CN106551141A

CN106551141A - 一种仔猪用配合饲料及其制备方法和应用

Info

Publication number: CN106551141A
Application number: CN201611059497.XA
Authority: CN
Inventors: 王丹; 岳隆耀; 朱秋凤; 王继苹; 王丽娟; 邵彩梅
Original assignee: HEFENG LIVESTOCK FARMING CO Ltd LIAONING
Current assignee: HEFENG LIVESTOCK FARMING CO Ltd LIAONING
Priority date: 2016-11-18
Filing date: 2016-11-18
Publication date: 2017-04-05

Abstract

本发明公开了一种仔猪用配合饲料及其制备方法和应用，属于仔猪饲料加工技术领域，主要由以下质量百分比的原料制备：玉米60～70份、豆粕10～20份、膨化大豆5～10份、蒸汽鱼粉2～6份、乳糖1～5份、米糠粕1～4份、麦麸0.2～1.2份、甜菜粕0.5～1份、稻壳粉0.3～1份、复合维生素0.03～0.09份、酸化剂0.2～0.6份、植酸酶1.7～4份、L‑赖氨酸0.2～0.6份、DL‑蛋氨酸0.01～0.05份、防霉剂0.01～1份、氧化锌0.1～0.15份、复合微量元素0.2～0.6份、酵母菌剂0.5～2份等。该配合饲料可提高仔猪的蛋白质水平，而且可以提高其消化吸收率以及免疫力，同时，保证仔猪对锌、磷、微量元素、蛋白以及淀粉等营养物质的有效消化吸收率，减少污染。

Description

一种仔猪用配合饲料及其制备方法和应用

技术领域

本发明属于仔猪饲料加工技术领域，具体地涉及一种仔猪配合饲料及其制备方法和应用。

背景技术

仔猪良好的生长性能是现代养猪生产的关键之一。随着仔猪早期断奶日龄的日益提前，发育不健全的仔猪肠道越来越难以适应高营养、高能量的固体饲料，造成生产中仔猪腹泻和死亡率增高。促进幼龄仔猪肠道发育提前成熟，并营造仔猪肠道良好的消化吸收生理环境，是近年来仔猪营养与饲料开发技术领域的热点。

目前，酵母作为饲料添加剂已经广泛应用于仔猪饲料中。

酵母在分类上属于真菌门，是含多种不同分类地位的酵母菌的生态类群，属于兼性厌氧微生物，分布广泛，种类多。酵母添加剂是利用生物技术生产的微生物添加剂的一种，不仅含有丰富的营养物质，可直接作为动物饲料的蛋白源，而且还可稳定胃肠道微生物区系，提高动物对纤维素和矿物质的消化，增强动物免疫力，吸附致病因子，从而促进动物健康。酵母添加剂在养殖业生产中用作微生态饲料添加剂始于20世纪20年代中期，最早用作反刍动物的蛋白质补充饲料。在美国，该添加剂已被作为一种常规的饲料成分得到广泛的应用。

酵母菌具有的众多生理功能，使其在饲料工业中得到广泛的研究与应用，其作用机制总结如下：l)直接营养作用，提供动物多种营养成分，促进动物生长发育。2)提高动物肠道消化酶活性。3)促进微生物繁殖和增强活性，调节胃肠道微生态平衡。4)提高动物对纤维素和矿物质的消化率。5)提高免疫力和抗应激能力，吸附致病因子，保障动物健康。

酵母菌中刺激动物免疫机能的主要是酵母菌的细胞壁，酵母细胞壁的活性成分主要有葡聚糖、甘露寡糖、糖蛋白和几丁质组成。这些活性成分中发挥作用的主要是葡聚糖和甘露寡糖。

此外，酵母中包含某些抗氧化活性成分，例如谷胱甘肽，其主要功能有：(1)清除自由基、过氧化物、重金属及黄曲霉毒素等毒物；(2)参与氨基酸(谷氨酰氨、半胱氨酸及其它中性氨基酸)的转运；(3)利于铁的吸收、硒的吸收、钙的吸收，谷胱甘肽还可以使饲料中的过氧化脂肪酸在吸收时或吸收后恢复为正常的脂肪；(4)保护胃肠道黏膜上皮，防止因炎症、局部缺血、氧化物质等对肠黏膜的损伤；(5)贮存并提供其组成氨基酸(1尤其是半胱氧酸)；(6)参与蛋白质和DNA的合成；(7)作为还原物质，利于维生素E、维生素C的还原，维持巯基酶活性。

由此可见，活性酵母作为微生物菌剂在仔猪饲料中发挥着重要的作用。

另一方面，存在于植物性蛋白质中的植酸，不仅能结合养分导致养分内源性损失，且其含量较高。植酸能与金属离子如锌离子、铜离子等形成稳定的络合物——植酸盐，还能与蛋白质、淀粉结合，使内源性淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶的活性降低，使各养分的消化率明显下降。植酸不被单胃动物所吸收，大部分以粪便形式被排出体外，磷的利用率大大降低，还造成了环境污染，特别是水的污染。

此外，由于植物性饲料中的磷主要是植酸磷，猪无法利用植酸磷，大量的磷以植酸磷的形式排出。通过添加外源植酸酶可将植酸磷中的磷有效地释放出来，提高磷的利用率，降低磷的排泄量。

目前，工业仔猪配合饲料中，饲料中普遍添加有植酸酶，通常植酸酶添加量为1000IU/kg左右(每千克饲料中酶活力1000IU)，从而有效提高植酸磷的利用率，降低磷对环境的污染并消除植酸的抗营养作用，同时改善了机体对蛋白质和矿物质等营养物质的利用率，增加了饲料配方的调整空间，给饲料生产创造有利条件，给养殖业带来较大的经济效益。

