CN106258492A - 一种有机硒食用菌及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种有机硒食用菌及其制备方法，所述制备方法包括以下步骤：制备一级母种，将得到的一级母种制备二级原种，将得到的二级原种制备三级栽培种，将得到的三级栽培种播种、出菇、采收和烘干得到所述有机硒食用菌；其中，所述出菇采用富硒棉籽壳培养料，所述富硒棉籽壳培养料每100kg包括如下原料：棉籽壳或玉米芯粉70‑100kg，石灰1‑5kg，石膏0.5‑3kg，玉米面3‑10kg，麦麸10‑18kg，亚硒酸钠15‑30g，硫酸亚铁15‑30g，硫酸锌15‑30g和多菌灵50‑160g，料水重量比为1:(1.2‑1.4)；其中，所述出菇采用生料培养和/或半生料培养。本发明制备方法制备的有机硒食用菌出菇率高，可达80％以上，且菇厚实，口感好，且通过驯化，提高了有机硒食用菌硒和锌的含量。
Description
技术领域
本发明涉及农业生产技术领域，主要涉及一种有机硒食用菌及其制备方法。
背景技术
微量元素虽然在人体内的含量不多，但与人的生存和健康息息相关，对人的生命起至关重要的作用。它们的摄入过量、不足、不平衡或缺乏都会不同程度地引起人体生理的异常或发生疾病。这些微量元素通常情况下必须直接或间接由土壤供给，但大部分人往往不能通过饮食获得足够的微量元素。硒被科学家称之为人体微量元素中的“抗癌之王”；锌是微量元素的一种，在人体内的含量以及每天所需摄入量都很少，但对机体的性发育、性功能、生殖细胞的生成却能起到举足轻重的作用，故有“生命的火花”与“婚姻和谐素”之称，锌还与大脑发育和智力有关。
硒是人体必需的微量元素，硒及硒化物除具有抗氧化性能外，还具有抗肿瘤、延长寿命和提高机体免疫力等功能。世界上有40多个国家土壤中缺硒，我国有70％地区属于缺硒地区，寻找和开发富硒产品，以保证人体摄入充足的硒，正被各国科学工作者关注。
CN 105393797 A公开了一种富含硒锌白灵菇的生产方法，通过加入亚硒酸钠和硫酸锌，实现从菌种到生产全程的富集硒和锌能力提高，使得白灵菇菌丝在生长过程中不断吸收培养基中的硒并转化为生物有机硒和锌，但此方法并不适用其他食用菌的培养。
发明内容
本发明提供了一种有机硒食用菌及其制备方法，该方法制备工艺简单，操作程序简单，更便捷，出菇率高，得到的食用菌硒含量高，口感好。
为达到此发明目的，本发明采用如下技术方案：
一方面，本发明提供一种有机硒食用菌的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：制备一级母种，将得到的一级母种制备二级原种，将得到的二级原种制备三级栽培种，将得到的三级栽培种播种、出菇、采收和烘干得到所述云芝林芝食用菌；
其中，所述出菇采用富硒棉籽壳培养料，所述富硒棉籽壳培养料每100kg包括如下原料：棉籽壳或玉米芯粉70-100kg，石灰1-5kg，石膏0.5-3kg，玉米面3-10kg，麦麸10-18kg，亚硒酸钠15-30g，硫酸亚铁15-30g，硫酸锌15-30g和多菌灵50-160g，料水重量比为1:(1.2-1.4)；
其中，所述出菇采用生料培养和/或半生料培养。
本发明中，所述出菇采用生料法栽培，相比熟料栽培法操作要求的条件降低，更便捷，备料、接种露天可行，熟料栽培法播种必须在接菌室和温室大棚进行，生料栽培法操作程序减少，不用经过栽培料棒的灭菌程序。熟料栽培必须经灭菌程序，因生料栽培可多层接菌(播种)每层可达一把菌种，故播种量大，熟料栽培只能是两头接菌，播种量小，因生料栽培，经过菌棒料发酵，温度逐渐升高，适宜菌丝生长，故出菇又早、又快、又好，产量高。而熟料栽培，菌棒料已经灭菌处理，不再发酵，只能靠外部提供适宜的温度，促使菌丝生长，赶上天气变化，适宜温度和湿度往往掌握不准，所以菌丝长得慢，出菇周期长，致使效益相对低下。
所述棉籽壳或玉米芯粉例如可以是70kg、71kg、72kg、75kg、76kg、78kg、80kg、82kg、85kg、88kg、90kg、92kg、95kg、96kg、97kg、98kg、99kg或100kg；
所述石灰例如可以是1kg、2kg、3kg、4kg或5kg；
所述石膏例如可以是0.5kg、0.6kg、0.7kg、0.8kg、1kg、1.5kg、2kg、2.5kg或3kg；
所述玉米面例如可以是3kg、4kg、5kg、6kg、7kg、8kg、9kg或10kg；
所述麦麸例如可以是10kg、11kg、12kg、13kg、14kg、15kg、16kg、17kg或18kg；
所述亚硒酸钠例如可以是15g、16g、17g、18g、19g、20g、21g、22g、23g、24g、25g、26g、27g、28g、29g或30g；
所述硫酸亚铁例如可以是15g、16g、17g、18g、19g、20g、21g、22g、23g、24g、25g、26g、27g、28g、29g或30g；
所述硫酸锌例如可以是15g、16g、17g、18g、19g、20g、21g、22g、23g、24g、25g、26g、27g、28g、29g或30g；
所述多菌灵例如可以是50g、51g、52g、53g、55g、56g、58g、60g、70g、80g、90g、100g、110g、120g、130g、140g、150g或160g。
优选地，所述制备出菇采用富硒棉籽壳培养料，所述富硒棉籽壳培养料每100kg包括如下原料：棉籽壳78kg，石灰1kg，石膏1kg，玉米面5kg，麦麸15kg，亚硒酸钠20g，硫酸亚铁20g，硫酸锌20g和多菌灵100g，料水重量比为1:(1.25-1.3)。
优选地，所述出菇包括如下步骤：将所述培养料装菌棒袋，采用一层培养料一层食用菌的方式装袋，一袋3-5层菌种，优选4层菌种，将装好的菌袋摆在温室大棚菇床上，4层“井”字形摆放，2-3天一倒垛，一透养，待菌棒里菌丝长满、菌袋呈白色，在菇床上改放成一字墙，并把菌袋两头扎口打开，待出菇。
