CN106317163A - 一种高效自动化的多肽合成方法 - Google Patents

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孙振
朱玮
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Abstract

本发明公开了一种高效自动化的多肽合成方法，涉及化学合成领域。本发明按如下步骤进行：使用树脂作为不溶性的固相载体；将一个氨基被封闭基团保护的氨基酸溶剂通过合成仪自动加入到反应器中，使得一个氨基被封闭基团保护的氨基酸共价连接在固相载体上；完成后，通过合成仪中蠕动泵注入加入相应序列氨基酸；将完成后的废液排出；合成半成品加入溶剂进行清洗，清洗后将废液排出；循环添加、反应、合成过程，直至达到所需要的肽链长度；通过加入相应的溶剂反应脱去保护基，并进行清洗，得到了合成好的氨基酸多肽产品。本发明操作简单，合成速度快，合成效率高。

Description

一种高效自动化的多肽合成方法
技术领域
本发明涉及化学合成领域，尤其涉及一种多肽合成方法。
背景技术
多肽合成通过在合成仪中依次加入合成物质，对氨基酸进行加肽链合成，形成所需序列的多肽产物。传统多肽合成工艺中，采用普通合成仪，通过简单控制实现依次加料合成，合成效率低，产量小。
发明内容
本发明的目的是解决上述不足，提供一种高效自动化的多肽合成方法。
本发明提供的一种高效自动化的多肽合成方法，其具体步骤如下：
步骤（1）、使用树脂作为不溶性的固相载体，将其投入合成仪反应器中，并启动合成仪。
步骤（2）、将一个氨基被封闭基团保护的氨基酸溶剂通过合成仪自动加入到反应器中，使得一个氨基被封闭基团保护的氨基酸共价连接在固相载体上。通过加入相应的溶剂反应脱掉氨基的保护基，将第一个氨基酸接到了固相载体上。
步骤（3）、在步骤（2）反应完成后，通过合成仪中蠕动泵注入相应序列氨基酸溶液，并吹入氮气鼓泡混合，合成过程中采用微波加热，提高合成速度；固相载体上的氨基酸中的氨基被封闭的第二个氨基酸的羧基通过活化反应被活化，羧基被活化的第二个氨基酸再与已接在固相载体的第一个氨基酸的氨基反应形成肽键，使得固相载体上生成一个带有保护基的氨基酸肽链。
步骤（4）、通过合成仪废液排放系统将步骤（3）完成后的废液排出。
步骤（5）、通过合成仪的清洗管路对步骤（4）反应后的合成半成品加入溶剂进行清洗，清洗后将废液排出。
步骤（6）、将步骤（5）完成后的反应器中通过合成仪加入相关溶剂脱掉多肽合成物上氨基的保护基，然后进行废液排放，废液排放完成后加入溶剂进行清洗操作。
步骤（7）、将步骤（6）完成后的反应器中通过合成仪蠕动泵加料系统加入对应序列的合成氨基酸，控制加入量及合成温度，完成合成反应后，将废液排出。
步骤（8）、循环重复步骤（4）、（5）、（6）、（7），使肽链从C端向N端生长，直至达到所需要肽链的长度。
步骤（9）、通过加入相应的溶剂反应脱去保护基并水解肽链和固相载体之间的酯键，并进行清洗，得到了合成好的氨基酸多肽产品。
