CN106259938B - 含有核苷酸和opo结构脂的母乳化0-12月婴儿配方奶粉及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种含有核苷酸和OPO结构脂的母乳化0‑12月婴儿配方奶粉及其制备方法，所述奶粉中的总蛋白含量为10.5～18g/100g，乳清蛋白占总蛋白的比例为48～61％，α‑乳清蛋白含量为1.25～1.8g/100g，β‑酪蛋白含量为2.2～3.7g/100g，脂肪含量为20～29g/100g，亚油酸含量为2600～4500mg/100g，α‑亚麻酸含量为330～450mg/100g，1,3‑二油酸‑2‑棕榈酸甘油三酯含量为3～5g/100g，碳水化合物含量为52～56g/100g，总核苷酸含量以核苷酸分子总量计为26～58mg/100g。该奶粉更接近母乳，可提升婴儿免疫力。

Description

含有核苷酸和OPO结构脂的母乳化0-12月婴儿配方奶粉及其 制备方法

技术领域

本发明涉及一种婴儿配方食品，具体而言，涉及一种含有核苷酸和结构油脂(OPO)的母乳化0-12月婴儿配方奶粉及其制备方法。

背景技术

目前，母乳化仍然是婴儿(infant，指0～12月龄的人)配方奶粉的研发趋势。婴儿配方奶粉母乳化设计的精髓在于使得配方奶粉在喂养效果上与母乳接近。然而，目前国内外的市售婴儿奶粉都仅是理化指标上符合国家标准，即，是在宏观量上有可能接近母乳，但是在微观结构上，如蛋白质的二级结构、脂肪结构及脂肪酸、免疫因子等方面，还与母乳存在较大的差别。

就蛋白质结构而言，目前市场上的国产婴儿系列奶粉都是按照《GB 10765-2010婴儿配方食品》和《GB 10767-2010较大婴儿和幼儿配方食品》的要求将总蛋白质控制在12～18％范围内，将乳清蛋白和酪蛋白比例调整为60：40，虽然在宏观量一定程度上模拟了母乳蛋白质组成，然而，众所周知，牛奶中蛋白质分为乳清蛋白、酪蛋白和乳铁蛋白等，其中酪蛋白分为：α_S1-酪蛋白、α_S2-酪蛋白、β-酪蛋白、κ-酪蛋白，乳清蛋白分为：α-乳清蛋白(α-乳白蛋白)、β-乳球蛋白、血清白蛋白等，目前的大多婴儿系列奶粉在蛋白质的这些更细分组成结构上与母乳相差较远，只有在真正的蛋白组成结构上接近母乳才能说产品是真正的蛋白质组成结构母乳化。此外，由于婴儿配方奶粉，特别是0-6个月婴儿配方奶粉，其蛋白质组成结构与母乳存在差异，蛋白质利用率较母乳低，所以往往需要在配方中提高蛋白质的比例才能达到婴儿的蛋白质需要量，然而，由于提高了蛋白质含量而造成婴儿消化系统的负担，容易导致婴儿便秘和其他胃肠道消化问题。

就脂肪结构而言，牛乳脂肪结构与母乳具有较大差异。近年来一些婴儿配方奶粉中开始添加OPO结构脂以使配方粉更接近母乳水平。OPO结构脂，又称结构脂OPO，化学名称：1，3-二油酸2-棕榈酸甘油三酯，是一种结构化脂肪，通过酶法脂交换技术模拟母乳脂质分子结构，使2位棕榈酸比例高达40％以上。相关研究表明，特有的二位棕榈酸结构，消化时不易形成钙皂，从而不易引起婴儿便秘，更易于脂肪酸和钙的消化吸收。据报道，临床试验证明婴幼儿每天吃22克OPO结构脂，24小时明显缓解婴儿便秘的现状。目前关于婴儿配方乳粉中OPO结构脂添加量没有统一的标准。

另外，有许多实验已经证明了核苷酸在生物体中的重要作用。核苷酸，是母乳非蛋白氮的一种，对出生婴儿的生长发育极其重要，它能够促进生长，提高免疫功能，改善代谢等。2008年，我国已允许核苷酸添加到婴儿奶粉中，但没有规定五种核苷酸分量的添加量。US 4,994,442中指出将各种核苷酸添加入婴儿配方食品中可以增强T细胞免疫应答，其中各种核苷酸组分(CMP、AMP、UMP、GMP和IMP)是以等量添加至配方食品中。EP 1549158中公开了一种婴儿奶粉组合物，其包含3.2-15.4mg/L的CMP、1.8-11.0mg/L的UMP、1.8-8.0mg/L的GMP、0.1-2.2mg/L的IMP和2.5-13.2mg/L的AMP，其意图给早产婴儿使用，但没有公开任何可能实现的效果。此外，CN1212068C、CN102283289B、CN102038041B、CN101233874B、CN101218940B、CN104222313A、CN104222314A、CN101731351A等均公开了将各种核苷酸按照特定的配比添加到婴幼儿奶粉中。这些现有技术报道的添加的各种核苷酸的配比不尽相同。

发明内容

本发明的一个目的在于提供一种含有核苷酸的母乳化0-12月婴儿配方奶粉，该婴儿配方奶粉的组分特别是乳蛋白、脂肪、核苷酸组成和比例等更接近母乳，喂养效果也更接近母乳，更适用于亚洲婴儿特别是中国人(华人)婴儿，可以提升婴儿的免疫力。

本发明的另一目的在于提供一种制备所述含有核苷酸的母乳化0-12月婴儿配方奶粉的方法。

一方面，本发明提供了一种含有核苷酸和OPO结构脂的母乳化0-12月婴儿配方奶粉，该奶粉中的总蛋白含量为10.5～18g/100g，乳清蛋白占总蛋白的比例为48～61％，α-乳清蛋白含量为1.25～1.80g/100g，β-酪蛋白含量为2.2～3.7g/100g，脂肪含量为20～29g/100g，亚油酸含量为2600～4500mg/100g，α-亚麻酸含量为330～450mg/100g，1,3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯含量为3～5g/100g，碳水化合物含量为52～56g/100g，总核苷酸含量以核苷酸分子总量计为26～58mg/100g；其中：

提供乳蛋白的原料包括基础原料牛奶、全脂奶粉、脱脂奶粉中的一种或多种，还包括：为强化乳清蛋白而添加的原料乳清蛋白粉、脱盐乳清粉中的一种或多种，为强化α-乳清蛋白而添加的原料α-乳清蛋白粉，以及为强化β-酪蛋白而添加的原料β-酪蛋白粉；

提供脂肪的原料除含有乳脂的基础原料外，还包括植物油和为提供1,3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯而添加的原料OPO结构脂；

提供核苷酸的原料包括为强化核苷酸而添加的原料复配核苷酸。

本案发明人通过采集全国重点地区母初乳及母成熟乳、收集添加核苷酸国内外品牌婴儿配方粉、收集牛初乳及成熟乳样本，并进行大量研究分析，着重对配方奶粉进行了微观结构的调整，分别对蛋白、脂肪、核苷酸等方面进行母乳化设计，且选择特定的原料复配制备婴儿配方奶粉，使得配方奶粉在细分组成及喂养效果上与母乳更接近。本发明的婴儿配方奶粉是以亚洲人，特别是中国汉族人母乳蛋白、脂肪、核苷酸组成和比例为依据而研制的，因此更适合于中国人(华人)宝宝。

根据本发明的具体实施方案，本发明的含有核苷酸和OPO结构脂的母乳化婴儿配方奶粉中，蛋白、脂肪指标可根据婴儿发育阶段做更进一步细分。具体而言，针对0-6个月婴儿：该奶粉中的总蛋白含量为10.5～15g/100g，乳清蛋白占总蛋白的比例为60～61％，α-乳清蛋白含量为1.25～1.8g/100g，β-酪蛋白含量为2.2～3.7g/100g，脂肪含量为23～29g/100g，亚油酸含量为2600～4500mg/100g，α-亚麻酸含量为330～450mg/100g，1,3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯含量为3～5g/100g，碳水化合物含量为52～56g/100g，总核苷酸含量以核苷酸分子总量计为26～58mg/100g。针对6-12个月婴儿：该奶粉中总蛋白含量为14～18g/100g，乳清蛋白占总蛋白的比例为48～61％，α-乳清蛋白含量为1.25～1.8g/100g，β-酪蛋白含量为2.2～3.7g/100g，脂肪含量为20～29g/100g，亚油酸含量为2600～4500mg/100g，α-亚麻酸含量为330～450mg/100g，1,3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯含量为3～5g/100g，碳水化合物含量为52～56g/100g，总核苷酸含量以核苷酸分子总量计为26～58mg/100g。

