CN106770877A - 一种硼替佐米手性异构体的检测方法 - Google Patents

一种硼替佐米手性异构体的检测方法 Download PDF

Info

Publication number
CN106770877A
CN106770877A CN201710196701.0A CN201710196701A CN106770877A CN 106770877 A CN106770877 A CN 106770877A CN 201710196701 A CN201710196701 A CN 201710196701A CN 106770877 A CN106770877 A CN 106770877A
Authority
CN
China
Prior art keywords
bortezomib
detection method
chiral isomer
high performance
performance liquid
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201710196701.0A
Other languages
English (en)
Inventor
丛艳伟
陈宏�
王应飞
栾春芳
张琪
普绍平
张林涛
彭娟
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
KUNMING GUIYAN PHARMACEUTICAL CO Ltd
Original Assignee
KUNMING GUIYAN PHARMACEUTICAL CO Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by KUNMING GUIYAN PHARMACEUTICAL CO Ltd filed Critical KUNMING GUIYAN PHARMACEUTICAL CO Ltd
Priority to CN201710196701.0A priority Critical patent/CN106770877A/zh
Publication of CN106770877A publication Critical patent/CN106770877A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/88—Integrated analysis systems specially adapted therefor, not covered by a single one of the groups G01N30/04 - G01N30/86
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/88—Integrated analysis systems specially adapted therefor, not covered by a single one of the groups G01N30/04 - G01N30/86
    • G01N2030/8809—Integrated analysis systems specially adapted therefor, not covered by a single one of the groups G01N30/04 - G01N30/86 analysis specially adapted for the sample
    • G01N2030/884—Integrated analysis systems specially adapted therefor, not covered by a single one of the groups G01N30/04 - G01N30/86 analysis specially adapted for the sample organic compounds

Landscapes

  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pathology (AREA)

Abstract

本发明公开了一种硼替佐米手性异构体的检测方法，采用以下步骤进行检测：1)采用高效液相色谱法，色谱条件如下；色谱柱——Chiralpak AD‑H，4.6×250mm，5um或等同；流动相——正己烷‑异丙醇‑乙醇‑二甲基甲酰胺；流速：0.6ml/min；检测波长：270nm；柱温：25℃；进样体积：10μl；2)流动相制备：BM、BM‑S,S、BM‑R,R、BM‑S,R样品按体积比混合，再以0.45um滤膜过滤；3)取10ul供试品注入高效液相色谱仪，记录谱图；采用高效液相色谱法，避免样品峰拖尾，干扰检测结果。

