CN107119044B - 一种用于载体上接触dna转移的擦拭试剂 - Google Patents

一种用于载体上接触dna转移的擦拭试剂 Download PDF

Info

Publication number
CN107119044B
CN107119044B CN201710301831.6A CN201710301831A CN107119044B CN 107119044 B CN107119044 B CN 107119044B CN 201710301831 A CN201710301831 A CN 201710301831A CN 107119044 B CN107119044 B CN 107119044B
Authority
CN
China
Prior art keywords
surfactant
dna
sodium
wiping
sulfonate
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
CN201710301831.6A
Other languages
English (en)
Other versions
CN107119044A (zh
Inventor
郝晓明
苟春宝
黄卫东
魏良华
张郑
李祖田
樊哲仁
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Banan Public Security Sub-Bureau
Original Assignee
Banan Public Security Sub-Bureau
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Banan Public Security Sub-Bureau filed Critical Banan Public Security Sub-Bureau
Priority to CN201710301831.6A priority Critical patent/CN107119044B/zh
Publication of CN107119044A publication Critical patent/CN107119044A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN107119044B publication Critical patent/CN107119044B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/10—Processes for the isolation, preparation or purification of DNA or RNA
    • C12N15/1003—Extracting or separating nucleic acids from biological samples, e.g. pure separation or isolation methods; Conditions, buffers or apparatuses therefor

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)

Abstract

本发明提供了一种用于载体上粘附接触DNA转移的擦拭试剂，以表面活性剂为主要成分，其浓度为1%～20%。采用本发明的擦拭试剂对粘附于不同类型载体上（木头材质、塑料材质、石头材质、金属材质、玻璃材质、陶瓷材质、橡胶材质、硬纸材质、皮革材质）的接触DNA的转移效率可达60%～90%，与常规干湿两步法相比，转移效率大大提升，进而可提高接触DNA的检验成功率。本发明对于充分发挥接触DNA在案件侦破、打击犯罪、固定证据中强有力的技术支撑作用具有重要意义，在现场勘查生物物证提取及法医DNA检验中具有重要的应用价值。

