CN106417026A - 一种多肉植物的组培快繁方法 - Google Patents
一种多肉植物的组培快繁方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN106417026A CN106417026A CN201610896212.1A CN201610896212A CN106417026A CN 106417026 A CN106417026 A CN 106417026A CN 201610896212 A CN201610896212 A CN 201610896212A CN 106417026 A CN106417026 A CN 106417026A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- culture
- days
- root
- base
- stem
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
- A01H4/00—Plant reproduction by tissue culture techniques ; Tissue culture techniques therefor
- A01H4/008—Methods for regeneration to complete plants
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Botany (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
Abstract
本发明公开了一种多肉植物的组培快繁方法，所述多肉植物的组培快繁方法，包括以下步骤：1）前处理，2）无菌组织建立，3）愈伤组织分化培养及扩大培养，4）增殖培养，5）分化出根，6）炼苗移栽；本发明所提供的组培繁殖技术，具有繁殖系数高、生产周期短、程序简单易于操作、成本低廉等优点，适于多肉植物的快速繁殖。
Description
技术领域
本发明涉及植物组织培养技术领域，具体是一种多肉植物的组培快繁方法。
背景技术
多肉植物是指植物营养器官的某一部分，如茎或叶或根(少数种类兼有两部分)具有发达的薄壁组织用以贮藏水分，在外形上显得肥厚多汁的一类植物。它们大部分生长在干旱或一年中有一段时间干旱的地区，每年有很长的时间根部吸收不到水分，仅靠体内贮藏的水分维持生命。多肉植物小盆栽，因其容易栽培，整体形状、颜色以及叶形多样，观赏价值高，被消费者青睐，目前销售多肉植物的网店、实体店增加速度很快，市场需求巨大，然而目前大部分多肉植物生产商依靠叶片扦插繁殖，其效率不高，繁殖系数低，繁殖周期长，场地要求大，人工成本较高。因此，提高多肉植物的生产效率，缩短培育时间，降低人工成本成为目前亟待解决的问题。
发明内容
本发明的目的在于提供一种多肉植物的组培快繁方法，以解决上述背景技术中提出的问题。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
一种多肉植物的组培快繁方法，包括以下步骤：
1）前处理
挑选健康无虫害5cm长的多肉植物的幼芽或茎干，去除杂叶和顶芽，使用生理盐水清洗枝条表面的灰尘并进行裁剪；随后置于次氯酸钠水溶液中浸泡8min，使用1%浓度的氯化汞反复冲洗8min，并放置于无菌滤纸上沥干水，放置时间不超过1h；
2）无菌组织建立
在无菌工作台上，将步骤1）中采集到的幼芽或茎干放入无菌玻璃培养皿中，首先加入硼酸溶液没过幼芽或茎干，浸泡1min后倒入，然后加入磷酸盐缓冲液进行反复清洗，接着使用热风机吹干幼芽或茎干表面的水分；随后使用无菌手术刀将幼芽或茎段剪切成1.5cm的小切片，小切片经过75%酒精浸泡后水洗，水洗后小切片涂抹姜黄素，然后将小切片接种在初代培养基中，初代培养条件为：黑暗，28℃-35℃，培养2天-5天；
3）愈伤组织分化培养及扩大培养
将在初代培养基中培养后的小切片放置愈伤组织培养基中进行诱导分化，直至小切片的断口处产生愈伤组织，愈伤组织培养条件为：800Lx-1000Lx，22℃-26℃，光照时间2h-4h，培养3天-6天；愈伤组织培养结束后，将茎段放置扩大培养基中进行增殖培养，如此循环往复，直至得到所需数量的丛生芽；
4）增殖培养
将丛生芽的基部切开划线，转入到增殖培养基中培养，直至划线处生芽长度为2cm以上时，并切下放置增殖培养基中继续培养4天，增殖培养条件为2500Lx，26℃-28℃，光照时间6h-8h；
5）分化出根
增殖后的丛生芽达到3cm-5cm时，将它们转入生根诱导培养基中，生根诱导培养条件为：2000Lx光照，20℃培养7天；
6）炼苗移栽
待丛生芽生根5条，根长2-4cm时，出瓶并使用磷酸盐缓冲液清洗干净根，最后移栽到由细砂土、砂砾和泥炭组成并灭菌的基质中，温度18℃-24℃，2200Lx光照，3天培养，出圃。
作为本发明进一步的方案：所述初代培养基主要成份为MS+0.8-1.2mg/L BA+0.01-0.03mg/L NAA+2.2-3.0mg/L IBA+3.2-3.6mg/L亚硒酸钠+24-34g/L蔗糖+2-6g/L琼脂。
作为本发明进一步的方案：所述愈伤组织培养基主要成份为MS+0.01-0.03mg/LIBA+30-40g/L蔗糖+6-8g/L琼脂。
作为本发明进一步的方案：所述扩大培养基培养基主要成份为MS+0.5-0.8mg/L2,4-D+30-40g/L蔗糖+6-8g/L琼脂。
作为本发明进一步的方案：所述增殖培养基主要成份为MS+2.0-4.0mg/L GA3+30-40g/L蔗糖+6-8g/L琼脂。
作为本发明进一步的方案：所述生根诱导培养基主要成份为MS+0.8-1.2mg/LNAA+0.8-1.6mg/L IBA+32-40g/L蔗糖+6-8g/L琼脂。