Description

一种硼替佐米手性异构体的检测方法
技术领域
本发明涉及抗肿瘤药物检测领域，特别涉及一种硼替佐米手性异构体的检测方法。
背景技术
硼替佐米，英文名Bortezomib，化学名称为“[(1R)-3-甲基-1-[[(2S)-1-氧代-3-苯基-[(吡嗪)氨基]丙基]氨基]丁基]硼酸”，分子量为384.20，化学结构式：
硼替佐米是近十余年来首个用于治疗多发性骨髓瘤的新药，是一种人工合成的二肽硼酸衍生物，为蛋白酶抑制剂，用于骨髓细胞瘤的治疗，也是首个以蛋白质降解酶复合物为靶标的癌症治疗药物，由美国Mellennium公司开发，2003年通过美国FDA批准上市，商品名万珂(Velcade)，为注射剂，随后在多个国家上市，在大量临床使用研究中，医疗工作者发现，硼替佐米不仅对骨髓瘤有效，同时对多种实体瘤，如淋巴瘤、肝细胞瘤、宫颈癌、急性白血病及骨髓增生异常综合症等都具有明显的治疗效果，由此，硼替佐米正逐渐成为重要的广谱抗肿瘤药物。
硼替佐米(以下简称“BM”)的化学结构中包含两个手性中心，共四个(非)对映异构体，产品中潜在三个手性异构体杂质，即R，R异构体(以下简称“BM-RR”)，S，S异构体(以下简称“BM-SS”)，S，R异构体(以下简称“BM-SR”)。在全球范围内各国药政对于药品杂质控制日趋严格，对于新药杂质细化研究的要求亦不断提高，本发明具有重要的现实意义。
目前尚未发现有关硼替佐米手性异构体杂质检测的相关文献报道。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种硼替佐米手性异构体的检测方法，采用高效液相色谱法，避免样品峰拖尾，干扰检测结果，以解决现有技术中导致的上述多项缺陷。
为实现上述目的，本发明提供以下的技术方案：一种硼替佐米手性异构体的检测方法，采用以下步骤进行检测：
1)采用高效液相色谱法，色谱条件如下；色谱柱——Chiralpak AD-H，4.6×250mm，5um或等同；流动相——正己烷-异丙醇-乙醇-二甲基甲酰胺；流速：0.6ml/min；检测波长：270nm；柱温：25℃；进样体积：10μl；
2)流动相制备：BM、BM-S,S、BM-R,R、BM-S,R样品按体积比混合，再以0.45um滤膜过滤；
3)取10ul供试品注入高效液相色谱仪，记录谱图。
优选的，所述步骤2)中，精密称定BM、BM-S,S、BM-R,R、BM-S,R样品各10.0mg混合置于25ml容量瓶内，以20ml溶剂溶解，超声约2-5分钟助溶，然后稀释至刻度并摇匀。
优选的，所述步骤2)中，供试液浓度：0.2-1.0mg/ml。
优选的，所述步骤2)中，供试液浓度优选0.4mg/ml。
优选的，所述步骤1)中，正己烷为800-950ml；异丙醇25-100ml；乙醇25-100ml；二甲基甲酰胺0-1ml。
优选的，所述步骤1)中，样品溶剂为正己烷-异丙醇-乙醇的混合液，比例为80:10:10。
采用以上技术方案的有益效果是：本发明一种硼替佐米手性异构体的检测方法，采用高效液相色谱法，采用正己烷、异丙醇、乙醇的混合液作为溶剂，能很好的溶解样品。以正己烷为主，同异丙醇、乙醇以不同比例混合作为流动相，均为常用的色谱溶剂，最大限度保护色谱柱不受到损伤。产品化学结构中含有两组羟基，加入少量二甲基甲酰胺，在一定程度上避免样品峰拖尾，干扰检测结果。
附图说明
图1是本发明实施例1的谱图；
图2是本发明实施例2的谱图；
图3是本发明实施例3的谱图；
图4是本发明实施例4的谱图；
图5是本发明实施例5的谱图。
具体实施方式
下面详细说明本发明的优选实施方式。
一种硼替佐米手性异构体的检测方法，采用以下步骤进行检测：
1)采用高效液相色谱法，色谱条件如下；色谱柱——Chiralpak AD-H，4.6×250mm，5um或等同；流动相——正己烷-异丙醇-乙醇-二甲基甲酰胺；流速：0.6ml/min；检测波长：270nm；柱温：25℃；进样体积：10μl；
2)流动相制备：BM、BM-S,S、BM-R,R、BM-S,R样品按体积比混合，再以0.45um滤膜过滤；
