CN106645603A - 反相hplc‑icp‑ms法同步检测食品中食品添加剂及重金属含量的方法 - Google Patents

反相hplc‑icp‑ms法同步检测食品中食品添加剂及重金属含量的方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开一种反相HPLC‑ICP‑MS法同步检测食品中食品添加剂及重金属含量的方法，该方法将HPLC和ICP‑MS设备通过Agilent公司专用的接口系统(5)连接在一起，然后将处理好的食品样品先在HPLC进行食品添加剂含量检测，然后再将流经HPLC的食品样品经接口系统(5)输入ICP‑MS进行重金属含量检测。该方法能够快速准确同步测出食品中食品添加剂和重金属的含量，不仅减少了待检测样品的取样量和样品的预处理量，同时减少不同仪器分别检测分别进样带来操作的繁冗，大大缩短了检测时间，提高了工作效率。通常两种仪器分别检测需要耗时6小时左右，联用之后耗时红4.8小时，节约时间20％左右。

Description

反相HPLC-ICP-MS法同步检测食品中食品添加剂及重金属含 量的方法
技术领域
本发明属于食品检测技术领域，特别涉及食品中食品添加剂及重金属含量的检测方法。
背景技术
食品添加剂是为了保证食品的观感和味觉而加入食品中的一种添加剂，它是现代食品工业中不可缺少的重要原辅材料，它可以改善食品的品质、色泽、口感，延长食品的保质期，提高食品的营养价值等。其主要原料是以化学合成物质和天然物质为主，化学添加剂与天然添加剂均有一定的毒性成分，但这种毒性成分的危害性与添加剂的剂量和人体的化学反应有关，达到一定程度或剂量时才会对人体的健康产生影响。我国的《食品添加剂使用卫生标准》GB2760—1996将其分为防腐剂、甜味剂、着色剂、发色剂、面粉处理剂、漂白剂和抗氧化剂等22类，并规定了食品添加剂使用范围和使用量。眼下问题食品屡屡发生，暴露出了食品添加剂的种种问题，主要体现在超范围和超限量使用防腐剂、甜味剂、着色剂、发色剂、面粉处理剂和漂白剂等。如何精确快速地检测出食品中食品添加剂的含量以确保人们能安全食用，杜绝问题食品危害人们的身心健康，已成为广大消费者以及研究人员共同关注的热点问题。
超范围和超限量使用食品添加剂严重地影响了食品的安全性，如果能合法合理添加尚且可以防患于未然，但是食品安全性的另一隐形杀手—重金属含量超标则让广大生产者和消费者始料不及。这是主要是取决食品中重金属的来源较广泛。重金属是指比重在5以上的金属，如铜、铅、锌、镍、钴、镉、铬、汞、铋、锡、锑、铌、钼等。通常情况下，重金属的自然本底浓度不会达到有害的程度，但随着社会工业化的快速发展，进入大气、水和土壤的有毒有害重金属如铅、汞、镉、铬等不断增加，超过正常范围则会引起环境的重金属污染。从食品安全方面考虑的重金属污染，目前最引人关注的是汞、镉、铅、铬，以及类金属砷等有显著生物毒性的重金属。据研究，重金属污染经食物链放大随食品进入人体后主要引起机体的慢性损伤，日常生活食品(包括蔬菜、水果、鱼肉等)被重金属污染后，仅仅通过简单蒸煮、浸泡或清洗不能去除其中的重金属。且进入人体的重金属要经过较长时间的积累才会显示出毒性，因此往往不易被早期察觉，很难在毒性发作前就引起足够的重视，从而更加重了其危害性。因此如何精确快速检测出食品中重金属含量和形态分布情况也是广大人们及研究工作人员关注的焦点。
高效液相色谱法(HPLC)是一种基于液相色谱法和气相色谱法的检测方法，主要采用高压输液的方法，对不同的流动相进行色谱分离，最后对分离后的试样采用检测器进行分析。该检测法因其回收率较高、分离效果好、灵敏度和精确度高的特点而广泛应用于食品痕量分析领域。反相高效液相色谱(HPLC)就是反相键合相色谱法，是化学键合相色谱法的一种。它的主要特点是，键合固定相的极性小于流动相的极性，适用于分离非极性、极性或离子型化合物。它通过将不同的有机官能团通过化学反应共价键合到砗胶载体表面的游离羟基上，而生成化学键合固定相。化学键合固定相对各种极性溶剂都有良好的化学稳定性和热稳定性。由它制备的色谱主柱效高、使刚寿命长、重现性好，几乎对各种类型的有机化合物都呈现良好的选择性，并可用梯度洗脱操作，消除了分配色谱法的缺点，这为同步测定多种化合物奠定了基础。
