CN106544386A - 一种核桃油和核桃蛋白肽的高效制取方法 - Google Patents

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侯曦
陈日雄
谢邦祥
胡靖�
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Abstract

本发明公开了一种核桃油和核桃蛋白肽的制备方法，它包括如下步骤：(1)取核桃仁，粉碎，蒸汽熏蒸，于浓度为0.08-0.12％w/w的蛋白酶溶液中浸泡，过滤，得滤渣；(2)在步骤(1)的滤渣中，加水，加入复合酶调节温度为35-40℃、pH为5.0-5.5，酶解2-3小时；(3)再加入滤渣重量0.5-0.8％的中性蛋白酶，调节温度为50-55℃、pH为6.0-6.5，酶解1-2小时；(4)离心，得油相和水相；取油相再次离心，得油相，即为核桃油；取水相，真空干燥，即得核桃蛋白肽。采用本发明方法制备核桃油和核桃蛋白肽，核桃油的收率和蛋白肽的水解度均较高，工业应用前景优良。

Description

一种核桃油和核桃蛋白肽的高效制取方法
技术领域
本发明涉及一种核桃油和核桃蛋白肽的高效制取方法。
背景技术
核桃(Juglans regia L.)又名胡桃、羌桃，属胡桃科胡桃属植物，具有很高的营养价值和经济价值，与扁桃、腰果、榛子并列为世界四大干果，在国外，核桃被称为“健脑之果”、“长寿之果”、“美容之果”。核桃仁中的主要营养成分为油脂和蛋白质，此外还富含多种维生素和微量元素。
从核桃中提取的核桃油，营养价值高，被誉为“东方橄榄油”，同橄榄油一样备受消费者青睐。核桃蛋白肽，是以核桃蛋白酶解制备的肽类，在抗氧化、降血压方面可能具有较高的活性。
目前，对于核桃油常用的提取方法主要有：传统压榨法、超临界CO2萃取法、溶剂浸出提油法、水酶法。
压榨法等方法可以有效提取核桃油，但是提取条件苛刻，设备复杂，而且只能得到核桃油，所得压榨饼中的蛋白肽受损严重且含有大量溶剂，取法在提取核桃油的同时，对核桃蛋白肽进行制备。
水酶法的提取条件温和、设备简单的优势，且可以同时获得核桃蛋白肽，但其一直存在核桃油提取率低的问题。直到最近的文献仍然表明其提取率不佳，如，何爽，“同步加酶超声提取核桃油和核桃蛋白肽”，《食品工业》2015年第36卷第5期，其公开了一种采用酶解与超声同时处理的方式提取核桃油和核桃蛋白肽的方法，但是核桃油的提取率最高仅53.61％。
因此，提高水酶法提取核桃油的得率是亟待解决的问题。
发明内容
为了解决上述问题，本发明提供了一种新的核桃油和核桃蛋白肽的高效制取方法。
本发明核桃油和核桃蛋白肽的制备方法，它包括如下步骤：
(1)取核桃仁，粉碎，蒸汽熏蒸20-30分钟，于浓度为0.08-0.12％w/w的蛋白酶溶液中浸泡2-3小时，过滤，得滤渣；
(2)在步骤(1)的滤渣中，加3～5倍重量的水，加入滤渣重量0.5-2％的复合酶调节温度为35-40℃、pH为5.0-5.5，酶解2-3小时，其中，复合酶包含纤维素蛋白酶、果胶酶和碱性蛋白酶，它们的重量比为3:1:8；
(3)再加入滤渣重量0.5-0.8％的中性蛋白酶，调节温度为50-55℃、pH为6.0-6.5，酶解1-2小时；
(4)离心，得油相和水相；取油相再次离心，得油相，即为核桃油；取水相，真空干燥，即得核桃蛋白肽。
步骤(1)中，所述核桃仁的含水量低于8％。
步骤(1)中，所述蛋白酶溶液的浓度为0.12％w/w。
步骤(1)中，所述粉碎是粉碎至粒径为0.5-1毫米。
步骤(1)中，所述蛋白酶溶液的温度为20-30℃。
步骤(2)中，所述复合酶的浓度为2％。
步骤(3)中，所述复合酶的浓度为0.8％。
步骤(2)和步骤(3)中，在酶解的同时进行超声处理，超声处理的功率为250-300w。
步骤(4)中，所述离心的转速为6000-8000rpm，离心的时间为15-25分钟。
本发明还提供了前述方法制备的核桃油和/或核桃蛋白肽。
采用本发明方法制备核桃油和核桃蛋白肽，核桃油的收率和蛋白肽的水解度均较高，其中，核桃油的收率为62.14～68.22％，比现有技术的收率高了10％左右，工业应用前景优良。
以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实施例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
具体实施方式
纤维素酶江苏锐阳生物科技有限公司
果胶酶南宁庞博生物工程有限公司
碱性蛋白酶北京奥博星生物技术有限责任公司
中性蛋白酶北京奥博星生物技术有限责任公司
木瓜蛋白酶南宁庞博生物工程有限公司
胃蛋白酶郑州高研生物科技有限公司
实施例1本发明核桃油和核桃蛋白肽的高效制取方法
一、制备方法