作为本发明进一步的方案：所述初代培养基、愈伤组织培养基、扩大培养基、增殖培养基、生根培养基的pH值为6.5±0.2。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
本发明所提供的组培繁殖技术，具有繁殖系数高、生产周期短、程序简单易于操作、成本低廉等优点，包括外植体的前处理、无菌组织的建立、愈伤组织分化培养及扩大培养、增殖培养、分化出根、炼苗移栽的步骤，通过对初代培养基、增殖培养基、生根诱导培养基的筛选，得到最佳的培养基组分和配比，得到的幼苗培养时间短，增殖频率高，幼苗整齐，便于后期统一的移栽和种植管理，能保证所长出的幼苗植株在形状上的一致性，易于操作，可进行产业化生产。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
一种多肉植物的组培快繁方法，包括以下步骤：
1）前处理
挑选健康无虫害5cm长的多肉植物的幼芽或茎干，去除杂叶和顶芽，使用生理盐水清洗枝条表面的灰尘并进行裁剪；随后置于次氯酸钠水溶液中浸泡8min，使用1%浓度的氯化汞反复冲洗8min，并放置于无菌滤纸上沥干水，放置时间不超过1h；
2）无菌组织建立
在无菌工作台上，将步骤1）中采集到的幼芽或茎干放入无菌玻璃培养皿中，首先加入硼酸溶液没过幼芽或茎干，浸泡1min后倒入，然后加入磷酸盐缓冲液进行反复清洗，接着使用热风机吹干幼芽或茎干表面的水分；随后使用无菌手术刀将幼芽或茎段剪切成1.5cm的小切片，小切片经过75%酒精浸泡后水洗，水洗后小切片涂抹姜黄素，然后将小切片接种在初代培养基中，初代培养条件为：黑暗，28℃，培养2天；
3）愈伤组织分化培养及扩大培养
将在初代培养基中培养后的小切片放置愈伤组织培养基中进行诱导分化，直至小切片的断口处产生愈伤组织，愈伤组织培养条件为：800Lx，22℃，光照时间2h，培养3天；愈伤组织培养结束后，将茎段放置扩大培养基中进行增殖培养，如此循环往复，直至得到所需数量的丛生芽；
4）增殖培养
将丛生芽的基部切开划线，转入到增殖培养基中培养，直至划线处生芽长度为2cm以上时，并切下放置增殖培养基中继续培养4天，增殖培养条件为2500Lx，26℃，光照时间6h；
5）分化出根
增殖后的丛生芽达到3cm时，将它们转入生根诱导培养基中，生根诱导培养条件为：2000Lx光照，20℃培养7天；
6）炼苗移栽
待丛生芽生根5条，根长2cm时，出瓶并使用磷酸盐缓冲液清洗干净根，最后移栽到由细砂土、砂砾和泥炭组成并灭菌的基质中，温度18℃，2200Lx光照，3天培养，出圃。
所述初代培养基主要成份为MS+0.8mg/L BA+0.01mg/L NAA+2.2mg/L IBA+3.2mg/L亚硒酸钠+24g/L蔗糖+2g/L琼脂。
所述愈伤组织培养基主要成份为MS+0.01mg/L IBA+30g/L蔗糖+6g/L琼脂。
所述扩大培养基培养基主要成份为MS+0.5mg/L 2,4-D+30g/L蔗糖+6g/L琼脂。
所述增殖培养基主要成份为MS+2.0mg/L GA3+30g/L蔗糖+6g/L琼脂。
所述生根诱导培养基主要成份为MS+0.8mg/L NAA+0.8mg/L IBA+32g/L蔗糖+6g/L琼脂。
所述初代培养基、愈伤组织培养基、扩大培养基、增殖培养基、生根培养基的pH值为6.5±0.2。
本实施例中增殖培养过程进行到2天时，生长点处萌发出新芽，4天时新芽的长度达到3cm，新芽粗壮；生根培养过程进行到7天时即开始生根。
实施例2
一种多肉植物的组培快繁方法，包括以下步骤：
1）前处理
挑选健康无虫害5cm长的多肉植物的幼芽或茎干，去除杂叶和顶芽，使用生理盐水清洗枝条表面的灰尘并进行裁剪；随后置于次氯酸钠水溶液中浸泡8min，使用1%浓度的氯化汞反复冲洗8min，并放置于无菌滤纸上沥干水，放置时间不超过1h；
2）无菌组织建立
在无菌工作台上，将步骤1）中采集到的幼芽或茎干放入无菌玻璃培养皿中，首先加入硼酸溶液没过幼芽或茎干，浸泡1min后倒入，然后加入磷酸盐缓冲液进行反复清洗，接着使用热风机吹干幼芽或茎干表面的水分；随后使用无菌手术刀将幼芽或茎段剪切成1.5cm的小切片，小切片经过75%酒精浸泡后水洗，水洗后小切片涂抹姜黄素，然后将小切片接种在初代培养基中，初代培养条件为：黑暗，28℃，培养2天；
3）愈伤组织分化培养及扩大培养
将在初代培养基中培养后的小切片放置愈伤组织培养基中进行诱导分化，直至小切片的断口处产生愈伤组织，愈伤组织培养条件为：800Lx，22℃，光照时间2h，培养3天；愈伤组织培养结束后，将茎段放置扩大培养基中进行增殖培养，如此循环往复，直至得到所需数量的丛生芽；
4）增殖培养
将丛生芽的基部切开划线，转入到增殖培养基中培养，直至划线处生芽长度为2cm以上时，并切下放置增殖培养基中继续培养4天，增殖培养条件为2500Lx，26℃，光照时间6h；
5）分化出根
增殖后的丛生芽达到3cm时，将它们转入生根诱导培养基中，生根诱导培养条件为：2000Lx光照，20℃培养7天；
6）炼苗移栽
待丛生芽生根5条，根长2cm时，出瓶并使用磷酸盐缓冲液清洗干净根，最后移栽到由细砂土、砂砾和泥炭组成并灭菌的基质中，温度18℃，2200Lx光照，3天培养，出圃。
所述初代培养基主要成份为MS+0.8mg/L BA+0.03mg/L NAA+2.2mg/L IBA+3.2mg/L亚硒酸钠+24g/L蔗糖+2g/L琼脂。
所述愈伤组织培养基主要成份为MS+0.01mg/L IBA+30g/L蔗糖+6g/L琼脂。
所述扩大培养基培养基主要成份为MS+0.5mg/L 2,4-D+30g/L蔗糖+6g/L琼脂。
所述增殖培养基主要成份为MS+2.2mg/L GA3+30g/L蔗糖+6g/L琼脂。
