CN106857508A - 反式‑石竹稀作为黒肩绿盲蝽引诱剂的应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及反式‑石竹稀作为黒肩绿盲蝽引诱剂的应用，反式‑石竹稀用无水乙醇配成母液，石蜡油或正己烷溶解后用于田间，浓度10‑10000ppm作为黒肩绿盲蝽引诱剂。通过Y型嗅觉仪测定两性成虫的行为反应，确定浓度为50ppm时，对雄虫的引诱率达36.67％；H型嗅觉仪测定若蝽的行为反应，确定浓度为50ppm时，引诱率达48.65％。网室试验，确定浓度为500ppm时，引诱率达65.84％。田间试验，确定浓度10000ppm时，对若蝽的引诱率达37.16％，对成蝽引诱率达20.74％。本发明确定反‑石竹稀能运用在田间可引诱黒肩绿盲蝽，加强对天敌的调控，控制水稻害虫虫口密度。也可在室内调节各虫态的行为。

Description

反式-石竹稀作为黒肩绿盲蝽引诱剂的应用

技术领域

本发明涉及反式-石竹稀作为黒肩绿盲蝽引诱剂的应用。

背景技术

黑肩绿盲蝽是水稻田间重要的天敌昆虫，主要以飞虱和叶蝉为生，最喜飞虱，在田间取食褐飞虱卵比率达30％-70％(Zhou，1986)，一天能取食7.5-10.2头褐飞虱(Reyes，1975)。有研究报告，在飞虱密度较高的小区黑肩绿盲蝽表现出聚集反应，但其对褐飞虱的捕食率与飞虱密度无关，而在蝽：虱数量比达到1:1，1:8，20:1时，蝽可以在没有化学农药的条件下，控制飞虱虫口密度(Tanangsnakool，1975)。黑肩绿盲蝽对化学农药敏感，吡蚜酮等化学农药影响其觅食能力和对水稻害虫的控制力度(Zhang et al.,2015)。并且暂时没有找到对黑肩绿盲蝽安全的化学农药和施药方式。因此有研究学者针对黑肩绿盲蝽引诱剂展开了研究，主要进行了水稻挥发物的提取和找寻有引诱作用的化合物单体(Cheng，2001)，但并没有找到能够运用到田间的引诱方法。

发明内容

本发明的目的是针对上述现状，旨在提供一种能够运用在田间，加强对天敌的调控作用，从而控制水稻害虫虫口密度的反式-石竹稀作为黒肩绿盲蝽引诱剂的开发与应用。

本发明目的的实现方式为，反式-石竹稀在无水乙醇中溶解至10000ppm，用石蜡油或正己烷稀释至浓度10ppm—10000ppm时，作为黒肩绿盲蝽引诱剂。

本发明通过Y型嗅觉仪测定反式-石竹稀对黑肩绿盲蝽成虫的行为反应，确定反式-石竹稀在浓度为500ppm时，对黒肩绿盲蝽雄虫的引诱率达36.67％；H型嗅觉仪测定黑肩绿盲蝽对反式-石竹稀的行为反应，确定反式-石竹稀在浓度50ppm时，对黒肩绿盲蝽若蝽所得引诱率达48.65％。网室试验，确定浓度为500ppm时，对黒肩绿盲蝽的引诱率达64.84％。田间试验，确定在浓度为10000ppm时，对黒肩绿盲蝽若蝽的引诱率达37.16％，对黒肩绿盲蝽成蝽引诱率达20.74％。

