CN107018900A - 一种八仙花植株快速繁育的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种八仙花植株快速繁育的方法，包括如下步骤：取材，外植体的预处理，外植体不定根的诱导处理，外植体的定植，外植体的成苗管理。本发明的优点在于：其一，取材方便，材料丰富；其二，步骤简单、操作方便；其三，繁殖速度快(20天即可成苗)，繁育成本低；其四，不定根诱导为最关键步骤，严格优化并控制化学药剂的种类和浓度，使其成为八仙花植株不定根诱导的最佳浓度；其五，预处理、定植及成苗管理步骤中的消毒剂、营养补液以及培养基质等的种类和浓度选择也严格与八仙花植株生长过程中所需的必要元素相配合，同时避免有害元素的引入。

Description

一种八仙花植株快速繁育的方法
技术领域
本发明涉及八仙花植株繁育领域，尤其涉及一种八仙花植株快速繁育的方法。
背景技术
八仙花(学名：Hydrangea macrophylla(Thunb.)Ser.)，又名绣球花、紫阳花、绣球荚蒾。属虎耳草科八仙花属，小灌木。原产我国南方，是长江流域及以南地区著名观赏花卉，也是北方地区良好的盆栽花卉。八仙花端庄素雅，花大而美丽，花色富于变化，花期长(5-7月)，耐人欣赏，是观赏花木的珍品。同时如将整个花球剪下，瓶插室内，也是上等点缀品，具有鲜、干切花的优良特性，具有广阔的市场应用前景。
目前八仙花繁殖主要以扦插为主，这种繁殖方式繁殖系数低，扩繁速度慢，阻碍了新优品种进行快速繁殖和大规模的工厂化生产的进行。植物非试管快繁技术是通过利用计算机模拟控制技术和生物技术的有机结合，为植物离体材料的发育创造了最佳的温度、光照、营养和外源激素环境，从而实现苗木的快速繁育。该技术有别于传统的扦插，又有别于现代的组织培养技术，但同时又是对传统与现代各种育苗技术之集成与发展，它既有传统育苗的易操作性，又有现代育苗的高效性。目前，有关通过利用植物非试管快繁技术对八仙花优良株系进行繁育的研究鲜有报道。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供了一种步骤简单、操作方便、繁殖速度快的八仙花植株快速繁育的方法。
本发明是通过以下技术方案实现的：一种八仙花植株快速繁育的方法，包括如下步骤：
(1)取材
以田间多年生具有优良农艺性状的八仙花当年生微茎段为外植体；
(2)外植体的预处理
将步骤(1)中的八仙花微茎段剪切为适宜大小、带有1-2个腋芽和1-2片叶子的微茎段，接着置于流水下进行冲洗，冲洗后置于次氯酸钠溶液中进行表面消毒，捞出后，吸干水分、备用；
(3)外植体不定根的诱导处理
将步骤(2)中消毒后的八仙花微茎段的形态学下端置于含有500-1000mg/L2，4-D、1000-2000mg/L吲哚丁酸和500-1000mg/L亚精胺的生根促进液中进行不定根的诱导处理；
(4)外植体的定植
将步骤(3)中经过生根促进液处理后的八仙花微茎段的形态学下端切口插入浇有不含有机元素的MS基本培养液的沙盘中，以互不重叠为准；
(5)外植体的成苗管理
将步骤(4)中定植后的茎段盖上塑料膜，于温室大棚中进行成苗培养，最终获得健壮的八仙花再生植株。
作为本发明的优选方式之一，所述步骤(1)中优良农艺性状指具有花色特异、花期长、耐寒性强中一种或几种的性状。
作为本发明的优选方式之一，所述步骤(2)中适宜大小指长度1.0-3.0cm。
作为本发明的优选方式之一，所述步骤(2)中八仙花微茎段于流水下冲洗5-10min。
作为本发明的优选方式之一，所述步骤(2)中次氯酸钠溶液为1.0-5.0％(v/v)次氯酸钠消毒溶液。
作为本发明的优选方式之一，所述次氯酸钠溶液的使用方法为：将待消毒的样品置于1.0-5.0％(v/v)次氯酸钠消毒溶液中消毒2-5min。
作为本发明的优选方式之一，所述步骤(3)中将消毒处理后的八仙花微茎段的形态学下端置于生根促进液中浸泡10-40s。
作为本发明的优选方式之一，所述步骤(4)中沙盘为粒径为0.3-0.5mm的沙盘。
作为本发明的优选方式之一，所述步骤(4)中将经过生根促进液处理后的八仙花微茎段的形态学下端切口插入浇有不含有机元素的MS基本培养液的沙盘中，插入的长度为0.5-1.0cm。
作为本发明的优选方式之一，所述步骤(5)中温室大棚为温度25-30℃、相对湿度80-85％的温室大棚。
本发明相比现有技术的优点在于：本发明提供了一种八仙花植株快速繁育的方法，以田间八仙花优良株系的一叶一芽为外植体，通过化学药剂处理和生长条件控制，让其迅速生根成苗；具有以下突出优点：其一，取材方便，材料丰富；其二，步骤简单、操作方便；其三，繁殖速度快(20天即可成苗)，繁育成本低；其四，不定根诱导为最关键步骤，严格优化并控制化学药剂的种类和浓度，使其成为八仙花植株不定根诱导的最佳浓度；其五，预处理、定植及成苗管理步骤中的消毒剂、营养补液以及培养基质等的种类和浓度选择也严格与八仙花植株生长过程中所需的必要元素相配合，同时避免有害元素的引入。
附图说明
图1是实施例2中的一种八仙花植株快速繁育的方法的八仙花微茎不定根诱导图；
图2是实施例2中的一种八仙花植株快速繁育的方法的八仙花微茎植株再生图。
具体实施方式
下面对本发明的实施例作详细说明，本实施例在以本发明技术方案为前提下进行实施，给出了详细的实施方式和具体的操作过程，但本发明的保护范围不限于下述的实施例。
实施例1
本实施例的一种八仙花植株快速繁育的方法，包括如下步骤：
(1)取材
以田间多年生具有优良农艺性状(具有花色特异、花期长、耐寒性强中一种或几种的性状)的八仙花当年生微茎段为外植体；
(2)外植体的预处理
将步骤(1)中的八仙花微茎段剪切为长1.0cm、带有1个腋芽和1片叶子的微茎段，接着置于流水下进行冲洗，冲洗5min后置于1.0％(v/v)次氯酸钠消毒溶液中进行表面消毒2min，捞出后，吸干水分、备用；
(3)外植体不定根的诱导处理
将步骤(2)中消毒后的八仙花微茎段的形态学下端置于含有500mg/L 2，4-D、1000mg/L吲哚丁酸和500mg/L亚精胺的生根促进液中浸泡10s，进行不定根的诱导处理；
(4)外植体的定植
将步骤(3)中经过生根促进液处理后的八仙花微茎段的形态学下端切口插入浇有不含有机元素的MS基本培养液的沙盘(沙盘的粒径为0.3mm)中，以互不重叠为准；且插入的茎段长度为0.5cm；
(5)外植体的成苗管理
将步骤(4)中定植后的茎段盖上塑料膜，于温度25℃、相对湿度80％的温室大棚中进行成苗培养；培养10d后，腋芽萌发，且茎段基部膨大并伴有大量长度为0.5cm的淡黄色不定根形成，不定根的诱导率高达91.8％；培养20d后，获得完整的八仙花再生植株。
实施例2
本实施例的一种八仙花植株快速繁育的方法，包括如下步骤：
(1)取材
以田间多年生具有优良农艺性状(具有花色特异、花期长、耐寒性强中一种或几种的性状)的八仙花当年生微茎段为外植体；
(2)外植体的预处理
将步骤(1)中的八仙花微茎段剪切为长2.0cm、带有2个腋芽和2片叶子的微茎段，接着置于流水下进行冲洗，冲洗8min后置于3.5％(v/v)次氯酸钠消毒溶液中进行表面消毒3min，捞出后，吸干水分、备用；
(3)外植体不定根的诱导处理
将步骤(2)中消毒后的八仙花微茎段的形态学下端置于含有750mg/L 2，4-D、1500mg/L吲哚丁酸和750mg/L亚精胺的生根促进液中浸泡25s，进行不定根的诱导处理；
(4)外植体的定植
将步骤(3)中经过生根促进液处理后的八仙花微茎段的形态学下端切口插入浇有不含有机元素的MS基本培养液的沙盘(沙盘的粒径为0.4mm)中，以互不重叠为准；且插入的茎段长度为0.8cm；
(5)外植体的成苗管理
将步骤(4)中定植后的茎段盖上塑料膜，于温度28℃、相对湿度83％的温室大棚中进行成苗培养；培养7d后，腋芽萌发，且茎段基部膨大并伴有大量长度为0.8cm的淡黄色不定根形成(如图1所示)，不定根的诱导率高达100％；培养20d后，获得完整的八仙花再生植株(如图2所示)。
实施例3
本实施例的一种八仙花植株快速繁育的方法，包括如下步骤：
(1)取材
以田间多年生具有优良农艺性状(具有花色特异、花期长、耐寒性强中一种或几种的性状)的八仙花当年生微茎段为外植体；
(2)外植体的预处理
将步骤(1)中的八仙花微茎段剪切为长3.0cm、带有2个腋芽和2片叶子的微茎段，接着置于流水下进行冲洗，冲洗10min后置于5.0％(v/v)次氯酸钠消毒溶液中进行表面消毒5min，捞出后，吸干水分、备用；
(3)外植体不定根的诱导处理
将步骤(2)中消毒后的八仙花微茎段的形态学下端置于含有1000mg/L 2，4-D、2000mg/L吲哚丁酸和1000mg/L亚精胺的生根促进液中浸泡40s，进行不定根的诱导处理；
(4)外植体的定植
将步骤(3)中经过生根促进液处理后的八仙花微茎段的形态学下端切口插入浇有不含有机元素的MS基本培养液的沙盘(沙盘的粒径为0.5mm)中，以互不重叠为准；且插入的茎段长度为1.0cm；
(5)外植体的成苗管理
将步骤(4)中定植后的茎段盖上塑料膜，于温度30℃、相对湿度85％的温室大棚中进行成苗培养；研究发现高浓度的生根促进液能够推迟八仙花茎段不定根的形成，培养7d后，腋芽萌发，茎段基部有乳白色愈伤组织形成；培养14d后，茎段基部膨大并伴有大量长度为0.8cm的淡黄色不定根形成，不定根的诱导率高达100％；培养30d后，获得完整的八仙花再生植株。
实施例4
本实施例测试了含有机元素和不含有机元素的MS植物基本培养液对八仙花茎段不定根诱导的影响，包括如下步骤：
(1)取材
以田间多年生具有优良农艺性状(具有花色特异、花期长、耐寒性强中一种或几种的性状)的八仙花当年生微茎段为外植体；
(2)外植体的预处理
将步骤(1)中的八仙花微茎段剪切为长2.0cm、带有2个腋芽和2片叶子的微茎段，接着置于流水下进行冲洗，冲洗8min后置于3.5％(v/v)次氯酸钠消毒溶液中进行表面消毒3min，捞出后，吸干水分、备用；
(3)外植体不定根的诱导处理
将步骤(2)中消毒后的八仙花微茎段的形态学下端置于含有750mg/L 2，4-D、1500mg/L吲哚丁酸和750mg/L亚精胺的生根促进液中浸泡25s，进行不定根的诱导处理；
(4)外植体的定植
将步骤(3)中经过生根促进液处理后的八仙花微茎段的形态学下端切口分别插入浇有不含有机元素和含有的MS基本培养液的沙盘(沙盘的粒径为0.4mm)中，以互不重叠为准；且插入的茎段长度为0.8cm；
(5)外植体的成苗管理
将步骤(4)中定植后的茎段盖上塑料膜，于温度28℃、相对湿度83％的温室大棚中进行成苗培养；培养20d后，统计八仙花的生根率和长势(统计结果如表1所示)。研究结果表明,用含有有机元素的MS基本培养液作为营养补液容易滋生霉菌生长，不利于八仙花植株的再生；而采用不含有机元素的MS基本培养液浇灌基质一方面利于八仙花植株的生根，另一方面也促进八仙花再生植株的生长。
表1含有机元素和不含有机元素的MS培养液对八仙花微茎段离体再生的影响
注：数据为平均值，每个处理包含140个外植体，每个处理重复三次。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种八仙花植株快速繁育的方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)取材
以田间多年生具有优良农艺性状的八仙花当年生微茎段为外植体；
(2)外植体的预处理
将步骤(1)中的八仙花微茎段剪切为适宜大小、带有1-2个腋芽和1-2片叶子的微茎段，接着置于流水下进行冲洗，冲洗后置于次氯酸钠溶液中进行表面消毒，捞出后，吸干水分、备用；
(3)外植体不定根的诱导处理
将步骤(2)中消毒后的八仙花微茎段的形态学下端置于含有500-1000mg/L2，4-D、1000-2000mg/L吲哚丁酸和500-1000mg/L亚精胺的生根促进液中进行不定根的诱导处理；
(4)外植体的定植
将步骤(3)中经过生根促进液处理后的八仙花微茎段的形态学下端切口插入浇有不含有机元素的MS基本培养液的沙盘中，以互不重叠为准；
(5)外植体的成苗管理
将步骤(4)中定植后的茎段盖上塑料膜，于温室大棚中进行成苗培养，最终获得健壮的八仙花再生植株。
2.根据权利要求1所述的八仙花植株快速繁育的方法，其特征在于，所述步骤(1)中优良农艺性状指具有花色特异、花期长、耐寒性强中一种或几种的性状。
3.根据权利要求1所述的八仙花植株快速繁育的方法，其特征在于，所述步骤(2)中适宜大小指长度1.0-3.0cm。
4.根据权利要求1所述的八仙花植株快速繁育的方法，其特征在于，所述步骤(2)中八仙花微茎段于流水下冲洗5-10min。
5.根据权利要求1所述的八仙花植株快速繁育的方法，其特征在于，所述步骤(2)中次氯酸钠溶液为1.0-5.0％(v/v)次氯酸钠消毒溶液。
6.根据权利要求5所述的八仙花植株快速繁育的方法，其特征在于，所述次氯酸钠溶液的使用方法为：将待消毒的样品置于1.0-5.0％(v/v)次氯酸钠消毒溶液中消毒2-5min。
7.根据权利要求1所述的八仙花植株快速繁育的方法，其特征在于，所述步骤(3)中将消毒处理后的八仙花微茎段的形态学下端置于生根促进液中浸泡10-40s。
8.根据权利要求1所述的八仙花植株快速繁育的方法，其特征在于，所述步骤(4)中沙盘为粒径为0.3-0.5mm的沙盘。
9.根据权利要求1所述的八仙花植株快速繁育的方法，其特征在于，所述步骤(4)中将经过生根促进液处理后的八仙花微茎段的形态学下端切口插入浇有不含有机元素的MS基本培养液的沙盘中，插入的长度为0.5-1.0cm。
10.根据权利要求1所述的八仙花植株快速繁育的方法，其特征在于，所述步骤(5)中温室大棚为温度25-30℃、相对湿度80-85％的温室大棚。
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