CN106589190B - 一种超亲水性分子印迹聚合物的制备方法及应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种超亲水性分子印迹聚合物的制备方法及应用，以环烯醚萜苷为模板分子，通过双乙烯功能单体在水相中制备分子印迹聚合物，其中，制备得到的分子印迹聚合物包含有针对所述环烯醚萜苷的特异性结合空腔；所述双乙烯单体选自以下两种物质：

Description

一种超亲水性分子印迹聚合物的制备方法及应用
技术领域
本发明属于分离分析技术领域，具体涉及是一种超亲水性分子印迹聚合物的制备方法及应用。
技术背景
现代化的中药质量评价模式是确保中药质量及其疗效的关键所在。由于中药多组分、多靶点的特点，单一指标性成分测定已不能适应建立现代化中药质量评价模式的要求。以中国药典为例，2010版药典选用丹参酮ⅡA、盐酸小檗碱、马钱苷作为丹参、功劳木、山茱萸及其复方制剂(如六味地黄丸、杞菊地黄丸、知柏地黄丸和桂附地黄丸等)的指标成分，而2015版中国药典则变更增选丹参酮ⅡA、隐丹参酮与丹参酮Ⅰ总量作为丹参质量控制标准，增选非洲防己碱、药根碱、巴马汀和小檗碱总量作为功劳木指标成分，增选马钱苷、莫诺苷作为山茱萸及其方剂质量控制标准。药效组分群质量评价模式替代单组分质量评价模式已成为中药质量评价方法的发展趋势。
环烯醚萜苷类“药效组分群”广泛共存于玄参科、茜草科、唇形科、龙胆科、马鞭草科等双子叶植物中，具有抗肿瘤、抗炎、抗过敏、抗氧化、抗病毒、降血糖、治疗白血病、防治心脑血管疾病等多种生物活性，常作为栀子、龙胆、山茱萸等药材及其复方制剂的质量控制指示性成分。环烯醚萜苷化学结构相近且基体复杂。如山茱萸复方制剂六味地黄丸中环烯醚萜苷类成分包括马钱苷、莫诺苷、甲氧基莫诺苷、断氧化马钱苷、獐牙菜苷、山茱萸苷等。六味地黄丸由熟地黄、山茱英制、牡丹皮、山药、获答、泽泻等六味中药组合而成的，作为滋阴补肾的中药，临床效果甚佳。2015版中国药典中选马钱苷和莫诺苷总量作为六味地黄丸质量控制标准，并且在成方制剂和单味制剂中的六味地黄丸，要求每丸含酒萸肉以莫诺苷(C17H26O11)和马钱苷(C17H26O10)的总量计，不得少于0.37mg。粗提液及混合对照品HPLC色谱图所示，中药或方剂中相近保留时间化学成分的“峰重叠”制约了样品中的色谱峰识别。复杂基质下药效组分群的快速靶向富集已成为中药质量评价的关键问题之一。加强高极性药效组分群分离基础研究，利于突破中药复杂样品物质分离瓶颈，为中药质量评价模式的制定提供理论依据。
分子印迹技术能够制备“预构化”的分子印迹聚合物(MIPs)，MIPs对于目标分子具有特异识别性。因MIPs材料极高的选择性及卓越的分子识别性能，很快在固相萃取、手性拆分、生物传感器等方面得到了广泛的应用。分子印迹-固相萃取技术将MIPs用作固相萃取填料从样品中纯化、富集目标分子及其结构类似物，能够克服分析过程中因基质复杂所带来的内源性干扰难题，在中药及其制剂质量控制方向展现出极大应用前景。分子印迹对于在天然产物中含量低、药效高的成分的鉴定分析和分离纯化提供了方法借鉴，但是其特异选择性有待提高。
传统的分子印迹聚合物具有机械稳定性好、化学选择性高、成本低、制备容易等优点，然而，用这种方法得到的分子印迹聚合物通常存在以下缺陷：由于研磨过程的可控性差，会产生大量不规则粒子，同时破坏部分印迹空腔；所制备的是高度交联的聚合物，致使内部模板分子的洗脱比较困难，残留的模板分子在使用过程中发生缓慢脱吸，给痕量分析等应用带来较大误差；印迹位点分布不均一，一部分处于粒子孔壁上，模板分子向这部分位点的传质速率较快，而另一些则包埋在聚合物本体之中，受位阻影响，这部分印迹空穴可接近性差，再结合模板分子的速率慢，从而降低了印迹位点的利用率，尤其对生物大分子而言，影响更为严重。含环烯醚萜苷以水作为介质，必须制备亲水性的分子印迹聚合物才能实现对水介质中环烯醚萜苷的高选择性吸附，继而对提取液进行分析前的预处理。但是，中药提取物中的成分复杂，对环烯醚萜苷的干扰作用较强，目前的分子印迹技术难以选择性检测中药提取物中的烯醚萜苷含量。
