CN106244498B - 一种果蔬农药残留净化菌剂的制备方法 - Google Patents
一种果蔬农药残留净化菌剂的制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN106244498B CN106244498B CN201610814765.8A CN201610814765A CN106244498B CN 106244498 B CN106244498 B CN 106244498B CN 201610814765 A CN201610814765 A CN 201610814765A CN 106244498 B CN106244498 B CN 106244498B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- lactobacillus strain
- culture
- culturing
- fruit
- microbial inoculum
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 235000012055 fruits and vegetables Nutrition 0.000 title claims abstract description 22
- 239000002068 microbial inoculum Substances 0.000 title claims abstract description 16
- 239000000447 pesticide residue Substances 0.000 title claims abstract description 13
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 7
- 238000000746 purification Methods 0.000 title claims description 8
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 32
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 claims abstract description 19
- 229940039696 lactobacillus Drugs 0.000 claims abstract description 19
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 18
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims abstract description 17
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 claims abstract description 16
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 claims abstract description 16
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims abstract description 12
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims abstract description 9
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 claims abstract description 6
- 238000009629 microbiological culture Methods 0.000 claims abstract description 4
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims description 23
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims description 23
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims description 23
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 18
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 13
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 10
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 9
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 claims description 8
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 claims description 8
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 claims description 8
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims description 8
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 claims description 8
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 claims description 8
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 claims description 7
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 claims description 7
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 claims description 7
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 claims description 7
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 claims description 5
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 claims description 5
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 5
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 claims description 5
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 4
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims description 4
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 4
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 claims description 3
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 3
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 claims description 3
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 claims description 3
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 claims description 3
- 238000004321 preservation Methods 0.000 claims description 3
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 3
- GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M potassium dihydrogen phosphate Chemical compound [K+].OP(O)([O-])=O GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 2
- LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K potassium phosphate Substances [K+].[K+].[K+].[O-]P([O-])([O-])=O LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 abstract description 9
- 230000006378 damage Effects 0.000 abstract description 8
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 4
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 abstract description 3
- 244000005700 microbiome Species 0.000 abstract 1
- 239000000575 pesticide Substances 0.000 description 12
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 5
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 5
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 5
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 4
- 239000005916 Methomyl Substances 0.000 description 4
- 241001052560 Thallis Species 0.000 description 4
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 4
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 4
- UHXUZOCRWCRNSJ-QPJJXVBHSA-N methomyl Chemical compound CNC(=O)O\N=C(/C)SC UHXUZOCRWCRNSJ-QPJJXVBHSA-N 0.000 description 4
- VOEYXMAFNDNNED-UHFFFAOYSA-N metolcarb Chemical compound CNC(=O)OC1=CC=CC(C)=C1 VOEYXMAFNDNNED-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000011160 research Methods 0.000 description 4
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 4
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 3
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 3
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 3
- 244000291564 Allium cepa Species 0.000 description 2
- 235000002732 Allium cepa var. cepa Nutrition 0.000 description 2
- KXDHJXZQYSOELW-UHFFFAOYSA-M Carbamate Chemical compound NC([O-])=O KXDHJXZQYSOELW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CKUAXEQHGKSLHN-UHFFFAOYSA-N [C].[N] Chemical compound [C].[N] CKUAXEQHGKSLHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 2
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 2
- 239000000152 carbamate pesticide Substances 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 2
- 238000000034 method Methods 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 230000033764 rhythmic process Effects 0.000 description 2
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 description 2
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 description 2
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 2
- GNFTZDOKVXKIBK-UHFFFAOYSA-N 3-(2-methoxyethoxy)benzohydrazide Chemical compound COCCOC1=CC=CC(C(=O)NN)=C1 GNFTZDOKVXKIBK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000004998 Abdominal Pain Diseases 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- FGUUSXIOTUKUDN-IBGZPJMESA-N C1(=CC=CC=C1)N1C2=C(NC([C@H](C1)NC=1OC(=NN=1)C1=CC=CC=C1)=O)C=CC=C2 Chemical compound C1(=CC=CC=C1)N1C2=C(NC([C@H](C1)NC=1OC(=NN=1)C1=CC=CC=C1)=O)C=CC=C2 FGUUSXIOTUKUDN-IBGZPJMESA-N 0.000 description 1
- 206010010071 Coma Diseases 0.000 description 1
- 208000034347 Faecal incontinence Diseases 0.000 description 1
- 241000192125 Firmicutes Species 0.000 description 1
- 206010019233 Headaches Diseases 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 206010028813 Nausea Diseases 0.000 description 1
- 239000005941 Thiamethoxam Substances 0.000 description 1
- 206010044565 Tremor Diseases 0.000 description 1
- 206010046543 Urinary incontinence Diseases 0.000 description 1
- 206010047513 Vision blurred Diseases 0.000 description 1
- 206010047700 Vomiting Diseases 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 230000019771 cognition Effects 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 208000002173 dizziness Diseases 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 210000003608 fece Anatomy 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- 231100000869 headache Toxicity 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 238000004895 liquid chromatography mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 231100000053 low toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 230000008693 nausea Effects 0.000 description 1
- 231100000956 nontoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid;potassium Chemical compound [K].OP(O)(O)=O PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000035790 physiological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 description 1