Description

一种用于载体上接触DNA转移的擦拭试剂
技术领域
本发明涉及刑事现场勘查及法医DNA检验中接触DNA转移提取，具体涉及一种用于载体上粘附接触DNA转移的擦拭试剂。
背景技术
接触DNA是指通过皮肤接触遗留在客体表面的DNA，主要来源于人体皮肤的脱落细胞及皮肤表面的游离DNA。目前接触DNA是法医DNA检验的热点和难点，接触DNA检验的成功率显著低于烟头、血斑、唾液斑等常规生物检材的成功率。现场勘查人员提取案发现场接触DNA最为常用的方法是采用棉签干湿两步擦拭法，同时棉签擦拭物在法医DNA日常检验中也占有很大的比例。棉签干湿两步擦拭法提取接触DNA时，常用蒸馏水浸湿棉签后转移粘附于载体上的接触DNA。虽然接触DNA检验成功率受载体属性、接触时间、遗留时间等多方面因素影响，但这些因素均为不可控因素，因此接触DNA转移效率问题就成为影响接触DNA检验成功率的关键性问题，换言之，只有高效率的转移粘附于载体上的接触DNA，才能为接触DNA检验的高成功率奠定基础。
发明内容
为了解决现有技术中的问题，根据本发明的第一方面，本发明的目的在于提供一种用于载体上粘附接触DNA转移的擦拭试剂。
除特殊说明外，本发明所述份数均为重量份，所述百分比均为质量百分比，所述浓度为质量百分比浓度。
本发明的目的是这样实现的：
本发明用于载体上接触DNA转移的擦拭试剂，包含表面活性剂和水，其中表面活性剂的浓度为1％～20％；所述表面活性剂为阴离子型表面活性剂、阳离子型表面活性剂或非离子型表面活性剂中的一种或几种组合。
本发明提供一种能够高效转移载体上接触DNA的擦拭试剂，能通过棉签干湿两步擦拭法使更多量的接触DNA从载体上被转移下来，进而可以提高接触DNA的检验成功率。
本发明所述接触DNA为人体皮肤直接或间接接触的物体上所遗留的DNA，主要来源于人体皮肤的脱落细胞及皮肤表面的游离DNA，如犯罪嫌疑人在案发现场使用的工具上、触摸门把手上、翻动物品上、攀爬栏杆上、遗落佩戴的饰品上、进食使用的餐具上等都会粘附有嫌疑人的DNA，即接触DNA。
进一步，所述的阳离子型表面活性剂为胺盐类(如十二烷基硫酸二乙醇胺盐、十八烷基胺乙酸盐、十二烷基二甲基氧化胺等)、季铵盐类(如十六烷基三甲基溴化铵、十二烷基二甲基苄基氯化铵、十六烷基三甲基氯化铵等)、杂环型表面活性剂(如十二烷基吡啶氯化铵、咪唑啉乙酸盐、十八烷基阳离子烷基咪唑啉等)中的一种或几种组合。
进一步，所述的阴离子型表面活性剂为脂肪酸盐类、磺酸盐类、硫酸酯盐类、磷酸酯盐类表面活性剂中的一种或几种组合。
进一步，所述的非离子型表面活性剂为聚氧乙烯型、多元醇型、烷基醇酰胺型表面活性剂中的一种或几种组合。
优选的，本发明表面活性剂为阴离子型表面活性剂、非离子型表面活性剂中的一种或两种组合，其浓度为1％～20％。
进一步优选的，本发明表面活性剂为阴离子表面活性剂和非离子表面活性剂的组合物，其浓度为1％～10％，阴离子与非离子表面活性剂重量比为0.5:0.5～9.5:0.5；所述阴离子表面活性剂为磺酸盐类或硫酸酯盐类表面活性剂；所述非离子表面活性剂为聚氧乙烯型或多元醇型表面活性剂。
最优选的，本发明表面活性剂为阴离子表面活性剂和非离子表面活性剂的组合物，其浓度为1％～5％，阴离子与非离子表面活性剂重量比为0.5:0.5～4.5:0.5；所述阴离子表面活性剂为烷基苯磺酸盐(如十二烷基苯磺酸钠)、链烃磺酸盐(如十六烷基磺酸钠)、脂肪酸酯磺酸盐(如脂肪酸甲酯磺酸钠)、α-烯基磺酸盐(如α-烯基磺酸钠)、木质素磺酸盐(如木质素磺酸钠)、琥珀酸酯磺酸盐(如琥珀酸二异辛酯磺酸钠)、烷基硫酸盐(如月桂醇硫酸钠)、脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸盐(如月桂醇聚氧乙烯醚硫酸钠)中的一种或几种组合；所述非离子表面活性剂为烷基酚聚氧乙烯醚(如壬基酚聚氧乙烯醚)、高碳脂肪醇聚氧乙烯醚(如烷基聚氧乙烯醚)、聚山梨酯(如聚氧乙烯失水山梨醇单月桂酸酯、聚氧乙烯山梨糖醇酐单棕榈酸酯、聚氧乙烯脱水山梨醇单油酸酯、聚氧乙烯山梨醇酐单硬脂酸酯)、脂肪酸聚氧乙烯酯、蔗糖酯中的一种或几种的组合。
