CN106770771A - 一种黄秦艽药材指纹图谱的建立方法及其指纹图谱 - Google Patents

一种黄秦艽药材指纹图谱的建立方法及其指纹图谱 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种黄秦艽药材指纹图谱的建立方法及其指纹图谱。该建立方法，包括以下步骤：(1)、以黄秦艽制备黄秦艽醇提物；(2)、将步骤(1)得到的黄秦艽醇提物进行液相色谱检测，记录90min内的指纹图谱：其中，液相色谱检测中的流动相包括流动相A和流动相B，流动相A为甲醇，流动相B为0.01％～0.1％磷酸溶液，流动相A和流动相B的体积百分数之和为100％；流动相的流速为：0.8～1.2mL/min；采用梯度洗脱。本发明得到的指纹图谱中各成分的色谱峰峰形和分离度均较好，能够对黄秦艽中的相关化学成分进行定性检测，并且有利于计算色谱峰的峰面积，通过含量测定方法能计算得到黄秦艽药材中各成分含量。

Description

一种黄秦艽药材指纹图谱的建立方法及其指纹图谱
技术领域
本发明属于中药分析领域，具体涉及一种黄秦艽药材指纹图谱的建立方法及其指纹图谱。
背景技术
黄秦艽，别名：滇黄芩、丽江金不换、大苦参、黄龙胆。龙胆科、黄秦艽属多年生草本植物，产西藏东南部、云南西北部、四川西部。
据现代临床研究,黄秦艽的主要功效为清热、消炎、解毒，可治疗支气管炎，解乌头碱、草乌和附片的中毒,用于治疗胃痉挛和解除乌头中毒引起的多种中枢神精症状，对各种痛症均具有很好的效果。
近年来,龙胆科药用植物对急慢性病毒性肝炎疗效显著,因此国内外药物化学工作者对其化学成分的研究引起产生了浓厚的兴趣。迄今为止，龙胆科的许多药用植物的化学成分及药理活性都已被研究，有的已被开发利用，但黄秦艽化学成分的研究还未见报道。
发明内容
本发明要解决的技术问题是：现有技术中没有对黄秦艽药材进行质量控制的有效方法。
为合理开发利用云南这一特有药用资源黄秦艽，对其药性和疗效用现代医学的理论进行阐释，发现其新的用途，本发明对其化学成分进行了研究，并提供了黄秦艽药材指纹图谱的建立方法及其指纹图谱。
本发明提供的黄秦艽药材指纹图谱的建立方法，包括以下步骤：
(1)、以黄秦艽制备黄秦艽醇提物；
(2)、将步骤(1)得到的所述黄秦艽醇提物进行液相色谱检测，记录90min内的指纹图谱：
其中，所述液相色谱检测中的流动相包括流动相A和流动相B，所述流动相A为甲醇，所述流动相B为0.01％～0.1％磷酸溶液，所述流动相A和流动相B的体积百分数之和为100％；流动相的流速为：0.8～1.2mL/min；
所述液相色谱检测的洗脱程序为梯度洗脱，所述梯度洗脱为：
0～5min，所述流动相A的体积百分数从7％～9％上升至17％～19％，所述流动相B的体积百分数从91％～93％下降至81％～83％；
5～20min，所述流动相A的体积百分数从17％～19％上升至29％～31％，所述流动相B的体积百分数从81％～83％下降至69％～71％；
20～45min，所述流动相A的体积百分数从29％～31％上升至30％～32％，所述流动相B的体积百分数从69％～71％下降至68％～70％；
