CN106892854A - 一种吲哚生物碱类化合物及其制备方法和用途 - Google Patents

一种吲哚生物碱类化合物及其制备方法和用途 Download PDF

Info

Publication number
CN106892854A
CN106892854A CN201510959923.4A CN201510959923A CN106892854A CN 106892854 A CN106892854 A CN 106892854A CN 201510959923 A CN201510959923 A CN 201510959923A CN 106892854 A CN106892854 A CN 106892854A
Authority
CN
China
Prior art keywords
compound
prb
fermentate
preparation
indole alkaloids
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201510959923.4A
Other languages
English (en)
Other versions
CN106892854B (zh
Inventor
李德海
于桂洪
朱天骄
顾谦群
车茜
王伟
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Ocean University of China
Original Assignee
Ocean University of China
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Ocean University of China filed Critical Ocean University of China
Priority to CN201510959923.4A priority Critical patent/CN106892854B/zh
Priority to PCT/CN2016/111042 priority patent/WO2017107897A1/zh
Priority to CN201680076350.3A priority patent/CN109071436B/zh
Publication of CN106892854A publication Critical patent/CN106892854A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN106892854B publication Critical patent/CN106892854B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A61K31/403—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil condensed with carbocyclic rings, e.g. carbazole
    • A61K31/404—Indoles, e.g. pindolol
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D209/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D209/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom condensed with one carbocyclic ring
    • C07D209/04—Indoles; Hydrogenated indoles
    • C07D209/10—Indoles; Hydrogenated indoles with substituted hydrocarbon radicals attached to carbon atoms of the hetero ring
    • C07D209/12—Radicals substituted by oxygen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
    • C12P17/10—Nitrogen as only ring hetero atom

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

本发明涉及一种吲哚生物碱类化合物的制备方法和用途。本发明用采自南极普利兹湾深海海域的壳青霉PRB-2 (Penicillium crustosum PRB-2) 生产出结构新颖的吲哚生物碱类化合物。本发明的吲哚生物碱对H1N1病毒有良好的抑制作用。

Description

一种吲哚生物碱类化合物及其制备方法和用途
技术领域
本发明涉及用壳青霉PRB-2 (Penicillium crustosumPRB-2)(保藏编号是: CGMCC 11573 保藏日期：2015年11月03日) 生产包含吲哚生物碱类化合物的方法；本发明还涉及该类化合物在抗H1N1病毒中的用途。
背景技术
本发明人将壳青霉PRB-2 (Penicillium crustosumPRB-2)(保藏编号是: CGMCC 11573)在液体培养基中培养时添加吲哚（终浓度150mg/L），从得到的发酵产物中分离出一个吲哚生物碱类化合物。研究发现所示该吲哚生物碱化合物具有显著的抗病毒活性，表明上述吲哚生物碱进一步有可能开发成新型抗病毒药物。
发明内容
本发明旨在提供一种结构新颖的具有抗病毒活性的新化合物。其结构式是
式 Ⅰ
本发明的式Ⅰ化合物可通过微生物在含吲哚的发酵培养条件下来获取含有该类化合物的发酵物，然后从发酵物中采用Sephadex LH20凝胶柱层析，反相中压MPLC,反相半制备HPLC方法分离纯化得到。
本发明的下述实施例中列举了利用PRB-2 (Penicillium crustosumPRB-2)(保藏编号是: CGMCC 11573) 制备本发明式Ⅰ化合物的实例。
具体实施方式：
在如下的实施例中所指的化合物Ⅰ的化学结构(结构式中的阿拉伯数字是化学结构中碳原子或氮原子的标位)是：
化合物Ⅰ
实施例1 化合物Ⅰ的发酵生产及分离精制
1 发酵生产
生产菌的发酵培养：按培养微生物的常规方法，取壳青霉PRB-2 (Penicillium crustosumPRB-2)(保藏编号是: CGMCC 11573)适量，接种到PDA固体平面培养基上，在28摄氏度培养箱中培养4天。
取固体平面培养4天的壳青霉PRB-2 (Penicillium crustosumPRB-2)适量，接种到装有300 mL培养基[培养基组成（克/升）：可溶性淀粉 40.0，酵母膏 1.0，味精 2.0，蔗糖 40.0，麦芽糖 30.0，黄豆粉 0.5，蛋白胨 2.0，MgSO4 · 7H2O 0.3，KH2PO4 0.5]的1000 mL锥型瓶中，并加入吲哚(45mg, 由500μL DMSO溶解)，使其在培养基中的终浓度150mg/L，在28摄氏度条件下静置培养30天，获得发酵产物。
2 浸膏的获得
将所得发酵液直接用等量乙酸乙酯萃取三次，合并乙酸乙酯相，减压浓缩，得粗浸膏，共1.2克。
3 化合物的分离精制
浸膏（1.2克）用甲醇溶解后，以甲醇为溶剂进行LH20柱层析，分为4个流份。组分2先以C-18 ODS中压柱层析，以甲醇-水为溶剂进行梯度洗脱，最后经反相半制备高效液相色谱（甲醇：水=75:25）得化合物Ⅰ（15 mg）。
化合物Ⅰ 乳白色粉末，分子式C28H27NO6，HR-ESI-MS m/z: 474.1910 [M+H]+，计算值474.1911。IR (KBr) v max 3345, 2923, 1625, 1330, 744 cm-1。1H和13C-NMR数据见表 1。
表 1 化合物Ⅰ的1H和13C NMR数据（500和125 MHz，in DMSO-d 6）a
a) 本表信号归属基于HMQC及HMBC图谱解析结果。
b) 此栏中的数字和代号分别代表在HMBC谱中与相应行中的1H给出偶合相关信号的13C核。
实施例2化合物的抗病毒活性测试
1 实验样品及实验方法
被测样品溶液的配制 测试样品为上述实施例1中分离精制的化合物Ⅰ纯品。精密称取适量样品，用DMSO配制成所需浓度的溶液，供测活性。
抗H1N1流感病毒活性采用CPE 方法测定，及采用细胞培养技术，以抗病毒药物利巴韦林为阳性对照药，比较观察化合物对流感病毒引起的细胞病变（CPE）的抑制作用。将流感病毒液接种到单层 MDCK 细胞上于37oC 吸附 1 个小时，弃上清液。加入待测化合物 DMSO 溶液（终浓度 50ug/ml），37 oC保温 48 小时，用 PBS 洗 3 次，结晶紫溶液（1%的结晶紫溶解于20%乙醇和3.7%甲醛的水溶液中）染色，之后至于酶标仪上测定 630nm 处的光密度 OD值。
抑制率按照以下公式计算：
病毒抑制率(%)= （药物对照组OD值-病毒对照组OD值）/（细胞对照组OD值-病毒对照组OD值）*100%
抑制率大于70%视为具有强效抗流感病毒活性，介于50%~70%为中效，介于30%~50%为弱效。
2 实验结果
采用CPE 方法对所示化合物Ⅰ抗H1N1流感病毒活性进行了研究，以抗病毒药物利巴韦林为阳性对照药，结果发现所述化合物Ⅰ对流感病毒引起的细胞病变（CPE）有明显的抑制作用。化合物Ⅰ在50μg/ml终浓度下对病毒的抑制率为82.5% （阳性对照药利巴韦林在50μg/ml浓度下抑制率为72.1%），IC50为34μM（阳性对照药利巴韦林IC50为94 μM）。
3 结论
化合物Ⅰ具有较好的抗H1N1流感病毒活性，可作为新型抗病毒药，用于治疗H1N1流感病毒感染。

