CN106692242A - 旱莲提取物的制备方法及用途 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一种墨旱莲提取物的制备方法，包括以下步骤：1）取墨旱莲材料，清洗后干燥，粉碎过筛150‑200目，得墨旱莲粉；2）在墨旱莲粉中加入乙醇和助溶剂，搅拌，浸泡22‑46h，回流浸提2‑4次，提取后合并提取液；3）过滤提取液，加入盐酸水溶液调节PH值并回流水解2.2‑4h，采用大孔树脂进行纯化，利用68‑76%的乙醇溶液以0.76‑0.93ml/min的速度进行洗脱，得洗脱液；4）将洗脱液浓缩，干燥，得墨旱莲提取物，本发明提供的这种墨旱莲提取物的制备方法及用途，制备简单，提高墨旱莲提取物的提取质量和提取浓度。

Description

旱莲提取物的制备方法及用途
技术领域
本发明涉及生物医药技术领域，尤其是一种墨旱莲提取物的制备方法及用途。
背景技术
随着社会的发展，药疗设备的不断完善突破，对中草药的研究使用普遍提高，墨旱莲为菊科鳢肠属植物鳢肠（Eclipta prostrata）的干燥地上部分，是传统中药，具有滋补肝肾, 凉血止血之功效，主治牙齿松动, 须发早白, 眩晕耳鸣, 腰膝酸软, 阴虚血热, 吐血, 衄血, 尿血, 血痢, 崩漏下血, 外伤出血。墨旱莲常作为复方用药，如传统名方二至丸来源于明王三才《医便》，由女贞子及墨旱莲二味药等量组成，功能补益肝肾，滋阴止血，主治肝肾阴虚所致的眩晕耳鸣，口鼻干燥，烦热失眠，吐血，崩中漏下，须发早白等，临床主要用于治神经衰弱、慢性虚弱疾病、慢性肝炎等症，为了提高墨旱莲的功效，对墨旱莲深度提取。
在现有技术中，一种墨旱莲提取物的制备方法及用途，CN102247420A，该发明公开了一种墨旱莲提取物的制备方法及用途，它的步骤如下：1）选取鳢肠属植物墨旱莲，用体积百比浓度为5～95%的乙醇/水浸泡0.5小时后，乙醇/水是墨旱莲药材20倍重量的提取1h和乙醇/水是墨旱莲药材16倍重量的提0.5h，合并提取液，提取液浓缩成0.25～1.0g生药/mL，静置6h，过滤，得到墨旱莲提取液；2）墨旱莲提取液采用预处理好的大孔树脂进行吸附，墨旱莲提取液与大孔树脂的重量比为1:1～1:5上样流速1～3BV/h，树脂柱径高比1:4～1:7，吸附后先用水洗3～6BV，洗脱流速为2～4BV/h，水洗脱液弃去；再用体积百分比浓度为20～90% 乙醇/水洗脱3～6BV，流速为2-4BV/h，收集乙醇/水洗脱液，浓缩，干燥，得到墨旱莲提取物，该发明降低了纯化成本，容易实现工业化生产，并且对环境无污染。
该发明的一种墨旱莲提取物的制备方法及用途，在提取制备中提取物的浓度较差。
发明内容
本发明所要解决的技术问题在于提供一种溶解度搞，提取率高，纯度高，制备简便的墨旱莲提取物的制备方法及用途。
为解决上述现有的技术问题，本发明采用如下方案：一种墨旱莲提取物的制备方法，包括以下步骤：
1）取墨旱莲材料，清洗后干燥，粉碎过筛150-200目，得墨旱莲粉；
2）在墨旱莲粉中加入乙醇和助溶剂，搅拌，浸泡22-46h，回流浸提2-4次，提取后合并提取液；
3）加入盐酸水溶液调节PH值并回流水解2.2-4h，采用大孔树脂进行纯化，利用68-76%的乙醇溶液以2-5.3BV/h的速度进行洗脱，得洗脱液；
4）将洗脱液浓缩，干燥，得墨旱莲提取物。
作为优选，步骤1中干燥方式为微波干燥，微波干燥的频率为1000-1300MHz，干燥16-24min，在干燥得同时对墨旱莲起到杀菌作用，提高墨旱莲的质量。
作为优选，步骤2中加入93-98%的乙醇，加入乙醇质量与墨旱莲粉质量比为1.5-2.2:1，使墨旱莲粉充分与乙醇接触，提高墨旱莲粉在乙醇中的溶解度。
作为优选，步骤2中助溶剂的成分及其重量份为：为乙酸乙酯1-5份、乙酸丁酯2-4份、甲基异丁基酮1-3份、丙三醇3-5份、乳酸乙酯2-4份、氢氯酸铝0.1-0.3份、腺三磷酸0.3-0.5份，提高墨旱莲粉的溶解度，其中氢氯酸铝和腺三磷酸与剩余成分可能是叠加产生了意想不到的有益成分或协同交互作用，产生了促进溶解的作用，使提取的墨旱莲提取物提取率得以提高，同时提高其纯度。
作为优选，步骤2中回流浸提时每隔20-40min搅拌原料2-4次，每次搅拌4-7min，回流浸提的温度为64-73℃，浸提3-5h，浸提时间隙搅拌，提高浸提质量。
作为优选，步骤3中加入盐酸水溶液的浓度为2-4%，调节提取液PH值为5.4-5.7，调节适宜的PH值，在大孔树脂纯化时更好的吸纳。
作为优选，步骤3中大孔树脂纯化时以1.4-1.7ml/min，吸附时间为0.6-1.3h，使大孔树脂吸附时吸附集中，提高杂质的分离效果。
墨旱莲提取物在药物中的应用。
有益效果：本发明提供的这种墨旱莲提取物的制备方法及用途，制备简单，提高墨旱莲提取物的提取质量和提取浓度。 本发明采用了上述技术方案提供一种墨旱莲提取物的制备方法及用途，弥补了现有技术的不足，设计合理，操作方便。
具体实施方式
以下实施例作进一步详细描述：
实施例1：
一种墨旱莲提取物的制备方法，包括以下步骤：
1）取墨旱莲材料，清洗后干燥，粉碎过筛150-200目，得墨旱莲粉；
2）在墨旱莲粉中加入乙醇和助溶剂，搅拌，浸泡22-46h，回流浸提2-4次，提取后合并提取液；
3）加入盐酸水溶液调节PH值并回流水解2.2-4h，采用大孔树脂进行纯化，利用68-76%的乙醇溶液以2-5.3BV/h的速度进行洗脱，得洗脱液；
4）将洗脱液浓缩，干燥，得墨旱莲提取物。
步骤1中干燥方式为微波干燥，微波干燥的频率为1000MHz，干燥16min，在干燥得同时对墨旱莲起到杀菌作用，提高墨旱莲的质量。
步骤2中加入93%的乙醇，加入乙醇质量与墨旱莲粉质量比为2.2:1，使墨旱莲粉充分与乙醇接触，提高墨旱莲粉在乙醇中的溶解度。
步骤2中助溶剂的成分及其重量份为：为乙酸乙酯4份、乙酸丁酯3份、甲基异丁基酮1份、丙三醇3份、乳酸乙酯2份、氢氯酸铝0.1-0.3份、腺三磷酸0.3-0.5份，提高墨旱莲粉的溶解度，使提取的墨旱莲提取物纯度更高，质量更好。
步骤2中回流浸提时每隔35min搅拌原料2次，每次搅拌7min，回流浸提的温度为64℃，浸提4h，浸提时间隙搅拌，提高浸提质量。
步骤3中加入盐酸水溶液的浓度为2%，调节提取液PH值为5.6，调节适宜的PH值，在大孔树脂纯化时更好的吸纳。
步骤3中大孔树脂纯化时以1.4ml/min，吸附时间为0.9h，使大孔树脂吸附时吸附集中，提高杂质的分离效果。
步骤1~4中的常规技术为本领域技术人员所知晓的现有技术，在此不作详细叙述。
实施例2：
一种墨旱莲提取物，选取墨旱莲材料，通过制备方法获得墨旱莲提取液，
墨旱莲提取物及其组合物的体外试验
我们将脂代谢相关关键靶点HMG-CoA 还原酶( 调节TC)、脂蛋白脂酶LPL( 调节TG)、脂肪酸合成酶FAS( 调节TG) 的3 种分子模型相结合，应用于降血脂作用筛选。分别对以上女贞子总三萜酸、女贞子总多糖、墨旱莲总皂苷、墨旱莲总黄酮四类组份物质及其不同配伍组份对进行了活性筛选。
HMG-CoA 还原酶( 调节TC)、脂蛋白脂酶LPL( 调节TG)、脂肪酸合成酶FAS( 调节TG) 的3 种分子模型相结合，组份女贞子总三萜和墨旱莲提取物有明显的抑制HMG-CoA 还原酶、增强脂蛋白脂酶LPL、抑制脂肪酸合成酶FAS 的活性，另两种组份女贞子总多糖、墨旱莲总黄酮有作用趋势但与模型对照组比较无统计学意义。除女贞子总三萜酸+ 墨旱莲提取物组份配伍的效果最强且优于它们各自单组份的效果外，其它组份亦有一定改善作用。但效果明显低于女贞子总三萜酸+ 墨旱莲提取物组份配伍，见表3。
表3 女贞子与墨旱莲组份脂代谢相关关键靶点活性筛选 (ug/ml)
组份 HMG-CoA 还原酶（IC50） LPL(EC50) FAS(IC50)
女贞子总三萜酸 76.8 17.6 60.32
女贞子总多糖 172.5 194.32 189.63
墨旱莲总皂苷 20.7 85.4 13.2
墨旱莲总黄酮 96.12 137.8 125.8
女贞子总三萜酸+ 墨旱莲总皂苷（35:65） 12.8 14.2 8.4
本文中所描述的具体实施例仅仅是对本发明作举例说明。本发明所属技术领域的技术人员可以对所描述的具体实施例做各种各样的修改或补充或采用类似的方式替代，但并不会偏离本发明的或者超越所附权利要求书所定义的范围。

Claims (8)

1.一种墨旱莲提取物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
1）取墨旱莲材料，清洗后干燥，粉碎过筛150-200目，得墨旱莲粉；
2）在墨旱莲粉中加入乙醇和助溶剂，搅拌，浸泡22-46h，回流浸提2-4次，提取后合并提取液；
3）加入盐酸水溶液调节PH值并回流水解2.2-4h，采用大孔树脂进行纯化，利用68-76%的乙醇溶液以2-5.3BV/h的流速进行洗脱，得洗脱液；
4）将洗脱液浓缩，干燥，得墨旱莲提取物。
2.根据权利要求1所述的一种墨旱莲提取物的制备方法，其特征在于：所述步骤1中干燥方式为微波干燥，微波干燥的频率为1000-1300MHz，干燥16-24min。
3.根据权利要求1所述的一种墨旱莲提取物的制备方法，其特征在于：所述步骤2中加入93-98%的乙醇，加入乙醇质量与墨旱莲粉质量比为1.5-2.2:1。
4.根据权利要求1所述的一种墨旱莲提取物的制备方法，其特征在于：所述步骤2中助溶剂的成分及其重量份为：乙酸乙酯1-5份、乙酸丁酯2-4份、甲基异丁基酮1-3份、丙三醇3-5份、乳酸乙酯2-4份、氢氯酸铝0.1-0.3份、腺三磷酸0.3-0.5份。
5.根据权利要求1所述的一种墨旱莲提取物的制备方法，其特征在于：所述步骤2中回流浸提时每隔20-40min搅拌原料2-4次，每次搅拌4-7min，回流浸提的温度为64-73℃，浸提3-5h。
6.根据权利要求1所述的一种墨旱莲提取物的制备方法，其特征在于：所述步骤3中加入盐酸水溶液的浓度为2-4%，调节提取液PH值为5.4-5.7。
7.根据权利要求1所述的一种墨旱莲提取物的制备方法，其特征在于：所述步骤3中大孔树脂纯化吸附时间为0.6-1.3h。
8.根据权利要求1所述的一种墨旱莲提取物的制备方法，墨旱莲提取物在药物中的应用。
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