发明内容
为解决上述问题，本发明采用有印迹作用位点的亲水性双乙烯功能单体，采用分子印迹技术，通过亲水性功能单体在水相中制备分子印迹聚合物，通过研磨、筛选聚合物颗粒装填层析柱。制备的分子印迹聚合物的特异选择性高、亲水性强以及在水介质中具有较好的吸附性能，能够用于中药复方制剂的质量控制，满足中药制剂提取液的样品前处理，继而经液相色谱系统分析检测及定量分析，建立了用于复杂样品前处理的萃取体系。
本发明的目的在于用双乙烯功能单体替代了传统的功能单体和交联剂，将二者合二为一，并能适用于水相中印迹。
本发明的另一目的在于提供一种超亲水性分子印迹聚合物的制备方法。
本发明的第二个目的在于提供上述超亲水性分子印迹聚合物在环烯醚萜苷的固相萃取、富集纯化中的应用。
为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
一种超亲水性分子印迹聚合物的制备方法，以环烯醚萜苷为模板分子，通过双乙烯功能单体在水相中制备分子印迹聚合物，其中，制备得到的分子印迹聚合物包含有针对所述环烯醚萜苷的特异性结合空腔；
所述双乙烯功能单体选自以下两种物质，其结构式分别如下：
亲水性双乙烯功能单体与分子印迹相结合可使分子印迹聚合物更容易在水相中识别待检测物质。制备得到的亲水性分子印迹聚合物的外部是亲水的表面，内部则是具有一定尺寸的疏水空腔，可以依据空腔大小，利用疏水作用、氢键和范德华力等进行分子的选择性识别。本文中利用环烯醚萜苷作为模板，制备得到的分子印迹聚合物中包括至少一个与环烯醚萜苷特异性结合的空腔，该空腔的大小、空腔的疏水作用、空腔内的氢键及范德华力等，可以实现对环烯醚萜苷的选择性识别和特异性结合，提高了中药提取物中环烯醚萜苷含量的选择性检测的准确性和灵敏性。
优选的，所述环烯醚萜苷为断氧化马钱子苷、獐牙菜苷、莫诺苷、甲氧基莫诺苷、山茱萸苷或马钱苷中的一种或多种。以其中一种为模板，即可富集所有的环烯醚萜苷，因为分子印迹可以吸附“模板的结构类似物”。
优选的，所述分子印迹聚合物的制备方法，包括如下步骤：
1)在水性溶剂体系中，提供双乙烯功能单体和模板分子，其中，所述双乙烯功能单体和所述模板分子通过可逆的自组装形成一种共价的模板-单体络合物；
2)使所述模板-单体络合物聚合，得到聚合物；
3)除去所述聚合物中的模板分子；
其中，所述水性溶剂体系使得能够形成所述的模板-单体络合物；
其中，存在促进形成所述模板-单体络合物的一种试剂。
优选的，上述聚合的方法是选自以下聚合方法：溶液聚合、本体聚合、沉淀聚合、乳液聚合、悬浮聚合、复合材料形成和接枝法、膜乳化以及溶胀技术。
优选的，上述促进形成所述模板-单体络合物的试剂为偶氮二异戊腈或偶氮二异丁腈。该处的试剂可以称之为引发剂。
为消除水相结合中产生的非特异吸附，本发明引入水溶性交联剂，并对多种水溶性交联剂进行了试验。经优选后发现：就本发明的分子印迹聚合物而言，本发明中选择的双乙烯功能单体既能作为功能单体，又能作为交联剂，并能够得到超亲水性及高选择性的印迹聚合物。
本发明在充分考虑了水环境下的影响因素后，对双乙烯功能单体的用量进行优化，结果表明：双乙烯功能单体的质量百分数为10％以上时，大部分MIPs都有较高的交联度(一般在80％以上)，聚合物网络中印迹位点的空间结构和识别效果较好，然而过多的双乙烯功能单体(质量百分数大于15％后)会使待富集化合物的结合及脱除更加困难，影响检测效果。因此，优选的双乙烯功能单体作为交联剂配比为10～15％。
