CN107125455A - 一种6月龄犊牛用复合益生菌制剂及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明属于饲料添加剂技术领域，特别涉及一种6月龄犊牛用复合益生菌制剂及其制备方法；包括以下按重量份计的原料：植物乳杆菌12～18、乳酸场球菌6～9、嗜酸乳杆菌20～30、嗜热链球菌10～20、中药剂15～25、培养基10～20；本发明的复合益生菌制剂是由复合益生菌和中药剂组合制成，能显著增强犊牛的免疫抵抗性，调节肠胃功能，有效的降低了犊牛的腹泻发病率和发烧率，保证了犊牛的正常生长，显著提高了犊牛的日增重，避免单独使用益生菌和单独使用中药产品的缺点，克服了禽畜养殖业长期使用抗生素的给养殖业造成的种种弊端，对发展绿色饲料添加剂具有广阔的运用前景。
Description
技术领域
本发明属于饲料添加剂技术领域，特别涉及一种6月龄犊牛用复合益生菌制剂及其制备方法。
背景技术
随着人们生活水平的不断提高，人们铸件认识到抗生素长期添加到饲料中可通过食物链对人类的健康造成严重危害，而益生菌是一类对宿主有益的活性微生物，是定植于人体肠道、生殖系统内，能产生确切健康功效从而改善宿主微生态平衡、发挥有益作用的活性有益微生物的总称，目前世界上研究的功能最强大的产品主要是以上各类微生物组成的复合活性益生菌，其广泛应用于生物工程、工农业、食品安全以及生命健康领域，从禽畜养殖方面来说，对复合益生菌制剂的研究克服了长期使用抗生素的给养殖业造成的种种弊端，对发展绿色饲料添加剂具有广阔的运用前景。
目前在益生菌对禽畜作用的方面取得一定的成效，如申请号CN201610995509.3《一种牛用复合型合生元微生态制剂及其制备方法》公开了一种牛用复合型合生元微生态制剂及其制备方法，由益生菌和益生元组成；益生菌∶益生元质量比＝1∶1～5的比例混合；益生菌由乳杆菌、双歧杆菌、枯草芽孢杆菌和鼠李糖乳杆菌组成；益生元由低聚糖和酸化剂组成；低聚糖为寡甘露糖、果寡糖、低聚异麦芽糖以及木寡糖，酸化剂由乳酸、柠檬酸、延胡索酸组成的复合酸化剂；如申请号CN201210144064.X《一种奶牛用益生菌混合制剂制备方法》公开了益生菌混合制剂的制备方法：将白地霉、扣囊拟内孢霉、嗜酸乳杆菌、枯草芽孢杆菌和双歧杆菌菌种分别接种到各自的种子培养基中，在28-32℃、通风条件下培养16-20小时，将培养成熟的种子分别接种到由玉米糖化液制备的发酵培养基中，其接种量为10％，在32±1℃、通风条件下发酵24-48小时，将培养成熟的种子接种到固态发酵培养基中，其接种量为每种菌种各10％，在45±1℃、通风条件下发酵48-56小时，即得到干燥的益生菌菌剂，而6月龄犊牛耐低温性能差、消化功能不完善、生长迅速、缺乏先天免疫力，身体各器官处于发育阶段，胃肠功能还未发育完全，消化器官的发育主要表现为内脏器官中微生物菌群、肠道容积和表面积的增加、各种消化酶发育演变以及各种代谢特征的变化，这些变化必将导致生长犊牛对食入饲粮中的各营养成分的消化率产生影响，因此，将益生菌制剂运用到犊牛的上是有着积极意义的。
发明内容
本发明为解决上述技术问题，提供了一种6月龄犊牛用复合益生菌制剂及其制备方法。
具体是通过以下技术方案来实现的：
一种6月龄犊牛用复合益生菌制剂，包括以下按重量份计的原料：植物乳杆菌12～18、乳酸场球菌6～9、嗜酸乳杆菌20～30、嗜热链球菌10～20、中药剂15～25、培养基10～20。
包括以下按重量份计的原料：植物乳杆菌15、乳酸场球菌8、嗜酸乳杆菌25、嗜热链球菌15、中药剂20、培养基15。
所述的中药剂，由以下按重量份计的原料组成：槐花8～12、生地黄15～20、薏米12～18、莲子10～20、杜仲6～9、白术8～12、茯苓12～18、川穹2～4、淮山1～3、谷芽8～12、麦冬5～8。
