CN106526050B - 一种右旋糖酐铁注射液中苯酚的含量测定方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种右旋糖酐铁注射液中苯酚的含量测定方法，涉及分析化学领域。本发明包括以下步骤：A、制备供试样品：精密量取右旋糖酐铁注射液置于容量瓶中，纯化水稀释，摇匀制备为供试样品；B、标准品溶液的制定：精密称量苯酚置于容量瓶中，加水溶解并定容，摇匀；然后定量称取溶液置于容量瓶中，流动相稀释至刻度，摇匀，过滤制备为标准品溶液；C、高效液相色谱测定：同体积定量称取步骤A、B中的供试样品与标准品溶液进行高效液相色谱测定，色谱条件为：色谱柱选用十八烷基硅烷键合硅胶柱；柱温：30℃；流动相：甲醇:乙腈:水＝45:25:30V/V；流速：1.0ml/min；检测波长：270nm；进样量为10μL。本发明能简单、快速、准确地将苯酚含量测定出来。

Description

一种右旋糖酐铁注射液中苯酚的含量测定方法

技术领域

本发明涉及分析化学领域，涉及一种右旋糖酐铁注射液中苯酚含量测定的方法。

背景技术

右旋糖酐铁注射液(Iron Dextran Injection)主要成分为右旋糖酐氢氧化铁复合物，适用于重症缺铁贫血或不宜内服铁剂的缺铁性贫血。美国药典(USP36-NF31)规定右旋糖酐铁注射液中苯酚含量不能超过0.5％，中国兽药典2010年版一部收载了右旋糖酐铁注射液的质量标准，但对苯酚的含量未作规定。目前，国内文献尚未见右旋糖酐铁注射液中苯酚含量测定的相关报道。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种操作简单、快速、准确地测定右旋糖酐铁注射液中含量的方法。

为解决上述技术问题，本发明所采取的技术方案是：一种右旋糖酐铁注射液中苯酚的含量测定方法，其特征在于：包括以下步骤：

A、制备供试样品

精密量取右旋糖酐铁注射液置于容量瓶中，纯化水稀释，摇匀制备为供试样品；

B、标准品溶液的制定

精密称量苯酚置于容量瓶中，加水溶解并定容，摇匀；然后定量称取溶液置于容量瓶中，流动相稀释至刻度，摇匀，过滤制备为标准品溶液；

C、高效液相色谱测定

同体积定量称取步骤A、B中的供试样品与标准品溶液进行高效液相色谱测定，色谱条件为：

色谱柱选用十八烷基硅烷键合硅胶柱；

柱温：30℃；

流动相：甲醇:乙腈:水＝45:25:30V/V；

流速：1.0ml/min

检测波长：270nm

进样量为10μL。

进一步的技术方案在于，所述色谱柱的规格为4.6×250mm×5μm。

进一步的技术方案在于，所述步骤B流动相为甲醇:乙腈:水＝45:25:30V/V。

进一步的技术方案还在于，所述流动相使用前先超声脱气处理。

采用上述技术方案所产生的有益效果在于：本发明采用外标法简单、快速、准确地将右旋糖酐铁注射液中苯酚含量测定出来，对于流动相的选择，发明人进行了数次摸索试验，最后确定以甲醇和乙腈作为有机相，以比例为甲醇：乙腈：水＝45：25：30(V/V)为流动相，其峰形良好，出峰时间10min左右，试验结果符合标准。

附图说明

下面结合附图和具体实施方式对本发明作进一步详细的说明。

图1是本发明实施例一色谱线性关系图。

具体实施方式

下面结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明的一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本发明，但是本发明还可以采用其他不同于在此描述的其它方式来实施，本领域技术人员可以在不违背本发明内涵的情况下做类似推广，因此本发明不受下面公开的具体实施例的限制。

实施例一

1.仪器与试药

高效液相色谱仪(waters-2695，2489紫外检测器，美国)；分析天平(SartoriusCPA225D，赛多利斯科学仪器(北京)有限公司)；超声波清洗仪(KQ2200型，昆山市超声仪器有限公司)；右旋糖酐铁注射液(批号BJ2140902，河北远征药业有限公司)；苯酚对照品(批号：100509-201203，含量100.0％)；甲醇、乙腈为色谱纯，其他试剂为分析级试剂。

2.色谱条件

色谱柱选用十八烷基硅烷键合硅胶柱(4.6×250mm×5μm)；流动相体积比为甲醇:乙腈:水＝45:25:30(V/V)，使用前先用超声脱气机超声脱气处理30分钟，以去除流动相中的气泡；柱温为30℃，紫外检测器的检测波长为270nm，流速为1.0ml/min，进样量为10μL。

对于流动相的选择，进行了数次摸索试验，流动相有机相尝试单独使用甲醇和乙腈，结果都不太理想，峰前沿；最后同时使用甲醇和乙腈作为有机相进行试验，比例为甲醇：乙腈：水＝45：25：30(V/V)，峰形良好，出峰时间10min左右，试验结果满意。

3.样品中苯酚含量检测

A、制备供试样品

精密量取1mL右旋糖酐铁注射液置于100mL容量瓶中，纯化水稀释至刻度，摇匀制备为供试样品；

B、标准品溶液的制定

精密称取适量苯酚对照品(约含苯酚25mg)置于25mL容量瓶中，加水溶解并定容，摇匀；取上述溶液5mL置于100mL容量瓶中，流动相稀释至刻度，摇匀，过滤制备为标准品溶液；

将供试样品与标准品溶液分别量取10μL，注入高效液相色谱仪，记录色谱图，再经分析计算得出样品中苯酚的含量，计算得出苯酚的含量为0.46％。

本方法用于测定右旋糖酐铁注射液中苯酚含量，操作简单，分析结果真实、准确。

本发明的方法学考察

4.线性范围考察

精密称取苯酚对照品49.30mg，置100ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，得标准品溶液。精密量取标准品溶液适量，加流动相分别稀释成24.65μg/ml、29.58μg/ml、39.44μg/ml、49.3μg/ml、59.16μg/ml、69.02μg/ml的对照溶液，经0.22μm微孔滤膜过滤后注入液相色谱仪，根据本发明所述方法测定，记录色谱图，以对照品浓度C(mg/mL)为横坐标，峰面积A为纵坐标进行回归，得线性回归方程A＝9208.2C+357.49，得r＝0.9999，苯酚在24.65μg/ml～69.02μg/ml范围内线性关系良好，如图1所示。

5.精密度考察

按照供试品溶液的制备方法，平行配制6份供试品溶液，考察此方法的中间精密度。为考察随机变动因素对精密度的影响，另一名分析员独立建立系统，重新配置6份供试品溶液进行检测，需使用不同的仪器，在不同的日期进行。中间精密度试验的RSD＝0.76％，重复性试验RSD＝0.88％，表明本发明所述方法测定苯酚含量精密度高，重现性好，相对标准偏差小。

精密度试验结果

6.回收率考察

配制低、中、高三种不同浓度的供试液，根据本发明所述方法测定，得各组分的平均回收率分别如下表所示。

回收率试验结果

7.溶液的稳定性考察

按照所述的方法制备供试品溶液，放置，分别于0h、2h、4h、6h、8h、10h进样测定。根据本发明所述方法测定，记录色谱图。结果表明：本发明供试品溶液在室温下放置10小时苯酚的峰面积未见明显变化，对日常检测不会造成影响。

样品稳定性试验结果

8.检测限与定量限的确定

精密称取苯酚对照品适量，加流动相溶解并逐级稀释成系列浓度的溶液，进样，记录色谱图，以信噪比(S/N)等于3时的浓度作为最低检测限，经检测，其检测限为0.01μg/ml，以信噪比(S/N)等于10时的浓度作为定量限，经检测，其定量限为0.05μg/ml。

上述4-8项试验结果表明，本发明方法具有良好的专属性，结果表明维生素B进样量在24.65μg/ml～69.02μg/ml范围内呈现良线性关系，回归方程为A＝9208.2C+357.49，相关系数r＝0.9999，精密度、稳定性、回收性良好，平均回收率在100.28％～101.21％之间，方法简单，含量测定准确可靠，试验时间短，无干扰峰，分离度、拖尾因子、对称因子均符合中国药典求，检测结果良好，能够用于该含量项目的检验控制。

本发明经与对照品溶液进样结果对比，保留时间、分离度、拖尾因子、对称因子、理论塔板数各项评价指标符合药典规定要求，测定结果能反映出的右旋糖酐铁注射液中苯酚的含量。本发明方法填补了国际医药领域技术上的空白，理论上采用对照分析思路，操作细节使用自主探索出流动相的优点。

Claims (4)

1.一种右旋糖酐铁注射液中苯酚的含量测定方法，其特征在于：包括以下步骤：

A、制备供试样品

精密量取右旋糖酐铁注射液置于容量瓶中，纯化水稀释，摇匀制备为供试样品；

B、标准品溶液的制定

精密称量苯酚置于容量瓶中，加水溶解并定容，摇匀；然后定量称取溶液置于容量瓶中，流动相稀释至刻度，摇匀，过滤制备为标准品溶液；

C、高效液相色谱测定

同体积定量称取步骤A、B中的供试样品与标准品溶液进行高效液相色谱测定，色谱条件为：

色谱柱选用十八烷基硅烷键合硅胶柱；

柱温：30℃；

流动相：甲醇:乙腈:水＝45:25:30V/V；

流速：1.0ml/min；

检测波长：270nm；

进样量为10μL。

2.根据权利要求1所述的一种右旋糖酐铁注射液中苯酚的含量测定方法，其特征在于：所述色谱柱的规格为4.6×250mm×5μm。

3.根据权利要求1所述的一种右旋糖酐铁注射液中苯酚的含量测定方法，其特征在于：所述步骤B流动相为甲醇:乙腈:水＝45:25:30V/V。

4.根据权利要求1所述的一种右旋糖酐铁注射液中苯酚的含量测定方法，其特征在于：所述流动相使用前先超声脱气处理。