45～50min，所述流动相A的体积百分数从30％～32％上升至37％～39％，所述流动相B的体积百分数从68％～70％下降至61％～63％；
50～55min，所述流动相A的体积百分数从37％～39％上升至40％～42％，所述流动相B的体积百分数从61％～63％下降至58％～60％；
55～82min，所述流动相A的体积百分数从40％～42％上升至41％～43％，所述流动相B的体积百分数从58％～60％下降至57％～59％；
82～83min，所述流动相A的体积百分数从41％～43％下降至7％～9％，所述流动相B的体积百分数从57％～59％上升至91％～93％；
83～90min，所述流动相A的体积百分数保持在7％～9％，所述流动相B的体积百分数保持在91％～93％。
优选地，步骤(1)为：黄秦艽药材用90％～100％甲醇溶液回流提取2～4次，每次3～5小时，过滤，合并提取液，减压浓缩，得黄秦艽醇提物。
优选地，步骤(1)为：黄秦艽药材用80％甲醇溶液回流提取3次，每次4小时，过滤，合并提取液，减压浓缩，得黄秦艽醇提物。
优选地，所述流动相B为0.05％磷酸溶液。
优选地，所述梯度洗脱为：
0～5min，所述流动相A的体积百分数从8％上升至18％，所述流动相B的体积百分数从92％下降至82％；
5～20min，所述流动相A的体积百分数从18％上升至30％，所述流动相B的体积百分数从82％下降至70％；
20～45min，所述流动相A的体积百分数从30％上升至31％，所述流动相B的体积百分数从70％下降至69％；
45～50min，所述流动相A的体积百分数从31％上升至38％，所述流动相B的体积百分数从69下降至62％；
50～55min，所述流动相A的体积百分数从38％上升至41％，所述流动相B的体积百分数从62％下降至59％；
55～82min，所述流动相A的体积百分数从41％上升至42％，所述流动相B的体积百分数从59％下降至58％；
82～83min，所述流动相A的体积百分数从42％下降至8％，所述流动相B的体积百分数从58％上升至92％；
83～90min，所述流动相A的体积百分数保持在8％，所述流动相B的体积百分数保持在92％。
优选地，流动相的流速为：1mL/min。
优选地，所述液相色谱检测的检测器为紫外检测器；紫外检测波长为254nm。
优选地，所述液相色谱检测中的色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，，色谱柱柱长为250mm，内径为4.6mm，粒径为5μm。
优选地，所述液相色谱检测中的色谱柱柱温为30℃。
本发明还提供上述的建立方法得到的黄秦艽药材指纹图谱，所述指纹图谱具有47个指纹峰，各指纹峰的数据如下表：
本发明使用溶剂提取法得到黄秦艽醇提物，采用梯度洗脱进行液相色谱检测，且得到的指纹图谱中各成分的色谱峰峰形和分离度均较好，能够对黄秦艽中的相关化学成分进行定性检测，并且有利于计算色谱峰的峰面积，通过含量测定方法可以计算得到黄秦艽药材中各成分含量。