本发明的含有核苷酸和OPO结构脂的母乳化0-12月婴儿配方奶粉中，总蛋白含量为10.5～18g/100g，在酪蛋白与乳清蛋白比例为60：40的基础上，强化了α-乳清蛋白和β-酪蛋白，使产品中α-乳清蛋白含量达1.25～1.8g/100g，β-酪蛋白含量达2.2～3.7g/100g，按照产品的冲调比例(通常13～15g奶粉加水冲调至100毫升奶液)折合为奶液中α-乳清蛋白和β-酪蛋白的含量达到了母乳水平。因此，本发明通过对产品蛋白质的结构调整使婴儿奶粉达到了真正意义上的蛋白母乳化。

根据本发明的具体实施方案，本发明的含有核苷酸和OPO结构脂的母乳化0-12月婴儿配方奶粉中，提供乳蛋白的原料包括基础原料牛奶、全脂奶粉、脱脂奶粉中的一种或多种；优选地，基于1000重量份的所述含有核苷酸和OPO结构脂的母乳化0-12月婴儿配方奶粉，其原料包括：全脂奶粉85～175重量份，脱脂奶粉0～275重量份；所述全脂奶粉、脱脂奶粉可部分或全部用相当量的全脂牛奶、脱脂牛奶替代。进一步，为满足本发明的婴儿配方奶粉产品中对乳清蛋白、α-乳清蛋白及β-酪蛋白的含量指标要求，本发明的婴儿配方奶粉的原料还包括：为强化乳清蛋白而添加的乳清蛋白粉(例如乳清蛋白粉WPC 80％、乳清蛋白粉WPC 34％)、脱盐乳清粉(例如脱盐乳清粉D70、D90等)中的一种或多种，优选包括脱盐乳清粉，选择性添加乳清蛋白粉WPC 80％和/或乳清蛋白粉WPC 34％；且为强化产品中的α-乳清蛋白更进一步添加有原料α-乳清蛋白粉，以及为强化产品中的β-酪蛋白更进一步添加有原料β-酪蛋白粉；优选地，基于1000重量份的所述含有核苷酸和OPO结构脂的母乳化0-12月婴儿配方奶粉，其原料包括：脱盐乳清粉125～225重量份，乳清蛋白粉0～170重量份(优选包括乳清蛋白粉WPC 80％0～75重量份)，α-乳清蛋白粉4～30重量份，β-酪蛋白粉0.5～10重量份。

在本发明的一具体实施方案中，本发明的含有核苷酸和OPO结构脂的母乳化0-12月婴儿配方奶粉，基于1000重量份的所述含有核苷酸和OPO结构脂的母乳化0-12月婴儿配方奶粉，其原料包括：全脂奶粉85～175重量份；脱脂奶粉0～275重量份；乳清蛋白粉WPC80％ 0～75重量份；脱盐乳清粉D90 125～225重量份；乳清蛋白粉WPC 34％ 0～20重量份；α-乳清蛋白粉4～30重量份；β-酪蛋白粉0.5～10重量份。优选地，基于1000重量份的所述含有核苷酸和OPO结构脂的母乳化婴儿配方奶粉，其原料包括：全脂奶粉135～165重量份；脱脂奶粉15～30重量份；乳清蛋白粉WPC 80％ 20～25重量份；脱盐乳清粉D90 160～185重量份；乳清蛋白粉WPC 34％ 0～20重量份；α-乳清蛋白粉9～30重量份；β-酪蛋白粉1～9重量份。其中的全脂奶粉、脱脂奶粉可部分或全部用相当量的全脂牛奶、脱脂牛奶替代。

本发明的含有核苷酸和OPO结构脂的母乳化0-12月婴儿配方奶粉中，采用复配核苷酸来提供产品核苷酸。实际上，牛乳中也含有一定的核苷酸，但相对于本发明额外添加的核苷酸的量而言，牛乳中核苷酸的含量非常少，且在普通牛乳加工成乳粉过程中大部分会被损耗，因此本发明所用全脂奶粉、脱脂奶粉等含乳成分原料中的基底核苷酸几乎可以忽略不计。在食品添加领域，所采用的核苷酸主要有CMP(胞嘧啶核苷酸)、UMP(尿嘧啶核苷酸)、AMP(腺嘌呤核苷酸)、GMP(鸟嘌呤核苷酸)、IMP(次黄嘌呤核苷酸)等。目前市场上出售的5'-混合核苷酸含有5'-腺苷酸(AMP)、5'-胞苷酸(CMP)、5'-鸟苷酸(GMP)、5'-尿苷酸(UMP)和5'-肌苷酸(IMP)。通常，在组合使用的时候，这种5'-混合核苷酸可以例如以两种类型存在：一种是5'-腺苷酸和5'-胞苷酸是以游离酸的形式存在，而其他3种核苷酸以钠盐形式存在，简称两酸三钠型；另一种则均以钠盐的形式存在，简称五钠型。因此，本文所用的术语“核苷酸”还涵盖其盐的形式，例如碱金属盐或碱土金属盐，如钠盐、钾盐或钙盐等，例如一钠盐或二钠盐等，如CMPNa₂、AMPNa₂、UMPNa₂、GMPNa₂、IMPNa₂和CMPK₂、AMPK₂、UMPK₂、GMPK、IMPK₂等。本发明的复配核苷酸中的各个核苷酸组分可以各自任选地且各自独立地以各种盐形式存在，包括但不限于上文提及的“两酸三钠型”；或者各个组分及其盐可以以任意组合的形式存在，例如仅GMP以盐形式存在，仅CMP以盐形式存在等。可选地，本发明的复配核苷酸中的各个核苷酸组分可以均以盐的形式存在，包括但不限于上文提及的“五钠型”。同样，本文所用的术语“核苷酸”还涵盖其各种形式的溶剂合物(如水合物)。因此，当本发明的组合物包含核苷酸组分的诸如上文所列的其他形式时，这些形式在组合物中的配比应当换算成其对应的核苷酸分子后计算。例如，当CMP以其二钠盐形式(CMPNa₂)存在时，应当换算成CMP来计算相应的重量比。

本发明的含有核苷酸和OPO结构脂的母乳化0-12月婴儿配方奶粉中，所述复配核苷酸的量是指原料量，其中核苷酸有效含量以核苷酸分子总量(即CMP、AMP、UMP、GMP和IMP分子总量)计，即如果复配核苷酸中含有各核苷酸的水合物或盐类，应折算成其对应的核苷酸分子后计算，为599～750mg/g。

根据本发明的一优选具体实施方案，本发明的含有核苷酸和OPO结构脂的母乳化0-12月婴儿配方奶粉中，所述复配核苷酸中，各核苷酸有效含量以CMP、AMP、UMP、GMP、IMP分子计分别为：

胞苷酸(CMP)：365～430mg

尿苷酸(UMP)：94～120mg

鸟苷酸(GMP)：70～90mg

腺苷酸(AMP)：70～90mg

肌苷酸(IMP)：0，或者大于0且不高于20mg。

根据本发明的一优选具体实施方案，本发明的含有核苷酸和OPO结构脂的母乳化0-12月婴儿配方奶粉中，所述复配核苷酸中，以各核苷酸折算成CMP、AMP、UMP、GMP、IMP分子计的总量为100％，各核苷酸有效百分含量以CMP、AMP、UMP、GMP、IMP分子计分别为：CMP 58～70％、AMP 7.5～12.5％、UMP 12～16.5％、GMP 10～13％、IMP为0或者大于且不高于2.5％；优选为：CMP 59～65％、AMP 8～12.5％、UMP 14～16.5％、GMP 11～12.5％、IMP为0或者大于0且不高于2％；更优选为CMP 59～60％、AMP 12～12.5％、UMP 16～16.5％、GMP12～12.5％、IMP 0。最优选的，本发明的复配核苷酸添加到所述的0-12月婴儿配方粉中，使配方粉中核苷酸比例为(以奶粉中各核苷酸折算成CMP、AMP、UMP、GMP、IMP分子计的总量为100％计)：CMP：60％、AMP：12％、UMP：16％和GMP：12％。

