CN108575912B - 一种评价杀虫蛋白对龟纹瓢虫成虫影响的方法及饲喂装置 - Google Patents

一种评价杀虫蛋白对龟纹瓢虫成虫影响的方法及饲喂装置 Download PDF

Info

Publication number
CN108575912B
CN108575912B CN201810205236.7A CN201810205236A CN108575912B CN 108575912 B CN108575912 B CN 108575912B CN 201810205236 A CN201810205236 A CN 201810205236A CN 108575912 B CN108575912 B CN 108575912B
Authority
CN
China
Prior art keywords
tube
adult
propylaea japonica
centrifugal tube
insecticidal protein
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
CN201810205236.7A
Other languages
English (en)
Other versions
CN108575912A (zh
Inventor
张帅
崔金杰
雒珺瑜
王丽
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Institute of Cotton Research of Chinese Academy of Agricultural Sciences
Original Assignee
Institute of Cotton Research of Chinese Academy of Agricultural Sciences
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Institute of Cotton Research of Chinese Academy of Agricultural Sciences filed Critical Institute of Cotton Research of Chinese Academy of Agricultural Sciences
Priority to CN201810205236.7A priority Critical patent/CN108575912B/zh
Publication of CN108575912A publication Critical patent/CN108575912A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN108575912B publication Critical patent/CN108575912B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01K—ANIMAL HUSBANDRY; CARE OF BIRDS, FISHES, INSECTS; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
    • A01K67/00—Rearing or breeding animals, not otherwise provided for; New breeds of animals
    • A01K67/033—Rearing or breeding invertebrates; New breeds of invertebrates
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/5005—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells
    • G01N33/5008—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics
    • G01N33/5082—Supracellular entities, e.g. tissue, organisms
    • G01N33/5085—Supracellular entities, e.g. tissue, organisms of invertebrates

Abstract

本发明公开了一种评价杀虫蛋白对龟纹瓢虫成虫影响的方法及饲喂装置。本发明首先设计了一种模拟植物腺体的饲喂装置，模拟龟纹瓢虫取食棉花花外蜜腺的吸取方式，然后使用棉花汁液提取物作为溶剂溶解外源杀虫蛋白，并加入果糖作为龟纹瓢虫成虫的诱食剂；将龟纹瓢虫成虫单对放入带有饲养溶液的饲喂装置中并补充足量的豌豆蚜在光照培养箱中培养。根据待测溶液对龟纹瓢虫成虫死亡率、产卵前期、产卵量和体重的指标来判断杀虫蛋白对龟纹瓢虫成虫是否有影响。本发明建立在评价植物体内次生代谢物质与杀虫蛋白互作来影响龟纹瓢虫的风险理论之上，更加真实的反映龟纹瓢虫所面临的杀虫蛋白威胁的自然环境，且评价方法简单、适用性强。