由于水分子的水合能强，氢键的作用往往被削弱，而实际上氢键的方向性使其具有较好的选择识别性。因此，为加强水环境中氢键的效能，本发明希望通过反应物间的协同作用来克服周围水分子的不利影响；实验中偶然发明当模板分子、功能单体、引发剂、致孔剂(致孔剂即溶剂，在聚合过程中可以增大聚合物的比表面积，有利于对待富集物质的吸附)的质量比为1～3:10～15:20～70时，作用位点附近的局部微环境有所改变，创造出了有利于氢键发挥作用的外部氛围。
在水环境中进行分子识别，要求分子印迹聚合物具有足够的亲水性。有机相合成通常采用丙烯酸衍生物(如甲基丙烯酸MAA)及乙烯基吡啶(4-VP)为单体，二甲基丙烯酸乙二醇酯(EDMA)为交联剂；而在水相合成中，聚合前的预组织过程要求印迹分子与单体之间要有充分的接触机会和作用环境，以便各相关基团能为将来的特定识别作用取得必要的空间排列和组合方式，为此要求印迹分子在预聚溶剂体系中具有一定的溶解度。本发明经过摸索后发现：采用烯基苷型功能单体代替传统的功能单体和交联剂时，制备的聚合物具有良好亲水性，在水中的识别性能大大提升，在水介质中具有更好的吸附性能。
上述的方法制备的分子印迹聚合物可用于药物含量检测、分离、化学传感器、药物筛选、催化作用，并且用于区域选择性或対映选择性合成。
MIPs的识别作用不但受聚合条件如光引发和热引发等的影响，而且深受周围环境的影响。与有机介质不同的是，由于水分子的参与，水环境下的分子识别问题要复杂的多，水溶液的组成、pH值、溶液中盐的离子强度、极性有机溶剂的加入的比例和种类等，均会对作用双方产生显著的影响。
因此，本发明的优选实施例中，对超亲水性分子印迹聚合物的制备方法进行了优化，具体包括以下步骤：
(1)将模板、双乙烯功能单体、引发剂和致孔剂按质量比为1～3:10～15:0.05～0.10:20～70加入到反应釜中充分混合，得到混合溶剂；
(2)将步骤1)中的混合溶剂，超声10-15分钟，然后充氮气10-20分钟除氧；
(3)将除氮后的混合溶剂密封后，于40～60℃条件下聚合18～24小时，得到带模板分子的聚合物；
(4)将步骤3)得到的聚合物研磨、筛分后，用酸洗液洗脱除去模板分子；
(5)将除去模板分子的聚合物真空下烘干干燥，烘干温度为50～65℃，即得到超亲水性分子印迹聚合物。
其中，步骤(1)中，所述的模板为断氧化马钱苷，獐牙菜苷，莫诺苷，甲氧基莫诺苷，山茱萸苷，马钱苷，优选为马钱苷。
双乙烯功能单体同时起到功能单体和交联剂的作用。
致孔剂为去离子水。
引发剂为偶氮二异戊腈或偶氮二异丁腈，优选为偶氮二异丁腈。
优选的，上述步骤4)中的聚合物经过研磨后过150～200目筛；除去模板分子的酸洗液为体积分数10～20％的乙酸的乙醇溶液。
本发明还提供了利用上述制备方法制备得到的超亲水性分子印迹聚合物。
本发明还提供了上述超亲水性分子印迹聚合物在对中药复方制剂提取物中的环烯醚萜苷进行固相萃取、富集纯化中的应用，包括如下步骤：以所述的超亲水性分子印迹聚合物作柱层析填料装柱，然后用中药复方制剂提取液上柱，对提取物中的环烯醚萜苷进行固相萃取；
再用体积比为8-12:1的环己烷和醇的混合溶液淋洗；
最后，将层析柱用醇洗脱，流出液为包括断氧化马钱苷、獐牙菜苷、莫诺苷、甲氧基莫诺苷、山茱萸苷和马钱苷的纯化溶液。
优选的，所述的醇为乙醇、异丙醇、正丙醇或正丁醇。
超亲水分子印迹聚合物的再生重复利用：将分子印迹聚合物用95％乙醇洗脱后即可再生用于下一次纯化富集用。
本发明的有益效果为：