所述的培养基，由以下按重量份计的原料组成：大豆蛋白胨8～12、葡萄糖15～25、柠檬酸二铵0～4、琼脂0～20、矿物质0.18～0.25、去离子水800～1200。
所述的矿物质，由以下按重量份计的原料组成：氯化钠1～3、磷酸氢二钾0～2、硫酸镁0.08～0.12、硫酸锰0.03～0.06、硫酸亚铁0.01～0.03。
所述的6月龄犊牛用复合益生菌制剂的制备方法，包括以下步骤：
(1)菌株培养：采集牛的养殖场内的土壤、铺垫物、食槽内残渣，与生理盐水按1∶10的质量比混合稀释，将稀释液涂覆在培养基上，培养；
(2)菌株分离、筛选：将培养基上的菌落按照平板划线分离法进行分离，对分离的菌株进行抗病毒、耐酸、耐胆盐的特性筛选，得复合益生菌；
(3)制备中药剂：将中药剂包括的原料按比例称取混合，加水，煎煮50～60min后，过滤，加入滤液质量5倍量的乙醇，浸提6～8h，回收乙醇，将残余液浓缩，即得中药剂；
(4)将复合益生菌和中药剂按比例混合，拌匀，即得复合益生菌制剂。
所述的培养，其培养温度为35～38℃，培养时间为6～8h，PH值为6.5～7。
所述的乙醇，其浓度≥65％。
所述的6月龄犊牛用复合益生菌制剂，使用时，将本发明制剂和犊牛饲料按0.2～0.3％∶1的质量比混合后，对犊牛进行喂食。
所述的抗病毒、耐酸、耐胆盐的特性筛选，参照(《两株耐酸耐胆盐人肠源菌株的鉴定及系统发育分析》，汪川，张朝武，陈会超，余倩，裴晓方，刘衡川，四川大学学报(医学版)，2008-03-15)以及(《耐酸耐胆盐乳酸菌的鉴定及筛选》，李利，孔丽，张宁，赵伟超，肖亦农，李炳学，韩晓日，食品科学，2015-04-08)进行特性筛选。
综上所述，本发明的有益效果在于：本发明的复合益生菌制剂是由复合益生菌和中药剂组合制成，能显著增强犊牛的免疫抵抗性，调节肠胃功能，有效的降低了犊牛的腹泻发病率和发烧率，保证了犊牛的正常生长，显著提高了犊牛的日增重，避免单独使用益生菌和单独使用中药产品的缺点，通过中药和益生菌之间相辅相成，同时也通过中药的有益成分促进益生菌的生长，二者之间没有抑制拮抗的作用，结合二者的功效制备的复合制剂，能显著提高犊牛的采食量，提高饲料消化率，提高犊牛的特异性免疫和非特异性免疫水平，促进胃肠消化功能的完善，克服了禽畜养殖业长期使用抗生素的给养殖业造成的种种弊端，对发展绿色饲料添加剂具有广阔的运用前景。
具体实施方式
下面对本发明的具体实施方式作进一步详细的说明，但本发明并不局限于这些实施方式，任何在本实施例基本精神上的改进或代替，仍属于本发明权利要求所要求保护的范围。
实施例1
一种6月龄犊牛用复合益生菌制剂，包括以下按重量份计的原料：植物乳杆菌12kg、乳酸场球菌6kg、嗜酸乳杆菌20kg、嗜热链球菌10kg、中药剂15kg、培养基10kg。
所述的中药剂，由以下按重量份计的原料组成：槐花8kg、生地黄15kg、薏米12kg、莲子10kg、杜仲6kg、白术8kg、茯苓12kg、川穹2kg、淮山1kg、谷芽8kg、麦冬5kg。
所述的培养基，由以下按重量份计的原料组成：大豆蛋白胨8kg、葡萄糖15kg、矿物质0.18kg、去离子水800kg。
所述的矿物质，由以下按重量份计的原料组成：氯化钠1kg、硫酸镁0.08kg、硫酸锰0.03kg、硫酸亚铁0.01kg。
所述的6月龄犊牛用复合益生菌制剂的制备方法，包括以下步骤：
(1)菌株培养：采集牛的养殖场内的土壤、铺垫物、食槽内残渣，与生理盐水按1∶10的质量比混合稀释，将稀释液涂覆在培养基上，在温度为35℃，PH值为6.5的环境下培养6h；
(2)菌株分离、筛选：将培养基上的菌落按照平板划线分离法进行分离，对分离的菌株进行抗病毒、耐酸、耐胆盐的特性筛选，得复合益生菌；