Description

一种评价杀虫蛋白对龟纹瓢虫成虫影响的方法及饲喂装置
技术领域
本发明涉及转基因植物环境安全领域，具体涉及一种外源杀虫蛋白对天敌昆虫龟纹瓢虫成虫影响的评价方法及饲喂装置。
背景技术
苏云金芽孢杆菌为革兰氏阳性细菌属，是目前世界上应用最为广泛的微生物杀虫剂之一，它所具有的杀虫活性的主要来源是该菌株体内产生的伴孢晶体蛋白。研究人员将Bt基因导入常规作物从而获得表达外源杀虫蛋白的转基因作物，自从1996年首次种植转基因作物以来，转基因作物已在全球得到大面积推广，为全世界的农业生产创造了巨大的经济、社会及环境效益。
转外源杀虫蛋白基因作物在整个生育期都能表达外源杀虫蛋白，可能会使取食转基因作物而存活下来的靶标或非靶标昆虫体内含有不同程度的外源杀虫蛋白，当天敌取食这些体内含有外源杀虫蛋白的昆虫后，外源杀虫蛋白可能会传递给天敌，并对天敌造成一定的影响。外源杀虫蛋白对天敌昆虫的安全性逐渐成为研究人员关注的重点和焦点，也是转基因抗虫植物环境安全评价的主要内容。同时转新型基因材料也不断涌现，其中导入的外源基因的环境安全性存在巨大的差异，要经过科学的评价才能进行下一步环境试验。
农田天敌昆虫种类较多，其中龟纹瓢虫Propylea japonica是优势种之一。由于它分布广，盛夏也能繁殖，在田间取食季节较长，是一种非常优良的天敌资源。龟纹瓢虫属鞘翅目、瓢虫科、龟纹瓢虫属，在我国大部分地区都有分布，捕食麦蚜、棉蚜、玉米蚜等多种蚜虫，并取食稻飞虱、木虱和叶螨等多种植食性害虫，是蚜虫及棉铃虫等害虫的优势天敌。龟纹瓢虫可以通过直接取食植食性昆虫间接暴露于外源杀虫蛋白，另外龟纹瓢虫成虫具有取食植物花外蜜腺的习性，这种习性使得龟纹瓢虫成虫具有直接暴露于外源杀虫蛋白的风险。研究结果表明，龟纹瓢虫可作为转基因作物环境安全检测中的指示性昆虫，并且建立起龟纹瓢虫规范化饲养方法，可以提供整齐一致的供试龟纹瓢虫。
在评价外源杀虫蛋白对龟纹瓢虫影响时，一般以对龟纹瓢虫最大暴露量的10倍以上的外源杀虫蛋白来喂食龟纹瓢虫，直接使用转基因植物花粉无法达到上述要求。在以往评价外源杀虫蛋白对龟纹瓢虫影响时，植物体内次生代谢物质与杀虫蛋白互作来影响龟纹瓢虫的风险未被考虑。
发明内容
针对上述问题，本发明提供了一种评价杀虫蛋白对龟纹瓢虫成虫影响的方法及饲喂装置，该方法建立在评价植物体内次生代谢物质与杀虫蛋白互作来影响龟纹瓢虫的风险理论之上，借助一种模拟植物腺体的饲喂装置来实现上述目的，更加真实的反映龟纹瓢虫所面临的杀虫蛋白威胁的自然环境，且评价方法简单、适用性强。
本发明首先提供了一种评价外源杀虫蛋白对龟纹瓢虫成虫影响的饲喂装置，其特征是，它包括带管盖且底部开口的大离心管、带管盖的小离心管和毛细管；
所述小离心管嵌套在大离心管的开口的底部，且小离心管的管体暴露在大离心管外3/4以上(管帽及上部在大离心管内)；
所述毛细管的一端穿透小离心管的管盖暴露在小离心管外，另一端伸入到小离心管的底部；
所述大离心管为50-100ml的离心管；所述小离心管为1-5ml的离心管；所述毛细管的内径为0.50-0.55mm。
优选的，所述大离心管为50ml的离心管；所述小离心管为1.5-2.0ml的离心管；所述毛细管的内径为0.53mm。
本发明还公开了一种评价杀虫蛋白对龟纹瓢虫成虫影响的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)采集健康非转基因棉花叶片，磨碎后加入1.8-2.2倍叶片质量的无菌蒸馏水，摇床振荡提取，离心，抽取上清，过滤后即为获得的棉花汁液提取物；
(2)以棉花汁液提取物作为溶剂，加入外源杀虫蛋白和果糖，制成果终浓度为0.1-0.5g/mL的待测溶液；同时设不加外源杀虫蛋白的阴性对照液以及采用蛋白酶抑制剂代替外源杀虫蛋白的阳性对照液；
(3)分别将待测溶液、阳性对照液和阴性对照液装入到饲喂装置的小离心管中，盖上管盖，通过伸入到溶液底部的毛细管引流出小离心管中的溶液，截断毛细管，使溶液暴露于管口；然后将小离心管的暴露部分放置恒温装置保持蛋白活性；
(4)将新羽化的龟纹瓢虫成虫根据雌雄随机配对，单对放入到饲喂装置的大离心管中，管开口处用棉花封口，连同恒温装置一起放置于光照培养箱中培养；大离心管中补充足量的豌豆蚜，每2-3天更换一次离心管中的溶液，试验持续18-25d；