本发明在多肽合成加料过程中，采用蠕动泵进行加料，通过蠕动泵高精度控制加料量，大大减少了反应因加料不精确所导致的反应不充分，副反应增多所导致的杂质过多及分离提纯困难，提高了合成产品质量。本发明在合成多肽的反应过程中，通过微波设备通入微波，提高反应瓶内试剂的温度，提高反应速度，在反应器内布置多个反应瓶同时进行合成反应，采用转盘带动多个反应瓶绕微波发生器旋转，达到均衡温度下进行合成反应，采用红外温度传感器进行检测反应环境温度，根据实测反应环境温度对微波进行调整以控制温度在合理反应内；通过微波加热提高反应环境温度以及在反应器中布置多个反应瓶实现了反应高效及批量化生产，大大提升了合成的效率，此合成方法是普通多肽合成设备的10倍以上，并且微波环境下能合成部分难合成的多肽链。
本发明具有如下有益效果：生产工艺简单，操作方便；合成过程中通过微波加温，提高合成速度，合成效率高；通过蠕动泵高精度控制加料，合成充分，杂质少，合成产品纯度高，产量大。
具体实施方式
本发明提供的一种高效自动化的多肽合成方法，其具体步骤如下：
步骤（1）、使用树脂作为不溶性的固相载体，将其投入合成仪反应器中，并启动合成仪。
步骤（2）、将一个氨基被封闭基团保护的氨基酸溶剂通过合成仪自动加入到反应器中，使得一个氨基被封闭基团保护的氨基酸共价连接在固相载体上。通过加入相应的溶剂反应脱掉氨基的保护基，将第一个氨基酸接到了固相载体上。
步骤（3）、在步骤（2）反应完成后，通过合成仪中蠕动泵注入相应序列氨基酸溶液，并吹入氮气鼓泡混合，合成过程中采用微波加热，提高合成速度；固相载体上的氨基酸中的氨基被封闭的第二个氨基酸的羧基通过活化反应被活化，羧基被活化的第二个氨基酸再与已接在固相载体的第一个氨基酸的氨基反应形成肽键，使得固相载体上生成一个带有保护基的氨基酸肽链。
步骤（4）、通过合成仪废液排放系统将步骤（3）完成后的废液排出。
步骤（5）、通过合成仪的清洗管路对步骤（4）反应后的合成半成品加入溶剂进行清洗，清洗后将废液排出。
步骤（6）、将步骤（5）完成后的反应器中通过合成仪加入相关溶剂脱掉多肽合成物上氨基的保护基，然后进行废液排放，废液排放完成后加入溶剂进行清洗操作。
步骤（7）、将步骤（6）完成后的反应器中通过合成仪蠕动泵加料系统加入对应序列的合成氨基酸，控制加入量及合成温度，完成合成反应后，将废液排出。
步骤（8）、循环重复步骤（4）、（5）、（6）、（7），使肽链从C端向N端生长，直至达到所需要的肽链长度。
步骤（9）、通过加入相应的溶剂反应脱去保护基并水解肽链和固相载体之间的酯键，并进行清洗，得到了合成好的氨基酸多肽产品。
本发明在多肽合成加料过程中，采用蠕动泵进行加料，通过蠕动泵高精度控制加料量，大大减少了反应因加料不精确所导致的反应不充分，副反应增多所导致的杂质过多及分离提纯困难，提高了合成产品质量。本发明在合成多肽的反应过程中，通过微波设备通入微波，提高反应瓶内试剂的温度，提高反应速度，在反应器内布置多个反应瓶同时进行合成反应，采用转盘带动多个反应瓶绕微波发生器旋转，达到均衡温度下进行合成反应，采用红外温度传感器进行检测反应环境温度，根据实测反应环境温度对微波进行调整以控制温度在合理反应内；通过微波加热提高反应环境温度以及在反应器中布置多个反应瓶实现了反应高效及批量化生产，大大提升了合成的效率，此合成方法是普通多肽合成设备的10倍以上，并且微波环境下能合成部分难合成的多肽链。

Claims (2)

