CN111141874A - 一种橘小实蝇成虫诱杀效果的测定方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开一种橘小实蝇成虫诱杀效果的测定方法，包括如下步骤:（1）小区设计：准备若干个封闭且没有橘小实蝇发生的小区，将小区分为处理区和空白区，每个小区内种植有一定数量的橘小实蝇寄主植物，各小区寄主植物的数量相同、大小长势一致；（2）成虫接入；（3）诱杀剂接入；（4）食物放置及其观察处理；（5）数据统计；（6）诱杀效果计算。本发明排除了室外评测的不确定性因素，设计了较大的封闭小区，能够满足橘小实蝇正常的生理生活、交配产卵活动，除了橘小实蝇不能向外飞出、向里飞入外其他情况与自然状态基本一致，这样确保了试验数据接近自然状态，并缩短了田间试验的周期。

Description

一种橘小实蝇成虫诱杀效果的测定方法

技术领域

本发明属于诱杀剂评测领域，具体涉及一种橘小实蝇成虫诱杀效果的测定方法。

背景技术

橘小实蝇(Bactrocera dorsalis(Hendel))是一种危险性杂食害虫，在南方地区普遍发生，北至河南南部。该虫在广西全境均有发生，近年来呈加重趋势，局部区域损失严重。

目前，我国害虫成虫诱杀技术的防治效果测定困难。原因在于：

1、成虫飞行能力强，不进行较大面积的连片防治，防治效果就体现不出来；但防治面积够大时，其他防治措施以及不采取防治措施的空白对照的田块就不好找，即使找到，虫源基数也不一样，防治效果的测定存在较大困难。这是生产实践中常见的事情，也是害虫成虫诱杀技术推广的一个难点。

2、常用的性诱技术，一般是诱杀雄虫，被诱杀的雄虫，在其被诱杀前是否已经与雌虫进行了交配是不好确定的，如果已经完成交配才被诱杀，就起不到防治效果，而一般做法是用统计被诱杀的雄虫数量来当作防治效果。

3、灯光诱杀技术，在成虫扑灯被诱杀前，是否已经完成交配或产卵，不容易确定；如果雄虫完成了交配或雌虫完成了产卵，它是否被诱杀对防治效果就没有影响，一般仅能统计被诱杀的成虫数量。

4、生产上常常调查防治田块目标害虫的危害情况作为防治效果，问题是成虫是能飞行的，不能确定是其他区域飞过来的目标害虫造成的，还是该防治区域的目标害虫造成的。

为了解决上述问题，专利号ZL200910112094.0，发明名称：橘小实蝇蛋白引诱杀剂及其制备方法，其实施例公开了室内生物测定方法，1、方法：是每笼40头试虫，雌雄各20头，饲喂糖和水，测试前1h停止饲喂。在两个自制诱瓶中分别加入2ml蛋白饵剂和水(对照)，放入养虫笼的对角线位置，15min后旋转180°，30min后统计两个诱瓶中实蝇的数量，并分别记录雌雄的数量。7:00A.M～8:30A.M间进行，测试前10min拿走饲料和水，测试时间为30min。2、数据处理：引诱率＝(蛋白饵剂引诱数量-对照引诱的数量)/40×100％；3、结果与分析。虽然该专利提出了室内评测方法以排除室外的不确定性因素，但该方法仅仅存在诱杀剂而无其它与诱杀剂竞争的食物，成虫只能选择对诱杀剂进行取食，并且测定的空间过小，测定时间很短，进而不能客观模拟自然环境中诱杀剂的引诱效果。

发明内容

本发明的目的是解决上述技术问题，提供一种接近自然状态、测定结果更准确、缩短田间试验周期的橘小实蝇诱杀剂防治效果的测定方法。

为实现上述的目的，本发明的技术方案为：

一种橘小实蝇成虫诱杀效果的测定方法，包括如下步骤:

