CN106728579A - 一种用于治疗仔猪流行性腹泻的中药组合物 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种用于治疗仔猪流行性腹泻的中药组合物，是由贯叶金丝桃、黄芪、石菖蒲和蜘蛛香四种中药组成。本中药组合物制成的散剂、口服液和颗粒剂，可用于治疗仔猪流行性腹泻、仔猪大肠杆菌病和传染性胃肠炎。

Description

一种用于治疗仔猪流行性腹泻的中药组合物

技术领域：

本发明属于兽用中药领域，特别是一种用于治疗仔猪流行性腹泻的中药组合物。

背景技术：

仔猪流行性腹泻是严重危害养猪业的疾病，症状以腹泻为主，发病后严重影响动物采食量、饲料转化率、生产能力以及畜产品的品质，每年都给养殖户造成大量损失。发生此病原因很复杂，有生理的原因：仔猪消化系统健全，抗病力低下；环境的原因：温湿度的条件不适或环境中存在传染源；营养的原因：营养组成不合理造成仔猪发育不良等。

目前疫苗不能有效预防仔猪流行性腹泻，抗生素只能防止继发感染却不能有效控制病毒传播，因此目前这种疾病缺少有效的防治手段。发明者在当地经验方的基础上研制出一种有效治疗仔猪流行性腹泻的中药组合物。

发明内容：

本发明是一种治疗仔猪流行性腹泻和传染性胃肠炎的中药组合物，其特征在于本中药组合物是由贯叶金丝桃、黄芪、石菖蒲和蜘蛛香四种中药组成。

贯叶金丝桃：性寒，味辛。具有疏肝解郁，清热利湿，消肿通乳的功效，属清清热解毒药。具有创伤治疗、抗病毒、抗细菌、抗真菌、抗抑郁、增强免疫及抗肿瘤的作用，另外还具有抗氧化、镇痉、扩张血管的功能。

黄芪：甘，微温，具有补气升阳，固表止汗，利水消肿，生津养血，行滞通痹，托毒排脓，敛疮生肌的功效。用于气虚乏力，食少便溏，中气下陷，久泻脱肛，便血崩漏，表虚自汗，痈疽难溃，久溃不敛，血虚萎黄，内热消渴等症。《本经》记载：“主痈疽，久败疮，排脓止痛。补虚，小儿百病。”《日华子本草》记载：“助气壮筋骨，长肉补血。”

石菖蒲：辛、温。具有开窍，豁痰，理气，活血，散风，去湿的功效，可治癫痫，痰厥，热病神昏，健忘，气闭耳聋，心胸烦闷，胃痛，腹痛，风寒湿痹，痈疽肿毒，跌打损伤等症。具化湿开胃，开窍豁痰，醒神益智的功效。可治脘痞不饥、噤口下痢、神昏癫痫、健忘耳聋等症。

蜘蛛香：微苦、辛、温。具有理气止痛，消食止泻，驱风祛湿，镇静安神的功效。现代药理学研究表明有抗菌、抗病毒、抗焦虑、抗抑郁、镇静、催眠、镇痛、降压、改善胃肠道、增强心肌收缩力、减少冠脉流出量等作用。主要用于治疗脘腹胀痛，食积不化，腹泻痢疾，风湿痹痛，腰膝酸软，失眠等症。

仔猪流行性腹泻这种疾病用现代兽医理论来解释是仔猪发育不健全，免疫功能低下，易感染流行性腹泻病毒所致；用传统中兽医理论来解释是由仔猪腹胃虚弱，脏腑功能不足，正气不旺， 当受到湿热之邪的侵袭时，很容易染病；根据此类疾病的发病机理来确定治疗原则，要采用补气健脾、清热利湿、止泄类中药来治疗，在此原则指导下，补气药选择了黄芪，清热利湿药选择了贯叶金丝桃，健脾消食，袪湿止泻药选择蜘蛛香，又选了一味化湿开胃药石菖蒲，四药合用，共同起到补气健脾，清热利湿，开胃止泄的功效。此方用于治疗湿热之邪所致的仔猪腹泻完全符合中兽医理论，同时现代药理学研究也表明，所选的四种药材提取物或其单体成分有抗病原微生物或调理肠胃功能的作用，因此说本方用于治疗仔猪流行性腹泻，即符合传统中兽医理论，也符合现代药理学研究。

我们在中兽医理论指导下选药组方，又经过大量的临床试验后，最后确定本中药组合物各组份的最佳比例为：贯叶金丝桃5份，黄芪2份，石菖蒲1份，蜘蛛香5份。经实证，按此比例制成的散剂、口服液、颗粒剂均有治疗仔猪流行性腹泻的作用，由此推断，用此组分制成的其它剂型，包括片剂、丸剂、注射剂、灌注液，浇泼剂，涂膜剂、冻干剂和膏剂等也有相似的作用。

本中药组合物散剂的制备工艺：按处方取药材，粉碎成80目以上细粉，混合均匀，分装，即成。

本中药组合物的清膏制备工艺：按处方称取贯叶金丝桃、蜘蛛香、黄芪药材后，分别用10、8、8倍60%乙醇回流提取3次，每次60分钟，合并滤液，回收乙醇，减压浓缩至密度为1.20-1.25（60℃），此为中药清膏。

提取石菖蒲挥发油工艺：按处方量取石菖蒲，加入10倍量水，按蒸馏法提取按发油4小时以上至油量不再增加，收集挥发油，密封低温保存。

本中药组合物口服液的制备工艺：在中药清膏中加入适量增溶剂、防腐剂和注射用水，适当混合后，再加入处方量的挥发油，加入防腐剂，最后用注射用水定容到含生药量1.0g/ml，搅拌均匀，调PH值至5-7，过滤、分装、灭菌。

本中药组合物的颗粒剂型的制备工艺为：先用环糊精包合处方量的挥发油，然后向中药清膏中加入环糊精包合的挥发油和适量糖粉、糊精，制粒，干燥，整粒、装袋，即得颗粒产品。

本发明还提供了一种用于治疗仔猪流行性腹泻的中药组合物的鉴定方法，鉴定步骤包括薄层鉴别法和液相色谱法。

本发明所述薄层鉴别法用于鉴别贯叶金丝桃、黄芪、石菖蒲或蜘蛛香四种药材中的一种或几种药材。

本发明所述液相色谱法用于测定金丝桃苷的含量。

具体实施方式：

处方：贯叶金丝桃500g，蜘蛛香500g,黄芪200g，石菖蒲100g。

实施例1，本中药组合物口服液制备：按处方称取四种药材，石菖蒲用蒸馏法提取挥发油冷藏备用；其余三位药材分别用10、8、8倍60%乙醇回流提取3次，每次60分钟，合并滤液，回收乙醇，减压浓缩至密度为1.20-1.25（60℃）的中药清膏，进行半成品检验，合格后冷藏备用。在中药清膏中加入适量增溶剂、乳化剂和适量注射用水，混合后再加入石菖蒲挥发油后混匀，加入适量防腐剂，用注射用水定容至1g/ml，调PH值至5-7之间，过滤，分装，灭菌。

实施例2，本中药组合物颗粒剂制备：按处方称取四种药材，石菖蒲用蒸馏法提取挥发油，再用适量环糊精包合后冷藏备用；其余三位药材分别用10、8、8倍60%乙醇回流提取3次，每次60分钟，合并滤液，回收乙醇，减压浓缩至密度为1.20-1.25（60℃）的中药清膏，在中药清膏中加入环糊精包合的挥发油和适量糖粉、糊精，混合，制粒，干燥，整粒，包装即得。

实施例3：本品颗粒剂的质量标准和检验方法：

鉴别贯叶金丝桃：取本品适量研细,取粉末约1g，加甲醇20ml，超声处理15分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取贯叶金丝桃对照药材粉末0.2g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(2010版兽药典附录32页)试验，吸取上述两种溶液各10ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-醋酸乙酯-甲酸（20∶10∶1）为展开剂，展开，取出，立即置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光主斑点。

鉴别黄芪：取本品10克，加甲醇30ml，加热回流1小时，滤过，滤液加于中性氧化铝柱（100-120目，5克，内径10-15mm）上，用40%甲醇100ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加水30ml使溶解，用水饱合的正丁醇提取两次，每次20ml，合并正丁醇液；用水洗涤两次，每次20ml，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇0.5ml使溶解，作为供试品溶液。另取黄芪对照药材1g，同法制成对照品溶液，照薄层色谱法（2010版兽药典附录32页）试验，吸取上述两种溶液各2ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，三氯甲烷-甲醇-水（13:7:2）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，日光下显相同的棕褐主斑点，紫外灯（365nm）下，显相同橙黄色荧光主斑点。

鉴别蜘蛛香：取本品研细，取粉末约2g，加60%乙醇40ml，水浴加热回流提取1小时，滤过，滤液水浴蒸干，残渣加甲醇5ml使溶解，作为供试品溶液。另取蜘蛛香对照药材粉末1g，加60%乙醇40ml，同供试品溶液的制备法制成对照药材溶液。照薄层色谱法（2010版兽药典附录32页）试验，吸取供试品溶液10ul，对照药材溶液10ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚（30～60℃）-醋酸乙酯（4：1）为展开剂，饱和30分钟，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光主斑点。

鉴别石菖蒲：取本品适量研细，取粉末约2g，置具塞锥形瓶中，加石油醚(30～60℃)30ml，超声处理15分钟，滤过，滤液蒸至近干，残渣加石油醚(30～60℃) 1ml使溶解，作为供试品溶液。另取石菖蒲对照药材0.2g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法（2010版兽药典附录32页）试验，吸取上述三种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(30～60℃)-醋酸乙酯(4：1)为展开剂，饱和30分钟，展开，取出，晾干，放置约1小时，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光主斑点。

液相色谱法测定金丝苷含量。

色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基键合硅胶为填充剂；以乙腈- 0.1%磷酸溶液（16:84）为流动相；检测波长360nm。理论板数按金丝桃苷峰计算应不低于4000。

对照品溶液的制备：取金丝桃苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1 ml含16μg的溶液，作为对照品溶液。

供试品溶液的的制备：取装量差异项下的本品，混匀，取适量，研细，取粉末约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入60%乙醇50ml，称定重量，加热回流30分钟，放冷，再称定重量，用60%乙醇补足减失重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

测定法： 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

本品按干燥品计算，含贯叶金丝桃以金丝桃苷（C₂₁H₂₀O₁₂）计，不得少于规定量。

实施例4，本品颗粒剂的安合试验：

急性毒性试验：将20只大鼠雌雄各半，禁食12h后分别称重，之后经口灌服金香颗粒混悬液，持续观察30min，2h后再观察一次，以后每天观察一次，连续14天，观察并记录。结果：试验观察期内所有大鼠均存活，观察期结束后处死存活大鼠，眼观病理学检查亦均未发现明显可见的病理性变化。金香颗粒大鼠经口染毒，LD₅₀大于5g/kg。

亚慢性毒性试验：将80只大鼠随机平均分成四组，每组20只，雌雄各半。以LD50的1/1即5000mg/kg b.w.为高剂量组，以LD₅₀的1/10即500mg/kg b.w.为低剂量组，中间剂量以LD₅₀的1/3即1700mg/kg b.w.为中剂量组，分别喂食含金香颗粒5%、0.5%和1.7%的饲料，连续喂食30d。另设饲喂不加金香颗粒日粮的SD大鼠为对照组。每天观察并记录大鼠健康情况，及时分析大鼠的中毒状况。结果：金香颗粒连续给药30d内，各剂量组的大鼠饮水、采食、增重率、主要脏器指数、血液学及血液生化指标与对照组相比，均未发生显著变化（P＞0.05）；剖检和组织学观察心、肝、脾、肺和肾等组织亦均未发生异常的组织病理学变化。

实施例5，本品颗粒剂的临床应用：本中药组合物在辽宁、吉林地区进行临床试验，对经诊断剂盒和PCR技术检测确诊为流行性腹泻的发病仔猪进行治疗，结果显示：本中药组合物按0.25g/kg体重灌服给药，一天二次，连用5天，共治疗流行性腹泻仔猪108头，治愈82头，治愈率为75.9%。

本发明的中药制剂在辽宁、吉林、河北、河南的多个养殖场进行推广使用，共治疗2000余头发病仔猪，经统计，治疗仔猪流行性腹泻总有效率均在80%以上，且在使用过程中未见任何不良反应。实际应用证明本发明的中药组合物用于治疗仔猪流行性腹泻安全、有效。

本发明的中药组合物在临床应用过程中，发现用于治疗大肠杆菌引起的仔猪腹泻也有较好的疗效，共治疗经细菌分离鉴定法确诊的大肠杆菌病发病仔猪196头，治愈163头，治愈率达到83.1%。

本发明的中药组合物在临床应用过程中，发现用于治疗传染性胃肠炎也有较好的疗效，治疗经诊断剂盒和PCR技术检测确诊为传染性胃肠炎的仔猪113头，治愈81头，治愈率约为71.7 %。

Claims (9)

1.一种用于治疗仔猪流行性腹泻的中药组合物，其特征在于，是由贯叶金丝桃、黄芪、石菖蒲和蜘蛛香四种中药组成。

2.根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，所述四种中药按照以下质量比例配比：贯叶金丝桃5份、黄芪2份、石菖蒲1份、蜘蛛香5份。

3.根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，所述中药组合物可以制成散剂、口服液、颗粒剂、灌注液或注射液。

4.一种用于治疗仔猪流行性腹泻的中药组合物的质量标准检验方法，其特征在于，质量标准检验方法包括薄层鉴别法和液相色谱法。

5.根据权利要求4所述的质量标准和检验方法，其特征在于，所述薄层鉴别法用于鉴别贯叶金丝桃、黄芪、石菖蒲和蜘蛛香四种药材中的一种或几种组分。

6.根据权利要求4所述的质量标准和检验方法，其特征在于，所述液相色谱法用于检测本产品中金丝苷含量。

7.一种用于治疗仔猪流行性腹泻的中药组合物，其特征在于本中药组合物是由贯叶金丝桃、黄芪、石菖蒲和蜘蛛香四种中药组成，可用于治疗仔猪流行性腹泻。

8.一种用于治疗仔猪流行性腹泻的中药组合物，其特征在于本中药组合物是由贯叶金丝桃、黄芪、石菖蒲和蜘蛛香四种中药组成，可用于治疗仔猪传染性胃肠炎。

9.一种用于治疗仔猪流行性腹泻的中药组合物，其特征在于本中药组合物是由贯叶金丝桃、黄芪、石菖蒲和蜘蛛香四种中药组成，可用于治疗仔猪大肠杆菌病。