CN106834253A - 一种发酵与生物转化原位耦合制备壳寡糖的方法 - Google Patents
一种发酵与生物转化原位耦合制备壳寡糖的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN106834253A CN106834253A CN201611112038.3A CN201611112038A CN106834253A CN 106834253 A CN106834253 A CN 106834253A CN 201611112038 A CN201611112038 A CN 201611112038A CN 106834253 A CN106834253 A CN 106834253A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- chitosan oligosaccharide
- bioconversion
- fermentation
- chitosan
- original position
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
- C12P19/04—Polysaccharides, i.e. compounds containing more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic bonds
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/14—Hydrolases (3)
- C12N9/24—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2)
- C12N9/2402—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2) hydrolysing O- and S- glycosyl compounds (3.2.1)
- C12N9/2405—Glucanases
- C12N9/2434—Glucanases acting on beta-1,4-glucosidic bonds
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
- C12P19/12—Disaccharides
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Y—ENZYMES
- C12Y302/00—Hydrolases acting on glycosyl compounds, i.e. glycosylases (3.2)
- C12Y302/01—Glycosidases, i.e. enzymes hydrolysing O- and S-glycosyl compounds (3.2.1)
- C12Y302/01132—Chitosanase (3.2.1.132)
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明涉及一种发酵与生物转化原位耦合制备壳寡糖的方法,其特点在于在同一生物反应器中完成微生物发酵和生物转化两个工艺操作,实现壳聚糖酶的发酵制备并原位生物催化生产壳寡糖。本发明方法具有制备壳寡糖高效、产品质量高、节省设备投资、缩减人力成本、车间占地面积小等优点。
Description
技术领域
本发明属于生物技术领域,涉及一种发酵与生物转化原位耦合制备壳寡糖的方法。
背景技术
壳寡糖是壳聚糖经水解后产生的一类聚合度在 2-20且可溶于水的氨基糖类化合物,具有独特的生理活性和优越的功能性质,在食品、农业、医药和化工领域具有重要应用,如可以作为功能性食品添加剂和防腐剂,在农业上作为植物调节剂和生物防治剂,在医药上可以作为抗癌和免疫系统的药物等。壳寡糖可作为植物生长调节剂,能够刺激植物的免疫系统反应,增强植物对病虫害的防御能力,对烟草花叶病毒病、稻瘟病和纹枯病、核盘霉菌病原菌等植物病具有较好的防治作用,还对植物体内多种功能酶具有较好的诱导激活作用,并且可诱导植保素合成,此外壳聚糖对鳞翅目和同翅目等害虫均具有一定的杀虫活性。
