CN106491581A - 含柚皮素的抗醉制剂及其用途 - Google Patents

Abstract

本发明提供了含柚皮素的抗醉制剂及其用途。具体地，本发明提供柚皮素在用于制备抗醉制剂中的用途，以及含有柚皮素作为有效成分的抗醉制剂。本发明的实验表明，柚皮素具有抗醉和提升乙醛脱氢酶2活性的功效，因而可用于饮酒前或后服用，从而防止醉酒和有助于解酒。

Description

含柚皮素的抗醉制剂及其用途

技术领域

本发明涉及食品和药物领域，更具体地涉及含柚皮素的抗醉和/或提升乙醛脱氢酶2活性的制剂及其用途。

背景技术

在中国，饮酒是生活、工作、社交必不可少的一项行为，醉酒现象在中国非常频繁常见。人对于乙醇的承受力差异很大，这是由于神经对乙醇的敏感程度以及胃肠吸收能力和肝脏的代谢处理能力不同所致。人体中乙醇脱氢酶的数量基本相等，但是约有40％的亚洲人群，因乙醛脱氢酶2(ALDH2)基因的变异，而使ALDH2处于低活性状态，使乙醛不能被完全分解为乙酸，而是以乙醛形式继续留在体内，乙醛对许多组织和器官都有毒性，可能造成DNA损伤，也被认为有多种致癌效应。乙醛使人喝酒后产生恶心欲吐、昏迷不适等醉酒症状。

目前国内关于饮酒的用药多为解酒药，通过促进乙醇代谢，使人尽快从醉酒状态苏醒，而防醉酒的研究则较少，醉酒后人的反应力自控力都会下降，大脑皮层兴奋，会做出不理性甚至有危险的事情，是饮酒者极力避免的。同时，国内解酒药多为中药复方，成分复杂，具体发挥作用的组分难以明晰、有效剂量难以控制，在解酒的同时，会对肝脏、肾脏造成代谢负担而产生不同程度的伤害。并且，中药成分对ALDH2活性影响的研究也比较少。

本领域迫切需要开发新的安全性高、效果好的抗醉产品。

发明内容

本发明的目的就是提供新的安全性高、效果好的抗醉和/或提升乙醛脱氢酶2活性的产品及其制法和用途。

在本发明的第一方面中，提供了一种柚皮素的用途，用于制备一制剂，所述制剂用于(a)延长醉酒潜伏期；和/或(b)降低饮酒对象的死亡风险。

在另一优选例中，所述的制剂还用于以下一种或多种用途：(c)缩短醉酒期；(d)降低醉酒概率。

在另一优选例中，所述的制剂包括组合物和柚皮素纯净物。

在另一优选例中，所述的制剂为组合物。

在另一优选例中，所述组合物为液态、固体、或半固体。

在另一优选例中，所述制剂的剂型包括片剂、颗粒剂、胶囊、口服液、或注射剂。

在另一优选例中，所述的组合物包括药物组合物、食品组合物、饮料组合物或膳食补充剂。

在另一优选例中，所述组合物中含有0.001-99wt％,较佳地0.1-90wt％，更佳地1-80wt％柚皮素，按组合物的总重量计。

在本发明的第二方面中，提供了一种柚皮素的用途，用于制备抗醉的制剂。

在本发明的第三方面中，提供了一种柚皮素的用途，(a)用于制备一制剂，所述制剂用于提高乙醛脱氢酶2的活性；和/或(b)用于制备乙醛脱氢酶2的促进剂。

在另一优选例中，所述的乙醛脱氢酶2为来源于肝脏或肝脏细胞的乙醛脱氢酶2。

在另一优选例中，所述制剂还用于延长醉酒潜伏期或用于抗醉。

在另一优选例中，所述的制剂还用于缓解因乙醛堆积形成的生理毒害。

在本发明的第四方面中，提供了一种非治疗性的抗醉的方法，包括步骤：(a)给需要的对象施用柚皮素。

在另一优选例中，所述的对象包括非人哺乳动物。

在另一优选例中，所述的对象包括啮齿动物，如小鼠、大鼠。

在另一优选例中，所述是对象是服用了乙醇的对象。

在另一优选例中，所述的对象服用了0.05-50g/kg的乙醇，较佳地0.5-5g/kg的乙醇。

在另一优选例中，所述柚皮素的施用量为0.01-10mmol/kg，较佳地为0.05-1mmol/kg，更佳地为0.1-0.5mmol/kg体重。

在另一优选例中，所述的方法还包括步骤：(b)对所述对象进行处死，和任选地检测所述对象中细胞因子、酶的水平或活性。

在本发明的第五方面中，提供了一种用于抗醉的组合物，包括(a)柚皮素；和(b)食品学上可接受的载体、或药学上可接受的载体。

在另一优选例中，所述的组合物还包括(c)二氢杨梅素。

在另一优选例中，在所述组合物中，柚皮素的含量为50wt％。

在另一优选例中，在所述组合物中，二氢杨梅素的含量为50wt％。

在另一优选例中，在所述组合物中，柚皮素和二氢杨梅素的重量比为0.1％：99.9％至99.9％：0.1％。

在另一优选例中，所述制剂的剂型包括片剂、颗粒剂、胶囊、口服液、或注射剂。

在另一优选例中，所述的组合物包括药物组合物、食品组合物、饮料组合物或膳食补充剂。

应理解，在本发明范围内中，本发明的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。限于篇幅，在此不再一一累述。

附图说明

图1显示了柚皮素可降低醉酒个体百分比(与EOH对照组比较，Chi-squareAnalysis)。

图2显示了柚皮素可显著延缓平均醉酒潜伏期(与EOH对照组比较，Student’st-test)。

图3显示了柚皮素可显著降低平均醉酒期(均与EOH对照组比较，Student’st-test)。

图4显示了柚皮素可降低高剂量下醉酒个体百分比(与EOH对照组比较，Chi-square Analysis)。

图5显示了柚皮素可降低高剂量下死亡个体百分比(与EOH对照组比较，Chi-square Analysis)。

图6显示了柚皮素可提升在酒精环境中离体肝脏组织块乙醛脱氢酶2活性(与EOH对照组比较，One-way ANOVA)。

图7显示了柚皮素可显著提升高剂量酒精灌胃后肝脏乙醛脱氢酶2活性(与EOH对照组比较，Student’s t-test)。

具体实施方式

本发明人经过广泛而深入的研究，首次意外地发现一种天然产物即柚皮素具有优异的抗醉和/或提升乙醛脱氢酶2活性的作用。实验表明，柚皮素可以显著地延长醉酒潜伏期、缩短醉酒期、降低醉酒概率、降低饮酒对象的死亡风险和/或提升乙醛脱氢酶2活性以缓解包括酒精代谢在内的乙醛毒性。在此基础上完成了本发明。

术语定义

抗醉

如本文所用，术语“抗醉”中的抗醉是指降低饮酒后的醉酒概率，延缓醉酒时间点，延长醉酒潜伏期。解酒是指使人从醉酒的状态中醒过来，恢复意识或回复自制力。

柚皮素

如本文所用，术语“柚皮素”是指一种成分简单的中药有效成分，属于二氢黄酮类化合物，具有如下结构式。常温下为白色针状结晶(甲醇)，溶于乙醇、乙醚和苯，几乎不溶于水。柚皮素具有抗菌、抗炎、清除自由基、抗氧化、止咳祛痰、降血脂、抗癌抗肿瘤、抗粥样动脉硬化等作用，广泛应用于医药、食品等领域。柚皮素衍生物或类似物具有与柚皮素相类似的药用价值。