1、预处理
1)控制核桃含水量为8％以下，本实施例为8％；
2)粉碎核桃仁、粒径为0.5-1毫米；蒸汽熏蒸20-30分钟后，于含有蛋白酶(木瓜蛋白酶，质量分数0.08％)的温水(20-30℃)浸泡2-3小时，过滤得滤渣；
2、两段酶解：向滤渣加水(重量比1：3到1：5)；
加入0.5％的复合酶Ⅰ，复合酶Ⅰ中含有纤维素蛋白酶、果胶酶、碱性蛋白酶(3:1:8)，35-40℃，pH＝5.0-5.5，酶解2-3小时；
再加入中性蛋白酶(0.5％)，50-55℃，pH＝6.0-6.5，酶解1-2小时。
3、离心(6000-8000rpm，15-25分钟)；取油相，再次离心(6000-8000rpm，15-25分钟)，得到核桃油；取水相，真空干燥，得核桃蛋白肽。
实施例2本发明核桃油和核桃蛋白肽的高效制取方法
一、制备方法
1、预处理
1)控制核桃含水量为8％以下，本实施例为4％；
2)粉碎核桃仁、粒径为0.5-1毫米；蒸汽熏蒸20-30分钟后，于含有蛋白酶(胃蛋白酶，质量分数0.1％)的温水(20-30℃)浸泡2-3小时，过滤得滤渣；
2、两段酶解：向滤渣加水(重量比1：3到1：5))；
加入2％的复合酶Ⅰ，复合酶Ⅰ中含有纤维素蛋白酶、果胶酶、碱性蛋白酶(3:1:8)，35-40℃，pH＝5.0-5.5，酶解2-3小时；
再加入中性蛋白酶(0.8％)，50-55℃，pH＝6.0-6.5，酶解1-2小时。
3、离心(6000-8000rpm，15-25分钟)；取油相，再次离心(6000-8000rpm，15-25分钟)，得到核桃油；取水相，真空干燥，得核桃蛋白肽。
实施例3本发明核桃油和核桃蛋白肽的高效制取方法
一、制备方法
1、预处理
1)控制核桃含水量为8％以下，本实施例为5％；
2)粉碎核桃仁、粒径为0.5-1毫米；蒸汽熏蒸20-30分钟后，于含有蛋白酶(为木瓜蛋白酶，质量分数0.12％)的温水(20-30℃)浸泡2-3小时，过滤得滤渣；
2、两段酶解：向滤渣加水(重量比1：3到1:5)；
加入1％的复合酶Ⅰ，复合酶Ⅰ中含有纤维素蛋白酶、果胶酶、碱性蛋白酶(3:1:8)，35-40℃，pH＝5.0-5.5，酶解2-3小时；
再加入中性蛋白酶(0.6％)，50-55℃，pH＝6.0-6.5，酶解1-2小时。
3、离心(6000-8000rpm，15-25分钟)，取油相，再次离心(6000-8000rpm，15-25分钟)，得到核桃油；取水相，真空干燥，得蛋白肽。
实施例4本发明核桃油和核桃蛋白肽的高效制取方法
一、制备方法
1、预处理
1)控制核桃含水量至8％以下，最好是4-5％；可以通过电热干燥技术、热风循环干燥技术干燥；
2)粉碎核桃仁、粒径为0.5-1毫米；蒸汽熏蒸20-30分钟后，于含有蛋白酶(胃蛋白酶，质量分数0.1％)的温水(20-30℃)浸泡2-3小时，过滤得滤渣；
2、两段酶解：向滤渣加水(重量比1：3到1：5)；
加入0.5％的复合酶Ⅰ，复合酶Ⅰ中含有纤维素蛋白酶、果胶酶、碱性蛋白酶(3:1:8)，35-40℃，pH＝5.0-5.5，酶解2-3小时；
再加入中性蛋白酶(0.5％)，50-55℃，pH＝6.0-6.5，酶解1-2小时。
在两段酶解过程中，加超声处理(250-300W)。
3、离心(6000-8000rpm，15-25分钟)；取油相，再次离心(6000-8000rpm，15-25分钟)，得到核桃油；取水相，真空干燥，得核桃蛋白肽。
检测实施例1-4所述方法制备的产品，检测方法如下：
核桃油提取得率的计算：
式中：W为核桃油提取得率，％；m为同步加酶超声提取核桃油的质量，g；M-样品中核桃油的质量，g。
水解度的测定：取水解蛋白液0.50mL定容至50mL，取2.00mL稀释液于试管中并加入1.00mL显色剂，混匀后置沸水浴中加热15min，同时作空白试验，冷水冷却，加入5.00mL 40％乙醇溶液混匀，放置15min后用1cm比色皿，以空白管调零，于570nm处测定吸光度。水解度计算公式：
式中：A为查表得蛋白质的质量，mg；m为水解样品中蛋白质质量，g；V1为水解液的总体积，mL；V2为显色时所用稀释液的体积，mL。
按GB/T 5530—2005动植物油脂酸价和酸度测定方法测定；过氧化值：按GB/T 5009.37—2005食用油卫生标准分析方法测定；皂化价：按GB/T5534—1985油脂皂化价测定方法测定。
检测结果如下：
核桃油和核桃蛋白肽的得率以及核桃油的理化指标如下表1～2所示：
表1各工艺对提取效果的影响
表2核桃油的理化指标
由表1可以看出，采用本发明方法制备核桃油和核桃蛋白肽，核桃油的收率为62.14～68.22％，蛋白肽的水解度为20.17～25.25％。
综上，采用本发明方法制备核桃油和核桃蛋白肽，核桃油的收率和蛋白肽的水解度均较高，工业应用前景优良。

