CN106754142A

CN106754142A - 一种鹿血酒及其制备方法

Info

Publication number: CN106754142A
Application number: CN201710031658.2A
Authority: CN
Inventors: 殷兆平
Original assignee: Ningxia Beautiful Haba Lake Ecological Tourism Development Co ltd
Current assignee: Ningxia Beautiful Haba Lake Ecological Tourism Development Co ltd
Priority date: 2017-01-17
Filing date: 2017-01-17
Publication date: 2017-05-31

Abstract

本发明公开了一种鹿血酒及其制备方法，属于营养白酒技术领域，以新鲜鹿血和鹿鞭为主要原料，科学复配黑枸杞、枸杞、桑葚、红枣、龙眼、甘草等，全程采用冻干、复合酶生物酶解、真空脱气脱腥、冷冻、功能性酿酒酵母低温发酵、超声处理、高压脉冲电场处理等低温加工技术，有效提高了鹿产品有效成分的利用率，降低了营养及保健物质的损失，最大限度地保留了鹿产品的原始色泽、风味、生物活性成分和营养成物质含量。最终制得一种无腥味、稳定性强、口感协调、醇厚、柔和、绵长，风味适宜、生物活性物质和营养价值高、保健功效好的澄清透明的鹿血酒。

Description

一种鹿血酒及其制备方法

技术领域

本发明涉及营养白酒，具体涉及一种鹿血酒及其制备方法。

背景技术

我国是世界上养鹿和使用鹿产品最早的国家，已有260多年的养鹿历史和1300多年的鹿产品药用史。现今全世界约有40多种鹿，而分布在我国大约有19种。野生或饲养的梅花鹿主要分布在吉林省、黑龙江省的大小兴安岭和长白山地区；东北马鹿主要野生或饲养于大兴安岭、长白山脉和内蒙东部林区；此外还有海南黑鹿、青海的白唇鹿、新疆的天山马鹿等。我国主要的茸用鹿是梅花鹿和马鹿，其中吉林省的东北梅花鹿茸驰名中外，主要靠圈养和人工放牧。

鹿是名贵的药食两用经济动物，全身都是宝，食用和药用部分有鹿茸、鹿茸血、鹿心、鹿肝、鹿鞭、鹿角、鹿筋、鹿皮、鹿骨、鹿胎等，达30余种。其中药用价值最大的是鹿茸、鹿茸血、鹿鞭和鹿血。

鹿血分为膛血和茸血，膛血是血管及体腔内的血液，亦称之为全血，茸血来自割(收获)茸后鹿茸内存留的血液，一般认为梅花鹿的茸血最为珍贵。茸血产量很少，因此专门研究和使用茸血的报道很少见到。鹿血作为一种的名贵中药，历代医书均有记述，最早记录于唐代孙思邈《千金·食治》中，直至明朝李时珍的《本草纲目》中对鹿血的医疗作用做了详细记载：“主阳痿、补虚，止腰痛，跌伤，狂犬伤，鼻衄，益精血，解痘毒、药毒，和酒服治肺痿吐血，崩中带下，诸气痛欲危者饮之立愈。”近代临床研究表明鹿血在心悸、健忘、失眠、跌伤、风湿和类风湿症及抗衰老等治疗方面有突出效果。鹿血的保健功能已得到国内外的广泛认可。鲜鹿血含水量80％～81％，有机成分含量16％～17％，其中主要是蛋白质，蛋白质中富含19种氨基酸及多种酶类，如具有抗衰老作用的超氧化物歧化酶SOD、谷胱甘肽氧化酶、脱氢酶、与心脏机能相关的磷酸肌酸激酶、A-羟丁酸脱氢酶和磷酸机酸激酶、辅酶；多种脂类、游离脂肪酸类有硬脂酸、亚麻酸及亚油酸、油酸；多种激素类有睾酮、雌二醇、雌酮、肾上腺素；维生素类有维生素E、维生素A、维生素B₁、维生素B₂、维生素B₆、维生素B₁₂、烟酸、肌酐等；嘌呤类有黄嘌呤、次黄嘌呤、腺嘌呤及鸟嘌呤等；还含有固醇类、糖脂类、磷脂类和多糖类等；另外灰分占3～4％，含多种常量和有益微量元素。

早在商代我国就有使用药酒的记载，仅《本草纲目》中就列出了四、五十种，至于“虎骨酒”、“鹿茸酒”等早已是尽人皆知的名药酒。酒有温通经脉作用，能促进酒中的生物活性等的吸收，活血通脉，却病延年。传统药酒常用一些药用植物或动物配制，其富含氨基酸、蛋白质、多种维生素、人体必需的微量元素和多种生物活性物质等；近年，保健药酒在抗疲劳和调节免疫力方面的作用深受推崇。

鹿血酒根据组成可分为：单味鹿血酒和复方鹿血酒。单味鹿血酒包括全血酒、脱纤维蛋白酒和血浆酒。全血酒是指用鹿血与50度白酒混合浸泡，鹿血含量在10％～20％。这种酒容易产生沉淀，摇匀后呈混沌状，外观不好，但效果不错，深受低档消费者的欢迎。脱纤维蛋白酒是指用竹筷缠上纱布，在新鲜的鹿血中不断搅拌，血液纤维蛋白粘在纱布上被除去，血液不凝固，再与酒混合制成鹿血酒。这种酒适合于中低档消费，上部橙黄色澄清透明，下部有固形物沉淀，摇晃时紫红色沉淀物会泛起呈混浊状。血浆酒是指用离心法除去血细胞部分，血浆部分与50度酒混合。鹿血浆酒属于高档消费品，呈橙黄色透明，市售的血浆酒目前有的还加入补肾、补气、安神等中药配制成复方鹿血酒。复方鹿血酒是鹿血与中药共同调配成的鹿血酒，根据药用目的不同，配用不同的中药。

