CN107048415A - 一种具有缓解运动疲劳的南极磷虾多肽制剂及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种具有缓解运动疲劳的南极磷虾多肽制剂及其制备方法。本发明产品制备的主要步骤为：将南极磷虾经过酶解后，得到南极磷虾多肽酶解液，按重量百分比计，按如下配比混合：红景天提取物3%~6%、肉苁蓉提取物3%~7%、甘草提取物2%~6%，其余为南极磷虾多肽酶解液；搅拌均匀，经高压匀质、杀菌、冷却后真空包装，得到一种具有缓解运动疲劳的南极磷虾多肽制剂。本发明的优点在于：将现代海产品与传统中药完美结合，制得南极磷虾多肽制剂，其具有抗疲劳的功效，尤其缓解运动所带来的疲劳。
Description
技术领域
本发明涉及食品技术加工领域，具体涉及一种具有缓解运动疲劳的南极磷虾多肽制剂及其制备方法。
背景技术
疲劳是一种常见的生理现象，表现为身体倦怠，精神不振，注意力不集中，抵抗力下降等，运动之后的疲劳若得不到缓解，使身体经常处于疲劳状态就会给身体带来实质性损害，因此开发一种可以缓解疲劳的食品制剂具有重要的实际意义。
南极磷虾属于纯天然物质，无任何添加剂，含有丰富的钙，磷及丰富的南极磷虾虾红素，其酶解可产生具有活性的多肽，具有缓解运动疲劳，抗衰老，抗肿瘤等功效，且多肽更易被人体吸收和利用；南极磷虾有着丰富的资源，可满足于现今社会对于绿色食品的需求。
红景天，景天科植物大花红景天的干燥根和根茎，具有补肾，理气养血，有活血止血、清肺止咳、解热及止带下的功效，红景天的副作用暂时没有发现。红景天还能提升肌体对有害刺激的非特异性抵抗力，加强肌体的适应性。透过增强体内细胞的氧气扩散，或氧气运用效益、抗氧化的能力，有助提高身体对缺氧刺激的适应力。
肉苁蓉，素有"沙漠人参"之美誉，具有极高的药用价值，是中国传统的名贵中药材。肉苁蓉味甘、性温，具有补肾壮阳、填精补髓、养血润燥、悦色延年等功效。肉苁蓉药食两用，长期食用可增加体力、增强耐力以及抵抗疲劳，同时又可以增强人类及动物的性能力及生育力。肉苁蓉在历史上就被西域各国作为上贡朝廷的珍品，也是历代补肾壮阳类处方中使用频度最高的补益药物之一。
甘草，《本草纲目》记载，弘景曰∶“此草最为众药之主，经方少有不用者，犹如香中有沉香也。国老即帝师之称，虽非君而为君所宗，是以能安和草石而解诸毒也”。
基于上述论述，本发明以南极磷虾酶解液为主料，红景天提取物、肉苁蓉提取物、甘草提取物为辅料，通过科学安全的配伍，将海洋生物与传统中药提取物完美结合，制得一种具有抗疲劳，尤其可缓解运动疲劳的南极磷虾多肽制剂。除此之外，制得的该南极磷虾多肽制剂还具有抗衰老，提高免疫力，抗肿瘤等功效，适合广大消费人群，无副作用，绿色安全。
发明内容
本发明的目的是提供一种具有缓解运动疲劳的南极磷虾多肽制剂及其制备方法。
为实现以上发明目的，本发明所采用的技术方案是：一种具有缓解运动疲劳的南极磷虾多肽制剂及其制备方法，以重量百分比计配比如下：红景天提取物3％～6％、肉苁蓉提取物3％～7％、甘草提取物2％～6％，其余为南极磷虾多肽酶解液。
上述的一种具有缓解运动疲劳的南极磷虾多肽制剂的制备方法，包括以下步骤：
(1)制备南极磷虾多肽酶解液：取鲜冻南极磷虾粉，用100～500目筛子进行过滤，重复2～3次，加入比重1:30～100的去离子水，30～50℃混匀，加热至80～90℃进行灭酶20～30分钟，冷却至20～30℃，添加2500～4800U/g酶解南极磷虾粉的蛋白酶，在超声波辅助条件下浸提2～4小时，浸提温度为30～60℃，加热至90～100℃，10～30min，冷却至20～40℃，5000～8000转/min离心15～30分钟，取上清液，即得南极磷虾多肽酶解液，4℃保藏备用；
(2)制备红景天提取物、肉苁蓉提取物、甘草提取物：将红景天干品粉碎，50～150目过筛2次，浸于pH值7.3～8.5的纯净水中，料液比为1:5～9，在超声波的辅助条件下浸提1～2小时，浸提温度60～80℃，浸提结束后，用3～5层纱布过滤2～3次，合并滤液于80℃下减压浓缩2～4小时，冷却至35～55℃，一边缓慢搅拌一边加入95％的乙醇，使其乙醇终浓度达到70～75％，密封，静置20～40小时，加热至70～80℃蒸除乙醇，即得红景天提取物，冷却后4℃保藏备用；肉苁蓉提取物、甘草提取物的制备方法同红景天提取物；
(3)按前述配比将红景天提取物、肉苁蓉提取物、甘草提取物、南极磷虾多肽酶解液于35～55℃下混匀，高压匀质，杀菌后冷却至20～40℃，即得南极磷虾多肽酶解液。
上述一种具有缓解运动疲劳的南极磷虾多肽制剂的制备方法，步骤(1)中蛋白酶为几丁质酶、糜蛋白酶、无花果蛋白酶或菠萝蛋白酶。
上述一种具有缓解运动疲劳的南极磷虾多肽制剂的制备方法，步骤(3)中高压匀质的条件为15～30MPa，45～60℃，杀菌的条件为80～100℃杀菌10～30分钟。
本发明的优点在于：
1.本发明以南极磷虾酶解液为主料，以红景天提取物、肉苁蓉提取物、甘草提取物为辅料，将现代海产品与传统中药完美结合，制得具有缓解运动疲劳的南极磷虾多肽制剂，且绿色安全，无副作用；
2.本发明中所含成分除具有缓解运动疲劳的功效以外，还具有抗衰老，提高免疫力的功效；
3.本发明制备工艺简单合理，操作可行，适合大众消费，有益于提高国民体质。
具体实施方式
以下结合具体实施例对本发明做进一步说明。
实施例1：
一种具有缓解运动疲劳的南极磷虾多肽制剂，以重量百分比计配比如下：红景天提取物4％、肉苁蓉提取物6％、甘草提取物5％，其余为南极磷虾多肽酶解液。
上述具有缓解运动疲劳的南极磷虾多肽制剂的制备方法，包括以下步骤：
(1)制备南极磷虾多肽酶解液：取鲜冻南极磷虾粉，用200目筛子进行过滤，重复3次，加入比重1:40的去离子水，35℃混匀，加热至90℃进行灭酶20分钟，冷却至22℃，添加4500U/g酶解南极磷虾粉的几丁质酶，在超声波辅助条件下浸提2.5小时，浸提温度为60℃，浸提后加热至95℃维持30min，冷却至22℃，6800转/分钟离心22分钟，取上清液，得南极磷虾多肽酶解液，4℃保藏备用；
(2)制备红景天提取物、肉苁蓉提取物、甘草提取物：将红景天干品粉碎，100目过筛2次，以料液比为1：8浸于pH值7.5的纯净水中，用Na2CO3调节pH值，在超声波的辅助条件下浸提1.5小时，浸提温度65℃，浸提结束后，用4层纱布过滤2次，合并滤液于80℃下减压浓缩2.5小时，冷却至37℃，一边缓慢搅拌一边加入95％的乙醇，使其乙醇终浓度达到74％，密封，静置25小时，加热至72℃蒸除乙醇，得红景天提取物；肉苁蓉提取物、甘草提取物的制备方法同红景天提取物；
(3)匀质：按配比将南极磷虾多肽酶解液、红景天提取物，肉苁蓉提取物、甘草提取物与35℃下搅拌混匀后在45℃，22MPa下匀质；
(4)将步骤(3)中得到的混合液在95℃条件下杀菌20min，冷却至12℃进行真空包装，即得到一种具有缓解运动疲劳的南极磷虾多肽制剂。
功效实验：
1.负重游泳实验：以实施例1中一种具有缓解运动疲劳的南极磷虾多肽制剂按400mg·kg-1的量给PSF级昆明种小鼠每天灌服1次，连续灌服14d末次灌服受试样品后30min，将小鼠尾根部负荷5％体重的铅丝，置于游泳箱中游泳，水深不少于30cm，水温25±1.0℃，记录小鼠自游泳开始至死亡的时间，即小鼠负重游泳的时间，结果见表1。
2.血清尿素测定：以实施例1中一种具有缓解运动疲劳的南极磷虾多肽制剂按400mg·kg-1的量给PSF级昆明种小每天灌服1次，连续灌服14d，末次灌服受试品后30min，将小鼠置于温度为30±1℃的水中不负重游泳90min，休息60min后，小鼠拔眼球采全血约0.5mL，置4℃冰箱3h，血凝固后3000r/min离心20min，取血清用7060型HITACHI全自动生化分析仪在OD340nm处测定血清尿素含量，结果见表1。
3.肝糖元测定：以实施例1中一种具有缓解运动疲劳的南极磷虾多肽制剂按400mg·kg-1的量给PSF级昆明种小鼠每天灌服1次，连续灌服14d，末次给药前8h禁食，灌服受试品后30min，处死动物，取肝脏经生理盐水漂洗后用滤纸吸干，依照肝糖元测定试剂盒说明书制备样品，用752型紫外分光光度计在OD620nm处测定肝糖元的吸光度值并计算处理，结果见表1。
4.血乳酸测定：以实施例1中一种具有缓解运动疲劳的南极磷虾多肽制剂按400mg·kg-1的量给PSF级昆明种小鼠每天灌服1次，连续灌服14d。末次灌胃30分钟后，负5％体重，将小鼠放人30℃水中游泳45min，取出。安静15min后采血。在铜离子催化下，乳酸与浓硫酸在沸水中反应，乳酸转化为乙醛，乙醛与对经基联苯反应产生紫色化合物，用紫外分光光度计在波长560nm处测定乳酸吸光度值并计算处理，结果见表1。
空白对照组：给PSF级昆明种小鼠灌服等量蒸馏水，每组20只，雌雄各半，结果见表1。
表1一种具有缓解运动疲劳的南极磷虾多肽制剂对小鼠负重游泳时间、血清尿素含量、肝糖元含量、血乳酸含量的影响min
由表1结果表明：负重游泳实验14d后，灌服实施例1中一种具有缓解运动疲劳的南极磷虾多肽制剂组的小鼠均可显著延长负重游泳时间，灌服实施例1组与对照组比较有极显著性差异(P＜0.01)，具有统计学意义，可判断本实验结果为阳性。
由血清尿素含量测定可知，灌服实施例1中一种具有缓解运动疲劳的南极磷虾多肽制剂组有降低游泳小鼠血清尿素含量的作用，与对照组比较有极显著性差异(P＜0.01)，具有统计学意义，可判断本实验结果为阳性。
由肝糖元含量测定可知，灌服实施例1中一种具有缓解运动疲劳的南极磷虾多肽制剂组有增加小鼠肝糖元含量的作用，灌服南极磷虾多肽制剂可以降低剧烈体力运动后肝糖原的消耗，与对照组比较有极显著性差异(P＜0.01)，具有统计学意义，可判断本实验结果为阳性。
由血乳酸含量测定可知，灌服实施例1中一种具有缓解运动疲劳的南极磷虾多肽制剂组有降低小鼠血乳酸含量的作用，灌服南极磷虾多肽制剂可促进Cori循环中乳酸往肝脏的转运或促进肝脏糖异生作用，与对照组比较有极显著性差异(P＜0.01)，具有统计学意义，可判断本实验结果为阳性。
实验结果显示，灌服实施例1中一种具有缓解运动疲劳的南极磷虾多肽制剂的小鼠负重游泳实验结果为阳性，且血乳酸、血清尿素、肝糖元三项生化指标均为阳性，可判断上述南极磷虾多肽制剂具有缓解运动疲劳的作用。
实施例2：
一种具有缓解运动疲劳的南极磷虾多肽制剂，以重量百分比计配比如下：红景天提取物6％、肉苁蓉提取物4％、甘草提取物6％，其余为南极磷虾多肽酶解液。
上述具有缓解运动疲劳的南极磷虾多肽制剂的制备方法，包括以下步骤：
(1)制备南极磷虾多肽酶解液：取鲜冻南极磷虾粉，用150目筛子进行过滤，重复3次，加入比重1:60的去离子水，45℃混匀，加热至90℃进行灭酶25分钟，冷却至25℃，添加4000U/g酶解南极磷虾粉的无花果蛋白酶，在超声波辅助条件下浸提3.2小时，浸提温度为60℃，浸提后加热至98℃维持25min，冷却至22℃，7200转/分钟离心22分钟，取上清液，得南极磷虾多肽酶解液，4℃保藏备用；
(2)制备红景天提取物、肉苁蓉提取物、甘草提取物：将红景天干品粉碎，过80目筛2次，以料液比1：9浸于pH值8.0的纯净水中，纯净水用Na2CO3调节，在超声波的辅助条件下浸提2小时，浸提温度62℃，浸提结束后，用5层纱布过滤2次，合并滤液于80℃下减压浓缩3小时，冷却至35℃，一边缓慢搅拌一边加入95％的乙醇，使其乙醇终浓度达到72％，密封，静置36小时，加热至75℃蒸除乙醇，得红景天提取物；肉苁蓉提取物、甘草提取物的制备方法同红景天提取物；
(3)匀质：按配比将南极磷虾多肽酶解液、红景天提取物，肉苁蓉提取物、甘草提取物35℃搅拌混匀后在45℃、22MPa下匀质；
(4)将步骤(3)中得到的混合液在95℃条件下杀菌20min，冷却至12℃进行真空包装，即得到一种具有缓解运动疲劳的南极磷虾多肽制剂。
功效实验：
实验方法同实施例1，结果见表2。
表2一种具有缓解运动疲劳的南极磷虾多肽制剂对小鼠负重游泳时间、血清尿素含量、肝糖元含量的影响min
由表2结果表明：负重游泳实验14d后，灌服实施例2中一种具有缓解运动疲劳的南极磷虾多肽制剂组的小鼠均可显著延长负重游泳时间，灌服实施例2组与对照组比较有极显著性差异(P＜0.01)，具有统计学意义，可判断本实验结果为阳性。
由血清尿素含量测定可知，灌服实施例2中一种具有缓解运动疲劳的南极磷虾多肽制剂组有降低游泳小鼠血清尿素含量的作用，与对照组比较有极显著性差异(P＜0.01)，具有统计学意义，可判断本实验结果为阳性。
由肝糖元含量测定可知，灌服实施例2中一种具有缓解运动疲劳的南极磷虾多肽制剂组有增加小鼠肝糖元含量的作用，灌服南极磷虾多肽制剂可以降低剧烈体力运动后肝糖原的消耗，与对照组比较有极显著性差异(P＜0.01)，具有统计学意义，可判断本实验结果为阳性。
由血乳酸测定可知，灌服实施例2中一种具有缓解运动疲劳的南极磷虾多肽制剂组有降低小鼠血乳酸含量的作用，灌服南极磷虾多肽制剂可促进Cori循环中乳酸往肝脏的转运或促进肝脏糖异生作用，与对照组比较有极显著性差异(P＜0.01)，具有统计学意义，可判断本实验结果为阳性。
实验结果显示，灌服实施例2中一种具有缓解运动疲劳的南极磷虾多肽制剂的小鼠负重游泳实验结果为阳性，且血乳酸、血清尿素、肝糖元三项生化指标均为阳性，可判断上述南极磷虾多肽制剂具有缓解运动疲劳的作用。
实施例3：
一种具有缓解运动疲劳的南极磷虾多肽制剂，以重量百分比计配比如下：红景天提取物4％、肉苁蓉提取物7％、甘草提取物5％，其余为南极磷虾多肽酶解液。
上述具有缓解运动疲劳的南极磷虾多肽制剂的制备方法，包括以下步骤：
(1)制备南极磷虾多肽酶解液：取鲜冻南极磷虾粉，用250目筛子进行过滤，重复2次，加入比重1:45的去离子水，40℃混匀，加热至90℃进行灭酶30分钟，冷却至25℃，添加4500U/g酶解南极磷虾粉的菠萝蛋白酶，在超声波辅助条件下浸提2～4小时，浸提温度为55℃，浸提后加热至98℃保温25min，冷却至26℃，6700转/分钟离心20分钟，取上清液，得南极磷虾多肽酶解液，4℃保藏备用；
(2)制备红景天提取物、肉苁蓉提取物、甘草提取物：将红景天干品粉碎，过100目筛2次，以料液比为1：7浸于pH值8.0的纯净水中，纯净水用Na2CO3调节pH值，在超声波的辅助条件下浸提1.8小时，浸提温度68℃，浸提结束后，用5层纱布过滤2次，合并滤液于80℃下减压浓缩3.2小时，冷却至38℃，一边缓慢搅拌一边加入95％的乙醇，使其乙醇终浓度达到75％，密封，静置30小时，加热至72℃蒸除乙醇，得红景天提取物；肉苁蓉提取物、甘草提取物的制备方法同红景天提取物；
(3)匀质：按配比将南极磷虾多肽酶解液、红景天提取物，肉苁蓉提取物、甘草提取物35℃搅拌混匀后在45℃、22MPa下匀质；
(4)将步骤(3)中得到的混合液在95℃条件下杀菌20min，冷却至12℃进行真空包装，即得到一种具有缓解运动疲劳的的南极磷虾多肽制剂。
功效实验：
实验方法同实施例1，结果见表3。
表3一种具有缓解运动疲劳的南极磷虾多肽制剂对小鼠负重游泳时间、血清尿素含量、肝糖元含量的影响min
由表3结果表明：负重游泳实验14d后，灌服实施例3中一种具有缓解运动疲劳的南极磷虾多肽制剂组的小鼠均可显著延长负重游泳时间，灌服实施例3组与对照组比较有极显著性差异(P＜0.01)，具有统计学意义，可判断本实验结果为阳性。
由血清尿素含量测定可知，灌服实施例3中一种具有缓解运动疲劳的南极磷虾多肽制剂组有降低游泳小鼠血清尿素含量的作用，与对照组比较有极显著性差异(P＜0.01)，具有统计学意义，可判断本实验结果为阳性。
由肝糖元含量测定可知，灌服实施例3中一种具有缓解运动疲劳的南极磷虾多肽制剂组有增加小鼠肝糖元含量的作用，灌服南极磷虾多肽制剂可以降低剧烈体力运动后肝糖原的消耗，与对照组比较有极显著性差异(P＜0.01)，具有统计学意义，可判断本实验结果为阳性。
由血乳酸测定可知，灌服实施例3中一种具有缓解运动疲劳的南极磷虾多肽制剂组有降低小鼠血乳酸含量的作用，灌服南极磷虾多肽制剂可促进Cori循环中乳酸往肝脏的转运或促进肝脏糖异生作用，与对照组比较有极显著性差异(P＜0.01)，具有统计学意义，可判断本实验结果为阳性。
实验结果显示，灌服实施例3中一种具有缓解运动疲劳的南极磷虾多肽制剂的小鼠，负重游泳实验结果为阳性，且血乳酸、血清尿素、肝糖元三项生化指标均为阳性，可判断上述南极磷虾多肽制剂具有缓解运动疲劳的作用。
Claims (4)
1.一种具有缓解运动疲劳的南极磷虾多肽制剂，其特征在于，以重量百分比计配比如下：红景天提取物3%~6%、肉苁蓉提取物3%~7%、甘草提取物2%~6%，其余为南极磷虾多肽酶解液。
2.根据权利要求1所述的一种具有缓解运动疲劳的南极磷虾多肽制剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）制备南极磷虾多肽酶解液：取鲜冻南极磷虾粉，用100~500目筛子进行过滤，重复2~3次，加入比重1:30~100的去离子水，30~50℃混匀，加热至80~90℃进行灭酶20~30分钟，冷却至20~30℃，添加2500~4800U/g酶解南极磷虾粉的蛋白酶，在超声波辅助条件下浸提2~4小时，浸提温度为30~60℃，加热至90~100℃，10~30min，冷却至20~40℃，5000~8000转/min离心15~30分钟，取上清液，即得南极磷虾多肽酶解液，4℃保藏备用；
（2）制备红景天提取物、肉苁蓉提取物、甘草提取物：将红景天干品粉碎，50~150目过筛2次，浸于pH值7.3~8.5的纯净水中，料液比为1:5~9，在超声波的辅助条件下浸提1~2小时，浸提温度60~80℃，浸提结束后，用3~5层纱布过滤2~3次，合并滤液于80℃下减压浓缩2~4小时，冷却至35~55℃，一边缓慢搅拌一边加入95%的乙醇，使其乙醇终浓度达到70~75%，密封，静置20~40小时，加热至70~80℃蒸除乙醇，即得红景天提取物，冷却后4℃保藏备用；肉苁蓉提取物、甘草提取物的制备方法同红景天提取物；
（3）按配比将红景天提取物、肉苁蓉提取物、甘草提取物和南极磷虾多肽酶解液于35~55℃下混匀，高压匀质，杀菌后冷却至20~40℃，即得南极磷虾多肽酶解液。
3.根据权利要求2所述的一种具有缓解运动疲劳的南极磷虾多肽制剂的制备方法，其特征在于，步骤（1）中所述蛋白酶为几丁质酶、糜蛋白酶、无花果蛋白酶或菠萝蛋白酶。
4.根据权利要求2所述的一种具有缓解运动疲劳的南极磷虾多肽制剂的制备方法，其特征在于，步骤（3）中所述高压匀质的条件为15~30MPa， 45~60℃，步骤（3）中所述杀菌的条件为80~100℃，杀菌10~30分钟。
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