(1)小区设计：准备若干个封闭且没有橘小实蝇发生的小区(如有橘小实蝇发生需提前进行清理，使小区内没有橘小实蝇)，将小区等分为处理区和空白区，每个小区内种植有一定数量的橘小实蝇寄主植物，各小区寄主植物的数量相同、大小长势一致；

(2)成虫接入：每隔一段时间向每个小区内等量接入一批橘小实蝇成虫；

(3)诱杀剂接入：在接入第一批虫的第2天，向处理区内放置待检测诱杀效果的成虫诱杀剂；

(4)食物放置及其观察处理：在接入首批成虫的同时，每个小区内随机放置一些橘小实蝇的食物和水，并提供水果供成虫产卵；每隔一段时间检查一次产卵情况，更换新的水果；然后按处理区和空白区分组编号，将产有卵的果实取出放入编号的小塑料杯内，待幼虫孵化后，检查计数每个果实的幼虫数量a；孵化数即孵化出的幼虫量，单位为条。

(5)数据统计：当所有处理区和空白区内的所有成虫均死亡，并且产有卵的果实没有新的幼虫孵化，试验即结束；依据每个果实内孵化出来的幼虫数量a，统计出处理区受害水果内孵化出来的幼虫数量A_P和空白区受害水果内孵化出来的幼虫数量A₀；

(6)诱杀效果计算：将步骤(1)～(5)作为一个试验，同样的条件下同时进行至少三组试验，进而算出处理区和空白区受害水果孵化出来的幼虫数量平均值，简称为孵化数平均值；根据处理区的平均孵化数

和空白区的平均孵化数

进而计算各待检测的成虫诱杀剂的诱杀效果D，

D越大，说明处理区的平均孵化数越低，则表明此待检测的成虫诱杀剂的诱杀效果越好。

作为进一步的技术方案，以上所述成虫接入的具体步骤是：共接入3批虫，每批相隔5天；

第1批：第1天每个小区各接入刚羽化的橘小实蝇成虫150头，雌雄各75头；

第2批：第6天，每个小区接入第2批橘小实蝇成虫150头，雌雄各75头；

第3批：第11天，每个小区接入第3批橘小实蝇成虫150头，雌雄各75头。

在步骤(2)的成虫接入前，需要做虫源准备，其步骤包括：从番石榴园采集橘小实蝇虫果，带回实验室饲养，待橘小实蝇成虫羽化后，将橘小实蝇成虫加入到已有的大虫笼中做进一步复壮，并保证虫笼内橘小实蝇成虫数量不少于300头；橘小实蝇成虫用蜜糖水或酵母饲养，待橘小实蝇成虫进入产卵期后，在笼内放置产卵基质或放入番石榴，让橘小实蝇成虫在基质或番石榴中产卵，48h后取出基质或果实，每2天取卵一次，放在室温下让卵孵化直到幼虫化蛹和成虫羽化；取同一天羽化的橘小实蝇成虫备用，确保每批橘小实蝇成虫数不少于1500头，分3批投放虫，共需准备4500头成虫；将每批成虫按性比1：1将雌雄虫单独置于小虫笼内，每个笼盛雌虫和雄虫各75头。

作为进一步的技术方案，以上所述小区设为40目网室，所述网室长7米、宽5米、高3.5米。可以根据作物的长势调节网室的尺寸，要求能够满足试验昆虫正常的生长发育、交配产卵繁殖后代。

作为进一步的技术方案，以上所述橘小实蝇寄主植物，为结果的柑橘树。

作为进一步的技术方案，以上所述柑橘树的种植数为9棵。

作为进一步的技术方案，以上所述食物放置及其观察处理，所述食物为水解蛋白和糖，每个小区均匀放置3个点，每个点5-10毫升，蒸发或取食完就随时补充；所述水果为没有橘小实蝇为害的新鲜杨桃和番石榴中的一种或两种混合，每个网室放置水果的大小和数量相同，初次放置10个，总数量为90个；每5天检查一次。

