CN107108591A - 作为hsp90抑制剂的间苯二酚类衍生物 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及作为HSP90抑制剂的间苯二酚类衍生物的式(I)化合物或其药学上可接受的盐。本发明的化合物具有抑制热休克蛋白HSP90的活性。本发明的化合物因此用于治疗例如癌症的增殖疾病和神经变性疾病。本发明也提供了这些化合物和包含它们的药物组合物的制备方法，治疗疾病的方法和包含这些化合物的药物组合物。

Description

作为HSP90抑制剂的间苯二酚类衍生物 技术领域
本发明涉及新的间苯二酚衍生物，尤其是式(I)所示化合物，涉及其制备方法、药物组合物及其作为在制备抗肿瘤药物和治疗神经变性疾病中的用途。
背景技术
目前治疗癌症的靶向治疗基于促使肿瘤发展的特定蛋白质的鉴别，和能够拮抗该蛋白质效果的特定药剂的鉴别。制药工业大多致力于非常有限数量的已充分验证的蛋白质靶标。常见缺陷是在用这些特定抑制剂治疗的癌症患者中经常发现耐药突变的产生。近来，一般观点是同时阻断涉及癌症发展的信号传导途径预期可促成更好的抗肿瘤效果，并也降低耐药性发展的可能性。HSP90属于通常分享连接至三磷腺苷的非常特定的C型模式(Bergerat折叠)的蛋白小家族(GHKL，来源于DNA促旋酶，HSP90，组氨酸激酶，mutL)。HSP90是细胞中量最大的蛋白质之一，对真核生物的生存能力至关重要。人类细胞包含四种HSP90同种型：组成性表达的细胞溶质β-同种型，可诱导的α-形式，在内质网中的GRP94/gp96，和线粒体的TRAP1/HSP75。α-和β-形式显示出85％的序列同源性。
HSP90是陪护结构的关键组分，其在正常细胞中和在应激条件下催化被称为HSP90委托方(client)的蛋白的折叠和质量控制。严格取决于三磷酸腺苷酶活性的分子伴侣的活性紧密地受其它调节性辅陪伴分子结合的调控。
有强大证据表明，在例如癌症或其它增殖疾病的疾病状态下，由于特定致癌基因的突变或过表达，或也由于肿瘤经常具有过载的错误折叠的蛋白(其导致分子伴侣功能需求的增加)，HSP90变得至关重要。
结构上HSP90是由三种主要结构域组成的同源二聚体：非常保守的N末端结构域、中间结构域的三磷酸腺苷酶结构域和C末端结构域。N和C末端结构域可以结合三磷腺苷。大多数目前已知的抑制剂，例如格尔德霉素、根赤壳菌素、二芳基吡唑和嘌呤衍生物显示对N末端三磷腺苷结合位点的三磷腺苷竞争性结合，而新生霉素是与C末端口袋结合的抑制剂的原型。
目前报道的HSP90委托方日益增多(Jolly等人，J.Natl.Cancer Inst.92；1564-1572(2000))，所述HSP90委托方属于激酶家族(Her2，B-RAF V600E，bcr-Abl，Flt3，NPM-ALK，Akt，Npm-Alk，ZAP-70)、转录因子(p53，HIF)端粒酶、其它分子伴侣，它们中的大多数与癌症发展密切相关。HSP90抑制损伤折叠或稳定其委托方蛋白的能力，导致这些未折叠的蛋白基于蛋白酶的降解。这些委托方蛋白的降解经常用作HSP90抑制的标志，典型地使用的是在Her2过表达的细胞，例如BT474乳癌细胞中，用化合物处理后，Her2被降解。
经证明，通过竞争性结合至N末端三磷腺苷结合位点和抑制HSP90三磷酸腺苷酶活性的功能，天然化合物格尔德霉素确实可以阻断多种肿瘤细胞的增殖，这最初在HSP90抑制剂领域引起大量研究。令人惊奇的是，该化合物在正常细胞中没有活性，可能是由于HSP90存在于仅在肿瘤细胞中存在的活 性络合物(对格尔德霉素有高亲和性)中(Kamal等人，Nature 425，407-410(2003))。对肿瘤的选择性灵敏度的另一个可能原因是许多HSP90抑制剂显示的肿瘤滞留。
正对坦螺旋霉素(17-AAG)，格尔德霉素(GDA)的半合成衍生物，以及其它相关衍生物(alvespimycin，17-DMAG，IPI-504)进行大量的临床评价，但是其效果似乎受大量因素限制：制备复杂，依赖代谢产生活性代谢物，缺乏患者的富集，可能与醌部分相关的肝毒性。这导致进行大量努力以鉴别具有更好的类药性特征和更好的耐受性的第二代HSP90抑制剂。这导致嘌呤衍生物和取芳基-间苯二酚衍生物的鉴别。
神经变性疾病，例如阿尔茨海默病、帕金森病、亨廷顿病和阮病毒病的主要原因是错误折叠的蛋白的蓄积导致噬斑形成。这些错误折叠的蛋白依赖分子伴侣(HSP70、HSP40等)进行蛋白聚集体的再成熟、解聚和再增溶。已显示热休克蛋白在多种细胞培养模型中提供该功能。HSF1可诱导HSP，在正常细胞中HSF1受HSP90的密切调节。已证明例如格尔德霉素和17-AAG衍生物的HSP90抑制剂可破坏该相互作用并导致HSP诱导，进而导致错误折叠蛋白的神经保护活性和再增溶与解聚。HSP90过表达可显著降低错误折叠蛋白的蓄积，错误折叠蛋白的蓄积是阿尔茨海默病的原因，事实上已证明聚合tau和HSP70/90水平之间存在反相关。通过HSP70、HSP27和HSP40的过表达可减少异常tau聚集(通过降解)，其通过HSP90的抑制而触发。基于在帕金森氏病小鼠模型中GDA在体内对1-甲基-4-苯基-1，2，3，6-四氢吡啶(MPTP)诱导的神经毒性的效果，应用HSP90抑制剂治疗帕金森氏病。GDA保护神经元免受MPTP引起的毒性，其与HSP70水平升高密切相关。此外，也已表明HSP90过表达可显著降低错误折叠蛋白的蓄积，其是运动损伤、多发性硬化、脊髓延髓肌肉萎缩症和其它疾病的原因。
在GB1,406,345中公开了具有药理学活性的4，6-二取代的间苯二酚化合物。其它专利申请描述了作为HSP90抑制剂的苯基-杂环化合物，所有化合物特征为具有五元杂环的特定取代模式，例如以Nippon Kayaku Kabushiki Kaisha的名义的WO2006/101052；Vernalis的WO2005/000300，WO2004/072051和WO2004/056782；Ribotargets的WO2003/055860，Synta Pharmaceuticals的WO2008/097640和Kyowa Hakko Kogyo的WO2005/063222。
WO2004072051涉及一类HSP90抑制剂，其中包括Luminespib：
WO2006055760A1报道了一些化合物如
CN1771235A公开了一些化合物，比如这些化合物在药效、药代动力学、水溶性、成药性等方面不甚理想。
尽管已有上述发展，仍需要开发更加有效，低副作用的HSP90抑制剂。
发明内容
本发明的目的在于提供式(Ⅰ)所示的化合物、其药学上可接受的盐或水合物，
其中：
X、Y分别独立地选自N、O或S；优选X选自N、O或S，Y选自N或O；
X1、X2、Y1、Y2和连接X1、X2的碳原子共同组成5-7元芳环、脂肪族饱和环或脂肪族不饱和环；优选X1、X2、Y1、Y2和连接X1、X2的碳原子共同组成5-6元芳环、脂肪族饱和环或脂肪族不饱和环；
X1、X2分别独立地选自C、O、S、N、-C＝C-、-C＝N-；X1或X2中的C可以是未取代的，也可以被R01或R02取代。
R01、R02分别独立地选自卤素、CN、OH、SH、NH2、CHO、COOH、C1-10烷基、N-C1-10烷氨基、N,N-二(C1-10烷基)氨基、C1-10烷氧基、C1-10烷酰基、C1-10烷氧羰基、C1-10烷基磺酰基、C1-10烷基亚磺酰基、C3-10环烷基、C3-10环烷氨基、C3-10环烷氧基、C3-10环烷基酰基、C3-10环烷氧羰基、C3-10环烷基磺酰基、C3-10环烷基亚磺酰基、被C3-10环烷基取代的C1-10烷基；
Y1、Y2分别独立地选自C或N，优选Y1和Y2均为C；Y1与Y2上的两个取代基连在一起形成带有 取代基R1，R2和R3的氮杂五元、六元或七元饱和环或芳香环；
R1、R2、R3分别独立选自氢、C1-10烷基、羟基C1-10烷基、C1-6烷氧基-C1-6烷基、卤代C1-10烷基、C1-6烷基磺酰基-C1-6烷基、C1-6烷基酰胺基-C1-6烷基、N,N-二(C1-6烷基)氨基酰基-C1-6烷基、N,N-二(C1-6烷基)氨基-C1-6烷酰基、吗啉基-C1-6烷酰基、N-C1-10烷氨基、N,N-二(C1-10烷基)氨基、C1-10烷氧基、C1-10烷酰基、C1-10烷氧羰基、C1-10烷基磺酰基、C1-10烷基亚磺酰基、C3-10环烷基、C3-10环烷基氨基、C3-10环烷基氧基、C3-10环烷基酰基、C3-10环烷氧羰基、C3-10环烷基磺酰基、C3-10环烷基亚磺酰基、C3-10环烷基-C1-5烷基，或R2和R3的取代基通过共价键相互连在一起形成带有取代基R03或不带有取代基的五元、六元或七元饱和环；优选R1、R2、R3分别独立选自氢、C1-10烷基、羟基C1-10烷基、C3-10环烷基、C1-6烷氧基-C1-6烷基、卤代C1-10烷基、C1-6烷基磺酰基-C1-6烷基、C1-6烷基酰胺基-C1-6烷基、N,N-二(C1-6烷基)氨基酰基-C1-6烷基、N,N-二(C1-6烷基)氨基-C1-6烷酰基、吗啉基-C1-6烷酰基、C3-10环烷基-C1-5烷基，或R2和R3的取代基通过共价键相互连在一起形成带有取代基R03或不带有取代基的五元、六元或七元饱和环；更优选R1、R2、R3分别独立选自氢、C1-6烷基、羟基C1-6烷基、C3-10环烷基、C1-4烷氧基-C1-4烷基、卤代C1-4烷基、C1-4烷基磺酰基-C1-4烷基、C1-4烷基酰胺基-C1-4烷基、N,N-二(C1-4烷基)氨基酰基-C1-4烷基、N,N-二(C1-4烷基)氨基-C1-4烷酰基、吗啉基-C1-4烷酰基、C3-6环烷基-C1-4烷基，或R2和R3的取代基通过共价键相互连在一起形成带有取代基R03或不带有取代基的五元、六元或七元饱和环；最优选R1选自氢、C1-6烷基、羟基C1-6烷基、C3-10环烷基、C1-4烷氧基-C1-4烷基、卤代C1-4烷基、C1-4烷基磺酰基-C1-4烷基、C1-4烷基酰胺基-C1-4烷基、N,N-二(C1-4烷基)氨基酰基-C1-4烷基、N,N-二(C1-4烷基)氨基-C1-4烷酰基、吗啉基-C1-4烷酰基，R2和R3选自氢或甲基，或R2和R3的取代基通过共价键相互连在一起形成不带有取代基的五元、六元或七元饱和环；
R03选自C1-6烷基或卤素；
R4选自H、卤素、C1-6烷基、C3-10环烷氧基、苯基取代的C1-6烷基、苯基取代的C2-6烯基、苯基、C1-6烷基取代的苯基、C3-6环烷基；优选R4选自H、C1-6烷基、苯基取代的C1-6烷基、卤素、C3-6环烷基；更优选R4选自C1-4烷基、Cl、Br或环丙基；最优选R4选自异丙基。
R5选自H、氰基、羧基、C1-6烷氧基酰基、C1-7烷基氨基羰基、卤代C1-6烷基氨基羰基、C1-6烷氧基-C1-6烷基氨基羰基、N,N-二(C1-6烷基)氨基-C1-6烷基氨基羰基、氨基羰基、羟C1-6烷基氨基羰基、羟基取代的卤代C1-6烷基、腈基取代的脒基，或选自任选被1个或多个R05取代的C3-10环烷基、C3-10环烯基或5～10元芳香环；其中R05选自C1-6烷基、C3-10环烷基。
优选R5选自氰基、C1-6烷基氨基羰基、卤代C1-4烷基氨基羰基、C1-4烷氧基-C1-4烷基氨基羰基、N,N-二(C1-4烷基)氨基-C1-4烷基氨基羰基、氨基羰基、羟C1-4烷基氨基羰基、羟基取代的卤代C1-4烷基、腈基取代的脒基，或选自任选被1个或多个R05取代的5～6元含氮杂芳环；其中R05选自C1-6烷基。
本发明的一个方案中，上述R5选自其中R04选自H、C1-6烷基、卤代C1-4烷基、C1-4烷氧基-C1-4烷基、N,N-二(C1-4烷基)氨基-C1-4烷基、羟C1-4烷基。
本发明的一个方案中，上述选自其他变量如式(Ⅰ)所定义。
本发明的一个方案中，上述选自 其中R01、R02分别独立地选自H、卤素、C1-10烷基、C3-10环烷基、被C3-10环烷基取代的C1-10烷基；其他变量如式(Ⅰ)所定义。
本发明的一个方案中，上述选自 其他变量如式(Ⅰ)所定义。
本发明的一个方案中，上述选自n01、n02选自0，1，2或3，且n01和n02之和为2、3或4；其他变量如式(Ⅰ)所定义，且R2和R3未连接成环。
本发明的一个方案中，上述选自其中，n＝1或2；其中，其他变量如式(Ⅰ)所定义。
本发明的一个方案中，上述选自其他变量如式(Ⅰ)所定义。
本发明的一个方案中，上述选自 其他变量如式(Ⅰ)所定义。
本发明的一个方案中，上述选自 其他变量如式(Ⅰ)所定义。
本发明的一个方案中，上述化合物或其药学上可接受的盐或水合物选自结构式如下的化合物或其药学上可接受的盐或水合物：
本发明的一个方案中，上述化合物或其药学上可接受的盐选自：
1)5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰胺或其药学上可接受的盐；
2)5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(1-甲基-1,2,3,4-四氢喹啉-7-基)异恶唑-3-甲酰胺或其药学上可接受的盐；
3)5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(1-甲基-1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰胺或其药学上可接受的盐；
4)5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(1,2,3,4-四氢-1,4-桥亚胺萘-6-基)异恶唑-3-甲酰胺或其药学上可接受的盐；
5)5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(9-甲基-1,2,3,4-四氢-1,4-桥亚胺萘-6-基)异恶唑-3-甲酰胺或其药学上可接受的盐；
6)5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(9-乙基-1,2,3,4-四氢-1,4-桥亚胺萘-6-基)异恶唑-3-甲酰胺或其药学上可接受的盐；
7)5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(9-异丙基-1,2,3,4-四氢-1,4-氨基萘-6-基)异恶唑-3-甲酰胺或其药学上可接受的盐；
8)5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(9-异丁基-1,2,3,4-四氢-1,4-氨基萘-6-基)异恶唑-3-甲酰胺或其药学上可接受的盐；
9)5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(5-甲基-4,5,6,7-四氢噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基)异恶唑-3-甲酰胺或其药学上可接受的盐；
10)5-(2,4-二羟基-5-异丙基-苯基)-N-乙基-4-(5-甲基-4,5,6,7-四氢噻唑并[4,5-c]吡啶-2-基)异恶唑-3-甲酰胺或其药学上可接受的盐；
11)5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(6-甲基-5,6,7,8-四氢-1,6-萘啶-2-基)异恶唑-3-甲酰胺或其药学上可接受的盐；
12)3-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-5-甲酰胺或其药学上可接受的盐；
13)5-(2,4-二羟基-5-异丙基-苯基)-N-乙基-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异噻唑-3-甲酰胺或其药学上可接受的盐；
14)5-(2,4-二羟基-5-异丙基-苯基)-N-乙基-4-(2-甲基-1,2,3,3a,4,6a-六氢环戊[c]吡咯-5-基)异恶唑-3-甲酰胺或其药学上可接受的盐；
15)4-异丙基-6-[4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)-3-(5-甲基-4H-1,2,4-三唑-3-基)异恶唑-5-基]苯-1,3-二醇或其药学上可接受的盐；
16)4-(3-(5-乙基-1H-咪唑-2-基)-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-5-基)-6-异丙基苯-1,3-二醇或其药学上可接受的盐；
17)4-(3-(5-乙基-1H-咪唑-2-基)-4-(2-(2-羟乙基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-5-基)-6-异丙基苯-1,3-二醇或其药学上可接受的盐；
18)5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-4-(7,7-二甲基-4,5,6,7-四氢噻吩并[2,3-c]吡啶-2-基)-N-乙基异恶唑-3-甲酰胺或其药学上可接受的盐；
19)5-(2,4-羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(6-甲基-5,6,7,8-四氢-1,6-萘叮-3-基)异恶唑-3-甲酰胺或其药学上可接受的盐；
20)4-异丙基-6-(4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)-3-(2,2,2-三氟-1-羟乙基)异恶唑-5-基)苯-1,3-二醇或其药学上可接受的盐；
21)N-腈基-5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲脒或其药 学上可接受的盐；
22)5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(6-甲基-5,6,7,8-四氢-4H-噻唑并[2,3-d]氮杂卓-2-基)异恶唑-3-甲酰胺或其药学上可接受的盐；
23)5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢吡咯并[1,2-a]吡嗪-7-基)异恶唑-3-甲酰胺或其药学上可接受的盐；
24)5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(5-异丁基-1甲基-4,5,6,7-四氢-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基)异恶唑-3-甲酰胺或其药学上可接受的盐；
25)5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(3-甲基-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂卓-7-基)异恶唑-3-甲酰胺或其药学上可接受的盐；
26)5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(3-甲基-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[c]氮杂卓-7-基)异恶唑-3-甲酰胺或其药学上可接受的盐；
27)3-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(3-甲基-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂卓-7-基)异恶唑-5-甲酰胺或其药学上可接受的盐；
28)3-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(2,3,4,5-四氢-1H-3-苯并氮杂卓-7-基)异恶唑-5-甲酰胺或其药学上可接受的盐；
29)3-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(异喹啉-6-基)异恶唑-5-甲酰胺或其药学上可接受的盐；
30)5-(2,4-二羟基-5-溴-苯基)-N-乙基-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-5-甲酰胺或其药学上可接受的盐；
31)5-(2,4-二羟基-5-氯-苯基)-N-乙基-4-(2-甲基-1,2,3,4四氢异喹啉-6-基)异恶唑-5-甲酰胺或其药学上可接受的盐；
32)5-(2,4-二羟基-5-甲基苯基)-N-乙基-4-(2-甲基-1,2,3,4四氢异喹啉-6-基)异恶唑-5-甲酰胺或其药学上可接受的盐；
33)5-(5-异丁基-2,4-二羟基-苯基)-N-乙基-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰胺或其药学上可接受的盐；
34)5-(5-乙基-2,4-二羟基-苯基)-N-乙基-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰胺或其药学上可接受的盐；
35)5-(5-环丙基-2,4-二羟基-苯基)-N-乙基-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰胺或其药学上可接受的盐；
36)5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-甲基-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰胺或其药学上可接受的盐；
37)5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-丙基-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰胺或其 药学上可接受的盐；
38)5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-异丙基-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰胺或其药学上可接受的盐；
39)5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-(2,2,2-三氟乙基)-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰胺或其药学上可接受的盐；
40)5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-(2-氟乙基)-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰胺或其药学上可接受的盐；
41)5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-(2-甲氧基乙基)-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰胺或其药学上可接受的盐；
42)5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-(3-甲氧基丙基)-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰胺或其药学上可接受的盐；
43)5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-[2-(二甲基胺基)乙基]-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰胺或其药学上可接受的盐；
44)5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(2-(2-羟基乙基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰胺或其药学上可接受的盐；
45)5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(2-(2-甲氧基乙基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰胺或其药学上可接受的盐；
46)5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(2-(2-氟乙基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰胺或其药学上可接受的盐；
47)5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(2-(3-甲氧基丙基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰胺或其药学上可接受的盐；
48)5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(2-(2-乙基磺酰基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰胺或其药学上可接受的盐；
49)5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(2-乙基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰胺或其药学上可接受的盐；
50)5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(2-丙基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰胺或其药学上可接受的盐；
51)5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(2-异丙基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰胺或其药学上可接受的盐；
52)5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(2-异丁基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰胺或其药学上可接受的盐；
53)4-(2-(2-乙酰氨基乙基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)-5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基异恶唑-3-甲酰胺或其药学上可接受的盐；
54)4-(2-(2-乙酰氨基丙基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)-5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基异恶唑-3-甲酰胺或其药学上可接受的盐；
55)5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-4-(2-(2-(二甲基氨基)-2-乙酰基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)-N-乙基异恶唑-3-甲酰胺或其药学上可接受的盐；
56)5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-4-(2-(2-(二甲基氨基)-3-丙酰基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)-N-乙基异恶唑-3-甲酰胺或其药学上可接受的盐；
57)5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-4-(2-(3-(二甲基氨基)丙酰基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)-N-乙基异恶唑-3-甲酰胺或其药学上可接受的盐；
58)5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(2-(3-吗啉-4-基-代丙酰基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰胺或其药学上可接受的盐；
59)5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-4-(2-(2-(二甲基氨基)乙酰基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)-N-乙基异恶唑-3-甲酰胺或其药学上可接受的盐；
60)5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(2-(2-吗啉-4-基代乙酰基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰胺或其药学上可接受的盐；
61)3-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-5-甲酰胺或其药学上可接受的盐；
62)3-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-甲基-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-5-甲酰胺或其药学上可接受的盐；
63)3-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-异丙基-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-5-甲酰胺或其药学上可接受的盐；
64)3-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-(2-羟基乙基)-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-5-甲酰胺或其药学上可接受的盐；
65)3-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-(2-氟乙基)-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-5-甲酰胺或其药学上可接受的盐；
66)3-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-(3-羟基丙基)-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-5-甲酰胺或其药学上可接受的盐；
67)3-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-5-甲酰胺或其药学上可接受的盐；
68)3-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(2-异丙基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-5-甲酰胺或 其药学上可接受的盐；
69)3-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(2-(2-羟基乙基)-(1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-5-甲酰胺或其药学上可接受的盐；
70)3-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(2-(2-甲氧基乙基)-(1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-5-甲酰胺或其药学上可接受的盐；
71)3-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(2-(2-氟乙基)-(1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-5-甲酰胺或其药学上可接受的盐。
本发明的另一目的在于提供一种药物组合物，其包括治疗有效量的式(Ⅰ)化合物或其药学上可接受的盐、水合物以及药学上可接受的载体。
本发明的另一目的在于提供上述化合物在制备治疗HSP90蛋白介导的疾病的药物中的应用。
本发明所述的由HSP90蛋白介导的疾病，优选自癌症和神经变性障碍。
本发明另一个目的在于提供上述化合物在制备治疗治疗特定类型的癌症中的应用，所述癌症包括但不限于：癌例如膀胱癌、乳腺癌、结肠癌、肾癌、肝癌、包括小细胞肺癌的肺癌、食道癌、胆囊癌、卵巢癌、胰腺癌、胃癌、宫颈癌、甲状腺癌、前列腺癌和包括鳞状细胞癌的皮肤癌；淋巴系的造血系统癌(hematopoietic tumor)，所述癌包括白血病、急性淋巴细胞性白血病、急性淋巴母细胞白血病、B-细胞淋巴瘤、T-细胞淋巴瘤、霍奇金氏淋巴瘤、非霍奇金氏淋巴瘤、毛细胞淋巴瘤和伯基特氏淋巴瘤；髓系的造血系统癌，所述癌包括急性和慢性髓性白血病、骨髓增生异常综合症和前髓细胞性白血病；包括纤维肉瘤和横纹肌肉瘤的间充质来源的癌；中枢和外周神经系统癌症，所述癌症包括星形细胞瘤、神经细胞瘤、神经胶质瘤和神经鞘瘤；其它癌，所述癌包括黑色素瘤、精原细胞瘤、畸胎癌、骨肉瘤、着色性干皮病、角化棘皮瘤(keratoxanthoma)、甲状腺毛囊癌和卡波西肉瘤。
本发明另目的在于提供制备治疗治疗特定类型的神经变性障碍的药物中的应用，所述障碍包括但不限于：阿尔茨海默病、帕金森病、亨廷顿病、多发性硬化和脊髓延髓肌肉萎缩症。
本发明另一目的在于提供包括式(I)的化合物在制备治疗连同放射治疗或化疗方案同时、单独或连续用于抗癌治疗的应用。
另外，本发明提供了用于抑制HSP90蛋白活性的体外方法，所述方法包括将所述蛋白与有效量的式(I)的化合物接触。
本发明也提供了包含1种或多种式(I)的化合物或其药学上可接受的盐和药学上可接受的赋形剂、载体或稀释剂的药物组合物。
本发明也提供了药物组合物，所述药物组合物包含式(I)的化合物连同已知细胞生长抑制剂或细胞毒类药、抗生素类药剂、烷化剂、抗代谢药剂、激素类药剂、免疫药剂、干扰素类药剂、环加氧酶抑制剂(例如COX-2抑制剂)、基质金属蛋白酶抑制剂、端粒末端转移酶抑制剂、酪氨酸激酶抑制剂、抗生长 因子受体药剂、抗HER药剂、抗EGFR药剂、抗血管发生药剂(例如血管发生抑制剂)、法尼基转移酶抑制剂、ras-raf信号转导途径抑制剂、细胞周期抑制剂、其它cdks抑制剂、微管蛋白结合试剂、拓扑异构酶I抑制剂、拓扑异构酶II抑制剂等。
此外，本发明提供了包含如上文所定义的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物和1种或多种化疗药物的产品或试剂盒，所述产品或试剂盒为组合制剂形式，所述如上文所定义的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物和1种或多种化疗药物同时、单独或连续用于抗癌治疗。
仍在另一个方面，本发明提供了如上文所定义的用作药物的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。
另外，本发明提供了如上文所定义的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐在制备具有抗肿瘤活性的药物中的用途。
最终，本发明提供了如上文所定义的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，所述化合物或盐用于制备治疗由HSP90活性改变所引起的和/或与HSP90活性改变相关的疾病中的应用，所述疾病特别是癌症或神经变性障碍。
除非另有说明，当提及式(I)的化合物本身以及其任何药物组合物或包含它们的任何治疗方法时，本发明包含本发明化合物的所有异构体、互变异构体、水合物、溶剂化物、络合物、N-氧化物和药学上可接受的盐。
式(I)的化合物的药学上可接受的盐包含与无机酸或有机酸形成的酸加成盐，所述酸例如硝酸、盐酸、氢溴酸、硫酸、高氯酸、磷酸、乙酸、三氟乙酸、丙酸、羟乙酸、富马酸、乳酸、草酸、丙二酸、苹果酸、马来酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、肉桂酸、苦杏仁酸、甲磺酸、羟乙磺酸和水杨酸。式(I)的化合物的药学上可接受的盐也包含与无机碱或有机碱形成的盐，所述碱例如碱金属或碱土金属，特别是钠、钾、钙、铵或镁的氢氧化物、碳酸盐或碳酸氢盐，非环状或环状胺类，优选甲胺、乙胺、二乙胺、三乙基胺、哌啶等。
对于术语“卤素”，我们意指氟、氯、溴或碘。
对于术语“烷基”，我们意指任何的饱和碳氢化合物或被1-3个杂原子取代的饱和碳氢化合物，其中碳氢化合物可以是直链或支链的。“烷基”包括烷烃基和杂烷基。例如“C1-6烷基”是指含有1-6个碳原子的烷烃或1-3个碳原子被杂原子取代的1-6个碳原子的烷烃。例如“C1-10烷基”是指含有1-10个碳原子的烷烃或1-3个碳原子被杂原子取代的1-10个碳原子的烷烃。“烷基”非限定性的例子包括甲基、乙基、正-丙基、异丙基、正-丁基、异丁基、叔-丁基、仲-丁基、正-戊基、正-己基等的基团。
对于术语“C2-7烯基”，我们意指含有至少一个双键且可以是直链或支链的脂族的C2-7烃链，其可能被一个或二个杂原子取代。代表性的实例包括，但不限于，乙烯基、1-丙烯基、2-丙烯基、1-或2-丁烯基等。
对于术语“C2-7炔基”，我们意指含有至少一个碳-碳三键且可以是直链或支链的脂族的C2-7烃链。代表性的实例包括，但不限于，乙炔基、1-丙炔基、2-丙炔基、1-或2-丁炔基等。
对于术语“环烷基”，除非另有说明，我们意指饱和环状碳氢化合物或被1个或多个杂原子取代的饱和环状碳氢化合物。“环烷基”包括环烷烃基和杂环烷基。环烷基非限制性的实例是环丙烷、环丁烷、环戊烷、环己烷，四氢呋喃、四氢噻吩等。例如术语“C3-10环烷基”，我们意指含有3-10个碳原子饱和环状碳氢化合物或被1个或多个杂原子取代的3-10个碳原子的饱和环状碳氢化合物。环烷基非限制性的实例是环丙烷、环丁烷、环戊烷、环己烷，四氢呋喃、四氢噻吩、吡喃、吡咯烷、咪唑烷、吡唑烷、噻唑烷、1，3-二氧杂环戊烷、哌啶、哌嗪和吗啉等。
对于术语“环烯基”，除非另有说明，我们意指含有双键的环状碳氢化合物或被1个或多个杂原子取代的含有双键的环状碳氢化合物，但含有完全共轭的π-电子系统的除外。“环烯基”包括环烯烃基和杂环烯基。环烯基非限制性的实例是环戊烯、环己烯、环己二烯、吡咯啉、咪唑啉、吡唑啉、噻唑啉和二氢呋喃等。
术语“芳基”、“芳稥基”、“芳稥环”或“芳环”包括芳烃基和杂芳基。
术语“芳烃基”意指具有1至4个环系统的单-、二-或多-碳环烃，所述环系统任选地进一步相互稠合或通过单键连接，其中至少一个碳环是“芳族的”，其中术语“芳族的”意指完全共轭的π-电子键系统。该芳基的非限制性实例是苯基、α-或β-萘基或联苯基基团。
术语“杂芳基”意指芳族的杂环，典型地是具有1至3个选自N、O或S的杂原子的5-至10元杂环；杂芳基环可以任选地进一步稠合或连接至芳族的和非芳族的碳环和杂环。该杂芳基的非限制性实例是，例如，吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、吲哚基、咪唑基、噻唑基、异噻唑基、吡咯基、苯基-吡咯基、呋喃基、苯基-呋喃基、噁唑基、异噁唑基、吡唑基、噻吩基、苯并噻吩基、异吲哚基、苯并咪唑基、喹啉基、异喹啉基、1，2，3-三唑基、1-苯基-1，2，3-三唑基、2，3-二氢吲哚基、2，3-二氢苯并呋喃基、2，3-二氢苯并噻吩基；苯并吡喃基、2，3-二氢苯并噁嗪基、2，3-二氢喹喔啉基等。
根据本发明，除非另有说明，任何上述R1～R5基团可以在其任何空着的位置任选地被1个或多个基团，例如1至6个基团取代，所述基团独立地选自：卤素、硝基、氧代基团(＝O)、氰基、C1-C6烷基、多氟代烷基、多氟代烷氧基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、羟基烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基、杂环烷基、C3-C7环烷基、羟基、烷氧基、芳氧基、杂环氧基、亚甲二氧基、烷基羰基氧基、芳基羰基氧基、环烯基氧基、杂环基羰基氧基、亚烷基氨基氧基、羧基、烷氧羰基、芳基氧基羰基、环烷基氧基羰基、杂环基烷基氧基羰基-氨基、脲基、烷基氨基、二烷基氨基、芳基氨基、二芳基氨基、杂环基氨基、甲酰氨基、烷基羰基氨基、芳基羰基氨基、杂环基羰基氨基、氨基羰基、烷基氨基羰基、二烷基氨基羰基、芳基氨基羰基、杂环基氨基羰基、烷氧基羰基氨基、羟基氨基羰基烷氧基亚氨基、烷基磺酰基氨基、芳基磺酰基氨基、杂环基磺酰基氨基、甲酰基、烷基羰基、芳基羰基、环烷 基羰基、杂环基羰基、烷基磺酰基、芳基磺酰基、氨基磺酰基、烷基氨基磺酰基、二烷基氨基磺酰基、芳基氨基磺酰基、杂环基氨基磺酰基、芳硫基、烷硫基、膦酸酯、膦酸、膦酸根和烷基膦酸酯。反过来，当适宜时，每个上述取代基可以进一步被1个或多个前述基团，如R1、R2、R3、R4和R5取代。
对于术语多氟代烷基或多氟代烷氧基，我们意指任何上述直链或支链C1-C8烷基或烷氧基，其被多于一个氟原子取代，例如，三氟甲基、三氟乙基、1，1，1，3，3，3-六氟丙基、三氟甲氧基等。
对于术语羟基烷基，我们意指任何含有羟基的上述C1-C8烷基，例如，羟甲基、2-羟基乙基、3-羟基丙基等。
通过所有如上描述，技术人员清楚，任何名称为复合名称的基团按惯例应当意指由通过衍生其的部分构成，例如，芳基氨基为进一步被芳基取代的氨基基团，其中芳基如上文所定义。
同样，任何术语，例如，烷硫基、烷基氨基、二烷基氨基、烷氧羰基、烷氧基羰基氨基、杂环基羰基、杂环基羰基氨基、环烷基氧基羰基等包含其中烷基、烷氧基、芳基、C3-10环烷基和杂环基部分如上文所定义的基团。
本发明的化合物可以通过本领域技术人员所熟知的多种合成方法来制备，包括下面列举的具体实施方式、其与其他化学合成方法的结合所形成的实施方式以及本领域技术上人员所熟知的等同替换方式，优选的实施方式包括但不限于本发明的实施例。
本发明所使用的所有溶剂是市售的，无需进一步纯化即可使用。反应一般是在惰性氮气下、无水溶剂中进行的。质子核磁共振数据记录在Bruker Avance III 400(400MHz)分光仪上，化学位移以四甲基硅烷低场处的δ(ppm)表示。质谱是在安捷伦1200系列加6110(&1956A)上测定。LC/MS或Shimadzu MS包含一个DAD：SPD-M20A(LC)和Shimadzu Micromass 2020检测器。质谱仪配备有一个正或负模式下操作的电喷雾离子源(ESI)。
本发明采用下述缩略词：PG代表保护基；DMF代表N,N-二甲基甲酰胺；PE代表石油醚；EA代表乙酸乙酯；NCS代表1-氯吡咯烷-2,5-二酮；NBS代表1-溴吡咯烷-2,5-二酮；NIS代表1-碘吡咯烷-2,5-二酮；eq代表当量、等量；DCM代表二氯甲烷；DMSO代表二甲亚砜；EtOH代表乙醇；MeOH代表甲醇；CBz代表苄氧羰基，是一种胺保护基团；BOC代表叔丁基羰基是一种胺保护基团；HOAc代表乙酸；NaCNBH3代表氰基硼氢化钠；THF代表四氢呋喃；Boc2O代表二-叔丁基二碳酸酯；TFA代表三氟乙酸；TFAA代表三氟乙酸酐；DIEA代表二异丙基乙基胺；DMAP代表N,N-二甲基氨基吡啶；TEA代表三乙胺；TMSCl代表三甲基氯硅烷；MTBE代表甲基叔丁基醚；AIBN代表偶氮二异丁腈；DME代表二甲醚；DCE代表二氯乙烷；LDA代表N,N-二异丙基氨基丽；CAN代表硝酸铈铵；mp代表熔点。
化合物经手工或者软件命名，市售化合物采用供应商目录名称。
用配有Shimadzu SIL-20A自动进样器和日本岛津DAD：SPD-M20A探测器的岛津LC20AB系统进行高效液相色谱分析，采用Xtimate C18(3m填料，规格为2.1x300mm)色谱柱。0-60AB_6分钟 的方法：应用线性梯度，以100％A(A为0.0675％TFA的水溶液)开始洗脱，并以60％B(B为0.0625％TFA的MeCN溶液)结束洗脱，整个过程为4.2分钟，然后以60％B洗脱1分钟。将色谱柱再平衡0.8分钟达到100:0，总运行时间为6分钟。10-80AB_6分钟的方法：应用线性梯度，以90％A(A为0.0675％TFA的水溶液)开始洗脱，并以80％B(B为0.0625％TFA的乙腈溶液)结束洗脱，整个过程为4.2分钟，然后以80％B洗脱1分钟。将色谱柱再平衡0.8分钟达到90:10，总运行时间为6分钟。柱温为50℃，流速为0.8mL/min。二极管阵列检测器扫描波长为200-400nm。
在Sanpont-group的硅胶GF254上进行薄层色谱分析(TLC)，常用紫外光灯照射检出斑点，在某些情况下也采用其他方法检视斑点，在这些情况下，用碘(10g硅胶中加入约1g碘并彻底混合而成)、香草醛(溶解大约1g香草醛于100mL 10％H2SO4中制得)、茚三酮(从Aldrich购得)或特殊显色剂(彻底混合(NH4)6Mo7O24·4H2O、5g(NH4)2Ce(IV)(NO3)6、450mL H2O和50mL浓H2SO4而制得)展开薄层板，检视化合物。采用Still,W.C.；Kahn,M.；and Mitra,M.Journal of Organic Chemistry,1978,43,2923-2925.中所公开技术的类似方法，在Silicycle的40-63μm(230-400目)硅胶上进行快速柱色谱。快速柱色谱或薄层色谱的常用溶剂是二氯甲烷/甲醇、乙酸乙酯/甲醇和己烷/乙酸乙酯的混合物。
在Gilson-281Prep LC 322系统上采用吉尔森UV/VIS-156探测器进行制备色谱分析,所采用的色谱柱是Agella Venusil ASB Prep C18，5m、150x21.2mm；Phenomenex Gemini C18、5m、150x30mm；Boston Symmetrix C18，5m、150x30mm；或者Phenomenex Synergi C18、4m、150x30mm。在流速约为25mL/min时，用低梯度的乙腈/水洗脱化合物，其中水中含有0.05％HCl、0.25％HCOOH或0.5％NH3·H2O，总运行时间为8-15分钟。
用带有Agilent1260自动进样器和Agilent DAD：1260检测器的Agilent 1260Infinity SFC系统进行SFC分析。色谱柱采用Chiralcel OD-H 250x4.6mm I.D.,5um或者Chiralpak AS-H 250x4.6mm I.D.,5um或者Chiralpak AD-H 250x4.6mm I.D.,5m。OD-H_5_40_2.35ML的色谱条件：Chiralcel OD-H色谱柱(规格为250x4.6mm I.D.,5m填料)，流动相为40％乙醇(0.05％DEA)-CO2；流速为2.35mL/min；检测波长为220nm。AS-H_3_40_2.35ML色谱条件：Chiralpak AS-H色谱柱(规格为250x4.6mm I.D.,5m填料)；流动相为40％甲醇(0.05％DEA)-CO2；流速为2.35mL/min，检测波长为220nm。OD-H_3_40_2.35M色谱条件：Chiralcel OD-H色谱柱(规格为250x4.6mm I.D，5m填料)，流动相为40％甲醇(0.05％DEA)-CO2，流速为2.35mL/min，检测波长为220nm。AD-H_2_50_2.35ML色谱条件：Chiralpak AD-H色谱柱(规格为250x4.6mm I.D，5mm填料),流动相为50％甲醇(0.1％MEA)-CO2，流速为2.35mL/min，检测波长为220nm。
在使用Gilson UV检测器的Waters Thar 80Pre-SFC系统上进行制备型SFC分析，所采用的色谱柱为Chiralcel OD-H(规格为250x4.6mm I.D，5m填料)或者Chiralpak AD-H(规格为250x4.6mm I.D，5m填料)。在流速约为40-80mL/min时，用低梯度的乙醇-二氧化碳或者甲醇-二氧化碳洗脱化合物， 其中甲醇或乙醇含有0.05％NH3·H2O、0.05％DEA或者0.1％MEA，总运行时间为20-30分钟。
本发明部分化合物的制备方法：
本发明的化合物可以通过本领域技术人员所熟知的多种合成方法来制备，包括下面列举的具体实施方式、其与其他化学合成方法的结合所形成的实施方式以及本领域技术上人员所熟知的等同替换方式，优选的实施方式包括但不限于本发明的实施例。
本发明具体实施方式的化学反应是在合适的溶剂中完成的，所述的溶剂须适合于本发明的化学变化及其所需的试剂和物料。为了获得本发明的化合物，有时需要本领域技术人员在已有实施方式的基础上对合成步骤或者反应流程进行修改或选择。
本领域任何合成路线规划中的一个重要考量因素是为反应性官能团(如本发明中的氨基)选择合适的保护基。对于经过训练的从业者来说，Greene and Wuts的(Protective Groups In Organic Synthesis,Wiley and Sons,1991)是这方面的权威。本发明引用的所有参考文献整体上并入本发明。
本发明中式(I)所示化合物可以通过反应流程1以及本领域技术人员所熟知的标准方法所制备。以带有保护基的间苯二酚原料(1-1)为例，与羟胺类底物进行(3+2)成环反应，并消除一分子水形成五元芳香杂环系(1-2)，然后再在五元芳香杂环上进行亲电卤代。形成的卤代物可以在钯催化下经Suzuki反应直接与并杂环芳香硼酸酯反应或先形成硼酸酯再与并杂环芳香卤代物进行Suzuki反应。两种途径均可在五元芳香杂环上引入各种芳香并环基团得到(1-5)。最后脱去保护基形成间苯二酚化合物(1-6)，即本发明的HSP90抑制剂。
反应式1
具体而言，本发明所提供的式(I)化合物可以通过反应流程1以及本领域技术人员所熟知的标准方法所制备。从市售戊内酰胺(1-1)衍生物开始，也可以从其他具有不同官能团修饰的近似衍生物开始，R0选自H、卤素、烷基、杂原子取代烷基、羧酸、羧酸烷基酯，PG为保护基团，选自甲基(Me)、苄基(Bn)、4-甲氧基苄基(PMB)、3，4-二甲氧基苄基(DMB)、甲氧基甲基(MOM)、2-甲氧基乙氧基甲基(MEM)、2-四氢呋喃基(THP)、三甲硅基(TMS)、三乙硅基(TES)、三异丙基硅基(TIPS)、叔丁基二甲基硅基(TBDMS)、叔丁基二苯基硅基(TBDPS)、乙酰基、苯甲酰基、特戊酰基；X’为卤素；X”为卤素或三氟甲磺酸等。
其它取代基与式(Ⅰ)相同。所有这些变化、替换将在具体实施方式部分予以详述。本领域技术人员应该知道，为了制备本发明化合物，反应流程1中反应步骤的顺序可以是不同的，这也属于本发明的范围。
本发明的式(I)所示的一系列新的间苯二酚化合物是HSP90蛋白的抑制剂，可用作治疗癌症和神经变性障碍。与现有技术相比，本发明化合物具有改进的活性和增强的疗效。因此，式(I)的化合物可以成为癌症和神经变性障碍疾病的治疗药物。
具体实施方式
下面通过实施例对本发明进行详细描述，但并不意味着对本发明任何不利限制。
实施例1
5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰胺
反应流程：
步骤A：在氮气保护20摄氏度下，向溶有4-异丙基苯-1,3-二醇(7.5克，49.3毫摩尔，1.0当量)的BF3·Et2O(60毫升)溶液中逐滴加入乙酸(3.26克，54.2毫摩尔，1.1当量)。加完后将反应混合物在80℃下搅拌3小时。反应液用醋酸钾水溶液(120mL)淬灭，然后用乙酸乙酯萃取(150毫升×3)。将合并的有机相用饱和食盐水(100毫升)洗涤后无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。粗制物用柱层析纯化(PE：EA＝50：1)，得到产物1-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)乙酮(6.0克，30.9毫摩尔，62.7％产率)，为黄色固体。
步骤B：在氮气保护20摄氏度下，向1-(2,4-二羟基-5-异丙基-苯基)乙酮(6.00克，30.89毫摩尔，1.00当量)和MeI(52.6克，370.7毫摩尔，12.0当量)的DMF(80毫升)混合物中加入碳酸铯(25.2克，77.2毫摩尔，2.5当量)。混合物在20℃下搅拌16小时后倒入水(80毫升)中。水相用乙酸乙酯萃取(100毫升×2)。合并的有机相用饱和食盐水(100毫升)洗涤后用无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过硅胶色谱纯化(PE/EA＝10/1～5/1)，得到1-(5-异丙基-2,4-二甲氧基-苯基)乙酮(3.40克，15.3毫摩尔，49.5％产率)为黄色固体。
步骤C：在氮气保护20摄氏度下，向溶有1-(5-异丙基-2,4-二甲氧基-苯基)-乙酮(3.40克，15.30毫摩尔，1.00当量)的THF(50毫升)溶液中加入NaH(1.22克，30.6毫摩尔，2.0当量)和草酸二甲酯(5.42克，45.9毫摩尔，3.0当量)。将反应混合物在60℃下再搅拌1小时后倾入氯化铵水溶液(1000毫升)中淬灭，然后用EA萃取(80毫升×2)。合并的有机相用饱和盐水(80毫升)洗涤并用无水硫酸钠干燥，过滤并在真空中浓缩，得到产物2-羟基-4-(5-异丙基-2,4-二甲氧基-苯基)-4-氧代-丁酸甲酯(4.80克，粗品)，为黄色固体，直接用于下一步。
步骤D：在室温氮气保护下，向2-羟基-4-(5-异丙基-2,4-二甲氧基-苯基)-4-氧代-丁酸甲酯(4.80克，15.57毫摩尔，1.00当量)的MeOH(60毫升)溶液中加入NH2OH·HCl(2.16克，31.14毫摩尔，2.00当量)。混合物加热到60摄氏度，并搅拌1小时。将混合物冷却至室温并倾入水(50毫升)中。水相用EA萃取(50毫升×2)。合并的有机相用饱和食盐水(30mL)洗涤后无水硫酸钠干燥，过滤并 真空浓缩。残余物通过硅胶色谱(PE/EA＝6/1～3/1)纯化，得到5-(5-异丙基-2,4-二甲氧基-苯基)-异恶唑-3-羧酸乙酯(4.80克，15.0毫摩尔纯化，96.5％产率)，为黄色固体。
步骤E：室温下向5-(5-异丙基-2,4-二甲氧基苯基)异恶唑-3-羧酸乙酯(4.80克，15.7毫摩尔，1.00当量)的MeOH溶液(50毫升)溶液中加入乙胺(3.54克，78.6毫摩尔，5.0当量)。将反应混合物在60℃下搅拌2小时。将反应混合物浓缩，粗制物通过PE/EA＝50/1(100毫升)洗涤，得到产物N-乙基-5-(5-异丙基-2,4-二甲氧基苯基)异恶唑-3-甲酰胺(3.70克，11.6毫摩尔，73.9％产率)，为黄色固体。
步骤F：在室温N2保护下，向N-乙基-5-(5-异丙基-2,4-二甲氧基苯基)异恶唑-3-甲酰胺(3.50克，11毫摩尔，1.0当量)的MeCN(50mL)溶液中，加入CAN(301毫克，549微摩尔，0.05当量)和NIS(4.95克，22毫摩尔，2.00当量)。混合物加热至80摄氏度并搅拌16小时。将混合物冷却至室温并倾入水(30毫升)中，水相用EA(40毫升x2)萃取。合并的有机相用饱和盐水(20mLx2)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤和真空浓缩干燥。残余物通过硅胶色谱(PE/EA＝10/1～4/1)纯化，得到N-乙基-4-碘-5-(5-异丙基-2,4-二甲氧基苯基)异恶唑-3-甲酰胺(4.10克，9.2毫摩尔，84.0％产率)，为黄色油状物。
步骤G：在0℃下，向溶有6-溴异喹啉(17.00克，81.7毫摩尔)的MeOH(170毫升)溶液中一次性加入MeI(197.2克，1.4摩尔)。将混合物在0℃搅拌20分钟，然后升温至25℃并搅拌16小时。将混合物在减压下浓缩，得到6-溴-2-甲基异喹啉-2-鎓碘化物(28.8克，粗品)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,Methanol-d4):δ9.90(s,1H),8.65-8.61(m,2H),8.45-8.39(m,2H),8.22(d,J＝8.0Hz,1H),4.55(s,1H).
步骤H：在0℃下，向6-溴-2-甲基异喹啉-2-鎓碘化物(28.80克，82.1毫摩尔)的MeOH(350毫升)溶液中一次性加入NaBH4(9.31克，246.2毫摩尔)。混合物在25℃下搅拌2小时后用NaHCO3水溶液将混合物调节至pH＝9，并用乙酸乙酯萃取(50mLx3)。将合并的有机相用饱和食盐水(100mLx2)洗涤，并用无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。残余物用硅胶色谱法(100～200目硅胶，二氯甲烷/甲醇＝50/1～20/1)，得到6-溴-2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉(16.65克，80.8％产率，90％纯度)，为黄色固体。
步骤I：在25℃氮气保护下，向6-溴-2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉(16.65克，73.64毫摩尔)的二氧六环(150毫升)溶液中加入双联片呐醇硼酸酯(28.05克，110.46毫摩尔)和KOAc(14.45克，147.27毫摩尔)，随后加入催化剂Pd(dppf)Cl2.CH2Cl2(6.01克，7.36毫摩尔)。混合物在25℃下搅拌10分钟，然后加热至90℃并搅拌14小时。将混合物冷却至25℃，并在减压下浓缩。残余物通过硅胶色谱法(100～200目硅胶，二氯甲烷/甲醇＝10/0～1/1)，得到标题产物(31.0克，粗品)，为黑色固体，直接用于下一步。MS(ESI)M/Z：274(M+1)。
步骤J：在25℃氮气保护下，向2-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊环-2-基)-1,2,3,4-四氢异喹啉(6.15克，13.5毫摩尔)和N-乙基-4-碘-5-(5-异丙基-2,4-二甲氧基苯基)异恶唑-3-甲酰胺(4.00克， 9.0毫摩尔)的二氧六环(50毫升)混合物溶液中加入K2CO3(2.49克，18.0毫摩尔)，H2O(10.0毫升)和Pd(PPh3)4(1.26克，1.80mmol)。将混合物在25℃下搅拌10分钟，然后加热至110℃并搅拌18小时。混合物冷却至25℃，并在减压下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法纯化(200-300目硅胶，石油醚/乙酸乙酯，二氯甲烷/甲醇＝5/1，10/1)，得到N-乙基-5-(5-异丙基-2,4-二甲氧基苯基)-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰胺(2.87克，68.8％收率)，为褐色固体。MS(ESI)M/Z：464(M+1)。
步骤K：在-78摄氏度氮气保护下，向N-乙基-5-(5-异丙基-2,4-二甲氧基苯基)-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢-6-基)异恶唑-3-甲酰胺(1.70克，3.67毫摩尔)的DCM溶液(16.00毫升)中缓慢加入BBr3(9.19克，36.67毫摩尔)，历时2小时。将反应混合物历时1小时升温至0摄氏度，然后将反应混合物在25℃再搅拌16小时。反应加入MeOH(10mL)淬灭，在25℃搅拌1小时，然后将混合物缓慢滴入饱和的NaHCO3水溶液并在0℃过滤。水相用二氯甲烷：甲醇＝10：1(10毫升x3)萃取。将合并的有机相用饱和盐水(10mLx2)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤和真空浓缩。残余物通过硅胶色谱法(100～200目硅胶，二氯甲烷/甲醇＝10/0～1/1)纯化，得到5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰胺(566.0毫克，35.4％产率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.08(s,1H),9.92-9.78(m,J＝4.0Hz,1H),7.16-7.12(m,3H),6.89(s,1H),6.53(s,1H),4.6-4.42(d,J＝16.0Hz,1H),4.27-4.21(m,1H),3.26-3.22(m,4H),3.05-3.02(m,1H),2.88-2.87(m,4H),1.11-1.08(t,J＝8.0Hz,3H),1.03-0.98(m,6H).MS(ESI)m/z:436(M+1).
实施例2
5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(1-甲基-1,2,3,4-四氢喹啉-7-基)异恶唑-3-甲酰胺
反应流程：
步骤A：在25℃下，向溶有7-溴喹啉(100.00毫克，480.65微摩尔)和多聚甲醛(433毫克，4.8毫摩尔)的AcOH(3mL)中混合物中，加入NaBH3CN(151毫克，2.4毫摩尔)。将混合物在25℃下搅拌40分钟后，用NaOH中和。将整个反应液用DCM萃取(3毫升x3)，合并有机相并用饱和食盐水(3毫升x2)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤和真空浓缩。得到的粗产物7-溴-1-甲基-1,2,3,4-四氢喹啉(155毫克)，为棕色油状物，无需进一步纯化直接用于下步反应。MS(ESI)M/Z：226(M+1)。
步骤B：在25℃氮气保护下，向7-溴-1-甲基-1,2,3,4-四氢喹啉(250毫克，1.11毫摩尔)的二氧六环(7毫升)溶液中加入双联片呐醇硼酸酯(318毫克，1.25毫摩尔)和KOAc(144毫克，1.47毫摩尔)，随后加入催化剂Pd(dppf)Cl2.CH2Cl2(272毫克，333微摩尔)。将混合物在25℃搅拌10分钟，然后加热至90摄氏度搅拌17小时。将混合物冷却至25℃，并在减压下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法纯化(100-200目硅胶，石油醚/乙酸乙酯＝50/1)提纯，得到粗品1-甲基-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊环-2-基)-1,2,3,4-四氢喹啉(316毫克)，为黄色油状物。MS(ESI)m/z:274(M+1)。
步骤C：在25℃氮气保护下，向溶有1-甲基-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊环-2-基)-1,2,3,4-四氢喹啉(221毫克，810.3微摩尔)和N-乙基-4-碘-5-(5-异丙基-2,4-二甲氧基苯基)异恶唑-3-甲酰胺(360毫克，810微摩尔)的二氧六环(9.9毫升)和H2O(2.1毫升)混合溶液中加入K2CO3(224毫克，1.6毫摩尔)和Pd(dppf)Cl2.CH2Cl2(66毫克，81微摩尔)。混合物在25℃下搅拌20分钟，然后加热至90℃并搅拌17小时。将混合物冷却至25℃，并在减压下浓缩。将残余物倒入水(5mL)中，并搅拌10分钟。水相用乙酸乙酯萃取(5毫升×3)。将合并的有机相用饱和盐水(5mL×2)，用无水硫酸钠干燥，过滤和真空浓缩。将残余物通过薄层层析板纯化(二氯甲烷：乙酸乙酯＝5/1)，得到N-乙基-5-(5-异丙基-2,4-二甲氧基苯基)-4-(1-甲基-1,2,3,4-四氢喹啉-7-基)异恶唑-3-甲酰胺(72毫克，19.2％产率)，为棕色油状物。MS(ESI)M/Z：464(M+1)。
步骤D：在-78摄氏度下，向N-乙基-5-(5-异丙基-2,4-二甲氧基苯基)-4-(1-甲基-1,2,3,4-四氢喹啉-7- 基)异恶唑-3-甲酰胺(83毫克，184.6微摩尔)的DCM溶液(5毫升)中加入BBr3(462毫克，1.85毫摩尔)，历时15分钟。在此期间，温度保持在-78摄氏度。加完后将反应混合物升温至0摄氏度搅拌30分钟。然后将反应混合物在25℃再搅拌16小时。反应物用饱和的NaHCO3水溶液缓慢猝灭，并过滤。将滤液在真空下蒸馏除去。粗产物通过制备型HPLC进一步纯化，得到5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(1-甲基-1,2,3,4-四氢喹啉-7-基)异恶唑-3-甲酰胺(23毫克，29.8％产率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ9.73(s,1H),9.63(s,1H),8.83(t,J＝4.0Hz,1H),6.84(s,1H),6.79(d,J＝8.0Hz,1H),6.49(s,1H),6.43-6.42(m,2H),3.27-3.21(m,2H),3.06-2.99(m,1H),2.65-2.63(m,5H),1.88-1.82(m,2H),1.09(t,J＝4.0Hz,3H),1.01(d,J＝4.0Hz,6H).MS(ESI)m/z:436(M+1).
实施例3
5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(1-甲基-1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰胺
反应流程：
步骤A：在25℃下，向溶有1,2,3,4-四氢喹啉(2.0克，15.0毫摩尔)和多聚甲醛(6.77克，75.1毫摩尔)的MeOH(20mL)混合物中，一次性加入AcOH(210毫克，3.5毫摩尔)。将混合物在25℃搅拌1小时，然后加入NaBH3CN(1.89克，30.0毫摩尔)，并继续搅拌16小时。将混合物在减压下浓缩。残余物倒入水(15毫升)中，并搅拌10分钟。水相用乙酸乙酯萃取(10毫升×3)。将合并的有机相用饱和盐水(10mL×3)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤和真空浓缩，得到1-甲基-1,2,3,4-四氢喹啉(1.17克， 52.9％)，为黄色油状物。MS(ESI)M/Z：148(M+1)。
步骤B：将1-甲基-1,2,3,4-四氢喹啉(300毫克，2.04毫摩尔)的DMF溶液(5毫升)冷却至0℃，然后加入NBS(363.1毫克，2.0毫摩尔)。反应在0℃下搅拌2小时，然后升温至25℃并搅拌16小时。然后将反应物倾入5mL水中，悬浮液用乙酸乙酯(5毫升×3)萃取。将合并的有机相用饱和盐水(5mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤和真空浓缩，得到粗品6-溴-1-甲基-1,2,3,4-四氢喹啉(485毫克)，为棕色固体，无需进一步纯化将其用于下一步反应。MS(ESI)M/Z：226(M+1)。
步骤C：在25℃氮气保护下，向溶有6-溴-1-甲基-1,2,3,4-四氢喹啉(250毫克，1.1毫摩尔)，双联片呐醇硼酸酯(318毫克，1.2毫摩尔)和KOAc(325毫克，3.3毫摩尔)的二氧六环溶液(7毫升)中加入Pd(dppf)Cl2.CH2Cl2(271毫克，331.7微摩尔)。将混合物在25℃搅拌10分钟，然后加热至90摄氏度并搅拌17小时。将混合物冷却至25℃，并在减压下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法纯化(100-200目硅胶，石油醚/乙酸乙酯＝50/1)，得到1-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊环-2-基)-1,2,3,4-四氢喹啉(187毫克)，为黄色油状物。MS(ESI)M/Z：274(M+1)。
步骤D：在25℃氮气保护下，向溶有1-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊环-2-基)-1,2,3,4-四氢喹啉(92毫克，337.6微摩尔)和N-乙基-4-碘-5-(5-异丙基-2,4-二甲氧基苯基)异恶唑-3-甲酰胺(100毫克，225.1微摩尔)的二氧六环(6.6毫升)和H2O(1.4毫升)混合溶液中加入Pd(PPh3)2Cl2(15.8mg,22.5umol)和NaHCO3(37.8mg,450.2umol)。混合物在25℃下搅拌10分钟，然后加热至90℃并搅拌17小时。将混合物冷却至25℃，并在减压下浓缩。将残余物倒入水(8mL)中，并搅拌10分钟。水相用乙酸乙酯萃取(5毫升×3)。将合并的有机相用饱和盐水(5mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤和真空浓缩。将残余物通过薄层层析板纯化(二氯甲烷：乙酸乙酯＝3/1)，得到N-乙基-5-(5-异丙基-2,4-二甲氧基苯基)-4-(1-甲基-1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰胺(51毫克，48.9％产率)，为棕色油状物。MS(ESI)M/Z：464(M+1)。
步骤E：在-78摄氏度下，向N-乙基-5-(5-异丙基-2,4-二甲氧基苯基)-4-(1-甲基-1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰胺(50毫克，107.9微摩尔，1.00当量)的DCM溶液(5毫升)中加入BBr3(270毫克，1.08毫摩尔，10.00当量)，历时15分钟。在此期间，温度保持在-78摄氏度。加完后将反应混合物升温至0摄氏度搅拌30分钟。然后将反应混合物在25℃再搅拌16小时。反应物用饱和的NaHCO3水溶液缓慢猝灭，并过滤。将滤液在真空下蒸馏除去。粗产物通过制备型HPLC纯化，得到5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(1-甲基-1,2,3,4-四氢喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰胺(26.8毫克，57.0％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ9.73(s,1H),9.60(s,1H),8.78(t,J＝8.0Hz,1H),6.87-6.89(m,1H),6.84-6.80(m,1H),6.49(d,J＝8.0Hz,1H),6.43(s,1H),3.27-3.20(m,2H),3.17-3.14(m,2H),3.06-2.97(m,1H),2.80(s,3H),2.56(t,J＝4.0Hz,2H),1.87-1.83(m,2H),1.09(t,J＝4.0Hz,3H),1.02-0.99(m,6H).MS(ESI)m/z:356(M+1).
实施例4
5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(1,2,3,4-四氢-1,4-桥亚胺萘-6-基)异恶唑-3-甲酰胺
反应流程：
步骤A：向溶有吡咯4.00克，59毫摩尔，1.00当量)和(Boc)2O(15.60克，71.5毫摩尔，1.20当量)的乙腈溶液(200毫升)中加入DMAP(1.00克，8.2毫摩尔，0.14当量)。将混合物在25℃下搅拌2小时。混合物浓缩并将残余物通过硅胶柱纯化(洗脱剂为PE)，得到吡咯-1-甲酸叔丁酯(7.80克，46.7毫摩尔，78.3％产率)，为无色液体。
步骤B：将吡咯-1-甲酸叔丁酯(4.60克，27.5毫摩尔，1.00当量)和镁粉(720毫克，27.5毫摩尔，1.0当量)的THF(20mL)混合溶液油浴加热至66℃。1-溴-2-氟-苯(4.88克，27.89毫摩尔，1.0当量)在20分钟内缓慢加入，加完后将混合物在66℃下搅拌8小时。减压移除溶剂并加入0.5N HCl水溶液，DCM萃取。将有机层用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，并减压浓缩，得到的残余物通过柱层析纯化(PE/EA＝20/1)，得到1,4-二氢-1,4-桥亚胺萘-9-甲酸叔丁酯(2.43克，10毫摩尔，36.3％产率)，为黄色液体。
步骤C：在H2气氛下，加有1,4-二氢-1,4-桥亚胺萘-9-甲酸叔丁酯(2.43克，10毫摩尔，1.00当量)和干Pd/C(200毫克)的MeOH(50毫升)溶液搅拌在25℃下搅拌2小时。将混合物通过硅藻土垫过滤并将滤液浓缩，得到1,2,3,4-四氢-1,4-桥亚胺萘-9-甲酸叔丁酯(2.33克，9.5毫摩尔，95.1％产率)，为黄色油状物。
步骤D：在0℃下，将1,2,3,4-四氢-1,4-桥亚胺萘-9-甲酸叔丁酯2.33克，9.5毫摩尔，1.0当量)加入DCM(1.2毫升)和TFA(4.5毫升)的混合溶液。将该混合物在0℃搅拌0.5小时后在25℃下再搅拌4.5小时。减压移除溶剂后加入2N NaOH水溶液，用DCM萃取水相。有机层经无水硫酸钠干燥，并浓缩，得到1,2,3,4-四氢-1,4-桥亚胺萘(1.38克，9.5毫摩尔，100％产率)，为黄色固体。
步骤E：将1,2,3,4-四氢-1,4-桥亚胺萘(1.38克，9.5毫摩尔，1.00当量)和DIEA(1.37克，10.6毫摩尔，1.12当量)的无水DCM(20.00毫升)混合物冷却至0℃，加入TFAA(2.27克，10.8毫摩尔，1.14当量)。将反应混合物在氮气保护下缓慢地升至25℃并搅拌5小时后，将所得反应混合物冷却至0℃，并加入水(2毫升)淬灭剩余的酸酐。使用NaOH水溶液(1N)调节水相pH为中性后，分离出有机相。水相用DCM萃取两次，将合并的有机层经无水硫酸钠干燥并浓缩得到2,2,2-三氟-1-(1,2,3,4-四氢-1,4-桥亚胺萘-9-基)乙酮(2.24克，9.29毫摩尔，97.8％产率)，为棕色油状物。
步骤F：将2,2,2-三氟-1-(1,2,3,4-四氢-1,4-桥亚胺萘-9-基)乙酮(2.24克，9.29毫摩尔，1.00当量)的TFA溶液(5.00毫升)冷却至0℃，逐滴加入发烟硝酸(1毫升)。将所得反应混合物在0℃下搅拌1小时，然后在25℃再搅拌1小时。该混合物倒入300毫升冰水中，并用DCM萃取三次。将合并的有机相依次用饱和NaHCO3和饱和NaCl水溶液洗涤。有机相经无水硫酸钠干燥并浓缩。将残余物通过硅胶柱层析纯化(DCM洗脱)，得到目标产物2,2,2-三氟-1-(6-硝基-1,2,3,4-四氢-1,4-桥亚胺萘-9-基)乙酮(1.86克，6.50毫摩尔，67.0％产率)，为黄色固体。
步骤G：向溶有2,2,2-三氟-1-(6-硝基-1,2,3,4-四氢-1,4-桥亚胺萘-9-基)乙酮(3.5克，12.23毫摩尔，1.00当量)的二氧六环(20.00毫升)/乙醇(16.00毫升)/H2O(12.00毫升)混合溶液中依次加入NH4Cl(2.63克，49.2毫摩尔，4.02当量)和铁粉(3.43克，61.4毫摩尔，5.02当量)。将所得混合物在氮气保护下加热至80℃并搅拌3小时。将反应混合物冷却至25℃，用EtOAc和H2O稀释，并通过垫硅藻土过滤。分液收集有机相并用硫酸钠干燥，减压浓缩得到2,2,2-三氟-1-(6-氨基-1,2,3,4-四氢-1,4-桥亚胺萘-9-基)乙酮(2.7克，10.5毫摩尔，86.2％产率)，其不需要进一步纯化直接用于下一步反应。
步骤H：将溶有2,2,2-三氟-1-(6-氨基-1,2,3,4-四氢-1,4-桥亚胺萘-9-基)乙酮(2.7克，10.5毫摩尔，1.0当量)，双联频哪醇硼酸酯(2.68克，10.5毫摩尔，1.0当量)，BPO(76毫克，316微摩尔，0.03当量)和亚硝酸叔丁酯(1.63克，15.8毫摩尔，1.5当量)的MeCN(15.0毫升)溶液在25℃下搅拌16小时。将混合物减压浓缩，粗残留物通过柱层析纯化(石油醚：乙酸乙酯＝40：1～5：1)，得到2,2,2-三氟-1-(6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊环-2-基)-1,2,3,4-四氢-1,4-桥亚胺萘-9-基)乙酮(2.2克，6.0毫摩尔， 56.9％产率)，为黄色油状物。
步骤I：将加有N-乙基-4-碘-5-(5-异丙基-2,4-二甲氧基-苯基)-异恶唑-3-甲酰胺(500毫克，1.13毫摩尔，1.00当量)，2,2,2-三氟-1-(6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊环-2-基)-1,2,3,4-四氢-1,4-桥亚胺萘-9-基)乙酮(539毫克，1.47毫摩尔，1.3当量)，Pd(PPh3)2Cl2(158毫克，225.1微摩尔，0.20当量)和NaHCO3(283毫克，3.38毫摩尔，3.0当量)的THF(5.00毫升)溶液置换为氮气氛围，然后微波加热至120℃并反应30分钟。将反应混合物倒入水(15毫升)中。混合物用乙酸乙酯(10mL×2)萃取。将合并的有机相用饱和盐水(15mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤后真空浓缩得到残余物。将其经硅胶色谱纯化(石油醚/乙酸乙酯＝50/1～5/1)，得到N-乙基5-(5-异丙基-2,4-二甲氧基-苯基)-4-(9-(2,2,2-三氟乙酰基)-1,2,3,4-四氢-1,4-桥亚胺萘-6-基)异恶唑-3-甲酰胺(500毫克，807微摩尔，71.4％产率，90％纯度)。
步骤J：在30℃下，向N-乙基5-(5-异丙基-2,4-二甲氧基-苯基)-4-(9-(2,2,2-三氟乙酰基)-1,2,3,4-四氢-1,4-桥亚胺萘-6-基)异恶唑-3-甲酰胺(500毫克，762.3微摩尔，1.0当量)在MeOH(4.2毫升)和H2O(1.8毫升)的混合溶液中加入K2CO3(526毫克，3.8毫摩尔，5.0当量)。反应液在30℃下搅拌18小时后倾入水(10毫升)中，水相用EA(10mL×3)萃取。将合并的有机相用饱和盐水(10mL×2)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。将残余物用薄层层析板(DCM/甲醇＝15：1)纯化，得到N-乙基-5-(5-异丙基-2,4-二甲氧基-苯基)-4-(1,2,3,4-四氢-1,4-桥亚胺萘-6-基)异恶唑-3-甲酰胺(220毫克，476.7微摩尔，62.5％产率)，为白色固体。
步骤K：在-78℃下，向N-乙基-5-(5-异丙基-2,4-二甲氧基-苯基)-4-(1,2,3,4-四氢-1,4-桥亚胺萘-6-基)异恶唑-3-甲酰胺(50毫克，108.3微摩尔，1.0当量)的无水DCM(2.0mL)溶液中缓慢滴入BBr3(271毫克，1.08毫摩尔，10.00当量)。加完后，将溶液升温至30℃并搅拌18小时。将溶液冷却至-78℃，并加入MeOH(1毫升)，然后再加入饱和NaHCO3(3毫升)水溶液，并将混合物在30℃下搅拌5分钟。将混合物用DCM(10mL×3)萃取，有机层合并，用盐水(10mL×2)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到残余物。残余物采用高效液相色谱法(甲酸体系)纯化，得到5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(1,2,3,4-四氢-1,4-桥亚胺萘-6-基)异恶唑-3-甲酰胺(30毫克，69.2微摩尔，63.9％产率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.83(t,J＝5.4Hz,1H),8.31(brs,1H),7.25-7.14(m,2H),7.01(d,J＝7.0Hz,1H),6.71(s,1H),6.45(s,1H),4.72-4.57(m,2H),3.28-3.17(m,2H),3.03-2.90(m,1H),1.95(brs,2H),1.18-1.04(m,5H),0.91(t,J＝6.0Hz,6H).
实施例5
5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(9-甲基-1,2,3,4-四氢-1,4-桥亚胺萘-6-基)异恶唑-3-甲酰胺
反应流程：
步骤A：向N-乙基-5-(5-异丙基-2,4-二甲氧基-苯基)-4-(1,2,3,4-四氢-1,4-桥亚胺萘-6-基)异恶唑-3-甲酰胺(20毫克，43.3微摩尔，1.0当量)的1,2-二氯乙烷(3mL)溶液中加入多聚甲醛(39毫克，433.3微摩尔，10.00当量)，乙酸(1.3毫克，21.7微摩尔，0.50当量)，四异丙基氧钛(6.2毫克，21.7微摩尔，0.50当量)。将混合液在30℃下搅拌18小时后加入NaBH3CN(8.2毫克，130微摩尔，3.00当量)，并将该混合物再搅拌2小时。向反应液加入水(10毫升)，并过滤，滤液用DCM(10mLx3)萃取。将有机层合并，用盐水洗涤(5mLx2)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩，得到N-乙基-5-(5-异丙基-2,4-二甲氧基苯基)-4-(9-甲基-1,2,3,4-四氢-1,4-桥亚胺萘-6-基)异恶唑-3-甲酰胺(20毫克，42.1微摩尔，97.1％产率)，为黄色油状物。
步骤B:在-78℃下，向N-乙基-5-(5-异丙基-2,4-二甲氧基苯基)-4-(9-甲基-1,2,3,4-四氢-1,4-桥亚胺萘-6-基)异恶唑-3-甲酰胺(30毫克，63.1微摩尔，1.0当量)的无水DCM(2mL)中缓慢滴入BBr3(158毫克，630.8微摩尔，10当量)。加完后，将溶液升温至30℃并搅拌18小时。将溶液冷却至-78℃，并缓慢加入MeOH(1毫升)，然后加入饱和NaHCO3(3毫升)水溶液，并将该混合物在30℃下搅拌5分钟。将混合物用DCM(10mLx3)萃取，将有机层合并，用盐水(10mLx2)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。得到的残余物通过制备型HPLC纯化，得到5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(9-甲基-1,2,3,4-四氢-1,4-桥亚胺萘-6-基)异恶唑-3-甲酰胺(10毫克，22.3微摩尔，35.4％产率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.79(t，J＝5.5Hz,1H),7.22-7.12(m,2H),6.99(d,J＝7.3Hz,1H),6.68(s,1H),6.46(s,1H),4.04(d,J＝19.8Hz,2H),3.27-3.16(m,2H),3.01-2.89(m,1H),2.05-1.80(m,5H),1.10-0.97(m,6H),0.89(d,J＝6.8Hz,6H).
实施例6
5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(9-乙基-1,2,3,4-四氢-1,4-桥亚胺萘-6-基)异恶唑-3-甲酰胺
步骤A：根据实施例5步骤A和B的顺序制备本实施例标题化合物，其中在步骤A中将多聚甲醛替换为乙醛。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.80(t,J＝5.5Hz,1H),8.24(brs,1H),7.23-7.11(m,2H),6.98(d,J＝7.5Hz,1H),6.67(s,1H),6.46(s,1H),4.22(d,J＝19.8Hz,2H),3.25-3.15(m,2H),2.95(td,J＝6.8,13.7Hz,1H),2.17-1.86(m,4H),1.06(t,J＝7.2Hz,5H),0.95-0.84(m,9H).
实施例7
5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(9-异丙基-1,2,3,4-四氢-1,4-氨基萘-6-基)异恶唑-3-甲酰胺
步骤A：根据实施例5步骤A和B的顺序制备本实施例标题化合物，其中在步骤A中将多聚甲醛替换为丙酮。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.80(t,J＝5.5Hz,1H),8.21(s,1H),7.23-7.11(m,2H),6.98(d,J＝7.3Hz,1H),6.66(s,1H),6.45(s,1H),4.40(d,J＝16.6Hz,2H),3.22(q,J＝6.7Hz,2H),2.95(td,J＝6.9,13.6Hz,1H),1.98(brs,3H),1.06(t,J＝7.2Hz,5H),0.96-0.79(m,12H).
实施例8
5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(9-异丁基-1,2,3,4-四氢-1,4-氨基萘-6-基)异恶唑-3-甲酰胺
步骤A：根据实施例5步骤A和B的顺序制备本实施例标题化合物，其中在步骤A中将多聚甲醛替换为异丁醛。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.78(t,J＝5.5Hz,1H),7.19-7.10(m,2H),6.96(d,J＝7.3Hz,1H),6.65(s,1H),6.46(s,1H),4.18-4.04(m,2H),3.26-3.17(m,3H),3.01-2.88(m,1H),1.96(brs,2H),1.83(d,J＝7.0Hz,2H),1.53(td,J＝6.7,13.3Hz,1H),1.09-0.95(m,5H),0.87(d,J＝6.0Hz,6H),0.80(dd,J＝1.8,6.3Hz,6H).
实施例9
5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(5-甲基-4,5,6,7-四氢噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基)异恶唑-3-甲酰胺
反应流程：
步骤A：向4,5,6,7-四氢噻吩并[3,2-c]吡啶(10.0克，71.8毫摩尔，1.0当量)的DCM溶液(120.0mL)中加入分子筛(10.00克)，四异丙基氧钛(1.02克，3.59毫摩尔，0.05当量)和AcOH(215.67毫克，3.59毫摩尔，0.05当量)。将混合物在25℃下搅拌16小时，然后加入NaBH3CN(9.03克，143.66毫摩尔，2.00当量)，并在25℃下继续搅拌3小时。将混合物倾入水(300毫升)中，用EA萃取(100mL×2)，合并的有机层经无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，残余物通过硅胶色谱法纯化(DCM/甲醇＝50/1～10/1)，得到5-甲基-4,5,6,7-四氢噻吩并[3,2-c]吡啶(2.50克，16.31毫摩尔，22.71％产率)，为黄色油状物。
步骤B：在0℃下，向溶有5-甲基-4,5,6,7-四氢噻吩并[3,2-c]吡啶(2.00克，13.05毫摩尔，1.0当量)的AcOH(20.00毫升)和水(20.00毫升)混合溶液中加入Br2(1.88克，11.75毫摩尔，0.90当量)。混合物在0℃下搅拌1小时后倾入水(100mL)中，并用NaOH(10N)碱化至pH＝8～9，然后用EA萃取(100mL×2)。合并的有机层浓缩，得到2-溴-5-甲基-4,5,6,7-四氢噻吩并[3,2-c]吡啶(2.70克，11.6毫摩尔，89.1％产率)，直接用于下一步骤。
步骤C：氮气保护下，向溶有N-乙基-4-碘-5-(5-异丙基-2,4-二甲氧基-苯基)异恶唑-3-甲酰胺(900毫克，2.03毫摩尔，1.00当量)的二氧六环溶液(20.00毫升)中加入Pd(PPh3)2Cl2(142.5毫克，203.0 微摩尔，0.10当量)，TEA(616毫克，6.1毫摩尔，3.0当量)和4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊烷(779毫克，6.1毫摩尔，3.0当量)。将混合物在80℃搅拌16小时。冷却后将混合物倾入水(60毫升)中，用EA萃取(60毫升×2)，合并有机层。浓缩有机层，得到N-乙基-5-(5-异丙基-2,4-二甲氧基-苯基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊环-2-基)异恶唑-3-甲酰胺(1.0克，粗品)，为黑褐色油状物，直接用于下一步。
步骤D：氮气保护下，向N-乙基-5-(5-异丙基-2,4-二甲氧基-苯基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)异恶唑-3-甲酰胺(500毫克，1.13毫摩尔，1.00当量)和2-溴-5-甲基-4,5,6,7-四氢噻吩并[3,2-c]吡啶(268毫克，1.13毫摩尔,1.00当量)的二氧六环(10.00毫升)和水(2.00毫升)混合溶液中加入Pd(dppf)Cl2.CH2Cl2(91.9毫克，112.5微摩尔，0.10当量)和K2CO3(466毫克，3.4毫摩尔，3.00当量)。将混合物在80℃搅拌16小时。混合物冷却后倾入水(80毫升)中，用EA萃取(80毫升×2)。合并有机层，并浓缩。残余物通过硅胶色谱(PE/EA＝1/1～0/1)纯化。获得N-乙基-5-(5-异丙基-2,4-二甲氧基-苯基)-4-(5-甲基-4,5,6,7-四氢噻吩并[3,2-c]吡啶吡啶-2-基)异恶唑-3-甲酰胺(430毫克，915.7微摩尔，81.0％产率)，为黑色棕色固体。
步骤E：在-78℃下，向溶有N-乙基-5-(5-异丙基-2,4-二甲氧基-苯基)-4-(5-甲基-4,5,6,7-四氢噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基)异恶唑-3-甲酰胺(560毫克，1.19毫摩尔，1.00当量)的DCM(15毫升)溶液中缓慢加入BBr3(1.49克，5.96毫摩尔，5.0当量)。将混合物在25℃下搅拌16小时，加入MeOH(20mL)并浓缩混合物。将残余物通过制备型HPLC(甲酸体系)纯化。获得产物5-(2,4-二羟基-5-异丙基-苯基)-N-乙基-4-(5-甲基-4,5,6,7-四氢噻吩并[3,2-c]吡啶-2-基)异恶唑-3-甲酰胺(243毫克，550.3微摩尔，46.1％产率)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.73(m,2H),8.91(t,J＝2.0Hz,1H),8.15(s,1H),6.91(s,1H),6.80(s,1H),6.45(s,1H),3.27-3.24(m,2H),3.07-3.04(m,1H),2.72-2.70(m,2H),2.65-2.63(m,2H),2.34(s,3H),1.16-1.04(s,9H).
实施例10
5-(2,4-二羟基-5-异丙基-苯基)-N-乙基-4-(5-甲基-4,5,6,7-四氢噻唑并[4,5-c]吡啶-2-基)异恶唑 -3-甲酰胺
反应流程：
步骤A：向4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯(10.0克，50.2毫摩尔，1.0当量)的DMF溶液(100.00毫升)中，加入TEA(10.2克，100.4毫摩尔，2.0当量)。随后在20℃下将TMSCl(6.27克，57.7毫摩尔，1.15当量)滴加到溶液中，并换气为氮气氛围。将混合物在80℃搅拌16小时后，加入300毫升饱和NaHCO3水溶液。该混合物由EA(150毫升×3)萃取，合并的有机相用无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩，得到粗品。该粗产物通过硅胶柱色谱法纯化，得到4-三甲基甲硅烷基-3,6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(9.2克，67％收率)，为无色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ4.77(brs,1H),3.85(brs,2H),3.5(t,J＝5.6Hz,2H),2.08(brs,2H),1.45(s,9H),0.17(s,9H).
步骤B：在0℃下，向4-三甲基甲硅烷基-3,6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(13.9克，51.2毫摩尔，1.0当量)的THF(150毫升)和水(150毫升)混合溶液中加入NaOAc(420毫克，5.1毫摩尔，0.1当量)和NBS(13.67克，76.8毫摩尔，1.5当量)。将混合物在20℃下搅拌12小时。用100mL饱和硫代硫酸钠水溶液淬灭反应，然后用200mL饱和NaHCO3水溶液洗涤中和。混合物用EA(2×500毫升)萃 取，将合并的有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到粗品。粗品通过硅胶柱色谱法纯化，得到产物3-溴-4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯(7克，49％收率)，为白色固体。1HNMR(400MHz,CDCl3):δ4.28-4.31(m,1H),3.96(m,2H),3.57-3.77(m,2H),2.97-3.00(m,1H),2.40-2.46(m,1H),1.48(s,9H).
步骤C：向3-溴-4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯(7.0克，25.2毫摩尔，1.0当量)的DMF(70毫升)溶液中加入TEA(7.64克，75.5毫摩尔，3.0当量)和硫脲(2.11克，27.7毫摩尔，1.1当量)。将该混合物在110℃下搅拌12小时后倒入300毫升水中，并过滤固体。固体用100mL水洗涤获得4.5克红色粗品2-氨基-4,5,6,7-四氢噻唑并[4,5-c]吡啶-5-甲酸叔丁酯。将粗产物直接用于下一步骤。MS(ESI)m/z:256.0(M+1).
步骤D：在0℃下，向2-氨基-4,5,6,7-四氢噻唑并[4,5-c]吡啶-5-甲酸叔丁酯(4.70克，18.4毫摩尔，1.0当量)的CH3CN溶液(50毫升)中加入的CuBr2(4.52克，20.3毫摩尔，1.1当量)和亚硝酸叔丁酯(2.09克，20.3毫摩尔，1.1当量)。将混合物在0℃搅拌1小时，加入3毫升0.5摩尔/L的HCl溶液淬灭，然后加入50毫升饱和NaHCO3水溶液中和。将混合物过滤，滤液由EA(50毫升×2)萃取，通过无水硫酸钠干燥并真空浓缩，得到粗品。将粗产物通过硅胶柱色谱法(PE：EA＝5:1)纯化，得到2-溴-4,5,6,7-四氢噻唑并[4,5-c]吡啶-5-羧酸叔丁酯(1.7克，29％收率)，为白色固体产物。MS(ESI)m/z：318.9，320.9(M+1,M+3)。
步骤E：将2-溴-4,5,6,7-四氢噻唑并[4,5-c]吡啶-5-羧酸叔丁酯(1.70克，5.33毫摩尔，1.00当量)加入盐酸乙酸乙酯(4N,30毫升)中，混合物在20℃搅拌2小时。将混合物真空浓缩得到1.35克2-溴-4,5,6,7-四氢噻唑并[4,5-c]吡啶粗品，为白色固体产物，直接用于下一步。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.88(brs,2H),4.31(s,2H),3.39-3.41(m,2H),2.99(t,J＝6.0Hz,2H).
步骤F：向2-溴-4,5,6,7-四氢噻唑并[4,5-c]吡啶(550.00毫克，2.15毫摩尔，1.00当量)的MeOH溶液(10.00毫升)中加入甲醛(194毫克，6.46毫摩尔，3.00当量)和AcOH(258毫克，4.3毫摩尔，2.0当量)。将混合物在20℃搅拌1小时，然后加入NaBH3CN(406毫克，6.5毫摩尔，3.0当量)，并将该混合物在20℃继续搅拌4小时。将反应物用0.5摩尔/L的HCl溶液(2mL)淬灭，再加入饱和NaHCO3(20mL)进行中和。然后将混合物用EA(20毫升×2)萃取，合并的有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到2-溴-5-甲基-4,5,6,7-四氢噻唑并〔4,5-c]吡啶(490毫克，97％收率)，为白色固体的产物。MS(ESI)m/z：232.8，234.8(M+1，M+3)。
步骤G：在氮气保护下，向5-(2,4-二苄氧基-5-异丙基-苯基)-N-乙基-4-碘-异恶唑-3-甲酰胺(1.00克，1.68毫摩尔，1.0当量)的1,4-二氧六环(15毫升)溶液中加入TEA(510毫克，5.04毫摩尔，3.0当量)和Pd(PPh3)2Cl2(117.9毫克，168.00微摩尔，0.1当量)。最后加入4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊环(1.08克，8.4毫摩尔，5.0当量)溶液，并将混合物在90℃下搅拌12小时。将反应混合物用EA(20mL)稀释，并通过硅藻土过滤。将滤液用30毫升水洗涤，有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得 到5-(2,4-二苄氧基-5-异丙基-苯基)-N-乙基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)异恶唑-3-甲酰胺(1.7克，LCMS 60％纯度)，为橙色胶状的粗产物，粗产物直接用于下一步反应。MS(ESI)m/z：597.3(M+1)。
步骤H：向5-(2,4-二苄氧基-5-异丙基-苯基)-N-乙基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)异恶唑-3-甲酰胺(800毫克，1.34毫摩尔，1.0当量)的1,4-二氧六环(20毫升)和水(4毫升)混合溶液中加入2-溴-5-甲基-4,5,6,7-四氢噻唑并〔4,5-c]吡啶(313毫克，1.34毫摩尔，1.0当量)和K2CO3(371毫克，2.7毫摩尔，2.0当量)。该混合物置换为氮气氛围，然后加入Pd(dppf)Cl2(196毫克，268.2微摩尔，0.2当量)。将混合物在95℃下搅拌8小时，用20毫升EA稀释反应物，通过硅藻土过滤。将滤液用EA(20毫升×2)萃取，合并的有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到粗品。该粗产物通过硅胶柱色谱纯化(DCM：甲醇＝20：1)，得到5-(2,4-二苄氧基-5-异丙基-苯基)-N-乙基-4-(5-甲基-4,5,6,7-四氢噻唑并[4,5-c]吡啶-2-基)异恶唑-3-甲酰胺(60毫克，7.2％收率)，为白色固体产物。MS(ESI)m/z：623.3(M+1)。
步骤I：在0℃下，向5-(2,4-二苄氧基-5-异丙基-苯基)-N-二乙基-4-(5-甲基-4,5,6,7-四氢噻唑并[4,5-c]吡啶-2-基)异恶唑-3-甲酰胺(60毫克，96.3微摩尔，1.0当量)的DCM(2毫升)溶液中加入BCl3(34毫克，289微摩尔，3.0当量)。将混合物在0℃搅拌1小时后，加入2mL的MeOH淬灭，并将该混合物倾入5毫升饱和NaHCO3水溶液。然后将混合物通过萃取DCM(5毫升x3)，将合并的有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到粗品。粗产物通过制备型HPLC(formic acid,Column:Welch Ultimate AQ-C18 150*30mm*5um,Condition:0.225％FA-ACN,FlowRate:25)纯化，得到5-(2,4-二羟基-5-异丙基-苯基)-N-乙基-4-(5-甲基-4,5,6,7-四氢噻唑并[4,5-c]吡啶-2-基)异恶唑-3-甲酰胺(17毫克，34％收率)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.93(brs,2H),9.09(brs,1H),7.07(s,1H),6.47(s,1H),3.54(s,2H),3.26(m,2H),3.07(m,1H),2.71(brs,4H),2.35(s,3H),1.07-1.12(m,9H).
实施例11
5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(6-甲基-5,6,7,8-四氢-1,6-萘啶-2-基)异恶唑-3-甲酰胺
反应流程：
步骤A：向N-乙基-5-(5-异丙基-2,4-二甲氧基-苯基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊环-2-基)异恶唑-3-甲酰胺(700毫克，1.58毫摩尔，1.0当量)和6-苄基-2-氯-5,6,7,8-四氢-1,6-二氮杂萘(409毫克，1.58毫摩尔，1.0当量)的二氧六环(3毫升)和水(500微升)混合溶液中加入Pd(dppf)Cl2(115毫克，157.5微摩尔，0.1当量)和K2CO3(435毫克，3.2毫摩尔，2.0当量)。将混合物在80℃下搅拌16小时后，混合物倾入水(80毫升)中，用EA萃取(60毫升×2)。合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤和浓缩，得到的粗品用硅胶色谱(PE/EA＝1:1～EA)纯化，得到4-(6-苄基-5,6,7,8-四氢-1,6-二氮杂萘-2-基)-N-乙基-5-(5-异丙基-2,4-二甲氧基-苯基)-异恶唑-3-甲酰胺(250毫克，462.4微摩尔，29.3％产率)，为黄色固体。
步骤B：室温下，向4-(6-苄基-5,6,7,8-四氢-1,6-二氮杂萘-2-基)-N-乙基-5-(5-异丙基-2,4-二甲氧基-苯基)-异恶唑-3-甲酰胺(250毫克，462.4微摩尔，1.00当量)的甲苯(8毫升)溶液中加入1-氯乙基碳酰氯(264毫克，1.85毫摩尔，4.0当量)，然后将混合物在110℃下搅拌8小时。将混合物浓缩，残余物溶解于MeOH(8毫升)中，并将该混合物加热至80℃并搅拌12小时。浓缩混合物，得到粗产物N-乙基-5-(5-异丙基-2,4-二甲氧基-苯基)-4-(5,6,7,8-四氢-1,6-二氮杂萘-2-基)异恶唑-3-甲酰胺(200.00毫克，粗品)，为黄色固体，直接用于下一步。
步骤C：向N-乙基-5-(5-异丙基-2,4-二甲氧基-苯基)-4-(5,6,7,8-四氢-1,6-二氮杂萘-2-基)异恶唑-3-甲酰胺(200毫克，443.9微摩尔，1.0当量)的DCE(8毫升)溶液中加入多聚甲醛(200毫克，2.2毫摩尔，5.0当量)，四异丙基氧钛(126毫克，443.9微摩尔，1.0当量)，乙酸(27毫克，444微摩尔，1.0当量)和分子筛(300毫克，444微摩尔，1.0当量)。将混合物在25℃下搅拌8小时，然后加入NaBH3CN(56毫克，887.8微摩尔，2.0当量)。将该混合物在25℃下再搅拌12小时。混合物过滤，浓 缩滤液，粗产物用薄层层析板(DCM/MeOH＝10:1)纯化，得到N-乙基-5-(5-异丙基-2,4-二甲氧基-苯基)-4-(6-甲基-7,8-二氢-5H-1,6-二氮杂萘-2-基)异恶唑-3-甲酰胺(120毫克，258.3微摩尔，58.2％产率)，为黄色固体。
步骤D：在0℃下，向N-乙基-5-(5-异丙基-2,4-二甲氧基-苯基)-4-(6-甲基-5,6,7,8-四氢-1,6-二氮杂萘-2-基)异恶唑-3-甲酰胺(60毫克，129.2微摩尔，1.0当量)的DCM(8毫升)溶液中缓慢加入BBr3(323.6毫克，1.3毫摩尔，10.0当量)。将混合物在25℃下搅拌16小时，混合物缓慢加入MeOH(15mL)，然后将混合物浓缩。粗品通过制备型HPLC(Phenomenex Synergi Max-RP 250*80 10u,0.225％FA-ACN)纯化，得到5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(6-甲基-5,6,7,8-四氢-1,6-萘啶-2-基)异恶唑-3-甲酰胺(3.1毫克，6.4微摩尔，5.0％产率)。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.99-8.95(m,1H),8.24(s,1H),7.44(d,J＝8.1Hz,1H),7.03(d,J＝7.8Hz,1H),6.98(s,1H),6.43(s,1H),3.26-3.19(m,4H),3.09-3.05(m,1H),2.84-2.81(m,2H),2.72-2.68(m,2H),2.35(s,3H),1.13-1.03(m,9H).
实施例12
3-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-5-甲酰胺
反应流程：
步骤A：在0℃下，将POCl3(6.25克，40.8毫摩尔，1.5当量)加入到DMF(60毫升)中，并在0℃搅拌10分钟。然后在0℃下加入2,4-二苄氧基-1-异丙基苯(9.0克，27.1毫摩尔，1.0当量)，加完后继续在0℃下搅拌10分钟。升温至15-25℃，搅拌10分钟后，再升至100℃下搅拌2.5小时。将反应混合物冷却到15-25℃，倒入冰水(120毫升)中，并加入10％的NaOAc水溶液调节pH＝6中并用EA萃取(120毫升×3)。将合并的有机层干燥，过滤并浓缩，得到2,4-二苄氧基-5-异丙基-苯甲醛(9.70克，粗品)，为黄色固体，直接用于下一步。
步骤B：在15～25℃下，向溶有2,4-二苄基-5-异丙基-苯甲醛(9.5克，26.4毫摩尔，1.0当量)的EtOH(100毫升)溶液中加入NH2OH·HCl(3.66克，52.7毫摩尔，2.0当量)，随后加入DIEA(5.11克，39.5毫摩尔，1.5当量)，并升温至80℃下搅拌16小时。将反应混合物冷却到15-25℃，并真空浓缩，得到残余物。将残余物溶解于EA(80mL)中，并用水(80毫升)洗涤。有机层干燥，过滤并浓缩，得到粗品。将粗品通过硅胶色谱纯化(PE：EA＝10：1至5：1)。得到(1E)-2,4-二苄基-5-异丙基-苯甲醛肟(7.00克，18.6毫摩尔，70.7％产率)，为黄色固体。
步骤C：在0-5℃下，向(1E)-2,4-二苄基-5-异丙基-苯甲醛肟(3.00克，7.99毫摩尔，1.0当量)的DCM(30.00毫升)溶液中加入NCS(1.28克，9.59毫摩尔，1.2当量)，并在0℃-5℃下搅拌2小时，后在15-25℃下继续搅拌16小时。将反应混合物浓缩，得到2,4-二苄氧基-N-羟基-5-异丙基苯并亚氨酰氯(4.0克，粗品)，为黄色油状物。将粗产物直接用于下一步骤。
步骤D：在15-25℃下，向2,4-二苄氧基-N-羟基-5-异丙基苯并亚氨酰氯(1.64克，4.00毫摩尔，1.0当 量)的甲苯(15.00毫升)溶液中加入丙-2-炔酸乙酯(588.60毫克，6.00毫摩尔，1.50当量)，随后在15-25℃下0.5小时内逐滴加入TEA(445.24毫克，4.40毫摩尔，1.10当量)。加完后在15-25℃下搅拌0.5小时，再在80℃下搅拌3小时。将反应混合物冷却到15-25℃，倒入水(20毫升)中并用EA萃取(20毫升×2)。将合并的有机层干燥，过滤并浓缩，得到粗品。将粗品通过硅胶色谱纯化(PE：EA＝20：1～5：1)。得到3-(2,4-二苄氧基-5-异丙基-苯基)异恶唑-5-羧酸乙酯(1.20克，粗品)，为黄色固体。
步骤E：在15-25℃下，向溶有3-(2,4-二苄氧基-5-异丙基-苯基)异恶唑-5-羧酸乙酯(600毫克，1.27毫摩尔，1.00当量)的EtOH(10.00毫升)溶液中加入乙胺(573.6毫克，12.7毫摩尔，10.0当量)，并在80℃下搅拌16小时。将反应混合物冷却到15-25℃，并浓缩，得到粗品。将粗品通过硅胶色谱纯化(PE：EA＝10：1～3：1)。得到3-(2,4-二苄氧基-5-异丙基-苯基)-N-乙基-异恶唑-5-甲酰胺(150毫克，318.8微摩尔，25.1％产率)，为黄色固体。
步骤F：-78℃下，向3-(2,4-二苄氧基-5-异丙基-苯基)-N-乙基-异恶唑-5-甲酰胺(50毫克，106.3微摩尔，1.0当量)的THF(2毫升)溶液中加入正丁基锂(2M，132微升，2.5当量)，加完后在-78℃下搅拌1小时，随后在-78℃下加入I2(40.5毫克，159.4微摩尔，1.5当量)的THF(1毫升)溶液，继续在-78℃下搅拌1小时。反应液升温至15-25℃下，并搅拌16小时。将反应混合物倒入饱和的NH4Cl(10毫升)水溶液，用EA萃取(10毫升×3)。将合并的有机层干燥，过滤并浓缩，得到粗品。粗品使用制备型TLC(PE：EA＝3：1)纯化，得到3-(2,4-二苄氧基-5-异丙基-苯基)-N-乙基-4-碘-异恶唑-5-甲酰胺(15毫克，25.2微摩尔，23.7％产率)，为黄色固体。MS(ESI)M/Z：597(M+1)。
步骤G：在15-25℃氮气保护下，向3-(2,4-二苄氧基-5-异丙基-苯基)-N-乙基-4-碘-异恶唑-5-甲酰胺(15毫克，25.15微摩尔，1.00当量)的DMF(2.5毫升)溶液中加入2-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-1,2,3,4-四氢异喹啉(13.7毫克，50.3微摩尔，2.00当量)，水(500.00UL)，碳酸氢钠(6.34毫克，75.5微摩尔，3.0当量)，随后加入Pd(PPh3)2Cl2(3.5毫克，5.0微摩尔，0.2当量)。混合物在80℃下搅拌16小时。将反应混合物冷却到15-25℃，倒入水(10毫升)中并用EA萃取(10毫升×3)。将合并的有机层干燥，过滤并浓缩，得到粗品。使粗品通过制备型TLC(DCM：甲醇＝15：1)纯化。得到3-(2,4-二苄氧基-5-异丙基-苯基)-N-乙基-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-5-甲酰胺(10.00毫克，16.24微摩尔，64.57％产率)，为黄色固体。(ESI)M/Z：616(M+1)。
步骤H：在0℃下，向3-(2,4-二苄氧基-5-异丙基-苯基)-N-乙基-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-5-甲酰胺(10毫克，16.2微摩尔，1.0当量)的DCM(1毫升)溶液中加入BCl3(1M，324.8微升，20.0当量)的DCM溶液，在0℃下搅拌2小时后，升温至15-25℃下搅拌1小时。将反应混合物冷却至0℃，加入MeOH(2mL)，并在0℃下搅拌0.5小时，15-25℃下再搅拌0.5小时。将混合物浓缩，得到粗品。粗品通过制备型HPLC(0.225％FA-ACN；Phenomenex Synergi Max-RP 250*80 10u)纯 化，得到3-(2,4-二羟基-5-异丙基-苯基)-N-乙基-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-5-甲酰胺(3.5毫克，8.0微摩尔，49.5％产率)。1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.87(t,J＝5.6Hz,1H),7.00-6.98(m,1H),6.95-6.90(m,2H),6.79(s,1H),6.33(s,1H),3.26-3.19(m,2H),3.06-2.98(m,1H),2.69-2.66(m,2H),2.55-2.50(m,4H),2.31(s,3H),1.07(t,J＝7.2Hz,3H),1.01(d,J＝6.8Hz,6H).MS(ESI)m/z:436(M+1).
实施例13
5-(2,4-二羟基-5-异丙基-苯基)-N-乙基-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异噻唑-3-甲酰胺
反应流程：
步骤A：在0℃下，向1-异丙基-2,4-二甲氧基-苯(2.0克，11.1毫摩尔，1.0当量)的DCM(40毫升)溶液中加入NBS(2.21克，12.42毫摩尔，1.12当量)。将混合物在0℃搅拌3小时，然后在25℃下搅拌1小时。将混合物浓缩并将残余物通过柱层析纯化(PE/EA＝10/1)，得到1-溴-5-异丙基-2,4-二甲氧基-苯(2.77克，10.69毫摩尔，96.30％产率)，为黄色固体。
步骤B：在-78℃下，向1-溴-5-异丙基-2,4-二甲氧基-苯(2.77克，10.69毫摩尔，1.0当量)的无水THF(100mL)溶液中加入n-BuLi(2.5M，6.00毫升，1.40当量)。将混合物在-78℃搅拌1小时。然后缓慢加入溶有硼酸三异丙酯(6.03克，32.07毫摩尔，3.0当量)的无水THF(10mL)溶液，温度保持在-78℃。加入后，将反应物在25℃下搅拌4小时。将混合物倒入冰水中，用1N盐酸调节pH至3～4。将所得混合物用EA萃取三次，将合并的有机层用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并浓缩。残余物由PE中重结晶，得到目标产物(5-异丙基-2,4-二甲氧基-苯基)-硼酸(1.60克，7.14毫摩尔，66.8％产率)，为白色固体。MS(ESI)m/z:225.2(M+H)。
步骤C：将3-甲基异喹啉-5-胺盐酸盐(8.00克，53.11毫摩尔，1.00当量)加入EA中(100毫升)，用10％的碳酸钠水溶液洗涤。将有机相干燥并浓缩，得到游离碱，将其溶解于磷酸(20毫升)中，并冷却至0℃。混合液逐滴加入硝酸(10毫升)，接着滴加亚硝酸钠的饱和水溶液(4.17克，60.4毫摩尔，1.14当量)，期间温度保持在0～5℃。将反应混合物在10℃下搅拌30分钟，然后滴加到溶有溴化亚铜(9.50克，66.2毫摩尔，1.25当量)的48％HBr水溶液(100毫升)，并将所得的混合物在室温下搅拌2小时。用4N的NaOH水溶液和水(200毫升)调整反应液pH至6～7。水相用MTBE萃取，将有机层经无水硫酸钠干燥并浓缩，得到5-溴-3-甲基异噻唑(8.0克，粗品)，直接用于下一步。
步骤D：将5-溴-3-甲基异噻唑(8.0克，44.9毫摩尔，1.0当量)，NBS(16.0克，89.9毫摩尔，2.0当量)和AIBN(1.40克，8.53毫摩尔，0.19当量)的DCE(150毫升)混合物加热至90℃，并置于150W卤灯照射下，搅拌48小时。该混合物用饱和NaHSO3水溶液洗涤，并用DCM萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并浓缩。残余物通过柱层析(PE/DCM＝100/0～1/2)纯化，得到目标产物5-溴-3-(溴甲基)异噻唑(4.60克，17.9毫摩尔，39.8％产率)。
步骤E：将5-溴-3-(溴甲基)异噻唑(4.10克，15.96毫摩尔，1.0当量)和碳酸钠(1.92克，18.11毫摩尔，1.14当量)的水(90毫升)混合物加热至回流，然后分多个小批次加入高锰酸钾(3.28g，20.76毫摩尔，1.3当量)。将反应混合物在回流下搅拌1小时，冷却后过滤。将滤液用1N HCl酸化，用EA萃取三次。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥并浓缩，得到5-溴异噻唑-3-羧酸(1.26克，6.06毫摩尔，38.0％产率)，为白色固体。
步骤F：向5-溴异噻唑-3-羧酸(1.26克，6.06毫摩尔，1.0当量)的MeOH(50毫升)溶液中加入硫酸(0.5mL)。将反应混合物在65℃下回流16小时。将混合物冷却至室温，并用饱和NaHCO3水溶液淬灭，然后将水层用EA萃取。有机层经无水硫酸钠干燥并浓缩，得到5-溴异噻唑-3-羧酸甲酯(1.30克， 5.85毫摩尔，96.6％产率)，为黄色油状物。
步骤G：将5-溴异噻唑-3-羧酸甲酯(1.00克，4.50毫摩尔)，(5-异丙基-2,4-二甲氧基-苯基)-硼酸(1.20克，5.36毫摩尔，1.19当量)，Pd(dppf)Cl2(340.00毫克，464.67微摩尔，0.10当量)和K2CO3(1.29克，9.33毫摩尔，2.07当量)加入DME(30mL)和水(0.12毫升)的混合溶液中。反应液在100℃氮气气氛中搅拌16小时。将混合物通过硅藻土过滤并将滤液浓缩。残余物通过柱层析(PE/EA＝6/1～3/1)纯化，得到目标产物5-(5-异丙基-2,4-二甲氧基-苯基)异噻唑-3-羧酸甲酯(1.10克，3.42毫摩尔，76.1％产率)，为白色固体。MS(ESI)m/z:322.1(M+H)
步骤H：将5-(5-异丙基-2,4-二甲氧基-苯基)-异噻唑-3-羧酸甲酯(300毫克，933微摩尔，1.0当量)，NIS(24毫克，1.07毫摩尔，1.14当量)和CAN(55毫克，100.3微摩尔，0.11当量)加入MeCN(20mL)中。混合物在82℃下搅拌16小时。将混合物浓缩。将残余物溶解在DCM中，用水和盐水洗涤。有机相经无水硫酸钠干燥并浓缩。残余物通过制备型TLC纯化(PE/EA＝3/1)，得到4-碘-5-(5-异丙基-2,4-二甲氧基-苯基)异噻唑-3-羧酸甲酯(300毫克，670.7微摩尔，71.9％产率)，为黄色油状物。MS(ESI)m/z:448.0(M+H)。
步骤I：在氮气保护下，将4-碘-5-(5-异丙基-2,4-二甲氧基苯基)异噻唑-3-羧酸甲酯(120毫克，268.3微摩尔，1.00当量)，2-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-1,2,3,4-四氢异喹啉(100毫克，366.1微摩尔，1.36当量)，Pd(PPh3)2Cl2(30毫克，57微摩尔，0.21当量)和NaHCO3(50毫克，595.2微摩尔，2.22当量)加入二氧六环(10mL)和H2O(1mL)的混合溶液中。混合物在80℃下搅拌16小时。冷却后，将混合物通过硅藻土垫过滤并将滤液浓缩。残余物通过制备型TLC(DCM/甲醇＝20/1)纯化，得到目标产物5-(5-异丙基-2,4-二甲氧基-苯基)-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异噻唑-3-羧酸甲酯(80毫克，171.5微摩尔，63.9％产率)，为黄色固体。MS(ESI)m/z:467.2(M+H)步骤J：将5-(5-异丙基-2,4-二甲氧基-苯基)-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异噻唑-3-羧酸甲酯(80毫克，171.5微摩尔，1.0当量)和乙胺(1毫升，15.3毫摩尔，89当量)加入MeOH(10mL)中。混合物在65℃下搅拌16小时。将混合物真空浓缩，得到目标产物N-乙基-5-(5-异丙基-2,4-二甲氧基-苯基)-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异噻唑-3-甲酰胺(82毫克，171微摩尔，99.7％产率)，为黄色固体。MS(ESI)m/z:480.2(M+H)
步骤K：在-78℃下，向N-乙基-5-(5-异丙基-2,4-二甲氧基-苯基)-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异噻唑-3-甲酰胺(80毫克，166.8微摩尔，1.0当量)的DCM(1mL)溶液中加入BBr3(1毫升，10.4毫摩尔，62当量)。将混合物在25℃下搅拌2小时。向该混合物中加入0.1毫升水和1克的NaHCO3固体，混合物在25℃下搅拌10分钟。将混合物过滤并将残余物用制备型HPLC纯化，得到目标产物5-(2,4-二羟基-5-异丙基-苯基)-N-乙基-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异噻唑-3-甲酰胺(16毫克，35.4微摩尔，21.2％产率)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.20(brs,1H),7.06(d,J＝7.6Hz,1H), 6.94-6.91(m,2H),6.44(s,1H),6.06(brs,1H),3.52(s,2H),3.13-3.07(m,3H),2.82-2.78(m,4H),2.59(brs,2H),2.36(s,3H),1.00(t,J＝7.2Hz,3H),0.67(d,J＝6.8Hz,6H).MS(ESI)m/z:452.2(M+H).
实施例14
5-(2,4-二羟基-5-异丙基-苯基)-N-乙基-4-(2-甲基-1,2,3,3a,4,6a-六氢环戊[c]吡咯-5-基)异恶唑-3-甲酰胺
反应流程：
步骤A：在-78℃下，向5-氧代-1,3,3a,4,6,6a-六氢环戊并[c]吡咯-2-羧酸叔丁酯(226毫克，1.0毫摩尔，1.0当量)的无水THF(20mL)溶液中加入LDA(2M，1.0毫升，2.0当量)。将所得混合物在-78℃下搅拌1小时，继续加入N,N－双(三氟甲磺酰基)苯胺(467毫克，1.2毫摩尔，1.2当量)的无水THF(20毫升)溶液。然后将混合物升温至室温并搅拌16小时。将混合物浓缩至干，残余物溶于DCM中，依次用饱和的NaHCO3水溶液洗涤，经无水MgSO4干燥并浓缩，得到5-(三氟甲基磺酰氧基)-3,3a,6,6-四氢-1H-环戊二烯并[c]吡咯-2-羧酸叔丁酯(360毫克，粗品)，为褐色油状物，直接用于下一步。
步骤B：在氮气保护下，将5-(三氟甲基磺酰氧基)-3,3a,6,6-四氢-1H-环戊二烯并[c]吡咯-2-羧酸叔丁酯(350毫克，979.43微摩尔，1.0当量)，N-乙基-5-(5-异丙基-2,4-二甲氧基-苯基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)异恶唑-3-甲酰胺(440毫克，990.3微摩尔，1.01当量)，Pd(dppf)Cl2(140 毫克，191.3微摩尔，0.2当量)和K2CO3(280毫克，2.03毫摩尔，2.07当量)加入二氧六环(20mL)和水(2mL)的混合溶液。混合物在80℃下搅拌16小时。冷却后，将混合物通过硅藻土过滤并将滤液浓缩。残余物通过柱层析(PE/EA＝5/1～1/1)纯化，得到目标产物5-[3-(乙基氨基甲酰基)-5-(5-异丙基–2,4-二甲氧基-苯基)-异恶唑-4-基]-3,3a,6,6a-四氢-1H-环戊二烯并[c]吡咯-2-羧酸叔丁酯(290毫克，551.7微摩尔，56.3％产率)，为灰白色固体。MS(ESI)m/z:426.2(M-99).
步骤C：向5-[3-(乙基氨基甲酰基)-5-(5-异丙基–2,4-二甲氧基-苯基)-异恶唑-4-基]-3,3a,6,6a-四氢-1H-环戊二烯并[c]吡咯-2-羧酸叔丁酯(290毫克，551.7微摩尔，1.0当量)的EA(10mL)溶液中加入盐酸乙酸乙酯(4N，1mL)。将混合物在25℃下搅拌2小时。浓缩混合物，得到目标产物4-(1,2,3,3a,4,6a-六氢环戊[c]吡咯-5-基)-N-乙基-5-(5-异丙基-2,4-二甲氧基-苯基)-异恶唑-3-甲酰胺(234毫克，549.9微摩尔，99.7％产率)，为黄色固体。MS(ESI)m/z:426.2(M+H)。
步骤D：向4-(1,2,3,3a,4,6a-六氢环戊[c]吡咯-5-基)-N-乙基-5-(5-异丙基-2,4-二甲氧基-苯基)-异恶唑-3-甲酰胺(234毫克，549.9微摩尔，1.00当量)的DCE(12毫升)和MeOH(4毫升)混合溶液中加入甲醛(500微升，18.2毫摩尔，33.0当量)，将混合物在25℃搅拌16小时，然后加入NaBH(OAc)3(500毫克，2.36毫摩尔，4.3当量)，并在25℃下将混合物继续搅拌2小时。反应用饱和NaHCO3水溶液淬灭，并用DCM萃取三次。将合并的有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残余物通过制备型TLC(DCM/甲醇＝10/1)纯化，得到目标产物N-乙基-5-(5-异丙基-2,4-二甲氧基-苯基)-4-(2-甲基-1,2,3,3a,4,6a-六氢环戊[c]吡咯-5-基)异恶唑-3-甲酰胺(160毫克，364.0微摩尔，66.2％产率)。MS(ESI)m/z:440.2(M+H)
步骤E：在-78℃下，向N-乙基-5-(5-异丙基-2,4-二甲氧基-苯基)-4-(2-甲基-1,2,3,3a,4,6a-六氢环戊[c]吡咯-5-基)异恶唑-3-甲酰胺(160毫克，364.0微摩尔，1.0当量)的DCM(1mL)溶液中加入BBr3(1毫升，10.4毫摩尔，28.5当量)。将混合物在25℃下搅拌2小时，向该混合物中加入0.1毫升水和1克NaHCO3，将得到的混合物在25℃下搅拌10分钟。混合物过滤并将残余液体通过制备型HPLC(甲酸体系)纯化，得到目标产物5-(2,4-二羟基-5-异丙基-苯基)-N-乙基-4-(2-甲基-1,2,3,3a,4,6a-六氢环戊[c]吡咯-5-基)异恶唑-3-甲酰胺(75.5毫克，165.0微摩尔，45.3％产率)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.82(t,J＝5.2Hz,1H),8.20(s,1H),6.91(s,1H),6.47(s,1H),5.61(d,J＝1.6Hz,1H),3.28-3.23(m,4H),3.11-3.09(m,1H),2.75(br,1H),2.63-2.59(m,3H),2.31-2.26(m,5H),2.15-2.13(m,1H),1.11(dd,J＝7.2,1.6Hz,9H).MS(ESI)m/z:412.2(M+H).
实施例15
4-异丙基-6-[4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)-3-(5-甲基-4H-1,2,4-三唑-3-基)异恶唑-5-基]苯-1,3- 二醇
反应流程：
步骤A：在氮气保护下，将2-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-1,2,3,4-四氢异喹啉(3.66克，8.7毫摩尔，1.3当量)，5-(2,4-二苄氧基-5-异丙基-苯基)-4-碘-异恶唑-3-羧酸乙酯(4.00克，6.7毫摩尔，1.0当量)，Pd(PPh3)2Cl2(470毫克，670.0微摩尔，0.1当量)和K2CO3(1.85克，13.4毫摩尔，2.0当量)加入二氧六环(30毫升)和水(6毫升)的混合溶液中。混合物在N2保护下加热至80℃搅拌18小时。冷却后，将反应混合物倒入水(15毫升)中，用乙酸乙酯(10mLx2)萃取。将有机相用饱和盐水(15mL)洗涤，无水Na2SO4干燥，真空浓缩得到残余物。残余物经硅胶色谱(石油醚/乙酸乙酯＝50/1～5/1)纯化，得到5-(2,4-二苄氧基-5-异丙基-苯基)-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-羧酸乙酯(2.90克，3.5毫摩尔，52.6％产率，75％纯度)，为黄色油状物。
步骤B：向5-(2,4-二苄氧基-5-异丙基-苯基)-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-羧酸乙酯(2.90克，4.1毫摩尔，1.0当量)的EtOH(30毫升)溶液中加入水合肼(1.20克，24.1毫摩尔，5当量)。将溶液加热至90℃并搅拌18小时。。将溶液真空浓缩，然后加入水(20mL)，将混合物用EA(15mLx3)萃取。将有机层合并，并用盐水(10mLx2)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到残余物，将其通过硅胶色谱(DCM/甲醇＝60/1，10/1)纯化，得到5-(2,4-二苄氧基-5-异丙基-苯基)-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-碳酰肼(1.50克，2.5毫摩尔，51.7％产率)，为黄色固体。
步骤C：向加有5-(2,4-二苄氧基-5-异丙基-苯基)-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3- 碳酰肼(1.50克溶液，2.49毫摩尔，1.00当量)和乙脒盐酸盐(352.93毫克，3.73毫摩尔，1.50当量)的THF(4.00毫升)溶液中加入NaOH(149.32毫克，3.73毫摩尔，1.50当量)。将溶液加热至80℃并搅拌18小时。将溶液冷却，浓缩，加入乙二醇(4.00毫升)。得到的混合物加热至120℃并搅拌2小时。混合物冷却后加入水(10毫升)，该溶液用EA(10mLx3)萃取。将有机层合并，用盐水(10mLx2)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩，得到残余物。残余物通过硅胶色谱(DCM/甲醇＝60/1，10/1)纯化，得到5-(2,4-二苄氧基-5-异丙基-苯基)-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)-3-(5-甲基-4H-1,2,4-三唑-3-基)异恶唑(1.10克，1.76毫摩尔，70.6％产率)，为黄色固体。
步骤D：在0℃下，向5-(2,4-二苄氧基-5-异丙基-苯基)-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)-3-(5-甲基-4H-1,2,4-三唑-3-基)异恶唑(120毫克，191.77微摩尔，1.0当量)的DCM(2.0毫升)溶液中滴入BCl3的DCM溶液(1M，1.92毫升，10.0当量)，用时5分钟。将悬浮液在0℃下搅拌30分钟，然后升温至25℃并搅拌2小时。将混合物冷却至-78℃，并缓慢加入MeOH(2毫升)淬灭，用饱和NaHCO3水溶液碱化至pH＝8，然后用DCM(10mLx3)萃取。合并有机相并用盐水(10mLx2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩，得到残余物。残余物用制备型TLC(DCM/甲醇＝5/1)纯化，得到4-异丙基-6-[4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)-3-(5-甲基-4H-1,2,4-三唑-3-基)异恶唑-5-基]苯-1,3-二醇(30毫克，67.3微摩尔，35.1％产率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.74(s,1H),9.63(s,1H),7.06-6.95(m,3H),6.86(s,1H),6.44(s,1H),3.17(d,J＝5.0Hz,1H),3.06-2.95(m,1H),2.77(brs,4H),2.38(s,3H),0.97(d,J＝7.0Hz,7H).
实施例16
4-(3-(5-乙基-1H-咪唑-2-基)-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-5-基)-6-异丙基苯-1,3-二醇
反应流程：
步骤A：在0℃下，向溶有NH2OH·HCl(1.16g,16.74mmol,100Eq)的MeOH(6mL)溶液中滴加KOH(1.41g,25.1mmol,150Eq)的MeOH(3mL)溶液。混合物在0℃下搅拌30分钟后过滤掉固体，剩余的甲醇溶液中加入5-(5-异丙基-2,4-二甲氧基苯基)异恶唑-3-甲酸乙酯(100.00mg,333.38umol,1.0Eq)，并在5℃下搅拌30分钟。混合物用1.2M的稀盐酸调节pH至4，减压浓缩，加入水，用EA(10mLx3)萃取。合并的有机相用饱和食盐水(10mLx2)洗涤,无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得到粗品N-乙基-5-(5-异丙基-2,4-二甲氧基苯基)异恶唑-3-甲酰胺(97mg,330umol,98％收率)，为白色固体，直接用于下一步。
步骤B：在29℃氮气保护下，向N-羟基-5-(5-异丙基-2,4-二甲氧基苯基)异恶唑-3-甲酰胺(3.40g,11.1mmol,1.0eq)的甲苯(80mL)溶液中一次性加入PBr3(6.01g,22.2mmol,2.0eq)。混合物在29℃下搅拌10分钟后升温至110℃并搅拌8小时。混合物冷至29℃后倒入饱和NaHCO3水溶液(60mL)并搅拌5分钟。水相用EA(100mLx3)萃取，合并有机相并用盐水(30mLx2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。得到的粗品通过柱层析(PE/EA＝10/1～5/1)纯化，得到5-(异丙基-2,4-二甲氧基苯基)异恶唑-3-腈(1.0g,3.67mmol,33.1％收率)，为白色固体。
步骤C：在28℃氮气保护下，向5-(异丙基-2,4-二甲氧基苯基)异恶唑-3-甲腈(1.80g,6.6mmol,1.0eq)的MeCN(32mL)溶液中加入NIS(1.93g,8.59mmol,1.3eq)和CAN(362mg,661umol,0.1eq)。混合物在28℃下搅拌10分钟，然后升温至80℃并搅拌4小时。混合物冷却至28℃后减压浓缩。剩余物倒入饱 和NaHCO3水溶液(50mL)中并搅拌5分钟。水相用乙酸乙酯(5mLx3)萃取，合并的有机相用饱和食盐水(10mLx2)洗涤,无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。得到的粗品通过柱层析(PE/EA＝20/1～10/1)纯化，得到4-碘-5-(异丙基-2,4-二甲氧基苯基)异恶唑-3-腈(1.30g,3.26mmol,49.4％yield)，为浅黄色固体。
步骤D:氮气保护下，向6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊环-2-基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-2-羧酸叔丁酯(2.30克，6.40毫摩尔，1.0当量)的二氧六环(30毫升)溶液中加入4-碘-5-(5-异丙基-2,4-二甲氧基-苯基)-异恶唑-3-腈(2.04克，5.12毫摩尔，0.80当量)，Pd(PPh3)2Cl2(314.45毫克，448.00微摩尔，0.07当量)和K2CO3(1.77克，12.80毫摩尔，2.0当量)。将混合物在80℃搅拌16小时。将混合物倒入水(100毫升)中，用EA(100mLx2)萃取。合并的有机层浓缩，残余物用硅胶色谱(PE/EA＝5/1，2/1)纯化，得到6-[3-氰基-5-(5-异丙基-2,4-二甲氧基-苯基)-异恶唑-4-基]-1,2,3,4-四氢异喹啉-2-羧酸叔丁酯(2.00克，3.97毫摩尔，62.1％产率)，为黑褐色固体。
步骤E：在25℃下，向6-[3-氰基-5-(5-异丙基-2,4-二甲氧基-苯基)-异恶唑-4-基]-1,2,3,4-四氢异喹啉-2-羧酸叔丁酯(2.00克，3.97毫摩尔，1.0当量)的MeOH(15毫升)溶液中加入甲醇钠(2.14克，39.7毫摩尔，10当量)。混合物在25℃下搅拌2小时，然后加入氯化铵(2.12克，39.71毫摩尔，10当量)。反应混合物在25℃下继续搅拌14小时。将混合物倾入水(80毫升)中，用EA(60毫升x2)萃取，合并有机层并浓缩。粗产物通过柱层析(PE/EA＝30/1)纯化，得到6-[3-甲脒基-5-(5-异丙基-2,4-二甲氧基-苯基)-异恶唑-4-基]-1,2,3,4-四氢异喹啉-2-羧酸叔丁酯(1.50克，2.88毫摩尔，72.6％产率)，为白色固体。
步骤F：向6-[3-甲脒基-5-(5-异丙基-2,4-二甲氧基-苯基)-异恶唑-4-基]-1,2,3,4-四氢异喹啉-2-羧酸叔丁酯(1.00克，1.92毫摩尔，1.0当量)的EtOH(15毫升)溶液中加入K2CO3(265毫克，1.92毫摩尔，1.0当量)和1-溴-2-丁酮(290毫克，1.92毫摩尔，1.0当量)。混合物在80℃下搅拌10小时后倾入水(80毫升)中，用EA(60mLx2)萃取，合并有机层并浓缩。残余物用硅胶色谱(PE/EA＝5/1，2/1)纯化，得到6-[3-(5-乙基-1H-咪唑-2-基)-5-(5-异丙基-2,4-二甲氧基-苯基)异恶唑-4-基]-1,2,3,4-四氢异喹啉-2-羧酸叔丁酯(850毫克，1.48毫摩尔，77.3％产率)，为白色固体。
步骤G：将6-[3-(5-乙基-1H-咪唑-2-基)-5-(5-异丙基-2,4-二甲氧基-苯基)异恶唑-4-基]-1,2,3,4-四氢异喹啉-2-羧酸叔丁酯(600毫克，1.05毫摩尔，1.00当量)的HCl/MeOH(4M，15.00毫升)混合物在25℃下搅拌30分钟。在40℃浓缩该混合物，得到产物3-(5-乙基-1H-咪唑-2-基)-5-(5-异丙基-2,4-二甲氧基苯基)-4-(1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑(50毫克，982.2微摩尔，93.6％产率)，为黄色固体。
步骤H：向3-(5-乙基-1H-咪唑-2-基)-5-(5-异丙基-2,4-二甲氧基苯基)-4-(1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑(500毫克，1.06毫摩尔，1.0当量)的MeOH(8毫升)溶液中加入多聚甲醛(476毫克，5.29 毫摩尔，5.0当量)和AcOH(63.7毫克，1.06毫摩尔，1.0当量)。将混合物在25℃下搅拌2小时，然后加入NaBH3CN(133毫克，2.12毫摩尔，2.0当量)。将反应在25℃下继续搅拌14小时，混合物倾入水(80毫升)中，用EA(80毫升x2)萃取，合并有机层并浓缩，得到产物3-(5-乙基-1H-咪唑-2-基)-5-(5-异丙基-2,4-二甲氧基-苯基)-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑(450毫克，924.8微摩尔，87.2％产率)，为黄色固体。
步骤I：在-78℃下，向3-(5-乙基-1H-咪唑-2-基)-5-(5-异丙基-2,4-二甲氧基-苯基)-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑(600毫克，1.23毫摩尔，1.0当量)的DCM(12毫升)中加入BBr3(1.54克，6.15毫摩尔，5.0当量)。将混合物在25℃下搅拌16小时，缓慢加入MeOH(20mL)淬灭。浓缩混合物，残余物通过制备型HPLC(甲酸体系)纯化，得到产物4-[3-(5-乙基-1H-咪唑-2-基)-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-5-基]-6-异丙基-苯-1,3-二醇(262毫克，571.4微摩尔，46.5％产率)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.55(m,1H),9.65(m,1H),8.16(s,1H),7.07-6.81(brs,5H),6.41(d,1H),3.52-3.50(m,4H),3.11-2.97(m,1H),2.70-2.61(m,4H),2.36(s,3H),1.15(t,J＝3.6Hz,3H),0.96-0.94(m,6H).
实施例17
4-(3-(5-乙基-1H-咪唑-2-基)-4-(2-(2-羟乙基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-5-基)-6-异丙基 苯-1,3-二醇
反应流程：
步骤A:向3-(5-乙基-1H-咪唑-2-基)-5-(5-异丙基-2,4-二甲氧基-苯基)-4-(1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑(130毫克，275.1微摩尔，1.0当量)的EtOH(6毫升)溶液中加入2-溴乙醇(137.5毫克，1.1毫摩尔，4.0当量)和K2CO3(114毫克，825.3微摩尔，3.0当量)。将混合物在50℃搅拌16小时后 倾入水(30毫升)中，用EA(30毫升×2)萃取。合并有机层并浓缩，粗产物用制备型TLC(DCM/MeOH＝10:1)纯化，得到2-[6-[3-(5-乙基-1H-咪唑-2-基)-5-(5-异丙基-2,4-二甲氧基-苯基)-异恶唑-4-基]-1,2,3,4-四氢异喹啉-2-基]乙醇(80毫克，154.9微摩尔，56.3％产率)，为黄色固体。
步骤B：在0℃下，向2-[6-[3-(5-乙基-1H-咪唑-2-基)-5-(5-异丙基-2,4-二甲氧基-苯基)-异恶唑-4-基]-1,2,3,4-四氢异喹啉-2-基]乙醇(80毫克，154.9微摩尔，1.0当量)的DCM(8毫升)溶液中加入BBr3(387.9毫克，1.55毫摩尔，10.0当量)。将混合物在25℃下搅拌16小时，加入MeOH(15mL)中淬灭后，将混合物浓缩。粗产物通过制备型HPLC(Phenomenex Synergi C18 250*21.2mm*4um,0.05％HCl-ACN)纯化，得到4-(3-(5-乙基-1H-咪唑-2-基)-4-(2-(2-羟乙基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-5-基)-6-异丙基苯-1,3-二醇(24.5毫克，50.2微摩尔，32.4％产率)。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ11.01(brs,1H),10.05-9.99(m,2H),7.62(s,1H),7.18-7.03(m,3H),6.91(s,1H),6.57(s,1H),4.55-4.34(m,2H),4.30-4.28(m,2H),3.27-3.01(m,7H),2.88-2.82(m,2H),1.23(t,J＝4.5Hz,3H),1.00(d,J＝6.9Hz,6H).
实施例18
5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-4-(7,7-二甲基-4,5,6,7-四氢噻吩并[2,3-c]吡啶-2-基)-N-乙基异恶唑-3-甲酰胺
反应流程：
步骤A：在氮气保护20℃下，向溶有叔丁基[2-(噻吩-3-基)乙基]氨基甲酸酯(2.40克，10.56毫摩尔，1.0当量)的丙酮(9.48克，163.22毫摩尔，15.46当量)溶液中逐滴加入三氟乙酸(18.36克，161.01毫摩尔，15.25当量)。加完后将反应混合物在100℃下搅拌16小时。反应液冷却到20℃，然后在50℃温度下浓缩得到7,7-二甲基-4,5,6,7-四氢噻吩并[2,3-c]吡啶(10.05g,粗品)。得到的粗品用2M NaOH溶液调节pH＝10，调碱后的溶液用于下一步反应。
步骤B：在氮气保护20℃下，向溶有7,7-二甲基-4,5,6,7-四氢噻吩并[2,3-c]吡啶(10.05g,粗品)的四氢呋喃(10毫升)溶液中逐滴加入Boc2O(2.31克，10.57毫摩尔，1当量)。加完后将反应混合物在20℃下搅拌20小时。反应液倒入到20毫升水中并搅拌5分钟,水相每次用10毫升乙酸乙酯萃取3次，有机相每次用10毫升食盐水洗3次，然后用无水硫酸钠干燥有机相，过滤浓缩得到粗品。粗品残余物用硅胶色谱法(100～200目硅胶，石油醚/乙酸乙酯＝400/1～90/1)纯化得到黄色油状的叔丁基7,7-二甲基-4,5-二氢噻吩并[2,3-c]吡啶-6(7H)-氨基甲酸酯(733毫克，2.74毫摩尔，25.93％收率)
步骤C：在氮气保护20℃下，向溶有叔丁基7,7-二甲基-4,5-二氢噻吩并[2,3-c]吡啶-6(7H)-氨基甲酸酯(733毫克，2.74毫摩尔，1当量)的N,N-二甲基甲酰胺(7毫升)溶液中分批加入NBS(487.67毫克,2.74毫摩尔,1当量)。反应液在20℃下反应一个小时。反应液倒入到20毫升水中并搅拌5分钟,水相每次用10毫升乙酸乙酯萃取3次，有机相每次用10毫升食盐水洗3次，然后用无水硫酸钠干燥有机相，过滤浓缩得到黄色油状的叔丁基2-溴-7,7-二甲基-4,5-二氢噻吩并[2,3-c]吡啶-6(7H)-氨基甲酸酯(840毫克，2.43毫摩尔，88.53％收率)
步骤D：在25℃氮气保护下，向叔丁基2-溴-7,7-二甲基-4,5-二氢噻吩并[2,3-c]吡啶-6(7H)-氨基甲酸酯(1.02克,2.95毫摩尔,1当量)和5-(2,4-二苄氧基-5-异丙基-苯基)-N-乙基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊环-2-基)异恶唑-3-甲酰胺(1.76克，2.95毫摩尔，1当量)的二氧六环(20毫升)和水(4毫升)溶液中加入碳酸氢钠(743.49毫克，8.85毫摩尔，3当量)和Pd(PPh3)2Cl2(414.12毫克,590.00微摩尔,0.20当量)。反应液在90℃下反应16小时。反应液冷却到室温然后浓缩得到粗品，粗品残余物用硅胶色谱法(100～200目硅胶，石油醚/乙酸乙酯＝100/1～3/1)得到棕色固体叔丁基2-[5-(2,4-二苄氧基-5-异丙基-苯基)-3-(乙基甲酰胺)异恶唑-4-基]-7,7-二甲基-4,5-二氢噻吩并[2,3-c]吡啶-6(7H)-氨基甲酸酯(841.00毫克,719.95微摩尔,24.40％收率,63％纯度)。
步骤D：在20℃环境下，向叔丁基2-[5-(2,4-二苄氧基-5-异丙基-苯基)-3-(乙基甲酰胺)异恶唑-4-基]-7,7-二甲基-4,5-二氢噻吩并[2,3-c]吡啶-6(7H)-氨基甲酸酯(840毫克，719.09微摩尔，1当量)的甲醇(8毫升)溶液中滴加HCl/MeOH(4摩尔/升,8毫升,44.50当量)。反应液在20℃下搅拌15小时。反应液浓缩得到粗品，然后经过硅胶色谱法(100～200目硅胶，二氯甲烷/甲醇＝1/0～10/1)得到浅棕色的固体5-(2,4-二苄氧基-5-异丙苯基)-4-(7,7-二甲基-4,5,6,7-四氢噻吩并[2,3-c]吡啶-2-基)-N-乙基异恶唑-3-甲酰胺(442.00毫克,695.18微摩尔,96.67％收率)。
步骤E：在氮气0℃的环境下，向5-(2,4-二苄氧基-5-异丙苯基)-4-(7,7-二甲基-4,5,6,7-四氢噻吩并[2,3-c]吡啶-2-基)-N-乙基异恶唑-3-甲酰胺(300毫克，471.84微摩尔，1当量)的无水二氯甲烷(20毫升)溶液中缓慢滴加三氯化硼(1摩尔/升，4.72毫升，10当量)。反应液在0℃反应一个小时，然后升温到20℃反应0.5小时。反应结束后，将反应液冷却到0℃缓慢滴加甲醇(30毫升)，然后搅拌0.5小时。有机相浓缩得到粗品。粗品通过pre-HPLC(Phenomenex Synergi Max-RP 250*80 10u,0.225％FA-ACN)得到白色固体5-(2,4-二羟基-5-异丙基-苯基)-4-(7,7-二甲基-4,5,6,7-四氢噻吩[2,3-c]吡啶-2-基)-N-乙基-异恶唑-3-甲酰胺(150.00毫克,311.43微摩尔,66.00％收率)1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.94(t,J＝5.5Hz,1H),8.28(s,1H),6.90(s,1H),6.82(s,1H),6.50(s,1H),3.31-3.24(m,2H),3.09-3.03(m,3H),2.56-2.54(m,2H),1.38(s,6H),1.11(t,J＝7.2Hz,3H),1.04(d,J＝7Hz,6H).
实施例19
5-(2,4-羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(6-甲基-5,6,7,8-四氢-1,6-二氮杂萘-3-基)异恶唑-3-甲酰胺
反应流程：
步骤A：在室温下，向1-甲基-3,5-二硝基-吡啶-2-酮(2克，10.04毫摩尔，1当量)和叔丁基4-哌啶酮-1-羧酸酯的甲醇(50毫升)溶液中加入氨气(1.37克，80.32毫摩尔，8当量)，反应液在密封罐中120℃搅拌1小时。反应液冷却到室温，浓缩得到粗品。粗品通过硅胶色谱柱纯化(PE/EA＝10/1～3/1)得到灰白色固体叔丁基3-硝基-7,8-二氢-5H-1,6-二氮杂萘-6-羧酸酯(1.9克，6.8毫摩尔，67.76％收率)
步骤B：在氢气(40Psi)室温环境下，向叔丁基3-硝基-7,8-二氢-5H-1,6-二氮杂萘-6-羧酸酯(3克，10.74毫摩尔，1当量)的甲醇(100毫升)溶液中加入Pd/C(1.00克)，反应液在室温下搅拌16小时。反应结束后，反应液过滤浓缩得到白色固体叔丁基3-氨基-7,8-二氢-5H-1,6-二氮杂萘-6-羧酸酯(2.5克，10.03毫摩尔，93.37％收率)
步骤C：在室温下，向叔丁基3-氨基-7,8-二氢-5H-1,6-二氮杂萘-6-羧酸酯(300毫克，1.2毫摩尔，1当量)的乙腈(6毫升)溶液中加入CuBr2(402.03毫克，1.8毫摩尔，1.5当量)，然后在0-5℃下滴加亚硝酸叔丁酯(148.49毫克，1.44毫摩尔，1.2当量)反应1个小时，升温到室温搅拌15小时。反应液倒入水中(20毫升)，过滤，每次用20毫升乙酸乙酯萃取3次。有机相每次用30毫升水洗两次，用无水硫酸钠干燥，过滤浓缩得到粗品。粗品通过硅胶色谱柱纯化(PE/EA＝10/1～3/1)得到无色透明的油状物叔丁基3-溴-7,8-二氢-5H-1,6-二氮杂萘-6-羧酸酯(180毫克，534.5微摩尔，44.54％收率，93％纯度)
步骤D：在25℃氮气保护下，向叔丁基3-溴-7,8-二氢-5H-1,6-二氮杂萘-6-羧酸酯(160毫克，510.87微摩尔,1当量)的二氧六环(3毫升)溶液中加入双联片呐醇硼酸酯(194.60毫克,766.31微摩尔,1.50当量)和KOAc(150.41毫克,1.53毫摩尔,3当量)，随后加入催化剂Pd(dppf)Cl2.CH2Cl2(74.76毫克,102.17微摩尔,0.20当量)。混合物在25℃下搅拌10分钟，然后加热至100℃并搅拌16小时。将混合物冷却至25℃，并在减压下浓缩得粗品直接用于下一步。
步骤E：在25℃氮气保护下，向叔丁基3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊环-2-基)-7,8-二氢-5H-1,6-二氮杂萘-6-羧酸酯(181.20毫克,502.98微摩尔,2.00当量)和N-乙基-4-碘-5-(5-异丙基-2,4-二甲氧基苯基)异恶唑-3-甲酰胺(150.00毫克,251.49微摩尔,1.00当量)的二氧六环(5毫升)混合物溶液中加入NaHCO3(63.38毫克,754.46微摩尔,3.00当量)，H2O(1毫升)和Pd(PPh3)2Cl2(35.30毫克,50.30微摩尔,0.2当量)。将混合物在25℃下搅拌10分钟，然后加热至90℃并搅拌16小时。混合物冷却至25℃，并在减压下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法纯化(200-300目硅胶，石油醚/乙酸乙酯，二氯甲烷/甲醇＝30/1，15/1)，得到叔丁基3-[5-(2,4-苄氧基-5-异丙基-苯基)-3-(乙基甲酰胺)异恶唑-4-基]-7,8-二氢-5H-1,6-二氮杂萘-6-羧酸酯(90.00毫克,粗品)，为黄色固体。
步骤F：在20℃环境下，向叔丁基3-[5-(2,4-苄氧基-5-异丙基-苯基)-3-(乙基甲酰胺)异恶唑-4-基]-7,8-二氢-5H-1,6-二氮杂萘-6-羧酸酯(90毫克，128.05微摩尔，1当量)的甲醇(2毫升)溶液中滴加HCl/MeOH(4摩尔/升),2.00毫升,62.4当量)，反应液在室温下搅拌2小时。反应液减压浓缩得粗品，粗品在室温下溶解到二氯甲烷(10毫升)中，然后添加碳酸氢钠(1克)，混合液在室温下搅拌1小时，过滤浓缩。粗品通过TLC大板(二氯甲烷/甲醇＝20/1)进行分离纯化得到黄色固体5-(2,4-苄氧基-5-异丙基-苯基)-N-乙基-4-(5,6,7,8-四氢-1,6-二氮杂萘-3-基)异恶唑-3-羧酸酯(50.00毫克,82.96微摩尔,64.79％收率)
步骤G：在20℃氮气保护下，向5-(2,4-苄氧基-5-异丙基-苯基)-N-乙基-4-(5,6,7,8-四氢-1,6-二氮杂萘-3-基)异恶唑-3-羧酸酯(50.00毫克,82.96微摩尔,1.00当量)的甲醇(5毫升)的溶液中滴加甲醛水溶液(62.28毫克，829.6微摩尔，10当量)，反应液在室温下搅拌10分钟，然后在室温下添加NaBH3CN(15.64毫克,248.88微摩尔,3.00当量)，并继续搅拌50分钟。反应液直接浓缩得到粗品，粗品通过TLC大板(二氯甲烷/甲醇＝10/1)进行分离纯化得到白色固体5-(2,4-苄氧基-5-异丙基-苯基)-N-乙基-4-(6-甲基-5,6,7,8-四氢-1,6-二氮杂萘-3-基)异恶唑-3-羧酸酯(40.00毫克,64.86微摩尔,78.18％收率)。
步骤H：在氮气0℃的环境下，向5-(2,4-苄氧基-5-异丙基-苯基)-N-乙基-4-(6-甲基-5,6,7,8-四氢-1,6-二氮杂萘-3-基)异恶唑-3-羧酸酯(40毫克，64.86微摩尔，1当量)的无水二氯甲烷(2.5毫升)溶液中缓慢滴加三氯化硼(1摩尔/升，0.648毫升，10当量)。反应液在0℃反应一个小时，然后升温到20℃反应14小时。反应结束后，将反应液冷却到0℃缓慢滴加甲醇(1毫升)，然后搅拌0.5小时。有机相浓缩得到粗品。粗品通过pre-HPLC(Phenomenex Synergi Max-RP 250*80 10u,0.225％FA-ACN)得到5-(2,4-羟基-5-异丙基-苯基)-N-乙基-4-(6-甲基-5,6,7,8-四氢-1,6-二氮杂萘-3-基)异恶唑-3-甲酰胺的甲酸盐(18毫克,37.3微摩尔,57.00％收率)1H NMR(400MHz,DMSO):δ8.88(t,J＝5.6Hz,1H),8.12(d,J＝1.6Hz,1H),7.32(d,J＝1.6Hz,1H),6.91(s,1H),6.41(s,1H),3.42(s,2H),3.27-3.19(m,2H),3.07-2.99(m,1H),2.85(t,J＝6.0Hz,2H),2.67(t,J＝6.0Hz,2H),2.34(s,3H),1.10(t,J＝7.2Hz,3H),1.01(d,J＝6.8Hz,6H).MS(ESI)m/z:437(M+1).
实施例20
4-异丙基-6-(4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)-3-(2,2,2-三氟-1-羟乙基)异恶唑-5-基)苯-1,3-二醇
反应流程：
步骤A：在25℃氮气保护下，向6-溴-2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉(1.00克，4.42毫摩尔,1.0当量)的二氧六环(10毫升)溶液中加入双联片呐醇硼酸酯(1.68克，6.63毫摩尔,1.5当量)和KOAc(1.30克，13.26毫摩尔,3.0当量)，随后加入催化剂Pd(dppf)Cl2(323.41毫克，442.00微摩尔)。混合物加热至90℃并搅拌2小时。将混合物通过硅藻土过滤并在减压下浓缩。残余物通过硅胶色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝1/1～0/1)，得到2-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊环-2-基)-1,2,3,4-四氢异喹啉(1.0克，3.66毫摩尔，82.82％产率)，为黄色油状物。
步骤B：在室温N2保护下，向5-(2,4-二苄氧基-5-异丙基-苯基)-异恶唑-3-羧酸乙酯(2.00克，4.24毫摩尔，1.0当量)的MeCN(25mL)溶液中，加入CAN(232.52毫克，549微摩尔，0.10当量)和NIS (2.83克，8.48毫摩尔，2.00当量)。混合物加热至80摄氏度并搅拌16小时。将混合物冷却至室温并倾入水(40毫升)中，水相用EA(40毫升x3)萃取。合并的有机相用无水硫酸钠干燥，过滤和真空浓缩。得到5-(2,4-二苄氧基-5-异丙基-苯基)-4-碘-异恶唑-3-羧酸乙酯(2.00克，3.35毫摩尔，78.95％产率)，为黄色固体。
步骤C：在25℃氮气保护下，向2-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊环-2-基)-1,2,3,4-四氢异喹啉(6.15克，13.5毫摩尔)和5-(2,4-二苄氧基-5-异丙基-苯基)-4-碘-异恶唑-3-羧酸乙酯(1.50克，2.51毫摩尔,1.0当量)的二氧六环(15毫升)混合物溶液中加入NaHCO3(632.60毫克，7.53毫摩尔,3.0当量)，H2O(3.00毫升)和Pd(PPh3)2Cl2(176.18毫克，251.00毫摩尔,0.10当量)。将混合物在加热至90℃并搅拌1.5小时。将混合物通过硅藻土过滤并在减压下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法纯化(二氯甲烷/甲醇＝20/1)，得到5-(2,4-二苄氧基-5-异丙基苯-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-羧酸乙酯(600毫克，972.86微摩尔，38.76％收率)，为黄色固体。直接用于下一步。MS(ESI)M/Z：617.2(M+1)。
步骤D：在-20℃氮气保护下，向5-(2,4-二苄氧基-5-异丙基苯-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-羧酸乙酯(500.00毫克，810.71微摩尔，1.0当量)的四氢呋喃(2.0毫升)混合物溶液中加入四氢铝锂(153.83毫克，4.05毫摩尔,5.0当量)。将混合物在冷却至-20℃并搅拌0.5小时。向混合物中滴加15％的NaOH溶液0.3mL后过滤得到有机相并在减压下浓缩。残余物通过薄层色谱(prep-TLC)(二氯甲烷/甲醇＝10/1)，得到(5-(2,4-二苄氧基)-5-异丙基苯)-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲醇(300毫克，522.00微摩尔，64.39％收率)，为黄色固体。直接用于下一步。MS(ESI)M/Z：575.2(M+1)。
步骤E：在5℃N2保护下，向(5-(2,4-二苄氧基)-5-异丙基苯)-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲醇(200.00毫克，348.00微摩尔，1.0当量)的二氯甲烷(5.0mL)溶液中，加入Dess-Martin(221.40毫克，522.00微摩尔，1.5当量)。混合物在5摄氏度搅拌1小时。向混合物中加入饱和NaHCO3溶液(1.0毫升)和饱和Na2SO3水溶液(1.0毫升)中搅拌5分钟。加入15毫升水稀释，水相用二氯甲烷(15毫升x2)萃取。合并的有机相用用无水硫酸钠干燥，过滤和真空浓缩干燥。得到(5-(2,4-二苄氧基)-5-异丙基苯)-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲醛(200毫克，粗品)，为黄色固体。MS(ESI)M/Z：573.2(M+1)。
步骤F：在5℃ N2保护下，向(5-(2,4-二苄氧基)-5-异丙基苯)-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲醛(200.00毫克，349.23微摩尔，1.0当量)的四氢呋喃(5.0mL)溶液中，加入碳酸铯(5.69毫克，17.465微摩尔，0.05当量)和三甲基(三氟甲基)硅(60毫克，419微摩尔，1.2当量)。混合物于5摄氏度并搅拌4小时。将四丁基氟化铵(136.96毫克，523.85微摩尔，1.50当量)于5摄氏度加入混合物并搅拌12小时。将混合物倾入水(15毫升)中，水相用二氯甲烷(15毫升x2)萃取。合并 的有机相用无水硫酸钠干燥，过滤和真空浓缩干燥。残余物通过薄层色谱(DCM/MeOH＝8/1)纯化，得到1-(5-(2,4-二苄氧基)-5-异丙基苯)-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-基)-2,2,2-三氟乙醇(100.0毫克，155.59毫摩尔，44.55％产率)，为黄色固体。MS(ESI)M/Z：643.2(M+1)。
步骤G：在-20℃下，向1-(5-(2,4-二苄氧基)-5-异丙基苯)-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-基)-2,2,2-三氟乙醇(100.00毫克，155.59微摩尔，1.0当量)的DCM(8毫升)溶液中加入1mol/L的BCl3。DCM(2毫升)。将混合物在-20℃搅拌1小时后，加入1mL的MeOH淬灭后真空浓缩，得到粗品。粗产物通过薄层色谱(DCM/MeOH＝8/1)纯化两次，得到4-异丙基-6-(4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)-3-(2,2,2-三氟-1-羟乙基)异恶唑-5-基)苯-1,3-二醇(20.10毫克，27.93％收率)。1H NMR B000139948EW2407-16-P1A(400MHz,DMSO-d6):δ9.77(s,1H),9.65(s,1H),7.28(d,J＝7.2Hz,1H),7.05-7.15(m,3H),6.82(s,1H),6.42(s,1H),5.15(t,J＝7.2Hz,2H),3.87(brs,2H),2.85-3.05(m,5H),2.59(s,3H),0.95(d,J＝6.8Hz,9H).MS(ESI)m/z:623(M+1).
实施例21
N-腈基-5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲脒
反应流程：
步骤A：在15-25℃氮气保护下，向5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-4-碘-异恶唑-3-甲腈(300毫克，545微摩尔，1.00当量)的二氧六环(4.5毫升)溶液中加入2-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-1,2,3,4-四氢异喹啉(372毫克，818微摩尔，1.5当量)，水(900.00微升)，碳酸氢钠(224毫克，2.7毫摩尔，4.9当量)，随后加入Pd(PPh3)2Cl2(77毫克，109微摩尔，0.2当量)。混合物在90℃下搅拌15小时。将反应混合物冷却到15-25℃，倒入水(50毫升)中并用EA萃取(50毫升×升)。将合并的有机层干燥，过滤并浓缩，得到粗品。使粗品通过柱层析纯化(DCM：甲醇＝20：1)纯化。得到5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲腈(306毫克，376微摩尔，70％产率)，为黄色固体。(ESI)M/Z：570(M+1)。
步骤B:向5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲腈(150 毫克，263微摩尔，1.0当量)的MeOH(4毫升)溶液中加入NaHCO3(221毫克，2.6毫摩尔，10.0当量)。将混合物在40℃下搅拌6.5小时。随后加入氨基腈(221毫克，5毫摩尔，20.0当量)并在后40℃下搅拌4小时。反应液倾入水(20毫升)中，用EA(10毫升×3)萃取。合并有机层用Na2SO4干燥后过滤并浓缩，得到粗品。粗产物用制备型TLC(DCM/MeOH＝15:1)纯化，得到N-腈基-5-(2,4-二苄氧基-5-异丙基苯基)-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲脒(125毫克，204微摩尔，77％产率)，为白色固体。MS(ESI)m/z:612(M+1).
步骤C：在0℃下，向N-腈基-5-(2,4-二苄氧基-5-异丙基苯基)-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲脒(78毫克，127微摩尔，1.0当量)的DCM(6毫升)溶液中加入BCl3(1M，1.3毫升，10.0当量)的DCM溶液，在0℃下搅拌2小时后，升温至15-25℃下搅拌1小时。将反应混合物冷却至0℃，加入MeOH(3mL)，并在0℃下搅拌0.5小时，15-25℃下再搅拌0.5小时。将混合物浓缩，得到粗品。粗品通过制备型HPLC(0.225％FA-ACN；Phenomenex Synergi Max-RP 250*80 10u)纯化，得到N-腈基-5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲脒(17毫克，39微摩尔，30％产率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.26(s,1H),7.05-6.83(m,4H),6.44(s,1H),3.02-2.98(m,1H),2.72-2.55(m,6H),2.33(s,1H),0.96(d,J＝6.5Hz,6H).MS(ESI)m/z:432(M+1).
实施例22
5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(6-甲基-5,6,7,8-四氢-4H-噻唑并[2,3-d]氮杂卓-2-基)异恶唑 -3-甲酰胺
反应流程：
步骤A：在15-25℃下，向2-(噻吩-2-基)乙胺(3.0克，23.6毫摩尔，1.00当量)和2-甲醛基甲酸乙酯(4.8克，23.6毫摩尔，1.00当量)的DCM(40.0毫升)溶液中加入醋酸(1.4克，23.6毫摩尔，1.0当量)，NaBH(OAc)3(10.0克，47.2毫摩尔，2.0当量)。混合物在25℃下搅拌16小时。将反应混合物倒入水(60毫升)中并用EA萃取(50毫升×2)。将合并的有机层干燥，过滤并浓缩，得到乙基2-((2-(噻吩-2-基)乙基)氨基)乙酸酯(5.0克，粗品)。直接用于下一步。
步骤B：在0℃下，向乙基2-((2-(噻吩-2-基)乙基)氨基)乙酸酯(3.2克，15.0毫摩尔，1.00当量)和NaHCO3(3.8克，45.0毫摩尔，3.00当量)的THF(40.0毫升)溶液中滴加氯甲酸乙酯(1.6克，15.0毫摩尔，1.00当量)。混合物在25℃下搅拌16小时。将反应混合物倒入饱和NaHCO3水溶液(80毫升)中，并用EA萃取(,60毫升×升)。。将合并的有机层干燥，过滤并浓缩，得到粗品。使粗品通过柱层析纯化(PE：EA＝5：1到1:1)纯化，得到乙基2-((乙氧基甲酰基)(2-(噻吩-2-基)乙基)氨基)乙酸酯(2.9克，10.2毫摩尔，68％产率)，为黄色油状物。
步骤C：在0℃下，向乙基2-((乙氧基甲酰基)(2-(噻吩-2-基)乙基)氨基)乙酸酯(2.9克，10.2毫摩尔，1.00当量)的EtOH(20.0毫升)溶液中滴加NaOH/H2O(20.3毫升，20.4毫摩尔，2.00当量,1M)。混合物在25℃下搅拌16小时。将反应混合物倒入水(80毫升)中，用1M的盐酸水溶液调节PH到1，并用EA萃取(80毫升×升)。将合并的有机层干燥，过滤并浓缩，得到2-((乙氧基甲酰基)(2-(噻吩-2-基)乙基)氨基)乙酸(2.0克，粗品)，为白色固体。
步骤D：在0℃下，向2-((乙氧基甲酰基)(2-(噻吩-2-基)乙基)氨基)乙酸(1.0克，3.9毫摩尔，1.00当量)的DCM(15.0毫升)溶液中加入DMF(14毫克，195微摩尔，0.05当量),(COCl)2(987毫升，7.8毫摩尔，2.00当量)。混合物在25℃下搅拌16小时。将反应混合物浓缩，得到乙基(2-氯-2-乙氧基)(2-(噻吩-2-基)乙基)氨基甲酸酯(1.1克，粗品)，为黄色油状物。
步骤E：在0℃下，向乙基(2-氯-2-乙氧基)(2-(噻吩-2-基)乙基)氨基甲酸酯(4.8克，17毫摩尔，1.00 当量)的DCM(50.0毫升)溶液中加入AlCl3(5.8克，43毫摩尔，2.5当量)。混合物在25℃下搅拌1小时。向反应液中加入EtOH(5.0毫升)将反应混合物倒入冰中并搅拌1小时。混合液用DCM(,60毫升×升)萃取。将合并的有机层用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到粗品。粗品通过柱层析纯化(PE：EA＝5：1到1:1)纯化，得到乙基4-氧代-7,8-二氢-4H-噻吩[2,3-d]氮杂卓-6(5H)-甲酸酯(1.1克，4.6毫摩尔，26％产率))，为黄色油状物。
步骤F：在0℃下，向AlCl3(2.0克，15毫摩尔，3.0当量)的DCM(20.0毫升)溶液中加入硼烷/2-甲基丙烷-2-胺(2.6克，30毫摩尔，6.0当量)。混合物在0℃下搅拌5分钟。随后加入乙基4-氧代-7,8-二氢-4H-噻吩[2,3-d]氮杂卓-6(5H)-甲酸酯(1.2克，5.0毫摩尔，1.0当量)的DCM(10.0毫升)溶液。反应混合物在25℃搅拌12小时。将反应混合物倒入HCl水溶液(60Ml,1M)中，混合液用DCM(50毫升×3)萃取。将合并的有机层用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到粗品。粗品通过柱层析纯化(PE：EA＝10：1到5:1)纯化，得到乙基7,8-二氢-4H-噻吩[2,3-d]氮杂卓-6(5H)-甲酸酯(700毫克，3.1毫摩尔，62％产率)，为黄色油状物。
步骤G：在25℃下，向乙基7,8-二氢-4H-噻吩[2,3-d]氮杂卓-6(5H)-甲酸酯(700毫克，3.1毫摩尔，1.00当量)的CHCl3(15.0毫升)溶液中加入TMSI(12.4克,62.毫摩尔,20.0当量).。混合物在80℃下搅拌12小时。向反应混合液中加入NaOH(10.0毫升，2M)并倒入饱和NaHCO3水溶液(100毫升)中，混合液用DCM(60毫升×升)萃取。将合并的有机层用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到产物5,6,7,8-四氢-4H-噻吩[2,3-d]氮杂卓(550毫克，粗品)，为黄色固体。
步骤H：在25℃下，向5,6,7,8-四氢-4H-噻吩[2,3-d]氮杂卓(550毫克，3.6毫摩尔，1.00当量)的DCM(10.0毫升)溶液中加入Et3N(1.1克,11.毫摩尔,3.0当量)和Boc2O(1.2克,5.4毫摩尔,1.5当量)。混合物在25℃下搅拌12小时。向反应混合液倒入水(60毫升)中，混合液用DCM(60毫升×2)萃取。将合并的有机层用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到粗品。粗品通过柱层析纯化(PE：EA＝5:1)纯化，得到得到产物叔丁基7,8-二氢-4H-噻吩[2,3-d]氮杂卓-6(5H)-甲酸酯(500毫克，2.0毫摩尔，55％产率)，为黄色油状物。
步骤I：在25℃下，向叔丁基7,8-二氢-4H-噻吩[2,3-d]氮杂卓-6(5H)-甲酸酯(500毫克，2.0毫摩尔，1.00当量)的MeCN(5.0毫升)溶液中加入NBS(245毫克,1.4毫摩尔,0.7当量)。混合物在25℃下搅拌2小时。向反应混合液倒入饱和NaHSO3水溶液(30毫升)中，混合液用DCM(30毫升×升)萃取。将合并的有机层用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到粗品。粗品通过柱层析纯化(PE：EA＝10:1到6:1)纯化，得到产物叔丁基2-溴-7,8-二氢-4H-噻吩[2,3-d]氮杂卓-6(5H)-甲酸酯(470毫克，1.4毫摩尔，72％产率)，为黄色油状物。
步骤J：氮气保护下，向N-乙基-5-(5-异丙基-2,4-二苄氧基-苯基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)异恶唑-3-甲酰胺(1.1克，1.8毫摩尔，1.40当量)，叔丁基2-溴-7,8-二氢-4H-噻吩[2,3-d] 氮杂卓-6(5H)-甲酸酯(420毫克，1.3毫摩尔)的二氧六环(20.00毫升)和水(4.00毫升)混合溶液中加入Pd(PPh3)2Cl2(88毫克，126微摩尔，0.10当量)和NaHCO3(212毫克，2.5毫摩尔，2.00当量)。将混合物在80℃搅拌12小时。混合物冷却后倾入水(100毫升)中，用EA萃取(80毫升×升)。合并有机层，并浓缩。残余物通过硅胶色谱(PE/EA＝10/1～3/1)纯化。获得叔丁基2-(5-(2,4-二苄氧基-5-异丙基-苯基)-3-(乙基氨基甲酰基)异恶唑-4-基)-4,5,7,8-四氢噻吩[2,3-d]氮杂卓-甲酸酯(800毫克，1.1毫摩尔，88.0％产率)，为黄色固体。
步骤K：将HCl/MeOH(4M，10.00毫升)加入到叔丁基2-(5-(2,4-二苄氧基-5-异丙基-苯基)-3-(乙基氨基甲酰基)异恶唑-4-基)-4,5,7,8-四氢噻吩[2,3-d]氮杂卓-甲酸酯(880毫克，1.2毫摩尔，1.00当量)的MeOH(10.00毫升)溶液中，并在25℃下搅拌1小时。在40℃浓缩该混合物，得到产物5-(2,4-二苄氧基-5-异丙基-苯基)-N-乙基-4-(5,6,7,8-四氢-4H-噻吩[2,3-d]氮杂卓-2-基)异恶唑-3-甲酰胺(800毫克，1.2微摩尔，99％产率)，为黄色固体。
步骤L：向5-(2,4-二苄氧基-5-异丙基-苯基)-N-乙基-4-(5,6,7,8-四氢-4H-噻吩[2,3-d]氮杂卓-2-基)异恶唑-3-甲酰胺(730毫克，1.2毫摩尔，1.0当量)的MeOH(15毫升)溶液中加入多聚甲醛(7.93克，98毫摩尔，83.5当量)和AcOH(70毫克，1.2毫摩尔，1.0当量)。将混合物在25℃下搅拌2小时，然后加入NaBH3CN(147毫克，2.3毫摩尔，2.0当量)。将反应在25℃下继续搅拌12小时，混合物倾入水(80毫升)中，用EA(80毫升x2)萃取，合并有机层并浓缩得到粗品。粗品通过柱层析纯化(PE/EA＝1/1,0/1)，得到产物5-(2,4-二苄氧基-5-异丙基-苯基)-N-乙基-4-(6-甲基-4,5,7,8-四氢噻吩[2,3-d]氮杂卓-2-基)异恶唑-3-甲酰胺(340毫克，535微摩尔，46％产率)，为黄色固体。
步骤M：在0℃下，向5-(2,4-二苄氧基-5-异丙基-苯基)-N-乙基-4-(6-甲基-4,5,7,8-四氢噻吩[2,3-d]氮杂卓-2-基)异恶唑-3-甲酰胺(100毫克，157微摩尔，1.0当量)的DCM(8毫升)溶液中加入BCl3(1M，0.8毫升，5.0当量)的DCM溶液，在0℃下搅拌2小时后，升温至15-25℃下搅拌1小时。将反应混合物冷却至0℃，加入MeOH(3mL)，并在0℃下搅拌0.5小时，15-25℃下再搅拌0.5小时。将混合物浓缩，得到粗品。粗品通过制备型HPLC(0.225％FA-ACN；Phenomenex Synergi Max-RP 250*80 10u)纯化，得到5-(2,4-二羟基-5-异丙基-苯基)-N-乙基-4-(6-甲基-4,5,7,8-四氢噻吩[2,3-d]氮杂卓-2-基)异恶唑-3-甲酰胺(20毫克，44微摩尔，28％产率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ11.05(m,1H),9.92(s,1H),9.81(s,1H),8.97-8.94(m,1H),6.92-6.90(m,2H),6.52(s,1H),6.43(s,1H),3.48-3.36(m,2H),3.28-3.23(m,3H),3.08-3.03(m,1H),2.82-2.81(m,3H),1.13-1.05(m,9H)..MS(ESI)m/z:456(M+1).
实施例23
5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢吡咯并[1,2-a]吡嗪-7-基)异恶唑-3-甲 酰胺
反应流程：
步骤A：在25℃氮气保护下，向2,2,2-三氯乙酰氯(19.51克,107.32毫摩尔,1.20当量)的四氢呋喃(36毫升)溶液中缓慢滴加溶有吡咯(6.00克,89.43毫摩尔,1.00当量)的四氢呋喃(120毫升)。反应液在25℃下搅拌5分钟，然后升温到67℃并搅拌2小时。反应液冷却到室温，碳酸氢钠(10克)的水(50毫升)溶液缓慢滴加到反应液中。水相每次用乙酸乙酯(50毫升)萃取3次，合并有机相并用水(80毫升)洗三次，饱和食盐水(40毫升)洗两次，用无水硫酸钠干燥，过滤浓缩得到2,2,2-三氯-1-(1H-吡咯-2-基)乙酮(18.00克,84.72毫摩尔,94.74％收率)
步骤B：在20℃氮气保护下，向2,2,2-三氯-1-(1H-吡咯-2-基)乙酮(22.00克,103.55毫摩尔,1.00当量)的二氯甲烷(250毫升)溶液中滴加氯化碘(16.81克,103.55毫摩尔,1.00当量),反应液在20℃下搅拌5小时。反应液用10％K2CO3(100毫升)溶液洗涤，用二氯甲烷(300毫升)萃取3次。有机相合并用水(50毫升)，1摩尔/升的硫代硫酸钠(100毫升)和饱和食盐水(100毫升)，并用无水硫酸钠干燥，过滤浓缩得白色固体2,2,2-三氯-1-(4-碘-1H-吡咯-2-基)乙酮(33.00克,97.53毫摩尔,94.19％收率)
步骤C：在25℃氮气保护下，向2,2,2-三氯-1-(4-碘-1H-吡咯-2-基)乙酮(34.60克,102.26毫摩尔,1.0当量)的甲醇(200毫升)溶液中滴加甲醇钠(6.63克)的甲醇(50毫升)的溶液。反应液在25℃下反应2小时。反应结束后，将反应液倒入水(150毫升)中，水相用乙酸乙酯(600毫升)萃取3次。合并有机相并用饱和食盐水(200毫升)洗涤两次。用无水硫酸钠干燥，过滤减压浓缩得到灰白色固体甲基4-碘-1H-吡咯-2-羧酸甲酯(24.00克,95.61毫摩尔,93.50％收率)
步骤D：在20℃氮气保护下，向甲基4-碘-1H-吡咯-2-羧酸甲酯(9.00克,35.85毫摩尔,1.00当量)的二甲基亚砜(80毫升)的溶液中加入氢氧化钾(14.08克,250.95毫摩尔,7.00当量)。反应液在20℃下反应3小时，然后向反应液中滴加二溴乙烷(53.88克,286.80毫摩尔,8.00当量)。反应液在20℃下反应10小时。反应结束后，反应液倒入水(100毫升)中，用乙酸乙酯(450毫升)萃取3次，合并有机相并用水(150毫升)洗涤3次，用无水硫酸钠干燥，过滤浓缩得到粗品，粗品通过硅胶色谱法(100～200目硅胶，石油醚/乙酸乙酯＝30/1-20/1)纯化得到黄色油状甲基1-(2-溴乙基)-4-碘-1H-吡咯-2-羧酸酯(9.50克,26.54毫摩尔,74.03％收率)。
步骤E：在20℃氮气保护下，向甲基1-(2-溴乙基)-4-碘-1H-吡咯-2-羧酸酯(4.00克,11.17毫摩尔,1.00当量)的乙醇(20毫升)溶液中滴加氨水(14.56克,124.55毫摩尔,11.15当量)，反应液在20℃下搅拌1小时，然后反应液升温到78℃搅拌12小时。反应结束后，反应液减压浓缩，粗品用水(20毫升)稀释然后用乙酸乙酯(150毫升)萃取3次。合并有机相用饱和食盐水(40毫升)洗2次，无水硫酸钠干燥，过滤浓缩。粗品通过硅胶色谱法(100～200目硅胶，二氯甲烷/甲醇＝10/1)纯化得到白色固体7-碘-3,4-二氢吡咯并[1,2-a]吡嗪-1(2H)-酮(1.00克,3.82毫摩尔,34.16％收率)
步骤F：在0℃氮气保护下，向7-碘-3,4-二氢吡咯并[1,2-a]吡嗪-1(2H)-酮(1.90克,7.25毫摩尔,1.00当量)的四氢呋喃(40毫升)溶液中滴加BH3-Me2S(10M,7.25毫升,10.00当量)。反应液在0℃下搅拌30分钟，然后升温到20℃搅拌1小时，最后将温度升温到67℃搅拌12小时。反应结束后，反应液冷却到0℃并用甲醇(5毫升)进行淬灭，然后在67℃下回流4小时。反应液减压浓缩得到黄色固体7-碘-1,2,3,4-四氢吡咯并[1,2-a]吡嗪(1.80g,粗品)
步骤G：在20℃氮气保护下，向7-碘-1,2,3,4-四氢吡咯并[1,2-a]吡嗪(1.80g,7.26mmol,1.00eq)的四氢呋喃(20毫升)溶液中加入三乙胺(3.67克,36.30毫摩尔,5.0当量)和(Boc)2O(3.17克,14.52毫摩尔,2.00当量)，反应液在20℃下搅拌2小时。反应结束后，反应液倒入水(30毫升)中，并用乙酸乙酯(150毫升)萃取3次，合并有机相用饱和食盐水(20毫升)洗涤2次。有机相用无水硫酸钠干燥，过滤浓缩。粗品通过硅胶色谱法(100～200目硅胶，石油醚/乙酸乙酯＝20/1-10/1)纯化得到黄色油状物叔丁基7-碘-3,4-二氢吡咯并[1,2-a]吡嗪-2(1H)-甲酸酯(800.00毫克,2.30毫摩尔31.65％收率)步骤H：根据实施例22步骤J、K、L和M的顺序制备本实施例标题化合物，其中在步骤J中将叔丁基2-溴-7,8-二氢-4H-噻吩[2,3-d]氮杂卓-6(5H)-甲酸酯替换为叔丁基7-碘-3,4-二氢吡咯并[1,2-a]吡嗪 -2(1H)-甲酸酯。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ1.01-1.15(m,9H)；2.29(s,3H)；2.64(t,J＝5.40Hz,2H)；3.19-3.30(m,5H)；3.83(t,J＝5.46Hz,2H)；5.61(s,1H)；6.47(s,1H)；6.69(d,J＝1.51Hz,1H)；6.90(s,1H)；8.79(t,J＝5.52Hz,1H)；9.56(s,1H)；9.70(s,1H).m/z:425.1[M+1].
实施例24
5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(5-异丁基-1-甲基-4,5,6,7-四氢-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基) 异恶唑-3-甲酰胺
反应流程：
步骤A：在氮气保护25摄氏度下，向溶有4,5,6,7-四氢-1H-咪唑[4,5-c]吡啶(4.5克，22.95毫摩尔，1.00当量)的甲醇(50.00毫升)溶液中加入DIPEA(7.42克，57.37毫摩尔，2.50当量)和(Boc)2O(12.52克，57.37毫摩尔，2.50当量)。加完后将反应混合物在25℃下搅拌18小时。反应液用水(20mL)稀释，然后用乙酸乙酯萃取(20毫升×升)。将合并的有机相无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。粗制物用柱层析纯化(PE：EA＝2：1)，得到产物双叔丁基6,7-二氢-1H-咪唑[4,5-c]吡啶-1,5(4H)-二甲酸酯(5.4克，16.70毫摩尔，72.76％产率)，为白色固体。
步骤B：在氮气保护25摄氏度下，向溶有双叔丁基6,7-二氢-1H-咪唑[4,5-c]吡啶-1,5(4H)-二甲酸酯(5.40克，16.70毫摩尔，1.00当量)的甲醇(40.00毫升)溶液中加入1摩尔/升的NaOH(20毫升)。加完后将反应混合物在25℃下搅拌1小时。反应液用水(50mL)稀释，然后用乙酸乙酯萃取(50毫升×升)。将合并的有机相无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。得到产物叔丁基1,4,6,7-四氢-咪唑[4,5-c]吡啶-5-甲酸酯(3.30克，14.78毫摩尔，88.50％产率)，为黄色固体。
步骤C：在氮气保护10摄氏度下，向溶有1,4,6,7-四氢-咪唑[4,5-c]吡啶-5-甲酸酯(3.30克，14.78毫摩尔，1.00当量)的四氢呋喃(30.00毫升)溶液中加入NIS(4.99克，22.17毫摩尔，1.50当量)。加完后将反应混合物在10℃下搅拌1小时。反应液用饱和碳酸氢钠水溶液(15mL)稀释，然后用乙酸乙酯萃取(15毫升×升)。将合并的有机相用水(10毫升)洗涤后无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。得到产物叔丁基2-碘-1,4,6,7-四氢-咪唑[4,5-c]吡啶-5-甲酸酯(4.30克，12.31毫摩尔，83.32％产率)，为黄色固体。
步骤D：在氮气保护10摄氏度下，向溶有叔丁基2-碘-1,4,6,7-四氢-咪唑[4,5-c]吡啶-5-甲酸酯(150毫克，429.59毫摩尔，1.00当量)的四氢呋喃(3.00毫升)溶液中加入氢化钠(34.37毫克，859.18微摩尔，2.00当量)和碘甲烷(630.00毫克，4.44毫摩尔，10.33当量)。加完后将反应混合物在10℃下搅拌16小时。反应液用水溶液(20mL)稀释，然后用乙酸乙酯萃取(20毫升×升)。将合并的有机相用无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。得到产物叔丁基2-碘-1-甲基-6,7-二氢-4H-咪唑[4,5-c]吡啶-5-甲酸酯(150.00毫克，粗品)，为黄色固体。该粗品直接用于下一步。MS(ESI)M/Z：363.9(M+1)。
步骤E：根据实施例22步骤J、K、L和M的顺序制备本实施例标题化合物，其中在步骤J中将叔丁基2-溴-7,8-二氢-4H-噻吩[2,3-d]氮杂卓-6(5H)-甲酸酯替换为叔丁基2-碘-1-甲基-6,7-二氢-4H-咪唑[4,5-c]吡啶-5-甲酸酯。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.26(brs,2H),9.96(s,1H),9.96-10.03(m,1H),6.87(s,1H),6.48(s,1H),3.23-3.26(m,2H),3.15-3.23(m,5H),3.00(t,J＝6.8Hz,1H),260-2.70(m,2H),2.50-2.55(m,2H),2.20-2.35(m,2H),1.75-1.90(brs,1H),1.08(t,J＝7.2Hz,1H),0.99(d,J＝3.6Hz,6H),0.83(d,J＝3.6Hz,6H)..m/z:482[M+1]。
实施例25
5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(3-甲基-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂卓-7-基)异恶唑-3-甲 酰胺
反应流程：
步骤A：在0摄氏度下，向6-溴-3,4-二氢萘-2(1H)-酮(2.25克，10毫摩尔)的甲烷磺酸溶液(20.00毫升)中缓慢分批加入NaN3(1.06克，16毫摩尔)，历时0.5小时。将反应混合物在0℃下搅拌3.5小时，,然后将反应混合物在25℃再搅拌16小时。然后将混合物缓慢滴入饱和的NaHCO3水溶液(100毫升)中，用乙酸乙酯(100毫升x3)萃取。将合并的有机相用用无水硫酸钠干燥，过滤和真空浓缩。残余物通过硅胶色谱法(100～200目硅胶，二氯甲烷/甲醇＝50/1～20/1)纯化，得到7-溴-4,5-二氢-1H-3-苯并[d]氮杂卓-2(3H)-酮(800毫克，33％产率)，为黄色固体。
步骤B：在0摄氏度下，向7-溴-4,5-二氢-1H-3-苯并[d]氮杂卓-2(3H)-酮(800毫克，3.3毫摩尔)的THF溶液(8.00毫升)中滴加入BH3-Me2S(3.3毫升，10M)。将反应混合物在0℃下搅拌1小时，在25℃下搅拌3小时，然后将反应混合物在70℃再搅拌16小时。然后将混合物冷却至0℃，在0摄氏度下，缓慢向反应液中滴加MeOH(4毫升)，并在25℃下搅拌0.5小时。将反应混合液真空浓缩，得到粗品7-溴-2,3,4,5-四氢-1H-3-苯并[d]氮杂卓(800毫克，粗品)，为黄色油状物。
步骤C：在25摄氏度下，向7-溴-2,3,4,5-四氢-1H-3-苯并[d]氮杂卓(800毫克，3.54毫摩尔)的THF溶液(16.00毫升)中加入TEA(1.07克，10.6毫摩尔),随后加入Boc2O(1.16克，10.6毫摩尔)。将反应混合物在25℃下搅拌16小时。将反应混合液真空浓缩，得到粗品。残余物通过硅胶色谱法(200～300目硅胶，石油醚/乙酸乙酯＝30/1～10/1)纯化，叔丁基7-溴-4,5-二氢-1H-苯并[d]氮杂卓-3(2H)-甲酸酯(500毫克，43％产率)，为黄色油状物。MS(ESI)m/z:270,272(M-56+1).
步骤D：根据实施例22步骤J、K、L和M的顺序制备本实施例标题化合物，其中在步骤J中将叔丁基2-溴-7,8-二氢-4H-噻吩[2,3-d]己内胺-6(5H)-甲酸酯替换为叔丁基7-溴-4,5-二氢-1H-苯并[d]氮杂卓-3(2H)-甲酸酯，该产物为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO):δ8.82(t,J＝5.6Hz,1H),7.04(d,J＝8.0Hz,1H), 7.01(s,1H),7.04(dd,J＝1.6,8.0Hz,1H),6.76(s,1H),6.42(s,1H),3.25-3.18(m,2H),3.02-2.94(m,1H),2.86-2.76(m,2H),2.76-2.66(m,2H),2.49-2.40(m,4H),2.26(s,3H),1.07(t,J＝7.2Hz,3H),0.94(d,J＝6.8Hz,6H).MS(ESI)m/z:450(M+1).
实施例26
5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(2-甲基-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[c]氮杂卓-7-基)异恶唑-3-甲酰 胺
反应流程：
步骤A：在0摄氏度下，向6-溴-3,4-二氢萘-2(1H)-酮(2.25克，10毫摩尔)的甲烷磺酸溶液(20.00毫升)中缓慢分批加入NaN3(1.06克，16毫摩尔)，历时0.5小时。将反应混合物在0℃下搅拌3.5小时，,然后将反应混合物在25℃再搅拌16小时。然后将混合物缓慢滴入饱和的NaHCO3水溶液(100毫升)中，用乙酸乙酯(100毫升x3)萃取。将合并的有机相用用无水硫酸钠干燥，过滤和真空浓缩。残余物通过硅胶色谱法(100～200目硅胶，二氯甲烷/甲醇＝50/1～20/1)纯化，得到7-溴-4,5-二氢-1H-苯并[c]氮杂卓-3(2H)-酮(400毫克，17％产率)，为黄色固体。
步骤B：在0摄氏度下，向7-溴-4,5-二氢-1H-苯并[c]氮杂卓-3(2H)-酮(400毫克，1.7毫摩尔)的THF溶液(4.00毫升)中滴加入BH3-Me2S(1.7毫升，10M)。将反应混合物在0℃下搅拌1小时，在 25℃下搅拌3小时，然后将反应混合物在70℃再搅拌16小时。然后将混合物冷却至0℃，在0摄氏度下，缓慢向反应液中滴加MeOH(2毫升)，并在25℃下搅拌0.5小时。将反应混合液真空浓缩，得到粗品7-溴-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[c]氮杂卓(400毫克，粗品)，为黄色油状物。
步骤C：在25摄氏度下，向7-溴-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[c]氮杂卓(400毫克，1.7毫摩尔)的THF溶液(8.00毫升)中加入TEA(537毫克，5.3毫摩尔),随后加入Boc2O(579毫克，5.3毫摩尔)。将反应混合物在25℃下搅拌16小时。将反应混合液真空浓缩，得到粗品。残余物通过硅胶色谱法(200～300目硅胶，石油醚/乙酸乙酯＝30/1～10/1)纯化，叔丁基7-溴-4,5-二氢-1H-苯并[c]氮杂卓-2(3H)-甲酸酯(210毫克，36％产率)，为黄色油状物。MS(ESI)m/z:270,272(M-56+1).
步骤D：根据实施例22步骤J、K、L和M的顺序制备本实施例标题化合物，其中在步骤J中将叔丁基2-溴-7,8-二氢-4H-噻吩[2,3-d]氮杂卓-6(5H)-甲酸酯替换为叔丁基7-溴-4,5-二氢-1H-苯并[c]氮杂卓-2(3H)-甲酸酯。1H NMR(400MHz,DMSO):δ8.83(t,J＝4.8Hz,1H),7.08-7.00(m,2H),6.97-6.97(m,1H),6.80-6.75(m,1H),6.44-6.42(m,1H),3.71(s,2H),3.26-3.16(m,2H),3.02-2.95(m,1H),2.93-2.87(m,1.4H),2.85-2.80(m,0.7H),2.77-2.68(m,2H),2.68-2.66(m,0.5H),2.26-2.16(m,3H),1.65-1.55(m,1.4H),1.07(t,J＝7.2Hz,3H),0.96-0.92(m,6H).MS(ESI)m/z:450(M+1).
实施例27
3-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(3-甲基-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂卓-7-基)异恶唑-5-甲酰胺
反应流程：
步骤A：在15-25℃氮气保护下，向3-(2,4-二苄氧基-5-异丙基-苯基)-N-乙基-4-碘-异恶唑-5-甲酰胺(300毫克，503微摩尔，1.00当量)的DMF(7.5毫升)溶液中加入叔丁基7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-1,2,4,5-四氢-苯并氮杂卓-3-甲酸酯(282毫克，754微摩尔，1.5当量)，水(1.5毫升)，碳酸钾(348毫克，2.5毫摩尔，5.0当量)，随后加入Pd(PPh3)2Cl2(71毫克，101微摩尔，0.2当量)。混合物在80℃下搅拌2小时。将反应混合物冷却到15-25℃，倒入水(30毫升)中并用EA萃取(30毫升×升)。将合并的有机层干燥，过滤并浓缩，得到粗品。使粗品通过柱层析(PE:EA＝10:1to3:1).纯化。得到叔丁基-7(3-(2,4-二苄氧基-5-异丙基苯基)-5-(乙基氨基甲酰基)异恶唑-4-基)-1,2,4,5-四氢-3-苯并氮杂卓-3-甲酸酯(200毫克，179微摩尔，36％产率)，为黄色油状物。(ESI)M/Z：716(M+1)，660(M-56+1)。
步骤B：在25℃下，将HCl/MeOH(4M，2.00毫升)加入到叔丁基-7(3-(2,4-二苄氧基-5-异丙基苯基)-5-(乙基氨基甲酰基)异恶唑-4-基)-1,2,4,5-四氢-3-苯并氮杂卓-3-甲酸酯(200毫克，279微摩尔，1.0当量)的MeOH(2.00毫升)溶液中。混合物在25℃下搅拌1小时。在40℃浓缩该混合物得到粗品。粗品溶解到DCM(10毫升)，向该溶液中加入NaHCO3(1g)，搅拌1小时。该混合液过滤，浓缩得到粗品。粗品经制备TLC(DCM:MeOH＝10:1)纯化得到产物3-(2,4-二苄氧基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(2,3,4,5-四氢-1H-3-苯并氮杂卓-7-基)异恶唑-5-甲酰胺(100毫克，162微摩尔，58％产率)，为黄色油状物。MS(ESI)m/z:616(M+1).
步骤C：向3-(2,4-二苄氧基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(2,3,4,5-四氢-1H-3-苯并氮杂卓-7-基)异恶唑-5-甲酰胺(100毫克，162微摩尔，1.0当量)的MeOH(5毫升)溶液中加入甲醛水溶液(211毫克，162微摩尔，1.0当量,40％含量)和AcOH(10毫克，16微毫摩尔，1.0当量)。将混合物在25℃下搅拌10分钟，然后加入NaBH3CN(31毫克，487微摩尔，3.0当量)。将反应在25℃下继续搅拌50分钟，混合物浓缩得到粗品。粗品经制备TLC(DCM:MeOH＝10:1)纯化，得到产物3-(2,4-二苄氧基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(3-甲基-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂卓-7-基)异恶唑-5-甲酰胺(80毫克，127微摩尔，78％产率)，为无色油状物。MS(ESI)m/z:630(M+1).
步骤D：在0℃下，向3-(2,4-二苄氧基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(3-甲基-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂卓-7-基)异恶唑-5-甲酰胺(60毫克，95微摩尔，1.0当量)的DCM(5毫升)溶液中加入BCl3(1M，952微升，10.0当量)的DCM溶液，在0℃下搅拌2小时后，升温至15-25℃下搅拌1小时。将反应混合物冷却至0℃，加入MeOH(2mL)，并在0℃下搅拌0.5小时，15-25℃下再搅拌0.5小时。将混合物浓缩，得到粗品。粗品通过制备型HPLC(0.225％FA-ACN；Phenomenex Synergi Max-RP 250*80 10u)纯化，得到3-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(3-甲基-2,3,4,5-四氢-1H-苯并[d]氮杂卓-7-基)异恶唑-5-甲酰胺(20毫克，41微摩尔，43％产率)。1H NMR(400MHz,DMSO):δ10.84(brs,1H),9.59(s, 1H),9.27(s,1H),8.91-8.89(m,1H),7.14-7.10(m,2H),7.03(d,J＝7.2Hz,1H),6.79(s,2H),6.37(s,1H),3.71(s,2H),3.25-3.16(m,5H),3.04-2.80(m,5H),2.78(s,3H),1.08(t,J＝6.8Hz,3H),1.01(d,J＝6.8Hz,6H).MS(ESI)m/z:450(M+1).
实施例28
3-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(2,3,4,5-四氢-1H-3-苯并氮杂卓-7-基)异恶唑-5-甲酰胺
反应流程：
步骤A：在0℃下，向3-(2,4-二苄氧基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(2,3,4,5-四氢-1H-3-苯并氮杂卓-7-基)异恶唑-5-甲酰胺(130毫克，211微摩尔，1.0当量)的DCM(10毫升)溶液中加入BCl3(1M，2.1毫升，10.0当量)的DCM溶液，在0℃下搅拌2小时后，升温至15-25℃下搅拌1小时。将反应混合物冷却至0℃，加入MeOH(4mL)，并在0℃下搅拌0.5小时，15-25℃下再搅拌0.5小时。将混合物浓缩，得到粗品。粗品通过制备型HPLC(0.225％FA-ACN；Phenomenex Synergi Max-RP 250*80 10u)纯化，得到3-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(2,3,4,5-四氢-1H-3-苯并[d]氮杂卓-7-基)异恶唑-5-甲酰胺(54毫克，113微摩尔，54％产率)。1H NMR(400MHz,DMSO):δ9.58(s,1H),9.29(brs,2H),9.26(s,1H),8.90(t,J＝5.6Hz,1H),7.12-7.10(m,2H),7.03(d,J＝7.6Hz,1H),6.76(s,1H),6.38(s,1H),3.26-3.21(m,2H),3.12-3.00(m,9H),1.09(t,J＝7.2Hz,3H),1.00(d,J＝6.8Hz,6H).MS(ESI)m/z:436(M+1).
实施例29
3-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(异喹啉-6-基)异恶唑-5-甲酰胺
反应流程：
步骤A：在25℃氮气保护下，向6-溴异喹啉(250毫克，1.2毫摩尔)的二氧六环(150毫升)溶液中加入双联片呐醇硼酸酯(366毫克，1.4毫摩尔)和KOAc(354毫克，3.6毫摩尔)，随后加入催化剂Pd(dppf)Cl2.CH2Cl2(294毫克，360微摩尔)。混合物在25℃下搅拌10分钟，然后加热至90℃并搅拌17小时。将混合物冷却至25℃，并在减压下浓缩，得到6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊环-2-基)异喹啉(300毫克，粗品)，为黑色固体，直接用于下一步。MS(ESI)M/Z：274(M+1)。
步骤B：在25℃氮气保护下，向6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊环-2-基)异喹啉(128毫克，503微摩尔)和3-(2,4-二苄氧基-5-异丙基-苯基)-N-乙基-4-碘-异恶唑-5-甲酰胺(200毫克，335微摩尔)的DMF(20毫升)混合物溶液中加入K2CO3(231毫克，1.7毫摩尔)，H2O(5.0毫升)和Pd(PPh3)2Cl2(71毫克，101微摩尔)。将混合物在25℃下搅拌10分钟，然后加热至90℃并搅拌17小时。混合物冷却至25℃，倒入水(50毫升)中并用EA萃取(100毫升×升)。将合并的有机层干燥，过滤并浓缩，得到粗品。使粗品通过柱层析(PE:EA＝5:1to 2:1).纯化，得到3-(2,4-二苄氧基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(异喹啉-6-基)异恶唑-5-甲酰胺(180毫克，90％收率)，为棕色固体。
步骤C：在0℃下，向3-(2,4-二苄氧基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(异喹啉-6-基)异恶唑-5-甲酰胺(180毫克，301微摩尔，1.0当量)的DCM(10毫升)溶液中加入BCl3(1M，3.1毫升，10.0当量)的DCM溶液，在0℃下搅拌2小时后，升温至15-25℃下搅拌12小时。将反应混合物冷却至0℃，加入MeOH(6mL)，并在0℃下搅拌0.5小时，15-25℃下再搅拌0.5小时。将混合物浓缩，得到粗品。粗品通过制备TLC(PE:EA＝1:1)纯化，得到3-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(异喹啉-6-基)异恶唑-5-甲酰胺(15毫克，32微摩尔，10％产率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)ppm:0.83(d,J＝6.90Hz,10H)；2.95-3.06(m,1H)；3.36(q,J＝7.28Hz,2H)；6.27(s,1H)；6.79(s,1H)；7.58-7.64(m,1H)；7.74(d,J＝5.77Hz,1H)；7.87(s,1H)；8.07(d,J＝8.53Hz,1H)；8.41(d,J＝5.90Hz,1H)；9.23(s,1H)..MS(ESI)m/z:418(M+1).
实施例30
5-(2,4-二羟基-5-溴-苯基)-N-乙基-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-5-甲酰胺
反应流程：
步骤A：在氮气保护20摄氏度下，向1-(2,4-二羟基苯基)乙酮(50.00克，329毫摩尔，1.00当量)和苄溴(124克，723毫摩尔，2.2当量)的CH3CN(500毫升)混合物中加入碳酸钾(100克，723毫摩尔，2.2当量)。混合物在80℃下搅拌18小时。反应液冷却至室温后过滤，反应液减压浓缩得到粗品。粗品在石油醚中打浆30分钟。过滤收集固体，干燥得到1-(2,4-二苄氧基苯基)乙酮(105克，316毫摩尔，96％产率)为白色固体。(MS:(M+1)＝333.0)。
步骤B：在氮气保护0摄氏度下，向1-(2,4-二苄氧基苯基)乙酮(50.00克，150毫摩尔，1.00当量)的DMF(150毫升)混合物中加入NBS(27克，150毫摩尔，1.0当量)。混合物在25℃下搅拌3小时。反应液倒入水(200毫升)中，过滤收集固体，干燥得到1-(2,4-二苄氧基-5-溴-苯基)乙酮(61克，148毫摩尔，98％产率)为白色固体。(MS:(M+1)＝411.1,413.1)
步骤C：在氮气保护20摄氏度下，向乙醇(400毫升)中分批加入金属钠(10.2克，445毫摩尔，3.0当量)并搅拌1小时。随后分批加入1-(2,4-二苄氧基-5-溴-苯基)乙酮(61.0克，148毫摩尔，1.0当量)，最后加入草酸二甲酯(32.5克，222毫摩尔，1.5当量)。将反应混合物在80℃下再搅拌2小时后冷却至65℃加入冰醋酸(30毫升)并将反应液倾入冰水(800毫升)中，搅拌至冷却。过滤收集固体，固体用水(500毫升)洗一次，真空干燥，得到产物2-羟基-4-(5-溴-2,4-二甲氧基-苯基)-4-氧代-丁酸乙酯(32克，63毫摩尔，42％收率)，为黄色固体。
步骤D：在室温氮气保护下，向2-羟基-4-(5-溴-2,4-二甲氧基-苯基)-4-氧代-丁酸乙酯(32克， 63毫摩尔，1.00当量)的EtOH(320毫升)溶液中加入NH2OH·HCl(5.2克，75毫摩尔，1.2当量)。混合物加热到80摄氏度，并搅拌3小时。将混合物冷却至室温，过滤收集固体，固体用水(150毫升*2)洗和乙醇(150毫升*2)，真空干燥，得到5-(5-溴-2,4-二甲氧基-苯基)-异恶唑-3-羧酸乙酯(23克，45毫摩尔纯化，72％产率)，为黄色固体。(MS:(M+1)＝508.1,510.2)
步骤E：室温下向5-(5-溴-2,4-二甲氧基-苯基)-异恶唑-3-羧酸乙酯(23克，45毫摩尔，1.00当量)的EtOH溶液(200毫升)溶液中加入乙胺(17克，384毫摩尔，8.5当量)。将反应混合物在80℃下搅拌12小时。。将反应混合物冷却至室温，析出固体。过滤收集固体，固体用乙醇(50毫升*2)洗，真空干燥，得到产物N-乙基-5-(5-溴-2,4-二甲氧基苯基)异恶唑-3-甲酰胺(13克，26毫摩尔，58％产率)，为黄色固体。
步骤F：在室温N2保护下，向5-(2,4-二苄氧基-5-溴-苯基)-N-乙基-异恶唑-3-甲酰胺(2.0克，3.9毫摩尔，1.0当量)的MeCN(20mL)溶液中，加入CAN(432毫克，788微摩尔，0.1当量)和NIS(1.3克，2.9毫摩尔，1.5当量)。混合物加热至50摄氏度并搅拌12小时。将混合物冷却至室温并倾入饱和Na2S2O3水溶液(40毫升)中，水相用EA(20毫升x3)萃取。合并的有机相用饱和盐水(50mLx)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤和真空浓缩干燥。残余物通过硅胶色谱(PE/EA＝3/1)纯化，得到5-(2,4-二苄氧基5-溴-苯基)-N-乙基-4-碘-异恶唑-3-甲酰胺(2.4克，3.8毫摩尔，98％产率)，为棕色油状物。MS:[M+1]＝633.0,635.0)。
步骤G：在25℃氮气保护下，向2-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊环-2-基)-1,2,3,4-四氢异喹啉(1.8克，4毫摩尔)和5-(2,4-二苄氧基5-溴-苯基)-N-乙基-4-碘-异恶唑-3-甲酰胺(2.5克，3.9毫摩尔)的DMF(25.0毫升)混合物溶液中加入NaHCO3(1.3克，15.5毫摩尔)，H2O(2.5毫升)和Pd(PPh3)2Cl2(407毫克，580微摩尔)。将混合物在25℃下搅拌10分钟，然后加热至80℃并搅拌12小时。混合物冷却至25℃，并倾入水(50毫升)中，水相用EA(30毫升x2)萃取。合并的有机相用饱和盐水(50mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法纯化(200-300目硅胶，DCM/MeOH＝100:1to 20:1)，得到5-(2,4-二苄氧基-5-溴-苯基)-N-乙基-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰胺(2.0克，60％收率)，为黄色固体。
步骤H：在0℃氮气保护下，向5-(2,4-二苄氧基-5-溴-苯基)-N-乙基-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰胺(300毫克，345微摩尔)的二氯甲烷(20.00毫升)混合物溶液中滴加入BCl3/DCM(1.3毫升，1.0摩尔/升)。将混合物在0℃搅拌1小时。往混合物中滴加甲醇(3毫升)，并在减压下浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化(formic acid,Column:Phenomenex Synergi Max-RP 250*80 10u,Condition:0.225％FA-ACN)，得到5-(2,4-二羟基-5-溴-苯基)-N-乙基-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰胺(96毫克，59％收率)。1H NMR(DMSO-d6,300MHz)δ:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝10.81(s,1H),10.73(br.s.,1H),10.29(s,1H),8.94(t,J＝5.65Hz,1H),7.29(s,1H),7.06-7.19(m,3H), 6.70(s,1H),4.38-4.50(m,1H),4.25(dd,J＝15.43,8.16Hz,1H),3.59(br.s.,1H),3.19-3.32(m,3H),3.07-3.19(m,1H),2.83-2.97(m,4H),1.09(t,J＝7.15Hz,3H).MS(ESI)M/Z：472，474(M+1)。
实施例31
5-(2,4-二羟基-5-氯-苯基)-N-乙基-4-(2-甲基-1,2,3,4四氢异喹啉-6-基)异恶唑-5-甲酰胺
反应流程：
步骤A：根据实施例30步骤B、C、D、E、F、G和H的顺序制备本实施例标题化合物，其中在步骤B中将NBS替换为NCS，该产物为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝10.72(br.s.,1H),10.23(br.s.,1H),8.95(t,J＝5.65Hz,1H),7.05-7.18(m,4H),6.67(br.s.,1H),4.45(d,J＝14.31Hz,1H),4.25(dd,J＝15.43,8.41Hz,1H),3.60(br.s.,1H),3.18-3.34(m,3H),3.10(br.s.,1H),2.89(br.s.,4H),1.09(t,J＝7.15Hz,3H).MS:[M+1]＝428.
实施例32
5-(2,4-二羟基-5-甲基苯基)-N-乙基-4-(2-甲基-1,2,3,4四氢异喹啉-6-基)异恶唑-5-甲酰胺
反应流程：
步骤A：在25℃氮气保护下，向N-乙基-5-(5-溴-2,4-二甲氧基苯基)异恶唑-3-甲酰胺(1.0克，2.0微摩尔)和甲基硼酸(177毫克，3.0毫摩尔)的二氧六环(10.0毫升)混合物溶液中加入Cs2CO3(1.3克，4毫摩尔)和Pd(dppf)2Cl2(288毫克，400微摩尔)。将混合物在25℃下搅拌10分钟，然后加热至90℃并搅拌2小时。混合物冷却至25℃，并倾入水(10毫升)中，水相用EA(5毫升x3)萃取。合并的有机相用饱和盐水(50mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法纯化(200-300目硅胶，石油醚/乙酸乙酯＝3/1)，得到5-(5-甲基-2,4-二苄氧基苯基)-N-乙基-异恶唑-3-甲酰胺(740毫克，85％收率)，为黄色固体。MS(ESI)M/Z：443(M+1)。
步骤B：在室温N2保护下，向5-(5-甲基-2,4-二苄氧基苯基)-N-乙基-异恶唑-3-甲酰胺(740毫克，1.7毫摩尔，1.0当量)的MeCN(30mL)溶液中，加入CAN(92毫克，167微摩尔，0.1当量)和NIS(488毫克，2.2毫摩尔，1.3当量)。混合物加热至80摄氏度并搅拌12小时。将混合物冷却至室温并倾入水(30毫升)中，水相用EA(20毫升x3)萃取。合并的有机相用饱和盐水(50mLx3)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤和真空浓缩干燥。残余物通过硅胶色谱(PE/EA＝3/1)纯化，得到5-(5-甲基-2,4-二苄氧基苯基)-N-乙基-4-碘-异恶唑-3-甲酰胺(450毫克，792毫摩尔，47.0％产率)，为黄色油状物。
步骤C：在25℃氮气保护下，向2-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊环-2-基)-1,2,3,4-四氢异喹啉(309毫克，679微摩尔)和5-(5-甲基-2,4-二苄氧基苯基)-N-乙基-4-碘-异恶唑-3-甲酰胺(450毫克，721微摩尔)的二氧六环(5.0毫升)混合物溶液中加入NaHCO3(228毫克，2.7毫摩尔)，H2O(1.0毫升)和Pd(PPh3)2Cl2(71毫克，102微摩尔)。将混合物在25℃下搅拌10分钟，然后加热至80℃并搅拌12小时。混合物冷却至25℃，并倾入水(50毫升)中，水相用EA(40毫升x3)萃取。合并的有机相用饱和盐水(50mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法纯化(200-300目硅胶，石油醚/乙酸乙酯＝50/1，3/1)，得到5-(5-甲基-2,4-二苄氧基苯基)-N-乙基-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰胺(280毫克，70％收率)，为黄色油状物。MS (ESI)M/Z：588(M+1)。
步骤D：在0℃氮气保护下，向5-(5-甲基-2,4-二苄氧基苯基)-N-乙基-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰胺(280毫克476微摩尔)的二氯甲烷(10.00毫升)混合物溶液中滴加入BCl3/DCM(1.8毫升，1.0摩尔/升)。将混合物在0℃搅拌1小时。往混合物中滴加甲醇(4毫升)，并在减压下浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化(formic acid,Column:Phenomenex Synergi Max-RP 250*80 10u,Condition:0.225％FA-ACN)，得到5-(5-甲基-2,4-二羟基苯基)-N-乙基-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰胺(57毫克，29％收率)。1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝8.90(t,J＝5.52Hz,1H),8.17(s,1H),7.01-7.10(m,1H),6.95(s,2H),6.90(s,1H),6.42(s,1H),3.47(s,2H),3.23(quin,J＝6.78Hz,2H),2.67-2.75(m,2H),2.57-2.63(m,2H),2.34(s,3H),1.98(s,3H),1.09(t,J＝7.15Hz,3H)MS(ESI)M/Z：408(M+1)。
实施例33
5-(5-异丁基-2,4-二羟基-苯基)-N-乙基-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰胺
反应流程：
步骤A：在25℃氮气保护下，向5-(2,4-二苄氧基-5-溴-苯基)-N-乙基-异恶唑-3-甲酰胺(2.00克，3.94毫摩尔,1当量)和异丁基硼酸(803.67毫克，7.88毫摩尔,2当量)的甲苯(50毫升)混合物溶液中加入Na2CO3(835.60毫克，7.88毫摩尔,2当量)，H2O(2.0毫升)和Pd(dppf)2Cl2(576.86毫克，788.00毫摩尔，0.2当量)。将混合物加热至120℃并搅拌18小时。混合物通过硅藻土过滤，并在减压下浓缩。 将残余物通过硅胶色谱法纯化(石油醚/乙酸乙酯＝6/1)，得到5-(2,4-二苄氧基-5-异丁基-苯基)-N-乙基-异恶唑-3-甲酰胺(500.00毫克，26.19％收率)，为白色固体。
步骤B：在室温N2保护下，向5-(2,4-二苄氧基-5-异丁基-苯基)-N-乙基-异恶唑-3-甲酰胺(500.00毫克，1.03毫摩尔，1.0当量)的MeCN(50mL)溶液中，加入CAN(54.67毫克，103.00微摩尔，0.10当量)和NIS(463.46毫克，2.06毫摩尔，2.00当量)。混合物加热至10摄氏度并搅拌18小时。将混合物冷却至室温并倾入Na2SO3水溶液(40毫升)中，水相用EA(30毫升x3)萃取。合并的有机相用无水硫酸钠干燥，过滤和真空浓缩干燥。将残余物通过硅胶色谱法纯化(石油醚/乙酸乙酯＝3/1)，得到5-(2,4-二苄氧基-5-异丁基-苯基)-N-乙基-4-碘-异恶唑-3-甲酰胺(400.00毫克，655.22微摩尔，63.61％产率)，为白色固体。
步骤C：在25℃氮气保护下，向5-(2,4-二苄氧基-5-异丁基-苯基)-N-乙基-4-碘-异恶唑-3-甲酰胺(400毫克，655.22毫摩尔,1当量)和2-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊环-2-基)-1,2,3,4-四氢异喹啉(268.49毫克，982.83微摩尔,1.5当量)的二氧六环(2.50毫升)混合物溶液中加入NaHCO3(165.14毫克，7.88毫摩尔,2当量)，H2O(0.5毫升)和Pd(PPh3)2Cl2(45.99毫克，65.52微摩尔，0.10当量)。将混合物加热至90℃并搅拌3小时。混合物通过硅藻土过滤，并在减压下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法纯化(二氯甲烷/甲醇＝6/1)，得到5-(5-异丁基-2,4-二苄氧基-苯基)-N-乙基-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰胺(300.00毫克，crude)，为黄色固体。
步骤D：在-20℃氮气保护下，向5-(5-异丁基-2,4-二苄氧基-苯基)-N-乙基-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰胺(150.00毫克238.17微摩尔)的二氯甲烷(10.00毫升)混合物溶液中滴加入BCl3/DCM(1毫升，1.0摩尔/升)。将混合物于-20℃搅拌1小时。往混合物中滴加甲醇(2毫升)，并在减压下浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化(formic acid,Column:Phenomenex Synergi Max-RP250*8010u,Condition:0.225％FA-ACN)，得到5-(5-异丁基-2,4-二羟基-苯基)-N-乙基-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰胺(28.20毫克，26.34％收率)。1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ8.87(t,J＝5.6Hz,1H),6.95(d,J＝4.4Hz,1H),6.71(s,1H),6.42(s,1H),6.82(s,1H),6.42(s,1H),3.45(s,2H),3.20-3.25(m,2H),2.68(d,J＝5.2Hz,2H),2.53-2.60(m,2H),2.50(s,3H),2.18-2.35(m,2H),1.68(dd,J＝6.8Hz,2H),1.07(t,J＝7.2Hz,3H),0.72(d,J＝6.8Hz,6H).MS(ESI)M/Z：450.3(M+1)。
实施例34
5-(5-乙基-2,4-二羟基-苯基)-N-乙基-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰胺
反应流程：
步骤A：在25℃氮气保护下，向5-(2,4-二苄氧基-5-溴-苯基)-N-乙基-异恶唑-3-甲酰胺(1克，1.97毫摩尔)的四氢呋喃(40毫升)和水(4毫升)溶液中加入乙烯基三氟硼酸钾(316.81毫克，2.36毫摩尔)和碳酸铯(1.93克，5.91毫摩尔)。混合物加热至80℃并搅拌12小时。将混合物冷却至25℃并倾入水(30毫升)中，水相用EA(30毫升x2)萃取。合并的有机相用水(50mL)和饱和盐水(40mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤和真空浓缩干燥。并在减压下浓缩。残余物通过硅胶色谱法(100～200目硅胶，石油醚/乙酸乙酯＝3/1)，得到标题产物(700.00毫克，78.17％产率)，为黄色固体。(MS:[M+1]＝455.1)。
步骤B：在25℃氢气保护下，向5-(2,4-二苄氧基-5-乙烯基-苯基)-N-乙基-异恶唑-3-甲酰胺(0.7克，1.54毫摩尔)的甲醇(20毫升)溶液中加入三三苯基磷氯化铑(71.25毫克，77微摩尔)。混合物加热至50℃于50psi下搅拌12小时。将混合物冷却至25℃，过滤后减压浓缩。残余物用水(20毫升)稀释中，水相用EA(10毫升x2)萃取。合并的有机相用饱和盐水(30mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤和真空浓缩干燥。并在减压下浓缩。残余物通过硅胶色谱法(100～200目硅胶，石油醚/乙酸乙酯＝2/1)，得到标题产物(600.00毫克,85.06％产率)，为黄色固体。(MS:[M+1]＝457.1)
步骤C：在25℃氮气保护下，向5-(2,4-二苄氧基-5-乙基-苯基)-N-乙基-异恶唑-3-甲酰胺(0.6克，1.31毫摩尔)的乙腈(20毫升)溶液中加入碘代丁二酰亚胺(442.09毫克，1.96毫摩尔)。混合物于25℃下搅拌12小时。将混合物冷却至25℃，过滤后减压浓缩后加入硫代硫酸钠(30mL)。水相用EA(20毫升x2)萃取。合并的有机相用饱和盐水(40mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤和真空浓缩干燥。并在减压下浓缩。残余物通过硅胶色谱法(100～200目硅胶，石油醚/乙酸乙酯＝3/1)，得到标题产物(420.00毫克，55.05％产率)，为黄色固体。(MS:[M+1]＝583.1)
步骤D：在25℃氮气保护下，向5-(2,4-二苄氧基-5-乙基-苯基)-N-乙基-4-碘-异恶唑-3-甲酰胺(320毫克，549微摩尔,1当量)和2-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊环-2-基)-1,2,3,4-四氢异喹啉(250毫 克，549微摩尔,1.0当量)的二氧六环(5.0毫升)混合物溶液中加入NaHCO3(184毫克，220微摩尔,4.0当量)，H2O(1.0毫升)和Pd(PPh3)2Cl2(39毫克，55微摩尔，0.10当量)。将混合物加热至80℃并搅拌12小时。混合物通过硅藻土过滤，并在减压下浓缩。将残余物通过制备型TLC纯化(二氯甲烷/甲醇＝10/1)，得到5-(5-乙基-2,4-二苄氧基-苯基)-N-乙基-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰胺(67.00毫克，111微摩尔，20％收率)，为棕色固体。MS:[M+1]＝602.3
步骤E：在25℃氮气保护下，向5-(5-乙基-2,4-二苄氧基-苯基)-N-乙基-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰胺(100.00毫克166微摩尔)的二氯甲烷(10.00毫升)混合物溶液中滴加入BCl3/DCM(5毫升，1.0摩尔/升)。将混合物于25℃搅拌0.5小时。往混合物中滴加甲醇(10毫升)，并在减压下浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化，得到5-(5-乙基-2,4-二羟基-苯基)-N-乙基-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰胺(15毫克，36微摩尔，21％收率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝8.90(t,J＝5.52Hz,1H),7.14(s,1H),7.09(br.s.,2H),6.85(s,1H),6.43(s,1H),3.50(br.s.,2H),3.18-3.25(m,2H),2.89(s,3H),2.46(br.s.,2H),2.30-2.41(m,4H),1.08(t,J＝7.15Hz,3H),0.98(t,J＝7.40Hz,3H)MS(ESI)M/Z：422(M+1)。
实施例35
5-(5-环丙基-2,4-二羟基-苯基)-N-乙基-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰胺
反应流程：
步骤A：在25℃氮气保护下，向溶有5-(2,4-苄氧基-5-溴-苯基)-N-乙基-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)-异恶唑-3-甲酰胺(1.10克,1.69毫摩尔,1.00当量)的PhMe(10.00毫升)和H2O(2.1毫升)混合溶液中加入环丙基硼酸(217.76毫克,2.54毫摩尔,1.50当量)K3PO4(717.47毫克,3.38毫摩尔,2.00当量)和Pd(OAc)2(75.88毫克,338.00微摩尔,0.20当量)。混合物在25℃下搅拌20分钟，然后加热 至90℃并搅拌12小时。将混合物冷却至25℃，将反应液倒入氯化铵溶液(20毫升)中，并搅拌10分钟。水相用乙酸乙酯萃取(10毫升×升)。将合并的有机相用饱和盐水(10毫升×升)，用无水硫酸钠干燥，过滤和真空浓缩。将残余物通过薄层层析板纯化(二氯甲烷：乙酸乙酯＝100/1～10/1)，得到5-(2,4-苄氧基-5-环丙基-苯基)-N-乙基-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)-异恶唑-3-甲酰胺(300.00毫克,488.81微摩尔,28.92％收率)，为黑色油状物
步骤B：在0℃氮气保护下，向5-(2,4-苄氧基-5-环丙基-苯基)-N-乙基-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)-异恶唑-3-甲酰胺(300毫克489微摩尔)的二氯甲烷(30.00毫升)混合物溶液中滴加入BCl3/DCM(1.9毫升，1摩尔/升)。将混合物在0℃搅拌1小时。往混合物中滴加甲醇(4毫升)，并在减压下浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化(formic acid,Column:Phenomenex Synergi Max-RP 250*80 10u,Condition:0.225％FA-ACN)，得到5-(2,4-二羟基-5-环丙基-苯基)-N-乙基-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)-异恶唑-3-甲酰胺(22毫克，10％收率)。1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝8.80-8.86(m,1H),6.90-7.01(m,3H),6.51(s,1H),6.42(s,1H),3.44(s,2H),3.16-3.27(m,2H),2.67-2.76(m,3H),2.55-2.60(m,3H),2.32(s,3H),2.27(br.s.,1H),1.08(t,J＝7.16Hz,3H),0.70(d,J＝8.29Hz,2H),0.28(d,J＝4.14Hz,2H).MS(ESI)M/Z：434(M+1)。
实施例36
5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-甲基-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰胺
反应流程：
步骤A：在室温N2保护下，向乙基-5-(2,4-二苄氧基-5-异丙基-苯基)异恶唑-3-甲酸酯(4.00克，8.5毫摩尔，1.0当量)的MeCN(50mL)溶液中，加入CAN(465毫克，848微摩尔，0.1当量)和NIS(7.63克,，34.0毫摩尔，4.0当量)。混合物加热至90摄氏度并搅拌12小时。将混合物冷却至室温并倾入水(40毫升)中，水相用EA(50毫升x2)萃取。合并的有机相用饱和盐水(20mLx2)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤和真空浓缩干燥。残余物通过硅胶色谱(PE/EA＝10/1～4/1)纯化，得到乙基-5-(2,4-二苄氧基-5-异丙基-苯基)-4-碘-异恶唑-3-羧酸酯(3.40克)，为黄色固体。MS(ESI)M/Z：(M+1)。
步骤B：在25℃氮气保护下，向2-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊环-2-基)-1,2,3,4-四氢异喹啉(2.47克，9.0毫摩尔)和乙基-5-(2,4-二苄氧基-5-异丙基-苯基)-4-碘-异恶唑-3-羧酸酯(2.70克，4.5毫摩尔)的二氧六环(30毫升)混合物溶液中加入NaHCO3(1.52克，18.0毫摩尔)，H2O(6.0毫升)和Pd(PPh3)4(1.26克，1.80mmol)。将混合物在25℃下搅拌10分钟，然后加热至110℃并搅拌18小时。混合物冷却至25℃，并在减压下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法纯化(200-300目硅胶，石油醚/乙酸乙酯，二氯甲烷/甲醇＝5/1，10/1)，得到乙基-5-(2,4-二苄氧基-5-异丙基-苯基)-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酸酯(1.4克)黄色油状物。MS(ESI)M/Z：617(M+1)。
步骤C：在20℃下，向乙基-5-(2,4-二苄氧基-5-异丙基-苯基)-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酸酯的THF(15毫升)/H2O(15毫升)混合物溶液中加入LiOH(101毫克，4.2毫摩尔)。将混合物在20℃下搅拌2小时。混合物用HCl调节pH到6，用EA(30毫升x3)萃取。合并的有机相用无水硫酸钠干燥，过滤和真空浓缩干燥。得到粗品5-(2,4-二苄氧基-5-异丙基-苯基)-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酸(1克)棕色固体。MS(ESI)M/Z：589(M+1)。
步骤D：在20℃下，向5-(2,4-二苄氧基-5-异丙基-苯基)-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酸(200毫克，340微摩尔)的DMF(5毫升)溶液中加入DIPEA(220毫克，1.7毫摩尔)和HATU(194毫克，510微摩尔)。将混合物在20℃下搅拌0.5小时。随后加入甲胺盐酸盐(30毫克，441微摩尔)，该反应液在20℃下搅拌1小时。向反应液中加入H2O(20毫升),析出固体。固体通过过滤收集，用水(5毫升)洗，干燥，得到5-(2,4-二苄氧基-5-异丙基-苯基)-N-甲基-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰胺(120克)黄色固体。MS(ESI)M/Z：602(M+1)。
步骤E：在0℃下，向5-(2,4-二苄氧基-5-异丙基-苯基)-N-甲基-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰胺(120毫克，199微摩尔，1.0当量)的DCM(5毫升)溶液中加入BCl3(1M，2毫升，10.0当量)。将混合物在20℃搅拌12小时后，加入5mL的MeOH淬灭，并将该混合物真空浓缩，得到粗品。粗产物通过制备型HPLC纯化，得到5-(2,4-羟基-5-异丙基-苯基)N-甲基-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰胺(38毫克，34％收率)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.75(s,1H),9.85(s,1H),9.72(s,1H),8.81(s,1H),7.14-7.08(m,3H),6.86(s,1H),6.46(s,1H),4.41-4.23(m,2H),3.59 (brs,1H),3.04-2.99(m,4H),2.87(s,3H),2.73(s,3H),1.00(d,J＝6.8Hz,6H).MS(ESI)M/Z：422(M+1)。
实施例37
5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-丙基-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰胺
反应流程：
步骤A：根据实施例36步骤D和E的顺序制备本实施例标题化合物，其中在步骤D中将甲胺盐酸盐替换为丙氨，该产物为淡黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.87(s,1H),9.84(s,1H),9.71(s,1H),8.89(t,J＝6.0Hz,1H),7.14-7.08(m,3H),6.88(s,1H),6.48(s,1H),4.45-4.21(m,2H),3.58(brs,1H),3.19-3.14(m,4H),3.05-3.01(m,2H),2.86(s,3H),1.52-1.46(m,2H),1.01(d,J＝6.8Hz,6H),0.86(t,J＝7.2Hz,3H).MS(ESI)M/Z：450(M+1)。
实施例38
5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-异丙基-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰胺
反应流程：
步骤A：根据实施例36步骤D和E的顺序制备本实施例标题化合物，其中在步骤D中将甲胺盐酸盐替换为丙烷-2-氨，该产物为淡黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.41(s,1H),9.80(s,1H),9.66(s,1H),8.81(d,J＝7.6Hz,1H),7.14-7.08(m,3H),6.87(s,1H),6.45(s,1H),4.46-4.24(m,2H),4.01(q,J＝6.8Hz,1H),3.60(brs,1H),3.06-2.99(m,2H),2.89(brs,5H),1.13(d,J＝6.4Hz,6H),1.01(d,J＝7.2Hz,6H).MS(ESI)M/Z：450(M+1)。
实施例39
5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-(2,2,2-三氟乙基)-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰胺
反应流程：
步骤A：根据实施例36步骤D和E的顺序制备本实施例标题化合物，其中在步骤D中将甲胺盐酸盐替换为2,2,2-三氟乙胺。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δδ10.85(brs,1H),9.88(s,1H),9.76(s,1H),9.64(t,J＝6.4Hz,1H),7.11-7.06(m,3H),6.89(s,1H),6.48(s,1H),4.23(brs,2H),4.09-4.05(m,2H),3.04-2.96(m,3H),2.81(s,3H),1.01(d,J＝6.8Hz,6H)..MS(ESI)M/Z：490(M+1)。
实施例40
5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-(2-氟乙基)-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰胺
反应流程：
步骤A：根据实施例36步骤D和E的顺序制备本实施例标题化合物，其中在步骤D中将甲胺盐酸盐替换为2-氟乙胺。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.37(brs,1H),9.83(s,1H),9.70(s,1H),9.13(t,J＝5.6Hz,1H),7.15-7.08(m,3H),6.87(s,1H),6.45(s,1H),4.58-4.44(m,2H),4.22(brs,1H),3.56-3.36(m,2H),3.20-3.00(m,4H),2.90(brs,5H),1.00(d,J＝6.8Hz,6H).MS(ESI)M/Z：454(M+1)。
实施例41
5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-(2-甲氧基乙基)-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰 胺
反应流程：
步骤A：根据实施例36步骤D和E的顺序制备本实施例标题化合物，其中在步骤D中将甲胺盐酸盐替换为2-甲氧基乙胺。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.55(brs,1H),9.84(s,1H),9.71(s,1H),8.92(t,J＝5.6Hz,1H),7.14-7.10(m,3H),6.87(s,1H),6.46(s,1H),4.28(brs,3H),3.44-3.37(m,6H),3.26(s,3H),3.03-2.98(m,2H),2.87(s,3H),1.00(d,J＝6.8Hz,6H).MS(ESI)M/Z：466(M+1)。
实施例42
5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-(3-甲氧基丙基)-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰胺
反应流程：
步骤A：根据实施例36步骤D和E的顺序制备本实施例标题化合物，其中在步骤D中将甲胺盐酸盐替换为3-甲氧基丙烷-1-胺。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.77(brs,1H),9.83(s,1H),9.71(s,1H),8.89(t,J＝5.6Hz,1H),7.14-7.08(m,3H),6.87(s,1H),6.47(s,1H),4.45-4.20(m,2H),3.58(brs,1H),3.32-3.21(m,7H),3.19-2.99(m,3H),2.87(brs,4H),1.72-1.69(m,2H),1.01(d,J＝6.8Hz,6H).MS(ESI)M/Z：480(M+1)。
实施例43
5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-[2-(二甲基胺基)乙基]-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑 -3-甲酰胺
反应流程：
步骤A：根据实施例36步骤D和E的顺序制备本实施例标题化合物，其中在步骤D中将甲胺盐酸盐替换为N',N'-二甲基乙烷-1,2-二胺。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.83(s,1H),9.72(s,1H),9.05(t,J＝5.6Hz,1H),7.17-7.09(m,3H),6.84(s,1H),6.46(s,1H),4.24(brs,2H),3.59-3.58(m,3H),3.19(brs,4H),3.02-2.99(m,2H),2.85(s,3H),2.77(s,6H),0.99(d,J＝6.8Hz,6H).MS(ESI)M/Z：479(M+1)，240(M/2+1)。
实施例44
5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(2-(2-羟基乙基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰胺
反应流程：
步骤A：在氮气保护下，将叔丁基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-2-甲酸酯(4.00克，11.1毫摩尔，1.6当量)，5-(2,4-二苄氧基-5-异丙基-苯基)-4-碘-异恶唑-3-羧酸乙酯(4.10克，6.9毫摩尔，1.0当量)，Pd(PPh3)2Cl2(723毫克，1.0毫摩尔，0.15当量)和NaHCO3(2.31克，27.5毫摩尔，4.0当量)加入二氧六环(40毫升)和水(8毫升)的混合溶液中。混合物在N2保护下加热至80℃搅拌16小时。冷却后，将反应混合物倒入水(50毫升)中，用乙酸乙酯(40mLx3)萃取。将有机相用饱和盐水(50mL)洗涤，无水Na2SO4干燥，真空浓缩得到残余物。残余物经硅胶色谱(石油醚/乙酸乙酯＝50/1～3/1)纯化，得到叔丁基6-[5-(2,4-二苄氧基-5-异丙基-苯基)-3-(乙基氨基甲酰基)异恶唑-4-基]-(3,4-二氢异喹啉)-2(1H)-甲酸酯(4.8克，6.8毫摩尔，99％产率)，为黄色固体。MS:[M-56]＝646.
步骤B：将叔丁基6-[5-(2,4-二苄氧基-5-异丙基-苯基)-3-(乙基氨基甲酰基)异恶唑-4-基]-(3,4-二氢异喹啉)-2(1H)-甲酸酯(750毫克，1.07毫摩尔，1.00当量)的HCl/MeOH(4M，6.00毫升)混合物在25℃下搅拌30分钟。在40℃浓缩该混合物，得到产物5-(2,4-二苄氧基-5-异丙基-苯基)-N-乙基-4-(1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰胺(630毫克，1.07毫摩尔，98％产率)，为黄色固体。
步骤C：将5-(2,4-二苄氧基-5-异丙基-苯基)-N-乙基-4-(1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰胺(4.00克，382微摩尔，1.0当量)，K2CO3(158毫克，1.2毫摩尔，3.0当量)，2-溴乙醇(72毫克，570微摩尔，1.5当量)加入乙醇(5毫升)中。混合物加热至50℃搅拌12小时。冷却后，将反应混合物浓 缩干，加入水(10mL)，用乙酸乙酯(10mLx2)萃取。将有机相用饱和盐水(20mL)洗涤，无水Na2SO4干燥，真空浓缩得到残余物。残余物经硅胶色谱(二氯甲烷/甲醇＝50/1～15/1)纯化，得到5-(2,4-二苄氧基-5-异丙基-苯基)-N-乙基-4[2-(2-羟基乙基)-(1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)]异恶唑-3-甲酰胺(132毫克，204微摩尔，53％产率)，为白色固体。MS:[M+1]＝646.3.
步骤D：在0℃下，向5-(2,4-二苄氧基-5-异丙基-苯基)-N-乙基-4[2-(2-羟基乙基)-(1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)]异恶唑-3-甲酰胺(132毫克，204微摩尔，1.0当量)的DCM(5.0毫升)溶液中滴入BCl3的DCM溶液(1M，2.0毫升，10.0当量)，用时5分钟。将悬浮液在0℃下搅拌30分钟，然后升温至25℃并搅拌2小时。将混合物冷却至0℃，并缓慢加入MeOH(1毫升)淬灭，并真空浓缩，得到残余物。残余物用制备型HPLC纯化，得到5-(2,4-羟基-5-异丙基-苯基)-N-乙基-4[2-(2-羟基乙基)-(1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)]异恶唑-3-甲酰胺(51毫克，110微摩尔，53.6％产率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝8.85(t,J＝5.52Hz,1H),8.21(s,1H),6.94-7.01(m,3H),6.86(s,1H),6.42(s,1H),3.54-3.60(m,4H),3.24(dd,J＝13.18,6.90Hz,5H),3.02(dt,J＝13.80,6.90Hz,2H),2.68(br.s.,4H),2.34(br.s.,1H),1.09(t,J＝7.15Hz,3H),1.00(d,J＝6.78Hz,6H).MS(ESI)M/Z：466(M+1)。
实施例45
5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(2-(2-甲氧基乙基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰 胺
反应流程：
步骤A：根据实施例44步骤C和D的顺序制备本实施例标题化合物，其中在步骤C中将2-溴乙醇替换为1-溴2-甲氧基乙烷。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝10.59(br.s.，1H)，9.85(s，1H)，9.71(s，1H)，8.91(t,J＝5.65Hz,1H),7.05-7.20(m,3H),6.83-6.93(m,1H),6.48(s,1H),4.43-4.52(m,1H),4.26-4.36(m,1H),3.63-3.83(m,3H),3.38-3.44(m,2H),3.32(s,4H),3.23(quin,J＝6.78Hz,2H),3.08-3.18(m,1H),3.02(dt,J＝13.74,6.81Hz,1H),2.84-2.95(m,1H),1.09(t,J＝7.15Hz,3H),1.01(d,J＝6.78Hz,6H)..MS(ESI)M/Z：480(M+1)。
实施例46
5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(2-(2-氟乙基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰胺
反应流程：
步骤A：将5-(2,4-二苄氧基-5-异丙基-苯基)-N-乙基-4-(1,2,3,4-,四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰胺(150毫克，250微摩尔，1.0当量)，三乙胺(63毫克，623微摩尔，2.5当量)，1-溴-2-氟乙烷(44毫克，350微摩尔，1.4当量)加入乙腈(3毫升)中。混合物加热至50℃搅拌5小时。冷却后，将反应混合物真空浓缩得到残余物。残余物经制备TLC纯化，得到5-(2,4-二苄氧基-5-异丙基-苯基)-N-乙基-4[2-(2-氟乙基)-(1,2,3,4-,四氢异喹啉-6-基)]异恶唑-3-甲酰胺(120毫克，185微摩尔，74％产率)，为黄色固体。MS:[M+1]＝646.3.
步骤B：在0℃下，向5-(2,4-二苄氧基-5-异丙基-苯基)-N-乙基-4[2-(2-氟乙基)-(1,2,3,4-,四氢异喹啉-6-基)]异恶唑-3-甲酰胺(120毫克，185微摩尔，1.0当量)的DCM(8.0毫升)溶液中滴入BCl3的DCM溶液(1M，1.9毫升，10.0当量)，用时5分钟。将悬浮液在0℃下搅拌30分钟，然后升温至25℃并搅拌2小时。将混合物冷却至0℃，并缓慢加入MeOH(4毫升)淬灭，并真空浓缩，得到残余物。残余物用制备型HPLC纯化，得到5-(2,4-羟基-5-异丙基-苯基)-N-乙基-4[2-(2-氟乙基)-(1,2,3,4-,四氢异喹啉-6-基)]异恶唑-3-甲酰胺(48毫克，96微摩尔，52％产率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)ppm:1.01(d,J＝6.90Hz,6H)；1.08(t,J＝7.22Hz,3H)；2.91(d,J＝15.69Hz,1H)；3.01(dt,J＝13.77,6.85Hz,1H)；3.08-3.28(m,3H)；3.37-3.41(m,1H)；3.49-3.82(m,3H)；4.24-4.62(m,2H)；4.79-5.10(m,2H)；6.46(s,1H)；6.88(s,1H)；7.05-7.19(m,3H)；8.91(t,J＝5.65Hz,1H)；9.70(s,1H)；9.83(s,1H)；11.01(br.s.,1H).MS(ESI)M/Z：468(M+1)。
实施例47
5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(2-(3-甲氧基丙基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰 胺
反应流程
步骤A：根据实施例46步骤A和B的顺序制备本实施例标题化合物，其中在步骤A中将1-溴-2-氟乙烷替换为1-溴-3-甲氧基丙烷，三乙胺替换为碳酸铯。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)ppm:1.01(d,J＝6.90Hz,6H)；1.09(t,J＝7.15Hz,3H)；1.96-2.08(m,2H)；2.89(d,J＝17.32Hz,1H)；2.97-3.17(m,2H)；3.19-3.27(m,8H)；3.41(t,J＝5.90Hz,3H)；3.67(d,J＝10.67Hz,1H)；4.25(dd,J＝15.56,8.03Hz,1H)；4.50(d,J＝15.18Hz,1H)；6.47(s,1H)；6.88(s,1H)；7.07-7.18(m,3H)；8.91(t,J＝5.65Hz,1H)；9.70(s,1H)；9.83(s,1H)；10.53(br.s.,1H).MS(ESI)M/Z：494(M+1)。
实施例48
5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(2-(2-乙基磺酰基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰 胺
反应流程
步骤A：根据实施例46步骤A和B的顺序制备本实施例标题化合物，其中在步骤A中将1-溴-2-氟乙 烷替换为1-乙烯基-磺酰乙烷。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)ppm:0.96-1.13(m,9H)；1.28(t,J＝7.44Hz,3H)；2.86-3.16(m,3H)；3.16-3.31(m,5H)；3.52-3.97(m,5H)；4.18-4.72(m,2H)；6.46(s,1H)；6.89(s,1H)；7.04-7.20(m,3H)；8.91(t,J＝5.65Hz,1H)；9.60-9.94(m,2H)；11.20(br.s.,1H).MS(ESI)M/Z：542(M+1)。
实施例49
5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(2-乙基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰胺
反应流程：
步骤A：向5-(2,4-二苄氧基-5-异丙基-苯基)-N-乙基-4-(1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰胺(150毫克，250微摩尔，1.0当量)的甲醇(3mL)溶液中加入乙醛(274毫克，433.3微摩尔，10.00当量)，乙酸(1.3毫克，21.7微摩尔，0.50当量)，四异丙基氧钛(6.2毫克，2.5毫摩尔，10当量)。将混合液在30℃下搅拌0.5小时后加入NaBH3CN(78毫克，1.3毫摩尔，5.0当量)，并将该混合物再搅拌12小时。向反应液加入水(10毫升)，并过滤，滤液用DCM(10mLx3)萃取。将有机层合并，用盐水洗涤(5mLx2)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩。剩余物用制备TLC纯化得到5-(2,4-二苄氧基-5-异丙基-苯基)-N-乙基-4-(2-乙基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰胺(60毫克，95微摩尔，38％产率)，为无色油状物。
步骤B:在0℃下，向5-(2,4-二苄氧基-5-异丙基-苯基)-N-乙基-4-(2-乙基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰胺(60毫克，95微摩尔，1.0当量)的无水DCM(8mL)中缓慢滴入溶液中滴入BCl3的DCM溶液(1M，1.0毫升，10.0当量)，用时5分钟。将悬浮液在0℃下搅拌30分钟，然后升温至25℃并搅拌2小时。将混合物冷却至0℃，并缓慢加入MeOH(2毫升)淬灭，并真空浓缩，得到残余物。残余物用制备型HPLC纯化，得到5-(2,4-羟基-5-异丙基-苯基)-N-乙基-4-(2-乙基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰胺(15毫克，30微摩尔，32％产率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)ppm: 1.02(d,J＝6.90Hz,6H)；1.09(t,J＝7.15Hz,3H)；1.32(t,J＝7.22Hz,3H)；2.89(d,J＝17.07Hz,1H)；3.03(dt,J＝13.71,6.89Hz,1H)；3.08-3.29(m,7H)；3.65(d,J＝11.17Hz,1H)；4.22(dd,J＝15.31,8.16Hz,1H)；4.48(d,J＝15.06Hz,1H)；6.48(s,1H)；6.89(s,1H)；7.06-7.18(m,3H)；8.91(t,J＝5.71Hz,1H)；9.71(s,1H)；9.85(s,1H)；10.61(br.s.,1H).MS(ESI)M/Z：450(M+1)。
实施例50
5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(2-丙基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰胺
反应流程：
步骤A：根据实施例49步骤A和B的顺序制备本实施例标题化合物，其中在步骤B中将乙醛替换为丙醛。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.88-1.13(m,12H)；1.77(d,J＝8.16Hz,2H)；2.90(d,J＝16.94Hz,1H)；2.97-3.05(m,1H)；3.11(br.s.,3H)；3.19-3.30(m,4H)；3.64(br.s.,1H)；4.13-4.56(m,2H)；6.46(s,1H)；6.88(s,1H)；7.09-7.19(m,3H)；8.90(t,J＝5.46Hz,1H)；9.68(s,1H)；9.82(s,1H)；10.37(br.s.,1H).MS(ESI)M/Z：464(M+1)。
实施例51
5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(2-异丙基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰胺
反应流程：
步骤A：根据实施例49步骤A和B的顺序制备本实施例标题化合物，其中在步骤B中将乙醛替换为丙酮。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.97-1.13(m,9H)；1.25-1.41(m,6H)；2.82-2.93(m,1H)；2.97-3.08(m,1H)；3.13-3.28(m,4H)；3.60(br.s.,2H)；4.23-4.43(m,2H)；6.49(s,1H)；6.91(s,1H)；7.06-7.24(m,3H)；8.92(t,J＝5.58Hz,1H)；9.58-9.95(m,2H)；10.53(br.s.,1H).MS(ESI)M/Z：464(M+1)。
实施例52
5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(2-异丁基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰胺
反应流程：
步骤A：根据实施例49步骤A和B的顺序制备本实施例标题化合物，其中在步骤B中将乙醛替换为2-甲基丙醛。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.94-1.13(m,15H)；2.05-2.26(m,1H)；2.91(d,J＝17.57Hz,1H)；2.99-3.08(m,3H)；3.19-3.27(m,3H)；3.66(br.s.,1H)；4.26(dd,J＝15.75,7.47Hz,1H)；4.51(d,J＝15.43Hz,1H)；6.46(s,1H)；6.88(s,1H)；7.05-7.21(m,3H)；8.89(t,J＝5.14Hz,1H)；9.61-9.87(m,3H).MS(ESI)M/Z：478(M+1)。
实施例53
4-(2-(2-乙酰氨基乙基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)-5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基异恶唑-3-甲 酰胺
反应流程：
步骤A：将5-(2,4-二苄氧基-5-异丙基-苯基)-N-乙基-4-(1,2，3,4-,四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰胺(300毫克，499微摩尔，1.0当量)，碳酸铯(244毫克，748微摩尔，1.5当量)，叔丁基N-(2-溴乙基)氨基甲酸酯(168毫克，748微摩尔，1.5当量)加入乙腈(5毫升)中。混合物加热至50℃搅拌25小时。冷却后，将反应混合物真空浓缩得到残余物。残余物经制备TLC纯化，得到叔丁基N-[2-[6-[5-(2,4-苄氧基-5-异丙基苯基)-3-(乙基氨基甲酰基)异恶唑-4-基]-1,2,3,4-四氢异喹啉-2-基]乙基]甲酸酯(250毫克，336微摩尔，67％产率)，为棕色固体。
步骤B：将叔丁基N-[2-[6-[5-(2,4-苄氧基-5-异丙基苯基)-3-(乙基氨基甲酰基)异恶唑-4-基]-1,2,3,4-四氢异喹啉-2-基]乙基]甲酸酯(250毫克，336微摩尔，1.00当量)的HCl/MeOH(4M，6.00毫升)混合物在25℃下搅拌2小时。在40℃浓缩该混合物，得到产物4-(2-(2氨基乙基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-2-基)-5-(2,4-苄氧基-5-异丙基苯基)-N-乙基异恶唑-3-甲酰胺(250毫克，粗品)，为棕色固体。
步骤C：在0度下，将乙酰氯(39毫克，496微摩尔，2.0当量)加入到4-(2-(2氨基乙基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-2-基)-5-(2,4-苄氧基-5-异丙基苯基)-N-乙基异恶唑-3-甲酰胺(170毫克，248微摩尔，1.0当量)，三乙胺(100毫克，991微摩尔，4.0当量)的DCM(6毫升)溶液中。混合物在0℃下搅拌 2小时。将反应混合物真空浓缩得到残余物。残余物经制备TLC纯化，得到4-(2-(2乙酰氨基乙基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-2-基)-5-(2,4-苄氧基-5-异丙基苯基)-N-乙基异恶唑-3-甲酰胺(150毫克，218微摩尔，88％产率)，为黄色固体。
步骤D：在0℃下，向4-(2-(2乙酰氨基乙基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-2-基)-5-(2,4-苄氧基-5-异丙基苯基)-N-乙基异恶唑-3-甲酰胺(100毫克，146微摩尔，1.0当量)的DCM(5.0毫升)溶液中滴入BCl3的DCM溶液(1M，1.5毫升，10.0当量)，用时5分钟。将悬浮液在0℃下搅拌30分钟，然后升温至25℃并搅拌2小时。将混合物冷却至0℃，并缓慢加入MeOH(3毫升)淬灭，并真空浓缩，得到残余物。残余物用制备型HPLC纯化，得到4-(2-(2-乙酰氨基乙基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)-5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基异恶唑-3-甲酰胺(60毫克，118微摩尔，81％产率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)ppm:0.95-1.14(m,9H)；1.79-1.88(m,3H)；2.90(d,J＝16.94Hz,1H)；2.97-3.07(m,1H)；3.10-3.34(m,6H)；3.51(d,J＝5.65Hz,2H)；3.71(d,J＝10.67Hz,1H)；4.28(dd,J＝15.75,7.72Hz,1H)；4.55(d,J＝15.31Hz,1H)；6.43-6.52(m,1H)；6.84-6.92(m,1H)；7.06-7.20(m,3H)；8.30(t,J＝5.58Hz,1H)；8.90(t,J＝5.71Hz,1H)；9.56-9.95(m,2H)；10.52(br.s.,1H).MS(ESI)M/Z：507(M+1)。
实施例54
4-(2-(2-乙酰氨基丙基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)-5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基异恶唑-3-甲酰胺
反应流程：
步骤A：根据实施例53步骤A、B和C的顺序制备本实施例标题化合物，其中在步骤A中将叔丁基N-(2-溴乙基)氨基甲酸酯替换为叔丁基N-(3-溴丙基)氨基甲酸酯。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)ppm:1.01(d,J＝6.90Hz,6H)；1.08(t,J＝7.22Hz,3H)；1.81(s,3H)；1.86-1.96(m,2H)；2.88(d,J＝17.19Hz,1H)；2.96-3.34(m,10H)；4.23(dd,J＝15.62,7.97Hz,1H)；4.47(d,J＝14.18Hz,1H)；6.48(s,1H)；6.88(s,1H)；7.07-7.17(m,3H)；8.10(t,J＝5.71Hz,1H)；8.90(t,J＝5.65Hz,1H)；9.52-10.02(m,2H)；10.69(br.s.,1H).MS(ESI)M/Z：521(M+1)。
实施例55
5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-4-(2-(2-(二甲基氨基)-2-乙酰基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)-N-乙基 异恶唑-3-甲酰胺
反应流程：
步骤A：将2-氯乙酰氯(3.00克，26.6毫摩尔，1.6当量)，二甲胺盐酸盐(2.38克，29.2毫摩尔，1.1当量)和三乙胺(8.0克，79.7毫摩尔，3.0当量)加入DCM(30毫升)中。混合物15℃搅拌3小时。将反应混合物倒入水(30毫升)中，用DCM(50mLx2)萃取。将有机相用稀盐酸(30mLx2，1M)洗涤，无水Na2SO4干燥，真空浓缩得到2-氯-N,N-二甲基乙酰胺(2.5克，20.6毫摩尔，77％产率)，为黄色油状物。
步骤B：将5-(2,4-二苄氧基-5-异丙基-苯基)-N-乙基-4-(1,2,3,4-,四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰胺(200毫克，313微摩尔，1.0当量)，K2CO3(130毫克，940微摩尔，3.0当量)，2-氯-N,N-二甲基乙酰胺(114毫克，940微摩尔，3.0当量)加入DMF(4毫升)中。混合物在15℃搅拌16小时。将反应混合物加入水(30mL)中，过滤收集固体得到5-(2,4-二苄氧基-5-异丙基-苯基)-4-(2-(2-(二甲基氨基)-2-乙酰基)-(1,2,3,4-,四氢异喹啉-6-基)-N-乙基异恶唑-3-甲酰胺(195毫克，粗品，74％纯度)，为白色固体。
步骤C：在0℃下，向5-(2,4-二苄氧基-5-异丙基-苯基)-4-(2-(2-(二甲基氨基)-2-乙酰基)-(1,2,3,4-,四氢异喹啉-6-基)-N-乙基异恶唑-3-甲酰胺(190毫克，277微摩尔，1.0当量)的DCM(10.0毫升)溶液中滴入BCl3的DCM溶液(1M，3.0毫升，10.0当量)，用时5分钟。将悬浮液在0℃下搅拌30分钟，然后升温至25℃并搅拌2小时。将混合物冷却至0℃，并缓慢加入MeOH(6毫升)淬灭，并真空浓缩，得到残余物。残余物用制备型HPLC纯化，得到5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-4-(2-(2-(二甲基氨基)-2-乙酰基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)-N-乙基异恶唑-3-甲酰胺(78毫克，138微摩尔，49.8％产率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ10.22(s,1H),9.86(s,1H),9.72(s,1H),8.92(t,J＝5.2Hz,1H),7.10-7.16(m,3H),6.86(s,1H),6.48(s,1H),4.32-4.55(m,4H),3.63(brs,2H),3.20-3.25(m,2H),3.10-3.14(m,1H), 2.67-3.00(m,7H),0.99-1.15(m,9H).MS(ESI)M/Z：507(M+1)。
实施例56
5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-4-(2-(2-(二甲基氨基)-3-丙酰基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)-N-乙基 异恶唑-3-甲酰胺
反应流程：
步骤A：将丙烯酰氯(5.0克，55毫摩尔，1.0当量)，二甲胺盐酸盐(4.95克，60.8毫摩尔，1.1当量)和三乙胺(16.8克，166毫摩尔，3.0当量)加入DCM(50毫升)中。混合物15℃搅拌3小时。将反应混合物倒入水(30毫升)中，用DCM(50mLx2)萃取。将有机相用稀盐酸(30mLx2，1M)洗涤，无水Na2SO4干燥，真空浓缩得到N,N-二甲基丙烯酰胺(3.0克，30毫摩尔，55％产率)，为黄色油状物。
步骤B：将5-(2,4-二苄氧基-5-异丙基-苯基)-N-乙基-4-(1,2,3,4-,四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰胺(100毫克，157微摩尔，1.0当量)，三乙胺(48毫克，470微摩尔，3.0当量)，N,N-二甲基丙烯酰胺(155毫克，1.57毫摩尔，10.0当量)加入乙醇(2毫升)中。混合物在15℃搅拌2小时。将反应混合 物加入水(30mL)中，用EA(30mLx2)萃取。将有机相用无水Na2SO4干燥，真空浓缩得到5-(2,4-二苄氧基-5-异丙基苯基)-4-(2-(2-(二甲基氨基)-3-丙酰基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)-N-乙基异恶唑-3-甲酰胺(195毫克，粗品，74％纯度)，为黄色油状物。
步骤C：在0℃下，向5-(2,4-二苄氧基-5-异丙基苯基)-4-(2-(2-(二甲基氨基)-3-丙酰基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)-N-乙基异恶唑-3-甲酰胺(105毫克，149微摩尔，1.0当量)的DCM(15.0毫升)溶液中滴入BCl3的DCM溶液(1M，3.0毫升，20.0当量)，用时5分钟。将悬浮液在0℃下搅拌30分钟，然后升温至25℃并搅拌2小时。将混合物冷却至0℃，并缓慢加入MeOH(6毫升)淬灭，并真空浓缩，得到残余物。残余物用制备型HPLC纯化，得到5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-4-(2-(2-(二甲基氨基)-3-丙酰基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)-N-乙基异恶唑-3-甲酰胺(28毫克，46微摩尔，31％产率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ10.49(s,1H),9.85(s,1H),9.71(s,1H),8.91(t,J＝5.6Hz,1H),7.10-7.15(m,3H),6.88(s,1H),6.47(s,1H),4.51-4.55(m,1H),4.31-4.34(m,2H),3.68-3.72(m,1H),3.30-3.42(m,4H),3.21-3.30(m,1H),3.00-3.20(m,4H),2.93-3.00(m,3H),2.85(s,4H),3.00-3.20(m,4H),1.09(t,J＝7.6Hz,3H),1.01(d,J＝3.6Hz,6H).MS(ESI)M/Z：521(M+1)。
实施例57
5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-4-(2-(3-(二甲基氨基)丙酰基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)-N-乙基异恶 唑-3-甲酰胺
反应流程：
步骤A：在20℃下，将HCl/MeOH(4M，30.00毫升)加入到叔丁基6-溴-1,2,3,4-四氢异喹啉-2-甲酸酯(5.0克，16毫摩尔，1.00当量)的MeOH(20.0毫升)溶液中，混合物在25℃下搅拌2小时。在40℃浓缩该混合物，得到产物6-溴-1,2,3,4-四氢异喹啉盐酸盐(4.5克，crude)。
步骤B：在0℃下，将丙烯酰氯(1.0克，11毫摩尔，1.2当量)加入到6-溴-1,2,3,4-,四氢异喹啉异喹啉盐酸盐(2.0克，9毫摩尔，1当量)和三乙胺(2.9克，28毫摩尔，3.0当量)加入DCM(40毫升)中。混合物在15℃搅拌14小时。将反应混合物倒入水(30毫升)中，用DCM(50mLx2)萃取。将有机相用无水Na2SO4干燥，真空浓缩。残余物用柱层析纯化得到1-(6-溴-1,2,3,4-,四氢异喹啉-基)丙基-2-烯-1-酮(1.4克，5毫摩尔，56％产率)，为黄色油状物。MS(ESI)m/z:266(M+1).
步骤C：将1-(6-溴-1,2,3,4-,四氢异喹啉-基)丙基-2-烯-1-酮(700毫克，2.6毫摩尔，1.0当量)，二甲胺(1.1克，7.9毫摩尔，3.0当量)加入乙醇(10毫升)中。混合物在15℃搅拌12小时。将反应混合物真空浓缩。残余物用柱层析纯化得到1-(6-溴-1,2,3,4-,四氢异喹啉-基)-3-(二甲基氨基)丙烷-1-酮(700毫克，2.3毫摩尔，86％收率)，为黄色油状物。
步骤D：向5-(2,4-二苄氧基-5-异丙基-苯基)-N-乙基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)异恶唑-3-甲酰胺(767毫克，771微摩尔，1.0当量)的DMF(2.5毫升)和水(0.5毫升)混合溶液中加入1-(6-溴-1,2,3,4-,四氢异喹啉-基)-3-(二甲基氨基)丙烷-1-酮(200毫克，643微摩尔，1.0当量)和NaHCO3(216毫克，2.6毫摩尔，4.0当量)。该混合物置换为氮气氛围，然后加入Pd(dppf)Cl2(47毫克，64微摩尔，0.1当量)。将混合物在100℃下搅拌16小时，用20毫升水稀释反应物，通过硅藻土过滤。将滤液用EA(20毫升×3)萃取，合并的有机相用水(20毫升×升)洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到粗品。该粗产物通过制备TLC纯化(DCM：甲醇＝10：1)，得到5-(2,4-二苄氧基-5-异丙基苯基)-4-(2-(3-(二甲基氨基)丙酰基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)-N-乙基异恶唑-3-甲酰胺(220毫克，314微摩尔，49％收率)，为白色固体产物。MS(ESI)m/z：701(M+1)。
步骤E：在0℃下，向5-(2,4-二苄氧基-5-异丙基苯基)-4-(2-(3-(二甲基氨基)丙酰基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)-N-乙基异恶唑-3-甲酰胺(170毫克，243微摩尔，1.0当量)的DCM(12.0毫升)溶液中滴入BCl3的DCM溶液(1M，2.4毫升，10.0当量)，用时5分钟。将悬浮液在0℃下搅拌30分钟，然后升温至25℃并搅拌2小时。将混合物冷却至0℃，并缓慢加入MeOH(6毫升)淬灭，并真空浓缩，得到残余物。残余物用制备型HPLC纯化，得到5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-4-(2-(3-(二甲基氨基)丙酰基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)-N-乙基异恶唑-3-甲酰胺(65毫克，117微摩尔，48％产率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)ppm 8.89(t，J＝5.65Hz,1H)7.11-7.20(m,1H)6.99-7.10(m,2H)6.84(s,1H)6.48(d,J＝1.88Hz,1H)4.54-4.72(m,2H)3.65(t,J＝5.65Hz,2H)3.16-3.37(m,4H)2.98-3.07(m,1H)2.94(t,J＝7.15Hz,2H)2.63-2.83(m,8H)1.08(t,J＝7.22Hz,3H)0.98(d,J＝6.78Hz,6H)MS(ESI)M/Z：521(M+1)。
实施例58
5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(2-(3-吗啉-4-基-代丙酰基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶 唑-3-甲酰胺
反应流程：
步骤A：根据实施例57步骤C、D和E的
顺序制备本实施例标题化合物，其中在步骤C中将二甲胺替换为吗啡啉。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)ppm:8.89(t,J＝5.65Hz,1H),7.13(t,J＝7.78Hz,1H),7.00-7.10(m,2H),6.85(s,1H),6.44(d,J＝1.76Hz,1H),4.62(d,J＝19.58Hz,2H),3.95(d,J＝11.92Hz,2H),3.74(t,J＝12.11Hz,2H),3.62-3.69(m,2H),3.45(d,J＝12.17Hz,3H),3.28-3.38(m,2H),3.16-3.27(m,2H),2.92-3.15(m,5H),2.79(t,J＝5.65Hz,1H),2.63-2.71(m,1H),1.08(t,J＝7.15Hz,3H),0.98(d,J＝6.90Hz,6H).MS(ESI)M/Z：563(M+1)。
实施例59
5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-4-(2-(2-(二甲基氨基)乙酰基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)-N-乙基异恶 唑-3-甲酰胺
反应流程：
步骤A：根据实施例57步骤D和E的顺序制备本实施例标题化合物，其中在步骤D中将1-(6-溴-1,2,3,4-四氢异喹啉-基)-3-(二甲基氨基)丙烷-1-酮替换为1-(6-溴-1,2,3,4-四氢异喹啉-基)-2-(二甲基氨基)乙酮。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)ppm:0.98(d,J＝6.90Hz,6H)；1.04-1.14(m,3H)；2.52(br.s.,1H)；2.71(t,J＝5.77Hz,1H)；2.81(d,J＝4.64Hz,7H)；3.00(dt,J＝13.65,6.79Hz,1H)；3.22(quin,J＝6.71Hz,2H)；3.53(t,J＝5.83Hz,1H)；3.69(t,J＝5.77Hz,1H)；4.37(d,J＝4.52Hz,2H)；4.50-4.69(m,2H)；6.48(d,J＝2.64Hz,1H)；6.84(s,1H)；7.01-7.13(m,2H)；7.17(d,J＝8.03Hz,1H)；8.89(t,J＝5.65Hz,1H)；9.47-10.00(m,3H).MS(ESI)M/Z：507(M+1)。
实施例60
5-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(2-(2-吗啉-4-基代乙酰基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑 -3-甲酰胺
反应流程：
步骤A：根据实施例57步骤D和E的顺序制备本实施例标题化合物，其中在步骤D中将1-(6-溴-1,2,3,4-四氢异喹啉-基)-3-(二甲基氨基)丙烷-1-酮替换为1-(6-溴-1,2,3,4-四氢异喹啉-基)-2-吗啡啉乙酮。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)ppm:0.94-1.01(m,6H)；1.08(td,J＝7.15,1.38Hz,3H)；2.69-2.87(m,2H)；3.01(dt,J＝13.71,6.76Hz,1H)；3.09-3.27(m,4H)；3.42(d,J＝11.67Hz,2H)；3.55-3.58(m,1H)；3.70(t,J＝5.96Hz,1H)；3.75-3.86(m,2H)；3.87-4.01(m,2H)；4.45(br.s.,2H)；4.53-4.67(m,2H)；6.48(d,J＝2.76Hz,1H)；6.84(s,1H)；7.03-7.14(m,2H)；7.17(d,J＝8.03Hz,1H)；8.90(t,J＝5.52Hz,1H)；9.63-9.95(m,2H)；10.27(br.s.,1H).MS(ESI)M/Z：549(M+1)。
实施例61
3-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-5-甲酰胺
反应流程：
步骤A：在0℃下，向3-(2,4-二苄氧基-5-异丙基苯基)-4-碘-异恶唑-5-甲酸(300毫克，527微摩尔， 1.0当量)的DCM(10毫升)溶液中加入(COCl)2(134毫克，1050微摩尔，2当量)和DMF(100.00微升)。该混合物在0℃搅拌1小时后，随后将反应液真空浓缩得到中间体。该中间体溶于DCM(10毫升)溶液中，在0℃下，并向溶液中加入NH3/THF(4M,1.32毫升,10.00当量)。该混合物在0℃搅拌1小时后，倾入15毫升水中。然后将混合物通过萃取DCM(15毫升x2)，将合并的有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到粗品。残余物用硅胶色谱法(200～300目硅胶，石油醚/乙酸乙酯＝20/1～5/1)，得到3-(2,4-二苄氧基-5-异丙基苯基)-4-碘-异恶唑-5-甲酰胺(140毫克，47％产率)，为黄色固体。MS(ESI)M/Z：569(M+1)。
步骤B：在25℃氮气保护下，向2-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊环-2-基)-1,2,3,4-四氢异喹啉(103毫克，377微摩尔)和3-(2,4-二苄氧基-5-异丙基苯基)-4-碘-异恶唑-5-甲酰胺(134毫克，236微摩尔)的DMF(4毫升)混合物溶液中加入NaHCO3(40毫克，472微摩尔)，H2O(1.0毫升)和Pd(PPh3)2Cl2(17毫克，24微摩尔)。将混合物在25℃下搅拌10分钟，然后加热至80℃并搅拌12小时。混合物冷却至25℃，并在减压下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法纯化(200-300目硅胶，二氯甲烷/甲醇＝20/1到10/1)，得到3-(2,4-二苄氧基-5-异丙基苯基)-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰胺(80毫克，51％收率)，为黄色固体。MS(ESI)M/Z：588(M+1)。
步骤C：在0摄氏度氮气保护下，向3-(2,4-二苄氧基-5-异丙基苯基)-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-3-甲酰胺(80毫克，136微摩尔)的DCM溶液(15.00毫升)中缓慢加入BCl3(2毫升，1摩尔的DCM溶液)。将反应混合物在0℃再搅拌1小时后，升温至室温搅拌两小时。反应液降温至0℃，然后加入MeOH(20毫升)淬灭反应。反应混合液真空浓缩得到粗品。残余物通过制备HPLC(HCl method:Phenomenex Synergi C18 150*30mm*4um,water(0.05％HCl)-ACN)纯化，得到3-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-5-甲酰胺盐酸盐(9毫克，15％产率)。MS(ESI)M/Z：408(M+1)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)NMR(400MHz，DMSO-dnomenex Synergi C18 150*30mm*4um,water(0.05％HCl)-ACN)2H)；4.53-4.67(m,2H)；6.48(d,),3.30-3.42(m,4H),3.21-3.30(m,1H),3.00-3.20(m,4H),2.93-3.00(m,3H),2.85(s,4H),3.00-3.20(m,4H),1.09(t,＝8.29Hz,2H)J＝6.8Hz,6H).
实施例62
3-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-甲基-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-5-甲酰胺
反应流程：
步骤A：根据实施例61步骤A、B和C的顺序制备本实施例标题化合物，其中在步骤A中将NH3/THF替换为甲胺。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.64(s,1H),9.36(s,1H),8.91(d,J＝4.8Hz,1H),7.19(s,1H),7.09(s,2H),6.89(s,1H),6.44(s,1H),4.08(br.s.,2H),3.19(br.s.,2H),3.14-3.04(m,1H),2.95(br.s.,2H),2.81(d,J＝4.5Hz,3H),2.75(br.s.,3H),1.15-1.06(m,6H).MS(ESI)M/Z：422(M+1)。
实施例63
3-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-异丙基-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-5-甲酰胺
反应流程：
步骤A：根据实施例61步骤A、B和C的顺序制备本实施例标题化合物，其中在步骤A中将NH3/THF替换为丙基-2-胺。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.80(t,J＝5.5Hz,1H),8.24(brs,1H),7.23-7.11(m,2H),6.98(d,J＝7.5Hz,1H),6.67(s,1H),6.46(s,1H),4.22(d,J＝19.8Hz,2H),3.25-3.15(m,2H),2.95(td,J＝6.8,13.7Hz,1H),2.17-1.86(m,4H),1.06(t,J＝7.2Hz,5H),0.95-0.84(m,9H).MS(ESI)M/Z：450 (M+1)。
实施例64
3-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-(2-羟基乙基)-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-5-甲酰 胺
反应流程：
步骤A：根据实施例61步骤A、B和C的顺序制备本实施例标题化合物，其中在步骤A中将NH3/THF替换为2-胺基乙醇。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ1.05(d,J＝6.90Hz,6H)；2.87(s,3H)；3.04(dt,J＝13.71,6.76Hz,2H)；3.28(q,J＝5.86Hz,3H)；3.45-3.50(m,2H)；3.58(br.s.,1H)；4.10-4.52(m,2H)；4.80(br.s.,1H)；6.39(s,1H)；6.86(s,1H)；7.07(s,2H)；7.16-7.26(m,1H)；8.83(t,J＝5.58Hz,1H)；9.36(s,1H)；9.62(s,1H)；10.54-11.07(m,1H)..MS(ESI)M/Z：452(M+1)。
实施例65
3-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-(2-氟乙基)-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-5-甲酰胺
反应流程：
步骤A：根据实施例61步骤A、B和C的顺序制备本实施例标题化合物，其中在步骤A中将NH3/THF替换为2-氟乙胺。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.63(s,1H),9.37(s,1H),9.15(t,J＝5.4Hz,1H),7.19(s,1H),7.08(s,2H),6.87(s,1H),6.39(s,1H),4.58(t,J＝4.8Hz,1H),4.46(t,J＝4.9Hz,1H),4.31(br.s.,1H),3.60-3.52(m,2H),3.51(br.s.,4H),3.10-2.96(m,2H),2.87(s,3H),2.11-2.05(m,1H),1.06(d,J＝6.8Hz,6H).MS(ESI)M/Z：454(M+1)。
实施例66
3-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-(3-羟基丙基)-4-(2-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-5-甲酰 胺
反应流程：
步骤A：根据实施例61步骤A、B和C的顺序制备本实施例标题化合物，其中在步骤A中将NH3/THF 替换为3-氨基丙烷-1-醇。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ1.05(d,J＝6.78Hz,6H)；1.64(quin,J＝6.62Hz,2H)；2.87(d,J＝4.52Hz,3H)；2.97-3.19(m,3H)；3.20-3.32(m,4H)；3.58(br.s.,2H)；4.22(dd,J＝15.81,8.03Hz,1H)；4.42(d,J＝15.06Hz,1H)；6.39(s,1H)；6.86(s,1H)；7.03-7.11(m,2H)；7.19(s,1H)；8.89(t,J＝5.58Hz,1H)；9.34(br.s.,1H)；9.59(br.s.,1H)；10.80(br.s.,1H).MS(ESI)M/Z：466(M+1)。
实施例67
3-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-5-甲酰胺
反应流程：
步骤A：在25℃氮气保护下，向叔丁基6-溴-1,2,3,4-四氢异喹啉-2-甲酰胺(7.5克，24毫摩尔)的DMF(100毫升)溶液中加入双联频哪醇硼酸酯(7.3克，29毫摩尔)和KOAc(7.1克，72毫摩尔)，随后加入催化剂Pd(dppf)Cl2.CH2Cl2(5.3克，7毫摩尔)。混合物在25℃下搅拌10分钟，然后加热至80℃ 并搅拌12小时。将混合物冷却至25℃，倒入水(600毫升)中，然后将混合物通过EA(200毫升x2)，将合并的有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到粗品。残余物用硅胶色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝20/1～10/1)纯化，得到叔丁基6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂己硼烷-2-基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-2-甲酰胺(7.4克，21毫摩尔，86％产率)，为白色固体。
步骤B：在0℃下，向3-(2,4-二苄氧基-5-异丙基苯基)-4-碘-异恶唑-5-甲酸(5克，9毫摩尔，1.0当量)的DCM(60毫升)溶液中加入(COCl)2(2.2克，18毫摩尔，1.5当量)和DMF(100.00微升)。该混合物在0℃搅拌1小时后，随后将反应液真空浓缩得到中间体。该中间体溶于DCM(80毫升)溶液中，在0℃下，并向溶液中加入乙胺(1.9克,2.8毫升,5.00当量)。该混合物在0℃搅拌1小时后，倾入100毫升水中。然后将混合物通过萃取DCM(80毫升x2)，将合并的有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到3-(2,4-二苄氧基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-碘-异恶唑-5-甲酰胺(3.8克，75％产率)，为黄色固体。
步骤C：在25℃氮气保护下，向叔丁基6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂己硼烷-2-基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-2-甲酰胺(3.2克，9毫摩尔)和3-(2,4-二苄氧基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-碘-异恶唑-5-甲酰胺(3.8克，6毫摩尔)的DMF(50毫升)混合物溶液中加入NaHCO3(1.6克，19毫摩尔)，H2O(17.0毫升)和Pd(PPh3)2Cl2(447毫克，637微摩尔)。将混合物在25℃下搅拌10分钟，然后加热至80℃并搅拌12小时。混合物冷却至25℃，倒入水(100毫升)中。然后将混合物通过萃取EA(150毫升x2)，将合并的有机相用水(100毫升)洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过硅胶色谱法纯化(200-300目硅胶，PE/EA＝10/1到5/1)，得到叔丁基6-(3-(2,4-二苄氧基-5-异丙基-苯基)-5-(乙基氨基甲酰基)异恶唑-4-基)-1,1，3,4-四氢异喹啉-2-甲酸酯(2.6克，3.7毫摩尔，58％收率)，为黄色固体。MS(ESI)M/Z：588(M+1)。
步骤D：在25℃下，将HCl/MeOH(4M，20.00毫升)加入到叔丁基6-(3-(2,4-二苄氧基-5-异丙基-苯基)-5-(乙基氨基甲酰基)异恶唑-4-基)-1,1，3,4-,四氢异喹啉-2-甲酸酯(2.6克，3.7毫摩尔，1.00当量)的MeOH(20.00毫升)溶液中，混合物在25℃下搅拌30分钟。在40℃浓缩该混合物，得到产物3-(2,4-二苄氧基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-5-甲酰胺(2.5克，粗品)，为黄色固体。
步骤E：在0摄氏度氮气保护下，向3-(2,4-二苄氧基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-5-甲酰胺(1.0克，1.6毫摩尔)的DCM溶液(50.00毫升)中缓慢加入BCl3(9.5毫升，1摩尔的DCM溶液)。将反应混合物在0℃再搅拌1小时后，升温至室温搅拌两小时。反应液降温至0℃，然后加入MeOH(20毫升)淬灭反应。反应混合液真空浓缩得到粗品。残余物通过制备HPLC(HCl method:Phenomenex Synergi C18 150*30mm*4um,water(0.05％HCl)-ACN)纯化，得到3-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-5-甲酰胺盐酸盐(315毫克，685微摩尔，44％产率)。 1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ9.57(s,1H),9.38(s,2H),9.31(s,1H),8.94(t,J＝5.6Hz,1H),7.15(s,1H),7.05-7.12(m,2H),6.86(s,1H),6.38(s,1H),4.21(s,2H),3.21-3.33(m,4H),3.03-3.10(m,1H),2.56-2.90(m,2H),1.05-1.11(m,9H).MS(ESI)M/Z：422(M+1)。
实施例68
3-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(2-异丙基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-5-甲酰胺
反应流程：
步骤A：向3-(2,4-二苄氧基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-5-甲酰胺(100毫克，166微摩尔，1.0当量)的甲醇(3mL)溶液中加入丙酮(97毫克，2毫摩尔，10.00当量)，乙酸(5毫克，8微摩尔，0.50当量)。将混合液在30℃下搅拌0.5小时后加入NaBH3CN(31毫克，499微摩尔，3.0当量)，并将该混合物再搅拌1小时。将反应液真空浓缩。剩余物用制备TLC纯化得到3-(2,4-二苄氧基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(2-异丙基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-5-甲酰胺(80毫克，124微摩尔，75％产率)，为黄色油状物。
步骤B:在0℃下，向3-(2,4-二苄氧基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(2-异丙基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-5-甲酰胺(80毫克，124微摩尔，1.0当量)的无水DCM(8mL)中缓慢滴入溶液中滴入BCl3的DCM溶液(1M，1.2毫升，10.0当量)，用时5分钟。将悬浮液在0℃下搅拌30分钟，然后升温至25℃并搅拌2小时。将混合物冷却至0℃，并缓慢加入MeOH(3毫升)淬灭，并真空浓缩，得到残余物。残余物用制备型HPLC纯化，得到3-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(2-异丙基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-5-甲酰胺(25毫克，48微摩尔，39％产率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)ppm:1.02-1.11(m,15H)；2.64-2.69(m,4H)；2.85(dt,J＝13.05,6.53Hz,1H)；3.04(dt,J＝13.71,6.89Hz,1H)；3.18-3.29(m,4H)；3.61(s,2H)；6.33(s,1H)；6.81(s,1H)；6.93-6.96(m,2H)；6.98(s,1H)；8.20(s,1H)；8.85(t,J＝5.71Hz,1H).MS(ESI)M/Z：464(M+1)。
实施例69
3-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(2-(2-羟基乙基)-(1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-5-甲 酰胺
反应流程：
步骤A：将3-(2,4-二苄氧基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-5-甲酰胺(150毫克，249微摩尔，1.0当量)，Cs2CO3(122毫克，374微摩尔，1.5当量)，2-溴乙醇(32毫克，249微摩尔，1.0当量)加入乙腈(3毫升)中。混合物加热至50℃搅拌12小时。冷却后，将反应混合物浓缩干。残余物经制备TLC(二氯甲烷/甲醇＝15：1)纯化，得到3-(2,4-二苄氧基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(2-(2-羟基乙基)-(1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-5-甲酰胺(120毫克，185微摩尔，74％产率)，为无色油状物。
步骤B：在0摄氏度氮气保护下，向3-(2,4-二苄氧基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(2-(2-羟基乙基)-(1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-5-甲酰胺(120毫克，186微摩尔)的DCM溶液(8.00毫升)中缓慢加入BCl3(1.9毫升，1摩尔的DCM溶液)。将反应混合物在0℃再搅拌1小时后，升温至室温搅拌两小时。反应液降温至0℃，然后加入MeOH(4毫升)淬灭反应。反应混合液真空浓缩得到粗品。残余物通过制备HPLC纯化，得到3-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(2-(2-羟基乙基)-(1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-5-甲酰胺盐酸盐(39毫克，77微摩尔，41％产率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)ppm:1.03-1.12(m,9H)；2.88(d,J＝17.32Hz,1H)；3.00-3.18(m,2H)；3.21-3.31(m,5H)；3.71(d,J＝11.67Hz,1H)；3.84(t,J＝4.96Hz,2H)；4.32(dd,J＝15.69,7.91Hz,1H)；4.51(d,J＝15.18Hz,1H)；6.39(s,1H)；6.85(s,1H)；7.10(s,2H)；7.18(s,1H)；8.95(t,J＝5.71Hz,1H)；9.32(br.s.,1H)；9.58(br.s.,1H)；10.43(br.s.,1H).MS(ESI)M/Z：466(M+1)。
实施例70
3-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(2-(2-甲氧基乙基)-(1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-5- 甲酰胺
反应流程：
步骤A：根据实施例69步骤A和B的顺序制备本实施例标题化合物，其中在步骤A中将2-溴乙醇替换为1-溴2-甲氧基乙烷。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)ppm:0.99-1.12(m,9H)；2.61-2.68(m,6H)；3.04(dt,J＝13.77,6.85Hz,1H)；3.19-3.24(m,2H)；3.47-3.60(m,7H)；6.33(s,1H)；6.81(s,1H)；6.90-6.96(m,2H)；6.98(s,1H)；8.18(s,1H)；8.85(t,J＝5.71Hz,1H).MS(ESI)M/Z：480(M+1)。
实施例71
3-(2,4-二羟基-5-异丙基苯基)-N-乙基-4-(2-(2-氟乙基)-(1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)异恶唑-5-甲酰 胺
反应流程：
步骤A：根据实施例69步骤A和B的顺序制备本实施例标题化合物，其中在步骤A中将2-溴乙醇替换为1-溴2-氟乙烷。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)ppm:1.02-1.11(m,9H)；2.89(d,J＝16.56Hz,1H)；2.99-3.18(m,2H)；3.19-3.28(m,2H)；3.30-3.44(m,1H)；3.66-3.75(m,2H)；4.28-4.41(m,1H)；4.45-4.57(m,1H)；4.88(t,J＝4.14Hz,1H)；5.00(t,J＝4.27Hz,1H)；6.37(s,1H)；6.85(s,1H)；7.10(s,2 H)；7.19(s,1H)；8.94(t,J＝5.71Hz,1H)；9.18-9.76(m,2H)；10.97(br.s.,1H).MS(ESI)M/Z：468(M+1)。
实施例72：化合物酶水平活性测定
本发明中应用荧光偏振(FP)的方法来构建HSP90-alpha抑制剂的筛选平台。基于的原理是通过检测荧光素标记的小分子与其他分子相互作用前后分子量的变化，计算水平方向及垂直方向的荧光偏振值作相关分析。如果被荧光标记小分子与大分子之间的结合平衡建立后，它受激发时运动慢，测得的荧光偏振光值会增高。如果荧光标记小分子与大分子之间的结合被其他配基取代，它在游离状态下的旋转或翻转速度会变快，发射光相对于激发光平面将去偏振化，测得的偏振光值降低，从而计算出样品的偏振值(偏振值单位mP)。
本发明中应用的荧光标记小分子是VER-00051001(参考JMC,2008,51,196-218所述的合成方法合成)。反应在384孔黑板中进行，所用的反应疏水蛋白HFB缓冲液：100mM Tris.Cl pH 7.4,20mM KCl,6mM MgCl2,5ug/mL BSA,25nM full-length Hsp90U,10nM VER-51001。反应体系体积50mL，其中包含5nM GM-BODIPY(格尔德霉素)，30nM HSP90和被测小分子化合物或DMSO(二甲基亚砜)，DMSO的含量是2‰。另做两组只加有HFB缓冲液的孔作为空白对照和5nM GM-BODIPY作为阴性对照。4℃下反应12-16小时，在Biotek酶标仪下检测，激发波长为485nm，发射波长为535nm，测得mP值。应用如下公式计算抑制率：
(不加化合物mP-加化合物mP)/(不加化合物mP-阴性对照mP)*100％
计算出不同浓度的化合物的抑制率后，计算该化合物的IC50，各化合物的IC50值示于下表1中。
实施例73：化合物细胞水平活性测定
肿瘤细胞的生长抑制检测采用磺酰罗单明B(sulforhodamine B，SRB)染色法。具体步骤如下：处于对数生长期的人结肠癌细胞株HCT116和人肺癌细胞株A549(购自美国典型培养物保藏中心，ATCC)按合适密度(4000/孔接种至96孔微培养板，每孔100μL，培养过夜后，加入不同浓度(100、10、1、0.1、0.01μM)的化合物作用72h，每个浓度设三复孔，并设相应浓度的溶媒对照及无细胞调零孔。作用结束后，贴壁细胞去培养液，加入10％(w/v)三氯乙酸(100μL/孔)于4℃固定1h，随后用蒸馏水冲洗五次，待在室温下干燥后，每孔加入SRB溶液(4mg/mL，溶于1％冰乙酸)100μL，室温下孵育染色15min后，用1％冰乙酸冲洗五次洗去未结合的SRB，室温下干燥后，每孔加入10mM Tris溶液100μL，VERSMax酶标仪测定515nm波长下的光密度(OD值)。按以下列公式计算药物对肿瘤细胞生长的抑制率：抑制率(％)＝(OD对照孔-OD给药孔)/OD对照孔×100％。实验重复两次。
各化合物对HCT116和A549细胞的抑制率(％)示于下表1中：
表1：本发明化合物体外筛选试验结果
备注：上面的通过酶活性测试的化合物按照活性的大小范围分为A～C三个区间，其中A≤20nM；20nM<B≤100nM；C＞100nM；ND表示该数据未测试。
结论：与已知HSP90抑制剂Luminespib相比，本发明的部分化合物在与HSP90蛋白靶点的结合和抑制 HCT116或A549肿瘤细胞生长方面均有良好的活性。
实施例74：化合物在动物体内药效评价
A549肿瘤细胞按5×106/只分别皮下接种于裸小鼠右侧腋窝，形成移植瘤，体积达到100－200mm3时，将动物按瘤体积随机分组，阴性对照组5只，阳性对照组每组5只，实验组每组5只。实验组每周2次分别静脉注射不同浓度的阳性药Luminespib(50mg/kg)和化合物1(50mg/kg)，阴性对照组同时给予等量的溶剂。每周两次用游标卡尺测量肿瘤长(A)、宽(B)，并由此计算肿瘤体积V＝A×B2/2。相对肿瘤体积(RTV)的计算遵循：RTV＝Vt/V0，Vt为给药结束时的肿瘤体积，V0为分笼给药前测量所得肿瘤体积。抗肿瘤活性的药效学评价指标为相对肿瘤增殖率T/C(％)，计算公式为：T/C(％)＝TRTV/CRTV×100％。其中TRTV：治疗组RTV；CRTV：阴性对照组RTV。疗效评价标准：T/C％>60％为无效；T/C％≤60％，并经统计学处理P<0.05为有效。肿瘤生长抑制率(TGI)计算公式如下：
TGI(％)＝{[(CVt-CV0)-(TVt-TV0)]/(CVt-CV0)}×100％
CVt为对照组给药结束时的肿瘤体积，CV0为对照组分笼给药前的肿瘤体积，TVt为给药组给药结束时的肿瘤体积，TV0为给药组分笼给药前的肿瘤体积。给药组及对照组的肿瘤体积的差异经t-检验。同时，每周两次称量各组裸鼠体重，以初步评价药物的毒副作用。各化合物在该模型中的药效结果如下表2中所示。
表2：本发明化合物体内药效试验结果
结论：与已知HSP90抑制剂Luminespib相比，本发明化合物实施例1在小鼠移植A549肺癌细胞模型中具有略优的抗肿瘤疗效。
实施例75：化合物组织分布研究
本发明实施例67的组织分布研究
1.摘要
以SD大鼠为受试动物，应用LC/MS/MS法测定了大鼠尾部静脉注射给予实施例67化合物后不同时刻血浆、肺部和乳腺组织中的药物浓度。研究本发明的化合物在大鼠体内的组织分布情况，评价其药代动 力学特征。
2.试验方案
2.1实验药品：Luminespib，Ganetespib和实施例67化合物。
2.2试验动物：
健康成年雄性SD大鼠100-200g，总共9只。购自上海斯莱克实验动物有限公司。
2.3药物配制：
称取适量样品，将Luminespib，Ganetespib和本发明化合物67一起配制成浓度均为1mg/mL in 0.5mg/mL in 10％DMSO/14％Cremophor RH40/76％D5W的澄清溶液用于静脉注射。
2.4给药：
SD雄性大鼠9只，分为三组，每组三只。正常喂食后尾端静脉注射给药，剂量为1mg/kg。
3.操作：
三组大鼠分别于给药后0.5、6、24小时采血样和肺部、乳腺组织样品。血液样品收集后半小时内在4℃,3000转的条件下离心15min分离得到血浆样品。得到的血浆样品用聚丙烯管存放并保存在-80℃下用于LC/MS/MS分析。血液样品收集后将动物采用CO2处死，然后收集组织样品。每份组织样品用冷的去离子水洗涤2次，并粘附于滤纸上。然后每份组织样品分别在MeOH/15mM PBS(1:2)(5mL MeOH/15mM PBS(1:2)每克组织,稀释系数为6)中多次匀浆，以确保形成均相。整个过程在冰点温度下进行。匀浆后的样品使用干冰快速冷冻并储存在-80℃下用于生物分析。
用LC/MS/MS法测定注射给药后大鼠血浆、肺部和乳腺组织中的待测化合物含量。
4.药代动力学参数结果
表3 本发明化合物组织分布结果
备注：ND代表超出仪器的检测限，未检测到相关数据。
结论：本发明优选化合物注射给药剂量为1mg/kg时，与Luminespib和Ganetespib同等剂量下相比，在大鼠肺部和乳腺组织中同等时间下的血药浓度明显更高，AUC值也明显更大。表明本发明优选化合物在肺癌和乳腺癌等癌症中具有较好的应用前景。
实施例76：化合物在乳腺癌动物体内药效评价
BT-474肿瘤细胞按5×106/只分别皮下接种于裸小鼠右侧腋窝，形成移植瘤，体积达到100－200mm3时，将动物按瘤体积随机分组，阴性对照组6只，阳性对照组每组6只，实验组每组6只。实验组每周3次分别静脉注射不同浓度的阳性药Ganetespib(20mg/kg)和化合物67(10mg/kg和20mg/kg)，阴性对照组同时给予等量的溶剂。每周两次用游标卡尺测量肿瘤长(A)、宽(B)，并由此计算肿瘤体积V＝A×B2/2。相对肿瘤体积(RTV)的计算遵循：RTV＝Vt/V0，Vt为给药结束时的肿瘤体积，V0为分笼给药前测量所得肿瘤体积。抗肿瘤活性的药效学评价指标为相对肿瘤增殖率T/C(％)，计算公式为：T/C(％)＝TRTV/CRTV×100％。其中TRTV：治疗组RTV；CRTV：阴性对照组RTV。疗效评价标准：T/C％>60％为无效；T/C％≤60％，并经统计学处理P<0.05为有效。肿瘤生长抑制率(TGI)计算公式如下：
TGI(％)＝{[(CVt-CV0)-(TVt-TV0)]/(CVt-CV0)}×100％
CVt为对照组给药结束时的肿瘤体积，CV0为对照组分笼给药前的肿瘤体积，TVt为给药组给药结束时的肿瘤体积，TV0为给药组分笼给药前的肿瘤体积。给药组及对照组的肿瘤体积的差异经t-检验。同时，每周两次称量各组裸鼠体重，以初步评价药物的毒副作用。各化合物在该模型中的药效结果如下表2中所示。
表4：本发明化合物体内药效试验结果
结论：与已知HSP90抑制剂Ganetespib的20mpk相比，本发明优选化合物在10mpk下，在小鼠移植BT-474乳腺癌细胞模型中具有明显更优的抗肿瘤疗效。
实施例77：水溶性对比：
本发明化合物和Ganetespib和Luminespib在临床上均作为针剂使用，故其需要具有良好的水溶性以利于相关临床制剂的开发。本发明化合物独特的并环结构中均包含有碱性氮原子，易于成盐，在水溶性方面具有较大的优势。CN1771235A公开一些含并环结构的HSP90抑制剂，但其在结构上与本发明化合物有显著的差别，且不含有易于成盐的基团，可以预见其在水溶性方面表现较差。

Claims (27)

  1. 式(Ⅰ)所示的化合物、其药学上可接受的盐或水合物，
    其中：
    X、Y分别独立地选自N、O或S；
    X1、X2、Y1、Y2和连接X1、X2的碳原子共同组成5-7元芳环、脂肪族饱和环或脂肪族不饱和环；
    X1、X2分别独立地选自C、O、S、N、-C＝C-、-C＝N-；
    X1或X2中的C可以是未取代的，也可以被R01或R02取代；
    R01、R02分别独立地选自卤素、CN、OH、SH、NH2、CHO、COOH、C1-10烷基、N-C1-10烷氨基、N,N-二(C1-10烷基)氨基、C1-10烷氧基、C1-10烷酰基、C1-10烷氧羰基、C1-10烷基磺酰基、C1-10烷基亚磺酰基、C3-10环烷基、C3-10环烷氨基、C3-10环烷氧基、C3-10环烷基酰基、C3-10环烷氧羰基、C3-10环烷基磺酰基、C3-10环烷基亚磺酰基、被C3-10环烷基取代的C1-10烷基；
    Y1、Y2分别独立地选自C或N；
    Y1与Y2上的两个取代基连在一起形成带有取代基R1，R2和R3的氮杂五元、六元或七元饱和环或芳香环；
    R1、R2、R3分别独立选自氢、C1-10烷基、羟基C1-10烷基、C1-6烷氧基-C1-6烷基、卤代C1-10烷基、C1-6烷基磺酰基-C1-6烷基、C1-6烷基酰胺基-C1-6烷基、N,N-二(C1-6烷基)氨基酰基-C1-6烷基、N,N-二(C1-6烷基)氨基-C1-6烷酰基、吗啉基-C1-6烷酰基、N-C1-10烷氨基、N,N-二(C1-10烷基)氨基、C1-10烷氧基、C1-10烷酰基、C1-10烷氧羰基、C1-10烷基磺酰基、C1-10烷基亚磺酰基、C3-10环烷基、C3-10环烷基氨基、C3-10环烷基氧基、C3-10环烷基酰基、C3-10环烷氧羰基、C3-10环烷基磺酰基、C3-10环烷基亚磺酰基、C3-10环烷基-C1-5烷基；
    或R2和R3的取代基通过共价键相互连在一起形成带有取代基R03或不带有取代基的五元、六元或七元饱和环；
    R03选自C1-6烷基或卤素；
    R4选自H、卤素、C1-6烷基、C3-10环烷氧基、苯基取代的C1-6烷基、苯基取代的C2-6烯基、苯基、C1-6 烷基取代的苯基、C3-6环烷基；
    R5选自H、氰基、羧基、C1-6烷氧基酰基、C1-7烷基氨基羰基、卤代C1-6烷基氨基羰基、C1-6烷氧基-C1-6烷基氨基羰基、N,N-二(C1-6烷基)氨基-C1-6烷基氨基羰基、氨基羰基、羟C1-6烷基氨基羰基、羟基取代的卤代C1-6烷基、腈基取代的脒基，或选自任选被1个或多个R05取代的C3-10环烷基、C3-10环烯基或5～10元芳香环；
    R05选自C1-6烷基、C3-10环烷基。
  2. 根据权利要求1所述化合物、其药学上可接受的盐或水合物，其中，Y1和Y2均为C。
  3. 根据权利要求1所述化合物、其药学上可接受的盐或水合物，其中，R1、R2、R3分别独立选自氢、C1-10烷基、羟基C1-10烷基、C3-10环烷基、C1-6烷氧基-C1-6烷基、卤代C1-10烷基、C1-6烷基磺酰基-C1-6烷基、C1-6烷基酰胺基-C1-6烷基、N,N-二(C1-6烷基)氨基酰基-C1-6烷基、N,N-二(C1-6烷基)氨基-C1-6烷酰基、吗啉基-C1-6烷酰基、C3-10环烷基-C1-5烷基，或R2和R3的取代基通过共价键相互连在一起形成带有取代基R03或不带有取代基的五元、六元或七元饱和环。
  4. 根据权利要求3所述化合物、其药学上可接受的盐或水合物，其中，R1、R2、R3分别独立选自氢、C1-6烷基、羟基C1-6烷基、C3-10环烷基、C1-4烷氧基-C1-4烷基、卤代C1-4烷基、C1-4烷基磺酰基-C1-4烷基、C1-4烷基酰胺基-C1-4烷基、N,N-二(C1-4烷基)氨基酰基-C1-4烷基、N,N-二(C1-4烷基)氨基-C1-4烷酰基、吗啉基-C1-4烷酰基、C3-6环烷基-C1-4烷基，或R2和R3的取代基通过共价键相互连在一起形成带有取代基R03或不带有取代基的五元、六元或七元饱和环。
  5. 根据权利要求4所述化合物、其药学上可接受的盐或水合物，其中，R1选自氢、C1-6烷基、羟基C1-6烷基、C3-10环烷基、C1-4烷氧基-C1-4烷基、卤代C1-4烷基、C1-4烷基磺酰基-C1-4烷基、C1-4烷基酰胺基-C1-4烷基、N,N-二(C1-4烷基)氨基酰基-C1-4烷基、N,N-二(C1-4烷基)氨基-C1-4烷酰基、吗啉基-C1-4烷酰基、C3-6环烷基-C1-5烷基，R2和R3选自氢或甲基，或R2和R3的取代基通过共价键相互连在一起形成不带有取代基的五元、六元或七元饱和环。
  6. 根据权利要求1所述化合物、其药学上可接受的盐或水合物，其中，R4选自H、C1-6烷基、苯基取代的C1-6烷基、卤素、C3-6环烷基。
  7. 根据权利要求6所述化合物、其药学上可接受的盐或水合物，其中，R4选自C1-4烷基、Cl、Br或环丙基。
  8. 根据权利要求7所述化合物、其药学上可接受的盐或水合物，其中R4选自异丙基。
  9. 根据权利要求书1所述化合物、其药学上可接受的盐或水合物，其中，R5选自氰基、C1-6烷基氨基羰基、卤代C1-4烷基氨基羰基、C1-4烷氧基-C1-4烷基氨基羰基、N,N-二(C1-4烷基)氨基-C1-4烷基氨基羰基、氨基羰基、羟C1-4烷基氨基羰基、羟基取代的卤代C1-4烷基、腈基取代的脒基，被1个或多个R05取代的5～6元含氮杂芳环；
    R05选自C1-6烷基。
  10. 根据权利要求书1所述化合物、其药学上可接受的盐或水合物，其中，R5选自
    R04选自H、C1-6烷基、卤代C1-4烷基、C1-4烷氧基-C1-4烷基、N,N-二(C1-4烷基)氨基-C1-4烷基、羟C1-4烷基。
  11. 根据权利要求书1-10任一项所述化合物、其药学上可接受的盐或水合物，其中，结构单元选自
  12. 根据权利要求书1-10任一项所述化合物、其药学上可接受的盐或水合物，其中，结构单元选自
    R01、R02分别独立地选自H、卤素、C1-10烷基、C3-10环烷基、被C3-10环烷基取代的C1-10烷基。
  13. 根据权利要求书12所述化合物、其药学上可接受的盐或水合物，选自
  14. 根据权利要求书1-10任一项所述化合物、其药学上可接受的盐或水合物，其中，结构单元 选自
    n01、n02选自0，1，2或3，且n01和n02之和为2、3或4，且R2和R3未连接成环。
  15. 根据权利要求书1-10任一项所述化合物、其药学上可接受的盐或水合物，其中，结构单元选自其中，n＝1或2。
  16. 根据权利要求书1-10任一项所述化合物、其药学上可接受的盐或水合物，其中，结构单元选自
  17. 根据权利要求书14所述化合物、其药学上可接受的盐或水合物，其中，结构单元选自
  18. 根据权利要求书1-10任一项所述化合物、其药学上可接受的盐或水合物，其中，结构单元 选自
  19. 根据权利要求书1所述化合物、其药学上可接受的盐或水合物，其选自结构式如下的化合物或其药学上可接受的盐或水合物：
  20. 一种制备(I)化合物的方法，其包括如下路线：
    其中，R0选自H、卤素、烷基、杂原子取代烷基、羧酸、羧酸烷基酯；
    PG为羟基保护基，选自甲基、苄基、4-甲氧基苄基、3，4-二甲氧基苄基、甲氧基甲基、2-甲氧基乙氧基甲基、2-四氢呋喃基、三甲硅基、三乙硅基、三异丙基硅基、叔丁基二甲基硅基、叔丁基二苯基硅基、乙酰基、苯甲酰基或特戊酰基；
    X’为卤素；
    X”为卤素或三氟甲磺酸；
    其它变量如权利要求1所定义。
  21. 一种药物组合物，其包括治疗有效量的权利要求1～19任意一项所述化合物或其药学上可接受的盐、水合物以及药学上可接受的载体。
  22. 权利要求1～19任意一项所述化合物或权利要求21所述组合物在制备治疗HSP90蛋白介导的疾病的药物中的应用。
  23. 根据权利要求22所述HSP90蛋白介导的疾病，其选自自癌症和神经变性障碍。
  24. 权利要求1～19任意一项所述化合物或权利要求21所述组合物在制备治疗治疗特定类型的癌症中的应用；所述癌症包括：癌例如膀胱癌、乳腺癌、结肠癌、肾癌、肝癌、包括小细胞肺癌的肺癌、食道癌、胆囊癌、卵巢癌、胰腺癌、胃癌、宫颈癌、甲状腺癌、前列腺癌和包括鳞状细胞癌的皮肤癌；淋巴系的造血系统癌(hematopoietic tumor)，所述癌包括白血病、急性淋巴细胞性白血病、急性淋巴母细胞白血病、B-细胞淋巴瘤、T-细胞淋巴瘤、霍奇金氏淋巴瘤、非霍奇金氏淋巴瘤、毛细胞淋巴瘤和伯基特氏淋巴瘤；髓系的造血系统癌，所述癌包括急性和慢性髓性白血病、骨髓增生异常综合症和前髓细胞性白血病；包括纤维肉瘤和横纹肌肉瘤的间充质来源的癌；中枢和外周神经系统癌症，所述癌症包括星形细胞瘤、神经细胞瘤、神经胶质瘤和神经鞘瘤；其它癌，所述癌包括黑色素瘤、精原细胞瘤、畸胎癌、骨肉瘤、着色性干皮病、角化棘皮瘤(keratoxanthoma)、甲状腺毛囊癌和卡波西肉瘤。
  25. 权利要求1～19任意一项所述化合物或权利要求21所述组合物供制备治疗治疗特定类型的神经变性障碍的药物中的应用，所述障碍包括：阿尔茨海默病、帕金森病、亨廷顿病、多发性硬化和脊髓延髓肌肉萎缩症。
  26. 权利要求1～19任意一项所述化合物或权利要求21所述组合物在制备治疗连同放射治疗或化疗方案同时、单独或连续用于抗癌治疗的应用。
  27. 权利要求1～19任意一项所述化合物或权利要求21所述组合物在体外抑制HSP90蛋白活性的应用，其包括将所述蛋白与有效量的式(I)的化合物接触。
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