CN106906206A - 一种富硒酵母、制备方法及应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种富硒酵母、制备方法及应用,包括以下步骤:将乙醇假丝酵母Candida ethanolica进行氮离子注入诱变,经过多次诱变筛选,获得耐受高浓度亚硒酸钠的乙醇假丝酵母突变菌株,种子培养液制备,将种子培养液接种至含有发酵培养基中,发酵至对数生长期,在发酵产物中补加亚硒酸钠,继续发酵培养,收集发酵产物;将发酵液,离心洗涤,干燥后制得淡黄色粉末状产品。本发明含有大量的氨基酸及小肽,极易被动物所消化吸收,酵母中的有机硒可随着氨基酸及小肽的吸收而被生物体充分吸收,大大提高了有机硒的消化利用率。同等添加量情况下比同类产品有明显的生产性能方面的优势,或达到同等的生产性能情况下可以减少添加量,降低成本。
Description
技术领域
本发明涉及一种生物富硒酵母,尤其涉及的是一种富硒酵母、制备方法及应用。
背景技术
硒是生物体生命活动所必需的微量元素之一,具有增强机体免疫力、抗氧化和抗衰老等诸多功能。同时,硒也是人和动物体内谷胱甘肽过氧化物酶的辅助因子,具有清除对机体有害的自由基,防止细胞膜氧化受损的作用。相反,缺硒则可能导致癌症、心肌梗塞等多种疾病发生。因此,通过膳食摄取足够的硒,尤其是有机硒,对于预防疾病,维持机体健康有着重要的作用。
生物富硒是获取有机硒的有效途径。目前,生物富硒的方法主要为微生物转化法。用于富硒的微生物有食用菌类、酵母类和细菌等,其中酵母是目前公认的最理想的富硒载体。酵母具有较高的富硒能力,在酵母生长过程中,将无机硒吸收,并将毒性较高的无机硒转化为安全的有机硒,纳入菌体,成为其蛋白质的一部分,主要以含硫氨基酸的类似物(蛋氨酸硒或胱氨酸硒)成为蛋白质的结构组成部分。
啤酒酵母具有生长繁殖快,发酵周期短,对微量元素吸收率高等特点,目前文献报道的富硒酵母生产方法,也大都集中在酿酒酵母上。将普通的酿酒酵母在添加适量的亚硒酸钠的发酵液培养基中,于一定的培养条件下培养,最终获得富硒酵母,进一步开发成富硒产品。而对于其他酵母菌株的富硒能力,目前研究开发得较少,一方面导致各家公司的富硒产品同质化严重,另一方面也极大的限制了其他酵母菌株在富硒产品生产中的应用。因此,开发利用酿酒酵母之外的富硒酵母菌株,生产营养成分多元化、更具特色的富硒产品,对于提升产品竞争力,加快富硒特色产业发展,具有重要意义。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的不足,提供了一种富硒酵母、制备方法及应用,制得富硒酵母中的硒含量高达3000ppm以上。
本发明是通过以下技术方案实现的:本发明的一种富硒酵母的制备方法,包括以下步骤:
(1)富硒菌株选育
将乙醇假丝酵母Candida ethanolica进行氮离子注入诱变,经过多次诱变筛选,获得耐受高浓度亚硒酸钠的乙醇假丝酵母突变菌株,命名为C.ethanolica cas8;
(2)种子培养液制备
将乙醇假丝酵母突变菌株C.ethanolica cas8接种在斜面培养基得到斜面菌株,再将斜面菌株接种于种子培养基中,得到种子培养液;
(3)发酵培养
将种子培养液按体积百分含量8~12%的接种量接种至含有发酵培养基中,发酵10~12h至对数生长期,在发酵产物中补加终浓度为150~200mg/L的亚硒酸钠,继续发酵培养20~24h,收集发酵产物;
(4)发酵产物收集
将发酵液,离心洗涤,干燥后制得淡黄色粉末状产品,产品水分小于8%。
所述步骤(1)包括以下步骤:
(11)乙醇假丝酵母C.ethanolica采用YEPD培养平板上培养24~36h,挑取单菌落至含YEPD液体培养基的培养瓶中,160~180rpm,震荡培养20~24h,菌液离心洗涤,制成单细胞悬液,使细胞浓度在108~109个/mL;
(12)将菌悬液均匀涂布到无菌培养皿中,风干制成菌膜;
(13)在N+注入机中进行离子注入,能量14~18KeV;
(14)每个菌株做6个梯度剂量,每个剂量两个平板,N+注入剂量分别为2.0×1014、4.0×1014、6.0×1014、8.0×1014、1.0×1015、1.2×1015ion/cm2,并做真空对照平板;
(15)诱变完成后,加入无菌水洗涤菌体制成菌悬液;
(16)将菌悬液稀释104~108倍涂布于含亚硒酸钠的筛选培养基,经过多次诱变筛选,获得耐受高浓度亚硒酸钠的酵母突变菌株,而且其发酵生物量在同等条件下比出发菌株提高,命名为C.ethanolica cas8。
所述步骤(2)中,将乙醇假丝酵母C.ethanolica cas8接种在斜面培养基25~30℃培养16~24h,得到斜面菌株,再将所述斜面菌株接种于种子培养基中,25~30℃、160~180r/min、振荡培养16~24h,得到种子培养液。
所述步骤(2)中,斜面培养基包括以下组分:葡萄糖15~20g/L,蛋白胨15~20g/L,酵母膏5~10g/L,亚硒酸钠20~30mg/L,琼脂12~18g/L。
所述步骤(2)中,种子培养基包括以下组分:麦芽抽提物10~20g/L,蛋白胨10~15g/L,酵母膏5~10g/L,亚硒酸钠30~60mg/L。
所述步骤(3)中,发酵培养基包括以下组分:可发酵还原糖200~300g/L,硫酸铜0.025~0.04g/L,硫酸锰0.02~0.03g/L,硫酸亚铁0.25~0.35g/L,硫酸镁4.5~6.0g/L,硫酸锌1.5~2.5g/L,氯化钙2.5~4.5g/L,硫酸铵4~6g/L,氯化钠7.5~10g/L,谷氨酸6~10g/L,L-半胱氨酸为10~12g/L,其余部分用蒸馏水补足至1L。
所述步骤(3)中,发酵条件为:25~30℃,溶氧为50~70%,pH为5.5~6.0。
一种使用所述的富硒酵母的制备方法制得的富硒酵母。
所述富硒酵母生物量达10~15g/L,得到的每kg富硒酵母产品中有机硒含量为4000~5000mg,其中硒蛋氨酸含量大于60%,无机硒含量不超过总硒含量2%。
一种富硒酵母在食品、保健品或饲料添加剂中的应用。
本发明相比现有技术具有以下优点:本发明采用的富硒酵母C.ethanolica cas8发酵得到的产品生物量高,且酵母细胞有机硒含量高,每kg富硒酵母干粉产品中,有机硒含量可达4000~5000mg,硒转化率高达95~99%。同时,通过本发明的制备方法所得到的富硒酵母产品中,含有大量的氨基酸及小肽,极易被动物所消化吸收,酵母中的有机硒可随着氨基酸及小肽的吸收而被生物体充分吸收,大大提高了有机硒的消化利用率。用于医药、食品、饲料等领域时,同等添加量情况下比同类产品有明显的生产性能方面的优势,或达到同等的生产性能情况下可以减少添加量,降低成本。此外,本发明中制得的富硒酵母产品中硒蛋氨酸含量可占有机硒总量的65~70%,高硒蛋氨酸含量也是本发明的一大特点。
具体实施方式
下面对本发明的实施例作详细说明,本实施例在以本发明技术方案为前提下进行实施,给出了详细的实施方式和具体的操作过程,但本发明的保护范围不限于下述的实施例。
实施例1
本实施例的富硒酵母制备方法如下:
(1)富硒菌株选育
乙醇假丝酵母C.ethanolica采用YEPD培养平板上培养24~36h,挑取单菌落至含100ml YEPD液体培养基的250ml三角瓶中,160~180rpm,震荡培养20~24h,菌液离心洗涤3次,制成单细胞悬液,使细胞浓度在108~109个/mL。取0.1mL菌悬液均匀涂布到无菌培养皿中,置于超净工作台风干制成菌膜。在N+注入机中进行离子注入,能量15KeV。每个菌株做6个梯度剂量,每个剂量两个平板。N+注入剂量分别为2.0×1014、4.0×1014、6.0×1014、8.0×1014、1.0×1015、1.2×1015ion/cm2,并做真空对照平板。诱变完成后,加入1ml无菌水洗涤菌体制成菌悬液。将菌悬液稀释104倍涂布于含亚硒酸钠的筛选培养基,采用3,3'-二氨基联苯胺盐酸盐法测定酵母菌株硒的含量。经过多次诱变筛选,获得耐受高浓度亚硒酸钠(200mg/L)的酵母突变菌株,而且其发酵生物量在同等条件下较出发菌株提高了近一倍,命名为C.ethanolica cas8。
(2)种子培养液制备
将上述乙醇假丝酵母C.ethanolica cas8接种在斜面培养基28℃培养16h,得到斜面菌株,斜面培养基成分组成为:葡萄糖15g/L,蛋白胨15/L,酵母膏5g/L,亚硒酸钠20mg/L,琼脂12g/L。
将上述斜面菌株接种于80mL的种子培养基中,28℃、160r/min、振荡培养16h,得到种子培养液。种子培养基成分组成为:麦芽抽提物10g/L,蛋白胨10g/L,酵母膏5g/L,亚硒酸钠30mg/L。
(3)发酵培养
发酵培养基成分组成为:可发酵还原糖200g/L,硫酸铜0.025g/L,硫酸锰0.02g/L,硫酸亚铁0.25g/L,硫酸镁4.5g/L,硫酸锌1.5g/L,氯化钙2.5g/L,硫酸铵4g/L,氯化钠7.5g/L,谷氨酸6g/L,L-半胱氨酸为10g/L,其余部分用蒸馏水补足至1L。
将种子培养液按8%(体积百分含量)的接种量接种至含有发酵培养基的50L发酵罐中(装液量为45%),28℃,溶氧控制50~60%,pH维持5.5,发酵10h至对数生长期,在发酵产物中补加终浓度为150mg/L的亚硒酸钠,继续发酵培养20h,收集发酵产物。
(4)发酵产物收集及富硒能力检测
收集经过上述步骤制得的发酵液,离心机离心,洗涤,160℃喷雾干燥,制得淡黄色粉末状产品,产品水分小于7%。
采用常规检测方法,检测发现所得发酵液中富硒酵母生物量可达12g/L,得到的每kg富硒酵母产品中有机硒含量为4000mg,其中硒蛋氨酸含量大于65%,无机硒含量不超过总硒含量2%。
实施例2
本实施例的富硒酵母制备方法如下:
(1)富硒菌株选育
富硒菌株选育的过程和实施例1相同。
(2)种子培养液制备
将乙醇假丝酵母C.ethanolica cas8接种在斜面培养基28℃培养20h,得到斜面菌株,斜面培养基成分组成为:葡萄糖18g/L,蛋白胨17g/L,酵母膏7g/L,亚硒酸钠25mg/L,琼脂14g/L。
将上述斜面菌株接种于80mL的种子培养基中,28℃、170r/min、振荡培养20h,得到种子培养液。种子培养基成分组成为:麦芽抽提物18g/L,蛋白胨13g/L,酵母膏7g/L,亚硒酸钠45mg/L。
(3)发酵培养
发酵培养基成分组成为:可发酵还原糖250g/L,硫酸铜0.035g/L,硫酸锰0.025g/L,硫酸亚铁0.31g/L,硫酸镁5.2g/L,硫酸锌2.1g/L,氯化钙3.5g/L,硫酸铵4.8g/L,氯化钠8.5g/L,谷氨酸8g/L,L-半胱氨酸为11g/L,其余部分用蒸馏水补足至1L。
将种子培养液按10%(体积百分含量)的接种量接种至含有发酵培养基的50L发酵罐中(装液量为45%),28℃,溶氧控制60~70%,pH维持5.5~6.0,发酵10h至对数生长期,在发酵产物中补加终浓度为180mg/L的亚硒酸钠,继续发酵培养22h,收集发酵产物。
(4)发酵产物收集及富硒能力检测
收集经过上述步骤制得的发酵液,离心机离心,洗涤,160℃喷雾干燥,制得淡黄色粉末状产品,产品水分小于7%。
采用常规检测方法,检测发现所得发酵液中富硒酵母生物量可达15g/L,得到的每kg富硒酵母产品中有机硒含量为5000mg,其中硒蛋氨酸含量大于65%,无机硒含量不超过总硒含量2%。
实施例3
本实施例的富硒酵母制备方法如下:
(1)富硒菌株选育
富硒菌株选育的过程和实施例1相同。
(2)种子培养液制备
将上述乙醇假丝酵母C.ethanolica cas8接种在斜面培养基28℃培养24h,得到斜面菌株,斜面培养基成分组成为:葡萄糖20g/L,蛋白胨20g/L,酵母膏10g/L,亚硒酸钠30mg/L,琼脂18g/L。
将上述斜面菌株接种于80mL的种子培养基中,28℃、180r/min、振荡培养24h,得到种子培养液。种子培养基成分组成为:麦芽抽提物20g/L,蛋白胨15g/L,酵母膏10g/L,亚硒酸钠60mg/L。
(3)发酵培养
发酵培养基成分组成为:可发酵还原糖300g/L,硫酸铜0.04g/L,硫酸锰0.03g/L,硫酸亚铁0.35g/L,硫酸镁6.0g/L,硫酸锌2.5g/L,氯化钙4.5g/L,硫酸铵6g/L,氯化钠10g/L,谷氨酸10g/L,L-半胱氨酸为12g/L,其余部分用蒸馏水补足至1L。
将种子培养液按12%(体积百分含量)的接种量接种至含有发酵培养基的50L发酵罐中(装液量为45%),28℃,溶氧控制60~70%,pH维持5.5~6.0,发酵12h至对数生长期,在发酵产物中补加终浓度为200mg/L的亚硒酸钠,继续发酵培养24h,收集发酵产物。
(4)发酵产物收集及富硒能力检测
收集经过上述步骤制得的发酵液,离心机离心,洗涤,160℃喷雾干燥,制得淡黄色粉末状产品,产品水分小于7%。
采用常规检测方法,检测发现所得发酵液中富硒酵母生物量可达14.1g/L,得到的每kg富硒酵母产品中有机硒含量为4610mg,其中硒蛋氨酸含量大于65%,无机硒含量不超过总硒含量2%。
将实施例1~3制得的富硒酵母,应用于医药、食品、饲料中,能够易于消化吸收,提高了有机硒的消化利用率。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已,并不用以限制本发明,凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (10)
1.一种富硒酵母的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)富硒菌株选育
将乙醇假丝酵母Candida ethanolica进行氮离子注入诱变,经过多次诱变筛选,获得耐受高浓度亚硒酸钠的乙醇假丝酵母突变菌株,命名为C.ethanolica cas8;
(2)种子培养液制备
将乙醇假丝酵母突变菌株C.ethanolica cas8接种在斜面培养基得到斜面菌株,再将斜面菌株接种于种子培养基中,得到种子培养液;
(3)发酵培养
将种子培养液按体积百分含量8~12%的接种量接种至含有发酵培养基中,发酵10~12h至对数生长期,在发酵产物中补加终浓度为150~200mg/L的亚硒酸钠,继续发酵培养20~24h,收集发酵产物;
(4)发酵产物收集
将发酵液,离心洗涤,干燥后制得淡黄色粉末状产品,产品水分小于8%。
2.根据权利要求1所述的一种富硒酵母的制备方法,其特征在于,所述步骤(1)包括以下步骤:
(11)乙醇假丝酵母C.ethanolica采用YEPD培养平板上培养24~36h,挑取单菌落至含YEPD液体培养基的培养瓶中,160~180rpm,震荡培养20~24h,菌液离心洗涤,制成单细胞悬液,使细胞浓度在108~109个/mL;
(12)将菌悬液均匀涂布到无菌培养皿中,风干制成菌膜;
(13)在N+注入机中进行离子注入,能量14~18KeV;
(14)每个菌株做6个梯度剂量,每个剂量两个平板,N+注入剂量分别为2.0×1014、4.0×1014、6.0×1014、8.0×1014、1.0×1015、1.2×1015ion/cm2,并做真空对照平板;
(15)诱变完成后,加入无菌水洗涤菌体制成菌悬液;
(16)将菌悬液稀释104~108倍涂布于含亚硒酸钠的筛选培养基,经过多次诱变筛选,获得耐受高浓度亚硒酸钠的酵母突变菌株,而且其发酵生物量在同等条件下比出发菌株提高,命名为C.ethanolica cas8。
3.根据权利要求1所述的一种富硒酵母的制备方法,其特征在于,所述步骤(2)中,将乙醇假丝酵母C.ethanolica cas8接种在斜面培养基25~30℃培养16~24h,得到斜面菌株,再将所述斜面菌株接种于种子培养基中,25~30℃、160~180r/min、振荡培养16~24h,得到种子培养液。
4.根据权利要求1所述的一种富硒酵母的制备方法,其特征在于,所述步骤(2)中,斜面培养基包括以下组分:葡萄糖15~20g/L,蛋白胨15~20g/L,酵母膏5~10g/L,亚硒酸钠20~30mg/L,琼脂12~18g/L。
5.根据权利要求1所述的一种富硒酵母的制备方法,其特征在于,所述步骤(2)中,种子培养基包括以下组分:麦芽抽提物10~20g/L,蛋白胨10~15g/L,酵母膏5~10g/L,亚硒酸钠30~60mg/L。
6.根据权利要求1所述的一种富硒酵母的制备方法,其特征在于,所述步骤(3)中,发酵培养基包括以下组分:可发酵还原糖200~300g/L,硫酸铜0.025~0.04g/L,硫酸锰0.02~0.03g/L,硫酸亚铁0.25~0.35g/L,硫酸镁4.5~6.0g/L,硫酸锌1.5~2.5g/L,氯化钙2.5~4.5g/L,硫酸铵4~6g/L,氯化钠7.5~10g/L,谷氨酸6~10g/L,L-半胱氨酸为10~12g/L,其余部分用蒸馏水补足至1L。
7.根据权利要求1所述的一种富硒酵母的制备方法,其特征在于,所述步骤(3)中,发酵条件为:25~30℃,溶氧为50~70%,pH为5.5~6.0。
8.一种使用如权利要求1~7任一项所述的富硒酵母的制备方法制得的富硒酵母。
9.根据权利要求8所述的一种富硒酵母,其特征在于,所述富硒酵母生物量达10~15g/L,得到的每kg富硒酵母产品中有机硒含量为4000~5000mg,其中硒蛋氨酸含量大于60%,无机硒含量不超过总硒含量2%。
10.如权利要求8所述的一种富硒酵母在食品、保健品或饲料添加剂中的应用。
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---|---|
CN (1) | CN106906206A (zh) |
Cited By (12)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN107365716A (zh) * | 2017-08-02 | 2017-11-21 | 陕西科技大学 | 一种富gsh‑硒多形汉逊酵母的制备方法 |
CN107594070A (zh) * | 2017-09-08 | 2018-01-19 | 四川亿客农食品有限公司 | 一种富硒农产品的培育方法及其应用 |
CN107699505A (zh) * | 2017-10-19 | 2018-02-16 | 四川农业大学 | 一种富硒酵母培养工艺的优化方法及工艺 |
CN108633717A (zh) * | 2018-08-13 | 2018-10-12 | 重庆善硒科技有限公司 | 一种高富硒的西兰花无土栽培营养液配方及其培养方法 |
CN109182128A (zh) * | 2018-10-16 | 2019-01-11 | 广西壮族自治区农业科学院农业资源与环境研究所 | 一种高效转化土壤硒的菌株培养方法 |
CN109355214A (zh) * | 2018-11-13 | 2019-02-19 | 湛江恒兴养殖技术服务有限公司 | 富硒酵母及其发酵保护剂和发酵方法 |
CN110343006A (zh) * | 2019-08-12 | 2019-10-18 | 山东佳硒雅生物有限公司 | 一种富硒酵素及其制备方法 |
CN112251365A (zh) * | 2020-10-16 | 2021-01-22 | 大连澎立生物科技有限公司 | 酵母蛋白硒及其制备方法、发酵培养基、富硒小分子肽原液及其制备方法和食品 |
CN112457999A (zh) * | 2020-11-10 | 2021-03-09 | 重庆蓝肽生物科技有限公司 | 一种富硒酿酒酵母菌株及其应用 |
CN113151019A (zh) * | 2021-03-25 | 2021-07-23 | 安徽华金味食品有限公司 | 一种酵母的分离方法 |
CN113278574A (zh) * | 2021-04-12 | 2021-08-20 | 南通银琪生物科技有限公司 | 正交实验法筛选富硒酵母突变菌株及发酵工艺 |
CN114214216A (zh) * | 2021-10-11 | 2022-03-22 | 厦门海嘉成生物科技有限公司 | 一种富硒酵母菌株及其应用 |
Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1309177A (zh) * | 2001-01-17 | 2001-08-22 | 中国科学院微生物研究所 | 含有高生物量的富硒酵母及其生产方法 |
CN104357437A (zh) * | 2014-11-11 | 2015-02-18 | 四川恒益科技有限公司 | 一种啤酒富硒酵母泥及酵母的生产方法 |
CN105331546A (zh) * | 2015-11-23 | 2016-02-17 | 湖北工业大学 | 一种富硒光滑假丝酵母菌株fxy-4及其培养方法和作为鱼饲料添加剂的应用 |
CN105420128A (zh) * | 2015-12-02 | 2016-03-23 | 湖北工业大学 | 一种富硒胶红酵母菌株fxy-7及其培养方法和在虾饲料添加剂中的应用 |
CN106244477A (zh) * | 2016-10-12 | 2016-12-21 | 厦门元尊生物工程有限公司 | 一种富硒酿酒酵母菌株及其在制备富硒紫薯酵母产品中的应用 |
-
2017
- 2017-04-26 CN CN201710281550.9A patent/CN106906206A/zh active Pending
Patent Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1309177A (zh) * | 2001-01-17 | 2001-08-22 | 中国科学院微生物研究所 | 含有高生物量的富硒酵母及其生产方法 |
CN104357437A (zh) * | 2014-11-11 | 2015-02-18 | 四川恒益科技有限公司 | 一种啤酒富硒酵母泥及酵母的生产方法 |
CN105331546A (zh) * | 2015-11-23 | 2016-02-17 | 湖北工业大学 | 一种富硒光滑假丝酵母菌株fxy-4及其培养方法和作为鱼饲料添加剂的应用 |
CN105420128A (zh) * | 2015-12-02 | 2016-03-23 | 湖北工业大学 | 一种富硒胶红酵母菌株fxy-7及其培养方法和在虾饲料添加剂中的应用 |
CN106244477A (zh) * | 2016-10-12 | 2016-12-21 | 厦门元尊生物工程有限公司 | 一种富硒酿酒酵母菌株及其在制备富硒紫薯酵母产品中的应用 |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
曾礼华等: "高富硒酵母菌诱变选育研究", 《食品与生物技术学报》 * |
Cited By (15)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN107365716A (zh) * | 2017-08-02 | 2017-11-21 | 陕西科技大学 | 一种富gsh‑硒多形汉逊酵母的制备方法 |
CN107365716B (zh) * | 2017-08-02 | 2020-04-07 | 陕西科技大学 | 一种富gsh-硒多形汉逊酵母的制备方法 |
CN107594070A (zh) * | 2017-09-08 | 2018-01-19 | 四川亿客农食品有限公司 | 一种富硒农产品的培育方法及其应用 |
CN107699505B (zh) * | 2017-10-19 | 2020-12-04 | 四川农业大学 | 一种富硒酵母培养工艺的优化方法及工艺 |
CN107699505A (zh) * | 2017-10-19 | 2018-02-16 | 四川农业大学 | 一种富硒酵母培养工艺的优化方法及工艺 |
CN108633717A (zh) * | 2018-08-13 | 2018-10-12 | 重庆善硒科技有限公司 | 一种高富硒的西兰花无土栽培营养液配方及其培养方法 |
CN109182128A (zh) * | 2018-10-16 | 2019-01-11 | 广西壮族自治区农业科学院农业资源与环境研究所 | 一种高效转化土壤硒的菌株培养方法 |
CN109355214A (zh) * | 2018-11-13 | 2019-02-19 | 湛江恒兴养殖技术服务有限公司 | 富硒酵母及其发酵保护剂和发酵方法 |
CN110343006A (zh) * | 2019-08-12 | 2019-10-18 | 山东佳硒雅生物有限公司 | 一种富硒酵素及其制备方法 |
CN112251365A (zh) * | 2020-10-16 | 2021-01-22 | 大连澎立生物科技有限公司 | 酵母蛋白硒及其制备方法、发酵培养基、富硒小分子肽原液及其制备方法和食品 |
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