CN106282281A - 一种从美洲大蠊中提取小分子肽的方法 - Google Patents

一种从美洲大蠊中提取小分子肽的方法 Download PDF

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Abstract

一种从美洲大蠊中提取小分子肽的方法,其特征在于,包括步骤:(1)原料预粉碎成30‑40目粉末;(2)采用动态微压提取浆液;(3)复合酶梯度酶解:升温灭菌后降温至50℃,加入100U/g的木聚糖酶酶解1‑2小时;再加入150U/g的果胶酶酶解1‑2小时;再加入NaOH溶液调pH至6.0,加入3200U/g的木瓜蛋白酶酶解2‑3小时;(4)膜分离,过滤至清液储罐;(5)双效真空节能浓缩:一效真空度与温度分别控制‑0.06MPa、70‑80℃,二效真空度与温度分别控制在‑0.08MPa、50‑60℃;(6)高速离心喷雾干燥;(7)成品包装。通过实施以上技术方案,具有以下技术效果:成本低,有效成分提取率高,提取物分子量小、极易吸收利用。

Description

一种从美洲大蠊中提取小分子肽的方法
技术领域
本发明属于肽或蛋白质的提取方法,特别涉及一种以干美洲大蠊为原料,利用生物酶解技术,提取美洲大蠊小分子肽的方法。
背景技术
美洲大蠊,俗称蟑螂,是世界上生命力最强、最古老,至今繁衍最成功的昆虫类群之一。美洲大蠊性寒味咸,有毒,有辛辣味、有散瘀、消积、解毒、利水、消肿等功能。现代研究表明其还具有抗癌作用。
美洲大蠊(蟑螂)是传统的中药材,常以干燥或鲜成虫入药,亦有将其制成超微粉末的美洲大蠊精粉出现,用于保健品或药物中。但由于传统习惯,患者难以接受,药效也难以完全发挥。
经研究,美洲大蠊干虫体提取物,含有多元醇类、粘氨酸、粘糖氨酸及多种氨基酸等活性物质。更有,经多年研究发现,美洲大蠊表皮含有巩膜质和甲壳质、溴、锌、镍、猛、钾、钙、钛、氯、硫、硅、铝、镁等元素。肌肉水解13种氨基酸。此外,身体贮藏微生素B1、维生素B2、烟酸和抗坏血酸等,淋巴含海藻糖、海藻糖酶、糖蛋白、肌醇、原儿茶酸葡萄甙等。全体含麦角硫因、龙虾肌碱、胡芦巴碱、甘氨酸、甜菜碱、肛碱、三甲胺、腺嘌呤等。通过提取美洲大蠊小分子肽工艺,既能够避免美洲大蠊全虫对患者的视觉冲击,又能够提高药材的生物利用度,充分发挥其应有的功效。
发明内容
本发明的目的在于提供一种从美洲大蠊中提取小分子肽的方法,以干美洲大蠊为原料,利用复合酶梯度酶解提取小分子肽。充分开发美洲大蠊资源中的具有高附加值的小分子肽,以弥补该领域的研究空白,取得经济效益和社会效益。
为了实现上述目的,本发明提供以下技术方案:一种从美洲大蠊中提取小分子肽的方法,其工艺步骤:
(1)原料预粉碎:干美洲大蠊经木粉粉碎机粉碎成30-40目的粉末;
(2)动态提取浆液:采用动态微压提取罐提取,提取时加入10倍水(以原料重计)升温升压至110℃、0.05MPa,恒温微高压条件下搅拌提取1-2小时,提取结束后提取液排入汤罐,提取后的渣子排出;
(3)复合酶梯度酶解(加酶量以原料计):提取液由汤罐排进水解罐,升温灭菌后降温至50℃,加入100U/g的木聚糖酶酶解1-2小时;再加入150U/g的果胶酶酶解1-2小时;再加入NaOH溶液调pH至6.0,加入3200U/g的木瓜蛋白酶酶解2-3小时。每个酶解过程中每隔0.5小时搅拌5分钟,使酶解均匀充分进行;
(4)膜分离:灭酶灭菌后的酶解液经多功能无机陶瓷膜分离设备超滤,过滤至清液储罐;
(5)双效真空节能浓缩:过滤液经双效真空节能浓缩设备浓缩,一效真空度与温度分别控制-0.06MPa、70-80℃,二效真空度与温度分别控制在-0.08MPa、50-60℃,以波美度为指标,综合控制浓缩温度、真空度及供汽压力;
(6)高速离心喷雾干燥:经过升温至80℃达到灭菌效果的浓缩液,由高速离心喷雾干燥造粒机喷雾干燥;
(7)成品包装:采用密封包装。
本发明具有以下技术效果:利用木聚糖酶、果胶酶、木瓜蛋白酶复合梯度酶解,再经木瓜蛋白酶对蛋白质进行酶解,提取出的小分子肽提取率较高,极易被人体吸收。其操作工艺步骤简便、各环节易于控制,加工成本低。
附图说明
图1是本发明一种从美洲大蠊中提取小分子肽的方法的工艺示意图
具体实施方式
为了更好的理解本发明的技术方案,下面详细描述本发明提供的实施例。
本发明实施例提供了一种从美洲大蠊中提取小分子肽的方法,包括以下步骤:
(1)原料预粉碎:干美洲大蠊经木粉粉碎机粉碎成30-40目的粉末;
(2)动态提取:采用动态微压提取罐提取,此设备主要用于对微小颗粒物质以水为介质在搅拌状态下进行微高压提取,设有搅拌装置更利于物料有效成分较充分溶出,同时又可避免高温高压对物质结构破坏而造成有效成分流失。提取时加入10倍水(以原料重计)、升温升压至110℃、0.05MPa,恒温微高压搅拌提取1小时,提取后提取液排入汤罐,提取渣子排出;
(3)复合酶梯度酶解(加酶量以原料计):提取液由汤罐排进水解罐,升温灭菌后降温至50℃,加入100U/g的木聚糖酶酶解1.5小时;再加入150U/g的果胶酶酶解1.5小时;再加入NaOH溶液调pH至6.0,加入3200U/g的木瓜蛋白酶酶解3小时。每个酶解过程中每隔0.5小时搅拌5分钟,使酶解均匀充分进行。通过实验最终确定酶解最优工艺:在55℃条件下,首先加入100U/g的木聚糖酶酶解1.5小时;再加入150U/g的果胶酶酶解1.5小时;再加入NaOH溶液调pH至6.0,加入3200U/g的木瓜蛋白酶酶解3小时。经测定水解度为:21.8%,出成率为:24.63%
(4)膜分离:灭酶灭菌后的酶解液经多功能无机陶瓷膜分离设备进行超滤,过滤至清液储罐。过滤过程中无需额外助剂,具有物料无变相、常(低)温低压操作、能耗小等特点,且物料分离精度高、透过液澄清透明,非常适宜于分离对热敏性、高纯度等要求高的物质;
(5)双效真空节能浓缩:过滤液经双效真空节能浓缩设备进行浓缩。设定一效真空度与温度分别控制-0.06MPa、80℃,二效真空度与温度分别控制在-0.08MPa、60℃,以波美度为指标,综合控制浓缩温度、真空度及供汽压力;
(6)干燥:经过升温至80℃达到灭菌效果的浓缩液,由高速离心喷雾干燥造粒机喷粉干燥,水分含量降至5%左右,送入集粉器;
(7)成品包装:采用密封包装。经测定,成品中主要含有:小分子肽、多种氨基酸等。

