CN107130006A - 高活性秋葵多糖的发酵方法及其活性制品 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一种高活性秋葵多糖的发酵方法，能够有效解决从秋葵中提取秋葵多糖的提取率较低、提取的多糖组分生物活性不高的问题，进而提供一种高效率高活性秋葵多糖的发酵方法，同时，本发明提供一种具有抗疲劳功效的秋葵多糖活性制品。

Description

高活性秋葵多糖的发酵方法及其活性制品
技术领域
本发明属于天然提取物技术领域，具体涉及一种高活性秋葵多糖的发酵提取方法及其活性制品。
背景技术
秋葵(AbelmoschusesculentusL.Moench)又名黄秋葵、羊角豆、咖啡黄葵、毛茄，黄蜀葵，民间也称"洋辣椒"。原产于非洲，20世纪初由印度引入中国，多见于中国南方。其可食用部分是果荚，分绿色和红色两种，口感脆嫩多汁，滑润不腻，香味独特，种子可榨油。
秋葵性味淡、寒，具有利咽、通淋、下乳、调经之功效。秋葵含有丰富的维生素和矿物质，每100克秋葵的嫩果中，约含有4毫克的维生素C、1.03毫克的维生素E以及310微克的胡萝卜素。秋葵中富含的锌和硒等微量元素，对增强人体防癌抗癌能力很有帮助。其次，秋葵嫩果中有黏黏的液体物质，这种黏液含有果胶和黏多糖类等多糖。黏多糖具有增强机体抵抗力，维护人体关节腔里关节膜和浆膜的光滑效果，削减脂类物质在动脉管壁上的堆积，避免肝脏和肾脏中结缔组织萎缩等功效。再者，秋葵含水量高，脂肪很少，每100克秋葵嫩果只含有0.1克脂肪，很适合想要减肥瘦身的女士，而且它富含的维生素C和膳食纤维，还能使皮肤嫩白。此外，黄秋葵的粘性物质，可促进胃肠蠕动，有益于助消化，益肠胃；秋葵的粘性物质中含有50％的可溶性纤维素，有利通便、排毒、防癌，能有效降低血清胆固醇，预防心血管病、可提高耐缺氧能力；黄秋葵中含有的果胶和多糖可有护肝功效，防治便秘；同时，黄秋葵不仅含钙量与鲜奶相当，且钙的吸收率在50-60％，高于牛奶1倍，是理想的钙源；黄秋葵为低能量食物，且黄酮含量为2.8％，可延缓衰老、具有抗氧化、防衰老作用，防治糖尿病。
秋葵多糖在秋葵物质中不仅是作为能量资源或结构材料，更重要的是它参与了生命科学中细胞的各种活动，不仅具有多方面的生物活性，而且具有增强免疫、降低血糖和抗癌等作用。高愿军等2种方法提取秋葵多糖工艺研究)报道了利用微波法和纤维素酶解法提取秋葵中秋葵多糖的方法。微波辅助提取是将溶剂浸提与微波提取相结合，利用被加热物体本身作为发热体而进行加热，不靠热传导作用，可以使物料内部温度迅速提高，加热时间缩短，同时采用蒸馏水作为提取溶剂，具有廉价、无毒、易于回收再利用的特点，大大降低了生产成本，利用微波辅助提取的工艺，其秋葵多糖的提取率可达到2.64％；而利用纤维素酶解的方式能够完整地分解细胞壁的结构，增加了溶剂的可溶性，有利于细胞间的活性物质溶出，同时还可以催化水解细胞壁多糖，增加多糖的浸提率，可以最大限度的避免多糖污染以及活性物质的丧失，其秋葵多糖的提取率预期达到6.32％。但是上述方法对于秋葵多糖的提取利用率依然存在提取率较低、提取的多糖组分生物活性不高的问题。
随着生活节奏的加快和社会压力的增大，在发达国家和城市中，除了一部分确诊的病人外，常人眼中的健康者有一半左右处于“亚健康”状态。据统计资料表明，在我国国内目前也有半数以上的人处于这种状态。因此，疲劳与亚健康不但是医学问题而且日益成为需要关注的社会问题，严重的影响着人们的生活质量，因此防治因疲劳而导致的亚健康己成为当务之急。
发明内容
为此，本发明所要解决的技术问题在于现有技术中从秋葵中提取秋葵多糖的提取率较低、提取的多糖组分生物活性不高的问题，进而提供一种高效率高活性秋葵多糖的发酵方法，同时，本发明提供一种具有抗疲劳功效的秋葵多糖活性制品。
本发明的技术方案为：高活性秋葵多糖的发酵方法，该方法包括以下步骤：
（1）预处理：取新鲜秋葵嫩果，过筛去除秋葵表面的附着物，称重（湿重）并作为计量依据，将秋葵切成丁状，过滤法去除秋葵籽，向粉碎后的秋葵中加入4-8倍重量的水，使用匀浆机或胶体磨将粉碎的秋葵顶制作成匀浆状；
（2）一次提取：采用过滤的方法将步骤（1）获得的秋葵匀浆进行过滤，分别收集滤饼和滤液，滤液为第一次提取液；
（3）二次提取：将步骤（2）获得的秋葵滤饼重新悬浮在3-5倍重量的水中，调节溶液pH至3.0-6.0，过滤后收集滤液，为第二次提取液；