目前，已经公开的相关的鹿血酒较多：中国专利CN 102719343B公开了一种鹿血酒，包括按体积百分比的下述成分：鲜鹿血10％，中药基酒90％；所述中药基酒由以下重量份成分制成：淫羊藿3-5份；西洋参2-4份；枸杞2.5-4.5份；55度米白酒90-150份。该发明鹿血酒品质纯正，具有补心血、壮肾阳、抗疲劳、提高人体免疫力等药效，口感好，人体饮用时吸收率高，保证营养成分能被饮用者快速吸收。中国专利CN 103386033 B公开了一种治疗风湿、痛风的鹿血酒及其制备方法，其由以下重量份的原料制成：鹿血20-30、九香虫10-15、全蝎15-20、蚂蚁8-12、乌梢蛇15-25、穿山甲10-15、狗脊5-10、枣皮15-20、僵蚕8-12、杜仲20-30、桑寄生15-25、怀牛膝12-16、天仙藤9-14、丝瓜络18-24、海桐皮10-15、黄柏20-25、苍术15-20、路路通16-22、防风10-15、牡丹藤8-12、紫葳根20-30、川萆薢15-25、竹花14-18、阴地蕨10-15、50-60度白酒400-500。该发明鹿血酒具有清热解毒、行气活血、通经止痛、祛风除湿之功效，对于治疗痛风、风湿性关节炎、类风湿性关节炎、四肢麻木、跌打损伤、腰腿疼痛等症具有良好的疗效。中国专利CN101544942B公开了鹿茸血酒及其制备方法，涉及保健酒领域。该发明鹿茸血酒将鹿茸、鹿茸血、鹿骨、鹿筋、鹿血、肉苁蓉、红花、枸杞子、天山雪莲等配方能增强人体免疫能力和提高机体工作能力，有改善睡眠和饮食，降低肌肉疲劳，促进儿童生长发育和血液循环及伤口愈合等作用。中国专利CN 102161962 A公开了一种鹿茸血酒，其配方为：每1000ml鹿茸血酒中：人参含量为12g，丁香含量为3g，山药含量为12g，鹿血含量为10ml，枸杞含量为10g，鹿茸含量为2.5g，肉桂含量为10g，白砂糖含量为28g，淫羊藿含量为8g，其余为蒸馏酒。该发明中各中药配伍合理，无禁忌，无有害物质产生，且借助酒力，更好的发挥药效，达到预期的保健功能。按该发明的生产工艺制成的以酒为载体的鹿茸血酒，对于处于长期压力、营养不良等免疫力低下及易体力疲劳的亚健康人群具有增强免疫力、缓解体力疲劳的保健作用。中国专利CN 104974905 A公开了一种鹿茸血虫草保健酒的制备方法。制备如下：包含如下步骤；包含鹿茸血酒部分和药材酒部分的制备和混合；鹿茸血酒部分：原酒500g中放置20g鹿茸血，浸泡15天；药材酒部分：原酒500g中放置枸杞子10g；鹿血15g；麦冬15g；桂圆：20-30g；冬虫夏草：5g；红参3g；甘草3g；浸泡一周；将以上浸泡好的酒按照比例进行灌装，灌装体积比例为鹿茸血酒部分20％，药材酒80％。该发明继承传统工艺，具有温肾补阳、生津养血、补髓健骨、补肺益肾、祛风除湿、增强机体免疫力的特殊疗效，酒香醇厚，营养丰富，是滋补养生的珍品。

为了解决鹿血酒沉淀现象，改善其感官状态，提高其消化吸收性。目前市场上的许多鹿血酒都是先将鹿血用蛋白酶水解，再制成鹿血酒：中国专利CN1081671C公开了一种鹿茸、鹿茸血酒及其制备方法，是由酒精、新鲜鹿茸、新鲜鹿茸血、蛋白酶、增溶剂、脱盐去离子水制成，将新鲜鹿茸和新鲜鹿茸血混合粉碎后，进行超微处理，加入蛋白酶，在36度水浴中水解，在加入增溶剂，搅拌加入优质白酒，过滤后其滤液即为成品鹿茸、鹿茸血酒。中国专利CN 104312878 B公开了一种含鹿茸血和玛卡的滋补保健酒及其制备方法，其特征在于包括如下步骤：(1)备料：鲜鹿茸血、玛卡粉、山药、枸杞、大枣、醋龟板、基酒、水、混合酶制剂；(2)鹿茸血酶解：酶解采用混合酶制剂，收集滤液备用；(3)原料采用基酒常规浸提或渗漉提取；(4)调制催陈。该发明工艺提高了鹿茸血酒的营养和有效成分的利用价值，保存了活性物质和有效成分，人体可全量、平衡、迅速吸收，具有显著的改善性功能，调节内分泌，增强免疫力，缓解疲劳等保健功效。

也有以酸或碱提取鹿血有效成分的：中国专利CN 101352510 B公开了一种提高机体免疫力的鹿血酒，其特征在于，它由以下重量配比的原料制成，鹿血1-15重量份；山药60-200重量份；茯苓30-90重量份；枸杞子30-90重量份；人参、党参或西洋参10-40重量份；白酒300-800重量份；纯净水50—400重量份。该发明鹿血酒是一种新的、配方简单的且口感较好的保健酒，它具有提高机体免疫力的保健功能。制备方法科学、先进，能有效地提取出原料中的各种有效成份，去除杂质，使制成的鹿血酒口感极佳，无明显药味。

上述公开的专利无论是浸泡、酶解还是酸碱提取均存在有效成分利用率低、口感差、血腥味浓、稳定性差、易变质等缺陷。尚未见以鹿血和鹿鞭发酵制备鹿血酒的报道。

发明内容

本发明的目的是以鹿血、鹿鞭为主要原料，提供一种有效成分利用率高、稳定性好、口感适宜的鹿血酒。

为了达到上述目的，本发明采用以下技术方案：

一种鹿血酒的制备方法，包括以下步骤：

1)取新鲜鹿血和鹿鞭，立刻分别冻干、粉碎，按质量比1-3:0.7-2均匀混合得冻干粉；

2)将冻干粉与碳酸氢钠、纯净水按质量比1:0.2-1:5-8均匀混合，调节混合液pH值为4-6，升温至45-55℃，加入冻干粉质量0.1-0.3％的复合酶，混合均匀，保温，于真空度-0.07--0.09MPa脱气脱腥10-15min，静置，继续酶解45-65min，过滤，滤渣备用，滤液敞口煮沸4-6min，迅速降至室温，向滤液中加入食用酒精，调整滤液酒精度为50-60％，密封，静置18-24h得浸泡液；

3)以步骤1)所述鹿血质量为基数，取1.5-2.5倍的黑枸杞，2-3倍的枸杞，2-3倍的桑葚，4-6倍的红枣，4-6倍的龙眼，5-7倍的甘草，分别清洗、沥干，与步骤2)所述滤渣混合后浸泡在质量百分比为8-12％的丝胶肽溶液中10-15min,取出，于-18--22℃冷冻30-50min后立即进行粉碎，冷冻料层厚度3-5cm，粉碎物粒径0.3-0.5mm,接着加入粉碎物质量4-6倍的水，用乳酸调节pH值为3.5-5.5，得混合液，加入其质量0.1-0.3％的混合酶，于40-50℃酶解30-50min，取酶解液质量0.5-1％的蛋清，放入搅拌机中于转速800-1000r/min搅拌10-12min,直至蛋清全部成为泡沫得到蛋清泡沫，将蛋清泡沫加入酶解液中，常压煮沸10-20min,迅速降至28-30℃，80-100目筛网过滤，向滤液中加入葡萄糖，使葡萄糖浓度为100-200g/L,得发酵基质，保温，加入发酵基质质量5-10％的酿酒酵母种子液进行发酵，通气量4-6L/min,罐压0.01-0.03MPa，400-600rpm,恒pH6.0条件下进行发酵培养，发酵至20-30h时，一次性添加终浓度为24-26mmol/L的L-半胱氨酸，继续发酵，当发酵液残糖降至30-50g/L时终止发酵，除菌过滤得最终发酵液；

4)将步骤2)浸泡液和步骤3)最终发酵液均匀混合，加入混合液质量0.02-0.06％的蒿草籽粉，调整酒精度为23-54％，控制混合料液温度为25-35℃，首先于功率200-400W,频率20-24KHz条件下进行超声波处理10-20min,然后通过连续式高压脉冲处理室处理，密封，-10--15℃冷冻8-10d,于2-5℃微滤即得鹿血酒。