目前，已经公开的涉及到添加有微生态制剂以及植酸酶适用于仔猪用配合饲料及其制备方法众多，如申请号为201410827556.8的发明，公开了“一种提高仔猪成活率的预配合饲料及其制备方法”，该方法中预配合饲料包括磷酸氢钙220～240份，石粉300～320份，食盐75～85份，赖氨酸25～30份，蛋氨酸8～10份，苏氨酸4～6份，复合酶制剂5～7份等，其中植酸酶5000为4～6份，微生态制剂8～10份。由于仔猪在采食的饲料的过程中，仅有一部分被消化，部分则不能消化，易发生腹泻。该发明利用植酸酶以及微生态制剂等，不仅能改善仔猪肠道健康，维持肠道有益菌群的平衡，增强仔猪健康，减少仔猪腹泻，降低仔猪的死亡率，更能提高饲料消化利用率，较好地改善仔猪的生长性能。

申请号为201610466116.3的发明，公开了“一种幼猪专用饲料”，其中包括玉米40份、小麦次粉30份、豆粕10份、发酵稻壳5份、植物提取物2份等，其中还添加了竹荪盖菌粉5份、植酸酶1份，使所得饲料能促进仔猪生长，提高存活率。但该发明为了增强仔猪机体的免疫功能，提高其防病抗病的能力，增加了半截叶、黄麻根等药物成分，虽然属于天然药物，但是势必药物中的某些毒性成分也会残留在仔猪体内，在最终人的食用过程中，易对造成不良影响。

申请号为201610439039.2的发明，公开了“一种仔猪饲料”，包括以下重量份组分：玉米粉400～450份，膨化玉米150～200份，大豆粕150～200份，乳清粉50～80，白鱼粉20～30份，发酵豆粕20～60份，石粉5～10份，磷酸氢钙10～15份，酸化剂5～10份，有机铬2份，猪用复合维生素0.3～0.5份，维生素C 0.2～0.3份，乳猪专用复合酶0.5份等，其中还添加了枯草芽孢杆菌0.8份以及耐高温植酸酶0.12份。该发明所述仔猪饲料不含抗生素，能够提高仔猪的消化、吸收功能，增强仔猪的免疫力，提高仔猪的采食量且仔猪的生产快速。

申请号为200910094362.0的发明，公开了“一种环保型乳仔猪教槽料”，在乳仔猪基础饲料配方中添加蛋白酶5～15万IU/T，植酸酶500～1000IU/T，乳酸4～12kg/T，精胺0.5～1.5g/T。从而完全替代常规乳仔猪饲料中的抗生素和合成抗菌药物，显著提高仔猪生长性能，减少仔猪粪尿中各类未消化营养物质的排放，以达到提高养殖经济效益的同时兼顾环境保护的生产要求。

上述公开的仔猪用配合饲料，为了提高仔猪对纤维素和矿物质的消化率、提升抗病能力，通常发明中添加复合酶制剂以及中草药成分。但复合酶制剂的添加势必会提高饲料成本，中草药的添加也会对肉类食品安全性造成影响。

由于植酸酶添加量适中，且均选择直接添加混合的方式，在饲料混合以及被仔猪进食、消化的过程中，植酸酶对植酸易酶解不充分，从而影响了仔猪对于金属元素、淀粉以及蛋白等的有效地消化吸收。

综上，在饲料中添加微生物菌剂可有效替代中草药以及其他营养物质，不仅可提高仔猪的蛋白质水平，而且可以提高其消化吸收率以及免疫力，同时选择有效剂量植酸酶的添加，可以确保植酸被酶解充分的同时，保证仔猪对锌、磷、微量元素、蛋白以及淀粉等营养物质的有效消化吸收率，减少污染。二者配合使用及其制备方法对于仔猪的快速生长是十分有必要的。

发明内容

本发明所解决的技术问题是克服上述现有技术中仔猪配合饲料制备的缺陷，在混合饲料中添加入酿酒酵母菌剂，提高仔猪的蛋白质水平，提高机体抗氧化活性，有效提高其消化吸收率以及免疫力；通过添加较高剂量植酸酶，可以有效酶解植酸，并复合添加氧化锌，不仅保证适时地充分利用植酸酶，使外源的磷、锌以及其他微量元素可以被仔猪有效地消化吸收，有效促进仔猪的生长，有效降低锌离子的添加量，减少环境污染。

为了达到上述目的，本发明采用以下技术方案：

一种仔猪用配合饲料，主要由以下重量份数的原料制备：

玉米60～70份、豆粕10～20份、膨化大豆5～10份、蒸汽鱼粉2～6份、乳糖1～5份、米糠粕1～4份、麦麸0.2～1.2份、甜菜粕0.5～1份、稻壳粉0.3～1份、复合维生素0.03～0.09份、酸化剂0.2～0.6份、植酸酶0.02～0.03份、L-赖氨酸0.2～0.6份、DL-蛋氨酸0.01～0.05份、防霉剂0.01～1份、氧化锌0.1～0.15份、复合微量元素0.2～0.6份、磷酸氢钙0.4～1.2份、石粉0.2～0.8份、食盐0.1～0.5份、玉米油1～5份、酵母菌剂0.5～2份。

优选地，所述仔猪用配合饲料，主要由以下重量份数的原料制备：

玉米64～66份、豆粕13～17份、膨化大豆6～9份、蒸汽鱼粉3～5份、乳糖2～4份、米糠粕1～2份、麦麸0.5～0.9份、甜菜粕0.6～0.9份、稻壳粉0.5～0.8份、复合维生素0.04～0.06份、酸化剂0.3～0.6份、植酸酶0.02～0.03份、L-赖氨酸0.3～0.4份、DL-蛋氨酸0.02～0.04份、防霉剂0.04～0.06份、氧化锌0.1～0.13份、复合微量元素0.3～0.5份、磷酸氢钙0.7～0.9份、石粉0.4～0.6份、食盐0.2～0.4份、玉米油1～3份、酵母菌剂1～2份。

更优选地，所述仔猪用配合饲料，主要由以下重量份数的原料制备：

玉米65份、豆粕15份、膨化大豆7份、蒸汽鱼粉4份、乳糖3份、米糠粕1.5份、麦麸0.7份、甜菜粕0.8份、稻壳粉0.6份、复合维生素0.05份、酸化剂0.5份、植酸酶0.025份、L-赖氨酸0.3份、DL-蛋氨酸0.03份、防霉剂0.05份、氧化锌0.12份、复合微量元素0.4份、磷酸氢钙0.8份、石粉0.5份、食盐0.3份、玉米油2份、酵母菌剂1.5份。