（4）酶解：合并两次提取的滤液，加入0.1-2.0%秋葵重量的复合酶解物，加入原料重量0.05%-1%的扩张蛋白，调节pH为8-9，在30-50℃范围内搅拌6-10h；所述复合酶解物是由质量比为1-3:1-3:0.5-2的裂壶藻发酵产物、纤维素酶、木瓜蛋白酶组成。
（5）沉淀处理：将步骤（4）获得的酶解液调节pH至3.0-5.5并加入硫酸盐溶液，搅拌均匀，静置后使用离心法将滤液进行处理，收集滤液；
（6）干燥：将步骤（5）获得的滤液进行超滤处理，收集截留液，喷雾干燥，获得的粉末即为秋葵多糖。
进一步的，所述步骤(4)中，所述裂壶藻发酵产物的制备方法为：取经过清洗的裂壶藻原料，设定酶解条件为料液比1∶10（m/V）、纤维素酶CellulaseACCF-4740添加量2%、温度55℃、pH4.5、反应时间1.3h，进行酶解，纤维素酶水解结束后，沸水浴灭酶15min，9000r/min离心，收集上清液得到裂壶藻纤维素酶水解液；裂壶藻酶解液灭酶活后，调节pH值至6.2-6.6，高压蒸汽灭菌（121℃，20min），然后接种体积分数1%的MRS培养基活化的戊糖片球菌液到裂壶藻酶解液，37℃恒温培养箱静置，进行发酵；发酵结束后，9000r/min离心，收集上清液得到裂壶藻发酵产物。
进一步的，步骤（4）中，酶解的原料是经过一次和二次提取后滤液的合并物。
进一步的，步骤（4）中，所述扩张蛋白的制备方法为：将莲子经0.05-0.15wt%氯化钠消毒4-6min，流水冲洗5-7h，然后，25-28℃暗培养4-6天；剪取幼苗下胚轴顶端3-4cm，置-20℃预冷0.5h，加预冷至4℃的匀浆缓冲液，匀浆后，用孔径70μm的尼龙网过滤，滤渣经匀浆缓冲液洗涤，然后将滤渣加入匀浆缓冲液中，室温静置1-3h，得静置液；向静置液中加入提取液，4℃下提取44-50h，过滤，按0.3-0.5g/mL的添加量向滤液中缓慢添加硫酸铵，添加硫酸铵过程中不断搅拌，防止硫酸铵局部过饱和，然后静置45-50h，4℃条件下25000g离心5-10min，沉淀用酸性缓冲液复溶，4℃下分子量3000Da的透析袋透析，透析液经20000g离心10min，取上清液即为制备的扩张蛋白溶液；上述匀浆缓冲液组分为：25mmol/L4-羟乙基哌嗪乙磺酸，1.5mmol/L焦亚硫酸钠，2mmol/LEDTA，0.1wt%TritonX-100，pH7.0；上述提取液组分为：15mmol/L4-羟乙基哌嗪乙磺酸，1.0mmol/L乙二胺四乙酸，1.5mmol/L焦亚硫酸钠，0.5mol/LNaCl，pH6.0；上述酸性缓冲液配制是：将2.05g醋酸钠溶于水中，用冰醋酸调节pH至4.0，水定容至1L。
进一步的，步骤（5）中，向溶液中加入的硫酸盐，可以是硫酸铁、硫酸锌或硫酸钠或混合使用。
海洋微藻作为一类原始而十分重要的海洋生物资源，富含多不饱和脂肪酸、多糖、多肽等多种生物活性物质，现主要用于制备生物能源及水产养殖饲料，关于用于发酵的活性物质制备的报道更为少见。裂壶藻是一类富含多不饱和脂肪酸的微藻，常被用来生产高纯度二十二碳六烯酸（docosahexaenoicacid，DHA）的保健品、婴幼儿乳制品添加剂等。裂壶藻经提取多不饱和脂肪酸后所产生的藻渣其蛋白质含量可高达40%以上，然而目前这些藻渣大多被当成饲料或肥料处理，蛋白资源未得到充分开发与利用。将裂壶藻发酵蛋白产物应用于秋葵多糖的发酵生产，用以提高秋葵多糖产量等次生代谢产物产量的研究国内外尚未见报道。
扩张蛋白是近年在植物细胞壁中发现的一类新型蛋白，最先是从黄瓜下胚轴伸长区分离纯化得到，现已证明在燕麦胚芽鞘细胞壁、栝楼根尖细胞壁、番茄、烟草、拟南芥、水稻、棉纤维、玉米、大豆等细胞壁中也有扩张蛋白的存在，被认为其普遍存在于各种双子叶和单子叶植物的细胞壁中，与促进其细胞生理生长，影响营养生长、形态发生、授粉受精、果实软化等生理生长过程有关。利用重组细胞壁实验研究证实了扩张蛋白与以前发现的细胞壁蛋白不同，具有诱导热钝化的离体细胞壁恢复伸展的功能，被推测能够打断细胞壁多聚物之间的氢键进而诱导酸依赖的细胞壁延展和压力松弛等生理活动，在植物生长过程中可能是生理调控和细胞壁松弛延伸的主要生理调节物质。
本发明所述提取秋葵多糖的方法，以裂壶藻发酵产物、纤维素酶、木瓜蛋白酶组成的复合酶解物进行酶解提取的方法，再通过扩张蛋白的协效复配作用，相对于现有技术中常规使用的仅以纤维素酶解的方式而言，其提取效率提升接近30倍；本发明所述提取方法进一步筛选整个提取工艺的优化参数条件，最大限度的提升了秋葵多糖的提取效率，并且能够在发酵的过程中保持多糖的活性。