进一步地，步骤1)所述冻干过程的保护剂含有质量比5-10％的丝胶肽。

进一步地，步骤2)所述复合酶质量组成为：鹿胃肠提取物:胃蛋白酶:风味蛋白酶:菠萝蛋白酶:脂肪酶＝8-10:3-5:2-4:1-3:0.3-0.5。

优选地，所述鹿胃肠提取物的制备方法，包括如下步骤：剥取新鲜鹿胃基底部粘膜和小肠,清洗干净，分别绞碎，按质量比5-9:1-4混匀得混料，加入其质量50-80％的水和1.8-2％的盐酸，加热至48-52℃，保温，消化3-4h,过滤，滤液置真空离心机中8000-10000r/min真空离心5-7min，自上而下分离得到游离脂肪、乳状液、酶液和残渣，将得到的乳状液控制温度为45-55℃，添加乳状液质量0.4-0.6％的生物破乳剂破乳20-40min,破乳后于6000-8000r/min真空离心2次，间隔时间1-3h，每次离心10-15min，合并三次离心得到的酶液，减压浓缩、冻干、粉碎，过80-100目筛即得鹿胃肠提取物；

更优选地，所述粘膜直径8-12cm，厚2-3mm；

更优选地，所述真空离心条件为温度10-14℃、真空度-0.02--0.04MPa；

更优选地，所述生物破乳剂的质量组成为：糖脂类:脂肽类＝2-4:1-3；

更优选地，所述糖脂类生物破乳剂的质量组成为：鼠李糖脂:烷基糖苷＝1-3:1-2。

进一步地，步骤3)所述混合酶为纤维素酶、蛋白酶、果胶酶、淀粉酶、脂肪酶按质量比2-4:1-3:1-3:1-2:1-2均匀混合；

进一步地，步骤3)所述最终发酵液中GSH的含量为3268-3308mg/L；

进一步地，步骤3)所述酿酒酵母种子液培养方法为：取酿酒酵母斜面菌种一环，接入装有30mL摇瓶培养基的250mL摇瓶中150rpm,30℃培养30h得酿酒酵母种子液；

所述摇瓶培养基质量组成为：(NH₄)₂SO₄ 6g/L，葡萄糖35g/L，K₂HPO₄·3H₂O 3g/L，KH₂PO₄ 0.5g/L，酵母粉11g/L，MnSO₄ 0.1g/L，KCL 0.1g/L，FeSO₄ 0.1g/L，MgSO₄·7H₂O0.1g/L，余量为水，pH 6.0；

所述酿酒酵母菌株具体为酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)tlj2016，该菌株已于保藏于2016年7月15日中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.12789，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编100101；

所述酿酒酵母tlj2016是从一株诱变菌株，经过诱变后获得的菌株tlj2016其葡萄糖耐受能力以及L-半胱氨酸耐受能力均得到提高，一方面在高浓度葡萄糖培养下能够提高细胞密度，另一方面L-半胱氨酸耐受能力的提高将有利于GSH在胞内大量合成，从而提高菌株大规模生产GSH的能力。

进一步地，步骤4)所述高压脉冲电场处理条件为电场强度80-100kV/cm、脉冲数40-50；

进一步地，步骤4)所述蒿草籽粉的制备方法，包括如下步骤：将蒿草籽装盘，首先于电场强度1-3kV/cm高压静电处理5-7min；接着在浓度为3-5mg/L的水杨酸溶液中室温浸泡2-5h，同时在电场强度2-6kV/cm，脉冲时间50-100μs,脉冲频率100-150Hz条件下进行高压脉冲电场处理；漂洗、沥干，于3-5℃静置18-24h,然后依次在1-3℃冷藏2-4d,-3--5℃冷冻1-3d、-15--18℃冷冻10-15h,立即放在室外自然光照2-4h后立即进行粉碎，冻干，过80-100目筛即得蒿草籽粉。

本发明另一目的是提供上述方法制得的鹿血酒。

有益效果：

本发明以新鲜鹿血和鹿鞭为主要原料，科学复配黑枸杞、枸杞、桑葚、红枣、龙眼、甘草等，全程采用冻干、复合酶生物酶解、真空脱气脱腥、冷冻、功能性酿酒酵母低温发酵、超声处理、高压脉冲电场处理等低温加工技术，有效提高了鹿产品有效成分的利用率，降低了营养及保健物质的损失，最大限度地保留了鹿产品的原始色泽、风味、生物活性成分和营养成物质含量。1)对鹿产品进行冻干，尤其采用丝胶肽作为保护剂，可最大限度地保留鹿产品生物活性肽的含量，减少冷冻损失；2)将真空脱气与复合酶生物酶解有机结合，不仅降低了酶解液的溶解氧含量，有效防止生物活性成分氧化变质，而且除去了酶解液中鹿产品的腥味，提升了保健酒的口感，增加了食欲，碳酸氢钠的科学复配，结合酶解和敞口煮沸工艺，进一步促进了鹿产品脱腥的效果，提高了鹿产品成品酒的非生物稳定性和透明度，其中产生脂肪酸和阳离子还可显著促进保健酒的陈化；3)将鹿产品提取后的残渣和辅料科学复配，添加功能性酿酒酵母发酵，不仅提高了名贵药材的原料的利用率，降低了生产成本，而且提高了发酵液中谷胱甘肽的含量，增强了鹿产品酒的抗氧化性，延长了产品的保质期。4)添加功能性天然蒿草籽粉作为澄清剂和冷冻保护剂，结合超声、高压脉冲电场崔陈和冷冻贮藏工艺，可进一步去除沉淀前提物和冷浑浊，提高成品酒中酒精与水、可溶性物质的缔结度，提升成品酒口感、风味和柔和度，缩短陈化时间，提高了产品的质量和稳定性，延长了保质期。最终制得一种无腥味、稳定性强、口感协调、醇厚、柔和、绵长，风味适宜、生物活性物质和营养价值高、保健功效好的澄清透明的鹿血酒。1)感官品评试验表明：本发明制备的鹿血酒从外观、质地、风味和口感任何一方面都要明显优于市售鹿血酒，特别是外观澄明度高，口感协调、醇厚、柔和、绵长，风味适宜，无腥味，同时也适合不同年龄段、不同消费层次的消费者饮用。2)抗疲劳、提高免疫力试验表明：a.本发明G3～G5鹿血酒均能延长小鼠负重游泳时间(P＜0.01)，且效果明显优于其它G1～G2的鹿血酒；b.生化检测方面显示，本发明G3～G5鹿血酒各剂量组均能减少运动后小鼠血清中葡萄糖无氧酵解所产生的乳酸含量，与对照组比较有显著性差异(P＜0.05)，而其它G1～G2的鹿血酒虽然也能减少运动后小鼠血清中葡萄糖无氧酵解所产生的乳酸含量，但与对照组比较，无统计学差异(P＞0.05)；c.本发明G3～G5鹿血酒各剂量组均能显著提高小鼠肝脏中糖原的储备(P＜0.01)，且效果明显优于其它G1～G2的鹿血酒；d.高尿酸模型发现，本发明G3～G5鹿血酒能显著降低小鼠游泳后血清中尿素的含量(P＜0.01)，且效果明显优于其它G1～G2鹿血酒。3)抗氧化性试验表明：本发明的鹿血酒对羟自由基的清除能力显著。且随着浓度的增加而增大。当浓度为16mg/mL时，清除率可达到98.23％，较市售的鹿血酒的清除率显著提高了35.92％，故本发明的鹿血酒具有很强的抗氧化功能。显著提高了鹿血酒的生化稳定性，提高了鹿血酒的储藏稳定性，延长了产品的保质期。4)储藏稳定性试验表明：本发明鹿血酒和市售鹿血酒相比澄明度高，稳定性强，外观质量较好，随着时间的延长，鹿血酒液相仍然相对稳定，可明显提高产品的货架期，提高消费者的购买欲，提高市场竞争力。按照鹿血酒的使用及药效标准，本发明鹿血酒保质期至少在5年以上，同时也说明本发明内在质量较好，饮用效果安全、稳定。具体试验效果见实施例4-10。具体技术原理如下：