为了加强DNA分子的稳定性，及提升表面活性剂间的协同作用，本发明用于转移载体上粘附的接触DNA的擦拭试剂还加入浓度为0.1％～3％的辅助添加剂，所述辅助添加剂为氯化钠、正戊醇、异戊醇、正辛醇、异辛醇中的一种或几种组合。
根据本发明的第二方面，本发明的目的在于提供上述表面活性剂在载体上粘附接触DNA转移中的应用,所述载体包括木头材质、塑料材质、石头材质、金属材质、玻璃材质、陶瓷材质、橡胶材质、硬纸材质、皮革材质等质地较硬的非渗透性载体，如螺丝刀、刀具、棍棒、玻璃杯、包装盒、钱包、饮料瓶、大理石等。
有益效果：
本发明提供了一种提高接触DNA转移效率的擦拭试剂，通过有效提升接触DNA的转移效率，进而提升接触DNA的检验成功率，对于充分发挥接触DNA在案件侦破、打击犯罪、固定证据中强有力的技术支撑作用具有重要意义，在现场勘查生物物证提取及法医DNA检验中具有重要的应用价值。本发明的擦拭试剂对粘附于不同类型载体上(木头材质、塑料材质、石头材质、金属材质、玻璃材质、陶瓷材质、橡胶材质、硬纸材质、皮革材质)的接触DNA的转移效率可达60％～90％，与常规干湿两步法相比，转移效率可提升40％～60％。本发明的擦拭试剂浸湿棉签后擦拭载体，棉签对载体有较好的润湿效果，特别是进行较大面积擦拭时，能够保持对载体的持续润湿。
本发明的擦拭试剂除可提高载体上接触DNA转移效率以外，还与法医DNA检验中的接触DNA提取纯化、PCR扩增、毛细管电泳检测的方法和试剂具有良好的兼容性，对检测结果无不良影响。
具体实施方式
下面通过具体实施例对本发明进行具体描述，在此指出以下实施例只用于对本发明进行进一步说明，不能理解为对本发明保护范围的限制，本领域的技术熟练人员可以根据上述发明内容对本发明作出一些非本质的改进和调整。本发明所有原料及试剂均为市售产品，其中M48磁珠试剂盒是购买自德国QIAGEN公司的
Figure BDA0001284424200000031
M48DNAManual Kit(200)。本发明的荧光定量分析，及PCR扩增，毛细管电泳检测检测方法为：荧光定量：按体积比1:199的比例配置
Figure BDA0001284424200000032
Reagent和
Figure BDA0001284424200000033
Buffer混合液，涡旋震荡3秒，取190μL混合液加入
Figure BDA0001284424200000034
样品管中，再向样品管中加入10μL DNA模板，涡旋震荡3秒，室温下静置2分钟，放入
Figure BDA0001284424200000035
3.0荧光计(Thermo Fisher，美国)中进行荧光定量分析；PCR扩增：采用Identifiler-Plus试剂盒(ABI，美国)按表1的PCR扩增体系，表2的PCR扩增程序进行PCR扩增反应；毛细管电泳检测：取1μL PCR扩增产物加入到96孔板中，每孔中再加入9μL配制好的甲酰胺和Liz600(体积比160:2.5)的混合液，混匀后将96孔板放入ABI 3500型遗传分析仪(ABI，美国)进行毛细管电泳检测，用GeneMapper ID-X v1.2基因软件进行数据分析。
表1 PCR扩增反应体系
反应成分 反应体积
Master Mix 4μL
Primer Set 2μL
DNA模板 4μL
表2 PCR扩增反应程序
Figure BDA0001284424200000041
实施例1
擦拭试剂的配置