一种秋葵多糖的活性制品，是由以下重量份数计组分组成：益母草提取物 13-18份，鹿茸提取物 8-12 份，黄连提取物 12-17 份，细辛提取物11-14份，秋葵多糖 25-37份，维生素 A 10-15 份，维生素 C 15-20 份，玉米淀粉 10-20 份。特别的，所述秋葵多糖的浓度为65%-78%。
进一步的，所述秋葵多糖的活性制品，其特征在于，是由以下重量份数计组分组成：益母草提取物15 份，鹿茸提取物 9 份，黄连提取物 14 份，细辛提取物12份，秋葵多糖29 份，维生素 A 11 份，维生素 C 17份，玉米淀粉 17 份。
秋葵（Okra，Hibiscus esculentus L.），营养保健价值很高，嫩荚富含多种蛋白质，氨基酸，维生素和矿质元素。每100 克黄秋葵富含蛋白质2.1 g，碳水化合物含6.6 g，膳食纤维5 g，维生素C 4 mg，钙45 mg，铁0.1 mg，锌0.23 mg，硒0.51 μg 等，可提供150 kJ的能量。黄秋葵中多糖含量2 % ，嫩果中含有黏性液质及阿拉伯聚糖、牛乳聚糖、鼠李聚糖，其脆嫩多汁，口感润滑，香味独特，具有助消化、增强体力、保护肝脏、健胃整肠；秋葵含有特殊的具有药效的成分，强肾补虚，享有“植物伟哥”之美誉，是欧美运动员消除疲劳、快速恢复体力的首选蔬菜；富含维生素C，可预防心血管疾病发生，提高免疫力；由于含锌和硒等微量元素，可以增强人体防癌抗癌能力。
本发明经验证，食用后可达到抗疲劳和增强免疫力的效果，基于本发明中主要活性组分为秋葵多糖，配合从植物体内提取出的活性成分以及鹿茸提取物，在进入肠道后，一方面可以在肠道内定殖，维持肠道微生物菌群的平衡；另一方面是秋葵多糖与益母草提取物、黄连提取物、鹿茸提取物共同作用于宿主的免疫系统，诱发肠道免疫，并刺激胸腺，脾脏等免疫器官，促进巨噬细胞活性，通过增强B、T淋巴细胞对抗原刺激的反应性，发挥特异性免疫活性，从而增强机体的免疫功能，易于被人体吸收，条件98%低龄人群长期服用无不适症状。
具体实施方案
下面将结合本发明实施例对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
高活性秋葵多糖的发酵方法，该方法包括以下步骤：
（1）预处理：取新鲜秋葵嫩果，过筛去除秋葵表面的附着物，称重（湿重）并作为计量依据，将秋葵切成丁状，过滤法去除秋葵籽，向粉碎后的秋葵中加入6倍重量的水，使用匀浆机或胶体磨将粉碎的秋葵顶制作成匀浆状；
（2）一次提取：采用过滤的方法将步骤（1）获得的秋葵匀浆进行过滤，分别收集滤饼和滤液，滤液为第一次提取液；
（3）二次提取：将步骤（2）获得的秋葵滤饼重新悬浮在3-5倍重量的水中，调节溶液pH至4.0，过滤后收集滤液，为第二次提取液；
（4）酶解：合并两次提取的滤液，加入1%秋葵重量的复合酶解物，加入原料重量0.5%的扩张蛋白，调节pH为8，在38℃范围内搅拌8h；所述复合酶解物是由质量比为2:2:1的裂壶藻发酵产物、纤维素酶、木瓜蛋白酶组成。
（5）沉淀处理：将步骤（4）获得的酶解液调节pH至4.0并加入硫酸盐溶液，搅拌均匀，静置后使用离心法将滤液进行处理，收集滤液；
（6）干燥：将步骤（5）获得的滤液进行超滤处理，收集截留液，喷雾干燥，获得的粉末即为秋葵多糖。
进一步的，所述步骤(4)中，所述裂壶藻发酵产物的制备方法为：取经过清洗的裂壶藻原料，设定酶解条件为料液比1∶10（m/V）、纤维素酶CellulaseACCF-4740添加量2%、温度55℃、pH4.5、反应时间1.3h，进行酶解，纤维素酶水解结束后，沸水浴灭酶15min，9000r/min离心，收集上清液得到裂壶藻纤维素酶水解液；裂壶藻酶解液灭酶活后，调节pH值至6.4，高压蒸汽灭菌（121℃，20min），然后接种体积分数1%的MRS培养基活化的戊糖片球菌液到裂壶藻酶解液，37℃恒温培养箱静置，进行发酵；发酵结束后，9000r/min离心，收集上清液得到裂壶藻发酵产物。
进一步的，步骤（4）中，酶解的原料是经过一次和二次提取后滤液的合并物。