(5)试验过程中每天观察记录龟纹瓢虫成虫的存活和产卵情况；试验结束后，将所有存活的龟纹瓢虫成虫辨别雌雄，冷冻干燥后分别称重。
进一步的，在“与阴性对照组相比，阳性对照组的成虫的发育历期显著延长，幼虫死亡率显著升高”的前提下，如果与阴性对照组相比，待测溶液对龟纹瓢虫成虫死亡率、产卵前期、产卵量和体重的指标上均没有显著性差异，则表明：外源杀虫蛋白Cry1Ac对龟纹瓢虫成虫没有造成不利影响。
优选的，所述步骤(1)的摇床振荡提取为在室温下在200rpm的摇床浸取2h。
优选的，所述步骤(4)光照培养箱中温度为25℃±1℃，湿度为60％-70％，光周期为L:D＝14h:10h。
优选的，所述步骤(4)实验过程中，每一种饲喂溶液视为一个试验处理，每一个试验处理45对龟纹瓢虫。
优选的，所述外源杀虫蛋白为Cry1Ac，其待测溶液终浓度为20μg/ml，蛋白酶抑制剂为E-64，阳性对照溶液终浓度为400μg/ml。
本发明的有益效果是：
1、本发明评价杀虫蛋白对龟纹瓢虫成虫影响时，完全考虑到龟纹瓢虫所面临的杀虫蛋白威胁的自然环境，具体如下：1)蚜虫取食植物棉花的叶片，龟纹瓢虫也有取食棉花的花外蜜腺的习性。本发明提取棉花汁液提取物作为溶剂并补充蚜虫作为饲料，不仅模拟了龟纹瓢虫取食花外蜜腺的自然环境，同时也考虑了棉花体内次生代谢物质与杀虫蛋白互作对龟纹瓢虫的影响，因此，更加真实的反映龟纹瓢虫所面临的自然环境；2)本发明设计了一种模拟植物腺体的装置，模拟龟纹瓢虫取食棉花的花外蜜腺的吸取方式，更加真实的反映龟纹瓢虫的取食方式。
2、评价方法中要考虑龟纹瓢虫的正常存活及产卵。本发明采用果糖作为龟纹瓢虫成虫的诱食剂，不仅刺激龟纹瓢虫取食，还可以提高龟纹瓢虫成虫的存活率和产卵量，保证了龟纹瓢虫正常取食以及可以正常用于实验。
3、本发明提供了一种龟纹瓢虫饲喂装置，该装置模拟植物腺体，由嵌套的大小两根离心管和毛细管构成，通过毛细管(内径0.53mm左右)引流喂食龟纹瓢虫成虫，同时还可以进一步通过恒温装置保持蛋白活性。该装置采用实验室常用化学仪器制成，结构简单且非常实用。
附图说明
图1为评价外源杀虫蛋白对龟纹瓢虫成虫影响的饲喂装置图；其中，1、大离心管，2、小离心管；3、毛细管。
图2为饲喂装置放置于恒温装置上的图。
具体实施方式
下面将以实施例的方式对本发明作进一步的详细描述，以使本领域技术人员能够实践本发明。应当理解，可以采用其他实施方式，并且可以做出适当的改变而不偏离本发明的精神或范围。为了避免对于使本领域技术人员能够实践本发明来说不必要的细节，说明书可能省略了对于本领域技术人员来说已知的某些信息。因此，以下详细描述不应以限制性的意义来理解，且本发明的范围仅由所附权利要求界定。
如图1所示，上述饲喂装置，包括带管盖且底部开口的大离心管1、带管盖的小离心管2和毛细管3。所述小离心管2嵌套在大离心管1的开口的底部，且小离心管的管体暴露在大离心管1外3/4以上(底部及下部在大离心管外，管帽及上部在大离心管内)；所述毛细管3的一端穿透小离心管2的管盖暴露在小离心管2外，另一端伸入到小离心管2的底部；所述大离心管为50ml的离心管；所述小离心管为1.5-2ml的离心管；所述毛细管的内径为0.53mm。
实施例1：果糖提高龟纹瓢虫成虫的存活率和产卵量
采集健康非转基因棉花叶片100g，研磨后加入200g的无菌蒸馏水，放在容器内，室温下在200rpm的摇床浸取2h，使用离心机12000g离心10min，抽取上清，过滤后即为获得的棉花汁液提取物。
称取0.4g果糖和0.4g蔗糖分别置于2.0ml的离心管中，再加入棉花汁液提取物，定容至1mL，混匀后即为配制好的0.4g/ml的果糖溶液和0.4g/ml的蔗糖溶液。
分别将0.4g/ml的果糖溶液和0.4g/ml的蔗糖溶液分装到1.5mL离心管中，每管250μL，盖上管盖，离心管管盖用锐利物刺孔，插入适宜长度的毛细管(内径0.53mm)至溶液底部，引流出其中的溶液，截断毛细管，使溶液暴露于管口。将上述1.5mL离心管底部朝下从50mL离心管管口，将50mL离心管底部开口，使1.5mL离心管管体能暴露出3/4以上(即制成了如图1所示的饲喂装置)，将暴露部分放置到14℃的恒温金属浴上(如图2)。提前制备时也可以将0.4g/ml的果糖溶液和0.4g/ml的蔗糖溶液提前分装到1.5mL离心管中，每管250μL，-20℃放置，保存时间不超过1个月，使用时再制备成饲喂时的状态。