1.一种高效自动化的多肽合成方法，其特征在于，按如下步骤进行合成反应：
步骤（1）、使用树脂作为不溶性的固相载体，将其投入合成仪反应器中，并启动合成仪；
步骤（2）、将一个氨基被封闭基团保护的氨基酸溶剂通过合成仪自动加入到反应器中，使得一个氨基被封闭基团保护的氨基酸共价连接在固相载体上；通过加入相应的溶剂反应脱掉氨基的保护基，将第一个氨基酸接到了固相载体上；
步骤（3）、在步骤（2）反应完成后，通过合成仪中蠕动泵注入相应序列氨基酸溶液，并吹入氮气鼓泡混合，合成过程中采用微波加热，提高合成速度；固相载体上的氨基酸中的氨基被封闭的第二个氨基酸的羧基通过活化反应被活化，羧基被活化的第二个氨基酸再与已接在固相载体的第一个氨基酸的氨基反应形成肽键，使得固相载体上生成一个带有保护基的氨基酸肽链；
步骤（4）、通过合成仪废液排放系统将步骤（3）完成后的废液排出；
步骤（5）、通过合成仪的清洗管路对步骤（4）反应后的合成半成品加入溶剂进行清洗，清洗后将废液排出；
步骤（6）、将步骤（5）完成后的反应器中通过合成仪加入相关溶剂脱掉多肽合成物上氨基的保护基，然后进行废液排放，废液排放完成后加入溶剂进行清洗操作；
步骤（7）、将步骤（6）完成后的反应器中通过加料系统加入对应序列的合成氨基酸，控制加入量及合成温度，完成合成反应后，将废液排出；
步骤（8）、循环重复步骤（4）、（5）、（6）、（7），使肽链从C端向N端生长，直至达到所需要长度的肽链；
步骤（9）、通过加入相应的溶剂反应脱去保护基并水解肽链和固相载体之间的酯键，并进行清洗，得到了合成好的氨基酸多肽产品。
2.根据权利要求1所述的一种高效自动化的多肽合成方法，其特征在于：在多肽合成加料过程中，采用蠕动泵进行加料，通过蠕动泵高精度控制加料量，大大减少了反应因加料不精确所导致的反应不充分，副反应增多所导致的杂质过多及分离提纯困难；在合成多肽的反应过程中，通过微波设备通入微波，提高反应瓶内试剂的温度，在反应器内布置多个反应瓶同时进行合成反应，采用转盘带动多个反应瓶绕微波发生器旋转，达到均衡温度下进行合成反应，采用红外温度传感器进行检测反应环境温度，根据实测反应环境温度对微波进行调整以控制温度在合理反应内。
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Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106986916A (zh) * 2017-03-20 2017-07-28 珠海百世瑞生命科技有限公司 全自动高效固相多肽合成仪及使用方法
CN110003306A (zh) * 2019-04-01 2019-07-12 中国科学技术大学 用于多肽的固相合成的设备和方法
WO2020103130A1 (zh) * 2018-11-23 2020-05-28 刘伟 微波流动固相多肽合成方法及其系统

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101538310A (zh) * 2009-01-13 2009-09-23 杭州中肽生化有限公司 微波辅助连续流大规模多肽合成方法与装置
CN105399800A (zh) * 2014-09-11 2016-03-16 天津药物研究院 一种自组装多肽、其制备方法、其核酸复合物及用途
CN105561904A (zh) * 2015-12-15 2016-05-11 滁州市天达生物科技贸易有限公司 一种微波合成仪

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101538310A (zh) * 2009-01-13 2009-09-23 杭州中肽生化有限公司 微波辅助连续流大规模多肽合成方法与装置
CN105399800A (zh) * 2014-09-11 2016-03-16 天津药物研究院 一种自组装多肽、其制备方法、其核酸复合物及用途
CN105561904A (zh) * 2015-12-15 2016-05-11 滁州市天达生物科技贸易有限公司 一种微波合成仪

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106986916A (zh) * 2017-03-20 2017-07-28 珠海百世瑞生命科技有限公司 全自动高效固相多肽合成仪及使用方法
CN106986916B (zh) * 2017-03-20 2023-10-13 珠海百世瑞生命科技有限公司 全自动高效固相多肽合成仪及使用方法
WO2020103130A1 (zh) * 2018-11-23 2020-05-28 刘伟 微波流动固相多肽合成方法及其系统
CN110003306A (zh) * 2019-04-01 2019-07-12 中国科学技术大学 用于多肽的固相合成的设备和方法
CN110003306B (zh) * 2019-04-01 2023-11-28 中国科学技术大学 用于多肽的固相合成的设备和方法

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