优选地，所述待菌棒里菌丝长满为培养18-25天，例如可以是18天、19天、20天、21天、22天、23天、24天或25天，优选为20天。
优选地，所述温室大棚的温度为10-40℃，例如可以是10℃、11℃、12℃、13℃、15℃、18℃、20℃、25℃、30℃、35℃或40℃，优选为15-32℃。
优选地，所述温室大棚的湿度为75-90％，例如可以是75％、76％、78％、80％、81％、83％、85％、86％、88％或90％，优选为80％。
优选地，所述出菇为菇盖长到直径8-10cm后采摘。
优选地，所述出菇采用半生料培养包括如下步骤：将所述富硒棉籽壳培养料翻到发酵培养6-12天，优选7天，发酵温度为65-73℃，优选70℃，再对三级栽培种进行培养出菇。
优选地，所述半生料培养出菇的具体包括如下步骤：将所述培养料装菌袋，采用一层培养料一层食用菌的方式装袋，一袋3-5层菌种，优选4层菌种，将装好的菌袋摆在温室大棚菇床上，摆一字墙，2-3天一倒垛，一透养，待菌棒里菌丝长满、菌袋呈白色，在菇床上改放成一字墙，并把菌袋两头扎口打开，待出菇。
优选地，所述待菌棒里菌丝长满为培养18-25天，例如可以是18天、19天、20天、21天、22天、23天、24天或25天，优选为20天。
优选地，所述温室大棚的温度为10-40℃，例如可以是10℃、11℃、12℃、13℃、15℃、18℃、20℃、25℃、30℃、35℃或40℃，优选为15-32℃。
优选地，所述温室大棚的湿度为75-90％，例如可以是75％、76％、78％、80％、81％、83％、85％、86％、88％或90％，优选为80％。
优选地，所述出菇为菇盖长到直径8-10cm后采摘。
优选地，所述制备一级母种采用富硒马铃薯琼脂培养基，所述富硒马铃薯琼脂培养基每1000mL包括如下原料：马铃薯160-240g，糖类16-23g、硫酸镁1-8g、磷酸二氢钾1-5g、蛋白胨15-30g、VB1 0.5-5g、亚硒酸钠0.1-3g、碳酸钙1-8g、硫酸亚铁1-8g、硫酸锌1-8g和琼脂15-30g。
所述马铃薯例如可以是160g、161g、162g、165g、170g、180g、190g、200g、210g、220g、230g或240g；
所述糖类例如可以是16g、17g、18g、19g、20g、21g、22g或23g；
所述硫酸镁例如可以是1g、2g、3g、4g、5g、6g、7g或8g；
所述磷酸二氢钾例如可以是1g、2g、3g、4g或5g；
所述蛋白胨例如可以是15g、16g、17g、18g、20g、22g、26g、28g、29g或30g；
所述VB1例如可以是0.5g、0.6g、0.7g、0.8g、1g、2g、3g、4g或5g；
所述亚硒酸钠例如可以是0.1g、0.2g、0.3g、0.5g、0.6g、0.8g、1g、1.5g、2g、2.5g或3g；
所述碳酸钙例如可以是1g、2g、3g、4g、5g、6g、7g或8g；
所述硫酸锌例如可以是1g、2g、3g、4g、5g、6g、7g或8g；
所述琼脂例如可以是15g、16g、17g、18g、20g、22g、26g、28g、29g或30g。
优选地，所述富硒马铃薯琼脂培养基每1000mL包括如下原料：马铃薯200g，糖类20g、硫酸镁3g、磷酸二氢钾1.5g、蛋白胨20g、VB1 1g、亚硒酸钠0.15g、碳酸钙1g、硫酸亚铁1g、硫酸锌1g和琼脂20g。
优选地，所述糖类为葡萄糖和/或蔗糖。
优选地，所述富硒马铃薯琼脂培养基的制备包括如下步骤：
(1)取去皮、洗净马铃薯，切块煮沸，用四层纱布过滤弃渣，过滤后放入液体放入烧瓶中，再加入葡萄糖或蔗糖、硫酸镁、磷酸二氢钾、蛋白胨、VB1、亚硒酸钠、碳酸钙、硫酸亚铁和硫酸锌，溶解后制得1000mL培养基，调整pH5.5-6.5，加入琼脂至完全溶化，分装试管进行高压灭菌，待锅内压力上升至0.05MPa时，放冷空气回零，继续加热至压力0.15MPa时灭菌25-40min。
本发明中，液体培养基分装时占试管1/5，棉塞长4.5cm，塞入罐内长度为试管长度的2/3，即便与通气又可防止杂菌侵入；灭菌后的试管培养基待温度降至50℃时，摆成斜面，冷却凝固后可形成斜面试管培养基。
优选地，所述制备一级母种包括如下步骤：
选好菇种，在接菌室进行胞子分离和组织分离，在15-28℃温度下培养7-10天，筛选菌种，做瓶皿，驯化，转接试管，扩大繁殖，经不断驯化、扩培的菌种，中试后为母种。
本发明中，所选菇种在接菌箱里用75％酒精棉球擦拭，再用接菌刀打开菌盖，取菌盖与菌柄之间约5mm见方小块，试管口放在酒精灯火焰上操作：打开试管棉塞，把所取小方块放入试管里的培养基上，再盖好棉塞；所述驯化，转接试管，扩大繁殖要反复多次，以使菌株不断提高在富硒培养基上繁殖能力，使之健康生长，并使含有有机硒的纯度越来越高，最终达到100％的纯有机硒。
本发明中，所述母种采用木粒培养基试管封存。
优选地，所述制备二级原种采用富硒棉籽壳培养基，所述富硒棉籽壳培养基每100kg包括如下原料：棉籽壳、谷粒或麦粒70-100kg，石灰0.5-5kg，石膏0.8-5kg，玉米面3-10kg，麦麸10-18kg，亚硒酸钠10-18g，硫酸亚铁10-18g和硫酸锌10-18g，料水重量比为1:(1.2-1.5)。
优选地，所述制备二级原种采用富硒棉籽壳培养基，所述富硒棉籽壳培养基每100kg包括如下原料：棉籽壳、谷粒或麦粒78kg，石灰1kg，石膏1kg，玉米面5kg，麦麸15kg，亚硒酸钠15g，硫酸亚铁15g和硫酸锌15g，料水重量比为1:1.25。
优选地，所述制备二级原种包括如下步骤：将配好的富硒棉籽壳培养基分装，高压灭菌，压力0.15MPa，灭菌90min，冷却后无菌条件下接入一级母种，在温度25-28℃，湿度30-55％下培养25-30天，得到所述二级原种。