1.本发明将鹿产品提取残渣和辅料科学复配，添加功能性酿酒酵母tlj2016低温发酵，发酵液中GSH终浓度达到3268-3308mg/L，不仅提高了鹿血酒的生物活性肽水平，而且提高了鹿血酒的生物活性和抗氧化性，极大地增强了鹿血酒的功能特性，酿酒酵母tlj2016除具备普通酵母的益生性外还具有以下功能特性：1)对葡萄糖的耐受能力达到300g/L，利于其在高浓度葡萄糖条件下生产GSH；2)在5L发酵罐中发酵生产GSH终浓度达到3308mg/L；3)耐受L-半胱氨酸的能力特强，在5mmol/L L-半胱氨酸作用下仍能缓慢生长，在40mmol/LL-半胱氨酸作用下仍能保持GSH大量合成；4)耐盐能力达到18％。

2.本发明制备的蒿草籽粉是以盐生植物蒿草的种子蒿草籽为原料而制备的，蒿草籽(蒿草种子)富含抗冻蛋白，经高压静电处理、高压脉冲电场辅助水杨酸诱导、低温分段胁迫处理和自然光照有机结合，使得本身含有抗冻基质的活性种子在外界环境的胁迫和诱导下，抗冻基质成分得到了最全面、最丰富的合成和积累，提高了抗冻蛋白的含量，将其在崔陈工序加入，可与酒体中的沉淀前提物颗粒快速缠绕、络合成大颗粒自然沉降，澄清效果非常显著，优于现有的任何单一或复配的澄清剂，产生了意外的效果，同时，降低了在后续冷冻贮藏过程中营养剂生物活性物质的冷冻损失，进而提高了鹿血酒中营养和生物活性物质的抗冻效果和稳定性，延长了产品的保质期。

3.本发明制备的鹿胃肠提取物以新鲜鹿胃肠为原料，经低温酸消化、生物破乳剂破乳和真空离心分离，可快速、有效、最大限度地提取原料中的源酶，提高了胃肠源酶的含量，缩短了提取时间，提高了提取效率，胃肠源酶含有最原始的动物(鹿)胃蛋白酶和肠道酶，最适合水解鹿血和鹿鞭中的活性蛋白为生物活性肽，相对于现有的植物或微生物源酶，其底物专一性更强、催化效率更高、水解效果更好，与其它酶制剂科学复配，协同效果更加显著。

需要说明的是本发明的技术效果是各组分技术特征和方法特征相互协同、相互作用的结果，并非简单的技术特征(组分功能)的叠加，各组分技术特征的有机结合和协同产生的效果远远超过各单一技术特征功能和效果的叠加，具有较好的先进性和实用性。

具体实施方式

下面通过具体的实施方案叙述本发明。除非特别说明，本发明中所用的技术手段均为本领域技术人员所公知的方法。另外，实施方案应理解为说明性的，而非限制本发明的范围，本发明的实质和范围仅由权利要求书所限定。对于本领域技术人员而言，在不背离本发明实质和范围的前提下，对这些实施方案中的物料成分和用量进行的各种改变或改动也属于本发明的保护范围。

实施例1

一种鹿血酒的制备方法，包括以下步骤：

1)取新鲜鹿血和鹿鞭，立刻分别冻干、粉碎，按质量比1:0.7均匀混合得冻干粉；

2)将冻干粉与碳酸氢钠、纯净水按质量比1:0.2:5均匀混合，调节混合液pH值为4，升温至45℃，加入冻干粉质量0.1％的复合酶，混合均匀，保温，于真空度-0.07MPa脱气脱腥10min，静置，继续酶解45min，过滤，滤渣备用，滤液敞口煮沸4min，迅速降至室温，向滤液中加入食用酒精，调整滤液酒精度为50％，密封，静置18h得浸泡液；

3)以步骤1)所述鹿血质量为基数，取1.5倍的黑枸杞，2倍的枸杞，2倍的桑葚，4倍的红枣，4倍的龙眼，5倍的甘草，分别清洗、沥干，与步骤2)所述滤渣混合后浸泡在质量百分比为8％的丝胶肽溶液中10min,取出，于-18℃冷冻30min后立即进行粉碎，冷冻料层厚度3cm，粉碎物粒径0.3mm,接着加入粉碎物质量4倍的水，用乳酸调节pH值为3.5，得混合液，加入其质量0.1％的混合酶，于40℃酶解30min，取酶解液质量0.5％的蛋清，放入搅拌机中于转速800r/min搅拌10min,直至蛋清全部成为泡沫得到蛋清泡沫，将蛋清泡沫加入酶解液中，常压煮沸10min,迅速降至28℃，80目筛网过滤，向滤液中加入葡萄糖，使葡萄糖浓度为100g/L,得发酵基质，保温，加入发酵基质质量5％的酿酒酵母种子液进行发酵，通气量4L/min,罐压0.01MPa，400rpm,恒pH6.0条件下进行发酵培养，发酵至20h时，一次性添加终浓度为24mmol/L的L-半胱氨酸，继续发酵，当发酵液残糖降至30g/L时终止发酵，除菌过滤得最终发酵液；

4)将步骤2)浸泡液和步骤3)最终发酵液均匀混合，加入混合液质量0.02％的蒿草籽粉，调整酒精度为23％，控制混合料液温度为25℃，首先于功率200W,频率20KHz条件下进行超声波处理10min,然后通过连续式高压脉冲处理室处理，密封，-10℃冷冻8d,于2℃微滤即得鹿血酒。

步骤1)所述冻干过程的保护剂含有质量比5％的丝胶肽。

步骤2)所述复合酶质量组成为：鹿胃肠提取物:胃蛋白酶:风味蛋白酶:菠萝蛋白酶:脂肪酶＝8:3:2:1:0.3。

所述鹿胃肠提取物的制备方法，包括如下步骤：剥取新鲜鹿胃基底部粘膜和小肠,清洗干净，分别绞碎，按质量比5:1混匀得混料，加入其质量50％的水和1.8％的盐酸，加热至48℃，保温，消化3h,过滤，滤液置真空离心机中8000r/min真空离心5min，自上而下分离得到游离脂肪、乳状液、酶液和残渣，将得到的乳状液控制温度为45℃，添加乳状液质量0.4％的生物破乳剂破乳20min,破乳后于6000r/min真空离心2次，间隔时间1h，每次离心10min，合并三次离心得到的酶液，减压浓缩、冻干、粉碎，过80目筛即得鹿胃肠提取物；

所述粘膜直径8cm，厚2mm；

所述真空离心条件为温度10℃、真空度-0.02MPa；

所述生物破乳剂的质量组成为：糖脂类:脂肽类＝2:1；

所述糖脂类生物破乳剂的质量组成为：鼠李糖脂:烷基糖苷＝1:1。

步骤3)所述混合酶为纤维素酶、蛋白酶、果胶酶、淀粉酶、脂肪酶按质量比2:1:1:1:1均匀混合；

步骤3)所述最终发酵液中GSH的含量为3268mg/L；

步骤3)所述酿酒酵母种子液培养方法为：取酿酒酵母斜面菌种一环，接入装有30mL摇瓶培养基的250mL摇瓶中150rpm,30℃培养30h得酿酒酵母种子液；

所述酿酒酵母保藏编号为CGMCC No.12789；

步骤4)所述高压脉冲电场处理条件为电场强度80kV/cm、脉冲数40；

步骤4)所述蒿草籽粉的制备方法，包括如下步骤：将蒿草籽装盘，首先于电场强度1kV/cm高压静电处理5min；接着在浓度为3mg/L的水杨酸溶液中室温浸泡2h，同时在电场强度2kV/cm，脉冲时间50μs,脉冲频率100Hz条件下进行高压脉冲电场处理；漂洗、沥干，于3℃静置18h,然后依次在1℃冷藏2d,-3℃冷冻1d、-15℃冷冻10h,立即放在室外自然光照2h后立即进行粉碎，冻干，过80目筛即得蒿草籽粉。