本发明利用本发明提供的指纹图谱能够对黄秦艽药材中各成分的定量测定，从而有效地控制黄秦艽药材的质量。
附图说明
图1是本发明的黄秦艽药材的指纹图谱。
具体实施方式
下面结合附图和具体实施例对本发明作进一步说明，以使本领域的技术人员可以更好的理解本发明并能予以实施，但所举实施例不作为对本发明的限定。
实施例1：黄秦艽醇提物的制备方法：
黄秦艽药材4.8Kg用80％甲醇溶液回流提取3次，每次4小时，过滤，合并提取液，减压浓缩，得黄秦艽醇提物1227.68g。
所用的黄秦艽实验药材黄秦艽购于云南省大理市药材市场周盛药材行，经鉴定为龙胆科黄秦艽属黄秦艽的干燥根茎，所用甲醇购买于天津博迪化工有限公司。
实施例2：指纹图谱的测定：
戴安Ultimate 3000型色谱仪，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，色谱柱型号为Phenomenex Synergi色谱柱，色谱柱柱长为250mm，内径为4.6mm，粒径为5μm。
将流动相A为甲醇，所述流动相B为0.05％磷酸溶液，液相色谱检测的洗脱程序为梯度洗脱，所述梯度洗脱为：0～5min，所述流动相A的体积百分数从8％上升至18％，所述流动相B的体积百分数从92％下降至82％；5～20min，所述流动相A的体积百分数从18％上升至30％，所述流动相B的体积百分数从82％下降至70％；20～45min，所述流动相A的体积百分数从30％上升至31％，所述流动相B的体积百分数从70％下降至69％；45～50min，所述流动相A的体积百分数从31％上升至38％，所述流动相B的体积百分数从69下降至62％；50～55min，所述流动相A的体积百分数从38％上升至41％，所述流动相B的体积百分数从62％下降至59％；55～82min，所述流动相A的体积百分数从41％上升至42％，所述流动相B的体积百分数从59％下降至58％；82～83min，所述流动相A的体积百分数从42％下降至8％，所述流动相B的体积百分数从58％上升至92％；83～90min，所述流动相A的体积百分数保持在8％，所述流动相B的体积百分数保持在92％。流动相的流速为1mL/min。液相色谱检测的检测器为紫外检测器；紫外检测波长为254nm。液相色谱检测中的色谱柱柱温为30℃。
所用的色谱纯甲醇购买于美国Tedia公司，磷酸购买于国药集团化学试剂有限公司。
将本发明实施例1制备的黄秦艽醇提物进行液相色谱检测得到的指纹图谱如图1所示，图1为本发明实施例1得到的黄秦艽醇提物的指纹图谱。其共有47个指纹峰，各指纹峰的数据如下表：
从上表和图1可看出，本发明的大部分指纹峰的分离度均大于1.5，大部分成分理论塔板数均不低于5000。(其中仅有非常少部分峰的分离度和理论塔板数系统无法分析得到,标注为n.a.)
根据本发明得到的指纹图谱通过与标准物质对照计算实施例1得到的黄秦艽醇提物中主要成分含量。
以上所述实施例仅是为充分说明本发明而所举的较佳的实施例，本发明的保护范围不限于此。本技术领域的技术人员在本发明基础上所作的等同替代或变换，均在本发明的保护范围之内。本发明的保护范围以权利要求书为准。

Claims (10)

1.一种黄秦艽药材指纹图谱的建立方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)、以黄秦艽制备黄秦艽醇提物；
(2)、将步骤(1)得到的所述黄秦艽醇提物进行液相色谱检测，记录90min内的指纹图谱：
其中，所述液相色谱检测中的流动相包括流动相A和流动相B，所述流动相A为甲醇，所述流动相B为0.01％～0.1％磷酸溶液，所述流动相A和流动相B的体积百分数之和为100％；流动相的流速为：0.8～1.2mL/min；
所述液相色谱检测的洗脱程序为梯度洗脱，所述梯度洗脱为：
0～5min，所述流动相A的体积百分数从7％～9％上升至17％～19％，所述流动相B的体积百分数从91％～93％下降至81％～83％；
5～20min，所述流动相A的体积百分数从17％～19％上升至29％～31％，所述流动相B的体积百分数从81％～83％下降至69％～71％；
20～45min，所述流动相A的体积百分数从29％～31％上升至30％～32％，所述流动相B的体积百分数从69％～71％下降至68％～70％；
45～50min，所述流动相A的体积百分数从30％～32％上升至37％～39％，所述流动相B的体积百分数从68％～70％下降至61％～63％；
50～55min，所述流动相A的体积百分数从37％～39％上升至40％～42％，所述流动相B的体积百分数从61％～63％下降至58％～60％；
55～82min，所述流动相A的体积百分数从40％～42％上升至41％～43％，所述流动相B的体积百分数从58％～60％下降至57％～59％；
82～83min，所述流动相A的体积百分数从41％～43％下降至7％～9％，所述流动相B的体积百分数从57％～59％上升至91％～93％；
83～90min，所述流动相A的体积百分数保持在7％～9％，所述流动相B的体积百分数保持在91％～93％。
2.根据权利要求1所述的黄秦艽药材指纹图谱的建立方法，其特征在于，步骤(1)为：黄秦艽药材用90％～100％甲醇溶液回流提取2～4次，每次3～5小时，过滤，合并提取液，减压浓缩，得黄秦艽醇提物。
3.根据权利要求2所述的黄秦艽药材指纹图谱的建立方法，其特征在于，步骤(1)为：黄秦艽药材用80％甲醇溶液回流提取3次，每次4小时，过滤，合并提取液，减压浓缩，得黄秦艽醇提物。
4.根据权利要求2所述的黄秦艽药材指纹图谱的建立方法，其特征在于，所述流动相B为0.05％磷酸溶液。
5.根据权利要求4所述的黄秦艽药材指纹图谱的建立方法，其特征在于，所述梯度洗脱为：
0～5min，所述流动相A的体积百分数从8％上升至18％，所述流动相B的体积百分数从92％下降至82％；
5～20min，所述流动相A的体积百分数从18％上升至30％，所述流动相B的体积百分数从82％下降至70％；
20～45min，所述流动相A的体积百分数从30％上升至31％，所述流动相B的体积百分数从70％下降至69％；
45～50min，所述流动相A的体积百分数从31％上升至38％，所述流动相B的体积百分数从69下降至62％；
50～55min，所述流动相A的体积百分数从38％上升至41％，所述流动相B的体积百分数从62％下降至59％；
55～82min，所述流动相A的体积百分数从41％上升至42％，所述流动相B的体积百分数从59％下降至58％；
82～83min，所述流动相A的体积百分数从42％下降至8％，所述流动相B的体积百分数从58％上升至92％；
83～90min，所述流动相A的体积百分数保持在8％，所述流动相B的体积百分数保持在92％。
6.根据权利要求5所述的黄秦艽药材指纹图谱的建立方法，其特征在于，流动相的流速为：1mL/min。
7.根据权利要求1所述的黄秦艽药材指纹图谱的建立方法，其特征在于，所述液相色谱检测的检测器为紫外检测器；紫外检测波长为254nm。
8.根据权利要求1所述的黄秦艽药材指纹图谱的建立方法，其特征在于，所述液相色谱检测中的色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，色谱柱柱长为250mm，内径为4.6mm，粒径为5μm。
9.根据权利要求7所述的黄秦艽药材指纹图谱的建立方法，其特征在于，所述液相色谱检测中的色谱柱柱温为30℃。
10.一种如权利要求1～8任一项所述的建立方法得到的黄秦艽药材指纹图谱，其特征在于，所述指纹图谱具有47个指纹峰，各指纹峰的数据如下表：
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Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107796892A (zh) * 2017-12-13 2018-03-13 西安正大制药有限公司 艽龙胶囊的指纹图谱及其在质量控制与成分分析中的应用
CN108169345A (zh) * 2017-11-10 2018-06-15 内蒙古医科大学 蒙药小秦艽花指纹图谱建立方法以及质量评价方法

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101732404A (zh) * 2009-12-31 2010-06-16 上海中药标准化研究中心 秦艽药材的鉴别方法

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101732404A (zh) * 2009-12-31 2010-06-16 上海中药标准化研究中心 秦艽药材的鉴别方法

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
吴启勋等: "青海秦艽高效液相色谱指纹图谱的研究", 《西北植物学报》 *
段宝忠等: "白族药黄秦艽中 3 种环烯醚萜苷类成分的含量测定", 《中药材》 *

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108169345A (zh) * 2017-11-10 2018-06-15 内蒙古医科大学 蒙药小秦艽花指纹图谱建立方法以及质量评价方法
CN107796892A (zh) * 2017-12-13 2018-03-13 西安正大制药有限公司 艽龙胶囊的指纹图谱及其在质量控制与成分分析中的应用
CN107796892B (zh) * 2017-12-13 2020-10-23 西安正大制药有限公司 艽龙胶囊的指纹图谱及其在质量控制与成分分析中的应用

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