优选地，所述制备三级栽培种采用富硒棉籽壳培养基，所述富硒棉籽壳培养基每100kg包括如下原料：棉籽壳70-100kg，石灰0.5-5kg，石膏0.8-5kg，玉米面3-10kg，麦麸10-18kg，亚硒酸钠12-30g，硫酸亚铁12-30g和硫酸锌12-30g，料水重量比为1:(1.2-1.4)。
优选地，所述制备三级栽培种采用富硒棉籽壳培养基，所述富硒棉籽壳培养基每100kg包括如下原料：棉籽壳78kg，石灰1kg，石膏1kg，玉米面5kg，麦麸15kg，亚硒酸钠20g，硫酸亚铁20g和硫酸锌20g，料水重量比为1:(1.25-1.3)。
优选地，所述制备三级栽培种包括如下步骤：将配好的富硒棉籽壳培养基分装灭菌，冷却后无菌条件下接入二级原种，在温度25-28℃，湿度30-55％下培养25-30天，得到所述三级栽培种。
优选地，所述灭菌为高压灭菌或常压灭菌。
优选地，所述高压灭菌的条件为压力0.15MPa，灭菌90min。
优选地，所述常压灭菌的条件为温度100℃，灭菌10h。
本发明中，所述二级原种和三级栽培种的培养恒温室切忌阳光直射，注意通风换气，保持室内清洁。
另一方面，本发明提供一种如第一方面所述的制备方法制备得到的有机硒食用菌。
与现有技术相比，本发明具有如下优点：
(1)本发明采用生料栽培或半生料栽培出菇，相比于熟料栽培，操作要求的条件降低，更便捷，备料、接种露天可行，操作程序减少，不用经过栽培料棒的灭菌程序，因生料栽培可多层接菌(播种)每层可达一把菌种，故播种量大，因生料栽培，经过菌棒料发酵，温度逐渐升高，适宜菌丝生长，故出菇又早、又快、又好，产量高；
(2)本发明制备方法可使所培育的菌丝更健壮，繁殖能力增强，防病能力提高，产量提高；菌类的营养品质提高，营养成分增多，在亚硒酸钠的基础上增加了硫酸亚铁、硫酸锌，使得驯化效果提高；
(3)本发明制备方法制备的食用菌出菇率高，可达80％以上，且菇厚实，口感好，且通过驯化，提高了有机硒食用菌硒和锌的含量，对改善人身造血功能和身体发育、营养不良、溃疡等有良好的作用，利于免疫力的提高；
具体实施方式
为更进一步阐述本发明所采取的技术手段及其效果，以下结合本发明的优选实施例来进一步说明本发明的技术方案，但本发明并非局限在实施例范围内。
实施例1
一种有机硒食用菌的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：制备一级母种，将得到的一级母种制备二级原种，将得到的二级原种制备三级栽培种，将得到的三级栽培种播种、出菇、采收和烘干；
其中，所述一级母种的制备包括如下步骤：
配制一级母种培养基-富硒马铃薯琼脂培养基：取去皮、洗净马铃薯200g，切块煮沸，用四层纱布过滤弃渣，过滤后放入液体放入烧瓶中，再加入葡萄糖20g、硫酸镁3g、磷酸二氢钾1.5g、蛋白胨20g、VB1 1g、亚硒酸钠0.15g、碳酸钙1g、硫酸亚铁1g和硫酸锌1g，溶解后制得1000mL培养基，调整pH 5.5-6.5，加入琼脂20g至完全溶化，分装试管进行高压灭菌，待锅内压力上升至0.05MPa时，放冷空气回零，继续加热至压力0.15MPa时灭菌25-40min；
其中，液体培养基分装时占试管1/5，棉塞长4.5cm，塞入罐内长度为试管长度的2/3，即便与通气又可防止杂菌侵入；灭菌后的试管培养基待温度降至50℃时，摆成斜面，冷却凝固后可形成斜面试管培养基。
母种的培育：选好菇种，在接菌室进行胞子分离和组织分离，在20℃温度下培养8天，筛选菌种，做瓶皿，驯化，转接试管，扩大繁殖，经不断驯化、扩培的菌种，中试后为母种。
其中，所选菇种在接菌箱里用75％酒精棉球擦拭，再用接菌刀打开菌盖，取菌盖与菌柄之间约5mm见方小块，试管口放在酒精灯火焰上操作：打开试管棉塞，把所取小方块放入试管里的培养基上，再盖好棉塞；所述驯化，转接试管，扩大繁殖要反复5此，以使菌株不断提高在富硒培养基上繁殖能力，使之健康生长，并使含有有机硒的纯度越来越高，最终达到100％的纯有机硒。
其中，所述母种采用木粒培养基试管封存。
所述二级原种的制备包括如下步骤：
所述制备二级原种采用富硒棉籽壳培养基，所述富硒棉籽壳培养基每100kg包括如下原料：棉籽壳78kg，石灰1kg，石膏1kg，玉米面5kg，麦麸15kg，亚硒酸钠15g，硫酸亚铁15g和硫酸锌15g，料水重量比为1:1.25；
所述制备二级原种包括如下步骤：将配好的富硒棉籽壳培养基分装，高压灭菌，压力0.15MPa，灭菌90min，冷却后无菌条件下接入一级母种，在温度26℃，湿度50％下培养28天，得到所述二级原种。
所述三级栽培种的制备包括如下步骤：
所述富硒棉籽壳培养基每100kg包括如下原料：棉籽壳78kg，石灰1kg，石膏1kg，玉米面5kg，麦麸15kg，亚硒酸钠20g，硫酸亚铁20g和硫酸锌20g，料水重量比为1:1.25；
所述制备三级栽培种包括如下步骤：将配好的富硒棉籽壳培养基分装灭菌，灭菌采用常压灭菌，100℃灭菌10h，冷却后无菌条件下接入二级原种，在温度26℃，湿度50％下培养28天，得到所述三级栽培种；
其中，所述二级原种和三级栽培种的培养恒温室切忌阳光直射，注意通风换气，保持室内清洁。
所述出菇包括如下步骤：
所述出菇采用的每100kg培养料包括如下原料：棉籽壳78kg，石灰1kg，石膏1kg，玉米面5kg，麦麸15kg，亚硒酸钠20g，硫酸亚铁20g，硫酸锌20g和多菌灵100g，料水重量比为1:(1.25-1.3)。
所述出菇包括如下步骤：将所述培养料装菌棒袋，采用一层培养料一层食用菌的方式装袋，一袋3-5层菌种，优选4层菌种，将装好的菌袋摆在温室大棚菇床上，温度20℃，湿度80％，4层“井”字形摆放，2-3天一倒垛，一透养，培养20天待菌棒里菌丝长满、菌袋呈白色，在菇床上改放成一字墙，并把菌袋两头扎口打开，待菇盖长到直径8-10cm即可采摘。
实施例2