传统的重金属定量检测方法主要有原子吸收光谱法、紫外可见分光光度法、原子荧光光谱法、电化学法、X射线荧光光谱法和电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)五种。ICP-MS法具有同时测定多种元素、分析速度快、线形范围宽、灵敏度高等优点，受到国内外学者的普遍关注，它对金属离子的检出限可达到ppm级。
由上述可知，HPLC和ICP-MS法都是目前食品安检领域较选的大型精密仪器。随着检测技术的发展和食品检测实际需要，单机检测往往不能满足得杂样品的要求，联机检测技术是发展大势所趋。关于HPLC和ICP-MS联用的应用方面，周瑛等人用HPLC-ICP-MS法检验食品中硒和砷形态分析及其生物有效性；王丙涛等人利用HPLC-ICP-MS联用检测食品中的五种硒形态分布。虽然HPLC-ICP-MS联用检测技术已有相关的报道和研究，但是利反相HPLC-ICP-MS联用同时检测食品中多种食品添加剂和重金属含量的未见报道。
发明内容
针对以上现有技术问题，本发明提供一种利反相HPLC-ICP-MS联用同时检测食品中多种食品添加剂和多种重金属含量的方法。
本发明的具体方案如下：
反相HPLC-ICP-MS法同步检测食品中食品添加剂及重金属含量的方法，将HPLC和ICP-MS设备通过Agilent公司专用的接口系统(5)连接在一起，然后将处理好的食品样品先在HPLC进行食品添加剂含量检测，然后再将流经HPLC的食品样品经接口系统(5)输入ICP-MS进行重金属含量检测。
作为技术方案的进一步改进，以上所述的反相HPLC-ICP-MS法同步检测食品中食品添加剂及重金属含量的方法，所述的食品添加剂含量检测步骤为：
(1)用食品添加剂标准品调试、确定HLPC色谱条件；
(2)绘制食品添加剂标准曲线及确定最小检出量；
(3)将处理好的食品样品HPLC进行食品添加剂含量检测，并绘制待检样品曲线；
(4)通过计算待检样品曲线的峰面积计算出食品添加剂的含量。
作为技术方案的进一步改进，以上所述的反相HPLC-ICP-MS法同步检测食品中食品添加剂及重金属含量的方法，所述的重金属含量检测步骤为：
(1)用重金属标准品调试、确定ICP-MS条件；
(2)绘制重金属标准曲线；
(3)将流经HPLC的食品样品经接口系统(5)输入ICP-MS进行重金属含量检测，并绘制待检样品曲线；
(4)通过计算待检样品曲线的峰面积计算出进行重金属的含量。
作为技术方案的进一步改进，以上所述的反相HPLC-ICP-MS法同步检测食品中食品添加剂及重金属含量的方法，所述确定HLPC色谱条件包括反向色谱柱选择确定、流动相选择确定、检测波选择确定。
作为技术方案的进一步改进，以上所述的反相HPLC-ICP-MS法同步检测食品中食品添加剂及重金属含量的方法，所述食品添加剂包括防腐剂、甜味剂和着色剂中的一种或者多种。
作为技术方案的进一步改进，以上所述的反相HPLC-ICP-MS法同步检测食品中食品添加剂及重金属含量的方法，所述的防腐剂包括苯甲酸、苯甲酸钠、山梨酸和山梨酸钾中的一种或者多种；所述的甜味剂包括乙酰磺胺酸钾、糖精钠、环己基氨基磺酸钠中的一种或者多种；所述的着苋菜红、胭脂红、柠檬黄、日落黄和亮蓝中的一种或者多种。
作为技术方案的进一步改进，以上所述的反相HPLC-ICP-MS法同步检测食品中食品添加剂及重金属含量的方法，所述重金属包括砷、铅和镉中的一种或者多种。