Claims (10)

1.一种核桃油和核桃蛋白肽的制备方法，其特征在于：它包括如下步骤：
(1)取核桃仁，粉碎，蒸汽熏蒸20-30分钟，于浓度为0.08-0.12％w/w的蛋白酶溶液中浸泡2-3小时，过滤，得滤渣；
(2)在步骤(1)的滤渣中，加3～5倍重量的水，再加入滤渣重量0.5-2％的复合酶调节温度为35-40℃、pH为5.0-5.5，酶解2-3小时，其中，复合酶包含纤维素蛋白酶、果胶酶和碱性蛋白酶，它们的重量比为3:1:8；
(3)再加入滤渣重量0.5-0.8％的中性蛋白酶，调节温度为50-55℃、pH为6.0-6.5，酶解1-2小时；
(4)离心，得油相和水相；取油相再次离心，得油相，即为核桃油；取水相，真空干燥，即得核桃蛋白肽。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤(1)中，所述核桃仁的含水量低于8％。
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：所述蛋白酶溶液的浓度为0.12％w/w。
4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤(1)中，所述粉碎是粉碎至粒径为0.5-1毫米。
5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤(1)中，所述蛋白酶溶液的温度为20-30℃。
6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤(2)中，所述复合酶的浓度为2％。
7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤(3)中，所述复合酶的浓度为0.8％。
8.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤(2)和步骤(3)中，在酶解的同时进行超声处理，超声处理的功率为250-300w。
9.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤(4)中，所述离心的转速为6000-8000rpm，离心的时间为15-25分钟。
10.权利要求1-9任意一项所述方法制备的核桃油和/或核桃蛋白肽。
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