进一步地，所述植酸酶购自武汉新华扬生物股份有限公司，酶活力：10000IU/g；

进一步地，所述酵母菌为酿酒酵母tlj2016，保藏号为CGMCC No.12789；

优选地，所述酵母菌剂的制备方法，包括如下步骤：

取1环活化后的酿酒酵母tlj2016斜面菌体接种至装有100m L种子培养基的500mL三角瓶中培养，在28～30℃、摇床转速150～200r/min条件下培养25～30h，得到一级种子液；将培养好的一级种子液按5％～10％(v/v)的接种量，接种至装有100m L发酵培养基的500m L三角瓶中进行发酵培养，发酵时间25～30h，温度28～30℃，摇床转速150～200r/min，得到二级种子液。将二级种子液以5％～10％接种量接入到3L发酵培养基的5L发酵罐，恒温培养，通风量4～6L/min，温度28～30℃，发酵全程调节发酵液pH值为6.0～6.5，转速150～200r/min，发酵至25～30h时，一次性添加终浓度为25～30mmol/L的L-半胱氨酸，继续发酵20～30h得到最终发酵液，最终发酵液减压浓缩，20-35℃粉碎至粒度0.1-0.6mm即得酵母菌剂；

所述种子培养基(g/L)：(NH₄)₂SO₄ 6、葡萄糖35、K₂HPO₄·3H₂O 3、KH₂PO₄ 0.5、酵母粉11、MnSO₄ 0.1、KCl 0.1、FeSO₄ 0.1、MgSO₄·7H₂O 0.1，余量为水，pH 6.0；

所述发酵培养基(g/L)：(NH₄)₂SO₄ 10、糖蜜150、K₂HPO₄·3H₂O 8、KH₂PO₄ 0.5、酵母粉5、玉米浆10、MnSO₄ 0.1、KCL 0.1、FeSO₄ 0.1、MgSO₄·7H₂O 0.1,余量为水，pH 6.0。

所述酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)tlj2016已于2016年7月15日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.12789，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编100101。

所述酿酒酵母tlj2016的最适生长pH为6.0-6.5,最适生长温度为28-35℃；

所述酿酒酵母tlj2016是从一株宁夏果园中分离得到的酿酒酵母出发菌株经以下步骤得到：

原始出发菌种→试管活化→硫酸二乙酯(DES)诱变→高渗平板筛选→亚硝基胍(NTG)诱变筛选→高渗平板初筛→摇瓶筛选→发酵复筛(产GSH能力)→传代稳定性试验。

1、本发明所提供的酿酒酵母对葡萄糖的耐受能力达到300g/L，利于其在高浓度葡萄糖条件下生产GSH；

2、本发明所提供的酿酒酵母在5L发酵罐中发酵生产GSH终浓度达到3308mg/L；

3、本发明所提供的酿酒酵母耐受L-半胱氨酸的能力远高于出发菌株，在5mmol/LL-半胱氨酸作用下仍能缓慢生长，在40mmol/LL-半胱氨酸作用下仍能保持GSH大量合成；

4、本发明所提供的酿酒酵母耐盐能力达到18％，有利于扩展其应用领域。

进一步地，所述酸化剂按照重量份数组成为：磷酸≥13份，乳酸≥30份，富马酸≥15份，柠檬酸≥12.5份，苹果酸≥1.5份；

优选地，所述酸化剂按照重量份数组成为：磷酸13份，乳酸30份，富马酸15份，柠檬酸12.5份，苹果酸1.5份。

进一步地，所述复合维生素由如下重量份数的原料组成：

维生素C 1～5份、维生素A 1～5份、维生素D₃ 0.5～1.5份、维生素E 2～6份、维生素K₃ 0.5～1.5份、维生素B₁ 0.1～0.5份、维生素B₂ 0.1～0.5份、维生素B₆ 0.5～3份、维生素B₁₂ 0.1～1.5份、烟酰胺1～4份；

优选地，所述复合维生素由如下重量份数的原料组成：

维生素C 3份、维生素A 3份、维生素D₃1份、维生素E 4份、维生素K₃ 1份、维生素B₁0.3份、维生素B₂ 0.3份、维生素B₆ 2份、维生素B₁₂ 0.8份、烟酰胺2.5份。

进一步地，所述复合微量元素由如下重量份数的原料组成：

硫酸亚铁2-4份、硫酸锰1-2份、葡萄糖酸锌1-2份、碱式氯化铜1-3份、赖氨酸螯合铁0.5-1份、亚硒酸钠0.1-0.2份、碘酸钙0.5-1份。

优选地，所述复合微量元素由如下重量份数的原料组成：

硫酸亚铁3份、硫酸锰1.5份、葡萄糖酸锌1.5份、碱式氯化铜2份、赖氨酸螯合铁0.7份、亚硒酸钠0.15份、碘酸钙0.7份。

本发明另一目的是提供上述仔猪用配合饲料的制备方法，包括如下步骤：

1)按照配方，将玉米、豆粕、膨化大豆、蒸汽鱼粉、乳糖、米糠粕、麦麸、甜菜粕、稻壳粉、复合维生素、酸化剂、植酸酶依次往饲料混合机中投料，边投料边混合，投料完成，继续混合20～30min；

2)向饲料混合机中继续依次投料：L-赖氨酸、DL-蛋氨酸、防霉剂、氧化锌、复合微量元素、磷酸氢钙、石粉、食盐、玉米油、酵母菌剂，边投料边混合，投料完成，继续混合20～30min，分装、打包即得仔猪用配合饲料。