(3)制备中药剂：将中药剂包括的原料按比例称取混合，加水，煎煮50min后，过滤，加入滤液质量5倍量的浓度≥65％的乙醇，浸提6～8h，回收乙醇，将残余液浓缩，即得中药剂；
(4)将复合益生菌和中药剂按比例混合，拌匀，即得复合益生菌制剂。
实施例2
一种6月龄犊牛用复合益生菌制剂，包括以下按重量份计的原料：植物乳杆菌18、乳酸场球菌9、嗜酸乳杆菌30、嗜热链球菌20、中药剂25、培养基20。
所述的中药剂，由以下按重量份计的原料组成：槐花12kg、生地黄20kg、薏米18kg、莲子20kg、杜仲9kg、白术12kg、茯苓18kg、川穹4kg、淮山3kg、谷芽12kg、麦冬8kg。
所述的培养基，由以下按重量份计的原料组成：大豆蛋白胨12kg、葡萄糖25kg、柠檬酸二铵4kg、琼脂20kg、矿物质0.25kg、去离子水1200kg。
所述的矿物质，由以下按重量份计的原料组成：氯化钠3kg、磷酸氢二钾2kg、硫酸镁0.12kg、硫酸锰0.06kg、硫酸亚铁0.03kg。
所述的6月龄犊牛用复合益生菌制剂的制备方法，包括以下步骤：
(1)菌株培养：采集牛的养殖场内的土壤、铺垫物、食槽内残渣，与生理盐水按1∶10的质量比混合稀释，将稀释液涂覆在培养基上，在温度为38℃，PH值为7的环境下培养6～8h；
(2)菌株分离、筛选：将培养基上的菌落按照平板划线分离法进行分离，对分离的菌株进行抗病毒、耐酸、耐胆盐的特性筛选，得复合益生菌；
(3)制备中药剂：将中药剂包括的原料按比例称取混合，加水，煎煮60min后，过滤，加入滤液质量5倍量的浓度≥65％的乙醇，浸提8h，回收乙醇，将残余液浓缩，即得中药剂；
(4)将复合益生菌和中药剂按比例混合，拌匀，即得复合益生菌制剂。
实施例3
一种6月龄犊牛用复合益生菌制剂，包括以下按重量份计的原料：植物乳杆菌15kg、乳酸场球菌8kg、嗜酸乳杆菌25kg、嗜热链球菌15kg、中药剂20kg、培养基15kg。
所述的中药剂，由以下按重量份计的原料组成：槐花10kg、生地黄18kg、薏米15kg、莲子15kg、杜仲8kg、白术10kg、茯苓15kg、川穹3kg、淮山2kg、谷芽10kg、麦冬7kg。
所述的培养基，由以下按重量份计的原料组成：大豆蛋白胨10kg、葡萄糖20kg、柠檬酸二铵2kg、琼脂10kg、矿物质0.2kg、去离子水1000kg。
所述的矿物质，由以下按重量份计的原料组成：氯化钠2kg、磷酸氢二钾1kg、硫酸镁0.1kg、硫酸锰0.05kg、硫酸亚铁0.02kg。
所述的6月龄犊牛用复合益生菌制剂的制备方法，包括以下步骤：
(1)菌株培养：采集牛的养殖场内的土壤、铺垫物、食槽内残渣，与生理盐水按1∶10的质量比混合稀释，将稀释液涂覆在培养基上，在温度为37℃，PH值为6.8的环境下培养7h；
(2)菌株分离、筛选：将培养基上的菌落按照平板划线分离法进行分离，对分离的菌株进行抗病毒、耐酸、耐胆盐的特性筛选，得复合益生菌；
(3)制备中药剂：将中药剂包括的原料按比例称取混合，加水，煎煮55min后，过滤，加入滤液质量5倍量的浓度≥65％的乙醇，浸提7h，回收乙醇，将残余液浓缩，即得中药剂；
(4)将复合益生菌和中药剂按比例混合，拌匀，即得复合益生菌制剂。
实施例4
一种6月龄犊牛用复合益生菌制剂，包括以下按重量份计的原料：植物乳杆菌12kg、乳酸场球菌9kg、嗜酸乳杆菌20kg、嗜热链球菌20kg、中药剂15kg、培养基10kg。
所述的中药剂，由以下按重量份计的原料组成：槐花8kg、生地黄20kg、薏米12kg、莲子20kg、杜仲6kg、白术12kg、茯苓12kg、川穹4kg、淮山1kg、谷芽12kg、麦冬5kg。
所述的培养基，由以下按重量份计的原料组成：大豆蛋白胨8kg、葡萄糖25kg、琼脂20kg、矿物质0.18kg、去离子水1200kg。
所述的矿物质，由以下按重量份计的原料组成：氯化钠1kg、磷酸氢二钾2kg、硫酸镁0.08kg、硫酸锰0.06kg、硫酸亚铁0.01kg。
所述的6月龄犊牛用复合益生菌制剂的制备方法，包括以下步骤：
(1)菌株培养：采集牛的养殖场内的土壤、铺垫物、食槽内残渣，与生理盐水按1∶10的质量比混合稀释，将稀释液涂覆在培养基上，在温度为35℃，PH值为6.5的环境下培养8h；
(2)菌株分离、筛选：将培养基上的菌落按照平板划线分离法进行分离，对分离的菌株进行抗病毒、耐酸、耐胆盐的特性筛选，得复合益生菌；
(3)制备中药剂：将中药剂包括的原料按比例称取混合，加水，煎煮50min后，过滤，加入滤液质量5倍量的浓度≥65％的乙醇，浸提8h，回收乙醇，将残余液浓缩，即得中药剂；
(4)将复合益生菌和中药剂按比例混合，拌匀，即得复合益生菌制剂。
实施例5
一种6月龄犊牛用复合益生菌制剂，包括以下按重量份计的原料：植物乳杆菌12～18、乳酸场球菌6～9、嗜酸乳杆菌20～30、嗜热链球菌10～20、中药剂15～25、培养基10～20。
所述的中药剂，由以下按重量份计的原料组成：槐花8kg、生地黄20kg、薏米12kg、莲子20kg、杜仲6kg、白术12kg、茯苓12kg、川穹4kg、淮山1kg、谷芽12kg、麦冬8kg。
所述的培养基，由以下按重量份计的原料组成：大豆蛋白胨8kg、葡萄糖15kg、柠檬酸二铵4kg、矿物质0.25kg、去离子水800kg。
所述的矿物质，由以下按重量份计的原料组成：氯化钠1kg、磷酸氢二钾2kg、硫酸镁0.12kg、硫酸锰0.03kg、硫酸亚铁0.03kg。
所述的6月龄犊牛用复合益生菌制剂的制备方法，包括以下步骤：
(1)菌株培养：采集牛的养殖场内的土壤、铺垫物、食槽内残渣，与生理盐水按1∶10的质量比混合稀释，将稀释液涂覆在培养基上，在温度为35℃，PH值为6.5的环境下培养8h；
(2)菌株分离、筛选：将培养基上的菌落按照平板划线分离法进行分离，对分离的菌株进行抗病毒、耐酸、耐胆盐的特性筛选，得复合益生菌；
(3)制备中药剂：将中药剂包括的原料按比例称取混合，加水，煎煮60min后，过滤，加入滤液质量5倍量的浓度≥65％的乙醇，浸提6h，回收乙醇，将残余液浓缩，即得中药剂；
(4)将复合益生菌和中药剂按比例混合，拌匀，即得复合益生菌制剂。
实验例
随机选取身体健康、活动能立强的6月龄的犊牛，随机分为3组，采用日常管理方式进行喂养，且均由同一人进行喂养，不同之处在于，第一组在犊牛饲料中添加本实施例1～5制备的任一复合益生菌制剂，添加量是将本实施例1～5制备的任一制剂和犊牛饲料按0.2～0.3％：1的质量比混合后，对犊牛进行喂食，第二组在犊牛饲料中添加本实施例1～5制备的任一复合益生菌，添加量是将本实施例1～5制备的任一复合益生菌和犊牛饲料按0.2～0.3％：1的质量比混合后，对犊牛进行喂食，第三组在犊牛饲料中添加本实施例1～5制备的任一中药剂，添加量是将本实施例1～5制备的任一中药剂和犊牛饲料按0.2～0.3％：1的质量比混合后，对犊牛进行喂食，实验时间为3个月，分别对三组不同喂养情况下犊牛的生长情况进行统计，结果如表1所示：
表1
| 项目 | 第一组 | 第二组 | 第三组 |
| 腹泻发病率％ | 1.56 | 1.86 | 2.12 |
| 发烧发病率％ | 0.69 | 1.12 | 1.47 |
| 平均日增重kg | 0.95±0.08 | 0.87±0.12 | 0.73±0.03 |
由表1可知，本发明制备的复合益生菌制剂，能显著增强犊牛的免疫抵抗性，调节肠胃功能，有效的降低了犊牛的腹泻发病率和发烧率，保证了犊牛的正常生长，显著提高了犊牛的日增重，本发明的复合益生菌制剂是由复合益生菌和中药剂组合制成，其中复合益生菌和中药剂单独使用时都能对犊牛的生长具有明显的促进作用，也能提高犊牛的特异性和非特异性免疫，降低疾病的发病率，本发明将二者共同作用于犊牛时，其对犊牛的促进生长的作用以及对犊牛的免疫增强作用明显优于二者单独使用的时候。
Claims (9)
1.一种6月龄犊牛用复合益生菌制剂，其特征在于，包括以下按重量份计的原料：植物乳杆菌12～18、乳酸场球菌6～9、嗜酸乳杆菌20～30、嗜热链球菌10～20、中药剂15～25、培养基10～20。
2.如权利要求1所述的6月龄犊牛用复合益生菌制剂，其特征在于，包括以下按重量份计的原料：植物乳杆菌15、乳酸场球菌8、嗜酸乳杆菌25、嗜热链球菌15、中药剂20、培养基15。
3.如权利要求1或2所述的6月龄犊牛用复合益生菌制剂，其特征在于，所述的中药剂，由以下按重量份计的原料组成：槐花8～12、生地黄15～20、薏米12～18、莲子10～20、杜仲6～9、白术8～12、茯苓12～18、川穹2～4、淮山1～3、谷芽8～12、麦冬5～8。
4.如权利要求1所述的6月龄犊牛用复合益生菌制剂，其特征在于，所述的培养基，由以下按重量份计的原料组成：大豆蛋白胨8～12、葡萄糖15～25、柠檬酸二铵0～4、琼脂0～20、矿物质0.18～0.25、去离子水800～1200。
5.如权利要求4所述的6月龄犊牛用复合益生菌制剂，其特征在于，所述的矿物质，由以下按重量份计的原料组成：氯化钠1～3、磷酸氢二钾0～2、硫酸镁0.08～0.12、硫酸锰0.03～0.06、硫酸亚铁0.01～0.03。
6.如权利要求1所述的6月龄犊牛用复合益生菌制剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)菌株培养：采集牛的养殖场内的土壤、铺垫物、食槽内残渣，与生理盐水按1∶10的质量比混合稀释，将稀释液涂覆在培养基上，培养；
(2)菌株分离、筛选：将培养基上的菌落按照平板划线分离法进行分离，对分离的菌株进行抗病毒、耐酸、耐胆盐的特性筛选，得复合益生菌；
(3)制备中药剂：将中药剂包括的原料按比例称取混合，加水，煎煮50～60min后，过滤，加入滤液质量5倍量的乙醇，浸提6～8h，回收乙醇，将残余液浓缩，即得中药剂；
(4)将复合益生菌和中药剂按比例混合，拌匀，即得复合益生菌制剂。
7.如权利要求6所述的6月龄犊牛用复合益生菌制剂的制备方法，其特征在于，所述的培养，其培养温度为35～38℃，培养时间为6～8h，PH值为6.5～7。
8.如权利要求6所述的6月龄犊牛用复合益生菌制剂的制备方法，其特征在于，所述的乙醇，其浓度≥65％。
9.如权利要求1～5所述的任一6月龄犊牛用复合益生菌制剂，其特征在于，使用时，将本发明制剂和犊牛饲料按0.2～0.3％∶1的质量比混合后，对犊牛进行喂食。
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| PB01 | Publication | ||
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| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
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| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
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Application publication date: 20170905 |