作为技术方案的进一步改进，以上所述的反相HPLC-ICP-MS法同步检测食品中食品添加剂及重金属含量的方法，所述的反向色谱柱选择确定为C18；所述流动相选择确定包括流动相选择为体积比为10-30:90-70的甲醇和乙酸铵混合溶液，流动相流量变动范围为2％－3％，所述的乙酸铵浓度为0.02～0.05mol/l；所述的检测波选择确定为检测波长210-320nm。
作为技术方案的进一步改进，以上任一所述的反相HPLC-ICP-MS法同步检测食品中食品添加剂及重金属含量的方法，所述的食品添加剂检测结果：相对标准偏差RSD<4％；加样回收率在93％-109％之间，检出限为2–28ng/L。
作为技术方案的进一步改进，以上任一所述的反相HPLC-ICP-MS法同步检测食品中食品添加剂及重金属含量的方法，所述的重金属检测结果：相对标准偏差RSD<3.5％；加样回收率在93％-104％之间，检出限为7–12ng/L。
本发明具有以下有益效果：
1.本发明将反相高效液相色谱与电感耦合等离子质谱(反相HPLC-ICP-MS)联用，能够快速准确同步测出食品中食品添加剂和重金属的含量，不仅减少了待检测样品的取样量和样品的预处理量，同时减少不同仪器分别检测分别进样带来操作的繁冗，大大缩短了检测时间，提高了工作效率。通常两种仪器分别检测需要耗时6小时左右，联用之后耗时红4.8小时，节约时间20％左右。
2.本发明可以同时实现对多种食品添加剂和重金属含量进行检测。传统的方法中无法同时实现对多种食品添加剂和重金属含量同步进行检测，通常只能对各个食品添加剂或重金属进行单一的检测。
3.本发明HPLC与ICP-MS联用，食品样品在经过HPLC后，重金属离子存在的形态不发生改变，不影响后续ICP-MS检测的精准度。
附图说明
附图1为本发明的高效液相色谱与电感受耦合等离子质谱联用示意图。
附图2 HPLC-ICP-MS联用同时测定标样中食品添加剂及重金属含量流程图。
图中：A为高效液相色谱仪(HPLC)；B为电感耦合等离子体质谱仪(ICP-MS)；
1.流动相；2.高压磊；3.进样口；4.反相色谱柱；5.Agilent公司专用的接口系统；
6.氩气瓶；7.雾化器/雾化室；8.火源；9.旋转磊；10.涡轮磊。
具体实施方式
为了更好的理解本发明，下面结合实施例子对本发明做进一步的描述。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。此外应理解，在阅读了本发明讲授的内容之后，本领域的技术人员对本发明做各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求所限定的范围。
一、色谱条件的确定及混合溶液标准曲线的绘制
(一)食品添加剂和重金属混合标准溶液的配制
1.食品添加剂标准溶液的配制：分别准确称取柠檬黄、日落黄、胭脂红、糖精钠、安赛蜜、苯甲酸、苯甲酸钠、山梨酸、山梨酸钾各0.1g，苯甲酸和山梨酸用少量乙醇溶解，柠檬黄、日落黄、胭脂红加pH6水至100ml容量瓶刻度线，其他添加剂用蒸馏水溶解，然后用蒸馏水定容至100ml容量瓶中，然后分别配制成浓度为1000mg/l的标准溶液共计9个。
2.重金属Pb、As和Cd的标准溶液的配制：准确移取5ml盐酸至100ml容量瓶中，分别将Pb、As和Cd标准物质溶液(1000ug.mL-1,国家标准物质研究中心)依次移取0.2ml、0.4ml、0.6ml、0.8ml、1.0ml至装有5ml盐酸的容量瓶中，加蒸馏水定容成Pb、As和Cd三种重金属不同浓度的标准溶液共计15个。
3.混合标准溶液的配制：
(1)于100ml容量瓶中加入5ml盐酸，分别取步骤2配制好的重金属Pb、As和Cd的标准溶液0.2ml、0.4ml、0.6ml、0.8ml、1.0ml，共计得到75个；对步骤1配制好的9个食品添加剂标准溶液，每个分别依次移取0.1ml、0.5ml、1ml、2ml、5ml、10ml，得到6个类别的混合食品添加剂标准溶液；然后依次将6个类别的混合食品添加剂标准溶液依顺序加入到75个重金属标准溶液样品中，加蒸馏水至刻度线，得到75个不同浓度的混合标准溶液。
(2)将上述步骤1配制好的食品添加剂标准溶液，依次移取0.1ml、0.5ml、1ml、2ml、5ml、10ml于100ml容量瓶中，再加入5ml盐酸，共计得到54个；对步骤2配制好的重金属Pb、As和Cd的标准溶液，每个分别依次移取0.2ml、0.4ml、0.6ml、0.8ml、1.0ml，得到5个类别的重金属Pb、As和Cd的标准溶液；然后依次将5个类别的个类别的重金属Pb、As和Cd的标准溶液依顺序加入到54个食品添加剂标准溶液样品中，加蒸馏水至刻度线，得到54个不同浓度的混合标准溶液。
(二)其他实验用标准溶液的配制
(1)甲醇：色谱纯，经微孔滤膜(0.45μm)过滤
(2)乙腈：色谱纯，经微孔滤膜(0.45μm)过滤
(3)稀氨水(1+1)氨水加水等体积混匀
(4)0.02～0.05mol/l乙酸铵(磷酸氢二钾)溶液称取1.54～3.85g乙酸铵，加水溶解并定容至1000ml，溶液经滤膜(0.45μm)过滤
(5)中性氧化铝 层析用，100～200目
(6)聚酰胺粉 100～200目
(7)亚铁氰化钾溶液 称取10g亚铁氰化钾，用水溶解，并稀释至100ml
(8)硫酸锌溶液 称取15g硫酸锌，用水溶解，并稀释至100ml
(9)正己烷 分析纯
(10)盐酸 分析纯
(11)氨水 量取氨水2ml，加水至100ml，混匀
(12)甲醇+甲酸(6+4)溶液 量取甲醇60ml，甲酸40ml，混匀
(13)柠檬酸溶液 称取柠檬酸20g，加水至100ml，溶解混匀
(14)无水乙醇+氨水+水(7+2+1) 量取无水乙醇70ml，氨水20ml，蒸馏水10ml，混匀
(15)三正辛胺正丁醇溶液(5％) 量取三正辛胺5ml，加正丁醇至100ml，混匀
(16)pH6的水 蒸馏水加柠檬酸溶液调pH值到6
(17)饱和硫酸钠溶液 分析纯
(18)乙酸 分析纯
(19)层析柱：用10ml注射器代替，内装3cm高的中性氧化铝。
流动相：甲醇：色谱纯，经微孔滤膜(0.45μm)过滤
乙腈：色谱纯，经微孔滤膜(0.45μm)过滤
0.02～0.05mol/l乙酸铵(磷酸氢二钾)溶液称取1.54～3.85g乙酸铵，加水溶解并定容至1000ml，溶液经滤膜(0.45μm)过滤
(三)色谱条件的确定及混合溶液标准曲线的绘制
对配置好的129个混合标准溶液样品，依次过膜进HLP-ICP-MS联用仪，色谱柱依次用Shim-pack CLC-ODS6.0mmi.d.*150mm、ZORBAX Eclipse XDB-C18 Analytical 4.6×250nm 5-Micron和ODS-SP250mm×4.6mm×5um,GL Science进行筛选，流动相依次用有机相(分别用甲醇或乙腈)和缓冲盐体系(分别选磷酸二氢钾和乙酸铵)进行筛选，流动相的体积比从1-100:100:1之间进行筛选，同时还对检测波长和柱温等进行筛选，得到色谱质谱条件为：反向色谱柱选择确定为ZORBAX Eclipse XDB-C18 Analytical 4.6×250nm 5-Micron；流动相选择确定包括流动相选择为体积比为10-30:90-70的甲醇和乙酸铵混合溶液，流动相流量变动范围为2％－3％，乙酸铵浓度为0.02～0.05mol/l；检测波选择确定为检测波长210-320nm。再在确定好的色谱柱条件下用129个样品流经HLP-ICP-MS联用仪，同时用origin软件拟合标准曲线，拟合好的标准曲线方程及相关系数列于表1中。
表1食品添加剂及重金属的标准曲线及相关系数
序号 食品添加剂 线性方程 相关系数(R2)
1 糖精钠 y＝7.51x+1.43479 0.99982
2 安赛蜜 y＝3.92x+6.65824 0.99988
3 胭脂红 y＝34.86x-1.42715 0.99998
4 日落黄 y＝45.86x+5.31069 0.99998
5 柠檬黄 y＝49.6x-23.68264 0.99964
6 山梨酸钾 y＝42.54x-0.40381 0.99996
7 苯甲酸 y＝7.79x+0.37448 0.99995
8 山梨酸 y＝255.78x+247.62459 0.99952
9 苯甲酸钠 y＝6.76641x+0.48057 0.99999
10 阿斯巴甜 y＝0.696x-10.77 0.9995
11 Pb y＝7.31×10-2x-6.14×10-3 0.99999
12 As y＝6.73×10-3x-2.87×10-3 0.99998
13 Cd y＝4.94×10-3x+5.28×10-3 0.99999
二、混合标准品加标实施例的组成及检测结果
为了检验检测方法的准确性及精确性，对前述129个混合标准溶液随机抽取样品，采用人工方法配制混合标准品进行混合标准品加标检测，各实施例具体的组成及检测条件列于表2中。
表2混合标准品加标检测实施例样液组成及色谱条件
本实验采用的色谱柱是：ZORBAX Eclipse XDB-C18 Analytical 4.6×250nm 5-Micron，并用紫外检测器。混合标准样按表1中各实例的配方配合并混合均匀，充分混合后经微孔滤膜(0.45μm)后进样检测，首先是流动相条件的选择实验，确定最佳的流动相中有机相和无机盐相的种类及配比，然后是ICP测定参数的确定。实验结果表明：流动相选甲醇和乙酸铵较为合适，它们的体积比为V甲醇：V乙酸铵＝1：9～3：7；ICP测定参数确定为：高频功率1.45kW；等离子气流量14.0L.min-1；载气流速0.8L.min-1,He流量4.0mL.min-1；样品提升量0.1mL.min-1；采样深度10.0mm；采样镍锥体：孔板直径1.0mm；截取镍锥体：孔板直径0.4mm；积分时间3s；重复采样3次。每个样品平行测定8次，并进行加标回收实验，考察方法的精密度和准确度，计算回收率和相对标准偏差(RSD)，结果见表3。检测结果列于表4中。
表3食品添加剂及重金属的加标回收率及相对标准偏差
序号 食品添加剂 检出限(μg/L) 加标回收率(％) RSD％
1 糖精钠 0.006 99.33 2.5
2 安赛蜜 0.018 100.39 3.8
3 胭脂红 0.028 108.21 3.2
4 日落黄 0.015 103.25 2.8
5 柠檬黄 0.025 106.97 2.6
6 山梨酸钾 0.008 104.27 2.3
7 苯甲酸 0.012 97.26 2.1
8 山梨酸 0.010 98.50 1.8
9 苯甲酸钠 0.015 93.32 2.7
10 阿斯巴甜 0.008 98.46 2.5
11 Pb 0.007 93.05 1.6
12 As 0.034 97.22 1.7
13 Cd 0.012 103.10 1.8
表4混合标准品加标检测实施例的检测结果
三、食品样品中含食品添加剂和重金属含量的同步测定
1、不含着色剂样品处理方法：
(1)汽水饮料果汁类：温热搅拌去除二氧化碳或超声脱气。吸取2.5ml样品于25ml容量瓶中，加流动相至刻度，搅匀后，溶液通过微孔过滤膜过滤，滤液进HLP-ICP-MS联用仪检测。
(2)可乐饮料：将样品温热，搅拌除去二氧化碳或超声脱气，吸取已除去二氧化碳的样品2.5ml，通过中性氧化铝柱，待样品液流至柱表面时，用流动相洗脱，收集25ml洗脱液，摇匀后超声脱气，溶液通过微孔过滤膜(0.45μm)过滤，滤液进HLP-ICP-MS联用仪检测。
(3)果茶、果汁类食品：吸取2.5ml样品，加约20ml水，混匀后，离心15min(4000r/min)，上清液全部转入中性氧化铝柱，待样品液流至柱表面时，用流动相洗脱。收集洗脱液25ml，混匀后，超声脱气，溶液通过微孔滤膜(0.45μm)过滤，滤液进HLP-ICP-MS联用仪检测。
(4)配制酒类：称取10.0g样品，放入小烧杯中，水浴加热除去乙醇，用氨水(1+1)调节pH值约7，加水定容至适当体积，经滤膜(0.45μm)过滤。滤液进HLP-ICP-MS联用仪检测。
(5)其他食品：称取2.5g样品，加5ml水，超声提取15min，离心10min(4000r/min)，上清液通过中性氧化铝柱，待样品液流至柱表面时，用流动相洗脱，收集25ml洗脱液，摇匀后超声脱气，溶液通过微孔过滤膜(0.45μm)过滤，滤液进HLP-ICP-MS联用仪检测。
(6)其他食品(包括肉制品)：称取2.5g样品，加1.0mL硫酸锌溶液和1.0mL亚铁氰化钾溶液，加水至25mL，摇匀，超声20min提取，离心10min，将上清液通过0.45μm微孔滤膜后进HLP-ICP-MS联用仪检测。
2、着色剂类样品处理方法
(1)橘子汁、果味水、果子露汽水等：称取20.0-40.0g，放入100ml烧杯中。含二氧化碳的样品加热驱除二氧化碳。
(2)配制酒类：称取20.0g-40.0g，放入100ml烧杯中，加小碎瓷片数片，水域加热驱除乙醇、加水30ml，温热溶解，若样品溶液pH值较高，用柠檬酸溶液调pH值到4左右。
(3)硬糖、蜜饯类、淀粉软糖等：称取5.00g-10.00g，放入100ml小烧杯中，加水30ml，温热溶解，若样品溶液pH值较高，用柠檬酸溶液调pH值到4左右。
(4)巧克力豆及着色糖衣制品：称取5.00g-10.00g，放入100ml小烧杯中，用水反复洗涤色素，到巧克力豆无色素为止，合并色素漂洗液为样品溶液。
(5)色素提取方法
①聚酰胺吸附法：样品溶液加柠檬酸溶液调pH值到4，加热至60℃，将1g聚酰胺粉加水少许调成粥状，倒入样品溶液中，搅拌片刻，倒入放有少许海沙的层析管中，用60℃pH＝4的水洗涤3-5次，再用水洗至中性，用乙醇-氨水-水混合溶液解析3-5次，每次5ml，收集解析液，蒸发至近干，加水溶解，定容至5ml。经滤膜(0.45μm)过滤，取10μl进滤液进HLP-ICP-MS联用仪检测。
②液-液分配法(适用于含赤藓红的样品)：将制备好的样品溶液放入分液漏斗中，加2ml盐酸、三正辛胺正丁醇溶液(5％)10-20ml，振摇提取，分取有机相，重复提取，直至有机相无色，合并有机相，用饱和硫酸钠溶液洗2次，每次10ml，分取有机相，于蒸发皿中，水浴加热浓缩至10ml，转移至分液漏斗中，加60ml正己烷，混匀，加氨水提取2-3次，每次5ml，合并氨水溶液层(含水溶性酸性色素)，用正己烷洗2次，氨水层加乙酸调成中性，水浴加热蒸发至近干，加水定容至5ml。经滤膜(0.45μm)过滤，吸取10μL滤液进HLP-ICP-MS联用仪检测。
3.HLP色谱条件及ICP-MS质普工作参数同表2混合标准品加标检测实施例的色谱条件。
4.分析结果的表述
食品中添加剂的含量按下式计算：
式中X—样品中乙酰磺胺酸钾、苯甲酸、山梨酸、糖精钠的含量，g/kg；
ρ—被测液中苯甲酸(或乙酰磺胺酸钾、山梨酸、糖精钠)的含量，μg/mL；
V—样品稀释总体积，mL；
m—样品质量，g。
食品中重金属含量的计算方法：
式中：
X——试样中重金属含量，单位为毫克每千克或毫克每升(mg/kg或mg/L)；
C1——测定样液中重金属含量，单位为微克每毫升(μg/mL)；
C0——空白液中重金属含量，单位为微克每毫升(μg/mL)；
V——试样消化液定量总体积，单位为毫升(mL)；
m——试样质量或体积，单位为克或毫升(g)；
以上重复条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，结果保留两位有效数字。
检测结果列于表5中。
表5实际食品样品的检测结果
表4检测结果表明，实验选用的美年达橙子味饮料、鸡尾酒、酱油、果冻等食品中的各类食品添加剂含量及三种重金属含量没有超出GB2760-2014的最高限要求。
同时，进行相同样品的比较实验，实验证明：
1.本发明将反相高效液相色谱与电感耦合等离子质谱(反相HPLC-ICP-MS)联用，能够快速准确同步测出食品中食品添加剂和重金属的含量，不仅减少了待检测样品的取样量和样品的预处理量，同时减少不同仪器分别检测分别进样带来操作的繁冗，大大缩短了检测时间，提高了工作效率。通常两种仪器分别检测需要耗时6小时左右，联用之后耗时红4.8小时，节约时间20％左右。
2.本发明可以同时实现对多种食品添加剂和重金属含量进行检测。传统的方法中无法同时实现对多种食品添加剂和重金属含量同步进行检测，通常只能对各个食品添加剂或重金属进行单一的检测。
3.本发明HPLC与ICP-MS联用，食品样品在经过HPLC后，重金属离子存在的形态不发生改变，不影响后续ICP-MS检测的精准度。

Claims (10)

1.反相HPLC-ICP-MS法同步检测食品中食品添加剂及重金属含量的方法，其特征在于：将HPLC和ICP-MS设备通过Agilent公司专用的接口系统(5)连接在一起，然后将处理好的食品样品先在HPLC进行食品添加剂含量检测，然后再将流经HPLC的食品样品经接口系统(5)输入ICP-MS进行重金属含量检测。
2.根据权利要求1所述的反相HPLC-ICP-MS法同步检测食品中食品添加剂及重金属含量的方法，其特征在于：所述的食品添加剂含量检测步骤为：
(1)用食品添加剂标准品调试、确定HLPC色谱条件；
(2)绘制食品添加剂标准曲线及确定最小检出量；
(3)将处理好的食品样品HPLC进行食品添加剂含量检测，并绘制待检样品曲线；
(4)通过计算待检样品曲线的峰面积计算出食品添加剂的含量。
3.根据权利要求1或2所述的反相HPLC-ICP-MS法同步检测食品中食品添加剂及重金属含量的方法，其特征在于：所述的重金属含量检测步骤为：
(1)用重金属标准品调试、确定ICP-MS条件；
(2)绘制重金属标准曲线；
(3)将流经HPLC的食品样品经接口系统(5)输入ICP-MS进行重金属含量检测，并绘制待检样品曲线；
(4)通过计算待检样品曲线的峰面积计算出进行重金属的含量。
4.根据权利要求2所述的反相HPLC-ICP-MS法同步检测食品中食品添加剂及重金属含量的方法，其特征在于：所述确定HLPC色谱条件包括反向色谱柱选择确定、流动相选择确定、检测波选择确定。
5.根据权利要求1所述的反相HPLC-ICP-MS法同步检测食品中食品添加剂及重金属含量的方法，其特征在于：所述食品添加剂包括防腐剂、甜味剂和着色剂中的一种或者多种。
6.根据权利要求5所述的反相HPLC-ICP-MS法同步检测食品中食品添加剂及重金属含量的方法，其特征在于：所述的防腐剂包括苯甲酸、苯甲酸钠、山梨酸和山梨酸钾中的一种或者多种；所述的甜味剂包括乙酰磺胺酸钾、糖精钠、环己基氨基磺酸钠中的一种或者多种；所述的着苋菜红、胭脂红、柠檬黄、日落黄和亮蓝中的一种或者多种。
7.根据权利要求1所述的反相HPLC-ICP-MS法同步检测食品中食品添加剂及重金属含量的方法，其特征在于：所述重金属包括砷、铅和镉中的一种或者多种。
8.根据权利要求4所述的反相HPLC-ICP-MS法同步检测食品中食品添加剂及重金属含量的方法，其特征在于：所述的反向色谱柱选择确定为C18；所述流动相选择确定包括流动相选择为体积比为10-30:90-70的甲醇和乙酸铵混合溶液，流动相流量变动范围为2％－3％，所述的乙酸铵浓度为0.02～0.05mol/l；所述的检测波选择确定为检测波长210-320nm。
9.根据权利要求4-8任一所述的反相HPLC-ICP-MS法同步检测食品中食品添加剂及重金属含量的方法，其特征在于：所述的食品添加剂检测结果：相对标准偏差RSD<4％；加样回收率在93％-109％之间，检出限为2–28ng/L。
10.根据权利要求4-8任一所述的反相HPLC-ICP-MS法同步检测食品中食品添加剂及重金属含量的方法，其特征在于：所述的重金属检测结果：相对标准偏差RSD<3.5％；加样回收率在93％-104％之间，检出限为7–12ng/L。
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