有益效果：

1、饲料中添加的酿酒酵母，不仅可直接作为动物饲料的蛋白源，营养丰富，而且具有高GSH产量特性，对仔猪的生长具有显著促进作用，在高糖条件下，发酵50h后，其GSH含量达3308mg/L；此外对比该菌株对L-半胱氨酸具有较强的耐受能力，在含有40mmol/L的L-半胱氨酸浓度的发酵液中，其菌株生长活力旺盛，发酵结束后，菌体干重较出发菌株高出17.9g，GSH产量较出发菌株高出130.5g，因此，有利于通过添加前体氨基酸-L-半胱氨酸提促进GSH生产的特性，从而提高酿酒酵母菌抗氧化的特性，进而促进蛋白合成、提高养分利用率,最终促进仔猪的生长。该菌株还可稳定胃肠道微生物区系，提高动物对纤维素和矿物质的消化，增强动物免疫力。

2、在添加玉米、豆粕等蛋白饲料后，通过添加较高剂量植酸酶，可以有效酶解植酸，在混料阶段即可有效防止饲料中植酸与金属离子的螯合作用以及与蛋白、淀粉的结合会在饲料混合，从而使得饲料中的金属元素、蛋白质、淀粉等可以被仔猪直接消化吸收。另一方面，在饲料被仔猪进食以及被仔猪消化的过程中，由于高剂量植酸酶的添加，使得饲料在被仔猪咀嚼消化过程中游离出的植酸可以持续被植酸酶分解，从而保障了仔猪机体对于磷、锌等元素以及蛋白质、淀粉的有效持续吸收。保证适时地充分利用植酸酶，使外源的磷、锌以及其他微量元素可以被仔猪有效地消化吸收。

试验结果表明，本发明通过添加酿酒酵母tlj2016以及植酸酶的超剂量添加，该配合饲料较市售普通饲料在仔猪的平均日增重上显著提高了22.30％；饲喂28天后，仔猪的末重较普通饲料显著提高了2.42kg。此外仔猪在平均28天内的平均腹泻率仅为1.55％，较对普通饲料显著下降了44.64％。此外，其毛色评分为2.9，高于普通饲料喂养的仔猪0.61分。在粪便分析中：分数为3时，说明饲料的有效利用率较低，饲料并没有被仔猪有效地消化吸收，在对照组1中，仔猪食用市售的普通饲料后，其粪便评分为2.39分，相比于试验组3而言，更接近于3分，说明市售普通饲料对于仔猪并没有较好的消化吸收效率，而本发明的配合饲料通过酿酒酵母tlj2016以及超剂量植酸酶的添加不仅含有丰富的营养活性物质，而且其能促进蛋白合成，提高养分利用率,最终促进仔猪的生长提高了仔猪对于饲料的消化吸收。而另一方面，由于仔猪在最佳的采食量中，乳仔猪粪便较软，以成形圆柱状为最理想状态。从试验组3中可以明显看出，其粪便评分最为接近2分，这说明在使用乳仔猪的采食量高、肠道健康、生长快，相比于对照组1和对照组2而言，仔猪对试验组3的饲料的消化吸收有显著的提高，较好地改善和提高了仔猪的生长性能。

3、有效降低锌离子的添加量，减少污染。

避免了仔猪饲料中由于高锌添加导致的锌高排出量，有效避免了其对环境造成污染，特别是水质污染，有效地节省饲料。

试验结果表明，本发明中较低剂量的氧化锌饲料添加量，其日增重相比于添加较高剂量的锌饲料显著提高了11.50％；平均日采食量显著提高了8g/天；饲喂28天后，仔猪的末重显著提高了1.37kg。此外仔猪在平均28天内的平均腹泻率仅为1.55％，相比于添加较高剂量的锌饲料显著下降了24.76％；毛色评分为2.9，提高了0.18。在粪便评分中可以看出，试验组3本发明相比于添加较高剂量的锌饲料更接近于2分。由此可见，在超剂量添加植酸酶的配合饲料中，不仅有效降低了锌的添加量，而且相比较高剂量氧化锌的添加，获得了显著的效果，其日增重量、采食、毛色均有显著提高，而腹泻率也有明显的下降。

具体实施方式

下面通过具体的实施方案叙述本发明。除非特别说明，本发明中所用的技术手段均为本领域技术人员所公知的方法。另外，实施方案应理解为说明性的，而非限制本发明的范围，本发明的实质和范围仅由权利要求书所限定。对于本领域技术人员而言，在不背离本发明实质和范围的前提下，对这些实施方案中的物料成分和用量进行的各种改变或改动也属于本发明的保护范围。

实施例1

一种仔猪用配合饲料，主要由以下重量份数的原料制备：

玉米60份、豆粕10份、膨化大豆5份、蒸汽鱼粉2份、乳糖1份、米糠粕1份、麦麸0.2份、甜菜粕0.5份、稻壳粉0.3份、复合维生素0.03份、酸化剂0.2份、植酸酶0.02份、L-赖氨酸0.2份、DL-蛋氨酸0.01份、防霉剂0.01份、氧化锌0.1份、复合微量元素0.2份、磷酸氢钙0.4份、石粉0.2份、食盐0.1份、玉米油1份、酵母菌剂0.5份。

所述酵母菌剂的制备方法，包括如下步骤：

取1环活化后的酿酒酵母tlj2016斜面菌体接种至装有100m L种子培养基的500mL三角瓶中培养，在28℃、摇床转速150r/min条件下培养25h，得到一级种子液。将培养好的一级种子液按5％(v/v)的接种量，接种至装有100m L发酵培养基的500m L三角瓶中进行发酵培养，发酵时间25h，温度28℃，摇床转速150/min，得到二级种子液。将二级种子液以5％(v/v)接种量接入到3L发酵培养基的5L发酵罐，恒温培养，通风量4L/min，温度28℃，发酵全程调节发酵液pH值为6.0，转速150r/min，发酵至25h时，一次性添加终浓度为25mmol/L的L-半胱氨酸，继续发酵20h得到最终发酵液；最终发酵液减压浓缩，20℃粉碎至粒度0.1mm即得酵母菌剂；

酸化剂按照重量份数组成为：磷酸13份，乳酸30份，富马酸15份，柠檬酸12.5份，苹果酸1.5份。

复合维生素由如下重量份数的原料组成：

维生素C 1份、维生素A1份、维生素D₃ 0.5份、维生素E 2份、维生素K₃ 0.5份、维生素B₁ 0.1份、维生素B₂ 0.1份、维生素B₆ 0.5份、维生素B₁₂ 0.1份、烟酰胺1份。

复合微量元素由如下重量份数的原料组成：

硫酸亚铁2份、硫酸锰1份、葡萄糖酸锌1份、碱式氯化铜1份、赖氨酸螯合铁0.5份、亚硒酸钠0.1份、碘酸钙0.5份。

制备方法，包括如下步骤：

1)按照配方，将玉米、豆粕、膨化大豆、蒸汽鱼粉、乳糖、米糠粕、麦麸、甜菜粕、稻壳粉、复合维生素、酸化剂、植酸酶依次往饲料混合机中投料，边投料边混合，投料完成，继续混合20min；

2)向饲料混合机中继续依次投料：L-赖氨酸、DL-蛋氨酸、防霉剂、氧化锌、复合微量元素、磷酸氢钙、石粉、食盐、玉米油、酵母菌剂，边投料边混合，投料完成，继续混合20min，分装、打包即得仔猪用配合饲料。

实施例2

一种仔猪用配合饲料，主要由以下质量百分比的原料制备：

玉米70份、豆粕20份、膨化大豆10份、蒸汽鱼粉6份、乳糖5份、米糠粕4份、麦麸1.2份、甜菜粕1份、稻壳粉1份、复合维生素0.09份、酸化剂0.6份、植酸酶0.03份、L-赖氨酸0.6份、DL-蛋氨酸0.05份、防霉剂1份、氧化锌0.15份、复合微量元素0.6份、磷酸氢钙1.2份、石粉0.8份、食盐0.5份、玉米油5份、酵母菌剂2份。

所述酵母菌剂的制备方法，包括如下步骤：

取1环活化后的酿酒酵母tlj2016斜面菌体接种至装有100m L种子培养基的500mL三角瓶中培养，在30℃、摇床转速200r/min条件下培养30h，得到一级种子液。将培养好的一级种子液按10％(v/v)的接种量，接种至装有100m L发酵培养基的500m L三角瓶中进行发酵培养，发酵时间30h，温度30℃，摇床转速200r/min，得到二级种子液。将二级种子液以10％(v/v)接种量接入到3L发酵培养基的5L发酵罐，恒温培养，通风量4～6L/min，温度30℃，发酵全程调节发酵液pH值为6.5，转速200r/min，发酵至30h时，一次性添加终浓度为30mmol/L的L-半胱氨酸，继续发酵30h得到最终发酵液；最终发酵液减压浓缩，35℃粉碎至粒度0.6mm即得酵母菌剂；

酸化剂按照重量份数组成为：磷酸15份，乳酸35份，富马酸20份，柠檬酸18份，苹果酸5份。

复合维生素由如下重量份数的原料组成：

维生素C 5份、维生素A 5份、维生素D₃ 1.5份、维生素E 6份、维生素K₃ 1.5份、维生素B₁ 0.5份、维生素B₂ 0.5份、维生素B₆ 3份、维生素B₁₂ 1.5份、烟酰胺4份。

复合微量元素由如下重量份数的原料组成：

硫酸亚铁4份、硫酸锰2份、葡萄糖酸锌2份、碱式氯化铜3份、赖氨酸螯合铁1份、亚硒酸钠0.2份、碘酸钙1份。

制备方法，包括如下步骤：

1)按照配方，将玉米、豆粕、膨化大豆、蒸汽鱼粉、乳糖、米糠粕、麦麸、甜菜粕、稻壳粉、复合维生素、酸化剂、植酸酶依次往饲料混合机中投料，边投料边混合，投料完成，继续混合30min；

2)向饲料混合机中继续依次投料：L-赖氨酸、DL-蛋氨酸、防霉剂、氧化锌、复合微量元素、磷酸氢钙、石粉、食盐、玉米油、酵母菌剂，边投料边混合，投料完成，继续混合30min，分装、打包即得仔猪用配合饲料。

实施例3

一种仔猪用配合饲料，主要由以下质量百分比的原料制备：

所述酵母菌剂的制备方法，包括如下步骤：

取1环活化后的酿酒酵母tlj2016斜面菌体接种至装有100m L种子培养基的500mL三角瓶中培养，在28℃、摇床转速180r/min条件下培养28h，得到一级种子液。将培养好的一级种子液按6％(v/v)的接种量，接种至装有100m L发酵培养基的500m L三角瓶中进行发酵培养，发酵时间28h，温度28℃，摇床转速180r/min，得到二级种子液。将二级种子液以6％(v/v)接种量接入到3L发酵培养基的5L发酵罐，恒温培养，通风量5L/min，温度28℃，发酵全程调节发酵液pH值为6.2，转速180r/min，发酵至30h时，一次性添加终浓度为28mmol/L的L-半胱氨酸，继续发酵28h得到最终发酵液；最终发酵液减压浓缩，30℃粉碎至粒度0.3mm即得酵母菌剂；

酸化剂按照重量份数组成为：磷酸14份，乳酸32份，富马酸17份，柠檬酸15份，苹果酸3份。

复合维生素由如下重量份数的原料组成：

复合微量元素由如下重量份数的原料组成：

制备方法，包括如下步骤：

1)按照配方，将玉米、豆粕、膨化大豆、蒸汽鱼粉、乳糖、米糠粕、麦麸、甜菜粕、稻壳粉、复合维生素、酸化剂、植酸酶依次往饲料混合机中投料，边投料边混合，投料完成，继续混合25min；

2)向饲料混合机中继续依次投料：L-赖氨酸、DL-蛋氨酸、防霉剂、氧化锌、复合微量元素、磷酸氢钙、石粉、食盐、玉米油、酵母菌剂，边投料边混合，投料完成，继续混合25min，分装、打包即得仔猪用配合饲料。

实施例4

一种仔猪用配合饲料，主要由以下质量百分比的原料制备：

玉米60份、豆粕15份、膨化大豆10份、蒸汽鱼粉2份、乳糖3份、米糠粕4份、麦麸0.2份、甜菜粕0.7份、稻壳粉1份、复合维生素0.03份、酸化剂0.6份、植酸酶0.03份、L-赖氨酸0.6份、DL-蛋氨酸0.03份、防霉剂0.05份、氧化锌0.12份、复合微量元素0.6份、磷酸氢钙0.4份、石粉0.5份、食盐0.5份、玉米油1份、酵母菌剂2份。

所述酵母菌剂的制备方法，包括如下步骤：

取1环活化后的酿酒酵母tlj2016斜面菌体接种至装有100m L种子培养基的500mL三角瓶中培养，在28℃、摇床转速170r/min条件下培养28h，得到一级种子液。将培养好的一级种子液按6％(v/v)的接种量，接种至装有100m L发酵培养基的500m L三角瓶中进行发酵培养，发酵时间28h，温度28℃，摇床转速170r/min，得到二级种子液。将二级种子液以6％(v/v)接种量接入到3L发酵培养基的5L发酵罐，恒温培养，通风量5L/min，温度28℃，发酵全程调节发酵液pH值为6.2，转速170r/min，发酵至28h时，一次性添加终浓度为28mmol/L的L-半胱氨酸，继续发酵28h得到最终发酵液；最终发酵液减压浓缩，28℃粉碎至粒度0.5mm即得酵母菌剂；

酸化剂按照重量份数组成为：磷酸14份，乳酸32份，富马酸16份，柠檬酸14 份，苹果酸3份。

复合维生素由如下重量份数的原料组成：

维生素C 1份、维生素A3份、维生素D₃ 1.5份、维生素E 2份、维生素K₃ 1份、维生素B₁ 0.5份、维生素B₂ 0.1份、维生素B₆ 1.5份、维生素B₁₂ 1.5份、烟酰胺1份。

复合微量元素由如下重量份数的原料组成：

硫酸亚铁2份、硫酸锰1.5份、葡萄糖酸锌2份、碱式氯化铜1份、赖氨酸螯合铁0.7份、亚硒酸钠0.2份、碘酸钙0.5份。

制备方法，包括如下步骤：

1)按照配方，将玉米、豆粕、膨化大豆、蒸汽鱼粉、乳糖、米糠粕、麦麸、甜菜粕、稻壳粉、复合维生素、酸化剂、植酸酶依次往饲料混合机中投料，边投料边混合，投料完成，继续混合28min；

2)向饲料混合机中继续依次投料：L-赖氨酸、DL-蛋氨酸、防霉剂、氧化锌、复合微量元素、磷酸氢钙、石粉、食盐、玉米油、酵母菌剂，边投料边混合，投料完成，继续混合28min，分装、打包即得仔猪用配合饲料。

实施例5

一种仔猪用配合饲料，主要由以下重量份数的原料制备：

玉米65份、豆粕16份、膨化大豆8份、蒸汽鱼粉4份、乳糖4份、米糠粕1份、麦麸0.8份、甜菜粕0.6份、稻壳粉0.6份、复合维生素0.05份、酸化剂0.4份、植酸酶0.02份、L-赖氨酸0.3份、DL-蛋氨酸0.03份、防霉剂0.04份、氧化锌0.12份、复合微量元素0.4份、磷酸氢钙0.7份、石粉0.6份、食盐0.3份、玉米油2.5份、酵母菌剂2份。

所述酵母菌剂的制备方法，包括如下步骤：

取1环活化后的酿酒酵母tlj2016斜面菌体接种至装有100m L种子培养基的500mL三角瓶中培养，在28℃、摇床转速180r/min条件下培养28h，得到一级种子液。将培养好的一级种子液按6％(v/v)的接种量，接种至装有100m L发酵培养基的500m L三角瓶中进行发酵培养，发酵时间28h，温度28℃，摇床转速180r/min，得到二级种子液。将二级种子液以6％(v/v)接种量接入到3L发酵培养基的5L发酵罐，恒温培养，通风量6L/min，温度28℃，发酵全程调节发酵液pH值为6.5，转速180r/min，发酵至28h时，一次性添加终浓度为25mmol/L的L-半胱氨酸，继续发酵25h得到最终发酵液；最终发酵液减压浓缩，30℃粉碎至粒度0.4mm即得酵母菌剂；

所述酸化剂按照重量份数组成为：磷酸14份，乳酸32份，富马酸15份，柠檬酸13.5份，苹果酸2份。

所述复合维生素由如下重量份数的原料组成：

维生素C 1～5份、维生素A 1～5份、维生素D₃ 0.5～1.5份、维生素E 2～6份、维生素K₃ 0.5～1.5份、维生素B₁ 0.1～0.5份、维生素B₂ 0.1～0.5份、维生素B₆ 0.5～3份、维生素B₁₂ 0.1～1.5份、烟酰胺1～4份。

所述复合微量元素由如下重量份数的原料组成：

硫酸亚铁4份、硫酸锰1份、葡萄糖酸锌2份、碱式氯化铜2份、赖氨酸螯合铁0.5份、亚硒酸钠0.1份、碘酸钙0.6份。

制备方法，包括如下步骤：

实施例6高糖条件下tlj2016发酵产谷胱甘肽(GSH)能力实验

(1)摇瓶培养

取tlj2016斜面菌种一环，接入装有30mL种子培养基的250mL摇瓶中150rpm,30℃培养30h得种子液；

种子培养基(g/L)：(NH₄)₂SO₄ 6、葡萄糖35、K₂HPO₄·3H₂O 3、KH₂PO₄ 0.5、酵母粉11、MnSO₄ 0.1、KCL 0.1、FeSO₄ 0.1、MgSO₄·7H₂O 0.1，余量为水，pH6.0。