进一步的，步骤（4）中，所述扩张蛋白的制备方法为：将莲子经0.1wt%氯化钠消毒5min，流水冲洗6h，然后，26℃暗培养5天；剪取幼苗下胚轴顶端3cm，置-20℃预冷0.5h，加预冷至4℃的匀浆缓冲液，匀浆后，用孔径70μm的尼龙网过滤，滤渣经匀浆缓冲液洗涤，然后将滤渣加入匀浆缓冲液中，室温静置1-3h，得静置液；向静置液中加入提取液，4℃下提取46h，过滤，按0.4g/mL的添加量向滤液中缓慢添加硫酸铵，添加硫酸铵过程中不断搅拌，防止硫酸铵局部过饱和，然后静置47h，4℃条件下25000g离心7min，沉淀用酸性缓冲液复溶，4℃下分子量3000Da的透析袋透析，透析液经20000g离心10min，取上清液即为制备的扩张蛋白溶液；上述匀浆缓冲液组分为：25mmol/L4-羟乙基哌嗪乙磺酸，1.5mmol/L焦亚硫酸钠，2mmol/LEDTA，0.1wt%TritonX-100，pH7.0；上述提取液组分为：15mmol/L4-羟乙基哌嗪乙磺酸，1.0mmol/L乙二胺四乙酸，1.5mmol/L焦亚硫酸钠，0.5mol/LNaCl，pH6.0；上述酸性缓冲液配制是：将2.05g醋酸钠溶于水中，用冰醋酸调节pH至4.0，水定容至1L。
进一步的，步骤（5）中，向溶液中加入的硫酸盐，可以是硫酸铁、硫酸锌或硫酸钠或混合使用。
实施例2
高活性秋葵多糖的发酵方法，该方法包括以下步骤：
（1）预处理：取新鲜秋葵嫩果，过筛去除秋葵表面的附着物，称重（湿重）并作为计量依据，将秋葵切成丁状，过滤法去除秋葵籽，向粉碎后的秋葵中加入4倍重量的水，使用匀浆机或胶体磨将粉碎的秋葵顶制作成匀浆状；
（2）一次提取：采用过滤的方法将步骤（1）获得的秋葵匀浆进行过滤，分别收集滤饼和滤液，滤液为第一次提取液；
（3）二次提取：将步骤（2）获得的秋葵滤饼重新悬浮在3倍重量的水中，调节溶液pH至3.0，过滤后收集滤液，为第二次提取液；
（4）酶解：合并两次提取的滤液，加入0.1%秋葵重量的复合酶解物，加入原料重量0.05%的扩张蛋白，调节pH为8，在30℃范围内搅拌6h；所述复合酶解物是由质量比为1:1:1的裂壶藻发酵产物、纤维素酶、木瓜蛋白酶组成。
（5）沉淀处理：将步骤（4）获得的酶解液调节pH至3.0并加入硫酸盐溶液，搅拌均匀，静置后使用离心法将滤液进行处理，收集滤液；
（6）干燥：将步骤（5）获得的滤液进行超滤处理，收集截留液，喷雾干燥，获得的粉末即为秋葵多糖。
进一步的，所述步骤(4)中，所述裂壶藻发酵产物的制备方法为：取经过清洗的裂壶藻原料，设定酶解条件为料液比1∶10（m/V）、纤维素酶CellulaseACCF-4740添加量2%、温度55℃、pH4.5、反应时间1.3h，进行酶解，纤维素酶水解结束后，沸水浴灭酶15min，9000r/min离心，收集上清液得到裂壶藻纤维素酶水解液；裂壶藻酶解液灭酶活后，调节pH值至6.2，高压蒸汽灭菌（121℃，20min），然后接种体积分数1%的MRS培养基活化的戊糖片球菌液到裂壶藻酶解液，37℃恒温培养箱静置，进行发酵；发酵结束后，9000r/min离心，收集上清液得到裂壶藻发酵产物。
进一步的，步骤（4）中，酶解的原料是经过一次和二次提取后滤液的合并物。
进一步的，步骤（4）中，所述扩张蛋白的制备方法为：将莲子经0.05wt%氯化钠消毒4min，流水冲洗5h，然后，25℃暗培养4天；剪取幼苗下胚轴顶端3cm，置-20℃预冷0.5h，加预冷至4℃的匀浆缓冲液，匀浆后，用孔径70μm的尼龙网过滤，滤渣经匀浆缓冲液洗涤，然后将滤渣加入匀浆缓冲液中，室温静置1h，得静置液；向静置液中加入提取液，4℃下提取44h，过滤，按0.3g/mL的添加量向滤液中缓慢添加硫酸铵，添加硫酸铵过程中不断搅拌，防止硫酸铵局部过饱和，然后静置45h，4℃条件下25000g离心5min，沉淀用酸性缓冲液复溶，4℃下分子量3000Da的透析袋透析，透析液经20000g离心10min，取上清液即为制备的扩张蛋白溶液；上述匀浆缓冲液组分为：25mmol/L4-羟乙基哌嗪乙磺酸，1.5mmol/L焦亚硫酸钠，2mmol/LEDTA，0.1wt%TritonX-100，pH7.0；上述提取液组分为：15mmol/L4-羟乙基哌嗪乙磺酸，1.0mmol/L乙二胺四乙酸，1.5mmol/L焦亚硫酸钠，0.5mol/LNaCl，pH6.0；上述酸性缓冲液配制是：将2.05g醋酸钠溶于水中，用冰醋酸调节pH至4.0，水定容至1L。
进一步的，步骤（5）中，向溶液中加入的硫酸盐，可以是硫酸铁、硫酸锌或硫酸钠或混合使用。
实施例3
高活性秋葵多糖的发酵方法，该方法包括以下步骤：
（1）预处理：取新鲜秋葵嫩果，过筛去除秋葵表面的附着物，称重（湿重）并作为计量依据，将秋葵切成丁状，过滤法去除秋葵籽，向粉碎后的秋葵中加入8倍重量的水，使用匀浆机或胶体磨将粉碎的秋葵顶制作成匀浆状；