本发明的复配核苷酸添加到所述的0-12月婴儿配方粉中，可使配方粉中核苷酸组成和比例上更接近中国人(华人)母乳，有助于婴幼儿免疫力的提高。

本发明的含有核苷酸和OPO结构脂的母乳化0-12月婴儿配方奶粉中，提供脂肪的原料除含有乳脂的基础原料(如前述的全脂奶粉、脱脂奶粉、牛奶)外，还包括植物油，所述植物油可以包括葵花籽油、玉米油、大豆油、低芥酸菜籽油、椰子油、棕榈油、核桃油中的一种或多种，优选包括葵花籽油、玉米油和大豆油，这些植物油的添加一方面为产品提供脂肪成分，另一方面提供亚油酸和α-亚麻酸。此外，提供脂肪的原料还包括为提供1,3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯而添加的原料OPO结构脂。由于目前市场上所售OPO结构脂原料纯度不一，即其中有效成分1,3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯的含量不尽相同，通常在40％～70％左右，本发明中，为区分有效成分1,3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯及其原料，在描述有效成分时采用术语“1,3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯”，在描述提供有效成分1,3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯的食品原料时采用俗称“OPO结构脂”。OPO结构脂的具体添加量可根据本发明奶粉产品中对1,3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯的含量要求及OPO结构脂原料纯度进行换算。更优选地，基于1000重量份的所述含有核苷酸和OPO结构脂的母乳化婴儿配方奶粉，其原料包括：葵花籽油20～38重量份；玉米油15～25重量份；大豆油50～70重量份；OPO结构脂40～120重量份。优选地，本发明中所用原料葵花籽油、玉米油、大豆油、OPO结构脂中的亚油酸和α-亚麻酸的含量分别为7.6～8.9％、0.25～0.38％，53.0～56.20％、0.9～1.6％，50.0～53.5％、7.6～9.6％，5.9～6.3％、0.4～0.62％，所用的低芥酸菜籽油亚油酸和α-亚麻酸的含量分别为16～19％、8.0～10.6％，椰子油亚油酸和α-亚麻酸的含量分别为1～3％、0～1％。OPO结构脂原料中1,3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯的有效含量为40％～70％。在人类母乳和大多数的婴儿配方中，提供给新生婴儿的约50％膳食能量以脂肪形式供应的，而98％的这种乳脂是以甘油三酸酯形式存在，其中多数是酯化成为甘油的饱和与不饱和脂肪酸。婴儿配方粉中脂肪含量和比例的设计是非常重要的，本发明在设计的过程中使用了优质的精炼植物油和结构油脂(OPO)来调整产品中脂肪组成，能够有效的提高产品中不饱和脂肪酸的含量，是产品更接近母乳脂肪结构，更易消化。

根据本发明的具体实施方案，本发明的含有核苷酸和OPO结构脂的母乳化0-12月婴儿配方奶粉，碳水化合物一部分来自含有乳糖的基础原料如牛奶、全脂奶粉和/或脱脂奶粉等，此外应额外添加乳糖原料来提供碳水化合物。即，本发明的婴儿配方奶粉中，提供碳水化合物的原料除含有乳糖的基础原料外，还包括原料乳糖。优选地，基于1000重量份的所述含有核苷酸和OPO结构脂的母乳化婴儿配方奶粉，其原料包括：乳糖125～325重量份。可在所述范围内调整乳糖的具体添加量以使本发明的含有核苷酸和OPO结构脂的母乳化0-12月婴儿配方奶粉碳水化合物含量为52～56g/100g。

根据本发明的具体实施方案，本发明的含有核苷酸和OPO结构脂的母乳化0-12月婴儿配方奶粉，其原料中还包括适当的低聚果糖、低聚半乳糖、DHA、ARA、双歧杆菌，还包括包含钙粉、维生素和矿物质的复配营养素，此外还包括在奶粉制备工艺中喷雾干燥时所用的载体无水奶油和磷脂。优选地，基于1000重量份的所述含有核苷酸和OPO结构脂的母乳化婴儿配方奶粉，其原料包括：低聚果糖粉4～18重量份；低聚半乳糖浆12～42重量份；DHA 4～9重量份；ARA 5～9重量份；双歧杆菌0.1～0.2重量份；包含钙粉、维生素和矿物质的复配营养素8～16重量份；磷脂1～2.5重量份；无水奶油0.5～1.5重量份。

本发明的含有核苷酸和OPO结构脂的母乳化0-12月婴儿配方奶粉中，采用原料低聚半乳糖和低聚果糖来提供产品膳食纤维。目前市场上的婴儿配方奶粉中多是单一使用了低聚半乳糖或者低聚果糖。而本案发明人经过分析研究后发现低聚半乳糖有比较好的功能性和加工性能，但在口感上不如低聚果糖，低聚果糖在酸性和高温环境下会被缓慢分解，影响最终产品中含量和有效吸收量，但成本低廉。本案发明人经过各方便的摸索分析，考虑其在肠道内对益生菌的促进作用以及加工性能影响等，最终于本发明中选用了低聚半乳糖(FOS)及低聚果糖(GOS)按照特定比例的组合。

本发明的含有核苷酸和OPO结构脂的母乳化0-12月婴儿配方奶粉中，所用原料双歧杆菌是用来提供产品益生菌的。根据本发明的具体实施方案，本发明的含有核苷酸和OPO结构脂的母乳化婴儿配方奶粉中，双歧杆菌的添加量为2×10⁸cfu/g(为满足该要求，通常，基于1000重量份的所述含有核苷酸和OPO结构脂的母乳化婴儿配方奶粉，其原料包括双歧杆菌0.1～0.2重量份)。经过试验验证，该添加量的双歧杆菌，在经过本发明的奶粉加工工艺后，产品货架期内活菌数能够保证在2×10⁶cfu/g以上。

本发明的含有核苷酸和OPO结构脂的母乳化0-12月婴儿配方奶粉中，还含有特定量的钙粉、维生素和矿物质。母乳中的维生素和矿物质是保证婴儿健康的重要保证，合理的维生素添加量能够在满足婴儿营养需要的情况下提供给婴儿更多的免疫力，如果矿物质含量过低会造成婴儿骨骼和身体发育延缓，但是如果矿物质摄入过高会造成婴儿肾脏负担的加重。同时通过对奶粉中钙磷比的调整使产品中的钙更加容易吸收。本发明所述的复配营养素为符合国家标准的营养成分的组合，按照不同配方使用不同添加量。本发明的配方奶粉根据需要若添加营养素可选择性采用下述复配营养素成分中的任一或任意组合。优选地，所述复配营养素至少包括复配维生素、钙粉、矿物质、氯化镁和氯化钾等营养包，各组分用量为：

1)复配维生素，每克复配维生素中：

维生素A：1700～2500μgRE

维生素D：30～44μg

维生素B1：2600～4200μg

维生素B2：600～1400μg

维生素B6：1400～2350μg

维生素B12：3.5～12.0μg

维生素K1：280～430μg

维生素C：330～520mg

维生素E：27～39.1mgα-TE

烟酰胺：16000～24550μg

叶酸：330～543μg

生物素：52～98μg

泛酸：6110～15230μg

2)钙粉，每克钙粉中：

钙：160～250mg

磷：75～100mg

3)矿物质，每克矿物质中：

铁：40～85mg

锌：23～49mg

铜：2600～4140μg

碘：500～992μg

硒：102～185μg

锰：0～579μg

4)氯化镁，每1000千克奶粉中：

镁：80～170g

5)氯化钾，每1000千克奶粉中：

钾：950～1050g。

此外，所述复配营养素中还可选择性包括氯化胆碱(每1000千克奶粉中含胆碱300～750g)，所述复配维生素中还可选择性包括牛磺酸(150～220mg/g)。复配营养素的基料优选为乳糖。优选地，基于1000重量份的所述含有核苷酸和OPO结构脂的母乳化婴儿配方奶粉，复配营养素的添加量为8～16重量份，其中，复配维生素营养包优选为2～3重量份，钙粉营养包优选为2～8重量份，矿物质营养包优选为0.5～6重量份，各营养包的基料优选为乳糖。上述复配营养素的各组分含量，是指为强化所述营养素物质的添加量，不包括奶粉其他原料中的营养素组分含量，例如，氯化镁，每1000千克奶粉中“镁：80～170g”是指为强化产品中的镁元素，基于1000千克重量的奶粉，添加氯化镁以其中镁元素重量计为80～170g。

本发明的含有核苷酸的母乳化0-12月婴儿配方奶粉中，所用原料磷脂和无水奶油主要是用于喷雾干燥过程中粉颗粒的成型，所述磷脂可以是大豆磷脂和/或卵磷脂。磷脂和无水奶油的用量较少，但对于奶粉产品中脂肪含量也具有一定贡献。

根据本发明的一优选的具体实施方案，本发明的含有核苷酸和OPO结构脂的母乳化婴儿配方奶粉，其原料包括：

复配核苷酸0.45～0.65重量份，且其中核苷酸有效量以CMP、AMP、UMP、GMP、和IMP分子总量计不超过0.58重量份，其中IMP为0～2％；

根据本发明的一更优选的具体实施方案，本发明的含有核苷酸和OPO结构脂的母乳化婴儿配方奶粉，其原料包括：

OPO结构脂 90～120重量份；

α-乳清蛋白粉 9～30重量份；

β-酪蛋白粉 1～9重量份；

复配核苷酸0.45～0.65重量份，且其中核苷酸有效量以CMP、AMP、UMP、GMP、和IMP分子总量计不超过0.58重量份；

包含钙粉、维生素和矿物质的复配营养素8～16重量份；

DHA 7～9重量份；

ARA 7～9重量份；

双歧杆菌 0.1～0.2重量份。

可以理解，本发明的含有核苷酸和OPO结构脂的母乳化0-12月婴儿配方奶粉中，各原料的具体用量应在满足对配方奶粉产品指标要求的前提下进行调整而确定。本发明的含有核苷酸和OPO结构脂的母乳化0-12月婴儿配方奶粉中，未详细说明或列出的产品性能指标均应按照《GB 10765-2010婴儿配方食品》和《GB 10767-2010较大婴儿和幼儿配方食品》及相关标准和法规的规定执行。

本发明的含有核苷酸和OPO结构脂的母乳化0-12月婴儿配方奶粉中，各原料均可商购获得，各原料的选用应符合相关标准要求，其中所述复配核苷酸同时应满足本发明所述要求。此外，所述复配核苷酸、复配营养素也可自行复配。本发明中仅是为方便表述而采用“复配”，并不意味着复配物中各组分必须先混合在一起再应用。各原料均应在满足相关法规前提下添加使用。

另一方面，本发明还提供了一种制备所述的含有核苷酸和OPO结构脂的母乳化0-12月婴儿配方奶粉的方法，其制备的工艺流程主要包括：配料、均质、浓缩杀菌、喷雾干燥、干混得到成品。具体而言，本发明的制备所述的含有核苷酸和OPO结构脂的母乳化0-12月婴儿配方奶粉的方法包括：

配料：将配方奶粉原料中除喷雾载体(磷脂及无水奶油)及后混料(如DHA、ARA、双歧杆菌等)外的其他原料进行混合，得混合料液；

均质：混合料液进行均质；

浓缩杀菌：均质后的料液进行浓缩杀菌，浓缩杀菌条件为：双效浓缩，杀菌温度≥83℃，杀菌时间15～30秒，并控制出料浓度为48％～52％干物质；

喷雾干燥：浓奶液经预热器预热到60～70℃，预热后物料经0.8～1.2mm孔径的过滤器过滤后，打入干燥塔喷雾干燥，控制喷雾干燥条件为：进风温度165～180℃，排风温度75-90℃，高压泵压力160～210bar，塔负压-4～-2mbar；

流化床干燥冷却：从干燥塔出来的粉再经一级流化床二次干燥后，经二级流化床冷却到25～30℃，同时在压缩空气作用下，将加热至60～65℃的磷脂(卵磷脂和/或大豆磷脂)与载体(无水奶油)的混合物均匀分散到粉表面，得到粉颗粒；

后混料：将DHA、ARA、双歧杆菌与流化床干燥冷却后的粉颗粒干混混均，包装，得奶粉成品。

根据本发明的具体实施方案，本发明的含有核苷酸和OPO结构脂的母乳化0-12月婴儿配方奶粉的制备方法中，营养素添加顺序及搅拌溶解时间也是非常重要的，优选地，配料时，钙粉、维生素和核苷酸、矿物质是依序添加到混好的其他粉料和油料混合物中，且添加钙粉后搅拌溶解15～25分钟，添加维生素和核苷酸后搅拌溶解15～20分钟，添加矿物质后搅拌溶解15～20分钟。发明人在研究中发现，先添加钙粉，钙可以与牛奶蛋白中的酪蛋白结合形成胶体钙，因此可以避免或减弱钙的沉淀，然而这一结合过程需要足够的时间。同时如果钙与矿物质同时添加，钙粉可以吸附部分矿物质如铁，促使其由二价铁变为三价铁，三价铁为红色，因此易造成黄至红色的沉淀。其次加入维生素和复配核苷酸，目的是维生素中含有易被金属离子氧化的成分如VC，如果先加入矿物质，会由于局部的维生素浓度过高而造成维生素的损失。并且VC如果局部浓度过高，会加速二价铁的氧化。最后加入矿物质是因为矿物质分散在水中比维生素慢，同时在矿物质分散过程中，要在其颗粒表面形成水膜才能使其稳定，并且不会对牛奶蛋白产生破坏，这一过程需要足够的之间。等维生素充分与牛奶混合稀释后加入矿物质，可以减弱矿物质对维生素的损失。

根据本发明的具体实施方案，本发明的含有核苷酸和OPO结构脂的母乳化0-12月婴儿配方奶粉的制备方法中，所述配料过程包括：

粉类添加：各种粉类原料按配方经计量后通过风送系统统一加入到配粉罐中，并通过真空系统吸入真空混料罐中；

溶化配油：按配方要求将配方中规定的油脂放入化油间，化油间的温度保持在50～90℃，待油溶化后，打入混合油贮罐中，并按配方要求将混合油经油泵打入混料罐中；

营养素溶解添加：将钙粉、维生素和核苷酸、矿物质用纯净水分别溶解后，依序添加到混料罐中，得到混合的料液。

在本发明的一具体实施方案中，本发明的含有核苷酸和OPO结构脂的母乳化0-12月婴儿配方奶粉的制备方法按照如下操作进行：

1)粉类添加：各种粉类原料按配方经计量后通过风送系统统一加入到配粉罐中贮存。

2)真空吸粉：配粉罐中的各种粉类原料通过真空系统吸入真空混料罐中。

3)溶化配油：按配方要求将配方中规定的油脂放入化油间，化油间的温度应保持在50～90℃，待油溶化后，按配方比例要求通过油泵和流量计打入混合油贮罐中。

混合油料贮存：混合油在油贮存罐中保温贮存，温度40～50℃，贮存时间小于12小时防止脂肪氧化。

4)称重：按配方要求将混合油经油泵打入混料罐。

5)营养素溶解添加：钙粉、矿物质、维生素及核苷酸等分别添加，用100～200kg纯净水，分别溶解后，打入湿混缸，每打完一种用100kg纯净水冲洗添加罐和管线。

6)过滤：经混合的料液经滤网过滤，去除原料中可能带入的物理杂质。

7)均质：混合后的料液通过均质机进行均质，均质一级压力为105±5bar，均质一级压力为32±3bar，将脂肪球进行机械处理，把它们分散成均匀一致的脂肪球。

8)冷却与贮存：均质后的料液进入板式换热器进行冷却：冷却至20℃以下，暂存在预存缸中，6小时内进入下道工序，搅拌器按设定需求开启。

9)浓缩杀菌：生产时使用双效浓缩，杀菌温度≥83℃，杀菌时间25秒。出料浓度均为48％～52％干物质。

10)浓奶贮存、预热过滤、喷雾干燥：浓缩后的奶暂存在浓奶平衡罐。经刮板预热器预热到60～70℃，预热后物料经1mm孔径的过滤器过滤后，用高压泵打入干燥塔喷雾干燥，细粉按要求在塔顶或流化床附聚。进风温度：165～180℃，排风温度75～90℃，高压泵压力160～210bar，塔负压-4～-2mbar左右。

11)流化床干燥冷却：从干燥塔出来的粉再经流化床(一级)二次干燥后，经流化床(二级)冷却到25～30℃。同时磷脂与载体混合后加热至60～65℃，在压缩空气作用下，均匀分散到粉表面，使粉颗粒附聚增加其颗粒度和速溶性。

12)分装：制粉车间人员按照配方要求，将DHA、ARA或双歧杆菌称量封袋分装。

13)干混：将称量好的DHA、ARA或双歧杆菌与奶粉在干混机内混均。

14)筛粉：通过振动筛，使奶粉的颗粒度均匀，粉渣报废处理。

15)出粉：用经过消毒的集粉箱接粉，并由出粉间运至上粉间。

16)上粉：将奶粉按包装要求倒入大小包装机上的储粉罐中。

17)包装：400克自动包装机充氮包装。充氮时含氧量低于1％。900克铁听自动充氮包装含氧量低于5％。

18)装箱：将已包装的小袋装入纸箱中同时加入粉勺，用封箱机封口。

19)成品检验：对包装完后的产品按检验计划进行抽样检验。

20)入库贮存：经检验合格的产品入库贮存，要求在常温下贮存，湿度≤65％。

综合而言，本发明提供了一种含有核苷酸和OPO结构脂的母乳化0-12月婴儿配方奶粉及其制备方法，本发明的婴儿配方奶粉的乳蛋白、脂肪、核苷酸组成和比例等更接近母乳，喂养效果也更接近母乳，更适用于亚洲婴儿特别是中国人(华人)婴儿，可以提升婴儿的免疫力。

具体实施方式

以下通过具体实施例详细说明本发明的实施过程和产生的有益效果，旨在帮助阅读者更好地理解本发明的实质和特点，不作为对本案可实施范围的限定。下列实施例中未注明具体条件的方法，通常按照所属领域的常规操作进行。

实施例1

含有核苷酸和OPO结构脂的母乳化婴儿配方奶粉(制备1000公斤)：

乳糖300千克，全脂奶粉150千克，乳清蛋白粉WPC80％40千克，脱盐乳清粉D90D90175千克，葵花籽油30千克份，玉米油20千克，大豆油65千克，OPO结构脂110千克，α-乳清蛋白粉27千克，β-酪蛋白粉9千克，复配核苷酸0.6千克，卵磷脂2千克，无水奶油1千克，低聚果糖粉17千克，低聚半乳糖浆40千克，复配营养素14.35千克，DHA 8千克，ARA 8千克，双歧杆菌0.2千克。

其中0.6千克复配核苷酸各核苷酸有效成分如下：CMP：242.1g，AMP：57.92g，UMP：73.85g，GMP：57.92g。复配核苷酸中除各核苷酸的水合物或盐类外，其余为乳糖。

其中复配营养素包括复配维生素营养包约2.5千克、氯化胆碱营养包约0.75千克、钙粉营养包约6千克、矿物质营养包约1千克以及氯化镁和氯化钾营养包，各营养包的基料为乳糖，具体的主要营养素组成如下：1)复配维生素，每克复配维生素中，牛磺酸：180mg；维生素A(醋酸视黄酯)：2300μgRE；维生素D(胆钙化醇)：34μg；维生素B1(硝酸硫胺素)：4000μg；维生素B2(核黄素)：1200μg；维生素B6(盐酸吡哆醇)：2050μg；维生素B12(氰钴胺)：11.2μg；维生素K1(植物甲萘醌)：400μg；维生素C(L-抗坏血酸)：495mg；维生素E(dl-α-醋酸生育酚)：38mgα-TE；烟酰胺：23050μg；叶酸：530μg；生物素(D-生物素)：88μg；泛酸(D-泛酸钙)：15000μg；2)钙粉，每克钙粉中，钙(碳酸钙、磷酸三钙)：230mg；磷(磷酸三钙)：90mg；3)矿物质，每克矿物质中，铁(硫酸亚铁)：80mg；锌(硫酸锌)：45mg；铜(硫酸铜)：4000μg；碘(碘化钾)：980μg；硒(亚硒酸钠)：170μg；锰(硫酸锰)：550μg；4)氯化镁，每1000千克奶粉中，镁(氯化镁)：150g；5)氯化钾，每1000千克奶粉中，钾(氯化钾)：1050g；6)氯化胆碱，每1000千克奶粉中，胆碱(氯化胆碱)：700g。

其中所用原料葵花籽油、玉米油、大豆油和结构油脂(OPO)中的亚油酸和α-亚麻酸的含量分别为8.20％、0.3％，55.50％、1.2％，52.10％、8.8％，6.18％、0.47％。

含核苷酸和OPO结构脂母乳化婴儿配方奶粉具体制备工艺如下：

1)粉类添加：各种粉类原料按配方经计量后通过风送系统统一加入到配粉罐中贮存。

2)真空吸粉：配粉罐中的各种粉类原料通过真空系统吸入真空混料罐中。

3)溶化配油：按配方要求将配方中规定的油脂放入化油间，化油间的温度应保持在60℃，待油溶化后，按配方比例要求通过油泵和流量计打入混合油贮罐中。

4)称重：按配方要求将混合油经油泵打入混料罐中。

5)营养素溶解添加：钙粉、矿物质、维生素及核苷酸等分别添加，用150kg纯净水，分别溶解后，打入混料罐中，每打完一种用100kg纯净水冲洗添加罐和管线。

6)过滤：经混合的料液经滤网过滤，去除原料中可能带入的物理杂质。

7)均质：混合后的料液通过均质机进行均质，将脂肪球进行机械处理，把它们分散成均匀一致的脂肪球。

8)冷却与贮存：均质后的料液进入板式换热器进行冷却：冷却至20℃以下，暂存在预存缸中，6小时内进入下道工序，搅拌器按设定需求开启。

9)浓缩杀菌：生产时使用双效浓缩，杀菌温度≥83℃，杀菌时间25秒。出料浓度均为50％干物质。

10)浓奶贮存、预热过滤、喷雾干燥：浓缩后的奶暂存在浓奶平衡罐。经刮板预热器预热到60℃，预热后物料经1mm孔径的过滤器过滤后，用高压泵打入干燥塔喷雾干燥，细粉按要求在塔顶或流化床附聚。进风温度：180℃，排风温度86℃，高压泵压力200bar，塔负压-4mbar左右。

11)流化床干燥冷却：从干燥塔出来的粉再经流化床(一级)二次干燥后，经流化床(二级)冷却到30℃。同时卵磷脂与载体混合后加热至60℃，在压缩空气作用下，均匀分散到粉表面，使粉颗粒附聚增加其颗粒度和速溶性。