实施例2

一种鹿血酒的制备方法，包括以下步骤：

1)取新鲜鹿血和鹿鞭，立刻分别冻干、粉碎，按质量比2:1.3均匀混合得冻干粉；

2)将冻干粉与碳酸氢钠、纯净水按质量比1:0.6:6.5均匀混合，调节混合液pH值为5，升温至50℃，加入冻干粉质量0.2％的复合酶，混合均匀，保温，于真空度-0.08MPa脱气脱腥12min，静置，继续酶解55min，过滤，滤渣备用，滤液敞口煮沸5min，迅速降至室温，向滤液中加入食用酒精，调整滤液酒精度为55％，密封，静置21h得浸泡液；

3)以步骤1)所述鹿血质量为基数，取2倍的黑枸杞，2.5倍的枸杞，2.5倍的桑葚，5倍的红枣，5倍的龙眼，6倍的甘草，分别清洗、沥干，与步骤2)所述滤渣混合后浸泡在质量百分比为10％的丝胶肽溶液中12min,取出，于-20℃冷冻40min后立即进行粉碎，冷冻料层厚度4cm，粉碎物粒径0.4mm,接着加入粉碎物质量5倍的水，用乳酸调节pH值为4.5，得混合液，加入其质量0.2％的混合酶，于45℃酶解35min，取酶解液质量0.8％的蛋清，放入搅拌机中于转速900r/min搅拌11min,直至蛋清全部成为泡沫得到蛋清泡沫，将蛋清泡沫加入酶解液中，常压煮沸15min,迅速降至29℃，90目筛网过滤，向滤液中加入葡萄糖，使葡萄糖浓度为150g/L,得发酵基质，保温，加入发酵基质质量8％的酿酒酵母种子液进行发酵，通气量5L/min,罐压0.02MPa，500rpm,恒pH6.0条件下进行发酵培养，发酵至25h时，一次性添加终浓度为25mmol/L的L-半胱氨酸，继续发酵，当发酵液残糖降至40g/L时终止发酵，除菌过滤得最终发酵液；

4)将步骤2)浸泡液和步骤3)最终发酵液均匀混合，加入混合液质量0.04％的蒿草籽粉，调整酒精度为38％，控制混合料液温度为30℃，首先于功率300W,频率22KHz条件下进行超声波处理15min,然后通过连续式高压脉冲处理室处理，密封，-12℃冷冻9d,于4℃微滤即得鹿血酒。

步骤1)所述冻干过程的保护剂含有质量比8％的丝胶肽。

步骤2)所述复合酶质量组成为：鹿胃肠提取物:胃蛋白酶:风味蛋白酶:菠萝蛋白酶:脂肪酶＝9:4:3:2:0.4。

所述鹿胃肠提取物的制备方法，包括如下步骤：剥取新鲜鹿胃基底部粘膜和小肠,清洗干净，分别绞碎，按质量比7:3混匀得混料，加入其质量65％的水和1.9％的盐酸，加热至50℃，保温，消化3.5h,过滤，滤液置真空离心机中9000r/min真空离心6min，自上而下分离得到游离脂肪、乳状液、酶液和残渣，将得到的乳状液控制温度为50℃，添加乳状液质量0.5％的生物破乳剂破乳30min,破乳后于7000r/min真空离心2次，间隔时间2h，每次离心12min，合并三次离心得到的酶液，减压浓缩、冻干、粉碎，过90目筛即得鹿胃肠提取物；

所述粘膜直径10cm，厚2.5mm；

所述真空离心条件为温度12℃、真空度-0.03MPa；

所述生物破乳剂的质量组成为：糖脂类:脂肽类＝3:2；

所述糖脂类生物破乳剂的质量组成为：鼠李糖脂:烷基糖苷＝2:1.5。

步骤3)所述混合酶为纤维素酶、蛋白酶、果胶酶、淀粉酶、脂肪酶按质量比3:2:2:1.5:1.5均匀混合；

步骤3)所述最终发酵液中GSH的含量为3308mg/L；

所述酿酒酵母保藏编号为CGMCC No.12789；

步骤4)所述高压脉冲电场处理条件为电场强度90kV/cm、脉冲数45；

步骤4)所述蒿草籽粉的制备方法，包括如下步骤：将蒿草籽装盘，首先于电场强度2kV/cm高压静电处理6min；接着在浓度为4mg/L的水杨酸溶液中室温浸泡4h，同时在电场强度4kV/cm，脉冲时间70μs,脉冲频率120Hz条件下进行高压脉冲电场处理；漂洗、沥干，于4℃静置21h,然后依次在2℃冷藏3d,-4℃冷冻2d、-16℃冷冻12h,立即放在室外自然光照3h后立即进行粉碎，冻干，过90目筛即得蒿草籽粉。

实施例3

一种鹿血酒的制备方法，包括以下步骤：

1)取新鲜鹿血和鹿鞭，立刻分别冻干、粉碎，按质量比3:2均匀混合得冻干粉；

2)将冻干粉与碳酸氢钠、纯净水按质量比1:1:8均匀混合，调节混合液pH值为6，升温至55℃，加入冻干粉质量0.3％的复合酶，混合均匀，保温，于真空度-0.09MPa脱气脱腥15min，静置，继续酶解65min，过滤，滤渣备用，滤液敞口煮沸6min，迅速降至室温，向滤液中加入食用酒精，调整滤液酒精度为60％，密封，静置24h得浸泡液；

3)以步骤1)所述鹿血质量为基数，取2.5倍的黑枸杞，3倍的枸杞，3倍的桑葚，6倍的红枣，6倍的龙眼，7倍的甘草，分别清洗、沥干，与步骤2)所述滤渣混合后浸泡在质量百分比为12％的丝胶肽溶液中15min,取出，于-22℃冷冻50min后立即进行粉碎，冷冻料层厚度5cm，粉碎物粒径0.5mm,接着加入粉碎物质量6倍的水，用乳酸调节pH值为5.5，得混合液，加入其质量0.3％的混合酶，于50℃酶解50min，取酶解液质量1％的蛋清，放入搅拌机中于转速1000r/min搅拌12min,直至蛋清全部成为泡沫得到蛋清泡沫，将蛋清泡沫加入酶解液中，常压煮沸20min,迅速降至30℃，100目筛网过滤，向滤液中加入葡萄糖，使葡萄糖浓度为200g/L,得发酵基质，保温，加入发酵基质质量10％的酿酒酵母种子液进行发酵，通气量6L/min,罐压0.03MPa，600rpm,恒pH6.0条件下进行发酵培养，发酵至30h时，一次性添加终浓度为26mmol/L的L-半胱氨酸，继续发酵，当发酵液残糖降至50g/L时终止发酵，除菌过滤得最终发酵液；

4)将步骤2)浸泡液和步骤3)最终发酵液均匀混合，加入混合液质量0.06％的蒿草籽粉，调整酒精度为54％，控制混合料液温度为35℃，首先于功率400W,频率24KHz条件下进行超声波处理20min,然后通过连续式高压脉冲处理室处理，密封，-15℃冷冻10d,于5℃微滤即得鹿血酒。

步骤1)所述冻干过程的保护剂含有质量比10％的丝胶肽。

步骤2)所述复合酶质量组成为：鹿胃肠提取物:胃蛋白酶:风味蛋白酶:菠萝蛋白酶:脂肪酶＝10:5:4:3:0.5。

所述鹿胃肠提取物的制备方法，包括如下步骤：剥取新鲜鹿胃基底部粘膜和小肠,清洗干净，分别绞碎，按质量比9:4混匀得混料，加入其质量80％的水和2％的盐酸，加热至52℃，保温，消化4h,过滤，滤液置真空离心机中10000r/min真空离心7min，自上而下分离得到游离脂肪、乳状液、酶液和残渣，将得到的乳状液控制温度为55℃，添加乳状液质量0.6％的生物破乳剂破乳40min,破乳后于8000r/min真空离心2次，间隔时间3h，每次离心15min，合并三次离心得到的酶液，减压浓缩、冻干、粉碎，过100目筛即得鹿胃肠提取物；

所述粘膜直径12cm，厚3mm；

所述真空离心条件为温度14℃、真空度-0.04MPa；

所述生物破乳剂的质量组成为：糖脂类:脂肽类＝4:3；

所述糖脂类生物破乳剂的质量组成为：鼠李糖脂:烷基糖苷＝3:2。

步骤3)所述混合酶为纤维素酶、蛋白酶、果胶酶、淀粉酶、脂肪酶按质量比4:3:3:2:2均匀混合；

步骤3)所述最终发酵液中GSH的含量为3288mg/L；

所述酿酒酵母保藏编号为CGMCC No.12789；

步骤4)所述高压脉冲电场处理条件为电场强度100kV/cm、脉冲数50；

步骤4)所述蒿草籽粉的制备方法，包括如下步骤：将蒿草籽装盘，首先于电场强度3kV/cm高压静电处理7min；接着在浓度为5mg/L的水杨酸溶液中室温浸泡5h，同时在电场强度6kV/cm，脉冲时间100μs,脉冲频率150Hz条件下进行高压脉冲电场处理；漂洗、沥干，于3-5℃静置24h,然后依次在3℃冷藏4d,-5℃冷冻3d、-18℃冷冻15h,立即放在室外自然光照4h后立即进行粉碎，冻干，过100目筛即得蒿草籽粉。

实施例4 本发明鹿血酒的感官品评试验

邀请24名人员对本发明实施例1制备的鹿血酒与市售两种同类相同生产日期的鹿血酒进行品评，感官打分，其中专业和非专业人员各12名，专业人员青年、中年、老年各4名，男女各半，非专业人员少年、青年、中年、老年各3名，男女各半；打分包括外观(澄明度20分)、质地(协调性25分)、风味(腥味30分)、口感(柔和度25分)四个方面，打分人员独立进行，互不影响，以保证品评结果准确。对品评结果进行了统计，均分值取近似值，保留整数，具体见表1：

表1：感官品评统计结果

注：同一行内标不同小写字母表示差异显著(P＜0.05)，标不同大写字母表示差异极显著(P＜0.01)，标有相同字母表示差异不显著(P＞0.05)。

以上结果表明，本发明制备的鹿血酒从外观、质地、风味和口感任何一方面都要明显优于市售鹿血酒，特别是外观澄明度高，口感协调、醇厚、柔和、绵长，风味适宜，无腥味，同时也适合不同年龄段、不同消费层次的消费者饮用。

需要说明的是：本发明实施例2-3制备的鹿血酒同样具有上述实验效果，各实施例之间及与上述实验效果差异性不大。

实施例5 本发明鹿血酒对机体免疫力的影响

1实验目的

通过运动耐力测试(小鼠游泳试验)，验证本发明鹿血酒的提高免疫力、抗疲劳作用。

2实验材料与试剂

2.1供试药物：

市售鹿血酒(G1)；市售鹿血酒(G2)；本发明实施例1-3制备的鹿血酒(G3-G5)。

2.2试剂：

肝/肌糖原测试盒，购自南京建成生物制品研究所；浓硫酸(AR)，南京化学试剂有限公司；生理盐水，山东长富洁晶药业有限公司。

3.实验动物

ICR小鼠，♂，清洁级，体重18-22g，由宁夏医科大学比较医学中心提供，实验期间小鼠自由饮食。

4.主要仪器

铝制游泳箱(50cm×50cm×40cm)，铅丝，低温高速离心机：5804R型，Eppendrof公司；水浴锅：DK-S26型，上海精宏实验设备有限公司；电子称：BS224S型，Sartorius公司；秒表，温度计

5.实验分组

5.1剂量分组及受试样品给予时间随机将小鼠分为6组，每组10只，第1组至第5组分别给G1～G5的药物，第6组为空白对照组，给予等体积的双蒸水，每组每日均灌胃1次，灌胃体积为0.2ml/10g，连续给予受试样品30天。

5.2样品配制第1组至第7组：称取2.25g药物样品，用蒸馏水配至150ml；空白对照组：双蒸水150ml。

6.实验方法

6.1负重游泳实验末次给药30min后，置小鼠于游泳箱中，水深不少于30cm，水温25±1℃，鼠尾根部负荷5％体重的铅皮，记录小鼠游泳开始至死亡的时间，作为小鼠游泳时间。

6.2小鼠血清尿素测定末次给药30min后，在温度为30℃的水中不负重游泳90min,休息60min后摘眼球采血0.5mL(不加抗凝剂),置4℃冰箱3h,血凝固后2000r/min离心15min,取血清送宁夏医科大学附属医院检验科检测。

6.3肝糖原的测定末次给药30min后，在温度为25±1℃的水中不负重游泳90min，颈椎脱臼处死小鼠，用生理盐水洗净，并用滤纸吸干水分后，准确称取肝脏100mg，肝糖原检测试剂盒检测小鼠肝糖原含量。

6.4血乳酸的测定末次给药30min后采血，然后不负重在温度为30℃的水中游泳10min后停止。乳酸仪测定方法：分别在游泳前、游泳后、游泳后休息20min后各采血20μL加入40μL破膜液中，立即充分振荡破碎细胞用乳酸仪测定。(血乳酸曲线下面积＝5×(游泳前血乳酸值+3×游泳后0min的血乳酸值+2×游泳后20min的血乳酸值)

7.观察指标负重游泳时间，血乳酸、尿素、肝糖原值

8.统计方法实验数据用表示，采用t检验进行组间比较

9.实验结果

9.1本发明鹿血酒对小鼠体重的影响

各组小鼠在给予G1～G5药物后，前、中，后期体重分别见下表所示,各组小鼠的初始体重和增重体重与对照组比较均无统计学差异(P＞0.05)，表明G1～G5药物均无明显的毒性。实验结果详见表2。

表2负重游泳实验小鼠的初始体重、中期体重和结束体重

9.2本发明鹿血酒对小鼠负重游泳时间的影响

经口给予小鼠G1～G5药物后，G1～G2药物与空白对照组比较，可以明显延长小鼠负重游泳时间，具有显著性差异(P＜0.05)，本发明鹿血酒G3～G5药物与空白对照组比较，可以显著延长小鼠负重游泳时间，具有极显著性差异(P＜0.01)，且明显优于G1～G2药物。结果详见表3。

表3鹿血酒对小鼠负重游泳时间的影响

“*”p<0.05vs空白对照；

“**”p<0.01vs空白对照；

9.3本发明鹿血酒对小鼠运动前后血乳酸的影响

经口给予小鼠本发明的鹿血酒后，本发明鹿血酒G3～G5药物对小鼠运动后血乳酸曲线下面积与对照组比较有统计学差异(P＜0.05)，G1～G2药物组小鼠血乳酸曲线下面积与对照组比较虽有所降低，但并无统计学差异(P＞0.05)。结果见表4。

表4本发明鹿血酒对小鼠运动前后血乳酸水平的影响

“*”p<0.05vs空白对照；

9.4本发明鹿血酒对小鼠肝糖原的影响

经口给予小鼠G1～G5药物后，G1～G2药物与空白对照组比较，小鼠肝糖原含量均有明显的升高，具有显著性差异(P＜0.05)，本发明鹿血酒G3～G5药物与与空白对照组比较，小鼠肝糖原含量均有明显的升高，具有极显著性差异(P＜0.01)，且明显优于G1～G2药物。结果详见表5。

表5本发明鹿血酒对小鼠肝糖原含量的影响

“*”p<0.05vs空白对照；

“**”p<0.01vs空白对照；

9.5本发明鹿血酒对小鼠血清尿素的影响

经口给予小鼠G1～G5药物后，G1～G2药物组与空白对照组比较，小鼠运动后血清尿素含量均有明显的降低，具有显著性差异(P＜0.05)，本发明鹿血酒G3～G5药物与与空白对照组比较，小鼠运动后血清尿素含量均有明显的降低，具有极显著性差异(P＜0.01)，且明显优于G1～G2药物。结果详见表6。

表6本发明鹿血酒对小鼠血清尿素含量的影响

“*”p<0.05vs空白对照；

“**”p<0.01vs空白对照；

10.实验结论

本实验主要通过小鼠负重游泳实验，同时检测小鼠肝糖原的储备来观察本发明鹿血酒提高免疫力、抗疲劳的效果。初步研究结果显示如下：

1、本发明G3～G5鹿血酒均能延长小鼠负重游泳时间(P＜0.01)，且效果明显优于其它G1～G2的鹿血酒。

2、生化检测方面显示，本发明G3～G5鹿血酒各剂量组均能减少运动后小鼠血清中葡萄糖无氧酵解所产生的乳酸含量，与对照组比较有显著性差异(P＜0.05)，而其它G1～G2的鹿血酒虽然也能减少运动后小鼠血清中葡萄糖无氧酵解所产生的乳酸含量，但与对照组比较，无统计学差异(P＞0.05)；

3、本发明G3～G5鹿血酒各剂量组均能显著提高小鼠肝脏中糖原的储备(P＜0.01)，且效果明显优于其它G1～G2的鹿血酒；

4、高尿酸模型发现，本发明G3～G5鹿血酒能显著降低小鼠游泳后血清中尿素的含量(P＜0.01)，且效果明显优于其它G1～G2鹿血酒；

11.结论

上述实验证明本发明鹿血酒能显著提高机体免疫力，提高小鼠的体力和耐力，降低小鼠运动后血清中尿素及乳酸的含量，且能显著提高小鼠肝脏中糖原的储备，有助于缓解运动负荷引起的疲劳；能延长小鼠负重游泳至力竭的时间。

实施例6本发明鹿血酒的抗氧化性能测试

实验采用Fenton反应体系。在试管中加入6mmol/L FeSO₄ 2mL，不同浓度V_C或待测溶液2mL，6mmol/L H₂O₂溶液2mL，摇匀，静置10min，再加入6mmol/L水杨酸-乙醇2mL反应，37℃温浴30min，于510nm测吸光值。

清除率s＝[A₀-(A_i-A_iO)]/A₀×100％

式中：A₀为对照,不加鹿血酒；A_i为某浓度时的吸光值；A_iO为无显色剂时的该浓度的本底值。

表6为对照品VC，市售鹿血酒以及本发明实施例1制备的阿根廷奶油鹿血酒冲液对羟自由基的清除率的对照表

表6羟自由基的清除率的对照表

数据表明，本发明的鹿血酒对羟自由基的清除能力显著。且随着浓度的增加而增大。当浓度为16mg/mL时，清除率可达到98.23％，较市售的鹿血酒的清除率显著提高了35.92％，故本发明的鹿血酒具有很强的抗氧化功能。显著提高了鹿血酒的生化稳定性，提高了鹿血酒的储藏稳定性，延长了产品的保质期。

实施例7本发明鹿血酒储藏稳定性试验

鹿血酒作为一种鹿血、鹿鞭和中草药提取液制备的液体制剂，参照中药液体制剂的稳定性标准，将澄明度确定为鹿血酒的质量稳定性指标，它不仅直接反映了产品的外观质量，亦反映了产品内在质量及稳定性，是鹿血酒最重要质控指标。

澄明度表征方法：澄清透明90-100分；微浊80-89分；浑浊70-79分；较混浊60-69分；严重浑浊50-59分；沉淀49分以下(沉淀颗粒越大、数量越多，分数越低)。

将本发明实施例1制备的鹿血酒和市售同类型、同规格、同生产日期的鹿血酒于室温、通风、避光条件储藏，观察鹿血酒澄明度，每6个月观察记录结果一次，结果见表7：

表7：储藏期鹿血酒澄明度检测结果

时间(月)	6	12	18	24	30	36	42	48	54	总均分
											市售	95	92	80	70	65	58	48	40	30	64.22
本发明	100	99	98	95	94	93	92	90	88	94.33

以上结果表明：本发明鹿血酒和市售鹿血酒相比澄明度高，稳定性强，外观质量较好，随着时间的延长，鹿血酒液相仍然相对稳定，可明显提高产品的货架期，提高消费者的购买欲，提高市场竞争力。按照鹿血酒的使用及药效标准，本发明鹿血酒保质期至少在5年以上，同时也说明本发明内在质量较好，饮用效果安全、稳定。

需要说明的是：本发明实施例1-2制备的鹿血酒同样具有上述实验效果，各实施例之间及与上述实验效果差异性不大。

实施例8 高糖条件下酿酒酵母tlj2016发酵产GSH能力实验

(1)摇瓶培养

取tlj2016斜面菌种一环，接入装有30mL摇瓶培养基的250mL摇瓶中150rpm,30℃培养30h得种子液；

所述摇瓶培养基质量组成为：(NH₄)₂SO₄ 6g/L，葡萄糖35g/L，K₂HPO4·3H₂O 3g/L，KH₂PO₄ 0.5g/L，酵母粉11g/L，MnSO₄ 0.1g/L，KCL 0.1g/L，FeSO₄ 0.1g/L，MgSO₄·7H₂O0.1g/L，余量为水，pH 6.0；

(2)5L发酵罐培养

将种子液按10％接种量，接入装有3L发酵培养基的发酵罐中，30℃,通气量6L/min,罐压0.03MPa，500rpm,恒pH6.0条件下进行发酵培养，发酵至30h时，一次性添加终浓度为25mmol/L的L-半胱氨酸，总发酵时间为50h；

所述发酵培养基质量组成为：(NH₄)₂SO₄ 10g/L，葡萄糖100g/L，K₂HPO₄·3H₂O 8g/L，KH₂PO₄ 0.5g/L，酵母粉11g/L，MnSO₄ 0.1g/L，KCL 0.1g/L，FeSO4 0.1g/L，MgSO₄·7H₂O0.1g/L，余量为水，pH6.0；

发酵结束后，测定发酵液中GSH的含量为3308mg/L.

实施例9 酿酒酵母tlj2016L-半胱氨酸耐受力实验

将出发菌株以及tlj2016斜面菌种各一环，分别接入装有30mL摇瓶培养基的250mL摇瓶中150rpm,30℃培养进行培养，在培养至12h时，向摇瓶中加入不同终浓度的L-半胱氨酸，再培养10h，测定细胞干重，结果表8、9；

摇瓶培养基(g/L)：(NH₄)₂SO₄ 6、葡萄糖20、K₂HPO₄·3H₂O 3、KH₂PO₄ 0.5、酵母粉11、MnSO₄ 0.1、KCL 0.1、FeSO4 0.1、MgSO₄·7H₂O 0.1，pH6.0；

表8：出发菌株L-半胱氨酸耐受力

L-半胱氨酸浓度mmol/L	0	5	10	15	20	40
							出发菌株干重g/L	22.6	15.7	10.2	4.3	2.2	0.8
GSH浓度(mg/L)	35.6	46.7	43.2	40.7	37.9	25.3

表9 tlj2016L-半胱氨酸耐受力

L-半胱氨酸浓度mmol/L	0	5	10	15	20	40
							tlj2016干重g/L	25.7	28.5	23.6	21.2	20.6	18.7
GSH浓度(mg/L)	73.2	98.3	113.5	121.7	127.5	135.8

从表10、11的结果可以看出，对于出发菌株，培养基中添加L-半胱氨酸，细胞停止生长，并且开始自溶，导致GSH增长率随着L-半胱氨酸浓度的升高而降低；而低浓度L-半胱氨酸下，tlj2016仍能够缓慢生长，随着L-半胱氨酸浓度的提高，tlj2016菌株的细胞干重缓慢下降，而GSH浓度持续增长，这一结果将有利于GSH生产过程中通过添加前体氨基酸-L-半胱氨酸提促进GSH的生产。

实施例10 酿酒酵母tlj2016耐盐能力实验

取tlj2016菌液1mL接种菌种于含有不同NaCl浓度的(含量梯度为0％、2％、5％、10％、15％、18％)的10mL YPD液体培养基(pH＝6.5)，置于30℃下分别培养24h，每个处理3个重复。各取1ml样品菌液于9ml生理盐水中混匀，制备稀释度溶液，取0.1ml稀释液于YPD固体平板中涂布，于30℃生化培养箱中倒置培养36小时(每个稀释度做3个平行)记录计算平板上的菌数个数。结果见表10，可知该菌的耐盐浓度为18％，说明酿酒酵母tlj2016不仅可以在常规环境中生存，在高盐条件下依然具有活力，可应用于酱油、腌制品等高盐食品加工过程中耗糖产谷胱甘肽。

表10 耐盐能力检测(×10⁷cfu/ml)

Claims

1.一种鹿血酒的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

4)将步骤2)浸泡液和步骤3)最终发酵液均匀混合，加入混合液质量0.02-0.06％的蒿草籽粉，调整酒精度为23-54％，控制混合料液温度为25-35℃，首先于功率200-400W,频率20-24KHz条件下进行超声波处理10-20min,然后通过连续式高压脉冲处理室处理，密封，-10--15℃冷冻8-10d,于2-5℃微滤即得鹿血酒；

步骤3)所述混合酶为纤维素酶、蛋白酶、果胶酶、淀粉酶、脂肪酶按质量比2-4:1-3:1-3:1-2:1-2均匀混合；

所述酿酒酵母保藏编号为CGMCC No.12789。

2.如权利要求1所述的鹿血酒的制备方法，其特征在于，步骤1)所述冻干过程的保护剂含有质量比5-10％的丝胶肽。

3.如权利要求1所述的鹿血酒的制备方法，其特征在于，步骤2)所述复合酶质量组成为：鹿胃肠提取物:胃蛋白酶:风味蛋白酶:菠萝蛋白酶:脂肪酶＝8-10:3-5:2-4:1-3:0.3-0.5；

所述鹿胃肠提取物的制备方法，包括如下步骤：剥取新鲜鹿胃基底部粘膜和小肠,清洗干净，分别绞碎，按质量比5-9:1-4混匀得混料，加入其质量50-80％的水和1.8-2％的盐酸，加热至48-52℃，保温，消化3-4h,过滤，滤液置真空离心机中8000-10000r/min真空离心5-7min，自上而下分离得到游离脂肪、乳状液、酶液和残渣，将得到的乳状液控制温度为45-55℃，添加乳状液质量0.4-0.6％的生物破乳剂破乳20-40min,破乳后于6000-8000r/min真空离心2次，间隔时间1-3h，每次离心10-15min，合并三次离心得到的酶液，减压浓缩、冻干、粉碎，过80-100目筛即得鹿胃肠提取物。

4.如权利要求3所述的鹿血酒的制备方法，其特征在于，所述粘膜直径8-12cm，厚2-3mm。

5.如权利要求3所述的鹿血酒的制备方法，其特征在于，所述生物破乳剂的质量组成为：糖脂类:脂肽类＝2-4:1-3；所述糖脂类生物破乳剂的质量组成为：鼠李糖脂:烷基糖苷＝1-3:1-2。

6.如权利要求3所述的鹿血酒的制备方法，其特征在于，所述真空离心条件为温度10-14℃、真空度-0.02--0.04MPa。

7.如权利要求1所述的鹿血酒的制备方法，其特征在于，步骤3)所述酿酒酵母种子液培养方法为：取酿酒酵母斜面菌种一环，接入装有30mL摇瓶培养基的250mL摇瓶中150rpm,30℃培养30h得酿酒酵母种子液；所述摇瓶培养基质量组成为：(NH₄)₂SO₄ 6g/L，葡萄糖35g/L，K₂HPO₄·3H₂O 3g/L，KH₂PO₄ 0.5g/L，酵母粉11g/L，MnSO₄ 0.1g/L，KCL 0.1g/L，FeSO₄ 0.1g/L，MgSO₄·7H₂O 0.1g/L，余量为水，pH 6.0。

8.如权利要求1所述的鹿血酒的制备方法，其特征在于，步骤4)所述高压脉冲电场处理条件为电场强度80-100kV/cm、脉冲数40-50。

9.如权利要求1所述的鹿血酒的制备方法，其特征在于，步骤4)所述蒿草籽粉的制备方法，包括如下步骤：将蒿草籽装盘，首先于电场强度1-3kV/cm高压静电处理5-7min；接着在浓度为3-5mg/L的水杨酸溶液中室温浸泡2-5h，同时在电场强度2-6kV/cm，脉冲时间50-100μs,脉冲频率100-150Hz条件下进行高压脉冲电场处理；漂洗、沥干，于3-5℃静置18-24h,然后依次在1-3℃冷藏2-4d,-3--5℃冷冻1-3d、-15--18℃冷冻10-15h,立即放在室外自然光照2-4h后立即进行粉碎，冻干，过80-100目筛即得蒿草籽粉。

10.如权利要求1-9任一方法制得的鹿血酒。