（2）一次提取：采用过滤的方法将步骤（1）获得的秋葵匀浆进行过滤，分别收集滤饼和滤液，滤液为第一次提取液；
（3）二次提取：将步骤（2）获得的秋葵滤饼重新悬浮在5倍重量的水中，调节溶液pH至6.0，过滤后收集滤液，为第二次提取液；
（4）酶解：合并两次提取的滤液，加入2.0%秋葵重量的复合酶解物，加入原料重量1%的扩张蛋白，调节pH为9，在50℃范围内搅拌6-10h；所述复合酶解物是由质量比为3: 3:2的裂壶藻发酵产物、纤维素酶、木瓜蛋白酶组成。
（5）沉淀处理：将步骤（4）获得的酶解液调节pH至5.5并加入硫酸盐溶液，搅拌均匀，静置后使用离心法将滤液进行处理，收集滤液；
（6）干燥：将步骤（5）获得的滤液进行超滤处理，收集截留液，喷雾干燥，获得的粉末即为秋葵多糖。
进一步的，所述步骤(4)中，所述裂壶藻发酵产物的制备方法为：取经过清洗的裂壶藻原料，设定酶解条件为料液比1∶10（m/V）、纤维素酶CellulaseACCF-4740添加量2%、温度55℃、pH4.5、反应时间1.3h，进行酶解，纤维素酶水解结束后，沸水浴灭酶15min，9000r/min离心，收集上清液得到裂壶藻纤维素酶水解液；裂壶藻酶解液灭酶活后，调节pH值至6.6，高压蒸汽灭菌（121℃，20min），然后接种体积分数1%的MRS培养基活化的戊糖片球菌液到裂壶藻酶解液，37℃恒温培养箱静置，进行发酵；发酵结束后，9000r/min离心，收集上清液得到裂壶藻发酵产物。
进一步的，步骤（4）中，酶解的原料是经过一次和二次提取后滤液的合并物。
进一步的，步骤（4）中，所述扩张蛋白的制备方法为：将莲子经0.15wt%氯化钠消毒6min，流水冲洗7h，然后， 28℃暗培养6天；剪取幼苗下胚轴顶端4cm，置-20℃预冷0.5h，加预冷至4℃的匀浆缓冲液，匀浆后，用孔径70μm的尼龙网过滤，滤渣经匀浆缓冲液洗涤，然后将滤渣加入匀浆缓冲液中，室温静置1-3h，得静置液；向静置液中加入提取液，4℃下提取50h，过滤，按0.5g/mL的添加量向滤液中缓慢添加硫酸铵，添加硫酸铵过程中不断搅拌，防止硫酸铵局部过饱和，然后静置50h，4℃条件下25000g离心10min，沉淀用酸性缓冲液复溶，4℃下分子量3000Da的透析袋透析，透析液经20000g离心10min，取上清液即为制备的扩张蛋白溶液；上述匀浆缓冲液组分为：25mmol/L4-羟乙基哌嗪乙磺酸，1.5mmol/L焦亚硫酸钠，2mmol/LEDTA，0.1wt%TritonX-100，pH7.0；上述提取液组分为：15mmol/L4-羟乙基哌嗪乙磺酸，1.0mmol/L乙二胺四乙酸，1.5mmol/L焦亚硫酸钠，0.5mol/LNaCl，pH6.0；上述酸性缓冲液配制是：将2.05g醋酸钠溶于水中，用冰醋酸调节pH至4.0，水定容至1L。
进一步的，步骤（5）中，向溶液中加入的硫酸盐，可以是硫酸铁、硫酸锌或硫酸钠或混合使用。
实施例4
一种秋葵多糖的活性制品，所述的胶囊中各原料的质量份数比为 ：益母草提取物15份，鹿茸提取物 9 份，黄连提取物 14 份，细辛提取物12份，秋葵多糖 29 份，维生素 A 11份，维生素 C 17份，玉米淀粉 17 份。所述秋葵多糖采用实施例1中的制备方法获得。
实施例5
本实施例提供一种秋葵多糖的活性制品，所述的胶囊中各原料的质量份数比为 ：益母草提取物15 份，鹿茸提取物 9 份，黄连提取物 14 份，细辛提取物12份，秋葵多糖 25份，维生素 A 11 份，维生素 C 17份，玉米淀粉 17 份。所述秋葵多糖采用实施例1中的制备方法获得。
实施例6
本实施例提供一种秋葵多糖的活性制品，所述的胶囊中各原料的质量份数比为 ：益母草提取物15 份，鹿茸提取物 9 份，黄连提取物 14 份，细辛提取物12份，秋葵多糖 37 份，维生素 A 17 份，维生素 C 17份，玉米淀粉 17 份。所述秋葵多糖采用实施例2中的制备方法获得。
实施例7
本实施例提供一种秋葵多糖的活性制品，所述的胶囊中各原料的质量份数比为 ：益母草提取物15 份，鹿茸提取物 9 份，黄连提取物 14 份，细辛提取物12份，秋葵多糖 25 份，维生素 A 11 份，维生素 C 17份，玉米淀粉 17 份。所述秋葵多糖采用实施例3中的制备方法获得。
实施例8
本实施例提供一种秋葵多糖的活性制品，所述的胶囊中各原料的质量份数比为 ：益母草提取物15 份，鹿茸提取物 9 份，黄连提取物 14 份，细辛提取物12份，秋葵多糖 37份，维生素 A 11 份，维生素 C 17份，玉米淀粉 17 份。所述秋葵多糖采用实施例3中的制备方法获得。