将新羽化的龟纹瓢虫成虫(羽化12h内)在解剖镜下辨别雌雄，随机配对，单对放入上述50ml的离心管中，离心管开口处用棉花封口。连同恒温金属浴一起放置于光照培养箱中，温度为25℃±1℃，湿度为60-70％，光周期为L:D＝14h:10h。每一种饲喂溶液视为一个试验处理，每一个试验处理45对龟纹瓢虫成虫，离心管中适时补充豌豆蚜作为瓢虫成虫的食物，每天观察并补充足量的豌豆蚜，每两天更换一次1.5mL离心管中的溶液，试验持续20d。
试验过程中每天观察记录龟纹瓢虫成虫的存活和产卵情况。试验结束后，将所有存活的龟纹瓢虫成虫辨别雌雄，冷冻干燥后分别称重。
试验结果如表1所示。从表1可以看出：与0.4g/ml的蔗糖溶液相比，0.4g/ml的果糖溶液饲养的龟纹瓢虫成虫死亡率降低、产卵前期缩短、产卵量增加、体重增加。该结果表明，0.4g/ml的果糖更有利于龟纹瓢虫成虫的存活。
表1.果糖和蔗糖对龟纹瓢虫成虫生物学特性的影响
Figure BDA0001595632660000051
实施例2：外源杀虫蛋白Cry1Ac蛋白对龟纹瓢虫影响的评价
采集健康非转基因棉花叶片100g，研磨后加入200g的无菌蒸馏水，放在容器内，室温下在200rpm的摇床浸取2h，使用离心机12000g离心10min，抽取上清，过滤后即为获得的棉花汁液提取物。
称取20μg的外源杀虫蛋白Cry1Ac和400mg果糖置于2.0ml的离心管中，再加入棉花汁液提取物定容至1mL，混匀后即为配制好的浓度为20μg/ml的外源杀虫蛋白Cry1Ac溶液，其中含有0.4g/ml的果糖溶液。
称取400μg的蛋白酶抑制剂E-64和400mg果糖置于2.0ml的离心管中，加入棉花汁液提取物作定容至1mL，混匀后即为配制好的含有400μg/ml的蛋白酶抑制剂的阳性对照溶液，其中含有0.4g/ml的果糖溶液。
称取400mg果糖置于2.0ml的离心管中，加入棉花汁液提取物定容至1mL，混匀后即为配制好的阴性对照溶液，其中含有0.4g/ml的果糖溶液。
分别将250μL的外源杀虫蛋白Cry1Ac溶液、阳性对照溶液、阴性对照溶液装入到1.5mL离心管中，盖上管盖，离心管管盖用锐利物刺孔，插入适宜长度的毛细管(内径0.53mm)至溶液底部，引流出其中的溶液，截断毛细管，使溶液暴露于管口。将上述1.5mL离心管底部朝下从50mL离心管管口，将50mL离心管底部开口，使1.5mL离心管管体能暴露出3/4以上(即制成了如图1所示的饲喂装置)，将暴露部分放置到14℃的恒温金属浴上。
将新羽化的龟纹瓢虫成虫(羽化12h内)在解剖镜下辨别雌雄，随机配对，单对放入上述50ml的离心管中，离心管开口处用棉花封口。连同恒温金属浴一起放置于光照培养箱中，温度为25℃±1℃，湿度为60％-70％，光周期为L:D＝14h:10h。每一种饲喂溶液视为一个试验处理，每一个试验处理45对龟纹瓢虫成虫，离心管中适时补充豌豆蚜作为瓢虫成虫的食物，每天观察并补充足量的豌豆蚜，每两天更换一次1.5mL离心管中的溶液，试验持续20d。
试验过程中每天观察记录龟纹瓢虫成虫的存活和产卵情况。试验结束后，将所有存活的龟纹瓢虫成虫辨别雌雄，冷冻干燥后分别称重。
试验结果如表2所示。与阴性对照组相比，阳性对照溶液处理组的成虫的发育历期显著延长，幼虫死亡率显著升高，符合阳性对照的实验预期。与阴性对照组相比，外源杀虫蛋白Cry1Ac对龟纹瓢虫成虫死亡率、产卵前期、产卵量和体重的指标上均没有显著性差异。该结果表明，外源杀虫蛋白Cry1Ac对龟纹瓢虫成虫没有造成不利影响。
表2.Cry1Ac蛋白对龟纹瓢虫成虫生物学特性的影响
Figure BDA0001595632660000061
综上所述，以上仅为本发明的较佳实施例而已，并非用于限定本发明的保护范围，因此，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (6)