12)分装：制粉车间人员按照配方要求，将DHA、ARA或双歧杆菌称量封袋分装。

13)干混：将称量好的DHA、ARA或双歧杆菌与奶粉在干混机内混均。

14)筛粉：通过振动筛，使奶粉的颗粒度均匀，粉渣报废处理。

15)出粉：用经过消毒的集粉箱接粉，并由出粉间运至上粉间。

16)上粉：将奶粉按包装要求倒入大小包装机上的储粉罐中。

17)包装：400克自动包装机充氮包装。充氮时含氧量低于1％。900克铁听自动充氮包装含氧量低于5％。

18)装箱：将已包装的小袋装入纸箱中同时加入粉勺，用封箱机封口。

19)成品检验：对包装完后的产品按检验计划进行抽样检验。

20)入库贮存：经检验合格的产品入库贮存，要求在常温下贮存，湿度≤65％。

实施例2

含核苷酸母乳化婴儿配方奶粉配方(制备1000公斤)：

乳糖140千克，全脂奶粉100千克，脱脂奶粉260千克，乳清蛋白粉WPC34％100千克，脱盐乳清粉D90210千克，葵花籽油22千克，玉米油15千克，大豆油48千克，OPO结构脂85千克，α-乳清蛋白粉4千克，β-酪蛋白粉1千克，复配核苷酸0.59千克，大豆磷脂2千克，无水奶油1千克，低聚果糖粉5千克，低聚半乳糖浆13千克，复配营养素10.3千克，DHA 7千克，ARA 8千克，双歧杆菌0.18千克。

其中0.59千克复配核苷酸各核苷酸有效成分如下：CMP：238.59g，AMP：57.04g，UMP：73.06g，GMP：57.04g。复配核苷酸中除各核苷酸的水合物或盐类外，其余为乳糖。

其中复配营养素包括复配维生素营养包约2.6千克、氯化胆碱营养包约0.35千克、钙粉营养包约3.7千克、矿物质营养包约1.3千克以及氯化镁和氯化钾营养包，各营养包的基料为乳糖，具体的主要营养素组成如下：1)复配维生素，每克复配维生素中，牛磺酸：190mg；维生素A(醋酸视黄酯)：2000μgRE；维生素D(胆钙化醇)：40μg；维生素B1(硝酸硫胺素)：3900μg；维生素B2(核黄素)：1000μg；维生素B6(盐酸吡哆醇)：1500μg；维生素B12(氰钴胺)：5μg；维生素K1(植物甲萘醌)：350μg；维生素C(L-抗坏血酸)：400mg；维生素E(dl-α-醋酸生育酚)：30mgα-TE；烟酰胺：23000μg；叶酸：420μg；生物素(D-生物素)：70μg；泛酸(D-泛酸钙)：8000μg；2)钙粉，每克钙粉中，钙(碳酸钙、磷酸三钙)：250mg；磷(磷酸三钙)：75mg；3)矿物质，每克矿物质中，铁(硫酸亚铁)：76mg；锌(硫酸锌)：26mg；铜(硫酸铜)：2700μg；碘(碘化钾)：600μg；硒(亚硒酸钠)：160μg；4)氯化镁，每1000千克奶粉中，镁(氯化镁)：85g；5)氯化钾，每1000千克奶粉中，钾(氯化钾)：1000g；6)氯化胆碱，每1000千克奶粉中，胆碱(氯化胆碱)：300g。

其中所用原料葵花籽油、玉米油、大豆油和结构油脂(OPO)中的亚油酸和α-亚麻酸的含量分别为8.20％、0.3％，55.50％、1.2％，52.10％、8.8％，6.18％、0.47％。

含核苷酸和OPO结构脂母乳化婴儿配方奶粉具体制备工艺如下：

1)粉类添加：各种粉类原料按配方经计量后通过风送系统统一加入到配粉罐中贮存。

2)真空吸粉：配粉罐中的各种粉类原料通过真空系统吸入真空混料罐中。

3)溶化配油：按配方要求将配方中规定的油脂放入化油间，化油间的温度应保持在60℃，待油溶化后，按配方比例要求通过油泵和流量计打入混合油贮罐中。

4)称重：按配方要求将混合油经油泵打入混料罐中。

5)营养素溶解添加：钙粉、矿物质、维生素及核苷酸等分别添加，用150kg纯净水，分别溶解后，打入混料罐中，每打完一种用100kg纯净水冲洗添加罐和管线。

6)过滤：经混合的料液经滤网过滤，去除原料中可能带入的物理杂质。

7)均质：混合后的料液通过均质机进行均质，将脂肪球进行机械处理，把它们分散成均匀一致的脂肪球。

8)冷却与贮存：均质后的料液进入板式换热器进行冷却：冷却至20℃以下，暂存在预存缸中，6小时内进入下道工序，搅拌器按设定需求开启。

9)浓缩杀菌：生产时使用双效浓缩，杀菌温度≥83℃，杀菌时间25秒。出料浓度均为50％干物质。

10)浓奶贮存、预热过滤、喷雾干燥：浓缩后的奶暂存在浓奶平衡罐。经刮板预热器预热到60℃，预热后物料经1mm孔径的过滤器过滤后，用高压泵打入干燥塔喷雾干燥，细粉按要求在塔顶或流化床附聚。进风温度：180℃，排风温度86℃，高压泵压力200bar，塔负压-4mbar左右。

11)流化床干燥冷却：从干燥塔出来的粉再经流化床(一级)二次干燥后，经流化床(二级)冷却到30℃。同时大豆磷脂与载体混合后加热至60℃，在压缩空气作用下，均匀分散到粉表面，使粉颗粒附聚增加其颗粒度和速溶性。

12)分装：制粉车间人员按照配方要求，将DHA、ARA或双歧杆菌称量封袋分装。

13)干混：将称量好的DHA、ARA或双歧杆菌与奶粉在干混机内混均。

14)筛粉：通过振动筛，使奶粉的颗粒度均匀，粉渣报废处理。

15)出粉：用经过消毒的集粉箱接粉，并由出粉间运至上粉间。

16)上粉：将奶粉按包装要求倒入大小包装机上的储粉罐中。

17)包装：400克自动包装机充氮包装。充氮时含氧量低于1％。900克铁听自动充氮包装含氧量低于5％。

18)装箱：将已包装的小袋装入纸箱中同时加入粉勺，用封箱机封口。

19)成品检验：对包装完后的产品按检验计划进行抽样检验。

20)入库贮存：经检验合格的产品入库贮存，要求在常温下贮存，湿度≤65％。

各实施例奶粉质量检测及喂养试验

本发明的实施例1、2的含核苷酸和OPO结构脂的母乳化婴儿配方奶粉与中国人(华人)母乳及两种市售婴儿奶粉的检测数据对比见表1(其中，中国人(华人)母乳是采集全国重点地区汉族人的产后15天～12个月的母成熟乳300份分别检测的平均数值)：

表1

注：各奶粉样品冲调为奶液的比例为：实施例1的奶粉13.2克加水冲调至100ml奶液；实施例2的奶粉14.1g加水冲调至100ml奶液；两种市售婴儿奶粉13.2克加水冲调至100ml奶液。

表2本发明的婴儿配方奶粉与母乳氨基酸结构对比表

从表2可以看出本发明的含核苷酸和OPO结构脂母乳化婴儿配方奶粉的在蛋白、脂肪细分组成及核苷酸总量和个单体比例上与中国人(华人)母乳接近，而市售的婴儿配方奶粉与母乳相差较大。因为，本发明人充分考虑了制作配方粉各原料中蛋白、脂肪、核苷酸的含量，特别是在其本底含量的基础上强化了各种核苷酸单体，使其成品中各蛋白、脂肪、核苷酸单体的含量更接近中国人(华人)母乳，因此，本发明的含核苷酸母乳化婴儿配方奶粉比市售的添加核苷酸婴儿配方奶粉，对婴儿的免疫系统和胃肠道发育有重要的意义。

本发明婴儿配方奶粉与市售产品试饮结果对比：

本发明人随机选90人，年龄0～12个月，60人本发明组，另30人市售配方奶粉组，试饮本发明婴儿配方奶粉与市售产品两周后，统计试饮期间出现便秘和腹泻情况的结果见表3：

表3

	便秘人数	腹泻人数
			本发明实施例1组(30人)	0	1
本发明实施例2组(30人)	0	1
			市售配方组(30人)	7	2
母乳组(10人)	0	2

从上表可以看出在试饮的两周期间，食用本发明组的配方奶粉无便秘发生，中有1人发生腹泻，而食用市售奶粉组有7人发生便秘，2人发生腹泻，本发明的配方奶粉与母乳喂养效果相当。

不同配比核苷酸的免疫功效试验

本试验意图证实本发明的奶粉中各核苷酸比例在免疫刺激方面的效果，其原理和步骤参见“保健食品检验与评价技术规范(2003年版)”第二部分第一章的规定和要求。

1.材料与方法

1.1.主要试剂

本试验中所用的主要试剂有：RPMI-1640培养基(Gibco)；胎牛血清(Gibco)；ConA(Sigma)(中文名为：刀豆蛋白A)；淋巴细胞分离液、全血及组织稀释液、细胞洗涤液(天津市灏洋生物制品科技有限责任公司)；5％鸡红细胞悬液(实验室制备)；MTT试剂盒、Hank's液(碧云天生物技术研究所)；Giemsa染液(珠海贝索生物技术有限公司)；EDTA抗凝管(BD)；96孔细胞培养板(Corning)；百呈牌牛初乳胶囊(上海孚正生物科技有限公司)；核苷酸样品(南京同凯兆业)。如果没有特别指明，这里所用试剂和设备均购自(碧云天生物技术研究所)。

1.2.主要仪器设备

CO₂培养箱(三洋MCO-18AIC(UV))；超净工作台(AIRTECH)；倒置显微镜(OLYMPUS)；日立水平离心机(himac-CT6EL)；酶标仪(BIO-RAD Model 680)；OLYMPUS显微镜(BX51)；DNP恒温培养箱(上海精宏实验设备有限公司)。

1.3.实验动物

5～6周龄雄性KM小鼠160只，由上海斯莱克实验动物有限责任公司提供。

1.4.动物分组

使KM小鼠适应性饲养7天后，将其随机分为8组，每组20只，即空白对照组，阳性对照组，样品一的高、中、低剂量组以及比较样品的高、中、低剂量组。向每组动物分别灌胃溶解了各样品(见下文)的无菌水，空白对照组灌胃相同体积的无菌水。每天1次，连续饲喂或灌胃30天。

高剂量组的饲喂的剂量为67.37mg﹒kg^-1﹒d^-1，中剂量组的剂量为41.82mg﹒kg^-1﹒d^-1，低剂量组的剂量为23.23mg﹒kg^-1﹒d^-1。阳性对照组的剂量为(150.17mg﹒kg^-1﹒d^-1)。

阳性对照组：牛初乳胶囊。

实验组：

样品一：参照本发明实施例奶粉中核苷酸含量的复配核苷酸组合物，其组成和配比(按重量计)为CMP：60％、AMP：12％、UMP：16％和GMP：12％。

比较样品：该样品为根据市售的某款添加核苷酸的婴幼儿食品中所用的核苷酸组分和配比制备的核苷酸组合物，其组成和配比(按重量计)为CMP：33.7％、AMP 20.3％、UMP23.1％、GMP 7.6％和IMP 15.3％。

1.5.检测指标

淋巴细胞转化实验：各组于实验第38天，随机取10只小鼠，使用2mL EDTA抗凝管，摘除眼球采血，采用Ficoll密度梯度离心法，无菌分离淋巴细胞。取1mL新鲜抗凝血，将其与全血和组织稀释液以1:1混匀，然后小心加于等体积淋巴细胞分离液的液面上。用水平离心机以1500转/分钟离心15分钟，收集环状乳白色淋巴细胞层，将其用细胞洗涤液洗涤2次。用RPMI-1640完全培养液配制为1×10⁷个/mL，然后加入96孔细胞培养板，每孔100μL，每鼠6孔，其中3孔加入ConA(终浓度为5μg/mL)，另3孔不加作为对照。在5％CO₂和37℃的CO₂培养箱中培养68小时后，加入MTT(5mg/mL)溶液(10μL/孔)，继续培养4小时后，每孔加入100μLFormazan(中文名为：甲臜)溶液，然后在37℃的CO₂培养箱内继续孵育，直至观察到Formazan全部溶解。在酶标仪上以波长570nm测定OD值，计算刺激指数(SI)：SI＝ConA刺激管OD平均值/对照管OD平均值。

腹腔巨噬细胞吞噬实验：各组于实验第38天，随机取10只小鼠，每鼠腹腔注射5％鸡红细胞悬液1mL。30分钟后，以颈椎脱臼法处死小鼠。腹腔注入l mL生理盐水，轻揉小鼠腹部1分钟，剪开腹壁皮肤，在肌肉层上开口，用吸管伸入腹腔吸取腹腔液l mL，滴加于洁净的载玻片上。将载玻片放入垫有湿纱布的搪瓷盒中，然后放入37℃培养箱孵育30分钟。取出载玻片，漂洗去除上清液和未粘附在玻片上的细胞，然后在室温下晾干，用1:1丙酮/甲醇溶液固定后，置于Giemsa染色液中，浸染15～30分钟，然后水洗并晾干。在高倍镜下计数巨噬细胞，每张玻片计数100个，分别计算吞噬百分率和吞噬指数。

1.6.统计学分析

数据均以表示，采用SPSS 13.0统计软件对数据进行方差分析，两两比较采用snk法，检验水准为α＝0.05。

2.结果

2.1.样品对淋巴细胞增殖功能的影响

表4样品对小鼠淋巴细胞增殖功能的影响

组别	刺激指数(SI)
		空白对照组	1.24±0.19
阳性对照组	2.13±0.47<sup>*</sup>
		样品一高剂量组	2.09±0.23<sup>*</sup>
样品一中剂量组	1.87±0.26<sup>*</sup>
		样品一低剂量组	1.46±0.34<sup>*</sup>
比较样品高剂量组	1.51±0.18<sup>*</sup>
		比较样品中剂量组	1.30±0.22
比较样品低剂量组	1.27±0.15

注：^*与空白对照组相比差异显著(p<0.05)。

由表4可见，样品一的高、中、低剂量组的SI值均显著高于空白对照组(p<0.05)，并且呈剂量依赖性；比较样品的高剂量组的SI值显著高于空白对照组(p<0.05)，比较样品的中、低剂量组SI值与空白对照组差异不显著(p>0.05)；样品一的低剂量组的SI值显著高于比较样品中剂量组(p<0.05)。

以上结果表明本发明的奶粉中的核苷酸配比可显著提高小鼠淋巴细胞增殖功能，且效果优于比较样品。

2.2.样品对巨噬细胞吞噬功能的影响

表5样品对小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响

组别	吞噬百分率(％)	吞噬指数
			空白对照组	35.2±4.2	0.43±0.06
阳性对照组	52.7±8.6<sup>*</sup>	0.62±0.10<sup>*</sup>
			样品一高剂量组	50.1±2.5<sup>*</sup>	0.59±0.01<sup>*</sup>
样品一中剂量组	48.7±3.2<sup>*</sup>	0.57±0.13<sup>*</sup>
			样品一低剂量组	46.7±3.1<sup>*</sup>	0.53±0.07<sup>*</sup>
比较样品高剂量组	49.8±2.0<sup>*</sup>	0.50±0.22<sup>*</sup>
			比较样品中剂量组	34.9±1.7	0.44±0.12
比较样品低剂量组	35.1±3.9	0.42±0.19

注：^*与空白对照组相比差异显著(p<0.05)。

由表5可见，样品一的高、中、低剂量组的吞噬百分率及吞噬指数均显著高于空白对照组(p<0.05)；比较样品的高剂量组的吞噬百分率及吞噬指数显著高于空白对照组(p<0.05)，比较样品的中、低剂量组的吞噬百分率及吞噬指数与空白对照组差异不显著(p>0.05)；样品一的低剂量组的吞噬百分率及吞噬指数显著高于比较样品的中剂量组(p<0.05)。

以上结果表明本发明的奶粉中的核苷酸配比可显著提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能，且效果优于比较样品。

3.结论

从以上实验结果可知，本发明的奶粉中的核苷酸配比可显著提高淋巴细胞转化功能，增强腹腔巨噬细胞吞噬功能，具有提高免疫功能的作用，且免疫调节作用显著高于比较样品。

Claims (10)

1.一种含有核苷酸和OPO结构脂的母乳化0-12月婴儿配方奶粉，该奶粉中的总蛋白含量为10.5~18g/100g，乳清蛋白占总蛋白的比例为48~61%，α-乳清蛋白含量为1.25~1.8g/100g，β-酪蛋白含量为2.2~3.7g/100g，脂肪含量为20~29g/100g，亚油酸含量为2600~4500mg/100g，α-亚麻酸含量为330~450mg/100g，1,3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯含量为3~5g/100g，碳水化合物含量为52~56g/100g，总核苷酸含量以核苷酸分子总量计为26~58mg/100g；其中：

提供乳蛋白的原料包括基础原料牛奶、全脂奶粉、脱脂奶粉中的一种或多种，还包括：为强化乳清蛋白而添加的原料乳清蛋白粉、脱盐乳清粉中的一种或多种，为强化α-乳清蛋白而添加的原料α-乳清蛋白粉，以及为强化β-酪蛋白而添加的原料β-酪蛋白粉；

提供脂肪的原料除含有乳脂的基础原料外，还包括植物油和为提供1,3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯而添加的原料OPO结构脂；

提供核苷酸的原料包括为强化核苷酸而添加的原料复配核苷酸；所述复配核苷酸中，以各核苷酸折算成CMP、AMP、UMP、GMP、IMP分子计的总量为100%，各核苷酸有效百分含量以CMP、AMP、UMP、GMP、IMP分子计分别为：CMP 58~70%，AMP 7.5~12.5%，UMP 12~16.5%，GMP 10~13%，IMP为0、或大于0且不高于2.5%。

2.根据权利要求1所述的含有核苷酸和OPO结构脂的母乳化0-12月婴儿配方奶粉，基于1000重量份的所述含有核苷酸和OPO结构脂的母乳化0-12月婴儿配方奶粉，其中：

提供乳蛋白的原料包括：全脂奶粉85~175重量份；脱脂奶粉0~275重量份；乳清蛋白粉0~170重量份；脱盐乳清粉125~225重量份；α-乳清蛋白粉4~30重量份；β-酪蛋白粉0.5~10重量份；

提供脂肪的原料除含有乳脂的基础原料外，还包括：葵花籽油20~50重量份；玉米油0~20重量份；大豆油30~80重量份；OPO结构脂 40~120重量份；

提供碳水化合物的原料除含有乳糖的基础原料外，还包括原料乳糖125~325重量份；

提供核苷酸的原料包括为强化核苷酸而添加的原料复配核苷酸0.45~0.65重量份，其中核苷酸有效量以核苷酸分子总量计不超过0.58重量份，并且，其中IMP含量为0、或大于0且不高于2%。

3.根据权利要求1或2所述的含有核苷酸和OPO结构脂的母乳化0-12月婴儿配方奶粉，基于1000重量份的所述含有核苷酸和OPO结构脂的母乳化0-12月婴儿配方奶粉，其原料还包括：

磷脂 1~2.5重量份；

无水奶油 0.5~1.5重量份；

低聚果糖粉 4~18重量份；

低聚半乳糖浆 12~42重量份；

包含钙粉、维生素和矿物质的复配营养素 8~16重量份；

DHA 4~9重量份；

ARA 5~9重量份；

双歧杆菌 0.1~0.2重量份。

4.根据权利要求1或2所述的含有核苷酸和OPO结构脂的母乳化0-12月婴儿配方奶粉，其中，所述复配核苷酸中，核苷酸有效含量以核苷酸分子总量计为599~750mg/g，并且，其中IMP含量为0、或大于0且不高于2%。

5.根据权利要求1或2所述的含有核苷酸和OPO结构脂的母乳化0-12月婴儿配方奶粉，其中，所述复配核苷酸中，各核苷酸有效含量以CMP、AMP、UMP、GMP、IMP分子计分别为：

CMP：365~430mg/g；

UMP：94~120mg/g；

GMP：70~90mg/g；

AMP：70~90mg/g；

IMP：0，或者大于0且不高于20mg/g。

6.根据权利要求1或2所述的含有核苷酸和OPO结构脂的母乳化0-12月婴儿配方奶粉，其中，所述复配核苷酸中，以各核苷酸折算成CMP、AMP、UMP、GMP、IMP分子计的总量为100%，各核苷酸有效百分含量以CMP、AMP、UMP、GMP、IMP分子计分别为：CMP 59~65%，AMP 8~12.5%，UMP 14~16.5%，GMP 11~12.5%，IMP为0、或大于0且不高于2%。

7.根据权利要求3所述的含有核苷酸和OPO结构脂的母乳化0-12月婴儿配方奶粉，其中：

所述复配营养素至少包括复配维生素、钙粉、矿物质、氯化镁和氯化钾，各组分用量为：

1）复配维生素，每克复配维生素中：

维生素A：1700~2500μgRE

维生素D：30~44μg

维生素B1：2600~4200μg

维生素B2：600~1400μg

维生素B6：1400~2350μg

维生素B12：3.5~12.0μg

维生素K1：280~430μg

维生素C：330~520mg

维生素E：27~39.1mg α-TE

烟酰胺：16000~24550μg

叶酸：330~543μg

生物素：52~98μg

泛酸：6110~15230μg

2）钙粉，每克钙粉中：

钙：160~250mg

磷：75~100mg

3）矿物质，每克矿物质中：

铁：40~85mg

锌：23~49mg

铜：2600~4140μg

碘：500~992μg

硒：102~185μg

锰：0~579μg

4）氯化镁，每1000千克奶粉中：

镁：80~170g

5）氯化钾，每1000千克奶粉中：

钾：950~1050g；

所述双歧杆菌的添加量为0.1~0.2重量份。

8.一种制备权利要求1~7任一项所述的含有核苷酸和OPO结构脂的母乳化0-12月婴儿配方奶粉的方法，该方法包括：

配料：配方奶粉原料中包括喷雾载体和后混料，所述后混料为DHA、ARA和双歧杆菌，将配方奶粉原料中除喷雾载体及后混料外的其他原料进行混合，得混合料液；

均质：混合料液进行均质；

浓缩杀菌：均质后的料液进行浓缩杀菌，浓缩杀菌条件为：双效浓缩，杀菌温度≥83℃，杀菌时间15~30秒，并控制出料浓度为48%~52%干物质；

喷雾干燥：浓奶液经预热器预热到60~70℃，预热后物料经0.8~1.2mm孔径的过滤器过滤后，打入干燥塔喷雾干燥，控制喷雾干燥条件为：进风温度165~180℃，排风温度75-90℃，高压泵压力160~210bar，塔负压-4~-2mbar；

流化床干燥冷却：从干燥塔出来的粉再经一级流化床二次干燥后，经二级流化床冷却到25~30℃，同时在压缩空气作用下，将加热至60~65℃的喷雾载体均匀分散到粉表面，得到粉颗粒；

后混料：将后混料与流化床干燥冷却后的粉颗粒干混混均，包装，得奶粉成品。

9.根据权利要求8所述的方法，其中，配料时，钙粉、维生素和核苷酸、矿物质是依序添加到混好的其他粉料和油料混合物中，且添加钙粉后搅拌溶解15~25分钟，添加维生素和核苷酸后搅拌溶解15~20分钟，添加矿物质后搅拌溶解15~20分钟，搅拌速度为600~800转。

10.根据权利要求8或9所述的方法，其中，所述配料过程包括：

粉类添加：各种粉类原料按配方经计量后通过风送系统统一加入到配粉罐中，并通过真空系统吸入真空混料罐中；

溶化配油：按配方要求将配方中规定的油脂放入化油间，化油间的温度保持在50~90℃，待油溶化后，打入混合油贮罐中，并按配方要求将混合油经油泵打入混料罐中；

营养素溶解添加：将钙粉、维生素和核苷酸、矿物质用纯净水分别溶解后，依序添加到混料罐中，得到混合的料液。