抗疲劳效果验证实验
将通过实施例4制得的活性制品混合均匀，制备成粉末状，作为测试样品。将生理盐水为空白对照组，以支链氨基酸的水溶液为阴性对照组。
实验对象：选用SD大鼠，由北京实验动物中心提供，雌雄各半，180只，220±18g，约3月龄，在实验室饲养一个月后，经过初步游泳训练随机分为空白对照组、阴性对照组和样品组。
试验方法
（1) 力竭性试验 ： 取样品粉末，用蒸馏水溶解，样品的浓度分别为分别为0.15g.kg-1.d-1、 0.30g.kg-1.d-1 、0.60g.kg-1.d-1 ，样品组每天按0.1mL/10g体重灌胃；阴性对照组为支链氨基酸 （亮氨酸∶异亮氨酸∶缬氨酸按质量比2：1:1混合后获得）的水溶液，配成浓0.60g.kg-1.d-1，每天按0.1mL/10g体重灌胃； 各组末次灌喂 30min 后，进行大鼠负重（5％体重）游泳试验至力竭 （力竭标准 ：负重大鼠游泳动作明显失调，不能再坚持或沉入水底超过 3s 不能回水面为力竭 )。
（2) 血清尿素氮试验 ：取样品粉末，用蒸馏水溶解，样品的浓度分别为分别为0.15g.kg-1.d-1、 0.30g.kg-1.d-1 、0.60g.kg-1.d-1 ，样品组每天按0.1mL/10g体重灌胃；阴性对照组为支链氨基酸 （亮氨酸∶异亮氨酸∶缬氨酸按质量比2：1:1混合后获得）的水溶液，配成浓0.60g.kg-1.d-1，每天按0.1mL/10g体重灌胃； 各组连续灌喂 30d 后，进行大鼠游泳试验（无负重），90min后，拔眼球采血，用尿素氮测定试剂盒（二乙酰肼一肟法，北京化工厂生产）检测血清尿素氮。
试验结果
实施例样品与对照组对大鼠负重游泳时间的影响见表1。
表 1实施例样品与对照组对大鼠负重游泳时间的影响对比
组别 游泳时间（min）
阴性对照组 98±2.1
阳性对照组 137±1.9 a
低剂量组 116±1.3a
中剂量组 154±0.2 ab
高剂量组 138±1.6 ab
注：采用方差分析方法进行统计分析，与阴性对照组比较，”a”: p<0.05; 与阳性对照组比较, “b”: p<0.01 。
表 2实施例样品与对照组对大鼠运动后血清尿素氮含量的影响
组别 血清尿素氮水平（mmol/L）
阴性对照组 4.07±0.21
阳性对照组 5.88±0.61 a
低剂量组 3.18±0.14 ab
中剂量组 6.29±0.25 a
高剂量组 4.94±0.37 ab
注：采用方差分析方法进行统计分析，与阴性对照组比较，”a”: p<0.05; 与阳性对照组比较, “b”: p<0.01 。
同样，对其余实施例5-8和本发明的实施例其余配比进行相同实验，结果与实施例1的效果类似。
对于本领域技术人员而言，显然本发明不限于上述示范性实施例的细节，而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下，能够以其他的具体形式实现本发明。因此，无论从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。
此外，应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。本发明中所未详细描述的技术细节，均可通过本领域中的任一现有技术实现。特别的，本发明中所有未详细描述的技术特点均可通过任一现有技术实现。

Claims (7)

1.高活性秋葵多糖的发酵方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：
（1）预处理：取新鲜秋葵嫩果，过筛去除秋葵表面的附着物，称重（湿重）并作为计量依据，将秋葵切成丁状，过滤法去除秋葵籽，向粉碎后的秋葵中加入4-8倍重量的水，使用匀浆机或胶体磨将粉碎的秋葵顶制作成匀浆状；
（2）一次提取：采用过滤的方法将步骤（1）获得的秋葵匀浆进行过滤，分别收集滤饼和滤液，滤液为第一次提取液；
（3）二次提取：将步骤（2）获得的秋葵滤饼重新悬浮在3-5倍重量的水中，调节溶液pH至3.0-6.0，过滤后收集滤液，为第二次提取液；
（4）酶解：合并两次提取的滤液，加入0.1-2.0%秋葵重量的复合酶解物，加入原料重量0.05%-1%的扩张蛋白，调节pH为8-9，在30-50℃范围内搅拌6-10h；所述复合酶解物是由质量比为1-3:1-3:0.5-2的裂壶藻发酵产物、纤维素酶、木瓜蛋白酶组成。