壳寡糖的制备方法有酶法、氧化法和酸降解法,其中酶法制备壳寡糖具有反应条件温和、可人为控制降解速率和产物相对分子质量、不产生二次污染等优点。在酶法制备壳寡糖中,具有突出应用前景的是专一性酶(壳聚糖酶)转化法制备,其相对于非专一性酶(如纤维素酶、蛋白酶、脂肪酶、溶菌酶和果胶酶等)来说,具有催化效率高、产物聚合度适中且具有高生理生化活性等突出优点。
在以往的文献报道中,酶法生物转化生产壳寡糖首先是获得生物催化剂,然后采用酶法生物转化制备的两步工艺路线。本发明是在筛选获得一株用于番茄和葡萄根结线虫害防治的淡紫拟青霉(发明专利CN 104818216 A)的基础上,发现该菌株还高产壳聚糖酶,以此优化其培养工艺,在此基础上确立了微生物发酵与酶法生物转化原位耦合制备壳寡糖的工艺技术,该种壳寡糖制备方法相对于传统的发酵与生物转化完全分开两步法来说,具有节省设备投资、车间厂房占地面积小、转化效率高、产品质量稳定等突出优点。
发明内容
本发明针对上述技术存在的不足,提供一种发酵与生物转化原位耦合制备壳寡糖的方法,其特征在于发酵生产壳聚糖酶和酶法生物转化制备壳寡糖的工艺合二为一。以淡紫拟青霉YT08为出发菌株,在其培养前期以壳聚糖酶产量为主,在微生物培养后期以生物转化制备壳寡糖为目的。
所用的淡紫拟青霉菌株具有高产壳聚糖酶的特性,其保藏名称为:YT08,保藏单位:中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号,保藏日期:2014年11月26日,保藏号为CGMCC No.10026,分类命名:淡紫拟青霉(Paecilomyces lilacinus)。
本发明的目的可以通过如下措施来达到:
1. 菌种活化
活化培养基:3~5 g/L蛋白胨,5~10 g/L葡萄糖,0.5~1.5 g/L壳聚糖(90%以上的脱乙酰度),0.5~1 g/L磷酸二氢钾,0.3~0.6 g/L硫酸镁, pH 7.0。500ml三角烧瓶中分装100ml活化培养基,115℃灭菌20min备用。从试管斜面保存菌种中挑取1环接种于活化培养基中,在28℃、200 rpm下培养30 h至菌体浑浊,制得活化种子液。
2. 发酵与生物转化原位耦合制备壳寡糖
采用优选培养基:5~15 g/L甘油,15~25 g/L大豆蛋白胨,1.5~2.5 g/L MnSO4,8~12 g/L粉末壳聚糖(90%以上的脱乙酰度),2.5~3.5 g/L NaCl,0.5~1.5 g/L CaCl2,1.5~2.5 g/L MgSO4,0.6~1.2 g/L FeSO4。在生物发酵罐中,以70%比例装入发酵培养组分,经118℃蒸汽灭菌20min后,火焰圈保护条件下按照0.2~0.5%(v/v)的比例接入活化的菌种,通过调节酸碱蠕动泵控制发酵过程中的pH始终维持在pH 5.5~6.0,利用发酵罐的加热装置调节培养温度在28~32℃,溶解氧参数通过调节进罐的无菌空气量和搅拌转速的大小使其始终维持在5%以上。经发酵培养2 d后,往发酵罐中一次性添加灭菌的壳聚糖(90%以上的脱乙酰度),新增壳聚糖浓度为20~30 g/L,维持溶解氧在10%以上继续培养2d以实现生物转化壳聚糖底物制备壳寡糖。
3. 壳寡糖产品回收与成型
壳寡糖产品回收:发酵与生物转化原位耦合制备的壳寡糖样液,经过滤除菌体和未反应的底物壳聚糖后即可直接作为农业壳寡糖和饲料添加剂使用。
壳寡糖产品成型:经过滤除菌丝体后的壳寡糖样液,添加无水乙醇至终体积分数为 30%以沉淀蛋白,离心去沉淀后的酶解产物溶液经过截留分子量10kDa 的超滤膜过滤,收集膜透过液组分,再补加无水乙醇至终体积分数为75%,以沉淀壳寡糖产品,最后经离心收集沉淀并干燥后即为成型的壳寡糖产品。
为进一步实现本发明的目的,本发明方法中底物壳聚糖添加使用粉末壳聚糖。根据淡紫拟青霉YT08所产壳聚糖酶对壳聚糖底物形式的降解程度不同,以粉末状态催化效率较高,且方便后续产物分离,故所用的壳聚糖为粉末壳聚糖形式。
本发明中壳寡糖的制备方法与现有的制备方法相比,其有益效果在于:
(1)壳寡糖制备高效、产品质量高
采用本发明的制备方法获得的壳寡糖产品,均为高生理活性的壳寡糖产品,聚合度适中,且产品得率高。
(2)发酵与生物转化原位耦合,节省设备等投资
本发明提供发酵与生物转化原位耦合制备壳寡糖的新型工艺,相对现有的酶制剂生产和生物转化完全分开的两步工艺来说,具有节省设备投资、占地面积小、缩减人力用工成本等突出特点,适合工厂化放大生产。
附图说明
图1 为实施例1中酶解产物的薄层层析结果分析,其中标号1为氨基葡萄糖,标号2为酶解产物。
具体实施方式
以下结合具体实施例对本发明做进一步详细描述,这些实施例用于理解而不是限制本发明的保护范围。
实施例1:在10L发酵罐中发酵与生物转化原位耦合制备壳寡糖(1)
活化培养基:3 g/L蛋白胨,5 g/L葡萄糖,0.5 g/L壳聚糖(90%脱乙酰度),磷酸二氢钾0.5,硫酸镁0.3, pH 7.0。500ml三角烧瓶中分装100ml活化培养基,115℃灭菌20min备用。从试管斜面保存菌种中挑取1环接种于活化培养基中,在28℃、200 rpm下培养30 h至菌体浑浊,制得活化种子液。
采用优选培养基:5 g/L甘油,15 g/L大豆蛋白胨,1.5 g/L MnSO4,8 g/L粉末壳聚糖(90%脱乙酰度),2.5 g/L NaCl,0.5 g/L CaCl2,1.5 g/L MgSO4,0.6 g/L FeSO4。在10L生物发酵罐中,以70%比例装入发酵培养组分,经118℃蒸汽灭菌20min后,火焰圈保护条件下按照0.2%(v/v)的比例接入活化的菌种,通过调节酸碱蠕动泵控制发酵过程中的pH始终维持在pH 5.5,利用发酵罐的加热装置调节培养温度在28℃,溶解氧参数通过调节进罐的无菌空气量和搅拌转速的大小使其始终维持在5%以上。经发酵培养2 d后,往发酵罐中一次性添加灭菌的壳聚糖(90%的脱乙酰度),新增壳聚糖浓度为20 g/L,维持溶解氧在10%以上继续培养2d以实现生物转化壳聚糖底物制备壳寡糖。
酶解产物的薄层层析分析见附图1,可以看出所得壳寡糖产品均为聚合度为2以上且8以下的高生理活性的壳寡糖。
经过滤除菌丝体后的壳寡糖样液,添加无水乙醇至终体积分数为 30%以沉淀蛋白,离心去沉淀后的酶解产物溶液经过截留分子量10kDa 的超滤膜过滤,收集膜透过液组分,再补加无水乙醇至终体积分数为75%,以沉淀壳寡糖产品,最后经离心收集沉淀并干燥后即为成型的壳寡糖产品128.18 g,壳寡糖实际产品得率为61.4%。
实施例2:在10L发酵罐中发酵与生物转化原位耦合制备壳寡糖(2)
活化培养基:5 g/L蛋白胨,10 g/L葡萄糖,1.5 g/L壳聚糖(90%脱乙酰度),1 g/L磷酸二氢钾,0.6 g/L硫酸镁, pH 7.0。500ml三角烧瓶中分装100ml活化培养基,115℃灭菌20min备用。从试管斜面保存菌种中挑取1环接种于活化培养基中,在28℃、200 rpm下培养30 h至菌体浑浊,制得活化种子液。
采用优选培养基:15 g/L甘油,25 g/L大豆蛋白胨,2.5 g/L MnSO4,12 g/L粉末壳聚糖(90%以上的脱乙酰度),3.5 g/L NaCl,1.5 g/L CaCl2,2.5 g/L MgSO4,1.2 g/LFeSO4。在生物发酵罐中,以70%比例装入发酵培养组分,经118℃蒸汽灭菌20min后,火焰圈保护条件下按照0.5%(v/v)的比例接入活化的菌种,通过调节酸碱蠕动泵控制发酵过程中的pH始终维持在pH 6.0,利用发酵罐的加热装置调节培养温度在32℃,溶解氧参数通过调节进罐的无菌空气量和搅拌转速的大小使其始终维持在5%以上。经发酵培养2 d后,往发酵罐中一次性添加灭菌的壳聚糖(90%脱乙酰度),新增壳聚糖浓度为30 g/L,维持溶解氧在10%以上继续培养2d以实现生物转化壳聚糖底物制备壳寡糖。
经过滤除菌丝体后的壳寡糖样液,添加无水乙醇至终体积分数为 30%以沉淀蛋白,离心去沉淀后的酶解产物溶液经过截留分子量10kDa 的超滤膜过滤,收集膜透过液组分,再补加无水乙醇至终体积分数为75%,以沉淀壳寡糖产品,最后经离心收集沉淀并干燥后即为成型的壳寡糖产品180.49 g,壳寡糖实际产品得率为65.39%。
实施例3:在50L发酵罐中发酵与生物转化原位耦合制备壳寡糖
活化培养基:4 g/L蛋白胨,8 g/L葡萄糖,1.5 g/L壳聚糖(90%脱乙酰度),0.6 g/L磷酸二氢钾,0.5 g/L硫酸镁, pH 7.0。500ml三角烧瓶中分装100ml活化培养基,115℃灭菌20min备用。从试管斜面保存菌种中挑取1环接种于活化培养基中,在28℃、200 rpm下培养30 h至菌体浑浊,制得活化种子液。
采用优选培养基:12 g/L甘油,25 g/L大豆蛋白胨,1.5 g/L MnSO4,12 g/L粉末壳聚糖(90%以上的脱乙酰度),3 g/L NaCl,1 g/L CaCl2,2 g/L MgSO4,1 g/L FeSO4。在生物发酵罐中,以70%比例装入发酵培养组分,经118℃蒸汽灭菌20min后,火焰圈保护条件下按照0.5%(v/v)的比例接入活化的菌种,通过调节酸碱蠕动泵控制发酵过程中的pH始终维持在pH 6.0,利用发酵罐的加热装置调节培养温度在32℃,溶解氧参数通过调节进罐的无菌空气量和搅拌转速的大小使其始终维持在5%以上。经发酵培养2 d后,往发酵罐中一次性添加灭菌的壳聚糖(90%脱乙酰度),新增壳聚糖浓度为25 g/L,维持溶解氧在10%以上继续培养2d以实现生物转化壳聚糖底物制备壳寡糖。
经过滤除菌丝体后的壳寡糖样液,添加无水乙醇至终体积分数为 30%以沉淀蛋白,离心去沉淀后的酶解产物溶液经过截留分子量10kDa 的超滤膜过滤,收集膜透过液组分,再补加无水乙醇至终体积分数为75%,以沉淀壳寡糖产品,最后经离心收集沉淀并干燥后即为成型的壳寡糖产品172.8 g,壳寡糖实际产品得率为67.72%。
实施例4:在300L发酵罐中发酵与生物转化原位耦合制备壳寡糖
活化培养基:3 g/L蛋白胨,7 g/L葡萄糖,1 g/L壳聚糖(90%脱乙酰度),0.6 g/L磷酸二氢钾,0.4 g/L硫酸镁, pH 7.0。500ml三角烧瓶中分装100ml活化培养基,115℃灭菌20min备用。从试管斜面保存菌种中挑取1环接种于活化培养基中,在28℃、200 rpm下培养30 h至菌体浑浊,制得活化种子液。
采用优选培养基:10 g/L甘油,20 g/L大豆蛋白胨,1.5 g/L MnSO4,10 g/L粉末壳聚糖(95%脱乙酰度),2.5 g/L NaCl,1 g/L CaCl2,2 g/L MgSO4,0.6 g/L FeSO4。在生物发酵罐中,以70%比例装入发酵培养组分,经118℃蒸汽灭菌20min后,火焰圈保护条件下按照0.5%(v/v)的比例接入活化的菌种,通过调节酸碱蠕动泵控制发酵过程中的pH始终维持在pH 6.0,利用发酵罐的加热装置调节培养温度在30℃,溶解氧参数通过调节进罐的无菌空气量和搅拌转速的大小使其始终维持在5%以上。经发酵培养2 d后,往发酵罐中一次性添加灭菌的壳聚糖(95%脱乙酰度),新增壳聚糖浓度为30 g/L,维持溶解氧在10%以上继续培养2d以实现生物转化壳聚糖底物制备壳寡糖。
经过滤除菌丝体后的壳寡糖样液,添加无水乙醇至终体积分数为 30%以沉淀蛋白,离心去沉淀后的酶解产物溶液经过截留分子量10kDa 的超滤膜过滤,收集膜透过液组分,再补加无水乙醇至终体积分数为75%,以沉淀壳寡糖产品,最后经离心收集沉淀并干燥后即为成型的壳寡糖产品188.02 g,壳寡糖实际产品得率为66.15%。
Claims (2)
1.一种发酵与生物转化原位耦合制备壳寡糖的方法,其特征在于发酵生产壳聚糖酶和酶法生物转化制备壳寡糖的工艺合二为一,包括如下步骤:
(1)菌种活化:试管斜面保存菌种转接活化培养基中,在28℃、200 rpm下培养30 h至菌体浑浊,制得活化种子液;所述的活化培养基:3~5 g/L蛋白胨,5~10 g/L葡萄糖,0.5~1.5 g/L壳聚糖(90%以上的脱乙酰度),0.5~1 g/L磷酸二氢钾,0.3~0.6 g/L硫酸镁, pH7.0;
(2)发酵与生物转化原位耦合制备壳寡糖:在生物发酵罐中,以70%比例装入发酵培养组分,经118℃蒸汽灭菌20min后,按照0.2~0.5%(v/v)的比例接入活化的菌种,发酵过程中的pH维持在pH 5.5~6.0,培养温度在28~32℃,溶解氧维持在5%以上;经发酵培养2 d后,往发酵罐中一次性添加灭菌的壳聚糖(90%以上的脱乙酰度),新增壳聚糖浓度为20~30 g/L,维持溶解氧在10%以上继续培养2d以实现生物转化壳聚糖底物制备壳寡糖;采用优选培养基:5~15 g/L甘油,15~25 g/L大豆蛋白胨,1.5~2.5 g/L MnSO4,8~12 g/L粉末壳聚糖(90%以上的脱乙酰度),2.5~3.5 g/L NaCl,0.5~1.5 g/L CaCl2,1.5~2.5 g/L MgSO4,0.6~1.2 g/L FeSO4;
(3)壳寡糖产品回收与成型:发酵与生物转化原位耦合制备的壳寡糖样液,经过滤除菌体和未反应的底物壳聚糖后即可直接作为农业壳寡糖和饲料添加剂使用;经过滤除菌丝体后的壳寡糖样液,添加无水乙醇至终体积分数为 30%以沉淀蛋白,离心去沉淀后的酶解产物溶液经过截留分子量10kDa 的超滤膜过滤,收集膜透过液组分,再补加无水乙醇至终体积分数为75%,以沉淀壳寡糖产品,最后经离心收集沉淀并干燥后即为成型的壳寡糖产品。
2.如权利要求1所述的发酵与生物转化原位耦合制备壳寡糖的方法,其特征在于所用的壳聚糖为粉末壳聚糖形式,其脱乙酰度在90%以上。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201611112038.3A CN106834253A (zh) | 2016-12-07 | 2016-12-07 | 一种发酵与生物转化原位耦合制备壳寡糖的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201611112038.3A CN106834253A (zh) | 2016-12-07 | 2016-12-07 | 一种发酵与生物转化原位耦合制备壳寡糖的方法 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN106834253A true CN106834253A (zh) | 2017-06-13 |
Family
ID=59146280
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201611112038.3A Pending CN106834253A (zh) | 2016-12-07 | 2016-12-07 | 一种发酵与生物转化原位耦合制备壳寡糖的方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN106834253A (zh) |
Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1680569A (zh) * | 2005-01-11 | 2005-10-12 | 苏理 | 一种利用腐皮镰孢菌生产壳寡糖的方法 |
CN102851239A (zh) * | 2012-08-22 | 2013-01-02 | 黄河三角洲京博化工研究院有限公司 | 一株壳聚糖酶生产菌株及应用该菌株生产壳寡糖的方法 |
CN104744608A (zh) * | 2013-12-25 | 2015-07-01 | 殷国铭 | 一种将壳聚糖制备成水溶性壳寡糖的方法 |
CN104911125A (zh) * | 2015-05-28 | 2015-09-16 | 威海斯瑞海洋生物科技有限公司 | 一种壳聚糖酶生产菌及其应用 |
CN105671024A (zh) * | 2016-04-21 | 2016-06-15 | 鲁东大学 | 一种利用淡紫拟青霉yt08生产壳聚糖酶的方法 |
CN105820966A (zh) * | 2015-12-10 | 2016-08-03 | 领先生物农业股份有限公司 | 一株高效壳聚糖酶产生菌及其发酵方法 |
-
2016
- 2016-12-07 CN CN201611112038.3A patent/CN106834253A/zh active Pending
Patent Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1680569A (zh) * | 2005-01-11 | 2005-10-12 | 苏理 | 一种利用腐皮镰孢菌生产壳寡糖的方法 |
CN102851239A (zh) * | 2012-08-22 | 2013-01-02 | 黄河三角洲京博化工研究院有限公司 | 一株壳聚糖酶生产菌株及应用该菌株生产壳寡糖的方法 |
CN104744608A (zh) * | 2013-12-25 | 2015-07-01 | 殷国铭 | 一种将壳聚糖制备成水溶性壳寡糖的方法 |
CN104911125A (zh) * | 2015-05-28 | 2015-09-16 | 威海斯瑞海洋生物科技有限公司 | 一种壳聚糖酶生产菌及其应用 |
CN105820966A (zh) * | 2015-12-10 | 2016-08-03 | 领先生物农业股份有限公司 | 一株高效壳聚糖酶产生菌及其发酵方法 |
CN105671024A (zh) * | 2016-04-21 | 2016-06-15 | 鲁东大学 | 一种利用淡紫拟青霉yt08生产壳聚糖酶的方法 |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
张璐: "发酵法生产壳寡糖菌种的选育及发酵工艺条件优化", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库》 * |
王宏广主编: "《2005中国生物技术发展报告》", 30 December 2006 * |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN100432212C (zh) | 灰树花菌株、培养方法及其应用 | |
CN101215592B (zh) | 生产普鲁兰多糖的发酵方法 | |
CN101831481B (zh) | 一种新的伊枯草菌素a及其同系物的制备方法 | |
CN104450561B (zh) | 一株产甲壳素酶菌株及其利用蟹壳发酵产甲壳素酶的应用 | |
CN104805143B (zh) | 一种制备低分子量γ‑聚谷氨酸的方法 | |
CN104845896B (zh) | 生产威兰胶的菌株及方法 | |
CN104988077B (zh) | 一种产高温纤维素酶及木聚糖酶的微细正青霉及应用 | |
Wan et al. | Exopolysaccharide production by Ganoderma lucidum immobilised on polyurethane foam in a repeated-batch fermentation | |
CN103882080A (zh) | 一种制备阿维菌素的有效方法 | |
CN102080113A (zh) | 使用米糠麸皮复合原料和灰树花诱变菌株生产多糖的方法 | |
CN104745656A (zh) | 一种利用热凝胶发酵液直接生产β-1,3-葡寡糖的方法 | |
CN106754411A (zh) | 一株高产β‑D‑呋喃果糖苷酶的黑曲霉菌株及其液态发酵产酶方法 | |
CN1752202A (zh) | 一种黑曲霉真菌及其在普洱茶生产中的应用 | |
CN102634470B (zh) | 一种纤维化纤维微细菌及渗透发酵生产海藻糖的方法 | |
CN104630167A (zh) | 海洋微生物发酵生产低温葡萄糖氧化酶的方法 | |
CN102127515B (zh) | 一株高产l-脯氨酸短波单胞杆菌(jnpp-1)的筛选及应用 | |
CN110317734A (zh) | 一种高产糖化酶、酯化酶和蛋白酶的红曲霉及其分离培养方法和应用 | |
CN103710291B (zh) | 一株巨大芽孢杆菌z2013513及其生产苯基乳酸的方法 | |
CN101475974B (zh) | 一种培养基及用该培养基发酵生产腺苷的方法 | |
CN103374537A (zh) | 一种制备恩拉霉素的方法及其生产菌株 | |
CN100529055C (zh) | 一种产碱杆菌及其在制备威兰胶中的应用 | |
CN102093990A (zh) | 微生物发酵生产低温淀粉酶的方法 | |
CN106754486A (zh) | 一株高产海藻糖合酶的假单胞菌及其发酵产酶方法 | |
CN109536558B (zh) | 制备β-胡萝卜素的方法 | |
CN1683520A (zh) | 一株产复合酶的菌株及用该菌株发酵生产复合酶的方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20170613 |