用电子天平称取2.0g十二烷基苯磺酸钠(阴离子表面活性剂)加入烧杯中，再向烧杯中加入1.0g聚氧乙烯失水山梨醇单月桂酸酯(非离子表面活性剂)，再加入0.5g氯化钠(辅助添加剂)，再加入超纯水补足至100.0g，用玻璃棒搅拌均匀，吸取20μL试剂溶液用M48磁珠试剂盒提取纯化后，PCR扩增，毛细管电泳检测，检测无外源DNA后，将试剂分装至1.5mLEP管中备用。
实施例2
擦拭试剂对玻璃上游离DNA的转移效果
分别向经过消毒、灭菌、灭DNA处理的载玻片上滴加浓度为0.08ng/μL的游离DNA20μL、30μL、50μL，室温下放置2小时待游离DNA干燥，处理组用棉签蘸取擦拭试剂后干湿两步法擦拭载玻片上粘附的游离DNA，对照组以常规干湿两步法进行擦拭。M48磁珠试剂盒对上述棉签擦拭物进行提取纯化后，进行荧光定量分析，及PCR扩增，毛细管电泳检测。
表3处理组与对照组对游离DNA转移效率的比较
分组 初始量(ng) 回收量(ng) 转移效率 提升效率
处理1 1.60 1.39 87％ 50％
对照1 1.60 0.59 37％ /
处理2 2.40 2.00 83％ 48％
对照2 2.40 0.85 35％ /
处理3 4.00 3.38 85％ 53％
对照3 4.00 1.28 32％ /
表3表明采用本发明中的擦拭试剂干湿两步法转移粘附于玻璃上的游离DNA效率可达80％以上，与传统干湿两步法相比转移效率可提升48％～53％。经过毛细管电泳检测，GeneMapper ID-X v1.2基因软件数据分析，处理组均能成功获得与对照组相一致的16个STR基因座基因分型结果，表明使用本发明中的擦拭试剂转移载体上粘附的游离DNA后，对DNA的提取纯化、PCR扩增、毛细管电泳检测结果均无不良影响。
实施例3
擦拭试剂对玻璃上脱落细胞的转移效果
分别向消毒、灭菌、灭DNA处理的载玻片上滴加可提取DNA浓度为0.15ng/μL的脱落细胞悬液20μL、30μL、50μL，室温下放置2小时待脱落细胞悬液干燥，处理组用棉签蘸取擦拭试剂后干湿两步法擦拭载玻片上粘附的脱落细胞，对照组以常规干湿两步法进行擦拭。M48磁珠试剂盒对上述棉签擦拭物进行提取纯化后，进行荧光定量分析，及PCR扩增，毛细管电泳检测。
表4处理组与对照组对脱落细胞转移效率的比较
分组 初始量(ng) 回收量(ng) 转移效率 提升效率
处理1 3.00 2.52 84％ 40％
对照1 3.00 1.32 44％ /
处理2 4.50 3.92 87％ 42％
对照2 4.50 2.03 45％ /
处理3 7.5 6.25 83％ 40％
对照3 7.5 3.24 43％ /
表4表明采用本发明中的擦拭试剂干湿两步法转移粘附于玻璃上的脱落细胞效率可达80％以上，与传统干湿两步法相比转移效率可提升40％～42％。经过毛细管电泳检测，GeneMapper ID-X v1.2基因软件数据分析，处理组均能成功获得与对照组相一致的16个STR基因座基因分型结果，表明使用本发明中的擦拭试剂转移载体上粘附的脱落细胞后，对DNA的提取纯化、PCR扩增、毛细管电泳检测结果均无不良影响。
实施例4
擦拭试剂对螺丝刀上粘附的接触DNA的转移效果
10把同样规格型号经过消毒、灭菌、灭DNA处理的螺丝刀，由5名已检测STR基因分型、身体健康的志愿者任意选取2把，同时抓握在右手中摩擦1分钟，每名志愿抓握后的螺丝刀其中1把用擦拭试剂干湿两步法擦拭作为处理组，另一把用常规干湿两步法擦拭作为对照组，两组均用M48磁珠试剂盒提取纯化后，进行荧光定量分析，另取处理组模板DNA进行PCR扩增，毛细管电泳检测。
表5处理组与对照组对螺丝刀上粘附的接触DNA转移效果的比较
Figure BDA0001284424200000061