（5）沉淀处理：将步骤（4）获得的酶解液调节pH至3.0-5.5并加入硫酸盐溶液，搅拌均匀，静置后使用离心法将滤液进行处理，收集滤液；
（6）干燥：将步骤（5）获得的滤液进行超滤处理，收集截留液，喷雾干燥，获得的粉末即为秋葵多糖。
2.根据权利要求1所述的高活性秋葵多糖的发酵方法，其特征在于，所述步骤(4)中，所述裂壶藻发酵产物的制备方法为：取经过清洗的裂壶藻原料，设定酶解条件为料液比1∶10（m/V）、纤维素酶CellulaseACCF-4740添加量2%、温度55℃、pH4.5、反应时间1.3h，进行酶解，纤维素酶水解结束后，沸水浴灭酶15min，9000r/min离心，收集上清液得到裂壶藻纤维素酶水解液；裂壶藻酶解液灭酶活后，调节pH值至6.2-6.6，高压蒸汽灭菌（121℃，20min），然后接种体积分数1%的MRS培养基活化的戊糖片球菌液到裂壶藻酶解液，37℃恒温培养箱静置，进行发酵；发酵结束后，9000r/min离心，收集上清液得到裂壶藻发酵产物。
3.根据权利要求1所述的高活性秋葵多糖的发酵方法，其特征在于步骤（4）中，酶解的原料是经过一次和二次提取后滤液的合并物。
4.根据权利要求1所述的高活性秋葵多糖的发酵方法，其特征在于步骤（4）中，所述扩张蛋白的制备方法为：将莲子经0.05-0.15wt%氯化钠消毒4-6min，流水冲洗5-7h，然后，25-28℃暗培养4-6天；剪取幼苗下胚轴顶端3-4cm，置-20℃预冷0.5h，加预冷至4℃的匀浆缓冲液，匀浆后，用孔径70μm的尼龙网过滤，滤渣经匀浆缓冲液洗涤，然后将滤渣加入匀浆缓冲液中，室温静置1-3h，得静置液；向静置液中加入提取液，4℃下提取44-50h，过滤，按0.3-0.5g/mL的添加量向滤液中缓慢添加硫酸铵，添加硫酸铵过程中不断搅拌，防止硫酸铵局部过饱和，然后静置45-50h，4℃条件下25000g离心5-10min，沉淀用酸性缓冲液复溶，4℃下分子量3000Da的透析袋透析，透析液经20000g离心10min，取上清液即为制备的扩张蛋白溶液；上述匀浆缓冲液组分为：25mmol/L4-羟乙基哌嗪乙磺酸，1.5mmol/L焦亚硫酸钠，2mmol/LEDTA，0.1wt%TritonX-100，pH7.0；上述提取液组分为：15mmol/L4-羟乙基哌嗪乙磺酸，1.0mmol/L乙二胺四乙酸，1.5mmol/L焦亚硫酸钠，0.5mol/LNaCl，pH6.0；上述酸性缓冲液配制是：将2.05g醋酸钠溶于水中，用冰醋酸调节pH至4.0，水定容至1L。
5.根据权利要求1所述的高活性秋葵多糖的发酵方法，其特征在于步骤（5）中，向溶液中加入的硫酸盐，可以是硫酸铁、硫酸锌或硫酸钠或混合使用。
6.一种秋葵多糖的活性制品，其特征在于，是由以下重量份数计组分组成：益母草提取物 13-18 份，鹿茸提取物 8-12 份，黄连提取物 12-17 份，细辛提取物11-14份，秋葵多糖25-37 份，维生素 A 10-15 份，维生素 C 15-20 份，玉米淀粉 10-20 份。
7.根据权利要求6所述的秋葵多糖的活性制品，其特征在于，是由以下重量份数计组分组成：益母草提取物15 份，鹿茸提取物 9 份，黄连提取物 14 份，细辛提取物12份，秋葵多糖29 份，维生素 A 11 份，维生素 C 17份，玉米淀粉 17 份。
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Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110564803A (zh) * 2019-10-29 2019-12-13 北京都元生物科学研究院 一种秋葵生物活性肽的生产工艺及应用
CN110916198A (zh) * 2019-12-24 2020-03-27 集美大学 一种利用黄秋葵发酵酒酒渣同时制备果胶多糖和黏性糖蛋白的方法
CN113651897A (zh) * 2021-08-18 2021-11-16 广东茂骐生物科技有限公司 一种高活性的百香果多糖的制备方法及其活性制品
CN113652461A (zh) * 2021-08-18 2021-11-16 广东茂骐生物科技有限公司 一种黄精植物甾醇多糖蛋白的制备方法及其活性制品
CN114686553A (zh) * 2022-04-20 2022-07-01 湖北瑞邦生物科技有限公司 一种玛卡秋葵肽复合多糖多肽及其提取方法和应用

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20090170809A1 (en) * 2006-05-10 2009-07-02 Bohus Biotech Ab Pectic Polysaccharides Isolated from Fruit Pods of Okra
CN102605005A (zh) * 2012-04-16 2012-07-25 山东省农业科学院农业资源与环境研究所 一种利用蛹虫草液体发酵生产虫草酸的方法
CN102618598A (zh) * 2012-04-16 2012-08-01 山东省农业科学院农业资源与环境研究所 一种利用扩张蛋白提高虫草多糖产量的液体发酵方法
CN104945526A (zh) * 2015-06-29 2015-09-30 河北葵克生物科技有限公司 一种从秋葵中提取多糖的方法
CN105218697A (zh) * 2015-11-13 2016-01-06 谢镜国 一种从黄秋葵中提取秋葵多糖的方法
CN106361842A (zh) * 2016-08-31 2017-02-01 邓志程 一种抗疲劳保健胶囊

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20090170809A1 (en) * 2006-05-10 2009-07-02 Bohus Biotech Ab Pectic Polysaccharides Isolated from Fruit Pods of Okra
CN102605005A (zh) * 2012-04-16 2012-07-25 山东省农业科学院农业资源与环境研究所 一种利用蛹虫草液体发酵生产虫草酸的方法
CN102618598A (zh) * 2012-04-16 2012-08-01 山东省农业科学院农业资源与环境研究所 一种利用扩张蛋白提高虫草多糖产量的液体发酵方法
CN104945526A (zh) * 2015-06-29 2015-09-30 河北葵克生物科技有限公司 一种从秋葵中提取多糖的方法
CN105218697A (zh) * 2015-11-13 2016-01-06 谢镜国 一种从黄秋葵中提取秋葵多糖的方法
CN106361842A (zh) * 2016-08-31 2017-02-01 邓志程 一种抗疲劳保健胶囊

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
于广利等: "《糖药物学》", 31 October 2012, 中国海洋大学出版社 *
张丽姣等: "海带酶解液的戊糖片球菌发酵及其产物的抗氧化性、抑菌性", 《食品科学》 *
朴香兰等: "《民族药物提取分离新技术》", 31 October 2011, 中央民族大学出版社 *

Cited By (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110564803A (zh) * 2019-10-29 2019-12-13 北京都元生物科学研究院 一种秋葵生物活性肽的生产工艺及应用
CN110564803B (zh) * 2019-10-29 2020-11-24 北京都元生物科学研究院 一种秋葵生物活性肽的生产工艺及应用
CN110916198A (zh) * 2019-12-24 2020-03-27 集美大学 一种利用黄秋葵发酵酒酒渣同时制备果胶多糖和黏性糖蛋白的方法
CN113651897A (zh) * 2021-08-18 2021-11-16 广东茂骐生物科技有限公司 一种高活性的百香果多糖的制备方法及其活性制品
CN113652461A (zh) * 2021-08-18 2021-11-16 广东茂骐生物科技有限公司 一种黄精植物甾醇多糖蛋白的制备方法及其活性制品
CN114686553A (zh) * 2022-04-20 2022-07-01 湖北瑞邦生物科技有限公司 一种玛卡秋葵肽复合多糖多肽及其提取方法和应用
CN114686553B (zh) * 2022-04-20 2023-11-21 湖北瑞邦生物科技有限公司 一种玛卡秋葵肽复合多糖多肽及其提取方法和应用

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