作为进一步的技术方案，以上将所述产有卵的果实放入40目小笼内，然后在28℃、相对湿度75％、光照：黑暗＝14：10的光照培养箱中进行幼虫孵化。

作为进一步的技术方案，以上所述测定方法在5-9月份进行。

作为进一步的技术方案，以上所述成虫诱杀剂为食品诱杀剂或性诱杀剂。

本发明的网室上开设有双重门，防止成虫飞出，同时便于研究人员进出放置试验物品。此种网室结构为本领域常用的网室设计，不进行详细的结构描述。

与现有技术相比，本发明的有益效果为：

1、本发明排除了室外评测的不确定性因素，设计了较大的封闭小区，能够满足橘小实蝇正常的生理生活、交配产卵活动，除了橘小实蝇不能向外飞出、向里飞入外其他情况与自然状态基本一致，这样确保了试验数据接近自然状态，并缩短了田间试验的周期。

2、本发明通过对成虫发生为害和生活习性的总结观察，在每个小区内放置寄主对象植物的果实供成虫取食为害，并作为待测定诱杀效果的诱杀剂的竞争物，同时模拟橘小实蝇的一个代次，设定了接入成虫的批次、数量、雄雌比例，放置成虫产卵前期所需要的食物，以达到最接近自然环境的状态，又能有效地控制田间试验的空间，得到对于诱杀剂更准确且稳定的测评结果。

3、本发明的通过统计孵化数平均值来计算诱杀效果，对于性诱剂而言更加准确。因生产实践中有雄成虫完成了交配或雌成虫完成了产卵才被诱杀的，所以通过统计成虫来评测诱杀效果的话，虽然成虫已被杀害，但是其后代幼虫仍会对作物造成为害，导致诱杀装置的诱杀效果评测偏高，本发明方法通过计算每个处理区雌成虫产卵所孵化出来的幼虫数量，来测定最终诱杀装置的诱杀效果D，D越高，说明诱杀处理区的幼虫数平均值越少，则待测定的性诱剂对橘小实蝇的诱杀效果越好；D越低，说明诱杀处理区的幼虫数平均值越多，则待测定的性诱剂对橘小实蝇的诱杀效果越差，避免了统计诱杀成虫数量作为防治效果指标，减少了误差。

4、本发明不仅可以采用孵化数来评测诱杀效果，还可通过统计果实中的产卵数以及孵化率来评定性诱剂的引诱率，提供更多的评测依据。

具体实施方式

下面结合实施案例对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式并不局限于实施例表示的范围。

经研究橘小实蝇具有以下特征，因而设计出本方案。

1.寄主范围

橘小实蝇是植食性昆虫，寄主植物有46个科250多种果树蔬菜；主要有柑橘、橙、柚、柠檬、芒果、杨桃、扁桃、枇杷、黄皮、番石榴、桃、梅、李、梨、柿、香蕉、百香果、罗汉果、西番莲、番木瓜、西瓜等，广西果类多是橘小实蝇的为害对象。

2.为害习性

橘小实蝇雌虫产卵于果皮与果肉之间，孵化后幼虫潜居果肉取食为害，造成烂果、落果；若果内幼虫数量少，危害轻，受害果实常挂在树上较长时间不脱落。产卵初期，产卵处常会有针尖大小的产卵孔，一段时间后常会出现变色、流液现象，即使伤口愈合，表面也会形成疤痕；随水果种类、为害时期等不同，表现症状也不尽相同。产卵造成的伤口容易招致病原菌入侵。

3.生活习性

成虫具有一定的趋光性，还有爱动、喜栖息阴凉环境的习性。成虫具有迁飞性，在食物丰足和气候条件适宜的情况下，通常就地发生危害，较少作远距离迁移；但在寄主食物短缺和气候干燥等恶劣的环境条件下，为寻找适宜的生存环境可以远距离迁飞。

整个成虫期要通过不断觅食含有蛋白质和糖类的食物来维持生命活动和达到性成熟，在自然界取食介壳虫、蚜虫、粉虱的分泌物或植物枝叶损伤流出的汁液，经产卵前期，才能发育成熟交配产卵，产卵开始后约20d达到产卵高峰期，产卵期约50d，一生可产卵400-1800粒，室内饲养出的成虫雌雄比约为1∶1。

幼虫孵化后数秒钟便开始活动，昼夜不停地取食为害。幼虫分三龄，三龄期食量最大，为害最烈。幼虫老熟后脱果入土或土石块、枯枝落叶缝中化蛹，也可以裸露或在受害果内发蛹，入土深度通常1～3cm，土质疏松的深达10cm。

橘小实蝇以老熟幼虫、蛹在土中，成虫在果树上或地上草里有遮避的地方越冬。12月至翌年2月虫口进入低潮时期，低温期成虫不食不动，多在原危害果园的果树丛中，静止于叶背，待气温回升时即开始活动、产卵，冬季温度较高时，成虫仍会活动、取食，获取补充营养。

4.生长发育

研究表明发育最适温度25～30℃。越冬蛹在地温达到16℃以上时开始羽化，最适温度22℃，蛹发育上限温度33℃，下限温度10℃。14-32℃之间的不同恒温饲养观察，成虫寿命均超过60d，雌虫寿命比雄虫长，成虫寿命最长1a。橘小实蝇喜欢比较湿润的空气环境，太干燥或湿度太大都会抑制成虫的飞行，旱季成虫羽化困难、死亡率也高。雨量充沛时，雌虫产卵量多，干旱时产卵量低。

5.田间发生动态

一年发生4～11代，世代重叠明显，同一时期成虫、幼虫、蛹和卵均能见到。从研究结果分析，橘小实蝇种群数量取决于虫口基数、寄主植物的果实成熟度和数量，以及温湿度是否适宜；发生代数主要取决于一年中寄主植物可供取食的天数和有效积温。

6.综合防治技术

橘小实蝇防治主要有农业、物理、生物和化学防治。农业防治有减少桥梁寄主、科学栽培管理、及时清理田园、冬季果园翻耕。物理防治主要有果实套袋和防虫网覆盖；生物防治中，寄生性天敌、捕食性天敌、病原线虫、真菌、蚂蚁、鸡等对橘小实蝇有一定的控制作用；化学防治主要有诱杀、土壤处理和树冠喷洒农药。

橘小实蝇的诱杀主要有食诱、性诱和黄板诱杀，或黄板加诱杀剂，

食饵诱杀：根据橘小实蝇成虫需要觅食的特点，用水解蛋白和糖等做成诱杀剂，诱杀前往取食的雄雌成虫；性诱防治：根据橘小实蝇雌成虫释放性外激素吸引雄虫前来交配的特性，用人工合成的性外激素来诱杀雄虫，主要成份有甲基丁香酚、异丁香酚。

实施例1：

1、试验设计：甲基丁香酚性诱、蛋白食物诱(商品名：聪绿)和空白对照三个处理，每个处理三个重复，共9个小区，按照常规试验的要求，小区的分布均是随机的。9个小区均为长7米、宽5米、高3.5米的网室，网为40目尼龙网，每个网室内有9颗高2.5米的3年龄柑橘树，设置双重门。试验地点在钦州市郊。