从表5得出，处理组转移螺丝刀上接触DNA的平均量是对照组的2.4倍；以上数据经SPSS v18.0软件进行样本配对t检验，结果显示，擦拭试剂处理与常规擦拭对照存在显著性差异(P＜0.01)，表明使用本发明擦拭试剂干湿两步法转移载体上的接触DNA要显著优于常规干湿两步法。经过毛细管电泳检测，GeneMapper ID-X v1.2基因软件数据分析，处理组成功获得5名名志愿者的16个STR基因座基因分型结果，表明使用本发明中的擦拭试剂转移载体上粘附的接触DNA后，对DNA的提取纯化、PCR扩增、毛细管电泳检测结果均无不良影响。
参照实施例1的制备方法，按照下表6运行实施例5-11，制备本发明用于载体上接触DNA转移的擦拭试剂。其中实施例5表面活性剂的浓度为1.0％，辅助添加剂的浓度为0.1％；实施例6表面活性剂的浓度为2.0％，辅助添加剂的浓度为0.5％；实施例7表面活性剂的浓度为3.5％，辅助添加剂的浓度为0.9％；实施例8表面活性剂的浓度为4.5％，辅助添加剂的浓度为1.5％；实施例9表面活性剂的浓度为5.0％，辅助添加剂的浓度为2.0％；实施例10表面活性剂的浓度为7.0％，辅助添加剂的浓度为2.5％；实施例11表面活性剂的浓度为10.0％，辅助添加剂的浓度为3.0％。
表6接触DNA擦拭试剂不同配置方法
Figure BDA0001284424200000071
参照实施例2-4的实验方法，检测本发明实施例5-11制备的擦拭试剂的对不同属性载体上接触DNA的转移效果。具体见下表7。
表7擦拭试剂对不同属性载体上接触DNA的转移效果
Figure BDA0001284424200000072
表7表明采用施例5-11中的擦拭试剂干湿两步法对粘附于不同属性载体上的游离DNA的转移效率达到65％～90％，对粘附于不同属性载体上的脱落细胞的转移效率达到70％～88％；在其他影响因素固定的条件下，对不同属性载体上志愿者所遗留的接触DNA的转移效果，擦拭试剂处理与常规干湿擦拭对照均存在显著性差异(P＜0.01)，其表明使用施例5-11的擦拭试剂干湿两步法对粘附于不同属性载体上的接触DNA的转移效果要显著优于常规干湿两步擦拭法。同时经荧光定量分析，及PCR扩增，毛细管电泳检测，检测实验显示本发明擦拭试剂与法医DNA检验中的接触DNA提取纯化、PCR扩增、毛细管电泳检测的方法和试剂具有良好的兼容性，对检测结果无不良影响。
参照实施例1的制备方法，制备实施例12-19的本发明擦拭试剂。
实施例12
擦拭试剂的配置
用电子天平称取3.0g十二烷基二甲基氧化胺(阳离子表面活性剂)加入烧杯中，再加入超纯水补足至100.0g，用玻璃棒搅拌均匀，吸取20μL试剂溶液用M48磁珠试剂盒提取纯化后，PCR扩增，毛细管电泳检测，检测无外源DNA后，将试剂分装至1.5mL EP管中备用。
采用实施例2-4的检测方法，检测结果为对载玻片上游离DNA转移效率为55％；对脱落细胞转移效率为58％。
实施例13
擦拭试剂的配置
用电子天平称取3.0g十二烷基二甲基苄基氯化铵(阳离子表面活性剂)加入烧杯中，再加入0.5g氯化钠(辅助添加剂)，再加入超纯水补足至100.0g，用玻璃棒搅拌均匀，吸取20μL试剂溶液用M48磁珠试剂盒提取纯化后，PCR扩增，毛细管电泳检测，检测无外源DNA后，将试剂分装至1.5mL EP管中备用。
采用实施例2-4的检测方法，检测结果为对载玻片上游离DNA转移效率为56％；对脱落细胞转移效率为59％。
实施例14
擦拭试剂的配置
用电子天平称取3.0g如十六烷基三甲基溴化铵(阳离子表面活性剂)加入烧杯中，再加入超纯水补足至100.0g，用玻璃棒搅拌均匀，吸取20μL试剂溶液用M48磁珠试剂盒提取纯化后，PCR扩增，毛细管电泳检测，检测无外源DNA后，将试剂分装至1.5mL EP管中备用。
采用实施例2-4的检测方法，检测结果为对载玻片上游离DNA转移效率为59％；脱落细胞转移效率为64％。