1.一种评价杀虫蛋白对龟纹瓢虫成虫影响的方法，其特征是，
采用的饲喂装置，它包括带管盖且底部开口的大离心管、带管盖的小离心管和毛细管；
所述小离心管嵌套在大离心管的开口的底部，且小离心管的管体暴露在大离心管外3/4以上；
所述毛细管的一端穿透小离心管的管盖暴露在小离心管外，另一端伸入到小离心管的底部；
所述大离心管为50-100ml的离心管；所述小离心管为1-5ml的离心管；所述毛细管的内径为0.50-0.55mm；
所述方法具体包括以下步骤：
(1)采集健康非转基因棉花叶片，磨碎后加入1.8-2.2倍叶片质量的无菌蒸馏水，摇床振荡提取，离心，抽取上清，过滤后即为获得的棉花汁液提取物；
(2)以棉花汁液提取物作为溶剂，加入外源杀虫蛋白和果糖，制成果糖终浓度为0.1-0.5g/mL的待测溶液；同时设不加外源杀虫蛋白的阴性对照液以及采用蛋白酶抑制剂代替外源杀虫蛋白的阳性对照液；
(3)分别将待测溶液、阳性对照液和阴性对照液装入到饲喂装置的小离心管中，盖上管盖，通过伸入到溶液底部的毛细管引流出小离心管中的溶液，截断毛细管，使溶液暴露于毛细管管口；然后将小离心管的暴露部分放置恒温装置保持蛋白活性；
(4)将新羽化的龟纹瓢虫成虫根据雌雄随机配对，单对放入到饲喂装置的大离心管中，管开口处用棉花封口，连同恒温装置一起放置于光照培养箱中培养；大离心管中加入足量的豌豆蚜，每2-3天更换一次小离心管中的溶液，试验持续18-25d；
(5)试验过程中每天观察记录龟纹瓢虫成虫的存活和产卵情况；试验结束后，将所有存活的龟纹瓢虫成虫辨别雌雄，冷冻干燥后分别称重。
2.如权利要求1所述的一种评价杀虫蛋白对龟纹瓢虫成虫影响的方法，其特征是，所述步骤(5)的结果判定是：在“与阴性对照组相比，阳性对照组的成虫的发育历期显著延长，幼虫死亡率显著升高”的前提下，如果与阴性对照组相比，待测溶液对龟纹瓢虫成虫死亡率、产卵前期、产卵量和体重的指标上均没有显著性差异，则表明：外源杀虫蛋白对龟纹瓢虫成虫没有造成不利影响。
3.如权利要求1或2所述的一种评价杀虫蛋白对龟纹瓢虫成虫影响的方法，其特征是，所述步骤(1)的摇床振荡提取为在室温下在200rpm的摇床浸取2h。
4.如权利要求1或2所述的一种评价杀虫蛋白对龟纹瓢虫成虫影响的方法，其特征是，所述步骤(4)光照培养箱中培养条件为：温度为25℃±1℃，湿度为60％-70％，光周期为L:D＝14h:10h。
5.如权利要求1或2所述的一种评价杀虫蛋白对龟纹瓢虫成虫影响的方法，其特征是，所述步骤(4)实验过程中，每一种饲喂溶液视为一个试验处理，每一个试验处理45对龟纹瓢虫。
6.如权利要求1所述的一种评价杀虫蛋白对龟纹瓢虫成虫影响的方法，其特征是，所述大离心管为50ml的离心管；所述小离心管为1.5-2.0ml的离心管；所述毛细管的内径为0.53mm。
CN201810205236.7A 2018-03-13 2018-03-13 一种评价杀虫蛋白对龟纹瓢虫成虫影响的方法及饲喂装置 Expired - Fee Related CN108575912B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201810205236.7A CN108575912B (zh) 2018-03-13 2018-03-13 一种评价杀虫蛋白对龟纹瓢虫成虫影响的方法及饲喂装置