2、虫源准备：从番石榴园采集虫果，带回实验室饲养，待成虫羽化后，将成虫加入到已有的实验室种群(大虫笼)中做进一步复壮，并保证虫笼内成虫数量不少于300头。成虫用蜜糖水或酵母饲养，待成虫进入产卵期后，在笼内放置产卵基质(或放入番石榴等水果代替)，让成虫在基质中产卵，48h后取出基质或果实，每2天取卵一次，放在室内(室温)下让卵孵化直到幼虫化蛹和成虫羽化。取同一天羽化的成虫备用，确保每批成虫数不少于1500头(150头/处理×3个处理×3次重复＝1350头，为确保开始实验时有足够的活虫数，需准备不少于1500头/批)，分3批投放虫，共需准备4500头成虫。将每批成虫按性比1：1将雌雄虫单独置于小虫笼内，每个笼盛雌虫和雄虫各75头。

3、成虫接入：共接入3批虫，每批相隔5天。

第1次：第1天每个小区各接入刚羽化的橘小实蝇成虫150头，雌雄各75头。

第2次：第6天，每个小区接入第2批橘小实蝇成虫，与第1批一样。

第3次：第11天，每个小区接入第3批橘小实蝇成虫，与第1批一样。

4、诱杀剂接入：

时间：在接入第一批虫的第2天

方法：在其中三个性诱小区放入内放置有性诱杀剂甲基丁香酚(江苏常州市禾丰生化研究所生产)，性诱瓶为柳州市双虹塑料工业有限公司生产；三个食诱小区放入为蛋白食物诱剂(商品名为聪绿，南京新安中绿生物科技有限公司生产)。如果诱杀剂用完，随时添加。

5、食物放置及其观察处理：

在接入首批成虫的同时，每个小区内随机放置一些橘小实蝇的食物和水，并提供水果供成虫产卵；每隔一段时间检查一次产卵情况，更换新的水果；然后按处理区和空白区分组编号，将产有卵的果实取出放入编号的小塑料杯内，待幼虫孵化后，检查计数每个果实的孵化数a；每果实内的虫卵数可通过抽查部分果实的卵粒数推算每批果中的卵粒数，计算卵的孵化率。其成虫生存和生长发育繁殖所需要的食物为水解蛋白和糖，每个网室均匀放置3个点，每个点5-10毫升，蒸发或取食完就随时补充；水果为没有橘小实蝇为害的新鲜杨桃和番石榴中的一种，每个小区放置水果的大小和数量相同，初次放置10个，总数量为90个；每5天检查一次。

6、数据统计：当所有处理区和空白区内的所有成虫均死亡，并且产有卵的果实没有新的幼虫孵化，试验即结束；依据每个果实的幼虫数量a，统计出处理区受害水果内孵化出来的幼虫数量A_P和空白区受害水果内孵化出来的幼虫数量A₀，进而算出处理区和空白区受害水果孵化出来的幼虫数量平均值，即为孵化数平均值；

7、诱杀效果计算：

算出处理区和空白区的孵化数平均值；根据处理区的平均孵化数

和空白区的平均孵化数

进而计算各待检测的成虫诱杀剂的诱杀效果D，

各处理产卵数、孵化数及孵化率统计表如表1所示。

表1

诱杀效果计算：

食诱的诱杀效果

性诱的诱杀效果

上述结果说明，聪绿的诱杀效果较好，甲基丁香酚的性诱效果较差。

上述实施例，仅为对本发明的目的、技术方案和有益效果进一步详细说明的具体个例，本发明并非限定于此。凡在本发明公开的范围之内所做的任何修改、等同替换、改进等，均包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种橘小实蝇成虫诱杀效果的测定方法，其特征在于，包括如下步骤:

(1)小区设计：准备若干个封闭且没有橘小实蝇发生的小区，将小区分为处理区和空白区，每个小区内种植有一定数量的橘小实蝇寄主植物，各小区寄主植物的数量相同、大小长势一致；

(2)成虫接入：每隔一段时间向每个小区内等量接入一批橘小实蝇成虫；

(3)诱杀剂接入：在接入第一批虫的第2天，向处理区内放置待检测诱杀效果的成虫诱杀剂；

(4)食物放置及其观察处理：在接入首批成虫的同时，每个小区内随机放置一些橘小实蝇的食物和水，并提供水果供成虫产卵；每隔一段时间检查一次产卵情况，更换新的水果；然后按处理区和空白区分组编号，将产有卵的果实取出放入编号的小塑料杯内，待幼虫孵化后，检查计数每个果实的幼虫数量a；

(5)数据统计：当所有处理区和空白区内的所有成虫均死亡，并且产有卵的果实没有新的幼虫孵化，试验即结束；依据每个果实内孵化出来的幼虫数量a，统计出处理区受害水果内孵化出来的幼虫数量A_P和空白区受害水果内孵化出来的幼虫数量A₀；

(6)诱杀效果计算：将步骤(1)～(5)作为一个试验，同样的条件下同时进行至少三组试验，进而算出处理区和空白区受害水果孵化出来的幼虫数量平均值，即为孵化数平均值；根据处理区的平均孵化数

和空白区的平均孵化数

进而计算各待检测的成虫诱杀剂的诱杀效果D，

2.根据权利要求1所述的一种橘小实蝇成虫诱杀效果的测定方法，其特征在于：所述成虫接入的具体步骤是：共接入3批虫，每批相隔5天；

第1批：第1天每个小区各接入刚羽化的橘小实蝇成虫150头，雌雄各75头；

第2批：第6天，每个小区接入第2批橘小实蝇成虫150头，雌雄各75头；

第3批：第11天，每个小区接入第3批橘小实蝇成虫150头，雌雄各75头。

3.根据权利要求2所述的一种橘小实蝇成虫诱杀效果的测定方法，其特征在于：在步骤(2)的成虫接入前，需要做虫源准备，其步骤包括：从番石榴园采集橘小实蝇虫果，带回实验室饲养，待橘小实蝇成虫羽化后，将橘小实蝇成虫加入到已有的大虫笼中做进一步复壮，并保证虫笼内橘小实蝇成虫数量不少于300头；橘小实蝇成虫用蜜糖水或酵母饲养，待橘小实蝇成虫进入产卵期后，在笼内放置产卵基质或放入番石榴，让橘小实蝇成虫在基质或番石榴中产卵，48h后取出基质或果实，每2天取卵一次，放在室温下让卵孵化直到幼虫化蛹和成虫羽化；取同一天羽化的橘小实蝇成虫备用。

4.根据权利要求3所述的一种橘小实蝇成虫诱杀效果的测定方法，其特征在于：所述小区设为40目网室，所述网室长7米、宽5米、高3.5米。

5.根据权利要求1所述的一种橘小实蝇成虫诱杀效果的测定方法，其特征在于：所述橘小实蝇寄主植物，为结果的柑橘树。

6.根据权利要求5所述的一种橘小实蝇成虫诱杀效果的测定方法，其特征在于：所述柑橘树的种植数为9棵。

7.根据权利要求4所述的一种橘小实蝇成虫诱杀效果的测定方法，其特征在于：所述食物放置及其观察处理，所述食物为水解蛋白和糖，每个小区均匀放置3个点，每个点5-10毫升，蒸发或取食完就随时补充；所述水果为没有橘小实蝇为害的新鲜杨桃和番石榴中的一种或两种混合，每个网室放置水果的大小和数量相同，初次放置10个，总数量为90个；每5天检查一次。

8.根据权利要求1所述的一种橘小实蝇成虫诱杀效果的测定方法，其特征在于：将所述产有卵的果实放入40目小笼内，然后在28℃、相对湿度75％、光照：黑暗＝14：10的光照培养箱中进行幼虫孵化。

9.根据权利要求1～8中任一项所述的一种橘小实蝇成虫诱杀效果的测定方法，其特征在于：所述测定方法在5-9月份进行。

10.根据权利要求9所述的一种橘小实蝇成虫诱杀效果的测定方法，其特征在于：所述成虫诱杀剂为食品诱杀剂或性诱杀剂。