由本发明可确定反式-石竹稀能够引诱运用在田间引诱黒肩绿盲蝽，从而加强对天敌的调控作用，控制水稻害虫虫口密度。

附图说明

图1是本发明使用的H型嗅觉仪结构示意图，

图2是本发明所用Y型嗅觉仪结构示意图，

图3是本发明使用的Y型管结构示意图；

图4是网室试验模式图，

图5是网室试验诱芯悬挂模式图，

图6是网室试验操作图；

图7是对黒肩绿盲蝽引诱效果测定田间实验小区分布图，

图8是诱芯结构示意图，

图9是诱芯具体悬挂和查虫位置图；

图10是对黒肩绿盲蝽若蝽的引诱活性图，

图11是对黒肩绿盲蝽两性成蝽的引诱效果测试结果图，

图12是网室实验对黒肩绿盲蝽引诱效果测定结果图，

图13、14是田间不同取样时间黒肩绿盲蝽若蝽的虫量变化图，

图15是田间不同取样时间黒肩绿盲蝽成蝽的虫量变化图，

具体实施方式

为证实反式-石竹稀能用于引诱黒肩绿盲蝽，本申请人作了如下实验。

采用图1所示的H型嗅觉仪测定黑肩绿盲蝽若蝽对反式-石竹稀的行为反应。

H型管两直臂长16cm，内径3cm，两直臂离底端4.5cm处各有一内径为3cm的开口，侧面开口处与H型管的横臂相连。横臂长18cm，内径3cm，在横臂正中间有一个内径为3cm，高1cm的圆柱形开口，此为接虫口。两端开口处分别与两直臂相连。

将待测反式-石竹稀用无水乙醇配制成10000ppm的母液，再用正己烷稀释8倍、40倍、200倍、1000倍，浓度设置为1250ppm、250ppm、50ppm、10ppm。轻轻地将H型管横放在桌面上，分别用毛细管吸取12μl的反式-石竹稀和正己烷(对照处理)，谨慎地放入H型嗅觉仪的两直臂中，然后用纱布塞住直臂顶端开口处。再将10头饥饿半小时的4龄黑肩绿盲蝽若蝽从接虫口处接入H型管内，用封口膜小心的封住接虫口。将其平放在温度为28±1℃、湿度为90％左右的黑暗培养箱中，并用黑布完全包裹住H型嗅觉仪，以排除光线对黑肩绿盲蝽若蝽选择行为的影响。每个H管接入10头健壮的4龄黑肩绿盲蝽若蝽，共测试60头。观察记录2h后黑肩绿盲蝽若蝽在H型管中的分布情况。若测试的黑肩绿盲蝽若蝽在距接虫口左右1cm范围内，记为未作出选择。若测试的黑肩绿盲蝽若蝽在A、B处和D处则记为对H型管右侧气味源有反应；反之，则记为测试黑肩绿盲蝽若蝽选择H型管左侧气味源。按下式计算引诱率。

引诱率(％)＝(处理虫数-对照虫数)/(处理虫数+对照虫数)×100。

数据分析：采用SPSS16.0的配对T检验分析处理组和对照组之间差异显著性。

实验结果如图10所示。从图中可见在浓度较低时，反式-石竹稀对黒肩绿盲蝽若蝽有引诱作用，而在浓度较高时，对黒肩绿盲蝽若蝽有驱避作用，在浓度为50ppm时，引诱率最高。

由结果分析可得，在浓度为10ppm时，反式-石竹稀对黒肩绿盲蝽若蝽引诱率达33.33％(P＝0.07，t＝2.449)。在浓度为50ppm时，反式-石竹稀对黒肩绿盲蝽若蝽有极显著的引诱作用(P<0.01，t＝8.104)，引诱率达48.65％。在浓度达到250ppm时，反式-石竹稀对黒肩绿盲蝽的引诱率达22.22％(P＝0.315，t＝1.117)。而在浓度为1250ppm时，室内环境下对黒肩绿盲蝽若蝽有显著的驱避作用，驱避率达38.27％(P＝0.004，t＝4.448)。由此结果分析，反式-石竹稀在浓度为50ppm时，在室内环境下对黒肩绿盲蝽若蝽有显著的引诱效果，引诱率最高。故而继续测定反式-石竹稀在浓度为50ppm时，对黒肩绿盲蝽两性成蝽的引诱作用。