一种有机硒食用菌的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：制备一级母种，将得到的一级母种制备二级原种，将得到的二级原种制备三级栽培种，将得到的三级栽培种播种、出菇、采收和烘干；
其中，所述一级母种的制备包括如下步骤：
配制一级母种培养基-富硒马铃薯琼脂培养基：取去皮、洗净马铃薯200g，切块煮沸，用四层纱布过滤弃渣，过滤后放入液体放入烧瓶中，再加入蔗糖18g、硫酸镁3g、磷酸二氢钾1.5g、蛋白胨25g、VB1 0.8g、亚硒酸钠0.15g、碳酸钙1g、硫酸亚铁2g和硫酸锌2g，溶解后制得1000mL培养基，调整pH 5.5-6.5，加入琼脂20g至完全溶化，分装试管进行高压灭菌，待锅内压力上升至0.05MPa时，放冷空气回零，继续加热至压力0.15MPa时灭菌25-40min；
其中，液体培养基分装时占试管1/5，棉塞长4.5cm，塞入罐内长度为试管长度的2/3，即便与通气又可防止杂菌侵入；灭菌后的试管培养基待温度降至50℃时，摆成斜面，冷却凝固后可形成斜面试管培养基。
母种的培育：选好菇种，在接菌室进行胞子分离和组织分离，在20℃温度下培养8天，筛选菌种，做瓶皿，驯化，转接试管，扩大繁殖，经不断驯化、扩培的菌种，中试后为母种。
其中，所选菇种在接菌箱里用75％酒精棉球擦拭，再用接菌刀打开菌盖，取菌盖与菌柄之间约5mm见方小块，试管口放在酒精灯火焰上操作：打开试管棉塞，把所取小方块放入试管里的培养基上，再盖好棉塞；所述驯化，转接试管，扩大繁殖要反复5此，以使菌株不断提高在富硒培养基上繁殖能力，使之健康生长，并使含有有机硒的纯度越来越高，最终达到100％的纯有机硒。
其中，所述母种采用木粒培养基试管封存。
所述二级原种的制备包括如下步骤：
所述制备二级原种采用富硒棉籽壳培养基，所述富硒棉籽壳培养基每100kg包括如下原料：谷粒78kg，石灰1kg，石膏1kg，玉米面5kg，麦麸15kg，亚硒酸钠15g，硫酸亚铁18g和硫酸锌16g，料水重量比为1:1.25；
所述制备二级原种包括如下步骤：将配好的富硒棉籽壳培养基分装，高压灭菌，压力0.15MPa，灭菌90min，冷却后无菌条件下接入一级母种，在温度26℃，湿度50％下培养25天，得到所述二级原种。
所述三级栽培种的制备包括如下步骤：
所述富硒棉籽壳培养基每100kg包括如下原料：棉籽壳78kg，石灰1kg，石膏1kg，玉米面5kg，麦麸15kg，亚硒酸钠20g，硫酸亚铁23g和硫酸锌24g，料水重量比为1:1.25；
所述制备三级栽培种包括如下步骤：将配好的富硒棉籽壳培养基分装灭菌，灭菌采用常压灭菌，100℃灭菌10h，冷却后无菌条件下接入二级原种，在温度26℃，湿度50％下培养30天，得到所述三级栽培种；
其中，所述二级原种和三级栽培种的培养恒温室切忌阳光直射，注意通风换气，保持室内清洁。
所述出菇包括如下步骤：
所述出菇采用的每100kg培养料包括如下原料：棉籽壳78kg，石灰1kg，石膏1kg，玉米面5kg，麦麸15kg，亚硒酸钠20g，硫酸亚铁20g，硫酸锌20g和多菌灵100g，料水重量比为1:(1.25-1.3)。
所述出菇包括如下步骤：将所述富硒棉籽壳培养料翻到发酵培养7天，发酵温度为70℃，再对三级栽培种进行培养出菇将所述培养料装菌棒袋，采用一层培养料一层食用菌的方式装袋，一袋3-5层菌种，优选4层菌种，将装好的菌袋摆在温室大棚菇床上，温度20℃，湿度80％，4层一字墙摆放，2-3天一倒垛，一透养，培养20天待菌棒里菌丝长满、菌袋呈白色，在菇床上改放成一字墙，并把菌袋两头扎口打开，待菇盖长到直径8-10cm即可采摘。
实施例3
一种有机硒食用菌的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：制备一级母种，将得到的一级母种制备二级原种，将得到的二级原种制备三级栽培种，将得到的三级栽培种播种、出菇、采收和烘干；
其中，所述一级母种的制备包括如下步骤：
配制一级母种培养基-富硒马铃薯琼脂培养基：取去皮、洗净马铃薯220g，切块煮沸，用四层纱布过滤弃渣，过滤后放入液体放入烧瓶中，再加入葡萄糖16g、硫酸镁5g、磷酸二氢钾2g、蛋白胨18g、VB1 0.8g、亚硒酸钠0.2g、碳酸钙3g、硫酸亚铁5g和硫酸锌4g，溶解后制得1000mL培养基，调整pH 5.5-6.5，加入琼脂20g至完全溶化，分装试管进行高压灭菌，待锅内压力上升至0.05MPa时，放冷空气回零，继续加热至压力0.15MPa时灭菌25-40min；
其中，液体培养基分装时占试管1/5，棉塞长4.5cm，塞入罐内长度为试管长度的2/3，即便与通气又可防止杂菌侵入；灭菌后的试管培养基待温度降至50℃时，摆成斜面，冷却凝固后可形成斜面试管培养基。
母种的培育：选好菇种，在接菌室进行胞子分离和组织分离，在20℃温度下培养8天，筛选菌种，做瓶皿，驯化，转接试管，扩大繁殖，经不断驯化、扩培的菌种，中试后为母种。
其中，所选菇种在接菌箱里用75％酒精棉球擦拭，再用接菌刀打开菌盖，取菌盖与菌柄之间约5mm见方小块，试管口放在酒精灯火焰上操作：打开试管棉塞，把所取小方块放入试管里的培养基上，再盖好棉塞；所述驯化，转接试管，扩大繁殖要反复5此，以使菌株不断提高在富硒培养基上繁殖能力，使之健康生长，并使含有有机硒的纯度越来越高，最终达到100％的纯有机硒。
其中，所述母种采用木粒培养基试管封存。
所述二级原种的制备包括如下步骤：
所述制备二级原种采用富硒棉籽壳培养基，所述富硒棉籽壳培养基每100kg包括如下原料：麦粒78kg，石灰1kg，石膏1kg，玉米面5kg，麦麸15kg，亚硒酸钠12g，硫酸亚铁12g和硫酸锌12g，料水重量比为1:1.25；
所述制备二级原种包括如下步骤：将配好的富硒棉籽壳培养基分装，高压灭菌，压力0.15MPa，灭菌90min，冷却后无菌条件下接入一级母种，在温度26℃，湿度50％下培养30天，得到所述二级原种。
所述三级栽培种的制备包括如下步骤：
所述富硒棉籽壳培养基每100kg包括如下原料：棉籽壳78kg，石灰1kg，石膏1kg，玉米面5kg，麦麸15kg，亚硒酸钠22g，硫酸亚铁22g和硫酸锌23g，料水重量比为1:1.25；
所述制备三级栽培种包括如下步骤：将配好的富硒棉籽壳培养基分装灭菌，灭菌采用常压灭菌，100℃灭菌10h，冷却后无菌条件下接入二级原种，在温度26℃，湿度50％下培养25天，得到所述三级栽培种；
其中，所述二级原种和三级栽培种的培养恒温室切忌阳光直射，注意通风换气，保持室内清洁。
所述出菇包括如下步骤：
所述出菇采用的每100kg培养料包括如下原料：玉米芯粉85kg，石灰3kg，石膏2kg，玉米面8kg，麦麸18kg，亚硒酸钠30g，硫酸亚铁30g，硫酸锌30g和多菌灵150g，料水重量比为1:(1.25-1.3)。
所述出菇包括如下步骤：将所述培养料装菌棒袋，采用一层培养料一层食用菌的方式装袋，一袋3-5层菌种，优选4层菌种，将装好的菌袋摆在温室大棚菇床上，温度20℃，湿度80％，4层“井”字形摆放，2-3天一倒垛，一透养，培养20天待菌棒里菌丝长满、菌袋呈白色，在菇床上改放成一字墙，并把菌袋两头扎口打开，待菇盖长到直径8-10cm即可采摘。
实施例4
一种有机硒食用菌的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：制备一级母种，将得到的一级母种制备二级原种，将得到的二级原种制备三级栽培种，将得到的三级栽培种播种、出菇、采收和烘干；
其中，所述一级母种的制备包括如下步骤：
配制一级母种培养基-富硒马铃薯琼脂培养基：取去皮、洗净马铃薯200g，切块煮沸，用四层纱布过滤弃渣，过滤后放入液体放入烧瓶中，再加入蔗糖18g、硫酸镁3g、磷酸二氢钾1.5g、蛋白胨25g、VB1 0.8g、亚硒酸钠0.15g、碳酸钙1g、硫酸亚铁2g和硫酸锌2g，溶解后制得1000mL培养基，调整pH 5.5-6.5，加入琼脂20g至完全溶化，分装试管进行高压灭菌，待锅内压力上升至0.05MPa时，放冷空气回零，继续加热至压力0.15MPa时灭菌25-40min；
其中，液体培养基分装时占试管1/5，棉塞长4.5cm，塞入罐内长度为试管长度的2/3，即便与通气又可防止杂菌侵入；灭菌后的试管培养基待温度降至50℃时，摆成斜面，冷却凝固后可形成斜面试管培养基。
母种的培育：选好菇种，在接菌室进行胞子分离和组织分离，在20℃温度下培养8天，筛选菌种，做瓶皿，驯化，转接试管，扩大繁殖，经不断驯化、扩培的菌种，中试后为母种。
其中，所选菇种在接菌箱里用75％酒精棉球擦拭，再用接菌刀打开菌盖，取菌盖与菌柄之间约5mm见方小块，试管口放在酒精灯火焰上操作：打开试管棉塞，把所取小方块放入试管里的培养基上，再盖好棉塞；所述驯化，转接试管，扩大繁殖要反复5此，以使菌株不断提高在富硒培养基上繁殖能力，使之健康生长，并使含有有机硒的纯度越来越高，最终达到100％的纯有机硒。
其中，所述母种采用木粒培养基试管封存。
所述二级原种的制备包括如下步骤：
所述制备二级原种采用富硒棉籽壳培养基，所述富硒棉籽壳培养基每100kg包括如下原料：谷粒78kg，石灰1kg，石膏1kg，玉米面5kg，麦麸15kg，亚硒酸钠15g，硫酸亚铁18g和硫酸锌16g，料水重量比为1:1.25；
所述制备二级原种包括如下步骤：将配好的富硒棉籽壳培养基分装，高压灭菌，压力0.15MPa，灭菌90min，冷却后无菌条件下接入一级母种，在温度26℃，湿度50％下培养27天，得到所述二级原种。
所述三级栽培种的制备包括如下步骤：
所述富硒棉籽壳培养基每100kg包括如下原料：棉籽壳78kg，石灰1kg，石膏1kg，玉米面5kg，麦麸15kg，亚硒酸钠20g，硫酸亚铁23g和硫酸锌24g，料水重量比为1:1.25；
所述制备三级栽培种包括如下步骤：将配好的富硒棉籽壳培养基分装灭菌，灭菌采用常压灭菌，100℃灭菌10h，冷却后无菌条件下接入二级原种，在温度26℃，湿度50％下培养26天，得到所述三级栽培种；
其中，所述二级原种和三级栽培种的培养恒温室切忌阳光直射，注意通风换气，保持室内清洁。
所述出菇包括如下步骤：
所述出菇采用的每100kg培养料包括如下原料：玉米芯粉100kg，石灰5kg，石膏0.5kg，玉米面3kg，麦麸10kg，亚硒酸钠16g，硫酸亚铁16g，硫酸锌16g和多菌灵60g，料水重量比为1:(1.25-1.3)。
所述出菇包括如下步骤：将所述富硒棉籽壳培养料翻到发酵培养7天，发酵温度为70℃，再对三级栽培种进行培养出菇将所述培养料装菌棒袋，采用一层培养料一层食用菌的方式装袋，一袋3-5层菌种，优选4层菌种，将装好的菌袋摆在温室大棚菇床上，温度20℃，湿度80％，4层一字墙摆放，2-3天一倒垛，一透养，培养20天待菌棒里菌丝长满、菌袋呈白色，在菇床上改放成一字墙，并把菌袋两头扎口打开，待菇盖长到直径8-10cm即可采摘。
对比例1
一种有机硒食用菌的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：制备一级母种，将得到的一级母种制备二级原种，将得到的二级原种制备三级栽培种，将得到的三级栽培种播种、出菇、采收和烘干；
其中，所述一级母种的制备包括如下步骤：
配制一级母种培养基-富硒马铃薯琼脂培养基：取去皮、洗净马铃薯200g，切块煮沸，用四层纱布过滤弃渣，过滤后放入液体放入烧瓶中，再加入葡萄糖20g、硫酸镁3g、磷酸二氢钾1.5g、蛋白胨3g、VB1 1g、亚硒酸钠0.15g、碳酸钙1g、硫酸亚铁1g和硫酸锌1g，溶解后制得1000mL培养基，调整pH 5.5-6.5，加入琼脂20g至完全溶化，分装试管进行高压灭菌，待锅内压力上升至0.05MPa时，放冷空气回零，继续加热至压力0.15MPa时灭菌25-40min；
其中，液体培养基分装时占试管1/5，棉塞长4.5cm，塞入罐内长度为试管长度的2/3，即便与通气又可防止杂菌侵入；灭菌后的试管培养基待温度降至50℃时，摆成斜面，冷却凝固后可形成斜面试管培养基。
母种的培育：选好菇种，在接菌室进行胞子分离和组织分离，在20℃温度下培养8天，筛选菌种，做瓶皿，驯化，转接试管，扩大繁殖，经不断驯化、扩培的菌种，中试后为母种。
其中，所选菇种在接菌箱里用75％酒精棉球擦拭，再用接菌刀打开菌盖，取菌盖与菌柄之间约5mm见方小块，试管口放在酒精灯火焰上操作：打开试管棉塞，把所取小方块放入试管里的培养基上，再盖好棉塞；所述驯化，转接试管，扩大繁殖要反复5此，以使菌株不断提高在富硒培养基上繁殖能力，使之健康生长，并使含有有机硒的纯度越来越高，最终达到100％的纯有机硒。
其中，所述母种采用木粒培养基试管封存。
所述二级原种的制备包括如下步骤：
所述制备二级原种采用富硒棉籽壳培养基，所述富硒棉籽壳培养基每100kg包括如下原料：棉籽壳78kg，石灰1kg，石膏1kg，玉米面5kg，麦麸15kg，亚硒酸钠15g，硫酸亚铁15g和硫酸锌15g，料水重量比为1:1.25；
所述制备二级原种包括如下步骤：将配好的富硒棉籽壳培养基分装，高压灭菌，压力0.15MPa，灭菌90min，冷却后无菌条件下接入一级母种，在温度26℃，湿度50％下培养28天，得到所述二级原种。
所述三级栽培种的制备包括如下步骤：
所述富硒棉籽壳培养基每100kg包括如下原料：棉籽壳78kg，石灰1kg，石膏1kg，玉米面5kg，麦麸15kg，亚硒酸钠20g，硫酸亚铁20g和硫酸锌20g，料水重量比为1:1.25；
所述制备三级栽培种包括如下步骤：将配好的富硒棉籽壳培养基分装灭菌，灭菌采用常压灭菌，100℃灭菌10h，冷却后无菌条件下接入二级原种，在温度26℃，湿度50％下培养28天，得到所述三级栽培种；
其中，所述二级原种和三级栽培种的培养恒温室切忌阳光直射，注意通风换气，保持室内清洁。
所述出菇包括如下步骤：
所述出菇采用的每100kg培养料包括如下原料：棉籽壳78kg，石灰1kg，石膏1kg，玉米面5kg，麦麸15kg，亚硒酸钠8g，硫酸亚铁10g，硫酸锌20g和多菌灵30g，料水重量比为1:(1.25-1.3)。
所述出菇包括如下步骤：将所述培养料装菌棒袋，采用一层培养料一层食用菌的方式装袋，一袋3-5层菌种，优选4层菌种，将装好的菌袋摆在温室大棚菇床上，温度20℃，湿度80％，4层“井”字形摆放，2-3天一倒垛，一透养，培养20天待菌棒里菌丝长满、菌袋呈白色，在菇床上改放成一字墙，并把菌袋两头扎口打开，待菇盖长到直径8-10cm即可采摘。
对比例2
一种有机硒食用菌的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：制备一级母种，将得到的一级母种制备二级原种，将得到的二级原种制备三级栽培种，将得到的三级栽培种播种、出菇、采收和烘干；
其中，所述一级母种的制备包括如下步骤：
配制一级母种培养基-富硒马铃薯琼脂培养基：取去皮、洗净马铃薯200g，切块煮沸，用四层纱布过滤弃渣，过滤后放入液体放入烧瓶中，再加入葡萄糖20g、硫酸镁3g、磷酸二氢钾1.5g、蛋白胨20g、VB1 1g、亚硒酸钠0.15g、碳酸钙1g和硫酸亚铁1g，溶解后制得1000mL培养基，调整pH 5.5-6.5，加入琼脂20g至完全溶化，分装试管进行高压灭菌，待锅内压力上升至0.05MPa时，放冷空气回零，继续加热至压力0.15MPa时灭菌25-40min；
其中，液体培养基分装时占试管1/5，棉塞长4.5cm，塞入罐内长度为试管长度的2/3，即便与通气又可防止杂菌侵入；灭菌后的试管培养基待温度降至50℃时，摆成斜面，冷却凝固后可形成斜面试管培养基。
母种的培育：选好菇种，在接菌室进行胞子分离和组织分离，在20℃温度下培养8天，筛选菌种，做瓶皿，驯化，转接试管，扩大繁殖，经不断驯化、扩培的菌种，中试后为母种。
其中，所选菇种在接菌箱里用75％酒精棉球擦拭，再用接菌刀打开菌盖，取菌盖与菌柄之间约5mm见方小块，试管口放在酒精灯火焰上操作：打开试管棉塞，把所取小方块放入试管里的培养基上，再盖好棉塞；所述驯化，转接试管，扩大繁殖要反复5此，以使菌株不断提高在富硒培养基上繁殖能力，使之健康生长，并使含有有机硒的纯度越来越高，最终达到100％的纯有机硒。
其中，所述母种采用木粒培养基试管封存。
所述二级原种的制备包括如下步骤：
所述制备二级原种采用富硒棉籽壳培养基，所述富硒棉籽壳培养基每100kg包括如下原料：谷粒78kg，石灰1kg，石膏1kg，玉米面5kg，麦麸15kg，亚硒酸钠15g，硫酸亚铁15g和硫酸锌15g，料水重量比为1:1.25；
所述制备二级原种包括如下步骤：将配好的富硒棉籽壳培养基分装，高压灭菌，压力0.15MPa，灭菌90min，冷却后无菌条件下接入一级母种，在温度26℃，湿度50％下培养25天，得到所述二级原种。
所述三级栽培种的制备包括如下步骤：
所述富硒棉籽壳培养基每100kg包括如下原料：棉籽壳78kg，石灰1kg，石膏1kg，玉米面5kg，麦麸15kg，亚硒酸钠20g，硫酸亚铁20g和硫酸锌20g，料水重量比为1:1.25；
所述制备三级栽培种包括如下步骤：将配好的富硒棉籽壳培养基分装灭菌，灭菌采用常压灭菌，100℃灭菌10h，冷却后无菌条件下接入二级原种，在温度26℃，湿度50％下培养30天，得到所述三级栽培种；
其中，所述二级原种和三级栽培种的培养恒温室切忌阳光直射，注意通风换气，保持室内清洁。
所述出菇包括如下步骤：
所述出菇采用的每100kg培养料包括如下原料：棉籽壳78kg，石灰1kg，石膏1kg，玉米面5kg，麦麸15kg，亚硒酸钠15g，硫酸亚铁10g和多菌灵200g，料水重量比为1:(1.25-1.3)。
所述出菇包括如下步骤：将所述培养料装菌棒袋，采用一层培养料一层食用菌的方式装袋，一袋3-5层菌种，优选4层菌种，将装好的菌袋摆在温室大棚菇床上，温度20℃，湿度80％，4层“井”字形摆放，2-3天一倒垛，一透养，培养20天待菌棒里菌丝长满、菌袋呈白色，在菇床上改放成一字墙，并把菌袋两头扎口打开，待菇盖长到直径8-10cm即可采摘。
对比例3
一种有机硒食用菌的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：制备一级母种，将得到的一级母种制备二级原种，将得到的二级原种制备三级栽培种，将得到的三级栽培种播种、出菇、采收和烘干；
其中，所述一级母种的制备包括如下步骤：
配制一级母种培养基-富硒马铃薯琼脂培养基：取去皮、洗净马铃薯200g，切块煮沸，用四层纱布过滤弃渣，过滤后放入液体放入烧瓶中，再加入葡萄糖20g、硫酸镁3g、磷酸二氢钾1.5g、蛋白胨20g、VB1 1g、亚硒酸钠0.15g、碳酸钙1g和硫酸锌1g，溶解后制得1000mL培养基，调整pH 5.5-6.5，加入琼脂20g至完全溶化，分装试管进行高压灭菌，待锅内压力上升至0.05MPa时，放冷空气回零，继续加热至压力0.15MPa时灭菌25-40min；
其中，液体培养基分装时占试管1/5，棉塞长4.5cm，塞入罐内长度为试管长度的2/3，即便与通气又可防止杂菌侵入；灭菌后的试管培养基待温度降至50℃时，摆成斜面，冷却凝固后可形成斜面试管培养基。
母种的培育：选好菇种，在接菌室进行胞子分离和组织分离，在20℃温度下培养8天，筛选菌种，做瓶皿，驯化，转接试管，扩大繁殖，经不断驯化、扩培的菌种，中试后为母种。
其中，所选菇种在接菌箱里用75％酒精棉球擦拭，再用接菌刀打开菌盖，取菌盖与菌柄之间约5mm见方小块，试管口放在酒精灯火焰上操作：打开试管棉塞，把所取小方块放入试管里的培养基上，再盖好棉塞；所述驯化，转接试管，扩大繁殖要反复5此，以使菌株不断提高在富硒培养基上繁殖能力，使之健康生长，并使含有有机硒的纯度越来越高，最终达到100％的纯有机硒。
其中，所述母种采用木粒培养基试管封存。
所述二级原种的制备包括如下步骤：
所述制备二级原种采用富硒棉籽壳培养基，所述富硒棉籽壳培养基每100kg包括如下原料：麦粒78kg，石灰1kg，石膏1kg，玉米面5kg，麦麸15kg，亚硒酸钠15g，硫酸亚铁15g和硫酸锌15g，料水重量比为1:1.25；
所述制备二级原种包括如下步骤：将配好的富硒棉籽壳培养基分装，高压灭菌，压力0.15MPa，灭菌90min，冷却后无菌条件下接入一级母种，在温度26℃，湿度50％下培养30天，得到所述二级原种。
所述三级栽培种的制备包括如下步骤：
所述富硒棉籽壳培养基每100kg包括如下原料：棉籽壳78kg，石灰1kg，石膏1kg，玉米面5kg，麦麸15kg，亚硒酸钠20g，硫酸亚铁20g和硫酸锌20g，料水重量比为1:1.25；
所述制备三级栽培种包括如下步骤：将配好的富硒棉籽壳培养基分装灭菌，灭菌采用常压灭菌，100℃灭菌10h，冷却后无菌条件下接入二级原种，在温度26℃，湿度50％下培养25天，得到所述三级栽培种；
其中，所述二级原种和三级栽培种的培养恒温室切忌阳光直射，注意通风换气，保持室内清洁。
所述出菇包括如下步骤：
所述出菇采用的每100kg培养料包括如下原料：棉籽壳78kg，石灰1kg，石膏1kg，玉米面5kg，麦麸15kg，亚硒酸钠20g，硫酸亚铁20g，硫酸锌20g和多菌灵100g，料水重量比为1:(1.25-1.3)。
所述出菇包括如下步骤：将所述富硒棉籽壳培养料翻到发酵培养3天，发酵温度为50℃，再对三级栽培种进行培养出菇将所述培养料装菌棒袋，采用一层培养料一层食用菌的方式装袋，一袋3-5层菌种，优选4层菌种，将装好的菌袋摆在温室大棚菇床上，温度20℃，湿度80％，4层一字墙摆放，2-3天一倒垛，一透养，培养20天待菌棒里菌丝长满、菌袋呈白色，在菇床上改放成一字墙，并把菌袋两头扎口打开，待菇盖长到直径8-10cm即可采摘。
将实施例1-4和对比例1-4采摘后测试出菇率，结果如下表1所示：
表1
由表1可以看出，实施例1-4的出菇率都在80％以上，而对比例1-2改变出菇培养基中亚硒酸钠、硫酸亚铁、硫酸锌和多菌灵的含量使得出菇率大大下降，下降了30％以上，对比例3改变半生料的发酵温度和时间，也使得使得出菇率也大大下降了，可见，通过添加这三种组分，使得出菇率增加，菌类的营养品质提高，营养成分增多，在亚硒酸钠的基础上增加了硫酸亚铁、硫酸锌和多菌灵，对改善人身造血功能和身体发育、营养不良、溃疡等有良好的作用，利于免疫力的提高；采用生料或半生料培养出菇，也使得出菇率大大提高，简化了工序，采用多层培养，加大了接种量。
申请人声明，本发明通过上述实施例来说明本发明的详细方法，但本发明并不局限于上述详细方法，即不意味着本发明必须依赖上述详细方法才能实施。所属技术领域的技术人员应该明了，对本发明的任何改进，对本发明产品各原料的等效替换及辅助成分的添加、具体方式的选择等，均落在本发明的保护范围和公开范围之内。
Claims (10)
1.一种有机硒食用菌的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：制备一级母种，将得到的一级母种制备二级原种，将得到的二级原种制备三级栽培种，将得到的三级栽培种播种、出菇、采收和烘干得到所述有机硒食用菌；
其中，所述出菇采用富硒棉籽壳培养料，所述富硒棉籽壳培养料每100kg包括如下原料：棉籽壳或玉米芯粉70-100kg，石灰1-5kg，石膏0.5-3kg，玉米面3-10kg，麦麸10-18kg，亚硒酸钠15-30g，硫酸亚铁15-30g，硫酸锌15-30g和多菌灵50-160g，料水重量比为1:(1.2-1.4)；
其中，所述出菇采用生料培养和/或半生料培养。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述制备出菇采用富硒棉籽壳培养料，所述富硒棉籽壳培养料每100kg包括如下原料：棉籽壳78kg，石灰1kg，石膏1kg，玉米面5kg，麦麸15kg，亚硒酸钠20g，硫酸亚铁20g，硫酸锌20g和多菌灵100g，料水重量比为1:(1.25-1.3)。
3.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，所述出菇采用生料培养包括如下步骤：将所述培养料装菌袋，采用一层培养料一层食用菌的方式装袋，一袋3-5层菌种，优选4层菌种，将装好的菌袋摆在温室大棚菇床上，4层“井”字形摆放，2-3天一倒垛，一透养，待菌棒里菌丝长满、菌袋呈白色，在菇床上改放成一字墙，并把菌袋两头扎口打开，待出菇；
优选地，所述待菌棒里菌丝长满为培养18-25天，优选为20天；
优选地，所述温室大棚的温度为10-40℃，优选为15-32℃；
优选地，所述温室大棚的湿度为75-90％，优选为80％；
优选地，所述出菇为菇盖长到直径8-10cm后采摘。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的制备方法，其特征在于，所述出菇采用半生料培养包括如下步骤：将所述富硒棉籽壳培养料翻到发酵培养6-12天，优选7天，发酵温度为65-73℃，优选70℃，再对三级栽培种进行培养出菇；
优选地，所述半生料培养出菇的具体包括如下步骤：将所述培养料装菌袋，采用一层培养料一层食用菌的方式装袋，一袋3-5层菌种，优选4层菌种，将装好的菌袋摆在温室大棚菇床上，摆一字墙，2-3天一倒垛，一透养，待菌棒里菌丝长满、菌袋呈白色，在菇床上改放成一字墙，并把菌袋两头扎口打开，待出菇；
优选地，所述待菌棒里菌丝长满为培养18-25天，优选为20天；
优选地，所述温室大棚的温度为10-40℃，优选为15-32℃；
优选地，所述温室大棚的湿度为75-90％，优选为80％；
优选地，所述出菇为菇盖长到直径8-10cm后采摘。
5.根据权利要求1-4中任一项所述的制备方法，其特征在于，所述制备一级母种采用富硒马铃薯琼脂培养基，所述富硒马铃薯琼脂培养基每1000mL包括如下原料：马铃薯160-240g，糖类16-23g、硫酸镁1-8g、磷酸二氢钾1-5g、蛋白胨15-30g、VB1 0.5-5g、亚硒酸钠0.1-3g、碳酸钙1-8g、硫酸亚铁1-8g、硫酸锌1-8g和琼脂15-30g。
6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述富硒马铃薯琼脂培养基每1000mL包括如下原料：马铃薯200g，糖类20g、硫酸镁3g、磷酸二氢钾1.5g、蛋白胨20g、VB1 1g、亚硒酸钠0.15g、碳酸钙1g、硫酸亚铁1g、硫酸锌1g和琼脂20g；
优选地，所述糖类为葡萄糖和/或蔗糖；
优选地，所述富硒马铃薯琼脂培养基的制备包括如下步骤：
(1)取去皮、洗净马铃薯，切块煮沸，用四层纱布过滤弃渣，过滤后放入液体放入烧瓶中，再加入葡萄糖或蔗糖、硫酸镁、磷酸二氢钾、蛋白胨、VB1、亚硒酸钠、碳酸钙、硫酸亚铁和硫酸锌，溶解后制得1000mL培养基，调整pH5.5-6.5，加入琼脂至完全溶化，分装试管进行高压灭菌，待锅内压力上升至0.05MPa时，放冷空气回零，继续加热至压力0.15MPa时灭菌25-40min。
7.根据权利要求1-6中任一项所述的制备方法，其特征在于，所述制备一级母种包括如下步骤：
选好菇种，在接菌室进行胞子分离和组织分离，在15-28℃温度下培养7-10天，筛选菌种，做瓶皿，驯化，转接试管，扩大繁殖，经不断驯化、扩培的菌种，中试后为母种；
优选地，所述制备二级原种采用富硒棉籽壳培养基，所述富硒棉籽壳培养基每100kg包括如下原料：棉籽壳、谷粒或麦粒70-100kg，石灰0.5-5kg，石膏0.8-5kg，玉米面3-10kg，麦麸10-18kg，亚硒酸钠10-18g，硫酸亚铁10-18g和硫酸锌10-18g，料水重量比为1:(1.2-1.5)。
8.根据权利要求1-7中任一项所述的制备方法，其特征在于，所述制备二级原种采用富硒棉籽壳培养基，所述富硒棉籽壳培养基每100kg包括如下原料：棉籽壳、谷粒或麦粒78kg，石灰1kg，石膏1kg，玉米面5kg，麦麸15kg，亚硒酸钠15g，硫酸亚铁15g和硫酸锌15g，料水重量比为1:1.25；
优选地，所述制备二级原种包括如下步骤：将配好的富硒棉籽壳培养基分装，高压灭菌，压力0.15MPa，灭菌90min，冷却后无菌条件下接入一级母种，在温度25-28℃，湿度30-55％下培养25-30天，得到所述二级原种。
9.根据权利要求1-5中任一项所述的制备方法，其特征在于，所述制备三级栽培种采用富硒棉籽壳培养基，所述富硒棉籽壳培养基每100kg包括如下原料：棉籽壳70-100kg，石灰0.5-5kg，石膏0.8-5kg，玉米面3-10kg，麦麸10-18kg，亚硒酸钠12-30g，硫酸亚铁12-30g和硫酸锌12-30g，料水重量比为1:(1.2-1.4)；
优选地，所述制备三级栽培种采用富硒棉籽壳培养基，所述富硒棉籽壳培养基每100kg包括如下原料：棉籽壳78kg，石灰1kg，石膏1kg，玉米面5kg，麦麸15kg，亚硒酸钠20g，硫酸亚铁20g和硫酸锌20g，料水重量比为1:(1.25-1.3)；
优选地，所述制备三级栽培种包括如下步骤：将配好的富硒棉籽壳培养基分装灭菌，冷却后无菌条件下接入二级原种，在温度25-28℃，湿度30-55％下培养25-30天，得到所述三级栽培种；
优选地，所述灭菌为高压灭菌或常压灭菌；
优选地，所述高压灭菌的条件为压力0.15MPa，灭菌90min；
优选地，所述常压灭菌的条件为温度100℃，灭菌10h。
10.一种如权利要求1-9中任一项所述的制备方法制备得到的有机硒食用菌。
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