Claims (1)

1.一种从美洲大蠊中提取小分子肽的方法,其特征在于,包括以下工艺步骤:
(1)原料预粉碎:干美洲大蠊经木粉粉碎机粉碎成30-40目粉末;
(2)动态提取浆液:采用动态微压提取罐提取,加入10倍水、升温升压至110℃、0.05MPa,恒温微高压条件下搅拌提取1-2小时;
(3)复合酶梯度酶解:升温灭菌后降温至50℃,加入100U/g的木聚糖酶酶解1-2小时;再加入150U/g的果胶酶酶解1-2小时;再加入NaOH溶液调pH至6.0,加入3200U/g的木瓜蛋白酶酶解2-3小时,每个酶解过程中每隔0.5小时搅拌5分钟,使酶解均匀充分进行;
(4)膜分离:灭酶灭菌后的酶解液经无机陶瓷膜分离设备超滤,过滤至清液储罐;
(5)双效真空节能浓缩:过滤液经双效真空节能浓缩设备浓缩,一效真空度与温度分别控制-0.06MPa、70-80℃,二效真空度与温度分别控制在-0.08MPa、50-60℃,以波美度为指标,综合控制浓缩温度、真空度及供气压力;
(6)高速离心喷雾干燥:经过升温至80℃达到灭菌效果的浓缩液,由高速离心喷雾干燥造粒机喷粉干燥;
(7)成品包装。
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