使用图2、3所示的Y型嗅觉仪测定反式-石竹稀对黑肩绿盲蝽两性成虫的行为反应。

将反式-石竹稀在无水乙醇中溶解至10000ppm，用石蜡油稀释至50ppm，作为味源，对照组使用石蜡油。

取初羽化的黑肩绿盲蝽成虫，饥饿1h。在味源瓶中放入含有40μL的50ppm反式-石竹稀或纯溶剂石蜡油(CK)的滤纸，以250mL/min的速度通空气20min后，从接虫口处接入单只黑肩绿盲蝽成虫。记录测试的黑肩绿盲蝽成蝽进入两选择臂的时间和方向，每只测试的黑肩绿盲蝽成蝽观测5分钟，测试的黑肩绿盲蝽成蝽运动至超过任一支臂3cm，并在支臂3cm后的持续时间超过1min算有效选择。如若5min内一直未动则记为无反应试虫，不计入数据。

数据使用spss16.0进行卡方检验。

试验结果如图11：在浓度为50ppm下，反式-石竹稀对雄性黒肩绿盲蝽成蝽有显著的引诱效果，引诱率达36.67％，P雄＝0.041，X²＝4.174；对雌性黒肩绿盲蝽成蝽的引诱率达16.67％，X²＝0.839，P＝0.36。由此结果推测反式-石竹稀在室内环境下对黒肩绿盲蝽成蝽具有显著的引诱效果。

参照图4、5、6，用反式-石竹稀引诱黑肩绿盲蝽的网室试验。

选择无大风晴天早上7：30-10:30和下午4:30-7:30在华中农业大学进行网室试验。将6盆分蘖期的水稻苗(见图3)放入1m*1m*0.8m的100目纱笼中，在中间空白区放入面包盒和纱布使纱笼底部高度一致。将反式-石竹稀在无水乙醇中溶解至10000ppm，用石蜡油稀释至50ppm，158ppm，500ppm，1580ppm，5000ppm这5个浓度进行实验。在1g羊毛脂中加入40μl特定浓度的反式-石竹稀，以石蜡油作为对照，均匀的涂抹在2.5*7cm的长方形滤纸片上，用别针固定在水稻苗茎秆上，固定部位距离地面10cm。中间一盆水稻苗放4片滤纸片，两边分别放置2片。在纱笼中央小心的放入50头4-5龄黑肩绿盲蝽若蝽。在3小时后记录各盆水稻苗上的黑肩绿盲蝽若蝽数，每一个纱笼中测试一个浓度，5个浓度同一天完成，重复三次。试验结果见图12。

数据结果运用spss16.0的卡方检验进行分析。

经结果分析，反式-石竹稀在浓度为50ppm时，对黒肩绿盲蝽有显著的引诱效果(X²＝5.513，P＝0.019)，引诱率达42.84％；在浓度为158ppm时，对黒肩绿盲蝽有极显著的引诱作用(X²＝47.79，P＝0.001)，引诱率达47.79％；在浓度为500ppm时，反式-石竹稀对黒肩绿盲蝽有极显著的引诱作用(X²＝13.476，P＝0.001)，引诱率达47.16％；在浓度为1580ppm时，反式-石竹稀对黒肩绿盲蝽的引诱率达20.52％(X²＝1.295，P＝0.255)；在浓度为5000ppm时，对黒肩绿盲蝽在网室中的引诱效果达到最佳(P<0.01，X²＝24.739)，引诱率超过50％，达65.84％。

此实验结果为田间试验提供了具有可行性的施药方法，以及反式-石竹稀在浓度为5000ppm时引诱效果最佳，提供了田间试验的浓度和质量依据。

用反式-石竹稀引诱黑肩绿盲蝽的田间试验。

在湖北省随州市安居县2016年8月27号至2016年10月1号完成反式-石竹稀对黒肩绿盲蝽的引诱实验。施药前确认田间黒肩绿盲蝽主要为成蝽。释放反式-石竹稀和对照石蜡油的田块重复4次，每个小区面积为64m²(8*8m)，各小区间设置宽为1m的保护行。小区分布如图7所示。

在小区中间位置悬挂两个如图8所示的诱芯。诱芯准备：用石蜡油溶解反式-石竹稀至浓度10000ppm。用羊毛脂均匀的涂抹在600ml的矿泉水瓶底部内壁处，并在此处开若干直径为1cm的圆孔。为了防止雨水的冲刷并增加引诱剂的挥发效率，在矿泉水瓶上部准备3个“小窗”。将制备好的矿泉水瓶用80cm竹竿固定在水稻田中，使矿泉水瓶位于水稻茎杆处。每个小区中间放置两个诱芯，两个诱芯之间距离为4m(见图9)。

在施药后第2，4，8，16，32天在诱芯的东南西北四个方向采用盆拍法取样，如图9所示。每个方向取3兜水稻苗，调查黒肩绿盲蝽成蝽，若蝽和褐飞虱的数量。

用SPSS16.0进行One-way ANOVE分析施药田和对照田黒肩绿盲蝽和褐飞虱百兜虫量之间差异。

实验结果如图13、图14所示，在第4天时，反式-石竹稀对黒肩绿盲蝽成蝽有极显著的引诱作用(P＝0.028)。在其他取样的时间中，反式-石竹稀田块中的黒肩绿盲蝽成蝽值均高于对照田块，但由于黒肩绿盲蝽的生命期，在第8-16天时黑肩绿盲蝽主要以黑肩绿盲蝽若蝽的形态存在。而在第32天时，由于已经到达十月黒肩绿盲蝽羽化迁飞，虫口基数降低，故而不具有显著性差异。而黒肩绿盲蝽若蝽在各取样时间，百兜虫量均高于对照组，且有增加的趋势，表明反式-石竹稀对黒肩绿盲蝽若蝽有引诱作用，只是因田块有一定差异未表现显著性差异。

实验结果如图15所示，在施加反式-石竹稀田块中，黒肩绿盲蝽若蝽的32天总百兜虫量与对照田块有显著性差异(P＝0.022)，引诱率达37.161％。且黒肩绿盲蝽成蝽的32天总百兜虫量也与对照田块有显著性差异(P＝0.048)，引诱率达20.741％。

Claims (5)

1.反式-石竹稀作为黒肩绿盲蝽引诱剂的应用，其特征在于：反式-石竹稀在无水乙醇中溶解至10000ppm，用石蜡油或正己烷稀释至浓度为10ppm—10000ppm时，作为黒肩绿盲蝽引诱剂。

2.根据权利书要求1所述的反式-石竹稀作为黒肩绿盲蝽引诱剂的应用，其特征在于：反式-石竹稀在无水乙醇中溶解至10000ppm，用正己烷稀释，浓度为10ppm—1250ppm时作为黒肩绿盲蝽引诱剂。

3.根据权利书要求1或2所述的反式-石竹稀作为黒肩绿盲蝽引诱剂的应用，其特征在于：反式-石竹稀在无水乙醇中溶解至10000ppm，用正己烷稀释，浓度为50ppm时作为黒肩绿盲蝽若蝽引诱剂。

4.根据权利书要求1或2所述的反式-石竹稀作为黒肩绿盲蝽引诱剂的应用，其特征在于：反式-石竹稀在无水乙醇中溶解至10000ppm，用石蜡油稀释，浓度为50ppm时作为黒肩绿盲蝽两性成蝽引诱剂。

5.根据权利书要求1或2所述的反式-石竹稀作为黒肩绿盲蝽引诱剂的应用，其特征在于：反式-石竹稀在石蜡油中溶解至浓度为10000ppm应用于田间引诱黒肩绿盲蝽。