实施例15
擦拭试剂的配置
用电子天平称取2.0g十六烷基三甲基溴化铵(阳离子表面活性剂)加入烧杯中，再向烧杯中加入1.0g聚氧乙烯失水山梨醇单月桂酸酯(非离子表面活性剂)，再加入0.5g氯化钠(辅助添加剂)，再加入超纯水补足至100.0g，用玻璃棒搅拌均匀，吸取20μL试剂溶液用M48磁珠试剂盒提取纯化后，PCR扩增，毛细管电泳检测，检测无外源DNA后，将试剂分装至1.5mL EP管中备用。
采用实施例2-4的检测方法，检测结果为对载玻片上游离DNA转移效率为75％；对脱落细胞转移效率为72％。
实施例16
擦拭试剂的配置
用电子天平称取3.0g十六烷基磺酸钠(阴离子表面活性剂)加入烧杯中，再加入超纯水补足至100.0g，用玻璃棒搅拌均匀，吸取20μL试剂溶液用M48磁珠试剂盒提取纯化后，PCR扩增，毛细管电泳检测，检测无外源DNA后，将试剂分装至1.5mL EP管中备用。
采用实施例2-4的检测方法，检测结果为对载玻片上游离DNA转移效率为77％；对脱落细胞转移效率为76％。
实施例17
擦拭试剂的配置
用电子天平称取3.0g聚氧乙烯山梨醇酐单硬脂酸酯(非离子表面活性剂)加入烧杯中，再加入超纯水补足至100.0g，用玻璃棒搅拌均匀，吸取20μL试剂溶液用M48磁珠试剂盒提取纯化后，PCR扩增，毛细管电泳检测，检测无外源DNA后，将试剂分装至1.5mL EP管中备用。
采用实施例2-4的检测方法，检测结果为对载玻片上游离DNA转移效率为72％；对脱落细胞转移效率为69％。
实施例18
擦拭试剂的配置
用电子天平称取5.0g木质素磺酸钠(阴离子表面活性剂)加入烧杯中，再向烧杯中加入5.0g月桂醇聚氧乙烯醚硫酸钠(阴离子表面活性剂)、再向烧杯中加入5.0g蔗糖酯(非离子表面活性剂)，再加入3.0g氯化钠(辅助添加剂)，再加入超纯水补足至100.0g，用玻璃棒搅拌均匀，吸取20μL试剂溶液用M48磁珠试剂盒提取纯化后，PCR扩增，毛细管电泳检测，检测无外源DNA后，将试剂分装至1.5mL EP管中备用。
采用实施例2-4的检测方法，检测结果为对载玻片上游离DNA转移效率为80％；对脱落细胞转移效率为82％。
实施例19
擦拭试剂的配置
用电子天平称取10.0g脂肪酸甲酯磺酸钠(阴离子表面活性剂)加入烧杯中，再向烧杯中加入5.0g烷基聚氧乙烯醚(非离子表面活性剂)、再向烧杯中加入5.0g脂肪酸聚氧乙烯酯(非离子表面活性剂)，再加入2.0g氯化钠(辅助添加剂)和1.0g异戊醇(辅助添加剂)，再加入超纯水补足至100.0g，用玻璃棒搅拌均匀，吸取20μL试剂溶液用M48磁珠试剂盒提取纯化后，PCR扩增，毛细管电泳检测，检测无外源DNA后，将试剂分装至1.5mL EP管中备用。
采用实施例2-4的检测方法，检测结果为对载玻片上游离DNA转移效率为79％；对脱落细胞转移效率为80％。
本发明用于载体上粘附接触DNA转移的擦拭试剂，能通过棉签干湿两步擦拭法使更多量的接触DNA从载体上被转移下来，进而可以提高接触DNA的检验成功率，对于充分发挥接触DNA在案件侦破、打击犯罪、固定证据中强有力的技术支撑作用具有重要意义，在现场勘查生物物证提取及法医DNA检验中具有重要的应用价值。本发明的擦拭试剂对粘附于不同类型载体上(木头材质、塑料材质、石头材质、金属材质、玻璃材质、陶瓷材质、橡胶材质、硬纸材质、皮革材质)的接触DNA的转移效率可达60％～90％，与常规干湿两步法相比，转移效率可提升40％～60％。本发明的擦拭试剂浸湿棉签后擦拭载体，棉签对载体有较好的润湿效果，特别是进行较大面积擦拭时，能够保持对载体的持续润湿。本发明的擦拭试剂除可提高载体上接触DNA转移效率以外，还与法医DNA检验中的接触DNA提取纯化、PCR扩增、毛细管电泳检测的方法和试剂具有良好的兼容性，对检测结果无不良影响。

Claims (3)

1.一种用于载体上接触DNA转移的擦拭试剂，包含表面活性剂和水，所述表面活性剂为阴离子表面活性剂和非离子表面活性剂的组合物，其浓度为1%～10%，阴离子与非离子表面活性剂重量比为0.5:0.5～9.5:0.5；所述阴离子表面活性剂为十二烷基苯磺酸钠、十六烷基磺酸钠、脂肪酸甲酯磺酸钠、α-烯基磺酸钠、木质素磺酸钠、琥珀酸二异辛酯磺酸钠、月桂醇聚氧乙烯醚硫酸钠中的一种或几种组合；所述非离子表面活性剂为壬基酚聚氧乙烯醚、烷基聚氧乙烯醚、聚氧乙烯山梨糖醇酐单棕榈酸酯、聚氧乙烯脱水山梨醇单油酸酯、聚氧乙烯山梨醇酐单硬脂酸酯、脂肪酸聚氧乙烯酯、蔗糖酯中的一种或几种的组合；所述擦拭试剂还加入浓度为0.1%～3%的辅助添加剂，所述辅助添加剂为氯化钠、正戊醇、异戊醇、正辛醇、异辛醇中的一种或几种组合。
2.如权利要求1所述的擦拭试剂，其特征在于：所述表面活性剂为阴离子表面活性剂和非离子表面活性剂的组合物，其浓度为1%～5%，阴离子与非离子表面活性剂重量比为0.5:0.5～4.5:0.5。
3.表面活性剂在载体上粘附接触DNA转移中的应用，所述载体包括木头材质、塑料材质、石头材质、金属材质、玻璃材质、陶瓷材质、橡胶材质、硬纸材质、皮革材质；所述表面活性剂为阴离子型表面活性剂、阳离子型表面活性剂或非离子型表面活性剂中的一种或几种组合；所述阳离子型表面活性剂为胺盐类、季铵盐类、杂环型表面活性剂中的一种或几种组合；所述胺盐类为十二烷基硫酸二乙醇胺盐、十八烷基胺乙酸盐、十二烷基二甲基氧化胺一种或几种组合；所述季铵盐类为十六烷基三甲基溴化铵、十二烷基二甲基苄基氯化铵、十六烷基三甲基氯化铵；所述杂环型表面活性剂为十二烷基吡啶氯化铵、咪唑啉乙酸盐、十八烷基阳离子烷基咪唑啉中的一种或几种组合；所述阴离子表面活性剂为十二烷基苯磺酸钠、十六烷基磺酸钠、脂肪酸甲酯磺酸钠、α-烯基磺酸钠、木质素磺酸钠、琥珀酸二异辛酯磺酸钠、月桂醇聚氧乙烯醚硫酸钠中的一种或几种组合；所述非离子表面活性剂为壬基酚聚氧乙烯醚、烷基聚氧乙烯醚、聚氧乙烯山梨糖醇酐单棕榈酸酯、聚氧乙烯脱水山梨醇单油酸酯、聚氧乙烯山梨醇酐单硬脂酸酯、脂肪酸聚氧乙烯酯、蔗糖酯中的一种或几种的组合。
CN201710301831.6A 2017-05-02 2017-05-02 一种用于载体上接触dna转移的擦拭试剂 Expired - Fee Related CN107119044B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201710301831.6A CN107119044B (zh) 2017-05-02 2017-05-02 一种用于载体上接触dna转移的擦拭试剂

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201710301831.6A CN107119044B (zh) 2017-05-02 2017-05-02 一种用于载体上接触dna转移的擦拭试剂

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN107119044A CN107119044A (zh) 2017-09-01
CN107119044B true CN107119044B (zh) 2020-11-06

Family

ID=59726589

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201710301831.6A Expired - Fee Related CN107119044B (zh) 2017-05-02 2017-05-02 一种用于载体上接触dna转移的擦拭试剂

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN107119044B (zh)

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102676501A (zh) * 2012-04-24 2012-09-19 厦门致善生物科技有限公司 一种唾液dna保存剂
CN104263721A (zh) * 2014-09-19 2015-01-07 宁波有成生物医药科技有限公司 一种保护痰液中核酸(dna和rna)的痰纸及核酸提取方法
CN106244582A (zh) * 2016-08-30 2016-12-21 苏州凡济医疗器械有限公司 一种口腔拭子核酸常温保存方法

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102676501A (zh) * 2012-04-24 2012-09-19 厦门致善生物科技有限公司 一种唾液dna保存剂
CN104263721A (zh) * 2014-09-19 2015-01-07 宁波有成生物医药科技有限公司 一种保护痰液中核酸(dna和rna)的痰纸及核酸提取方法
CN106244582A (zh) * 2016-08-30 2016-12-21 苏州凡济医疗器械有限公司 一种口腔拭子核酸常温保存方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN107119044A (zh) 2017-09-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US20230257733A1 (en) Method for isolating nucleic acid
EP1983051B1 (en) Isolation and purification of nucleic acid molecules with solid phase
CN102257158B (zh) 用于dna提取的方法和试剂盒
EP2094846B1 (en) Use of tde for the isolation of nucleic acids
CN106244535B (zh) 孕妇外周血中胎儿游离dna的保存剂及其构成的真空采血管
BRPI0913107B1 (pt) Reagente de lise, ligação e/ou lavagem, uso do mesmo, método e kit para isolamento e/ou purificação de ácidos nucleicos de uma amostra biológica contendo ácidos nucleicos, e, uso de tensoativos não-iônicos com base em polioxietileno
US10464961B2 (en) Nucleic acid purification
CN113151397B (zh) 一种基于磁珠法提取病毒样本的核酸提取试剂盒
JP2019521640A (ja) タンパク質系試料回収マトリックス及び装置
CN110846308A (zh) 从毛发中提取dna的方法
CN109762874A (zh) 核酸助沉剂、孕妇血浆游离dna提取试剂盒及方法
CN104498599A (zh) 一组微孢子虫分子通用检测引物及其试剂盒
CN107119044B (zh) 一种用于载体上接触dna转移的擦拭试剂
CN107475243A (zh) 一种改良酚抽提总rna的方法
WO2016090965A1 (zh) Hmg1基因及其在微孢子虫分子检测中的应用
CN103013985B (zh) 一种白桦叶片基因组dna提取方法
CN115873848A (zh) 植物dna提取试剂盒
CN105368818B (zh) 一种适于茄果类主要蔬菜的高效、快速dna提取方法
CN106350510A (zh) 快速提取哈蟆油基因组dna的方法、试剂盒及其应用
CN102154308A (zh) 一种海带孢子体dna的制备方法
CN117625593B (zh) 一种血液样本dna提取试剂盒和核酸提取方法
CN115851698B (zh) 一种血液基因组dna提取试剂盒及其使用方法
CN108795925A (zh) Dna胶抽提试剂及使用该试剂纯化pcr产物的方法
CN108676794A (zh) 一种用于动物组织病料核酸的快速提取方法
CN110656106A (zh) 一种体态类生物检材中游离dna的提取方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20201106

CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee