CN107007813B - 一种高效解酒护肝组合物，其制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种高效解酒护肝组合物，其制备方法和应用。所述组合物以重量份数280～390份的脱水显齿蛇葡萄叶、重量份数210～580份的枳椇子、重量份数140～300份的玉米低聚肽粉和重量份数90～130份的阿萨伊果速溶粉组成。其中，脱水显齿蛇葡萄叶经超声提取，提取物总黄酮含量≥35％、二氢杨梅素含量25～32％；枳椇子经乙醇热回流提取，提取物总黄酮含量≥8％。阿萨伊果速溶粉由阿萨伊果打浆、过滤除渣、滤液浓缩、添加辅料、混合干燥制成。试验表明：本发明所述组合物能对显著降解大鼠血液中乙醇；持续增强小鼠肝脏中ADH活性；有效阻止酒精导致的肝脏GSH耗竭、MDA升高、降低TG含量，具有较好的预防和治疗酒精性肝损伤功效。
Description
技术领域
本发明涉及一种高效解酒护肝的组合物。尤其涉及显齿蛇葡萄叶、枳椇子、玉米低聚肽粉和阿萨伊果速溶粉的配伍组合物及其制备方法和应用。
技术背景
少量饮酒能活血、通络、散寒，过量饮酒则会产生“酒精中毒”(俗称醉酒)。医学上将酒精中毒分为急性酒精中毒和慢性酒精中毒两种。其中，急性酒精中毒是指过量饮酒后，在较短时间给患者带来恶心、呕吐、头晕、谵语、躁动、昏迷、大小便失禁、呼吸抑制甚至死亡的临床症状；慢性酒精中毒指由于长期过量饮酒，进入人体的乙醇不能被消化吸收，随血液进入大脑，破坏神经元细胞膜，削弱中枢神经系统，并通过激活抑制性神经原和抑制激活性神经原造成大脑活动迟缓、神经细胞坏死、严重者造成酒精性肝硬化和某些癌症(如口腔癌、舌癌、肝癌)。近年来，我国酒精消费群体与日俱增，已成为社会不安定因素而备受关注。目前，市场出现的解酒产品多以化学药品、中成药制剂为主，在解酒的同时，会不同程度加重肝脏、肾脏代谢负担而产生不同程度的伤害。
显齿蛇葡萄叶为国家卫计委(原卫生部)批准的新资源食品(公告号：2013年第16号)；玉米低聚肽粉为国家卫计委(原卫生部)批准的新资源食品(公告号：2010年第15号)；阿萨伊果为国家卫计委(原卫生部)批准的新资源食品(公告号：2013年第1号)。枳椇子作为传统药食同源药材，其解酒功能始载于我国《千金方》、《本草纲目》等医学巨著。现代药学、药理学、药效学、临床医学对枳椇子解酒作用的研究文献较多，作为解酒原料开发上市的产品也屡见不鲜。
“一种具有解酒、护肝功效的保健食品(专利授权公告号：CN 101731630 B)”公开了一种具有解酒、护肝功效的保健食品，该保健食品重量百分比包括以下组分：玉米低聚肽粉1.0％～100.0％、牛磺酸0.0％～40.0％、丙氨酸0.0％～30.0％、半胱氨酸0.0～50.0％、亮氨酸0.0％～30.0％、谷胱甘肽0.0％～30.0％、枳椇子提取物0.0％～30.0％、糙米胚芽0.0％～30.0％、葛根提取物0.0％～30.0％、辅料0.0％～95.5％。
本发明旨在采用新资源食品原料显齿蛇葡萄叶、玉米低聚肽粉、阿萨伊果与传统药食同源物质枳椇子组方，通过本发明特定比例、特定工艺及特定质量控制技术方案，制备高效解酒护肝组合物，为研究开发解酒护肝药品、保健食品、功能性普通食品、特殊医学用食品、特殊膳食食品提供组合原料或制剂。
发明内容
本发明的第一目的在于提供一种高效解酒护肝组合物及其制备方法。第二目的在于提供该组合物的应用。
本发明的第一目的是采用以下技术方案来实现的：
首先，本发明提供一种高效解酒护肝组合物，所述组合物以重量份数280～390份的脱水显齿蛇葡萄叶、重量份数210～580份的枳椇子、重量份数140～300份的玉米低聚肽粉和重量份数90～130份的阿萨伊果速溶粉组成。
优选地，所述组合物以重量份数300～390份的脱水显齿蛇葡萄叶、重量份数240～500份的枳椇子、重量份数140～250份的玉米低聚肽粉和重量份数100～130份的阿萨伊果速溶粉组成。
进一步优选，所述组合物以重量份数350～390份的脱水显齿蛇葡萄叶、重量份数250～350份的枳椇子、重量份数160～200份的玉米低聚肽粉和重量份数110～130份的阿萨伊果速溶粉组成。
最优选，所述组合物以重量份数370～380份的脱水显齿蛇葡萄叶、重量份数305～315份的枳椇子、重量份数185～195份的玉米低聚肽粉和重量份数120～130份的阿萨伊果速溶粉组成。
首先，本发明所述组合物中，脱水显齿蛇葡萄叶系采用超声法进行提取。具体为：将脱水显齿蛇葡萄叶粉碎过24目筛，按液料比(v/m)30:1加入70％的乙醇浸泡30min后进行超声提取3次，每次20min，收集提取液经减压浓缩、干燥、粉碎过80目筛得提取物。提取物中总黄酮质量百分含量≥35％，二氢杨梅素质量百分含量25～32％。其中，二氢杨梅素质量百分含量优选为26～31％，再优选为27～30％，最优选为28～29％。
其次，本发明所述组合物中，枳椇子系采用乙醇热回流法进行提取。具体为：将枳椇子粉碎过24目筛，按料液比(m/v)1:8加入70％乙醇，于80℃热回流提取1.5h。连续提取3次，合并提取液，减压浓缩至干，于105℃干燥3h，冷却至室温，粉碎过80目筛得提取物。提取物中总黄酮含量≥8％。
再其次，本发明组合物所述的阿萨伊果速溶粉，系将阿萨伊果鲜果洗净，挑选出劣质果，打浆，过滤除渣，滤液浓缩至相对密度1.20(20℃)，浓缩滤液按质量百分比(m/m)为85～90％:10～15％添加木糖醇、羧甲基纤维素、甲基纤维素、聚维酮K30中的一种或几种，混合、干燥、粉碎过80-100目筛制成。其中，浓缩滤液与辅料质量百分比(m/m)为85～90％:10～15％，优选为86～89％：11～14％，最优选为87～88％：12～13％。
最后，本发明组合物所述的玉米低聚肽粉，系采用食品级或药品级原料。
按本发明所述重量份数称取脱水显齿蛇葡萄叶、枳椇子，按上述方法制备提取物。将所得提取物转移至干燥洁净容器，按本发明所述重量份数添加上述阿萨伊果速溶粉、玉米低聚肽粉，充分搅拌使混合均匀，即得本发明所述组合物。
本发明的第二目的是采用下述技术方案实现的：
首先，本发明所述组合物，具有解酒、保肝、护肝功能/功效，可应用于药品、保健食品、功能性普通食品、特殊医学食品、特殊膳食食品研究开发。
其次，本发明所述组合物，根据需要可添加或不添加药品、保健食品、功能性普通食品、特殊医学食品、特殊膳食食品可接受的辅料，进一步制成粉剂、颗粒剂、片剂、硬胶囊剂、滴丸等固体口服制剂。
具体实施方式
下面通过具体实施例对本发明作进一步说明，但不以任何方式对本发明加以限制，基于本发明教导所作的任何变化或替换，均属本发明保护范围。
实施例1：显齿蛇葡萄叶提取物的制备
将脱水显齿蛇葡萄叶粉碎过24目筛。称取粗粉5.8kg，按液料比(v/m)30:1加入70％乙醇浸泡30min后，超声提取3次，每次20min，收集提取液经减压浓缩、干燥、粉碎过80目筛得提取物2000g。经检测：提取物总黄酮质量百分含量为36.2％，二氢杨梅素质量百分含量为28.2％。
实施例2：枳椇子提取物的制备
将枳椇子粉碎过24目筛。称取粗粉16.5kg，按料液比(m/v)1:8加入70％乙醇，于80℃热回流提取3次，每次1.5h。合并3次提取液，减压浓缩至干，于105℃干燥3h，冷却至室温，粉碎过80目筛得提取物1600g。经检测：提取物总黄酮质量百分含量为8.3％。
实施例3：阿萨伊果速溶粉的制备
将阿萨伊果鲜果洗净，挑出劣质果。称取优质鲜果4100g置于打浆机中打浆，过滤除渣，滤液浓缩至相对密度1.20(20℃)。浓缩滤液按质量百分比(m/m)88％:12％添加木糖醇、甲基纤维素，充分搅拌混合、干燥、粉碎过80目筛，得阿萨伊果速溶粉1200g。
实施例4：玉米低聚肽粉的准备
直接购置食品级玉米低聚肽粉1100g。
实施例5：组合物制备1
称取实施例1制备的显齿蛇葡萄叶提取物9.8g、实施例2制备的枳椇子提取物2.2g、实施例3制备的阿萨伊果速溶粉9g、实施例4准备的玉米低聚肽粉14g。将上述显齿蛇葡萄叶提取物、枳椇子提取物、阿萨伊果速溶粉、玉米低聚肽粉置于干燥洁净的容器中，充分搅拌使混合均匀，过80目筛，得组合物33g。
实施例6：组合物制备2
称取实施例1制备的显齿蛇葡萄叶提取物11.2g、实施例2制备的枳椇子提取物2.5g、实施例3制备的阿萨伊果速溶粉10g、实施例4准备的玉米低聚肽粉15g。将上述显齿蛇葡萄叶提取物、枳椇子提取物、阿萨伊果速溶粉、玉米低聚肽粉置于干燥洁净的容器中，充分搅拌使混合均匀，过80目筛，得组合物37g。
实施例7：组合物制备3
称取实施例1制备的显齿蛇葡萄叶提取物1395g、实施例2制备的枳椇子提取物1138g、实施例3制备的阿萨伊果速溶粉441g、实施例4准备的玉米低聚肽粉698g。将上述显齿蛇葡萄叶提取物、枳椇子提取物、阿萨伊果速溶粉、玉米低聚肽粉置于干燥洁净的容器中，充分搅拌使混合均匀，过80目筛，得组合物3670g。
实施例8：组合物制备4
称取实施例1制备的显齿蛇葡萄叶提取物12.3g、实施例2制备的枳椇子提取物2.8g、实施例3制备的阿萨伊果速溶粉11g、实施例4准备的玉米低聚肽粉16g。将上述显齿蛇葡萄叶提取物、枳椇子提取物、阿萨伊果速溶粉、玉米低聚肽粉置于干燥洁净的容器中，充分搅拌使混合均匀，过80目筛，得组合物40.5g。
实施例9：粉剂的制备
称取实施例7制备的组合物1000g置干压机内，调节适合的滚筒压力干压、过筛、包装成8克/袋，即得具有解酒护肝活性的粉剂。
实施例10：颗粒剂的制备
称取实施例7制备的组合物900g,添加糖粉、糊精、乳糖、甘露醇等辅料适量，经制粒、干燥、包装，即得具有解酒护肝活性的颗粒剂。
实施例11：片剂的制备
称取实施例7制备的组合物400g,添加淀粉、糖粉、β-环糊精、聚维酮等辅料适量，经混合、制粒、压片、包装，即得具有解酒护肝活性的片剂。
实施例12：硬胶囊剂的制备
称取实施例7制备的组合物350g,添加蔗糖、乳糖、微晶纤维素、二氧化硅、硬脂酸镁等辅料适量，经混合、制粒、充填、包装，即得具有解酒护肝活性的硬胶囊。
实施例13：滴丸剂的制备
称取实施例7制备的组合物600g，添加PEG6000适量,经混合、制丸、冷却、洗丸、干燥，即得具有解酒护肝活性的滴丸。
为了更进一步对本发明组合物技术效果进行说明，本发明选取实施例1制备的显齿蛇葡萄叶提取物、实施例2制备的枳椇子提取物、实施例3制备的阿萨伊果速溶粉、实施例4准备的玉米低聚肽粉以及四者非本发明组合比例按实施例7的制备方法制备的组合物(由显齿蛇葡萄叶提取物140g、枳椇子提取物20g、阿萨伊果速溶粉160g、玉米低聚肽粉100g混合制成)作为对照样品，编号为①、②、③、④、⑤；选取实施例7制备的组合物作为试验样品，编号为⑥，开展对急性酒精中毒大鼠血液中乙醇浓度的影响、对小鼠酒后体内乙醇脱氢酶活性影响、对大鼠酒精性肝损伤的保护作用试验。具体如下：
1、对急性酒精中毒大鼠血液中乙醇浓度的影响试验
试验动物及器材：昆明种雄性健康大鼠(200±20g)；52°红星二锅头白酒(北京红星酿酒厂)；生理盐水；酒精干片试剂；全自动生化检测仪。
给样剂量：本发明所述组合物(试验样品⑥)60kg成年人给样剂量确定为7.6g/天，据此折算每天大鼠给样剂量为0.798g/kg BW。依据等剂量给样可比原则确定对照样品⑤每天大鼠给样剂量为0.798g/kg BW。依据等剂量给样可比原则，结合国家药典或相关行业标准推荐的显齿蛇葡萄叶提取物、枳椇子提取物、阿萨伊果速溶粉最高日推荐剂量确定对照样品①～③每天大鼠给样剂量均为0.798g/kg BW，样品④每天大鼠给样剂量为0.473g/kgBW。
试验方案设计：选取昆明种雄性大鼠70只，正常情况下喂养一周后随机选取10只作为模型组，其余随机分为样品①～⑥组，每组10只。禁食12小时，空腹眼眶静脉丛取血。样品①～⑥组按给样量给样，模型对照组给予等量生理盐水，给药半小时后按0.015ml/g量的白酒同时给7组大鼠灌胃处理，每组均抽取眼眶静脉血待测，分别在灌酒后1小时、2小时、3小时、4小时准时取血，测定血中酒精浓度。(酒精浓度采用酒精干片试剂进行测定。仪器为美国柯达公司VTTROs250干化学全自动生化分析仪。)结果均用统计学处理，采用t检验。结果见表1。
表1各样品对大鼠血液中乙醇浓度的影响试验结果(单位mmol/mL)(
n＝10)
(样品⑥相较于模型对照组及样品①～⑤各组，其血液乙醇浓度P值均小于0.01，具有高度的统计学意义)
试验结论：从表1可以看出，酒后4h内，样品⑥相较于模型对照组及样品①～⑤各组，其血液乙醇浓度P值均小于0.01，具有高度的统计学意义，说明本发明所述的组合物(样品⑥)对大鼠血液中的乙醇有显著的降解作用。
2、对小鼠酒后体内乙醇脱氢酶活性影响试验
试验动物及器材：昆明种健康雄性小鼠(20±2g)；生理盐水；电子天平、UV752N紫外可见分光光度计、离心机、离心管。
给样剂量：本发明所述组合物(试验样品⑥)60kg成年人给样剂量确定为7.6g/天，据此折算每天小鼠给样剂量为0.988g/kg BW。依据等剂量给样可比原则确定对照样品⑤每天小鼠给样剂量为0.988g/kg BW。依据等剂量给样可比原则，结合国家药典或相关行业标准推荐的显齿蛇葡萄叶提取物、枳椇子提取物、阿萨伊果速溶粉最高日推荐剂量确定对照样品①～③小鼠每天给样剂量均为0.988g/kg BW，样品④小鼠每天给样剂量为0.585g/kgBW。
试验方案设计：选取健康昆明种雄性小鼠80只,自由进食、进水喂养一周后，随机分为空白对照、模型对照、样品①～⑥组共计8组，每组各10只。样品组每日按规定剂量灌胃给予对应样品、空白对照组和模型组每日给予等量0.9％生理盐水喂养，连续喂养四周，于四周末次给样30min后，一次性给予模型组和样品组50％乙醇(12ml/kg BW)，空白对照组给等量0.9％生理盐水。分别在灌酒后0.5h、1h、2h和3h取左肝叶边缘肝脏组织，大小为2mm×2mm×2mm(空白对照组小鼠只摘取肝脏组织)。用生理盐水冲洗取出的肝脏，滤纸吸净后称重，在冰浴中用玻璃匀浆器制备匀浆，3000r/min低温离心5min，上清液备检测。在1cm比色杯内加0.0021mol/L的NAD2.8mL，空白管加蒸馏水0.2mL，样品管加0.3mol/L乙醇和上清液各0.1mL，混匀后于340nm测上述各管吸光度，观测其5min内变化率△A/min。
ADH活性计算：
式中，E为摩尔消光系数，E＝6.22×103；L为比色杯厚度；3.1为反应液总体积/mL；0.1为加入反应体系的ADH提取液体积；m为肝质量；V为匀浆体积。
试验结果如表2所示：
表2不同组急性酒精中毒小鼠肝中乙醇脱氢酶活性(单位：U·g-1)(
n＝10)
试验结论：表2看出，酒后3h内，与空白组比较，模型组肝中ADH活性升高(P<0.05)；与模型组比较，样品⑤和样品⑥组肝中ADH活性升高(P<0.01)、样品①和样品④样品组肝中ADH活性也有所升高(P<0.05)、样品②和样品③中组肝中ADH活性也有所升高，但无显著差异(P＞0.05)；样品⑥相较于样品⑤组肝中ADH活性升高(P＜0.05)。说明，本发明所述组合物(样品6)对小鼠肝脏中ADH活性不仅有较好的增强作用，而且还有良好的持续增强作用。
3、对大鼠酒精性肝损伤的保护作用
试验动物及器材：昆明种雄性健康大鼠(200±20g)；52°红星二锅头白酒(北京红星酿酒厂)；生理盐水；分光光度计、离心机、离心管、组织匀浆器。
给样剂量：本发明所述组合物(试验样品⑥)60kg成年人给样剂量确定为7.6g/天，据此折算每天大鼠给样剂量为0.798g/kg BW。依据等剂量给样可比原则确定对照样品⑤每天大鼠给样剂量为0.798g/kg BW。依据等剂量给样可比原则，结合国家药典或相关行业标准推荐的显齿蛇葡萄叶提取物、枳椇子提取物、阿萨伊果速溶粉最高日推荐剂量确定对照样品①～③每天大鼠给样剂量均为0.788g/kg BW，样品④每天大鼠给样剂量为0.473g/kgBW。
试验方案设计：选取健康昆明种雌性大鼠80只,自由进食、进水喂养一周后，随机分为空白对照、模型对照、样品①～⑥组共计8组，每组各10只。样品组每日按规定剂量灌胃给予对应样品、空白对照组和模型组每日给予等量0.9％生理盐水喂养，连续喂养四周，于四周末次给样30min后，一次性给予模型组和样品组50％乙醇(12ml/kg BW)，空白对照组给等量0.9％生理盐水，禁食不禁水16h将小鼠处死，解刨取出完整肝脏，预冷生理盐水清洗至洗液无血色后，吸干肝脏表面水分。剪取0.1g肝脏组织置于小烧杯中，准备9倍于肝脏重量的生理盐水，转移总量2/3的生理盐水于烧杯中，尽快剪碎肝脏，倒入玻璃匀浆器，剩下的1/3冲洗后一起倒入进行匀浆，制成10％的组织匀浆，于离心机中以2000r/min离心15min,取上清液检测GSH、MDA和TG等指标。结果见表3。
表3各样品对肝匀浆中各指标的影响(单位μmol/g肝)(
n＝10)
试验结论：从表3可知，肝损伤模型对照组小鼠与空白对照组比较：MDA含量明显升高(P<0.01)、GSH含量明显降低(P<0.01)、TG含量明显升高(P<0.01)，说明肝损伤模型成立；样品⑥组较模型对照组及样品①～④组MDA含量明显降低(P<0.01)、GSH含量明显升高(P<0.01)、TG含量明显降低(P<0.O1)，样品⑤组较样品⑥组MDA含量升高(P<0.05)、GSH含量降低(P<0.05)、TG含量升高(P<0.O5)。说明本发明所述的组合物(样品⑥)能有效地阻止酒精导致的肝脏GSH耗竭和MDA升高，降低TG含量，具有较好的预防和治疗乙醇性肝损伤功效。
Claims (7)
1.一种高效解酒护肝组合物，其特征在于：所述组合物以重量份数280～390份的脱水显齿蛇葡萄叶采用超声提取法提取、总黄酮质量百分比含量≥35％、二氢杨梅素质量百分比含量为25～32％的显齿蛇葡萄叶提取物，重量份数210～580份的枳椇子采用乙醇热回流提取、总黄酮质量百分比含量≥8％的枳椇子提取物，重量份数140～300份的玉米低聚肽粉，重量份数90～130份的阿萨伊果速溶粉制成；所述显齿蛇葡萄叶提取物系将脱水显齿蛇葡萄叶粉碎过24目筛，按液料质量体积比为30:1加入70％的乙醇浸泡30分钟后进行超声提取3次、每次20分钟，收集提取液经减压浓缩、干燥、粉碎过80目筛制得；所述枳椇子提取物系将枳椇子经粉碎过24目筛，按料液质量体积比为1:8加入70％乙醇，于80℃热回流提取3次、每次1.5小时，合并提取液经减压浓缩至干、于105℃干燥3小时、冷却至室温、粉碎过80目筛制得；所述阿萨伊果速溶粉系将阿萨伊果鲜果洗净，挑选出劣质果，打浆，过滤除渣，滤液浓缩至20℃测定相对密度1.20，浓缩液按质量百分比为85～90％:10～15％添加木糖醇、羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、聚维酮K30中的一种或几种，混合、干燥、粉碎过80-100目筛制得；所述玉米低聚肽粉系采用食品级或药品级原料。
2.如权利要求1所述组合物，其特征在于：所述组合物以重量份数300～390份的脱水显齿蛇葡萄叶采用超声提取法提取、总黄酮质量百分比含量≥35％、二氢杨梅素质量百分比含量为26～31％的显齿蛇葡萄叶提取物，重量份数240～500份的枳椇子采用乙醇热回流提取、总黄酮质量百分比含量≥8％的枳椇子提取物，重量份数140～250份的玉米低聚肽粉，重量份数100～130份的阿萨伊果速溶粉制成。
3.如权利要求1所述组合物，其特征在于：所述组合物以重量份数350～390份的脱水显齿蛇葡萄叶采用超声提取法提取、总黄酮质量百分比含量≥35％、二氢杨梅素质量百分比含量为27～30％的显齿蛇葡萄叶提取物，重量份数250～350份的枳椇子采用乙醇热回流提取、总黄酮质量百分比含量≥8％的枳椇子提取物，重量份数160～200份的玉米低聚肽粉，重量份数110～130份的阿萨伊果速溶粉制成。
4.如权利要求1所述组合物，其特征在于：所述组合物以重量份数370～380份的脱水显齿蛇葡萄叶采用超声提取法提取、总黄酮质量百分比含量≥35％、二氢杨梅素质量百分比含量为28～29％的显齿蛇葡萄叶提取物，重量份数305～315份的枳椇子采用乙醇热回流提取、总黄酮质量百分比含量≥8％的枳椇子提取物，重量份数185～195份的玉米低聚肽粉，重量份数120～130份的阿萨伊果速溶粉制成。
5.如权利要求1-4任意一项所述组合物，其特征在于：所述浓缩液与辅料质量百分比为86～89％：11～14％。
6.如权利要求5所述组合物，其特征在于：所述浓缩液与辅料质量百分比为87～88％：12～13％。
7.如权利要求1-4任意一项所述组合物，其特征在于：所述组合物应用于具有解酒护肝功效的药品、保健食品、特殊膳食食品；添加或不添加药品、保健食品、特殊膳食食品接受的辅料，进一步制成粉剂、颗粒剂、片剂、硬胶囊剂、滴丸剂。
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