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201810205236.7A CN108575912B (zh) 2018-03-13 2018-03-13 一种评价杀虫蛋白对龟纹瓢虫成虫影响的方法及饲喂装置

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN108575912A CN108575912A (zh) 2018-09-28
CN108575912B true CN108575912B (zh) 2020-11-13

Family

ID=63626089

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201810205236.7A Expired - Fee Related CN108575912B (zh) 2018-03-13 2018-03-13 一种评价杀虫蛋白对龟纹瓢虫成虫影响的方法及饲喂装置

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN108575912B (zh)

Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110896926A (zh) * 2019-11-14 2020-03-24 中国农业科学院植物保护研究所 评价杀虫蛋白对异色瓢虫幼虫影响的方法
CN112335609B (zh) * 2020-09-30 2022-07-29 生态环境部南京环境科学研究所 一种评价转基因外源蛋白对蛴螬影响的生物检测方法
CN113208014A (zh) * 2021-05-14 2021-08-06 河北科技师范学院 一种天敌瓢虫高产卵增殖率的饲料及应用

Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SU1741694A1 (ru) * 1990-03-19 1992-06-23 Анапская Зональная Опытная Станция Виноградарства И Виноделия Научно-Производственного Объединения "Сады Кубани" Устройство дл выкармливани насекомых
WO2003060463A2 (en) * 2001-07-30 2003-07-24 Purdue Research Foundation Methods of screening, determining, developing, and utilizing negative cross resistance toxins
CN1692717A (zh) * 2005-05-11 2005-11-09 北京卓凯生物技术有限公司 一种昆虫给药方法和装置及其在大规模药物筛选中的用途
WO2009067487A2 (en) * 2007-11-19 2009-05-28 The United States Of America, As Represented By The Secretary Of Agriculture Novel cadherin receptor peptide for potentiating bt biopesticides
CN103609877A (zh) * 2013-11-05 2014-03-05 中国农业科学院植物保护研究所 胃毒性杀虫剂或转基因杀虫蛋白对龟纹瓢虫毒性影响的测定方法
CN103875608A (zh) * 2014-03-24 2014-06-25 华中农业大学 转基因抗虫水稻对捕食性天敌黑肩绿盲蝽安全性评价方法
CN104133054A (zh) * 2014-07-04 2014-11-05 中国农业科学院植物保护研究所 一种评价转基因棉花对大草蛉影响的生物测定方法
CN104459095A (zh) * 2014-11-12 2015-03-25 中国农业科学院棉花研究所 一种Bt蛋白对龟纹瓢虫的安全性评价方法

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20120151634A1 (en) * 2010-12-13 2012-06-14 Iowa State University Research Foundation, Inc. Assay for measuring rootworm resistance

Patent Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SU1741694A1 (ru) * 1990-03-19 1992-06-23 Анапская Зональная Опытная Станция Виноградарства И Виноделия Научно-Производственного Объединения "Сады Кубани" Устройство дл выкармливани насекомых
WO2003060463A2 (en) * 2001-07-30 2003-07-24 Purdue Research Foundation Methods of screening, determining, developing, and utilizing negative cross resistance toxins
CN1692717A (zh) * 2005-05-11 2005-11-09 北京卓凯生物技术有限公司 一种昆虫给药方法和装置及其在大规模药物筛选中的用途
WO2009067487A2 (en) * 2007-11-19 2009-05-28 The United States Of America, As Represented By The Secretary Of Agriculture Novel cadherin receptor peptide for potentiating bt biopesticides
CN103609877A (zh) * 2013-11-05 2014-03-05 中国农业科学院植物保护研究所 胃毒性杀虫剂或转基因杀虫蛋白对龟纹瓢虫毒性影响的测定方法
CN103875608A (zh) * 2014-03-24 2014-06-25 华中农业大学 转基因抗虫水稻对捕食性天敌黑肩绿盲蝽安全性评价方法
CN104133054A (zh) * 2014-07-04 2014-11-05 中国农业科学院植物保护研究所 一种评价转基因棉花对大草蛉影响的生物测定方法
CN104459095A (zh) * 2014-11-12 2015-03-25 中国农业科学院棉花研究所 一种Bt蛋白对龟纹瓢虫的安全性评价方法