所述生根诱导培养基主要成份为MS+0.8mg/L NAA+0.8mg/L IBA+32g/L蔗糖+6g/L琼脂。
所述初代培养基、愈伤组织培养基、扩大培养基、增殖培养基、生根培养基的pH值为6.5±0.2。
本实施例中增殖培养过程进行到2天时，生长点处萌发出新芽，4天时新芽的长度达到3cm，新芽粗壮；生根培养过程进行到7天时即开始生根。
实施例3
一种多肉植物的组培快繁方法，包括以下步骤：
1）前处理
挑选健康无虫害5cm长的多肉植物的幼芽或茎干，去除杂叶和顶芽，使用生理盐水清洗枝条表面的灰尘并进行裁剪；随后置于次氯酸钠水溶液中浸泡8min，使用1%浓度的氯化汞反复冲洗8min，并放置于无菌滤纸上沥干水，放置时间不超过1h；
2）无菌组织建立
在无菌工作台上，将步骤1）中采集到的幼芽或茎干放入无菌玻璃培养皿中，首先加入硼酸溶液没过幼芽或茎干，浸泡1min后倒入，然后加入磷酸盐缓冲液进行反复清洗，接着使用热风机吹干幼芽或茎干表面的水分；随后使用无菌手术刀将幼芽或茎段剪切成1.5cm的小切片，小切片经过75%酒精浸泡后水洗，水洗后小切片涂抹姜黄素，然后将小切片接种在初代培养基中，初代培养条件为：黑暗，28℃，培养2天；
3）愈伤组织分化培养及扩大培养
将在初代培养基中培养后的小切片放置愈伤组织培养基中进行诱导分化，直至小切片的断口处产生愈伤组织，愈伤组织培养条件为：800Lx，22℃，光照时间2h，培养3天；愈伤组织培养结束后，将茎段放置扩大培养基中进行增殖培养，如此循环往复，直至得到所需数量的丛生芽；
4）增殖培养
将丛生芽的基部切开划线，转入到增殖培养基中培养，直至划线处生芽长度为2cm以上时，并切下放置增殖培养基中继续培养4天，增殖培养条件为2500Lx，26℃，光照时间6h；
5）分化出根
增殖后的丛生芽达到3cm时，将它们转入生根诱导培养基中，生根诱导培养条件为：2000Lx光照，20℃培养7天；
6）炼苗移栽
待丛生芽生根5条，根长2cm时，出瓶并使用磷酸盐缓冲液清洗干净根，最后移栽到由细砂土、砂砾和泥炭组成并灭菌的基质中，温度18℃，2200Lx光照，3天培养，出圃。
所述初代培养基主要成份为MS+0.9mg/L BA+0.03mg/L NAA+3.0mg/L IBA+3.3mg/L亚硒酸钠+24g/L蔗糖+2g/L琼脂。
所述愈伤组织培养基主要成份为MS+0.01mg/L IBA+30g/L蔗糖+6g/L琼脂。
所述扩大培养基培养基主要成份为MS+0.6mg/L 2,4-D+30g/L蔗糖+6g/L琼脂。
所述增殖培养基主要成份为MS+2.3mg/L GA3+30g/L蔗糖+6g/L琼脂。
所述生根诱导培养基主要成份为MS+0.9mg/L NAA+0.9mg/L IBA+34g/L蔗糖+6g/L琼脂。
所述初代培养基、愈伤组织培养基、扩大培养基、增殖培养基、生根培养基的pH值为6.5±0.2。
本实施例中增殖培养过程进行到2天时，生长点处萌发出新芽，4天时新芽的长度达到3cm，新芽粗壮；生根培养过程进行到7天时即开始生根。
实施例4
一种多肉植物的组培快繁方法，包括以下步骤：
1）前处理
挑选健康无虫害5cm长的多肉植物的幼芽或茎干，去除杂叶和顶芽，使用生理盐水清洗枝条表面的灰尘并进行裁剪；随后置于次氯酸钠水溶液中浸泡8min，使用1%浓度的氯化汞反复冲洗8min，并放置于无菌滤纸上沥干水，放置时间不超过1h；
2）无菌组织建立
在无菌工作台上，将步骤1）中采集到的幼芽或茎干放入无菌玻璃培养皿中，首先加入硼酸溶液没过幼芽或茎干，浸泡1min后倒入，然后加入磷酸盐缓冲液进行反复清洗，接着使用热风机吹干幼芽或茎干表面的水分；随后使用无菌手术刀将幼芽或茎段剪切成1.5cm的小切片，小切片经过75%酒精浸泡后水洗，水洗后小切片涂抹姜黄素，然后将小切片接种在初代培养基中，初代培养条件为：黑暗，33℃，培养4天；
3）愈伤组织分化培养及扩大培养
将在初代培养基中培养后的小切片放置愈伤组织培养基中进行诱导分化，直至小切片的断口处产生愈伤组织，愈伤组织培养条件为：900Lx，24℃，光照时间3h，培养5天；愈伤组织培养结束后，将茎段放置扩大培养基中进行增殖培养，如此循环往复，直至得到所需数量的丛生芽；
4）增殖培养
将丛生芽的基部切开划线，转入到增殖培养基中培养，直至划线处生芽长度为2cm以上时，并切下放置增殖培养基中继续培养4天，增殖培养条件为2500Lx，27℃，光照时间7h；
5）分化出根
增殖后的丛生芽达到4cm时，将它们转入生根诱导培养基中，生根诱导培养条件为：2000Lx光照，20℃培养7天；
6）炼苗移栽
待丛生芽生根5条，根长2-4cm时，出瓶并使用磷酸盐缓冲液清洗干净根，最后移栽到由细砂土、砂砾和泥炭组成并灭菌的基质中，温度21℃，2200Lx光照，3天培养，出圃。
所述初代培养基主要成份为MS+1.1mg/L BA+0.02mg/L NAA+2.6mg/L IBA+3.4mg/L亚硒酸钠+30g/L蔗糖+4g/L琼脂。
所述愈伤组织培养基主要成份为MS+0.02mg/L IBA+35g/L蔗糖+7g/L琼脂。
所述扩大培养基培养基主要成份为MS+0.7mg/L 2,4-D+35g/L蔗糖+7g/L琼脂。
所述增殖培养基主要成份为MS+2.8mg/L GA3+32g/L蔗糖+7g/L琼脂。
所述生根诱导培养基主要成份为MS+1.1mg/L NAA+1.3mg/L IBA+35g/L蔗糖+7g/L琼脂。
所述初代培养基、愈伤组织培养基、扩大培养基、增殖培养基、生根培养基的pH值为6.5±0.2。
本实施例中增殖培养过程进行到2天时，生长点处萌发出新芽，4天时新芽的长度达到3cm，新芽粗壮；生根培养过程进行到7天时即开始生根。
实施例5
一种多肉植物的组培快繁方法，包括以下步骤：
1）前处理
挑选健康无虫害5cm长的多肉植物的幼芽或茎干，去除杂叶和顶芽，使用生理盐水清洗枝条表面的灰尘并进行裁剪；随后置于次氯酸钠水溶液中浸泡8min，使用1%浓度的氯化汞反复冲洗8min，并放置于无菌滤纸上沥干水，放置时间不超过1h；
2）无菌组织建立
在无菌工作台上，将步骤1）中采集到的幼芽或茎干放入无菌玻璃培养皿中，首先加入硼酸溶液没过幼芽或茎干，浸泡1min后倒入，然后加入磷酸盐缓冲液进行反复清洗，接着使用热风机吹干幼芽或茎干表面的水分；随后使用无菌手术刀将幼芽或茎段剪切成1.5cm的小切片，小切片经过75%酒精浸泡后水洗，水洗后小切片涂抹姜黄素，然后将小切片接种在初代培养基中，初代培养条件为：黑暗，33℃，培养4天；
3）愈伤组织分化培养及扩大培养
将在初代培养基中培养后的小切片放置愈伤组织培养基中进行诱导分化，直至小切片的断口处产生愈伤组织，愈伤组织培养条件为：900Lx，24℃，光照时间3h，培养5天；愈伤组织培养结束后，将茎段放置扩大培养基中进行增殖培养，如此循环往复，直至得到所需数量的丛生芽；
4）增殖培养
将丛生芽的基部切开划线，转入到增殖培养基中培养，直至划线处生芽长度为2cm以上时，并切下放置增殖培养基中继续培养4天，增殖培养条件为2500Lx，27℃，光照时间7h；
5）分化出根
增殖后的丛生芽达到4cm时，将它们转入生根诱导培养基中，生根诱导培养条件为：2000Lx光照，20℃培养7天；
6）炼苗移栽
待丛生芽生根5条，根长2-4cm时，出瓶并使用磷酸盐缓冲液清洗干净根，最后移栽到由细砂土、砂砾和泥炭组成并灭菌的基质中，温度21℃，2200Lx光照，3天培养，出圃。
所述初代培养基主要成份为MS+1.1mg/L BA+0.02mg/L NAA+2.4mg/L IBA+3.6mg/L亚硒酸钠+31g/L蔗糖+4g/L琼脂。
所述愈伤组织培养基主要成份为MS+0.03mg/L IBA+35g/L蔗糖+8g/L琼脂。
所述扩大培养基培养基主要成份为MS+0.6mg/L 2,4-D+35g/L蔗糖+7g/L琼脂。
所述增殖培养基主要成份为MS+2.7mg/L GA3+36g/L蔗糖+7g/L琼脂。
所述生根诱导培养基主要成份为MS+0.9mg/L NAA+1.2mg/L IBA+37g/L蔗糖+7g/L琼脂。
所述初代培养基、愈伤组织培养基、扩大培养基、增殖培养基、生根培养基的pH值为6.5±0.2。
本实施例中增殖培养过程进行到2天时，生长点处萌发出新芽，4天时新芽的长度达到3cm，新芽粗壮；生根培养过程进行到7天时即开始生根。
实施例6
一种多肉植物的组培快繁方法，包括以下步骤：
1）前处理
挑选健康无虫害5cm长的多肉植物的幼芽或茎干，去除杂叶和顶芽，使用生理盐水清洗枝条表面的灰尘并进行裁剪；随后置于次氯酸钠水溶液中浸泡8min，使用1%浓度的氯化汞反复冲洗8min，并放置于无菌滤纸上沥干水，放置时间不超过1h；
2）无菌组织建立
在无菌工作台上，将步骤1）中采集到的幼芽或茎干放入无菌玻璃培养皿中，首先加入硼酸溶液没过幼芽或茎干，浸泡1min后倒入，然后加入磷酸盐缓冲液进行反复清洗，接着使用热风机吹干幼芽或茎干表面的水分；随后使用无菌手术刀将幼芽或茎段剪切成1.5cm的小切片，小切片经过75%酒精浸泡后水洗，水洗后小切片涂抹姜黄素，然后将小切片接种在初代培养基中，初代培养条件为：黑暗，33℃，培养4天；
3）愈伤组织分化培养及扩大培养
将在初代培养基中培养后的小切片放置愈伤组织培养基中进行诱导分化，直至小切片的断口处产生愈伤组织，愈伤组织培养条件为：900Lx，24℃，光照时间3h，培养5天；愈伤组织培养结束后，将茎段放置扩大培养基中进行增殖培养，如此循环往复，直至得到所需数量的丛生芽；
4）增殖培养
将丛生芽的基部切开划线，转入到增殖培养基中培养，直至划线处生芽长度为2cm以上时，并切下放置增殖培养基中继续培养4天，增殖培养条件为2500Lx，27℃，光照时间7h；
5）分化出根
增殖后的丛生芽达到4cm时，将它们转入生根诱导培养基中，生根诱导培养条件为：2000Lx光照，20℃培养7天；
6）炼苗移栽
待丛生芽生根5条，根长2-4cm时，出瓶并使用磷酸盐缓冲液清洗干净根，最后移栽到由细砂土、砂砾和泥炭组成并灭菌的基质中，温度21℃，2200Lx光照，3天培养，出圃。
所述初代培养基主要成份为MS+0.8mg/L BA+0.02mg/L NAA+2.7mg/L IBA+3.4mg/L亚硒酸钠+29g/L蔗糖+5g/L琼脂。
所述愈伤组织培养基主要成份为MS+0.02mg/L IBA+36g/L蔗糖+7g/L琼脂。
所述扩大培养基培养基主要成份为MS+0.6mg/L 2,4-D+34g/L蔗糖+7g/L琼脂。
所述增殖培养基主要成份为MS+3.3mg/L GA3+35g/L蔗糖+7g/L琼脂。
所述生根诱导培养基主要成份为MS+0.9mg/L NAA+1.2mg/L IBA+36g/L蔗糖+7g/L琼脂。
所述初代培养基、愈伤组织培养基、扩大培养基、增殖培养基、生根培养基的pH值为6.5±0.2。
本实施例中增殖培养过程进行到2天时，生长点处萌发出新芽，4天时新芽的长度达到3cm，新芽粗壮；生根培养过程进行到7天时即开始生根。
实施例7
一种多肉植物的组培快繁方法，包括以下步骤：
1）前处理
挑选健康无虫害5cm长的多肉植物的幼芽或茎干，去除杂叶和顶芽，使用生理盐水清洗枝条表面的灰尘并进行裁剪；随后置于次氯酸钠水溶液中浸泡8min，使用1%浓度的氯化汞反复冲洗8min，并放置于无菌滤纸上沥干水，放置时间不超过1h；
2）无菌组织建立
在无菌工作台上，将步骤1）中采集到的幼芽或茎干放入无菌玻璃培养皿中，首先加入硼酸溶液没过幼芽或茎干，浸泡1min后倒入，然后加入磷酸盐缓冲液进行反复清洗，接着使用热风机吹干幼芽或茎干表面的水分；随后使用无菌手术刀将幼芽或茎段剪切成1.5cm的小切片，小切片经过75%酒精浸泡后水洗，水洗后小切片涂抹姜黄素，然后将小切片接种在初代培养基中，初代培养条件为：黑暗，35℃，培养5天；
3）愈伤组织分化培养及扩大培养
将在初代培养基中培养后的小切片放置愈伤组织培养基中进行诱导分化，直至小切片的断口处产生愈伤组织，愈伤组织培养条件为：1000Lx，26℃，光照时间4h，培养6天；愈伤组织培养结束后，将茎段放置扩大培养基中进行增殖培养，如此循环往复，直至得到所需数量的丛生芽；
4）增殖培养
将丛生芽的基部切开划线，转入到增殖培养基中培养，直至划线处生芽长度为2cm以上时，并切下放置增殖培养基中继续培养4天，增殖培养条件为2500Lx，28℃，光照时间8h；
5）分化出根
增殖后的丛生芽达到5cm时，将它们转入生根诱导培养基中，生根诱导培养条件为：2000Lx光照，20℃培养7天；
6）炼苗移栽
待丛生芽生根5条，根长4cm时，出瓶并使用磷酸盐缓冲液清洗干净根，最后移栽到由细砂土、砂砾和泥炭组成并灭菌的基质中，温度24℃，2200Lx光照，3天培养，出圃。
所述初代培养基主要成份为MS+1.2mg/L BA+0.03mg/L NAA+3.0mg/L IBA+3.6mg/L亚硒酸钠+34g/L蔗糖+6g/L琼脂。
所述愈伤组织培养基主要成份为MS+0.03mg/L IBA+40g/L蔗糖+8g/L琼脂。
所述扩大培养基培养基主要成份为MS+0.8mg/L 2,4-D+40g/L蔗糖+8g/L琼脂。
所述增殖培养基主要成份为MS+4.0mg/L GA3+40g/L蔗糖+8g/L琼脂。
所述生根诱导培养基主要成份为MS+1.2mg/L NAA+1.6mg/L IBA+40g/L蔗糖+8g/L琼脂。
所述初代培养基、愈伤组织培养基、扩大培养基、增殖培养基、生根培养基的pH值为6.5±0.2。
本实施例中增殖培养过程进行到2天时，生长点处萌发出新芽，4天时新芽的长度达到3cm，新芽粗壮；生根培养过程进行到7天时即开始生根。
实施例8
一种多肉植物的组培快繁方法，包括以下步骤：
1）前处理
挑选健康无虫害5cm长的多肉植物的幼芽或茎干，去除杂叶和顶芽，使用生理盐水清洗枝条表面的灰尘并进行裁剪；随后置于次氯酸钠水溶液中浸泡8min，使用1%浓度的氯化汞反复冲洗8min，并放置于无菌滤纸上沥干水，放置时间不超过1h；
2）无菌组织建立
在无菌工作台上，将步骤1）中采集到的幼芽或茎干放入无菌玻璃培养皿中，首先加入硼酸溶液没过幼芽或茎干，浸泡1min后倒入，然后加入磷酸盐缓冲液进行反复清洗，接着使用热风机吹干幼芽或茎干表面的水分；随后使用无菌手术刀将幼芽或茎段剪切成1.5cm的小切片，小切片经过75%酒精浸泡后水洗，水洗后小切片涂抹姜黄素，然后将小切片接种在初代培养基中，初代培养条件为：黑暗，35℃，培养5天；
3）愈伤组织分化培养及扩大培养
将在初代培养基中培养后的小切片放置愈伤组织培养基中进行诱导分化，直至小切片的断口处产生愈伤组织，愈伤组织培养条件为：1000Lx，26℃，光照时间4h，培养6天；愈伤组织培养结束后，将茎段放置扩大培养基中进行增殖培养，如此循环往复，直至得到所需数量的丛生芽；
4）增殖培养
将丛生芽的基部切开划线，转入到增殖培养基中培养，直至划线处生芽长度为2cm以上时，并切下放置增殖培养基中继续培养4天，增殖培养条件为2500Lx，28℃，光照时间8h；
5）分化出根
增殖后的丛生芽达到5cm时，将它们转入生根诱导培养基中，生根诱导培养条件为：2000Lx光照，20℃培养7天；
6）炼苗移栽
待丛生芽生根5条，根长4cm时，出瓶并使用磷酸盐缓冲液清洗干净根，最后移栽到由细砂土、砂砾和泥炭组成并灭菌的基质中，温度24℃，2200Lx光照，3天培养，出圃。
所述初代培养基主要成份为MS+1.1mg/L BA+0.03mg/L NAA+2.8mg/L IBA+3.6mg/L亚硒酸钠+34g/L蔗糖+6g/L琼脂。
所述愈伤组织培养基主要成份为MS+0.03mg/L IBA+38g/L蔗糖+8g/L琼脂。
所述扩大培养基培养基主要成份为MS+0.7mg/L 2,4-D+38g/L蔗糖+8g/L琼脂。
所述增殖培养基主要成份为MS+3.6mg/L GA3+38g/L蔗糖+8g/L琼脂。
所述生根诱导培养基主要成份为MS+1.2mg/L NAA+1.5mg/L IBA+36g/L蔗糖+8g/L琼脂。
所述初代培养基、愈伤组织培养基、扩大培养基、增殖培养基、生根培养基的pH值为6.5±0.2。
本实施例中增殖培养过程进行到2天时，生长点处萌发出新芽，4天时新芽的长度达到3cm，新芽粗壮；生根培养过程进行到7天时即开始生根。
实施例9
一种多肉植物的组培快繁方法，包括以下步骤：
1）前处理
挑选健康无虫害5cm长的多肉植物的幼芽或茎干，去除杂叶和顶芽，使用生理盐水清洗枝条表面的灰尘并进行裁剪；随后置于次氯酸钠水溶液中浸泡8min，使用1%浓度的氯化汞反复冲洗8min，并放置于无菌滤纸上沥干水，放置时间不超过1h；
2）无菌组织建立
在无菌工作台上，将步骤1）中采集到的幼芽或茎干放入无菌玻璃培养皿中，首先加入硼酸溶液没过幼芽或茎干，浸泡1min后倒入，然后加入磷酸盐缓冲液进行反复清洗，接着使用热风机吹干幼芽或茎干表面的水分；随后使用无菌手术刀将幼芽或茎段剪切成1.5cm的小切片，小切片经过75%酒精浸泡后水洗，水洗后小切片涂抹姜黄素，然后将小切片接种在初代培养基中，初代培养条件为：黑暗，35℃，培养5天；
3）愈伤组织分化培养及扩大培养
将在初代培养基中培养后的小切片放置愈伤组织培养基中进行诱导分化，直至小切片的断口处产生愈伤组织，愈伤组织培养条件为：1000Lx，26℃，光照时间4h，培养6天；愈伤组织培养结束后，将茎段放置扩大培养基中进行增殖培养，如此循环往复，直至得到所需数量的丛生芽；
4）增殖培养
将丛生芽的基部切开划线，转入到增殖培养基中培养，直至划线处生芽长度为2cm以上时，并切下放置增殖培养基中继续培养4天，增殖培养条件为2500Lx，28℃，光照时间8h；
5）分化出根
增殖后的丛生芽达到5cm时，将它们转入生根诱导培养基中，生根诱导培养条件为：2000Lx光照，20℃培养7天；
6）炼苗移栽
待丛生芽生根5条，根长4cm时，出瓶并使用磷酸盐缓冲液清洗干净根，最后移栽到由细砂土、砂砾和泥炭组成并灭菌的基质中，温度24℃，2200Lx光照，3天培养，出圃。
所述初代培养基主要成份为MS+0.7mg/L BA+0.03mg/L NAA+3.0mg/L IBA+3.6mg/L亚硒酸钠+34g/L蔗糖+6g/L琼脂。
所述愈伤组织培养基主要成份为MS+0.03mg/L IBA+37g/L蔗糖+8g/L琼脂。
所述扩大培养基培养基主要成份为MS+0.7mg/L 2,4-D+40g/L蔗糖+8g/L琼脂。
所述增殖培养基主要成份为MS+3.5mg/L GA3+37g/L蔗糖+8g/L琼脂。
所述生根诱导培养基主要成份为MS+1.2mg/L NAA+1.5mg/L IBA+35g/L蔗糖+6g/L琼脂。
所述初代培养基、愈伤组织培养基、扩大培养基、增殖培养基、生根培养基的pH值为6.5±0.2。
本实施例中增殖培养过程进行到2天时，生长点处萌发出新芽，4天时新芽的长度达到3cm，新芽粗壮；生根培养过程进行到7天时即开始生根。
实施例11
初代培养基中生长激素成分和浓度对多肉植物分化的影响
本实施例所述的一种多肉植物的组培快繁方法，与实施例4的区别在于初代培养基中成分和浓度的不同，根据生长激素的成分和浓度进行分组，观察并记录培养基中的培养情况，具体分组及培养结果见表1。
表1 初代培养基中成分和浓度对多肉植物分化的影响结果
| 分组 | BA（mg/L） | NAA（mg/L） | IBA（mg/L） | 接种数（个） | 分化数（个） | 分化率（%） |
| 1 | 0.8 | -- | -- | 50 | 14 | 28.00 |
| 2 | 1.2 | 0.01 | -- | 50 | 12 | 24.00 |
| 3 | -- | 0.02 | 2.6 | 50 | 8 | 16.00 |
| 4 | -- | 0.02 | 2.6 | 50 | 4 | 8.00 |
| 5 | 0.8 | -- | 2.6 | 50 | 17 | 34.00 |
| 6 | 1.0 | 0.02 | 2.6 | 50 | 49 | 98.00 |
从上表可以看出，BA、NAA和IBA同时使用比二者任一单用时的分化率要高得多，且从1-6组可以看出，三者同时使用时，BA为1.0mg/L，NAA为0.02mg/L，IBA为2.6mg/L时，分化率最高，为初代培养基成分和浓度的最适合的组成条件。
实施例12
增殖培养基中生长激素成分和浓度对多肉植物分化的影响
本实施例所述的一种多肉植物的组培快繁方法，与实施例4的区别在于增殖培养基中成分和浓度的不同，根据生长激素的成分和浓度进行分组，观察并记录培养基中的培养情况，具体分组及培养结果见表2。
表2 增殖培养基中成分和浓度对多肉植物增殖的影响结果
| 分组 | GA3（mg/L） | 接种数（个） | 增殖数（个） | 增殖率（%） |
| 1 | -- | 50 | 3 | 6.00 |
| 2 | 1.0 | 50 | 16 | 32.00 |
| 3 | 2.0 | 50 | 24 | 48.00 |
| 4 | 2.5 | 50 | 32 | 64.00 |
| 5 | 3.5 | 50 | 45 | 90.00 |
| 6 | 4.0 | 50 | 48 | 98.00 |
从上表可以看出，GA3能显著性地提高多肉植物的增殖率，且从1-6组可以看出，GA3为4.0mg/L时，增殖率最高，为增殖培养基成分和浓度的最适合的组成条件。
实施例13
生根诱导培养基中生长激素成分和浓度对多肉植物分化的影响
本实施例所述的一种多肉植物的组培快繁方法，与实施例4的区别在于生根诱导培养基中成分和浓度的不同，根据生长激素的成分和浓度进行分组，观察并记录培养基中的培养情况，具体分组及培养结果见表3。
表3 生根诱导培养基中成分和浓度对多肉植物分化的影响结果
| 分组 | NAA（mg/L） | IBA（mg/L） | 接种数（个） | 生根数（个） | 生根率（%） |
| 1 | -- | -- | 50 | 0 | 0.00 |
| 2 | 0.8 | -- | 50 | 8 | 16.00 |
| 3 | 1.2 | 0.8 | 50 | 41 | 82.00 |
| 4 | 1.0 | 1.2 | 50 | 36 | 72.00 |
| 5 | -- | 1.6 | 50 | 15 | 30.00 |
| 6 | 1.0 | 1.3 | 50 | 49 | 98.00 |
从上表可以看出，NAA和IBA同时使用比二者任一单用时的生根率要高得多，且从1-6组可以看出，两者同时使用时，NAA为1.0mg/L，IBA为1.3mg/L时，生根率最高，为生根诱导培养基成分和浓度的最适合的组成条件。
对于本领域技术人员而言，显然本发明不限于上述示范性实施例的细节，而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下，能够以其他的具体形式实现本发明。因此，无论从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。
此外，应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。
Claims (7)
1.一种多肉植物的组培快繁方法，其特征在于，包括以下步骤：
1）前处理
挑选健康无虫害5cm长的多肉植物的幼芽或茎干，去除杂叶和顶芽，使用生理盐水清洗枝条表面的灰尘并进行裁剪；随后置于次氯酸钠水溶液中浸泡8min，使用1%浓度的氯化汞反复冲洗8min，并放置于无菌滤纸上沥干水，放置时间不超过1h；
2）无菌组织建立
在无菌工作台上，将步骤1）中采集到的幼芽或茎干放入无菌玻璃培养皿中，首先加入硼酸溶液没过幼芽或茎干，浸泡1min后倒入，然后加入磷酸盐缓冲液进行反复清洗，接着使用热风机吹干幼芽或茎干表面的水分；随后使用无菌手术刀将幼芽或茎段剪切成1.5cm的小切片，小切片经过75%酒精浸泡后水洗，水洗后小切片涂抹姜黄素，然后将小切片接种在初代培养基中，初代培养条件为：黑暗，28℃-35℃，培养2天-5天；
3）愈伤组织分化培养及扩大培养
将在初代培养基中培养后的小切片放置愈伤组织培养基中进行诱导分化，直至小切片的断口处产生愈伤组织，愈伤组织培养条件为：800Lx-1000Lx，22℃-26℃，光照时间2h-4h，培养3天-6天；愈伤组织培养结束后，将茎段放置扩大培养基中进行增殖培养，如此循环往复，直至得到所需数量的丛生芽；
4）增殖培养
将丛生芽的基部切开划线，转入到增殖培养基中培养，直至划线处生芽长度为2cm以上时，并切下放置增殖培养基中继续培养4天，增殖培养条件为2500Lx，26℃-28℃，光照时间6h-8h；
5）分化出根
增殖后的丛生芽达到3cm-5cm时，将它们转入生根诱导培养基中，生根诱导培养条件为：2000Lx光照，20℃培养7天；
6）炼苗移栽
待丛生芽生根5条，根长2-4cm时，出瓶并使用磷酸盐缓冲液清洗干净根，最后移栽到由细砂土、砂砾和泥炭组成并灭菌的基质中，温度18℃-24℃，2200Lx光照，3天培养，出圃。
2.根据权利要求1所述的多肉植物的组培快繁方法，其特征在于，所述初代培养基主要成份为MS+0.8-1.2mg/L BA+0.01-0.03mg/L NAA+2.2-3.0mg/L IBA+3.2-3.6mg/L亚硒酸钠+24-34g/L蔗糖+2-6g/L琼脂。
3.根据权利要求1或2所述的多肉植物的组培快繁方法，其特征在于，所述愈伤组织培养基主要成份为MS+0.01-0.03mg/L IBA+30-40g/L蔗糖+6-8g/L琼脂。
4.根据权利要求3所述的多肉植物的组培快繁方法，其特征在于，所述扩大培养基培养基主要成份为MS+0.5-0.8mg/L 2,4-D+30-40g/L蔗糖+6-8g/L琼脂。
5.根据权利要求4所述的多肉植物的组培快繁方法，其特征在于，所述增殖培养基主要成份为MS+2.0-4.0mg/L GA3+30-40g/L蔗糖+6-8g/L琼脂。
6. 根据权利要求5所述的多肉植物的组培快繁方法，其特征在于，所述生根诱导培养基主要成份为MS+0.8-1.2mg/L NAA+0.8-1.6mg/L IBA+32-40g/L蔗糖+6-8g/L琼脂。
7.根据权利要求1所述的多肉植物的组培快繁方法，其特征在于，所述初代培养基、愈伤组织培养基、扩大培养基、增殖培养基、生根培养基的pH值为6.5±0.2。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201610896212.1A CN106417026A (zh) | 2016-10-14 | 2016-10-14 | 一种多肉植物的组培快繁方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201610896212.1A CN106417026A (zh) | 2016-10-14 | 2016-10-14 | 一种多肉植物的组培快繁方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN106417026A true CN106417026A (zh) | 2017-02-22 |
Family
ID=58174663
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201610896212.1A Pending CN106417026A (zh) | 2016-10-14 | 2016-10-14 | 一种多肉植物的组培快繁方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN106417026A (zh) |
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106942058A (zh) * | 2017-03-24 | 2017-07-14 | 河南红枫种苗股份有限公司 | 一种天锦章属植物组织培养的培养基及其方法 |
| CN107041304A (zh) * | 2017-04-18 | 2017-08-15 | 屏南县惠荣农业科技有限公司 | 花叶万年青的原种制作方法 |
| CN107637464A (zh) * | 2017-11-02 | 2018-01-30 | 樊昌华 | 利用不同波长光源处理诱导多肉植物增殖和生根的方法 |
| CN108925428A (zh) * | 2018-07-31 | 2018-12-04 | 上海应用技术大学 | 多肉植物黄金山地玫瑰组培快速繁殖方法 |
| CN111642394A (zh) * | 2020-05-15 | 2020-09-11 | 临沂大学 | 一种多肉丸叶海豹组培用组合培养基、多肉丸叶海豹组培方法和多肉丸叶海豹栽培方法 |
| CN114027182A (zh) * | 2021-10-11 | 2022-02-11 | 云南省农业科学院花卉研究所 | 一种景天科拟石莲属东云系多肉植物组织培养繁殖方法 |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105325292A (zh) * | 2015-09-30 | 2016-02-17 | 福建省亚热带植物研究所 | 一种减缓长期继代蝴蝶兰类原球茎衰老的方法 |
-
2016
- 2016-10-14 CN CN201610896212.1A patent/CN106417026A/zh active Pending
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105325292A (zh) * | 2015-09-30 | 2016-02-17 | 福建省亚热带植物研究所 | 一种减缓长期继代蝴蝶兰类原球茎衰老的方法 |
Non-Patent Citations (6)
| Title |
|---|
| 吴正景等: "风铃玉的组织培养与快速繁殖", 《植物生理学报》 * |
| 王燕等: "卧牛锦的组织培养及其种质创新初探", 《浙江农业学报》 * |
| 蒲仕明等: "燕子掌的组织培养与植株再生", 《北方园艺》 * |
| 马赞留等: "两种常用多肉植物高效组培快繁技术研究", 《现代园艺》 * |
| 黄清俊: "多肉花卉短叶巨象(Gasteria brevifolia)的离体繁殖和种质保存", 《安徽农业科学》 * |
| 黄素华等: "水晶掌组织培养与快速繁殖", 《福建师范大学学报(自然科学版)》 * |
Cited By (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106942058A (zh) * | 2017-03-24 | 2017-07-14 | 河南红枫种苗股份有限公司 | 一种天锦章属植物组织培养的培养基及其方法 |
| CN106942058B (zh) * | 2017-03-24 | 2019-04-05 | 河南红枫种苗股份有限公司 | 一种天锦章属植物组织培养的培养基及其方法 |
| CN107041304A (zh) * | 2017-04-18 | 2017-08-15 | 屏南县惠荣农业科技有限公司 | 花叶万年青的原种制作方法 |
| CN107637464A (zh) * | 2017-11-02 | 2018-01-30 | 樊昌华 | 利用不同波长光源处理诱导多肉植物增殖和生根的方法 |
| CN108925428A (zh) * | 2018-07-31 | 2018-12-04 | 上海应用技术大学 | 多肉植物黄金山地玫瑰组培快速繁殖方法 |
| CN111642394A (zh) * | 2020-05-15 | 2020-09-11 | 临沂大学 | 一种多肉丸叶海豹组培用组合培养基、多肉丸叶海豹组培方法和多肉丸叶海豹栽培方法 |
| CN111642394B (zh) * | 2020-05-15 | 2021-10-15 | 临沂大学 | 一种多肉丸叶海豹组培用组合培养基、多肉丸叶海豹组培方法和多肉丸叶海豹栽培方法 |
| CN114027182A (zh) * | 2021-10-11 | 2022-02-11 | 云南省农业科学院花卉研究所 | 一种景天科拟石莲属东云系多肉植物组织培养繁殖方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN106417026A (zh) | 一种多肉植物的组培快繁方法 | |
| CN104054583B (zh) | 一种苹果砧木t337快速繁殖的方法 | |
| CN103190347B (zh) | 一种茶壶枣组织培养方法 | |
| CN105638477A (zh) | 一种竹叶石斛种子快速繁殖方法 | |
| CN105494103A (zh) | 一种摩帝类兜兰优质种苗组织培养快速繁殖方法 | |
| CN104737914A (zh) | 一种龙脑樟组织培养方法 | |
| CN104186295A (zh) | 兜兰种子萌发培养基及培养方法 | |
| CN100361570C (zh) | 一种鲜切花百合的高效离体繁殖方法 | |
| CN108513910A (zh) | 一种黑果枸杞耐盐突变体的离体筛选方法 | |
| CN105191792B (zh) | 扁桃斑鸠菊的快速繁殖方法 | |
| CN102499088A (zh) | 一种利用广西金线莲蒴果快速繁育其种苗的方法 | |
| CN111084103A (zh) | 一种欧李组培快繁的方法 | |
| CN104145822B (zh) | 一种杉木优良无性系11c的组织培养育苗方法 | |
| CN105210875A (zh) | 一种白芨快速扩繁方法 | |
| CN104813931A (zh) | 一种铁皮石斛组培快繁的方法 | |
| CN110012834B (zh) | 一种提高金菠萝组织培养效率的方法 | |
| CN101743908A (zh) | 红花银桦组培快繁及栽培方法 | |
| CN104642111B (zh) | 一种金花茶种苗繁育方法 | |
| CN113491239B (zh) | 一种多倍体大花萱草组织培养及培养基 | |
| CN104663445A (zh) | 一种高产脂湿地松的离体快繁技术 | |
| CN104585040A (zh) | 一种利用走马胎幼芽胚轴快速繁殖其种苗的方法 | |
| CN107810850B (zh) | 一种小叶杨与胡杨杂交种再生苗的培育方法 | |
| CN109220813A (zh) | 一种忽布花离体培养技术 | |
| CN103749295B (zh) | 一种麻疯树再生苗增根的方法 | |
| CN114027196B (zh) | 一种丛生紫荆的组培快繁培养基组合及培养方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20170222 |