3)取10ul供试品注入高效液相色谱仪，记录谱图。
步骤2)中，精密称定BM、BM-S,S、BM-R,R、BM-S,R样品各10.0mg混合置于25ml容量瓶内，以20ml溶剂溶解，超声约2-5分钟助溶，然后稀释至刻度并摇匀；供试液浓度：0.2-1.0mg/ml，供试液浓度优选0.4mg/ml。
步骤1)中，正己烷为800-950ml；异丙醇25-100ml；乙醇25-100ml；二甲基甲酰胺0-1ml；样品溶剂为正己烷-异丙醇-乙醇的混合液，比例为80:10:10。
实施例1
仪器：Waters 1525高效液相色谱仪
色谱柱：Chiralpak AD-H手性色谱柱
流动相：正己烷950ml；异丙醇25ml；乙醇25ml；二甲基甲酰胺1ml。
柱温：25℃
洗脱方式：等度
检测波长：270nm
供试品配制：精密称定BM、BM-S,S、BM-R,R、BM-S,R样品各10.0mg混合置于25ml容量瓶内，以20ml溶剂溶解，超声约2-5分钟助溶，然后稀释至刻度并摇匀。
测定：将10ul供试品注入高效液相色谱仪，记录谱图并分析，硼替佐米同手性异构体分离良好，结果见图1。
实施例2
仪器：Waters 1525高效液相色谱仪
色谱柱：Chiralpak AD-H手性色谱柱
流动相：正己烷900ml；异丙醇50ml；乙醇50ml；二甲基甲酰胺1ml。
柱温：25℃
洗脱方式：等度
检测波长：270nm
供试品配制：精密称定BM、BM-S,S、BM-R,R、BM-S,R样品各10.0mg混合置于25ml容量瓶内，以20ml溶剂溶解，超声约2-5分钟助溶，然后稀释至刻度并摇匀。
测定：将10ul供试品注入高效液相色谱仪，记录谱图并分析，硼替佐米同手性异构体分离良好，结果见图2。
实施例3
仪器：Waters 1525高效液相色谱仪
色谱柱：Chiralpak AD-H手性色谱柱
流动相：正己烷950ml；异丙醇50ml；乙醇50ml；二甲基甲酰胺1ml。
柱温：25℃
洗脱方式：等度
检测波长：270nm
供试品配制：精密称定BM、BM-S,S、BM-R,R、BM-S,R样品各10.0mg混合置于25ml容量瓶内，以20ml溶剂溶解，超声约2-5分钟助溶，然后稀释至刻度并摇匀。
测定：将10ul供试品注入高效液相色谱仪，记录谱图并分析，硼替佐米同手性异构体分离良好，结果见图3。
实施例4
仪器：Waters 1525高效液相色谱仪
色谱柱：Chiralpak AD-H手性色谱柱
流动相：正己烷800ml；异丙醇100ml；乙醇100ml；二甲基甲酰胺1ml。
柱温：25℃
洗脱方式：等度
检测波长：270nm
供试品配制：精密称定BM、BM-S,S、BM-R,R、BM-S,R样品各10.0mg混合置于25ml容量瓶内，以20ml溶剂溶解，超声约2-5分钟助溶，然后稀释至刻度并摇匀。
测定：将10ul供试品注入高效液相色谱仪，记录谱图并分析，硼替佐米同手性异构体分离良好，结果见图4。
实施例5
仪器：Waters 1525高效液相色谱仪
色谱柱：Chiralpak AD-H手性色谱柱
流动相：正己烷800ml；异丙醇100ml；乙醇100ml。
柱温：25℃
洗脱方式：等度
检测波长：270nm
供试品配制：精密称定BM、BM-S,S、BM-R,R、BM-S,R样品各10.0mg混合置于25ml容量瓶内，以20ml溶剂溶解，超声约2-5分钟助溶，然后稀释至刻度并摇匀。
测定：将10ul供试品注入高效液相色谱仪，记录谱图并分析，硼替佐米同手性异构体分离良好，结果见图5。
注意事项：①Chiralpak AD-H手性色谱柱应避免接触以下物质：乙酸乙酯、二氯甲烷、三氯甲烷、四氢呋喃、甲苯、丙酮、DMSO；②不能使用水、100％甲醇或乙腈溶解样品。
以上所述的仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明创造构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。

Claims (6)

1.一种硼替佐米手性异构体的检测方法，其特征在于，采用以下步骤进行检测：
1)采用高效液相色谱法，色谱条件如下；色谱柱——Chiralpak AD-H，4.6×250mm，5um或等同；流动相——正己烷-异丙醇-乙醇-二甲基甲酰胺；流速：0.6ml/min；检测波长：270nm；柱温：25℃；进样体积：10μl；
2)流动相制备：BM、BM-S,S、BM-R,R、BM-S,R样品按体积比混合，再以0.45um滤膜过滤；
3)取10ul供试品注入高效液相色谱仪，记录谱图。
2.根据权利要求1所述的硼替佐米手性异构体的检测方法，其特征在于，所述步骤2)中，精密称定BM、BM-S,S、BM-R,R、BM-S,R样品各10.0mg混合置于25ml容量瓶内，以20ml溶剂溶解，超声约2-5分钟助溶，然后稀释至刻度并摇匀。
3.根据权利要求1所述的硼替佐米手性异构体的检测方法，其特征在于，所述步骤2)中，供试液浓度：0.2-1.0mg/ml。
4.根据权利要求3所述的硼替佐米手性异构体的检测方法，其特征在于，所述步骤2)中，供试液浓度优选0.4mg/ml。
5.根据权利要求1所述的硼替佐米手性异构体的检测方法，其特征在于，所述步骤1)中，正己烷为800-950ml；异丙醇25-100ml；乙醇25-100ml；二甲基甲酰胺0-1ml。
6.根据权利要求1所述的硼替佐米手性异构体的检测方法，其特征在于，所述步骤1)中，样品溶剂为正己烷-异丙醇-乙醇的混合液，比例为80:10:10。
CN201710196701.0A 2017-03-29 2017-03-29 一种硼替佐米手性异构体的检测方法 Pending CN106770877A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201710196701.0A CN106770877A (zh) 2017-03-29 2017-03-29 一种硼替佐米手性异构体的检测方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201710196701.0A CN106770877A (zh) 2017-03-29 2017-03-29 一种硼替佐米手性异构体的检测方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN106770877A true CN106770877A (zh) 2017-05-31

Family

ID=58966538

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201710196701.0A Pending CN106770877A (zh) 2017-03-29 2017-03-29 一种硼替佐米手性异构体的检测方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN106770877A (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111380971A (zh) * 2018-12-29 2020-07-07 江苏先声药业有限公司 一种硼替佐米有关物质的hplc分析方法

Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20120289699A1 (en) * 2011-05-12 2012-11-15 Scino Pharm Taiwan, Ltd. Process for Preparing and Purifying Bortezomib
WO2012131707A3 (en) * 2011-03-28 2012-11-29 Laurus Labs Private Limited Crystalline form of bortezomib, preparation method and pharmaceutical composition there f
CN103044467A (zh) * 2011-10-14 2013-04-17 重庆安格龙翔医药科技有限公司 一种制备用于合成硼替佐米的中间体的方法
CN103344733A (zh) * 2013-07-08 2013-10-09 江苏奥赛康药业股份有限公司 一种硼替佐米对映异构体的高效液相色谱分离检测方法
CN103487526A (zh) * 2013-09-30 2014-01-01 常州市亚邦医药研究所有限公司 一种硼替佐米光学异构体的含量检测方法
CN103554219A (zh) * 2013-10-01 2014-02-05 昆明贵研药业有限公司 一种制备硼替佐米的方法
CN103604894A (zh) * 2013-11-07 2014-02-26 深圳万乐药业有限公司 高效液相色谱法分离测定硼替佐米手性异构体的方法
CN103965231A (zh) * 2013-01-31 2014-08-06 江苏奥赛康药业股份有限公司 用于检测硼替佐米中间体纯度的酰胺硼酸酯、制备方法及其应用

Patent Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2012131707A3 (en) * 2011-03-28 2012-11-29 Laurus Labs Private Limited Crystalline form of bortezomib, preparation method and pharmaceutical composition there f
US20120289699A1 (en) * 2011-05-12 2012-11-15 Scino Pharm Taiwan, Ltd. Process for Preparing and Purifying Bortezomib
CN103044467A (zh) * 2011-10-14 2013-04-17 重庆安格龙翔医药科技有限公司 一种制备用于合成硼替佐米的中间体的方法
CN103965231A (zh) * 2013-01-31 2014-08-06 江苏奥赛康药业股份有限公司 用于检测硼替佐米中间体纯度的酰胺硼酸酯、制备方法及其应用
CN103344733A (zh) * 2013-07-08 2013-10-09 江苏奥赛康药业股份有限公司 一种硼替佐米对映异构体的高效液相色谱分离检测方法
CN103487526A (zh) * 2013-09-30 2014-01-01 常州市亚邦医药研究所有限公司 一种硼替佐米光学异构体的含量检测方法
CN103554219A (zh) * 2013-10-01 2014-02-05 昆明贵研药业有限公司 一种制备硼替佐米的方法
CN103604894A (zh) * 2013-11-07 2014-02-26 深圳万乐药业有限公司 高效液相色谱法分离测定硼替佐米手性异构体的方法

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
WANG SHUNI 等: "Chemical Dynamic Thermodynamic Resolution and S/R Interconversion of Unprotected Unnatural Tailor-made α-Amino Acids", 《J. ORG. CHEM》 *
邹华生 等: "正相 HPLC-直链淀粉手性固定相拆分硼替佐米及其光学异构体", 《中国现代应用药学》 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111380971A (zh) * 2018-12-29 2020-07-07 江苏先声药业有限公司 一种硼替佐米有关物质的hplc分析方法

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Wang et al. A new A431/cell membrane chromatography and online high performance liquid chromatography/mass spectrometry method for screening epidermal growth factor receptor antagonists from Radix sophorae flavescentis
CN104634887A (zh) 一种分离和测定替格瑞洛及其光学异构体的方法
CN103344733B (zh) 一种硼替佐米对映异构体的高效液相色谱分离检测方法
CN102043020A (zh) 一种具有脑神经保护作用的灯盏细辛活性成分筛选方法
EP3954371A1 (en) Anti-acetylcholinesterase active composition in caulis mahoniae and screening method therefor and application thereof
CN104327176A (zh) 一种高纯度眼镜蛇神经毒素的提取方法及含有该毒素的药物组合物
CN106770855A (zh) 一种基于高效液相色谱法的沙库必曲中间体及其光学异构体的分离检测方法
Wang et al. Separation and pharmacology of chiral compounds in Traditional Chinese Medicine
CN104777243A (zh) 一种同时测定半夏中有机酸、核苷和麻黄碱的hplc方法
CN102375033A (zh) 盐酸苯达莫司汀及其有关物质的高效液相色谱分析方法
Rosetti et al. Simultaneous enantio-and diastereo-selective high-performance liquid chromatography separation of paroxetine on an immobilized amylose-based chiral stationary phase under green reversed-phase conditions
CN101929985A (zh) 一种用高效液相色谱法测定阿托伐他汀钙有关物质的方法
CN104569255B (zh) 一种用HPLC测定Suvorexant中间体的方法
CN106770877A (zh) 一种硼替佐米手性异构体的检测方法
CN106483202B (zh) 一种分离和测定阿利维a酸与异构体的方法
CN104458945B (zh) 一种盐酸贝西沙星及其异构体的分离测定方法
CN107167535A (zh) 一种反相液相色谱法检测雷替曲塞对映异构体的方法
Lei et al. Evaluation of the interaction of bioactive compounds in Cortex Pseudolarix and Radix Stephaniae by the microdialysis probe coupled with high performance liquid chromatography–mass spectrometry
CN110927279A (zh) 一种盐酸咪达普利有关物质的分离方法
CN103604894A (zh) 高效液相色谱法分离测定硼替佐米手性异构体的方法
CN114814060B (zh) 一种缬沙坦氨氯地平片有关物质的检测方法
CN103487526B (zh) 一种硼替佐米光学异构体的含量检测方法
Garcia-Martínez et al. Bionalytical validation study for the determination of unbound ambrisentan in human plasma using rapid equilibrium dialysis followed by ultra performance liquid chromatography coupled to mass spectrometry
CN109557218A (zh) Ahu377及其异构体的色谱分析方法
CN107870211A (zh) 一种分离测定盐酸帕洛诺司琼的液相色谱方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20170531

RJ01 Rejection of invention patent application after publication