CN106609287A - 一种吉他霉素发酵培养基 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种吉他霉素发酵培养基，属于吉他霉素生产领域。本发明的发酵培养基成分包含淀粉1.5-4.5%，葡萄糖0.1-0.3%，豆饼粉2.0-4.0%，丝素粉0.5-1.5%，碳酸钙0.2-0.5%，淀粉酶0.006-0.015%，豆油2.0-3.5%，泡敌0.01-0.06%，磷酸二氢钾0.05-0.1%，硫酸铵0.15-0.55%，氯化锰0.04-0.06%，硫酸锌0.005-0.007%，还包含乳化剂；其中乳化剂为吐温80，添加时与豆油混合均匀后再与其他成分混合；所述发酵培养基的pH为6.3-7.5。采用本发明的培养基可以使吉他霉素发酵水平得以提高。而且，本培养基在发酵结束后，发酵液中油被充分利用，不仅节约了豆油的使用量降低生产成本，还减少了提取过程中乳化的产生，利于提炼工段对产品的提取，使提取收率得到提高，产品质量也得到大幅度提高。

Description

一种吉他霉素发酵培养基

技术领域

本发明涉及吉他霉素生产领域，具体涉及一种吉他霉素发酵培养基。

背景技术

吉他霉素是由链霉菌所产生的一种多组分的大环内酯类抗生素。其游离碱供口服用；酒石酸盐则供注射。其盐为白色或淡黄色结晶性粉末，无臭、味苦、微有引湿性；易溶于水、甲醇或乙醇；几乎不溶于乙醚、氯仿。

吉他霉素抗菌性能与红霉素近似，对革兰氏阳性菌，如葡萄球菌、化脓性链球菌、绿色链球菌、肺炎链球菌、破伤风杆菌、白喉杆菌等有较强的抑制作用。对革兰氏阴性菌，如淋球菌、百日咳杆菌等革兰氏阴性菌也有相当的抑制作用。此外，对支原体、钩端螺旋体、立克次体有抑制作用。对大多数耐青霉素和红霉素的金葡菌有效是该品的特点。

目前工业抗生素生产中，大多使用豆油作为发酵培养基的主要组成成分，一是作为碳源促进菌丝生长，二是其长链在脂肪酶的作用下分解为小分子的脂肪酸作为前体促进抗生素的合成，三是豆油还能起到消泡的作用。吉他霉素发酵生产的重要原材料之一也是油。培养基中的油如不能被很好利用，大量聚集的油粒，与菌丝粘附，影响菌体对氧及营养物质的摄取，菌丝老化速度快，部分菌丝自溶，释放氨氮，pH回升，产物合成所需的前体物质就不能顺利形成，而且pH的持续回升以及菌体老化还影响生物合成所需各种酶活力下降，产物的生物合成受到抑制，表现为效价增长缓慢，后期甚至还会下降，不能进行正常发酵生产。现有的发酵培养基配方中油基本是直接浮在发酵液表面，只是靠搅拌的作用使其与其它物质混合，不利于菌体的利用，易造成发酵异常批次，最终导致发酵液效价低，残油量高，提取过程中乳化量增多，影响提取收率和产品质量。

乳化剂是能够改善乳浊液中各种构成相之间的表面张力，使之形成均匀稳定的分散体系或乳浊液的物质。乳化剂是表面活性物质，分子中同时具有亲水基和亲油基，它聚集在油/水界面上，可以降低界面张力和减少形成乳状液所需要的能量，因此，在油水体系中加入乳化剂后，水和油就能相互混合，形成完全分散的乳浊液。

聚山梨酯80（或吐温80）为非离子型表面活性剂，本品属多元醇型非离子表面活性剂，是聚山梨酯类中最常用的一种。对电解质有显著的抵抗力，亲水性强，广泛应用于液体、半固体、固体制剂中，作O/W型乳化剂、增溶剂、湿润剂、分散剂和稳定剂。对矿物油、植物油、动物油脂等各种油脂类均有良好的乳化作用、分散作用、增溶作用。通常被认为是无毒、无刺激性的材料。

发明内容

为了解决上述现有技术中存在的问题，本发明提供一种吉他霉素发酵培养基。该发酵培养基除包含现有吉他霉素发酵培养基的成分和含量外，还包含乳化剂。采用本发明的培养基可以使吉他霉素发酵水平得以提高。而且，本培养基在发酵结束后，发酵液中油被充分利用，不仅节约了豆油的使用量降低生产成本，还减少了提取过程中乳化的产生，利于提炼工段对产品的提取，使提取收率得到提高，产品质量也得到大幅度提高。

具体而言，本发明提供：

（1）一种吉他霉素发酵培养基，所述发酵培养基包含淀粉1.5-4.5%，葡萄糖0.1-0.3%，豆饼粉2.0-4.0%，丝素粉0.5-1.5%，碳酸钙0.2-0.5%，淀粉酶0.006-0.015%，豆油2.0-3.5%，泡敌0.01-0.06%，磷酸二氢钾0.05-0.1%，硫酸铵0.15-0.55%，氯化锰0.04-0.06%，硫酸锌0.005-0.007%，还包含乳化剂；

（2）根据（1）所述的发酵培养基，该发酵培养基是在现有培养基基础上，在其中添加乳化剂。优选地乳化剂添加量为0.05-0.5%；

（3）根据（1）或（2）所述的发酵培养基，其中所述乳化剂为吐温80；

（4）根据（1）~（3）任一所述发酵培养基的制备方法，其特征在于，所述乳化剂添加时与豆油混合均匀，再与其它成分混合；

（5）本发明的多个实施例使用本发明提供的吉他霉素发酵培养基生产吉他霉素，其中，吉他霉素发酵放罐效价均高于13000u/ml，成品效价均高于1600ug/mg，收率在80%以上，相比不包含乳化剂的对照均提高约1.2倍左右。

本发明的优点是该发酵培养基除包含现有吉他霉素发酵培养基的成分和含量外，还包含乳化剂。采用本发明的培养基可以使吉他霉素发酵水平得以提高。而且，本培养基在发酵结束后，发酵液中油被充分利用，不仅节约了豆油的使用量降低生产成本，还减少了提取过程中乳化的产生，利于提炼工段对产品的提取，使提取收率得到提高，产品质量也得到大幅度提高。对稳定生产有着重要的意义。

具体实施方式

以下通过具体实施方式进一步对本发明进行描述，但这并非是对本发明的限制，本领域技术人员根据本发明的基本思想，可以做出各种修改或改进，但是只要不脱离本发明的基本思想，均在本发明保护范围内。

实施例1：

斜面和种子培养：用吉他霉素产生菌传斜面。斜面培养基：淀粉1.0-2.0%，硫酸镁0.04-0.06%，磷酸二氢钾0.04-0.06%，酵母浸膏0.3-0.5%，琼脂2.0-2.2%；消前pH7.0-7.5.在温度29±0.5℃恒温培养8-10d，用成熟斜面接入种子罐培养，接种量1/6-1/5斜面/20L种子培养基。种子培养基：淀粉1.5-2.5%，豆饼粉1.8-2.3%，葡萄糖0.8-1.2%，氯化钠0.3-0.5%，碳酸钙0.2-0.4%，消前pH7.0-7.5.在温度31±0.5℃，转速150rpm，风量1:1条件下培养30-35h。发酵培养：将成熟种子液转入发酵罐培养，接种量10-15%。在温度29-31℃，转速200-260rpm，风量1:0.7-0.9条件下发酵培养65-75h。所用发酵培养基为：淀粉1.5-4.5%，葡萄糖0.1-0.3%，豆饼粉2.0-4.0%，丝素粉0.5-1.5%，碳酸钙0.2-0.5%，淀粉酶0.006-0.015%，豆油2.0-3.5%，泡敌0.01-0.06%，磷酸二氢钾0.05-0.1%，硫酸铵0.15-0.55%，氯化锰0.04-0.06%，硫酸锌0.005-0.007%。其中乳化剂吐温80按照配制发酵培养基总量0.05%的比例加入豆油中，搅拌均匀后再加入培养基中。吉他霉素效价测定：管蝶法。管碟法：照《中国药典》2010版附录ⅪA依法测定，试验用菌为枯草芽孢杆菌，用微生物自动测量分析仪测量并计算结果。

发酵结束后测得吉他霉素放罐效价为13050u/ml，成品效价1610ug/mg，收率80.5%，而不包含乳化剂的对照（其它工艺步骤和配料同实施例1）吉他霉素放罐效价为10060u/ml，成品效价1490，收率67%，添加乳化剂后收率提高1.20倍，成品效价也得到提高。

实施例2：

乳化剂吐温80按照配制发酵培养基总量0.3%的比例加入豆油中，搅拌均匀后再加入培养基中，其余同实施例1.

发酵结束后测得吉他霉素放罐效价为13500u/ml，成品效价1670ug/mg，收率82%，比不包含乳化剂的对照收率提高1.22倍，成品效价也得到提高。

实施例3：

乳化剂吐温80按照配制发酵培养基总量0.5%的比例加入豆油中，搅拌均匀后再加入培养基中，其余同实施例1.

发酵结束后测得吉他霉素放罐效价为13360u/ml，成品效价1656ug/mg，收率81.6%，比不包含乳化剂的对照收率提高1.21倍，成品效价也得到提高。

Claims (4)

1.一种吉他霉素发酵培养基，所述发酵培养基包含淀粉1.5-4.5%，葡萄糖0.1-0.3%，豆饼粉2.0-4.0%，丝素粉0.5-1.5%，碳酸钙0.2-0.5%，淀粉酶0.006-0.015%，豆油2.0-3.5%，泡敌0.01-0.06%，磷酸二氢钾0.05-0.1%，硫酸铵0.15-0.55%，氯化锰0.04-0.06%，硫酸锌0.005-0.007%，还包含乳化剂。

2.根据权利要求1所述的发酵培养基，其特征在于，所述乳化剂含量为0.05-0.5%。

3.根据权利要求1或2所述的发酵培养基，其特征在于，所述乳化剂为吐温80。

4.根据权利要求1~3任一所述发酵培养基的制备方法，其特征在于，所述乳化剂添加时与豆油混合均匀，再与其它成分混合。