(1)本发明用双乙烯功能单体替代了传统的功能单体和交联剂，将两者合二为一，适用于水相中印迹的亲水性功能单体。
(2)本发明以亲水性功能单体、在水相中制备环烯醚萜苷模板分子印迹聚合物，与传统脂溶性功能单体制备的分子印迹聚合物相比，本发明中制备的聚合物具有良好亲水性，在水介质中具有更好的吸附性能。
(3)本发明提供的制备超亲水性分子印迹聚合物方法操作简便、再生方法简单、重复利用率高。
(4)本发明制备的亲水性分子印迹聚合物用作柱层析填料，实现对基质复杂中药制剂提取液进行前处理，建立一种新型的样品前处理分析方法。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明的技术方案作进一步说明。
以下实施例中双乙烯功能单体1号和双乙烯功能单体2号分别为
实施例1
超亲水性分子印迹聚合物的制备：
(1)备料
各原料组分按如下用量配比配料：模板分子马钱苷0.91g，双乙烯功能单体1号11.98g，引发剂偶氮二异丁腈0.08g，制孔剂去离子水55.31g；
(2)制备带有模板的超亲水分子印迹聚合物
将上述备好的马钱苷、双乙烯功能单体1、偶氮二异丁腈、去离子水加入到反应釜中混合均匀，超声脱气15min，然后充氮除氧15分钟，密封后于60℃恒温油浴聚合24小时，得到带有模板分子的聚合物。
(3)制备脱去模板分子的分子印迹聚合物
将上述制备的聚合物碾磨过200目筛，即得到带有模板分子的聚合物颗粒，用体积分数为10％的乙酸的乙醇溶液洗脱，于60℃真空干燥后，得到分子印迹聚合物15.1g。
超亲水性分子印迹聚合物在纯化富集环烯醚萜苷中的应用：
取10g本实例制得的分子印迹聚合物装柱，称取六味地黄丸1g粉碎，加入25mL去离子水加热回流提取2小时，过滤，残渣重复提取3次，收集滤液混匀后上柱。待上柱溶液流尽后，用乙醇进行淋洗，得淋洗液。层析柱再用乙醇/三乙胺(90：10，v/v)在65℃下洗脱，高效液相色谱说明分子印迹-固相萃取对六种环烯醚萜苷有较好纯化富集效果。结果表明，由本发明建立的方法得到的环烯醚萜苷的回收率为87.9％～98.3％，精密度用RSD表示，小于5.8％。测定的线性范围为0.01～50μg/mL。被分析的六味地黄丸样品中六种环烯醚萜苷的检出限范围为0.005～0.01μg/mL，定量限范围为0.018～0.032μg/mL。
实施例2
亲水性栀子苷假模板分子印迹聚合物的制备：
各原料组分按如下用量配比配料：模板分子马钱苷1.1g，双乙烯功能单体2号12.05g，引发剂偶氮二异丁腈0.07g，制孔剂去离子水56.33g。制备分子印迹过程同实施例1，最后得到分子印迹聚合物16.3g。
超亲水性分子印迹聚合物在纯化富集环烯醚萜苷中的应用：
取10g本实例制得的分子印迹聚合物装柱，称取六味地黄丸1g粉碎，加入25mL去离子水加热回流提取2小时，过滤，残渣重复提取3次，收集滤液混匀后上柱。待上柱溶液流尽后，用乙醇进行淋洗，得淋洗液。层析柱再用乙醇/三乙胺(90：10，v/v)在65℃下洗脱，高效液相色谱说明分子印迹-固相萃取对六种环烯醚萜苷有较好纯化富集效果。结果表明，由本发明建立的方法得到的环烯醚萜苷的回收率为85.6％～97.3％，精密度用RSD表示，小于5.1％。测定的线性范围为0.01～50μg/mL。被分析的六味地黄丸样品中六种环烯醚萜苷的检出限范围为0.004～0.02μg/mL，定量限范围为0.016～0.031μg/mL。
实施例3
超亲水性分子印迹聚合物的制备：
各原料组分按如下用量配比配料：模板分子断氧化马钱苷1.5g，双乙烯功能单体1号12.88g，引发剂偶氮二异丁腈0.09g，制孔剂去离子水58.91g。制备分子印迹过程同实施例1，最后得到分子印迹聚合物17.3g。