抗醉制剂

如本文所用，术语“本发明制剂”、“本发明组合物”、“本发明的抗醉制剂”等可互换使用，指含柚皮素的抗醉和/或提升肝脏乙醛脱氢酶2活性的制剂。

本发明的组合物可以制备成片剂、颗粒剂、胶囊、还可以添加到茶、饮料甚至酒中，生产为解酒茶、解酒饮料以及减轻醉酒的酒品等。片剂的配方为柚皮素0.001-99wt％，其他有效成分和辅料占1-99.999wt％。解酒饮品的配方为，在茶、饮料或酒中，柚皮素0.001-2wt％。个体中柚皮素的施用量为0.01-10mmol/kg，较佳地为0.05-1mmol/kg，更佳地为0.1-0.5mmol/kg体重。

基于本发明的发现，柚皮素或含柚皮素为活性成分的制剂，用在饮酒前或后服用，可以提升肝脏乙醛脱氢酶2的活性，从而防止醉酒和发挥解酒功效。

实验证明，服用本发明制剂后，可以提升肝脏乙醛脱氢酶2的活性，缓解因乙醛堆积形成的生理毒害，降低醉酒概率，延缓醉酒潜伏期或缩短醉酒时程。

本发明的主要优点包括：

(a)柚皮素的抗醉作用显著。

(b)柚皮素可以提升肝脏乙醛脱氢酶2的活性。

(c)柚皮素服用安全，无毒副作用。

下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则百分比和份数是重量百分比和重量份数。

以下实施例在统计学上均以*P<0.05视为显著差异。

实施例1

柚皮素抗醉酒和缩短醒酒时间试验

选取SPF级BALB/C小鼠(体重20-24g)，进行灌胃实验，方法如下：

配制50％乙醇(EOH：PBS＝1:1)，分为两组，每组5-6只动物：(1)EOH组，即以50％乙醇灌胃；(2)EOH+NG组，即以50％乙醇为溶剂，添加柚皮素至终浓度为10mM，以该溶液灌胃。对两组动物分别以200μL溶液灌胃。

按以下方式纪录试验结果，并计算和统计两组动物的醉酒个体百分比、醉酒潜伏期、和醉酒期。

当翻正反射(重复多次)消失时，记录时间点为醉酒时间点；当翻正反射重现时，记录时间点为醒酒时间点。

将灌胃至醉酒时间点的时长作为醉酒潜伏期。

从醉酒时间点至醒酒时间点的时长为醉酒期。

如某动物不醉酒，则记录潜伏期为180min，醉酒期为0min。

结果见图1、2和3所示。

如图1所示，柚皮素可显著降低醉酒个体百分比。对照组的醉酒个体百分比100％，而柚皮素试验组仅约50％，下降幅度达50％。

如图2所示，柚皮素可显著延缓平均醉酒潜伏期。对照组的平均醉酒潜伏期为25分钟，而柚皮素试验组约105分钟。

如图3所示，柚皮素可显著缩短平均醉酒期。对照组的平均醉酒期为105分钟，而柚皮素试验组仅约28分钟。

实施例2

柚皮素在高剂量下抗醉酒和减少因醉酒死亡试验

方法中，动物和试剂同实施例1，灌胃剂量为300μL，观察醉酒个体百分比和死亡个体百分比。

结果见图4和5所示。

如图4所示，柚皮素可降低高剂量下醉酒个体百分比。对照组的醉酒个体百分比100％，而柚皮素试验组仅约60％。

如图5所示，柚皮素可降低高剂量下死亡个体百分比。对照组的死亡个体百分比17，而柚皮素试验组无个体死亡。

实施例3

柚皮素提升离体肝脏乙醛脱氢酶2活性试验

选取SPF级BALB/C小鼠，颈椎脱臼处死，快速取出肝脏，去掉边缘，切成重量相近的小块，转入超净工作台，经PBS冲洗和快速吸干PBS后，放入24孔板的不同孔中，孔内置不同组条件培养基，分别为：(1)PBS组，即DMEM中，含2％PBS；(2)PBS+EOH组，即DMEM中，含2％体积的50％乙醇(EOH：PBS＝1:1)，即乙醇终浓度为1％；(3)EOH+NG组，即DMEM中，含2％体积的NG溶液，该溶液以50％乙醇为溶剂，NG浓度为10mM，即乙醇终浓度为1％，柚皮素终浓度为200μM。将24孔板置于37℃下孵育2h，取出肝组织块，加入PBS匀浆后低温离心(4℃，3000rpm，15-20min)，取上清检测蛋白浓度，每次实验根据检测所得蛋白浓度，调平各组蛋白浓度。利用乙醛脱氢酶2活性检测ELISA试剂盒，测各次实验中各组乙醛脱氢酶2的相对活性，即以PBS组活性值为1，由多次平行试验，观察1％乙醇环境中，柚皮素对肝脏乙醛脱氢酶2活性的影响。

结果见图6所示。

如图6所示，柚皮素可提升酒精环境中离体肝脏组织块乙醛脱氢酶2活性。以PBS组乙醛脱氢酶2相对活性为1，PBS+EOH组乙醛脱氢酶2相对活性为0.807，EOH+NG组乙醛脱氢酶2相对活性为0.972。

实施例4

柚皮素提升高剂量酒精灌胃后肝脏乙醛脱氢酶2活性试验

方法同实施例2，对SPF级BALB/C小鼠进行灌胃实验，实验分为两组，分别为：(1)EOH组，即以50％乙醇灌胃；(2)EOH+NG组，即以50％乙醇为溶剂，添加柚皮素至终浓度为10mM，以该溶液灌胃。对两组动物分别以300μL溶液灌胃，2h后，如死亡则剔除该动物，如醉酒或清醒，则颈椎脱臼处死，取肝脏加入PBS匀浆，低温离心(4℃，3000rpm，15-20min)，取上清检测蛋白浓度，以PBS通过不同比例稀释，调平各动物蛋白浓度，利用乙醛脱氢酶2活性检测ELSIA试剂盒，测各动物肝脏乙醛脱氢酶2的相对活性。

结果见图7所示。

图7中，柚皮素可提升高剂量酒精灌胃后肝脏乙醛脱氢酶2活性。EOH组肝脏乙醛脱氢酶2相对活性为1，PBS+EOH组肝脏乙醛脱氢酶2相对活性为1.29。

在本发明提及的所有文献都在本申请中引用作为参考，就如同每一篇文献被单独引用作为参考那样。此外应理解，在阅读了本发明的上述讲授内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。

Claims (10)

1.一种柚皮素的用途，其特征在于，用于制备一制剂，所述制剂用于(a)延长醉酒潜伏期；和/或(b)降低饮酒对象的死亡风险。

2.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的制剂还用于以下一种或多种用途：(c)缩短醉酒期；(d)降低醉酒概率。

3.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的制剂包括组合物和柚皮素纯净物。

4.一种柚皮素的用途，其特征在于，用于制备抗醉的制剂。

5.一种柚皮素的用途，其特征在于，(a)用于制备一制剂，所述制剂用于提高乙醛脱氢酶2的活性；和/或(b)用于制备乙醛脱氢酶2的促进剂。

6.如权利要求5所述的用途，其特征在于，所述的乙醛脱氢酶2为来源于肝脏或肝脏细胞的乙醛脱氢酶2。

7.一种非治疗性的抗醉的方法，其特征在于，包括步骤：(a)给需要的对象施用柚皮素。

8.如权利要求7所述的方法，其特征在于，所述的方法还包括步骤：(b)对所述对象进行处死，和任选地检测所述对象中细胞因子、酶的水平或活性。

9.一种用于抗醉的组合物，其特征在于，包括(a)柚皮素；和(b)食品学上可接受的载体、或药学上可接受的载体。

10.如权利要求9所述的组合物，其特征在于，所述的组合物还包括(c)二氢杨梅素。