Claims (4)

1.化合物结构如下式所示
。
2.权利要求1所述化合物的制备方法，其特征是发酵培养壳青霉PRB-2 (Penicillium crustosum), 并添加吲哚（在培养基中的终浓度为150mg/L），获取含有上述化合物的发酵物，然后从发酵物中分离纯化出该化合物。
3.权利要求2所述的制备方法，其中将所述发酵物经Sephadex LH20凝胶柱层析，甲醇为溶剂，再经反相中压MPLC及反相半制备HPLC分离纯化得该化合物。
4.权利要求1所述化合物在制备抗病毒药物中的用途。
CN201510959923.4A 2015-12-21 2015-12-21 一种吲哚生物碱类化合物及其制备方法和用途 Active CN106892854B (zh)

Priority Applications (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201510959923.4A CN106892854B (zh) 2015-12-21 2015-12-21 一种吲哚生物碱类化合物及其制备方法和用途
PCT/CN2016/111042 WO2017107897A1 (zh) 2015-12-21 2016-12-20 一种吲哚生物碱类化合物及其制备方法和用途
CN201680076350.3A CN109071436B (zh) 2015-12-21 2016-12-20 一种吲哚生物碱类化合物及其制备方法和用途

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201510959923.4A CN106892854B (zh) 2015-12-21 2015-12-21 一种吲哚生物碱类化合物及其制备方法和用途

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN106892854A true CN106892854A (zh) 2017-06-27
CN106892854B CN106892854B (zh) 2019-04-30

Family

ID=59089012

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201510959923.4A Active CN106892854B (zh) 2015-12-21 2015-12-21 一种吲哚生物碱类化合物及其制备方法和用途
CN201680076350.3A Active CN109071436B (zh) 2015-12-21 2016-12-20 一种吲哚生物碱类化合物及其制备方法和用途

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201680076350.3A Active CN109071436B (zh) 2015-12-21 2016-12-20 一种吲哚生物碱类化合物及其制备方法和用途

Country Status (2)

Country Link
CN (2) CN106892854B (zh)
WO (1) WO2017107897A1 (zh)

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109206478A (zh) * 2017-07-09 2019-01-15 中国海洋大学 一种pks-nrps杂合的大环内酯类化合物及其制备方法和用途
CN111205196A (zh) * 2020-03-04 2020-05-29 中国科学院昆明植物研究所 一种苯酚类ab环结构化合物及其制备方法和应用
CN111995560A (zh) * 2020-08-26 2020-11-27 云南大学 一种单萜吲哚类化合物及其制备方法和应用
CN114507139A (zh) * 2022-02-23 2022-05-17 自然资源部第三海洋研究所 环丙烷类化合物及其制备方法与抗流感病毒的应用

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106892854B (zh) * 2015-12-21 2019-04-30 中国海洋大学 一种吲哚生物碱类化合物及其制备方法和用途

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1119856A (zh) * 1993-02-24 1996-04-03 麦克公司 Hiv逆转录酶抑制剂
CN103937678A (zh) * 2014-01-24 2014-07-23 大连交通大学 一株海洋壳青霉、其衍生的喹啉酮类化合物及其制备和应用
CN104357505A (zh) * 2014-08-30 2015-02-18 云南民族大学 一种吲哚-四氢吡咯-2-酮类生物碱及其制备方法与应用

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106892854B (zh) * 2015-12-21 2019-04-30 中国海洋大学 一种吲哚生物碱类化合物及其制备方法和用途

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1119856A (zh) * 1993-02-24 1996-04-03 麦克公司 Hiv逆转录酶抑制剂
CN103937678A (zh) * 2014-01-24 2014-07-23 大连交通大学 一株海洋壳青霉、其衍生的喹啉酮类化合物及其制备和应用
CN104357505A (zh) * 2014-08-30 2015-02-18 云南民族大学 一种吲哚-四氢吡咯-2-酮类生物碱及其制备方法与应用

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ILIAS MUHAMMA等: "CHEMISTRY OF THE ANNONACEAE, PART 18.1 BENZYLATED INDOLES AND DIHYDROCHALCONES IN UVARIA ANGOLENSIS FROM TANZANIA", 《JOURNAL OF NATURAL PRODUCTS》 *
LAMIAA A. SHAALA 等: "Identification and Bioactivity of Compounds from the Fungus Penicillium sp. CYE-87 Isolated from a Marine Tunicate", 《MARINE DRUGS》 *

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109206478A (zh) * 2017-07-09 2019-01-15 中国海洋大学 一种pks-nrps杂合的大环内酯类化合物及其制备方法和用途
CN111205196A (zh) * 2020-03-04 2020-05-29 中国科学院昆明植物研究所 一种苯酚类ab环结构化合物及其制备方法和应用
CN111995560A (zh) * 2020-08-26 2020-11-27 云南大学 一种单萜吲哚类化合物及其制备方法和应用
CN111995560B (zh) * 2020-08-26 2021-09-28 云南大学 一种单萜吲哚类化合物及其制备方法和应用
CN114507139A (zh) * 2022-02-23 2022-05-17 自然资源部第三海洋研究所 环丙烷类化合物及其制备方法与抗流感病毒的应用

Also Published As

Publication number Publication date
WO2017107897A1 (zh) 2017-06-29
CN109071436A (zh) 2018-12-21
CN106892854B (zh) 2019-04-30
CN109071436B (zh) 2020-10-27

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN106892854A (zh) 一种吲哚生物碱类化合物及其制备方法和用途
CN103865808B (zh) 一种源于桔青霉的青霉烯醇a1的抗肿瘤用途
CN103865809B (zh) 一种源于桔青霉的青霉烯醇b1的抗肿瘤用途
CN103265550B (zh) 一类生物碱类化合物及其制备方法和在制备抗海洋生物污损涂料与抗肿瘤药物中的应用
CN108148031B (zh) 吡喃酮类化合物及制备方法、用途
CN104876945B (zh) 一种生物碱二聚体及其制备方法与作为抗病毒剂的应用
CN107298670A (zh) 源于草酸青霉黑麦酮酸h制备抗人口腔表皮样癌药物应用
CN106967024A (zh) 一种α‑吡喃酮衍生物及其制备方法和应用
CN106518643A (zh) 一种环戊烯酮类化合物及其制备方法和用途
CN107298669A (zh) 源于草酸青霉的黑麦酮酸i及抗人口腔表皮样癌药物应用
CN104031051B (zh) 二酮哌嗪类化合物及其制备方法和用途
CN105418602B (zh) 一种海洋肽类化合物及其制备方法和应用
CN104387396B (zh) 源于米曲霉的吲哚萜speradine E及应用
CN102268005B (zh) 来源于色氨酸与脯氨酸的吲哚二酮哌嗪生物碱类化合物及其制备方法和用途
CN104370917A (zh) 源于米曲霉的吲哚萜speradine H及应用
CN104211780B (zh) 一种环缩肽类化合物及其制备方法和用途
CN103030683B (zh) 棘孢肽类化合物及其制备方法和用途
CN107973803B (zh) 一种七元内酯并呋喃衍生物及其制备方法和应用
CN109020991B (zh) 一类美达霉素类化合物及其制备方法和应用
CN103058846B (zh) 一种源于棘孢曲霉的苯醌衍生物及其应用
CN104370928B (zh) 源于米曲霉的吲哚萜speradine F及应用
CN103012559A (zh) 一种棘孢肽类化合物及其应用
CN105037397B (zh) 一种含硫桥复杂环系生物碱类化合物及其制备方法和用途
CN104447475B (zh) 源于桔青霉的青霉烯醇 d1制备方法及其应用
CN102001921B (zh) 倍半萜混对苯二酚类化合物及其制备方法和用途

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant