CN106370750A - 金朴消积颗粒中橙皮苷、柚皮苷和新橙皮苷含量检测方法 - Google Patents

Abstract

本发明属于分析化学技术领域，具体涉及一种金朴消积颗粒中橙皮苷、柚皮苷和新橙皮苷含量检测方法。本发明采用高效液相色谱法定量测定金朴消积颗粒样品中陈皮和枳实中所含橙皮苷、柚皮苷和新橙皮苷的含量，替代了原有质量标准的薄层扫描含量测定方法，能成功区分柚皮苷、橙皮苷和新橙皮苷三个成分并能准确定量测定，具有更高的准确度和稳定性，专属性更强，能够更好地确保中药金朴消积颗粒的整体质量，有较好的科学性和应用价值。

Description

金朴消积颗粒中橙皮苷、柚皮苷和新橙皮苷含量检测方法

技术领域

本发明属于分析化学技术领域，具体涉及一种金朴消积颗粒中橙皮苷、柚皮苷和新橙皮苷含量检测方法。

背景技术

金朴消积颗粒是南京海陵药业有限公司生产的一种治疗小儿厌食的中成药，由陈皮、苍术、枳实、厚朴、鸡内金、甘草、大黄7味药组成，按照现行质量标准WS-643(Z-115)-2013Z的制法进行生产所得。

现行质量标准WS-643(Z-115)-2013Z含量测定项下检测方法采用的是薄层扫描色谱法，此方法抗干扰能力不强，准确度差，检测结果误差大，不能很好地反映药品指标成分含量，此方法现行2015版药典已很少采用，属于淘汰方法。因此需要有专属性更强、准确度更高的含量测定方法来更好地控制药品质量。

发明内容

针对现有技术存在的问题，本发明提供一种金朴消积颗粒中橙皮苷、柚皮苷和新橙皮苷含量检测方法，目的是通过高效液相色谱法外标的方式，准确测量金朴消积颗粒中橙皮苷、柚皮苷和新橙皮苷含量，从而更好地控制药品质量。

实现本发明目的的技术方案按照以下步骤进行：

(1)配制金朴消积颗粒供试品溶液和对照品溶液：将金朴消积颗粒研细，精密天平称定0.5g，置于具塞锥形瓶中，加入50ml甲醇，称定重量后超声处理30分钟，室温放冷，再称定重量，再加入甲醇补足减失的重量，摇匀过滤，取滤液作为供试品溶液；

精密天平称取柚皮苷对照品、橙皮苷对照品和新橙皮苷对照品，加甲醇制成每lml甲醇含柚皮苷100μg、橙皮苷50μg、新橙皮苷50μg的对照品溶液；

(2)分别取供试品溶液和对照品溶液各5μl，注入液相色谱仪中，液相色谱仪以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇-醋酸-水为流动相，理论板数按柚皮苷峰计算≥2000，以283nm为检测波长，得到柚皮苷对照品、橙皮苷对照品和新橙皮苷对照品色谱图以及供试品色谱图，将供试品色谱图中的柚皮苷峰、橙皮苷和新橙皮苷峰与对照品色谱图进行对照，计算得到供试品中橙皮苷、柚皮苷和新橙皮苷的含量。

与现有技术相比，本发明的特点和有益效果是：

本发明采用高效液相色谱法定量测定金朴消积颗粒样品中陈皮和枳实中所含橙皮苷、柚皮苷和新橙皮苷的含量，分别对柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷对照品溶液在200～900nm波长范围内扫描，三者的最大和次大吸收峰分别在283、327nm波长处，因在283nm波长处吸收最强，且干扰较少，故选择283nm为检测波长，替代了原有质量标准的薄层扫描含量测定方法，能成功区分柚皮苷、橙皮苷和新橙皮苷三个成分并能准确定量测定，现有的薄层扫描色谱法不能区分三个成分，只能显示一个斑点，都作为橙皮苷定量。

本发明技术方案经过线性关系考察、精密度试验、稳定性试验、重复性试验和加样回收率试验验证表明具有更高的准确度和稳定性，专属性更强,能够更好的确保中药金朴消积颗粒的整体质量,有较大的科学性和应用价值。

附图说明

图1是本发明实施例中的供试品和对照品的高效液相色谱图；

其中：A：阴性对照色谱图；B：供试品色谱图；C：对照品色谱图；

图中各峰：1：柚皮苷；2：橙皮苷；3：新橙皮苷。

具体实施方式

本发明实施例中使用的液相色谱仪是美国安捷伦公司Agilent 1260型HPLC仪；超声波装置是KH-600DB型超声波发生器(昆山市超声仪器有限公司)；精密天平是XS204型电子天平(瑞士梅特勒-托利多公司)；

柚皮苷对照品、橙皮苷对照品和新橙皮苷对照品来自中国食品药品检定研究院；金朴消积颗粒由扬子江药业集团南京海陵药业有限公司生产；甲醇为色谱纯，其余试剂为分析纯，水为自制纯化水。

实施例：

本实施例的金朴消积颗粒中橙皮苷、柚皮苷和新橙皮苷含量检测方法按照以下步骤进行：

(1)配制金朴消积颗粒供试品溶液和对照品溶液：将金朴消积颗粒研细，精密天平称定0.5g，置于具塞锥形瓶中，加入50ml甲醇，称定重量后超声处理30分钟，室温放冷，再称定重量，再加入甲醇补足减失的重量，摇匀过滤，取滤液作为供试品溶液；

精密天平称取柚皮苷对照品、橙皮苷对照品和新橙皮苷对照品，加甲醇制成每lml甲醇含柚皮苷100μg、橙皮苷50μg、新橙皮苷50μg的对照品溶液；

(2)分别取供试品溶液和对照品溶液各5μl，注入液相色谱仪中，液相色谱仪以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇-醋酸-水为流动相，理论板数按柚皮苷峰计算≥2000，以283nm为检测波长，得到柚皮苷对照品、橙皮苷对照品和新橙皮苷对照品色谱图以及供试品色谱图，将供试品色谱图中的柚皮苷峰、橙皮苷和新橙皮苷峰与对照品色谱图进行对照，如图1所示，在阴性对照条件下，0.5g金朴消积颗粒样品中含柚皮苷、橙皮苷和新橙皮苷含量分别为2.14mg，0.43mg，3.43mg，百分含量分别为0.429％，0.086％，0.686％，三者含量总和为1.201％。

从多个方面评价实施例测定金朴消积颗粒样品中陈皮和枳实中所含橙皮苷、柚皮苷和新橙皮苷的含量，评价方法如下：

1、线性关系考察

精密量取不同浓度对照品溶液，依次稀释2倍得系列混合对照品溶液，分别吸取10μl进样测定。以质量浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，进行线性回归，回归方程及线性范围见表1，从表1可以看出各成分在各自线性范围内具有良好的线性关系。

表1回归方程及线性范围

2、精密度试验

取对照品溶液适量，连续重复进样测定6次，结果柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷的RSD(相对标准偏差)分别为0.32％、0.63％、0.32％，表明色谱仪器精密度良好。

3、稳定性试验

取同一批号金朴消积颗粒供试品溶液适量，分别于放置0、2、4、8、12、18、24、30、36、48h时进样测定10次，结果柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷的RSD分别为1.4％、1.1％、1.5％，表明供试品溶液在48h内质量基本稳定。

4、重复性试验

精密称取同一批号金朴消积颗粒样品0.5g，制备供试品溶液，重复制备6份，进样测定，结果柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷的RSD分别为1.02％、0.59％、0.92％，表明本方法重复性良好。

5、加样回收率试验

精密称取已知含量的金朴消积颗粒样品0.5g，共6份，置于50ml量瓶中，精密加入对照品贮备液适量，制备供试品溶液，进样测定，计算加样回收率，结果见表2，结果表明方法准确度良好。

表2加样回收率试验结果

对比例：

本对比例是按照传统薄层色谱法对金朴消积颗粒中橙皮苷、柚皮苷和新橙皮苷含量进行检测，按照以下步骤进行：

取金朴消积颗粒，研细，精密称定，加甲醇适量，超声处理20分钟，滤过，残渣再加甲醇适量，超声处理20分钟，滤过，残渣及滤器用甲醇洗涤二次，合并滤液及洗液，置25ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，作为供试品溶液；

另取橙皮苷对照品，加0.1％氢氧化钠甲醇溶液制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；

按照薄层色谱法试验，精密吸取对照品溶液1μl、4μl与供试品溶液4μl，分别交叉点于同一含0.5％氢氧化钠的0.5％羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯-甲醇-水(体积比100：17：13)为展开剂，展开，取出，凉干，喷以1％三氯化铝乙醇溶液，晾干，置紫外光灯(365nm)下定位，照薄层色谱法进行扫描，波长λs＝287nm，λR＝370nm，测定供试品吸收度积分值与对照品吸收度积分值，计算，即得。

对比例结果显示本品每g含陈皮、枳实以橙皮苷(C28H34O15)计为17.5mg，百分含量为1.75％。比高效液相色谱法检测结果柚皮苷、橙皮苷和新橙皮苷三者含量总和1.201％要高，说明薄层扫描法准确度较差。

按照与实施例1中同样的方式对对比例方法的可行性进行评价，结果如表3所示。

表3对比例方法的可行性评价结果

:结论：

从实施例和对比例两者比较可以看出，本发明的新方法高效液相色谱法能成功区分柚皮苷、橙皮苷和新橙皮苷三个成分并能准确定量测定，而老方法薄层扫描色谱法不能区分三个成分，只能显示一个斑点，都作为橙皮苷定量；新方法各指标均好于旧方法，准确度更高，稳定可靠,专属性更强,可以更好的确保中药金朴消积颗粒的整体质量，有较大的科学性和应用价值。

Claims (1)

1.一种金朴消积颗粒中橙皮苷、柚皮苷和新橙皮苷含量检测方法，其特征在于，按照以下步骤进行：

(1)配制金朴消积颗粒供试品溶液和对照品溶液：将金朴消积颗粒研细，精密天平称定0.5g，置于具塞锥形瓶中，加入50ml甲醇，称定重量后超声处理30分钟，室温放冷，再称定重量，再加入甲醇补足减失的重量，摇匀过滤，取滤液作为供试品溶液；

精密天平称取柚皮苷对照品、橙皮苷对照品和新橙皮苷对照品，加甲醇制成每lml甲醇含柚皮苷100μg、橙皮苷50μg、新橙皮苷50μg的对照品溶液；

(2)分别取供试品溶液和对照品溶液各5μl，注入液相色谱仪中，液相色谱仪以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇-醋酸-水为流动相，理论板数按柚皮苷峰计算≥2000，以283nm为检测波长，得到柚皮苷对照品、橙皮苷对照品和新橙皮苷对照品色谱图以及供试品色谱图，将供试品色谱图中的柚皮苷峰、橙皮苷和新橙皮苷峰与对照品色谱图进行对照，计算得到供试品中橙皮苷、柚皮苷和新橙皮苷的含量。