超亲水性分子印迹聚合物在纯化富集环烯醚萜苷中的应用：
取10g本实例制得的分子印迹聚合物装柱，称取六味地黄丸1g粉碎，加入25mL去离子水加热回流提取2小时，过滤，残渣重复提取3次，收集滤液混匀后上柱。待上柱溶液流尽后，用乙醇进行淋洗，得淋洗液。层析柱再用乙醇/三乙胺(90：10，v/v)在65℃下洗脱，高效液相色谱说明分子印迹-固相萃取对六种环烯醚萜苷有较好纯化富集效果。结果表明，由本发明建立的方法得到的环烯醚萜苷的回收率为88.9％～97.9％，精密度用RSD表示，小于5.7％。测定的线性范围为0.01～50μg/mL。被分析的六味地黄丸样品中六种环烯醚萜苷的检出限范围为0.0051～0.015μg/mL，定量限范围为0.017～0.031μg/mL。
实施例4
超亲水性分子印迹聚合物的制备：
各原料组分按如下用量配比配料：模板分子断氧化马钱苷1.3g，双乙烯功能单体2号13.96g，引发剂偶氮二异丁腈0.09g，制孔剂去离子水59.29g。制备分子印迹过程同实施例1，最后得到分子印迹聚合物18.0g。
超亲水性分子印迹聚合物在纯化富集环烯醚萜苷中的应用：
取10g本实例制得的分子印迹聚合物装柱，称取六味地黄丸1g粉碎，加入25mL去离子水加热回流提取2小时，过滤，残渣重复提取3次，收集滤液混匀后上柱。待上柱溶液流尽后，用乙醇进行淋洗，得淋洗液。层析柱再用乙醇/三乙胺(90：10，v/v)在65℃下洗脱，高效液相色谱说明分子印迹-固相萃取对六种环烯醚萜苷有较好纯化富集效果。结果表明，由本发明建立的方法得到的环烯醚萜苷的回收率为88.8％～98.1％，精密度用RSD表示，小于5.6％。测定的线性范围为0.01～50μg/mL。被分析的六味地黄丸样品中六种环烯醚萜苷的检出限范围为0.0049～0.012μg/mL，定量限范围为0.017～0.031μg/mL。
实施例5
超亲水性分子印迹聚合物的制备：
各原料组分按如下用量配比配料：模板分子獐牙菜苷1.3g，双乙烯功能单体1号15.99g，引发剂偶氮二异丁腈0.1g，制孔剂去离子水6.9g。制备分子印迹过程同实施例1，最后得到分子印迹聚合物18.3g。
超亲水性分子印迹聚合物在纯化富集环烯醚萜苷中的应用：
取10g本实例制得的分子印迹聚合物装柱，称取六味地黄丸1g粉碎，加入25mL去离子水加热回流提取2小时，过滤，残渣重复提取3次，收集滤液混匀后上柱。待上柱溶液流尽后，用乙醇进行淋洗，得淋洗液。层析柱再用乙醇/三乙胺(90：10，v/v)在65℃下洗脱，高效液相色谱说明分子印迹-固相萃取对六种环烯醚萜苷有较好纯化富集效果。结果表明，由本发明建立的方法得到的环烯醚萜苷的回收率为87.8％～98.1％，精密度用RSD表示，小于5.4％。测定的线性范围为0.01～50μg/mL。被分析的六味地黄丸样品中六种环烯醚萜苷的检出限范围为0.0045～0.01μg/mL，定量限范围为0.016～0.032μg/mL。
实施例6
超亲水性分子印迹聚合物的制备：
各原料组分按如下用量配比配料：模板分子獐牙菜苷1.19g，双乙烯功能单体2号11.98g，引发剂偶氮二异丁腈0.08g，制孔剂去离子水55.4g。制备分子印迹过程同实施例1，最后得到分子印迹聚合物16.5g。
超亲水性分子印迹聚合物在纯化富集环烯醚萜苷中的应用：
取10g本实例制得的分子印迹聚合物装柱，称取六味地黄丸1g粉碎，加入25mL去离子水加热回流提取2小时，过滤，残渣重复提取3次，收集滤液混匀后上柱。待上柱溶液流尽后，用乙醇进行淋洗，得淋洗液。层析柱再用乙醇/三乙胺(90：10，v/v)在65℃下洗脱，高效液相色谱说明分子印迹-固相萃取对六种环烯醚萜苷有较好纯化富集效果。结果表明，由本发明建立的方法得到的环烯醚萜苷的回收率为87.5％～98.7％，精密度用RSD表示，小于5.3％。测定的线性范围为0.01～50μg/mL。被分析的六味地黄丸样品中六种环烯醚萜苷的检出限范围为0.003～0.01μg/mL，定量限范围为0.018～0.033μg/mL。
实施例7
超亲水性分子印迹聚合物的制备：
各原料组分按如下用量配比配料：模板分子莫诺苷0.99g，双乙烯功能单体1号11.88g，引发剂偶氮二异丁腈0.09g，制孔剂去离子水57.21g。制备分子印迹过程同实施例1，最后得到分子印迹聚合物16.3g。
超亲水性分子印迹聚合物在纯化富集环烯醚萜苷中的应用：
取10g本实例制得的分子印迹聚合物装柱，称取六味地黄丸1g粉碎，加入25mL去离子水加热回流提取2小时，过滤，残渣重复提取3次，收集滤液混匀后上柱。待上柱溶液流尽后，用乙醇进行淋洗，得淋洗液。层析柱再用乙醇/三乙胺(90：10，v/v)在65℃下洗脱，高效液相色谱说明分子印迹-固相萃取对六种环烯醚萜苷有较好纯化富集效果。结果表明，由本发明建立的方法得到的环烯醚萜苷的回收率为88.9％～98.4％，精密度用RSD表示，小于5.4％。测定的线性范围为0.01～50μg/mL。被分析的六味地黄丸样品中六种环烯醚萜苷的检出限范围为0.0051～0.012μg/mL，定量限范围为0.016～0.035μg/mL。
实施例8
超亲水性分子印迹聚合物的制备：
各原料组分按如下用量配比配料：模板分子莫诺苷1.1g，双乙烯功能单体2号10.88g，引发剂偶氮二异丁腈0.09g，制孔剂去离子水57.01g。制备分子印迹过程同实施例1，最后得到分子印迹聚合物17.3g。
超亲水性分子印迹聚合物在纯化富集环烯醚萜苷中的应用：
取10g本实例制得的分子印迹聚合物装柱，称取六味地黄丸1g粉碎，加入25mL去离子水加热回流提取2小时，过滤，残渣重复提取3次，收集滤液混匀后上柱。待上柱溶液流尽后，用乙醇进行淋洗，得淋洗液。层析柱再用乙醇/三乙胺(90：10，v/v)在65℃下洗脱，高效液相色谱说明分子印迹-固相萃取对六种环烯醚萜苷有较好纯化富集效果。结果表明，由本发明建立的方法得到的环烯醚萜苷的回收率为87.9％～98.3％，精密度用RSD表示，小于5.8％。测定的线性范围为0.01～50μg/mL。被分析的六味地黄丸样品中六种环烯醚萜苷的检出限范围为0.0053～0.013μg/mL，定量限范围为0.015～0.034μg/mL。
实施例9
超亲水性分子印迹聚合物的制备：
各原料组分按如下用量配比配料：模板分子甲氧基莫诺苷1.3g，双乙烯功能单体1号12.89g，引发剂偶氮二异丁腈0.1g，制孔剂去离子水60.21g。制备分子印迹过程同实施例1，最后得到分子印迹聚合物18.5g。
超亲水性分子印迹聚合物在纯化富集环烯醚萜苷中的应用：
取10g本实例制得的分子印迹聚合物装柱，称取六味地黄丸1g粉碎，加入25mL去离子水加热回流提取2小时，过滤，残渣重复提取3次，收集滤液混匀后上柱。待上柱溶液流尽后，用乙醇进行淋洗，得淋洗液。层析柱再用乙醇/三乙胺(90：10，v/v)在65℃下洗脱，高效液相色谱说明分子印迹-固相萃取对六种环烯醚萜苷有较好纯化富集效果。结果表明，由本发明建立的方法得到的环烯醚萜苷的回收率为87.8％～98.6％，精密度用RSD表示，小于5.3％。测定的线性范围为0.01～50μg/mL。被分析的六味地黄丸样品中六种环烯醚萜苷的检出限范围为0.0048～0.009μg/mL，定量限范围为0.017～0.031μg/mL。
实施例10
超亲水性分子印迹聚合物的制备：
各原料组分按如下用量配比配料：模板分子甲氧基莫诺苷1.3g，双乙烯功能单体2号14.01g，引发剂偶氮二异丁腈0.1g，制孔剂去离子水61.34g。制备分子印迹过程同实施例1，最后得到分子印迹聚合物19.3g。
超亲水性分子印迹聚合物在纯化富集环烯醚萜苷中的应用：
取10g本实例制得的分子印迹聚合物装柱，称取六味地黄丸1g粉碎，加入25mL去离子水加热回流提取2小时，过滤，残渣重复提取3次，收集滤液混匀后上柱。待上柱溶液流尽后，用乙醇进行淋洗，得淋洗液。层析柱再用乙醇/三乙胺(90：10，v/v)在65℃下洗脱，高效液相色谱说明分子印迹-固相萃取对六种环烯醚萜苷有较好纯化富集效果。结果表明，由本发明建立的方法得到的环烯醚萜苷的回收率为89.0％～98.1％，精密度用RSD表示，小于5.8％。测定的线性范围为0.01～50μg/mL。被分析的六味地黄丸样品中六种环烯醚萜苷的检出限范围为0.005～0.01μg/mL，定量限范围为0.016～0.031μg/mL。
实施例11
超亲水性分子印迹聚合物的制备：
各原料组分按如下用量配比配料：模板分子山茱萸苷1.2g，双乙烯功能单体1号12.87g，引发剂偶氮二异丁腈0.09g，制孔剂去离子水59.99g。制备分子印迹过程同实施例1，最后得到分子印迹聚合物18.7g。
超亲水性分子印迹聚合物在纯化富集环烯醚萜苷中的应用：
取10g本实例制得的分子印迹聚合物装柱，称取六味地黄丸1g粉碎，加入25mL去离子水加热回流提取2小时，过滤，残渣重复提取3次，收集滤液混匀后上柱。待上柱溶液流尽后，用乙醇进行淋洗，得淋洗液。层析柱再用乙醇/三乙胺(90：10，v/v)在65℃下洗脱，高效液相色谱说明分子印迹-固相萃取对六种环烯醚萜苷有较好纯化富集效果。结果表明，由本发明建立的方法得到的环烯醚萜苷的回收率为88.8％～98.6％，精密度用RSD表示，小于5.6％。测定的线性范围为0.01～50μg/mL。被分析的六味地黄丸样品中六种环烯醚萜苷的检出限范围为0.0046～0.011μg/mL，定量限范围为0.016～0.034μg/mL。
实施例12
超亲水性分子印迹聚合物的制备：
各原料组分按如下用量配比配料：模板分子山茱萸苷1.92g，双乙烯功能单体2号15.89g，引发剂偶氮二异丁腈0.1g，制孔剂去离子水65.29g。制备分子印迹过程同实施例1，最后得到分子印迹聚合物20.5g。
超亲水性分子印迹聚合物在纯化富集环烯醚萜苷中的应用：
取10g本实例制得的分子印迹聚合物装柱，称取六味地黄丸1g粉碎，加入25mL去离子水加热回流提取2小时，过滤，残渣重复提取3次，收集滤液混匀后上柱。待上柱溶液流尽后，用乙醇进行淋洗，得淋洗液。层析柱再用乙醇/三乙胺(90：10，v/v)在65℃下洗脱，高效液相色谱说明分子印迹-固相萃取对六种环烯醚萜苷有较好纯化富集效果。结果表明，由本发明建立的方法得到的环烯醚萜苷的回收率为89.1％～97.1％，精密度用RSD表示，小于5.6％。测定的线性范围为0.01～50μg/mL。被分析的六味地黄丸样品中六种环烯醚萜苷的检出限范围为0.0051～0.012μg/mL，定量限范围为0.017～0.029μg/mL。
上述虽然对本发明的具体实施方式进行了描述，但并非对发明保护范围的限制，所属领域技术人员应该明白，在本发明的技术方案的基础上，本领域技术人员不需要付出创造性劳动即可做出的各种修改或变形仍在本发明的保护范围内。

Claims (10)

1.一种超亲水性分子印迹聚合物的制备方法，其特征在于：以环烯醚萜苷为模板分子，通过双乙烯功能单体在水相中制备分子印迹聚合物，其中，制备得到的分子印迹聚合物包含有针对所述环烯醚萜苷的特异性结合空腔；
所述双乙烯功能单体选自以下物质，其结构式如下：
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述环烯醚萜苷为断氧化马钱子苷、獐牙菜苷、莫诺苷、甲氧基莫诺苷、山茱萸苷或马钱苷中的一种或多种。
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：
1)在水性溶剂体系中，提供双乙烯功能单体和模板分子，其中，所述双乙烯功能单体和所述模板分子通过可逆的自组装形成一种共价的模板-单体络合物；
2)使所述模板-单体络合物聚合，得到聚合物；
3)除去所述聚合物中的模板分子；
其中，所述水性溶剂体系使得能够形成所述的模板-单体络合物；
其中，存在促进形成所述模板-单体络合物的一种试剂，
其中，双乙烯功能单体同时起到功能单体和交联剂的作用。
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于：
步骤2)中，所述聚合的方法选自以下方法：溶液聚合、本体聚合、沉淀聚合、乳液聚合、悬浮聚合。
5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于：所述促进形成所述模板-单体络合物的试剂为偶氮二异戊腈或偶氮二异丁腈。
6.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于：具体包括以下步骤：
(1)将模板、双乙烯功能单体、引发剂、致孔剂按质量比为1～3:10～15:0.05～0.10:20～70加入到反应釜中充分混合，得到混合物；
(2)将步骤1)中的混合物，超声10-15分钟，然后充氮气10-20分钟除氧；
(3)将除氮后的混合物密封后，于40～60℃条件下聚合18～24小时，得到带模板分子的聚合物；
(4)将步骤3)得到的聚合物研磨、筛分后，用酸洗液洗脱除去模板分子；
(5)将除去模板分子的聚合物真空下烘干干燥，烘干温度为50～65℃，即得到超亲水性分子印迹聚合物。
7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于：步骤4)中的聚合物经过研磨后过150～200目筛。
8.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于：除去模板分子的酸洗液为体积分数10～20％的乙酸的乙醇溶液。
9.利用权利要求1-8任一所述制备方法制备得到的超亲水性分子印迹聚合物。
10.权利要求9所述超亲水性分子印迹聚合物在对中药复方制剂提取物中的环烯醚萜苷进行固相萃取、富集纯化中的应用，其特征在于：包括如下步骤：以所述的超亲水性分子印迹聚合物作柱层析填料装柱，
然后用中药复方制剂提取液上柱，对提取物中的环烯醚萜苷进行固相萃取；再用体积比为8-12:1的环己烷和醇的混合溶液淋洗；
最后，将层析柱用醇洗脱，流出液为包括断氧化马钱苷、獐牙菜苷、莫诺苷、甲氧基莫诺苷、山茱萸苷和马钱苷的纯化溶液。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1745106A (zh) * 2003-01-30 2006-03-08 Mip技术股份公司 用于从食品中提取组分的分子印迹聚合物
CN105315397A (zh) * 2015-11-30 2016-02-10 山东省分析测试中心 一种用于检测栀子苷的亲水性假模版分子印迹聚合物的制备方法和应用
CN106046254A (zh) * 2016-07-11 2016-10-26 山东省分析测试中心 富集京尼平苷的亲水性分子印迹聚合物及制备方法和应用

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