Non-Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Bt proteins Cry1Ah and Cry2Ab do not affect cotton aphid Aphis gossypii and ladybeetle Propylea japonica;Yao zhao,et al.;《Scientific Reports》;20160201;第6卷;第1-10页 *
Consumption of Bt rice pollen containing Cry1C or Cry2A does not pose a risk to Propylea japonica (Thunberg) (Coleoptera：Coccinellidae);Yunhe Li,et al.;《Scientific Reports》;20150108;第5卷;第1-6页 *
外源Bt杀虫蛋白与棉花抗虫次生物的互作关系及转Bt基因棉花诱导抗虫性的研究;张永军;《中国博士学位论文全文数据库（农业科技辑）》;20020615(第1期);第D046-42页 *
导入外源Bt基因与受体作物次生代谢物质的交互关系研究;钟珍梅 等;《中国生态农业学报》;20071130;第15卷(第6期);第200-第203页 *
龙爪槐花对异色瓢虫成虫寿命的影响;徐彬 等;《中国生物防治学报》;20170831;第33卷(第4期);第442-445页 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN108575912A (zh) 2018-09-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN108575912B (zh) 一种评价杀虫蛋白对龟纹瓢虫成虫影响的方法及饲喂装置
CN103931564B (zh) 转基因抗虫水稻对寄生性天敌稻虱缨小蜂安全性评价方法
Garrett et al. Leaf processing behaviour in Atta leafcutter ants: 90% of leaf cutting takes place inside the nest, and ants select pieces that require less cutting
Vaughan et al. An aeroponic culture system for the study of root herbivory on Arabidopsis thaliana
Porto et al. Interaction of Fusarium solani, Macrophomina phaseolina and Rhizoctonia solani as root rot pathogens of Cucumis melo
CN104322452A (zh) 转Bt基因抗虫水稻对捕食性天敌青翅蚁形隐翅甲安全性评价方法
Alpízar et al. Bats and bananas: Simplified diet of the nectar-feeding bat Glossophaga soricina (Phyllostomidae: Glossophaginae) foraging in Costa Rican banana plantations
Gómez et al. Oviposition preference of Ceratitis capitata (Diptera: Tephritidae) at different times after pruning ‘Italia’table grapes grown in Brazil
Matta et al. Feeding habits of Carabidae (Coleoptera) associated with herbaceous plants and the phenology of coloured cotton
Wardle The problems of applied entomology
Andrade et al. Effects of botanical insecticides on the instantaneous population growth rate of Aphis gossypii Glover (Hemiptera: Aphididae) in cotton
Fernandes et al. Within plant distribution and dynamics of Hyadaphis foeniculi (Hemiptera: Aphididae) in field fennel intercropped with naturally colored cotton
Sahayaraj et al. Life traits and predatory potential of Antilochus coqueberti (Fab.)(Heteroptera: Pyrrhocoridae) against Dysdercus koenigii Fab.
Bae et al. Changes in nutritional composition of soybean seed caused by feeding of pentatomid (Hemiptera: Pentatomidae) and alydid bugs (Hemiptera: Alydidae)
Hynes Lepidopterous pests of maize in Trinidad.
CN105866352B (zh) 评价转基因植物花粉对蜜蜂毒理学效应的方法和花粉提取液及其制备方法
Gyawali et al. Elucidating the fitness of a dead-end trap crop strategy against the tomato fruitworm, Helicoverpa armigera
Pasinato et al. Biology and fertility life table of Bactrocera carambolae on grape and acerola
Summerville The Larger Horned Citrus Bug (Biprorulus bibax Breddin).
Rizvi et al. Effect of leaf chemistry of Vitis vinifera L. on the performance and development of Epiphyas postvittana (Lepidoptera: Tortricidae)
Ronquim et al. Occurrence and parasitism of aphids (Hemiptera: Aphididae) on cultivars of irrigated oat (Avena spp.) in São Carlos, Brazil
Barnewall Plant-insect interactions between yellow toadflax, Linaria vulgaris, and a potential biocontrol agent, the gall-forming weevil, Rhinusa pilosa
Storey Preference and performance of the water lily aphid (Rhopalosiphum nymphaeae) among native and invasive duckweeds (Lemnaceae)
CN108651527A (zh) 一种基于瑞香狼毒根的植物源杀虫剂制备方法
Endo et al. Pupal parasitoids for the biological control of Diatraea saccharalis (Fabricius, 1794)(Lepidoptera: Crambidae)

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20201113

Termination date: 20210313

CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee