CN106806900B - 基于10-羟基喜树碱的pH响应释放药物的制剂及制备方法和应用 - Google Patents

基于10-羟基喜树碱的pH响应释放药物的制剂及制备方法和应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种基于10‑羟基喜树碱的pH响应释放药物的制剂及制备方法和应用，该制剂为10‑羟基喜树碱的缀合物通过化学键连接在金纳米颗粒上形成的制剂。基于该制剂可得到一个基于肿瘤微环境的pH响应释放药物的的化疗联合光疗肿瘤靶向药物输送系统，该给药系统具有载药量高、不泄露、靶向性好、可控释放、生物相容性好的优点，实现了化疗与光疗协同治疗肿瘤。

Description

基于10-羟基喜树碱的pH响应释放药物的制剂及制备方法和 应用
技术领域
本发明涉及化学制药技术领域，尤其是涉及一种基于10-羟基喜树碱的pH响应释放药物的制剂及制备方法和应用。
背景技术
10-羟基喜树碱(10-Hydroxycamptothecine,10-HCPT)是珙桐科旱莲属落叶植物喜树果实与叶中提取的一种具显著抗癌活性的喜树碱类生物碱，也可由喜树碱合成而得。其抗癌作用相当于喜树碱的30倍。10-HCPT对胰腺癌、前列腺癌、膀胱癌、口腔鳞癌、大肠癌、胃癌、肝癌、非小细胞肺癌等具有明显疗效。对口腔、颈面部癌、头颈部癌、头颈部圆柱型腺癌及皮肤癌也有较好疗效；对恶性葡萄胎，绒毛膜上皮癌、肺癌、急慢性粒细胞、白血病，银屑病，及血吸虫病引起的肝脾肿大等也具有一定的疗效。与其他常用的抗癌药无交叉耐药。10-HCPT的不良反应主要是消化道反应，表现为恶心、呕吐和迟发性腹泻，少数心律失常和血尿，停药后均可缓解。
10-羟基喜树碱的分子结构是由一个吡咯喹啉环，一个共轭吡啶环和一个六元α羟基基内酯环(环E)组成，分子式C20H16N2o5，摩尔质量364.357，是黄色棱柱状一水合物结晶，熔点268～270℃，微溶于少数有机溶剂，不溶于水，在稀碱溶液中变成开环羧酸盐形式溶解，溶液具有蓝色荧光。闭环结构油水分配系数分别为LogP1.06(正辛醇/蒸馏水)与1.28(正辛醇/pH5.0的磷酸盐缓冲液)，亲脂性稍强。10-HCPT不具有明显的生物碱性质，近中性，不溶于酸，与酸不成盐；难溶于水及一般有机溶剂，可溶于吡啶、二甲基亚枫、醋酸和氯仿与甲醇的混合液，溶液有明显的蓝色荧光。对光、热敏感。光照射喜树碱溶液，其吸光度降低，光越强，吸光度下降越多，避光则十分稳定。加热可使喜树碱分解。国内外学者对喜树碱进行结构修饰，合成了大量的活性衍生物，其中一部分己经投入临床应用。
目前癌症治疗主要集中在手术治疗、放射治疗和化学药物治疗。手术治疗很难去除体内所有的癌细胞，化学治疗和放射治疗会给正常的组织带来不良反应，且容易诱发抗药性，治疗效果局限。研究发现，单一机制的智能药物输送系统或靶向药物输送系统给药，还不能满足癌症的治疗需求，环境响应的多功能靶向药物输送系统，可进一步增效减毒。将两种或两种以上治疗手段联合应用是未来诊断和治疗的发展趋势。随着纳米材料和纳米科技的发展，用光敏性纳米颗粒携带药物进行治疗成为了目前药物递送的研究热点。随着纳米材料和纳米科技的发展，肿瘤光热治疗得到了快速的发展。肿瘤光热治疗主要采用对具有强的组织穿透能力的近红外光吸收有能力的物质，在激光的照射下产生热量，有选择性地杀死肿瘤细胞，不对正常的组织造成明显不良作用。热疗同化疗、放疗相比副作用较少，但是传统的热疗仍存在加热效率低，热场分布不均匀而且易损伤正常组织等缺点，需革新加以突破。临床研究表明，热疗-化疗联合治疗可以明显增强化疗效果，主要因为热疗在杀死癌细胞的同时，还有助于化疗药物进入肿瘤组织和增加化疗药物的细胞毒。传统热疗-化疗联合治疗技术很难起到理想效果，主要受限于化疗药物和热疗制剂很难同时到达肿瘤部位，共同发挥功效。
近年来纳米技术的迅猛发展，纳米材料由于其纳米尺度所固有的独特性质，在肿瘤治疗方面起到积极、重要的作用。因此，以纳米材料为载体的热疗-化疗联合治疗研究成为热点。
发明内容
本发明的目的在于提供一种基于10-羟基喜树碱的pH响应释放药物的制剂，基于该制剂可得到一个基于肿瘤微环境的pH响应的化疗联合光疗肿瘤靶向药物输送系统，改给药系统具有载药量高、不泄露、靶向性好、可控释放、生物相容性好的优点，实现了化疗与光疗协同治疗肿瘤。
本发明的另一个目的是提供上述的基于10-羟基喜树碱的pH响应释放药物的制剂的制备方法及应用。
为解决上述技术问题，本发明采用如下技术方案：
一种基于10-羟基喜树碱的pH响应释放药物的制剂，该制剂为10-羟基喜树碱的缀合物通过化学键连接在纳米颗粒上形成所述制剂。
优选地，所述10-羟基喜树碱的缀合物为经过修饰的10-羟基喜树碱与聚乙二醇的缀合物。
优选地，所述经过修饰的10-羟基喜树碱为对10-羟基喜树碱的10位羟基进行酯化，接入一个带有酮羰基的短链，再接入一个腙键。
优选地，所述缀合物为将经过修饰的10-羟基喜树碱与聚乙二醇分子链接得到。
优选地，其特征在于，所述缀合物具有式(1)所示的结构，
Figure BDA0001219464120000031
式(1)中，n为正整数；优选n为10-35的正整数。
优选地，所述n为22。
优选地，所述纳米颗粒为金属纳米颗粒。
优选地，所述金属纳米颗粒为金纳米颗粒。
上述的基于10-羟基喜树碱的pH响应释放药物的制剂的制备方法，该方法包括如下步骤：
(1)合成10-羟基喜树碱的缀合物，
所述缀合物的合成路径如下：
Figure BDA0001219464120000041
(2)制备金纳米胶体；
(3)将10-羟基喜树碱的缀合物与金纳米胶体混合放置，通过配体交换法键合到金纳米颗粒的表面，制得所述基于10-羟基喜树碱的pH响应释放药物的制剂。
上述制剂在化疗联合光疗肿瘤靶向药物输送系统中的应用。
本发明的有益效果如下：
本发明的基于10-羟基喜树碱的pH响应释放药物的制剂了提供一种基于肿瘤微环境的pH响应的化疗联合光疗肿瘤靶向药物输送系统。该系统利用肿瘤组织EPR效应被动靶向至肿瘤。所载的药物为羟基喜树碱通过pH敏感的腙键链接PEG形成的大分子缀合物(化合物F)，该缀合物水溶性好，并具有体内长循环作用。将10-HCPT-Hyd-PEG通过化学键连接在金纳米粒上形成10-HCPT-Hyd-PEG@AuNPs。给药后可通过胞吞作用进入细胞，由于肿瘤组织和的细胞内溶酶体的酸性环境，羟基喜树碱与PEG之间的酸敏感腙键断裂，药物释放出来，发挥抗肿瘤作用。同时对其进行近红外激光照射，纳米金的表面等离子体震荡效应，将光能转化为热能，局部温度升高，进一步杀灭肿瘤细胞。没有进行近红外激光照射的正常组织不被破坏。该给药系统具有载药量高、不泄露、靶向性好、可控释放、生物相容性好的优点，实现了化疗与光疗协同治疗肿瘤。
附图说明
图1为pH响应性化疗联合光疗金纳米载药体系示意图；
图2为化合物F的核磁共振氢谱图；
图3为化合物F的核磁共振碳谱图；
图4为PEG2000的质谱图；
图5为化合物F的质谱图；
图6a为金纳米颗粒形貌；
图6b为金纳米粒的透射电子显微图；
图7为金纳米粒的尺寸分布图；
图8为不同介质中药物的释放；
图9为金纳米粒近红外光照射后升温效果图；
图10为金纳米粒近红外光照射后升温曲线图；
图11为纳米荧光显微镜观察MCF-7细胞摄取载药金纳米粒；
图12a为10-HCPT注射液在不同组织中的药时曲线；
图12b为化合物F在不同组织中的药时曲线；
图13a为荷瘤裸鼠的光疗过程0时刻；
图13b为荷瘤裸鼠光疗5分钟后；
图13c为荷瘤裸鼠光疗10分钟后；
图13d为荷瘤裸鼠光疗15分钟后；
图14为不同制剂组荷瘤裸鼠给药14天后肿瘤生长曲线；
图15为不同制剂组荷瘤裸鼠给药14天后肿瘤大小；
图16为不同制剂组荷瘤裸鼠给药14天后肿瘤生长抑制率柱形图；
图17A为生理盐水组肿瘤组织H&E染色切片图；
图17B为10-HCPT(5mg/kg)组肿瘤组织H&E染色切片图；
图17C为10-HCPT-hyd-PEG(5mg/kg)组肿瘤组织H&E染色切片图；
图17D为空白金纳米粒组肿瘤组织H&E染色切片图；
图17E为10-HCPT-hyd-PEG@AuNPs(5mg/kg)组肿瘤组织H&E染色切片图；
图18为不同给药组荷瘤裸鼠体重降低曲线。
具体实施方式
下面将结合附图对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
研究发现，单一机制的智能药物输送系统还不能满足癌症的治疗需求。将两种或两种以上治疗手段联合应用是肿瘤治疗的发展趋势。纳米金具有表面效应和量子效应，具有生物活性和光热效应，可作药物载体，集成像，载药和光热治疗于一体。已在生物检测、成像和治疗中得到应用。可减少剂量、提高药物靶向性、控释药物、提高药物的膜穿透性等。
本发明的发明人则基于10-羟基喜树碱的缀合物和纳米金颗粒发明了一个基于肿瘤微环境的pH响应的化疗联合光疗肿瘤靶向药物输送系统。该系统利用肿瘤组织EPR效应被动靶向至肿瘤。所载的药物为羟基喜树碱通过pH敏感的腙键链接PEG形成的大分子缀合物10-HCPT-Hyd-PEG，该缀合物水溶性好，并具有长循环作用。将10-HCPT-Hyd-PEG通过某种方法连接在金纳米粒上形成10-HCPT-Hyd-PEG@AuNPs。给药后可通过胞吞作用进入细胞，由于肿瘤组织和的细胞内溶酶体的酸性环境，羟基喜树碱与PEG之间的酸敏感腙键断裂，药物释放出来，发挥抗肿瘤作用。同时对其进行近红外激光照射，纳米金的表面等离子体震荡效应，将光能转化为热能，局部温度升高，进一步杀灭肿瘤细胞。没有进行近红外激光照射的正常组织不被破坏。该给药系统具有载药量高、不泄露、靶向性好、可控释放、生物相容性好的优点，实现了化疗与光疗协同治疗肿瘤。如图1所示，图1为pH响应性化疗联合光疗金纳米载药体系示意图。
实施例1
10-羟基喜树碱的缀合物的制备
10-羟基喜树碱的缀合物路径如下：
Figure BDA0001219464120000071
10-羟基喜树碱的缀合物的制备方法包括如下步骤：
(1)化合物B的合成
将compound A(1.00g，2.7mmol)和5-羰基己酸(1.07g，8.1mmol)溶解于10mL吡啶中，于室温下加入EDCI(2.06g,10.8mmol)，搅拌3h，薄层色谱法监测反应。向反应体系中加入50mL二氯甲烷和50mL水，搅拌反应30分钟后，分出有机层，减压干燥浓缩得到的残渣用硅胶柱进行纯化，用二氯甲烷:甲醇10:1洗脱，得到黄色的固体化合物(1.25g,96％)。
(2)化合物C的合成
室温下将化合物B(377mg,2.1mmol)溶解于100ml无水二氯甲烷中[2]。将氨基硫脲溶解于50ml无水甲醇中，混合二者，50℃搅拌反应24h，降温至室温，得到白色沉淀，依次用100ml无水二氯甲烷和100ml无水甲醇洗涤，减压干燥得到白色干燥固体粉末即化合物C；
(3)化合物E的合成
室温下将线型MeO-PEG2000-COOH溶解于2ml无水N,N-二甲基甲酰胺中，加入100ml无水二氯甲烷，加入5ml氯化亚砜，氮气保护下，50℃搅拌反应5h。减压除去氯化亚砜，得到淡黄色油状液体即化合物E，充入氮气，保存于4℃；
(4)化合物F的合成
将化合物E(205mg,0.1mmol)溶解于50ml无水N,N-二甲基甲酰胺中，0℃冰浴条件下逐滴加入化合物C(55mg,0.1mmol)，充氮气进行保护，加入适量碳酸钾将体系的pH值维持在碱性状态。冰浴条件下搅拌反应3h，减压除去溶剂，浓缩体系，使用分子排阻色谱柱(Sephadex LH-20)纯化产物。重力法装柱3.0×20cm。将浓缩后的反应体系室温下加入到柱上，每次1ml,用二氯甲烷:甲醇1:1溶液洗脱，每5ml洗脱液收集一管，薄层色谱监测洗脱物，收集纯化合物F的洗脱液，减压浓缩。产物用二氯甲烷:甲醇1:1溶液洗涤，室温减压干燥过夜。
化合物F采用1H NMR(BRUKER,400MHz)，13C NMR和基质辅助飞行时间质谱(MALDITOF)鉴定结构，线性正离子模式，15mV(sum＝850mv)，数据结果采用Kratos PCAxima CFR plus V 2.4.1.软件进行分析。
1H NMR谱图和13C NMR谱图用氘代二甲基亚砜(DMSO-d6)做溶剂。以下为核磁信号结果:
1H NMR(Bruker，400MHz).δ0.89CH3(t)，δ1.87CH2(m)，δ1.95CH3(s)，δ2.37CH2(t)，δ2.42CH3(s)，δ2.70CH2(t)，δ3.23CH2(s)，δ3.43CH2(t)，δ3.50(CH2CH2)45(s)，δ3.68OH(s)，δ4.11CH2(t),δ5.30CH2(s)，δ5.44CH2(s)，δ6.54CH(s)，δ7.35CH(s)，δ7.55NH(s)，δ7.67CH(dd)，δ7.90CH(d)，δ8.13NH(s)，δ8.21CH(d)。
13C NMR(Bruker,100MHz)＝8.2,17.0,21.1,29.1,29.2,30.7,33.3,37.7,58.5,63.8,65.7,68.7,70.0,70.2,71.7,72.8,97.1,119.6,119.8,126.6,128.8,130.9,131.7,145.8,149.5,150.5,153.9,157.3,172.2,172.9,173.8,174.0.
MALDI-TOF法为高分子分子量测定的有效方法[6]。未反应的PEG(MW 2065)测定值与理论值相差一个道尔顿，终产物化合物F的分子量测定结果在单质谱峰中均与理论值相差一个道尔顿。表明化合物F成功合成。而且没有发现其他分子量的PEG产物和未反应完全参与的PEG。化合物F的产率为32.4％。
图2为化合物F的核磁共振氢谱图；图3为化合物F的核磁共振碳谱图；图4为PEG2000的质谱图；图5为化合物F的质谱图。
实施例2
基于10-羟基喜树碱的pH响应的制剂的制备
(1)类球形金纳米颗粒的制备
将所用的玻璃仪器用王水浸泡，取出后用超纯水清洗干净，烘干。1％HAuCl4水溶液加入10倍量超纯水，加热搅拌，回流。加入三倍量1％柠檬酸钠水溶液，继续回流，搅拌，观察颜色由灰色变为紫色最后变为酒红色且不再变化，再回流十分钟。撤去热源，搅拌冷却到室温，取出金溶胶溶液避光保存于4℃。采用紫外可见吸收光谱、荧光光谱、HRTEM、FTIR等技术对金纳米颗粒进行表征。结果表明空白金纳米溶胶表面呈弱的负电性，外观呈酒红色，稳定性好，室温放置1个月粒径、电位等各项指标没有明显变化，经近红外激光808nm照射后升温效果明显，2分钟内可升温至45℃左右。最大紫外吸收波长520nm。
(2)将实施例1制备的10-羟基喜树碱的缀合物与步骤(1)制备的金纳米粒混合放置48h，通过配体交换法，10-羟基喜树碱的缀合物键合到纳米金颗粒的表面，制备得到基于10-羟基喜树碱的pH响应的制剂(10-HCPT-Hyd-PEG@AuNPs)，即一个集化疗与光疗于一体的抗肿瘤药物传递系统。
实施例3
载药金纳米粒(10-HCPT-Hyd-PEG@AuNPs)的性质测定
采用HRTEM、FTIR等技术对复合物进行表征。HPLC法、透析法、等方法测定载药量、体外各pH条件下的药物释放及激光照射后药物的释放指标。发现在中性条件下10-HCPT-Hyd-PEG@AuNPs稳定，但在酸性(pH 6.0以下)溶液中腙键断裂，药物迅速释放，具有显著地pH响应特性。10-HCPT-Hyd-PEG@AuNPs载药量可以达到要求并且稳定性好，近红外激光808nm照射后升温速度不受影响。
图6a为金纳米颗粒的形貌，图6b为金纳米粒的透射电子显微图；图7为金纳米粒的尺寸分布图；图8为37℃不同pH值PBS中和血浆中的药物释放；图9为金纳米粒近红外光照射后升温效果图；图10为金纳米粒近红外光照射后升温曲线图，表明金纳米粒的光热转化效率较高，短时间内可达到较高温度。
利用纳米荧光显微镜观察细胞摄取载药颗粒的过程，结果如图11所示，图11为37℃下纳米荧光显微镜观察MCF-7细胞摄取载药金纳米粒0小时，1小时，2小时和4小时的照片，结果表明细胞摄取10-HCPT-Hyd-PEG@AuNPs的速度较快，纳米荧光显微镜观察到载药的金纳米颗粒给药30分钟后细胞内即出现金黄色荧光，随时间延长，荧光逐渐增强并可维持8小时以上。表明金纳米载体可通过细胞内吞途径快速进入细胞，有助于药物更大量快速地进入细胞核，发挥疗效，采用MTT法检测其对MCF-7、HepG2、SW180细胞的毒性，结果如表1所示；近红外激光照射后，10-HCPT-Hyd-PEG@AuNP制剂组对三株肿瘤细胞的毒性、细胞凋亡率均显著提高。参比对照制剂经激光照射后没有明显变化。
表1 MTT法测定各制剂组体外细胞毒性
Figure BDA0001219464120000111
用MCF-7细胞建立腋下荷瘤裸小鼠动物模型，进行体内药动学和组织分布靶向性研究，结果如表2，表3，表4所示，及图12a，图12b所示，结果表明10-HCPT-Hyd-PEG@AuNPs在荷瘤裸小鼠体内的循环时间显著高于游离10-HCPT，这有利于提高药物可逆性地与拓扑异构酶Ⅰ结合的机率，而提高药效。肿瘤内、肝脏和肺部10-HCPT药物量大小顺序为：
10-HCPT-Hyd-PEG@AuNPs>10-HCPT注射液。结果表明10-HCPT-Hyd-PEG@AuNPs对肿瘤、肝脏和肺脏具有更好的靶向性。在心
脏和肾脏内药物分布由小到大顺序为：10-HCPT-Hyd-PEG@AuNPs<10-HCPT。表明金纳米载体制剂有利于降低10-HCPT的心脏和肾脏毒性。
表2 血浆中10-HCPT非房室模型统计矩参数
Figure BDA0001219464120000121
表3-各组织中10-HCPT非房室模型统计矩参数
Figure BDA0001219464120000122
Figure BDA0001219464120000131
表4 各组织中10-HCPT-hydro-PEG@AuNPs非房室模型统计矩参数
Figure BDA0001219464120000132
a药时曲线下面积；
b平均滞留时间；
c 10-HCPT注射液剂量:5.0mg/kg；
*p<0.05与10-HCPT注射液组相比；
**P<0.01与10-HCPT注射液组相比。
图12a为10-HCPT注射液在不同组织中的药时曲线，说明了10-HCPT在大鼠体内药物浓度随时间的变化情况；图12b为化合物F在不同组织中的药时曲线，说明了化合物F在大鼠体内药物浓度随时间的变化情况。
测定肿瘤各给药10-HCPT-Hyd-PEG组、10-HCPT-Hyd-PEG@AuNPs、10-HCPT组、空白AuNPs和生理盐水对照组14天，同时每日近红外激光照射一定时间后肿瘤的生长情况。结果各组制剂的肿瘤抑制效果由强至弱顺序为：
10-HCPT-Hyd-PEG@AuNPs>10-HCPT-Hyd-PEG>10-HCPT>AuNPs。
10-HCPT-Hyd-PEG@AuNPs组经近红外激光照射后抗肿瘤效果较10-HCPT组大幅提高。抑瘤率显著提升。较大比例的荷瘤裸小鼠肿瘤消失。结果表明光疗联合化疗较单纯化疗效果有显著的提升。
图13a至图13d为荷瘤裸鼠的光疗过程，表明了荷瘤裸鼠在808nm近红外激光照射下肿瘤部位不同时间的升温情况，表明了制剂的光热转换效率较好，能在短时间内，将近红外激光的光能转换为热能，在肿瘤部位产生较好的热疗效果。
图14为不同制剂组荷瘤裸鼠给药14天后肿瘤生长的体积随时间的变化曲线，表明载药金纳米粒组经过近红外激光照射后肿瘤的生长速度显著降低，该制剂组的肿瘤抑制效果最好。
图15为不同制剂组荷瘤裸鼠给药14天后各制剂组肿瘤剥离后的体积大小，表明载药金纳米粒组经过近红外激光照射后肿瘤的生长显著被抑制，该制剂组的肿瘤有4只裸鼠肿瘤消失，2只肿瘤体积有所缩小，该方法治疗肿瘤获得了最好的疗效。
图16为不同制剂组荷瘤裸鼠给药14天后肿瘤生长抑制率柱形图，a:10-HCPT组；b:10-HCPT-hyd-PEG组；c:AuNPs组；d:HCPT-hyd-PEG@AuNPs组表明载药金纳米粒组经过近红外激光照射后获得了最高的肿瘤生长抑制率，该方法治疗肿瘤疗效最好。
通过分析各制剂组给药后实验动物各器官组织病理切片，实验动物体重降低，分析各给药系统的毒性。结果表明毒性的大小顺序为AuNPs<10-HCPT-Hyd-PEG@AuNPs<10-HCPT-Hyd-PEG<10-HCPT。制剂的初步毒性研究显示：金纳米载体制剂生物相容性好，毒性更低，对动物的正常体重无影响。
图17A为生理盐水组肿瘤组织H&E染色切片图；图17B为10-HCPT(5mg/kg)组肿瘤组织H&E染色切片图；图17C为10-HCPT-hyd-PEG(5mg/kg)组肿瘤组织H&E染色切片图；图17D为空白金纳米粒组肿瘤组织H&E染色切片图；图17E为10-HCPT-hyd-PEG@AuNPs(5mg/kg)组肿瘤组织H&E染色切片图，从各制剂组给药14天后肿瘤组织的H&E染色切片可见，生理盐水组肿瘤组织细胞核大量聚集，形态不规则，呈结节状，细胞核染色质增多且分布不均，核深染，颗粒变粗，呈墨水滴样，出现大片坏死细胞碎片。10-HCPT组肿瘤组织特征典型，核大深染，呈结节状，也看到有少量坏死细胞碎片，10-HCPT-hyd-PEG组肿瘤组织特征典型，坏死较少，相比于10-HCPT组和10-HCPT-hyd-PEG组，金纳米粒光疗组和载药金纳米粒联合光疗制剂组表现出更强的肿瘤生长抑制效应，后者则表现出最强的肿瘤治疗效果。
图18为不同给药组荷瘤裸鼠体重降低曲线，生理盐水组裸鼠体重起初变化不大，后期下降迅速，分析可能由于肿瘤的生长，裸鼠的生命状态逐渐恶劣，肿瘤汲取了大量养分，导致裸鼠迅速消瘦。10-HCPT组较生理盐水组体重下降缓慢。分析可能由于药物的治疗作用，肿瘤得到一定程度的遏制，裸鼠获取的养分可维持体重，但是由于药物的毒副作用尤其胃肠道的副反应，体重仍然呈下降趋势。聚合物前药给药系统较10-HCPT组下降更为缓慢，可能由于疗效的提高，肿瘤的生长得到更好程度的遏制，裸鼠生命状态较好，体重有所增加。空白金纳米制剂光疗组裸鼠体重缓慢上升，载药金纳米粒组体重上升最快，分析可能是光疗和光疗联合化疗治疗后，肿瘤得到了更好的控制，后者基本消失了，裸鼠的生长状况良好，体重逐渐增加。说明10-HCPT在抗肿瘤治疗过程中具有一定的毒副作用。HCPT-hydro-PEG相比于10-HCPT市售制剂，在一定程度上减少了毒副作用。光疗抗皮下肿瘤的效果较好且毒副作用低。光疗联合化疗治疗的效果很好，且毒副作用很低。
最后应说明的是：以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围。

Claims (4)

1.一种基于10-羟基喜树碱的pH响应释放药物的制剂，其特征在于，该制剂为10-羟基喜树碱的缀合物通过化学键连接在纳米颗粒上形成所述制剂；
所述缀合物具有式(1)所示的结构，
Figure FDA0002384506590000011
式(1)中，n为正整数；所述纳米颗粒为金纳米颗粒。
2.根据权利要求1所述的制剂，其特征在于，n为10-35的正整数。
3.根据权利要求2所述的制剂，其特征在于，所述n为22。
4.如权利要求3所述的基于10-羟基喜树碱的pH响应释放药物的制剂的制备方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：
(1)合成10-羟基喜树碱的缀合物，
所述缀合物的合成路径如下：
Figure FDA0002384506590000021
(2)制备金纳米胶体；
(3)将10-羟基喜树碱的缀合物与金纳米胶体混合放置，通过配体交换法键合到金纳米颗粒的表面，制得所述基于10-羟基喜树碱的pH响应释放药物的制剂。
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Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101530619A (zh) * 2009-04-16 2009-09-16 山东大学 一种水溶性聚乙二醇化羟基喜树碱衍生物的制备方法
CN102060991A (zh) * 2010-11-26 2011-05-18 浙江大学 7-乙基-10-羟基喜树碱的两亲性药物前体及其制备方法
CN103768080A (zh) * 2013-12-30 2014-05-07 浙江工业大学 一种抗耐药肿瘤的靶向制剂、制备方法及应用
CN104758948A (zh) * 2015-04-25 2015-07-08 郑州大学 基于金纳米星的多功能抗肿瘤靶向诊断治疗药物的制备方法及应用
CN104857525A (zh) * 2015-05-27 2015-08-26 湘潭大学 一种以聚乙二醇-b-聚ε-己内酯为载体的pH响应型抗肿瘤前药及其制备方法
CN105963717A (zh) * 2016-05-31 2016-09-28 电子科技大学 用于肿瘤诊疗一体化的复合纳米药物及其制备方法

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20110217363A1 (en) * 2010-03-05 2011-09-08 Bionanox Two-step targeted tumor therapy with prodrug encapsulated in nanocarrier

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101530619A (zh) * 2009-04-16 2009-09-16 山东大学 一种水溶性聚乙二醇化羟基喜树碱衍生物的制备方法
CN102060991A (zh) * 2010-11-26 2011-05-18 浙江大学 7-乙基-10-羟基喜树碱的两亲性药物前体及其制备方法
CN103768080A (zh) * 2013-12-30 2014-05-07 浙江工业大学 一种抗耐药肿瘤的靶向制剂、制备方法及应用
CN104758948A (zh) * 2015-04-25 2015-07-08 郑州大学 基于金纳米星的多功能抗肿瘤靶向诊断治疗药物的制备方法及应用
CN104857525A (zh) * 2015-05-27 2015-08-26 湘潭大学 一种以聚乙二醇-b-聚ε-己内酯为载体的pH响应型抗肿瘤前药及其制备方法
CN105963717A (zh) * 2016-05-31 2016-09-28 电子科技大学 用于肿瘤诊疗一体化的复合纳米药物及其制备方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Preparation of carboxymethylchitosan nanoparticles with acid-sensitive bond based on solid dispersion of 10-hydroxycamptothecin;Risheng Yao，et al.;《ISRN Pharmaceutics》;20111231;第2011卷;1-9 *

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