(2)5L发酵罐培养

将种子液按10％(v/v)接种量，接入装有3L发酵罐培养基的5L发酵罐中，30℃,通气量6L/min,罐压0.03MPa，500rpm,恒pH6.0条件下进行发酵培养，发酵至30h时，一次性添加终浓度为25mmol/L的L-半胱氨酸，继续发酵时间为20h，发酵结束。

发酵罐培养基(g/L)：(NH₄)₂SO₄ 10、葡萄糖100、K₂HPO₄·3H₂O 8、KH₂PO₄ 0.5、酵母粉11、MnSO₄ 0.1、KCL 0.1、FeSO₄ 0.1、MgSO₄·7H₂O 0.1,余量为水，pH6.0；

发酵结束后，测定发酵液中GSH的含量为3308mg/L。

实施例7L-半胱氨酸耐受力实验

将出发菌株以及tlj2016斜面菌种各一环，分别接入装有30mL种子培养基的250mL摇瓶中150rpm,30℃培养进行培养，在培养至12h时，向摇瓶中加入不同终浓度的L-半胱氨酸，再培养10h，测定细胞干重，结果见表1、2；

种子培养基(g/L)：(NH₄)₂SO₄ 6、葡萄糖20、K₂HPO₄·3H₂O 3、KH₂PO₄ 0.5、酵母粉11、MnSO₄ 0.1、KCL 0.1、FeSO₄ 0.1、MgSO₄·7H₂O 0.1，余量为水，pH6.0；

表1：出发菌株L-半胱氨酸耐受力

L-半胱氨酸浓度mmol/L	0	5	10	15	20	40
							出发菌株干重g/L	22.6	15.7	10.2	4.3	2.2	0.8
GSH浓度(mg/L)	35.6	46.7	43.2	40.7	37.9	25.3

表2 tlj2016L-半胱氨酸耐受力

L-半胱氨酸浓度mmol/L	0	5	10	15	20	40
							tlj2016干重g/L	25.7	28.5	23.6	21.2	20.6	18.7
GSH浓度(mg/L)	73.2	98.3	113.5	121.7	127.5	135.8

从表1、2的结果可以看出，对于出发菌株，培养基中添加L-半胱氨酸，细胞停止生长，并且开始自溶，导致GSH增长率随着L-半胱氨酸浓度的升高而降低；而低浓度L-半胱氨酸下，tlj2016仍能够缓慢生长，随着L-半胱氨酸浓度的提高，tlj2016菌株的细胞干重缓慢下降，而GSH浓度持续增长，这一结果将有利于GSH生产过程中通过添加前体氨基酸-L-半胱氨酸提促进GSH的生产。

实施例8耐盐能力实验

取tlj2016菌液1mL接种菌种于含有不同NaCl浓度的(含量梯度为0％、2％、5％、10％、15％、18％)的10mL YPD液体培养基(pH＝6.5)，置于30℃下分别培养24h，每个处理3个重复。各取1ml样品菌液于9ml生理盐水中混匀，制备稀释度溶液，取0.1ml稀释液于YPD固体平板中涂布，于30℃生化培养箱中倒置培养36小时(每个稀释度做3个平行)记录计算平板上的菌数个数。结果见表3，可知该菌的耐盐浓度为18％，说明tlj2016不仅可以在常规环境中生存，在高盐条件下依然具有活力，可应用于酱油、腌制品等高盐食品加工过程中耗糖产谷胱甘肽。

表3耐盐能力检测(×10⁷cfu/ml)

实验例9饲料对于仔猪的生长性能测试

1试验材料

1.1试验时间

试验于2015年1月27日——2月12日以及2015年3月4日——4月1日进行，试验进行28天。

1.2试验地点

试验在辽宁凌源种猪场实施。

1.3试验动物

试验动物选用杜洛克×大白×长白三元杂交健康仔猪共180头。

1.4试验设计

对照组1、2和试验组3分别为：

对照组1：普通市售的仔猪饲料，按照重量份数，其中包含：植酸酶：0.01份，；氧化锌：0.2份；

对照组2：按照重量份数，其中：植酸酶0.025份，氧化锌0.2份；酵母菌剂1.5份添加入饲料中，配合饲料其他成分以及调配方法均按照实施例3处理；

试验组3：按照实施例3制备的配合饲料(按照重量份数，其中：植酸酶：0.025份；氧化锌：0.12份；酵母菌剂：1.5份。

2试验方法

2.1试验设计

本试验采用单因素随机设计，选择平均初始体重约为11.37kg的杜洛克×长白×大白三元杂交健康生长猪共180头，按体重相近和遗传基础相似的原则，随机分为3个处理，每个处理7个重复，分别饲喂三种不同日粮。每个重复(圈)8或9头猪，每个处理60头猪。上午进行个体称重、编号。按品种、性别、个体重进行分组，使组间体重差异不显著。

2.2饲养管理

试验猪饲养在封闭式猪舍内床上饲养，通风良好。试验期间自由采食和饮水，按猪场常规程序进行消毒、驱虫和免疫。

2.3测定指标

2.3.1生长性能

分别于每个试验开始和结束时早晨空腹个体称重，以重复(圈)为单位记录耗料量，计算平均日增重、平均日采食量、饲料增重比和腹泻头数与头次的统计。

2.4统计分析

试验数据用Excel软件进行初步处理后，采用SAS 8.2的一般线性模型(generallinear model，GLM)模型统计分析(SAS，2001)。

3结果与分析

表4生长性能对比表

备注：1、毛色评分标准：1分：差；2分：一般；3分：最好；

2、粪便评分标准：1分：粪便干燥、颗粒状、较硬；2分：粪便成形圆柱状，油光发亮，色泽正常；3分：粪便软不成形；4分：粪便成粥样；5分：粪便成水样。(粪便评分中，2分为最优)

试验结果表明，比较试验组3与对照组1发现，试验组3日增重最好，较对照组1的市售普通饲料显著提高了22.30％；平均日采食量较对照组1显著提高了13g/天；饲喂28天后，仔猪的末重较普通饲料显著提高了2.42kg。此外仔猪在平均28天内的平均腹泻率仅为1.55％，较对照组1显著下降了24.75％。此外，试验组3中，毛色评分为2.9，也显著高于对照组1。在粪便评分中可以看出，分数为3时，说明饲料的有效利用率较低，饲料并没有被仔猪有效地消化吸收，在对照组1中，仔猪食用市售的普通饲料后，其粪便评分为2.39分，相比于试验组3而言，更接近于3分，说明市售普通饲料对于仔猪并没有较好的消化吸收效率。而另一方面，由于仔猪在最佳的采食量中，乳仔猪粪便较软，以成形圆柱状为最理想状态。从试验组3中可以明显看出，其粪便评分最为接近2分，这说明在使用乳仔猪的采食量高、肠道健康、生长快，相比于对照组1和对照组2而言，仔猪对试验组3的饲料的消化吸收有显著的提高，说明本发明中的仔猪饲料显著提高了仔猪对于饲料有效成分的消化利用率，较好地改善和提高了仔猪的生长性能。

另一方面，比较试验组3以及对照组2发现，相对于对照组2中添加较高剂量氧化锌，本发明即试验组3中较低剂量的氧化锌饲料添加量，其日增重较对照组2显著提高了11.50％；平均日采食量较对照组2显著提高了8g/天；饲喂28天后，仔猪的末重较对照组2显著提高了1.37kg。此外仔猪在平均28天内的平均腹泻率仅为1.55％，较对照组2显著下降了24.76％。此外，试验组3中，毛色评分为2.9，较对照组2提高了0.18。在粪便评分中可以看出，试验组3比对照组2更接近于2分，这说明乳仔猪的采食量高、肠道健康、生长快。由此可见，在超剂量添加植酸酶的配合饲料中，不仅有效降低了锌的添加量，而且相比较高剂量氧化锌的添加，获得了显著的效果，其日增重量、采食、毛色均有显著提高，而腹泻率也有明显的下降。

相比于对照组1和对照组2而言，仔猪对试验组3的饲料的消化吸收有显著的提高，说明本发明中的仔猪饲料通过添加植酸酶复合氧化锌显著提高了仔猪对于饲料有效成分的消化利用率。

需要说明的是：本发明实施例1-2、4-5制备的仔猪用配合饲料同样具有上述实验效果，各实施例之间及与上述实验效果差异性不大。

Claims

1.一种仔猪用配合饲料，主要由以下重量份数的原料制备：

玉米60～70份、豆粕10～20份、膨化大豆5～10份、蒸汽鱼粉2～6份、乳糖1～5份、米糠粕1～4份、麦麸0.2～1.2份、甜菜粕0.5～1份、稻壳粉0.3～1份、复合维生素0.03～0.09份、酸化剂0.2～0.6份、植酸酶0.02～0.03份、L-赖氨酸0.2～0.6份、DL-蛋氨酸0.01～0.05份、防霉剂0.01～1份、氧化锌0.1～0.15份、复合微量元素0.2～0.6份、磷酸氢钙0.4～1.2份、石粉0.2～0.8份、食盐0.1～0.5份、玉米油1～5份、酵母菌剂0.5～2份；

所述酵母菌为酿酒酵母tlj2016，保藏号为CGMCC No.12789。

2.如权利要求1所述的一种仔猪用配合饲料，其特征在于：主要由以下重量份数的原料制备：

3.如权利要求1所述的一种仔猪用配合饲料，其特征在于：主要由以下重量份数的原料制备：

4.如权利要求1-3任一所述的一种仔猪用配合饲料，其特征在于：所述酵母菌剂的制备方法包括如下步骤：

取1环活化后的酿酒酵母tlj2016斜面菌体接种至装有100ml种子培养基的500ml三角瓶中培养，在28～30℃、摇床转速150～200r/min条件下培养25～30h，得到一级种子液；将培养好的一级种子液按5％～10％(v/v)的接种量，接种至装有100ml发酵培养基的500ml三角瓶中进行发酵培养，发酵时间25～30h，温度28～30℃，摇床转速150～200r/min，得到二级种子液；将二级种子液以5％～10％(v/v)接种量接入到3L发酵培养基的5L发酵罐，恒温培养，通风量4～6L/min，温度28～30℃，发酵全程调节发酵液pH值为6.0～6.5，转速150～200r/min，发酵至25～30h时，一次性添加终浓度为25～30mmol/L的L-半胱氨酸，继续发酵20～30h得到最终发酵液；将最终发酵液减压浓缩，20-35℃粉碎至粒度0.1-0.6mm即得酵母菌剂。

5.如权利要求1-3任一所述的一种仔猪用配合饲料，其特征在于：所述酸化剂按照重量份数组成为：磷酸≥13份，乳酸≥30份，富马酸≥15份，柠檬酸≥12.5份，苹果酸≥1.5份。

6.如权利要求5所述的一种仔猪用配合饲料，其特征在于：所述酸化剂按照重量份数组成为：磷酸13份，乳酸30份，富马酸15份，柠檬酸12.5份，苹果酸1.5份。

7.如权利要求1-3任一所述的一种仔猪用配合饲料，其特征在于：所述复合维生素由如下重量份数的原料组成：

维生素C 1～5份、维生素A 1～5份、维生素D₃ 0.5～1.5份、维生素E 2～6份、维生素K₃0.5～1.5份、维生素B₁ 0.1～0.5份、维生素B₂ 0.1～0.5份、维生素B₆ 0.5～3份、维生素B₁₂0.1～1.5份、烟酰胺1～4份。

8.如权利要求7所述的一种仔猪用配合饲料，其特征在于：所述复合维生素由如下重量份数的原料组成：

维生素C 3份、维生素A 3份、维生素D₃ 1份、维生素E 4份、维生素K₃ 1份、维生素B₁ 0.3份、维生素B₂ 0.3份、维生素B₆ 2份、维生素B₁₂ 0.8份、烟酰胺2.5份。

9.如权利要求1-3任一所述的一种仔猪用配合饲料，其特征在于：所述复合微量元素由如下重量份数的原料组成：

10.如权利要求1-9任一所述的仔猪用配合饲料的制备方法，包括如下步骤：