- 238000011218 seed culture Methods 0.000 description 1
- 231100001229 severe poisoning Toxicity 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- NWWZPOKUUAIXIW-FLIBITNWSA-N thiamethoxam Chemical compound [O-][N+](=O)\N=C/1N(C)COCN\1CC1=CN=C(Cl)S1 NWWZPOKUUAIXIW-FLIBITNWSA-N 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000008673 vomiting Effects 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
- C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
- C11D3/00—Other compounding ingredients of detergent compositions covered in group C11D1/00
- C11D3/16—Organic compounds
- C11D3/38—Products with no well-defined composition, e.g. natural products
- C11D3/381—Microorganisms
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- Virology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
本发明公开了一种果蔬农药残留净化菌剂的制备方法，乳酸菌菌种经培养后离心清洗，添加氯化钠水溶液，乳酸菌菌种保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，简称CGMCC，保藏编号：CGMCC No.10574，在乳酸菌菌体中添加氯化钠溶液，一方面能够减少低温对菌体的伤害；另一方面能够抑制乳酸菌的生长；菌种容易控制，方便易得；生产成本低，安全无危害，净化农药残留效果好。
Description
发明领域
本发明涉及一种果蔬农药的净化菌剂，具体地说，涉及一种果蔬农药净化菌剂的制备方法，属于生物技术领域。
背景技术
食品安全是消费者最为关注的焦点之一，我国从2015年开始实施新食品法，对食品安全问题格外严厉。然而，为保证果蔬产量，种植中使用农药不能避免，如2014年洋葱中农药残留噻虫嗪事件，引起了质检总局的高度重视，至今仍是输日洋葱的监控项目。果蔬类产品，属于消费者日常生活中必备的食品，有些甚至清洗后直接食用，若果蔬表面有农药残留或残留过量，很容易对食用者造成伤害。大多数农药属于脂溶性化合物，仅仅靠水清洗并不能很好的清除。随着检测技术的发展和各国在食品安全研究方面的突破，各国都加大了对农药残留降解的研究。氨基甲酸酯类农药是果蔬种植中常用的杀虫剂，虽然多数属低毒农药，但对人体和环境仍然有害。为保护果蔬的生长，需要喷洒氨基甲酸酯类药物，因此果蔬表面很容易残留农药，若清除不干净被误食，可以引起头痛、头晕、恶心、呕吐、腹痛、流口水、视物不清，重度中毒还出现肌肉震颤、昏迷、大小便失禁等。目前对氨基甲酸酯类农药残留的降解研究已有报道，多偏重于芽孢杆菌，虽也能达到降解的目的，但芽孢杆菌研究不透明，一些对人有毒，若用于清除果蔬表面农药，可能带来新的危害。目前，在市场上已有一些果蔬类农残净化菌剂的商品，但生产和市场主要掌握在国外大型生物公司，价格高，且多未被国内权威机构认可。国内净化菌剂起步较晚，受生产成本、培养条件、检测手段和消费者认知的制约，还未推广普及。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种果蔬农药净化菌剂的制备方法，生产本菌剂成本低、工艺简单、无毒和不破坏果蔬表面、并具有稳定安全的优点。
为解决以上问题，本发明采用以下技术方案：一种果蔬农药残留净化菌剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
乳酸菌菌种经培养后离心清洗，添加氯化钠水溶液。
一种优化方案，乳酸菌菌种保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，简称CGMCC，保藏编号：CGMCC No.10574。
进一步地，乳酸菌菌种的培养包括：
无菌接种：取冰箱4℃保藏的乳酸菌菌种在超净台接种到细菌培养基，培养温度37℃，转速120转/分钟摇床培养3天，得种子。
进一步地，乳酸菌菌种的培养还包括：
发酵培养：将培养好的种子超净台全部接种到发酵培养基，无菌搅拌均匀，温箱中培养，温度为37℃培养2天，降低温度到30℃培养1天，得菌液。
进一步地，细菌培养基包括：
酵母膏7.5g、蛋白胨7.5g、葡萄糖10g、磷酸二氢钾2g、0.5mL吐温80，121℃高压灭菌35min。
进一步地，发酵培养基包括：
酵母膏10g、蛋白胨10g、玉米浆40g、蔗糖10g、碳酸钙粉5g，调pH到6.5，121℃高压灭菌35min后冰箱4℃保藏。
进一步地，乳酸菌菌种的离心清洗包括：
将培养好的菌液装入离心管，4℃，3000转/分离心10分钟，弃去上层溶液，留用下层菌液。
进一步地，乳酸菌菌种的离心清洗还包括：
将下层菌液中加入等体积纯水，涡混均匀，4℃，3000转/分离心10分钟，弃去上层溶液，留用下层菌液。
进一步地，离心清洗后的乳酸菌菌体中添加相同重量的1mol/L的氯化钠水溶液，并冰箱-10℃保藏。
乳酸菌指发酵糖类主要产物为乳酸的一类无芽孢、革兰氏染色阳性细菌的总称。凡能从葡萄糖或乳糖的发酵过程中产生乳酸的细菌统称为乳酸菌。这是一群相当庞杂的细菌，目前至少可分为18个属，共有200多种。除极少数外，其中绝大部分都是人体内必不可少的且具有重要生理功能的菌群，其广泛存在于人体的肠道中。目前已被国内外生物学家所证实，肠内乳酸菌与健康长寿有着非常密切的直接关系。
本发明采用以上技术方案，具有以下优点：
采用以上培养基，成分简单，可溶于水，有利于后处理提取，减少提取成本；其中，酵母膏、蛋白胨和玉米浆均可为菌种10574提供碳氮源；蔗糖提供速效碳源；玉米浆提供微量元素和宽松的培养环境；碳酸钙粉能够中和发酵产生的酸度，发酵菌种10574的后期培养更有利；pH 6.5为给菌种提供一个微酸的环境，利于消毒杀菌和乳酸菌10574的生长。
经试验后发现：37℃的培养温度在发酵初期可以加速菌种10574菌体繁殖生长；培养2天后将温度降低到30℃，可以有效控制发酵的节奏，提高菌体的产量。
加水可以将残留的发酵液除去，清洗菌体，过多的发酵培养基残留会减弱菌剂对果蔬表面农药的清除效果；
经试验后发现：在乳酸菌菌体中添加氯化钠溶液，一方面能够减少低温对菌体的伤害；另一方面能够抑制乳酸菌的生长。
菌种容易控制，方便易得；生产成本低，安全无危害，净化农药残留效果好。
下面结合附图和实施例对本发明进行详细说明。
附图说明
附图1为灭多威和速灭威的对照TIC色谱图(100μg/kg)；
附图2为本发明中灭多威和速灭威经菌剂清除后的基质色谱图。
具体实施方式
实施例1，一种果蔬农药残留净化菌剂的制备方法，包括以下步骤：
a、选取乳酸菌菌种：取冰箱4℃保存的菌种10574，放入超净台上，静置2小时，乳酸菌菌种保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，简称CGMCC，保藏编号：CGMCC No.10574；
b、细菌培养基(种子培养基)：酵母膏7.5g，蛋白胨7.5g，葡萄糖10g，磷酸二氢钾2g，0.5mL吐温80，定容到1000mL，以100mL分装入500mL三角瓶，121℃高压灭菌35min；
c、发酵培养基：酵母膏10g，蛋白胨10g，玉米浆40g，蔗糖10g，碳酸钙粉5g，用水定容到1000mL，搅拌均匀，调pH到6.5，装入3000mL三角瓶，121℃高压灭菌35min后冰箱4℃保藏；
经试验后发现：采用以上培养基，成分简单，可溶于水，有利于后处理提取，减少提取成本；其中，酵母膏、蛋白胨和玉米浆均可为菌种10574提供碳氮源；蔗糖提供速效碳源；玉米浆提供微量元素和宽松的培养环境；碳酸钙粉能够中和发酵产生的酸度，发酵菌种10574的后期培养更有利；pH 6.5为给菌种提供一个微酸的环境，利于消毒杀菌和乳酸菌10574的生长。
d、无菌接种：取冰箱4℃保藏的菌种10574在超净台接种到细菌培养基，培养温度37℃，转速120转/分钟摇床培养3天得种子；
e、发酵培养：将步骤d培养好的种子超净台全部接种到发酵培养基(3000mL三角瓶中)，无菌搅拌均匀，温箱中培养，温度依次为37℃培养2天，降低温度到30℃培养1天得菌液；
经试验后发现：37℃的培养温度在发酵初期可以加速菌种10574菌体繁殖生长；培养2天后将温度降低到30℃，可以有效控制发酵的节奏，提高菌体的产量。
f、将步骤e培养好菌液装入100mL离心管，4℃，3000转/分离心10分钟，弃去上层溶液，留用下层菌液；
g、在步骤f所得下层菌液中加入等体积纯水(菌液∶纯水＝1∶1)，涡混均匀，4℃，3000转/分离心10分钟，弃去上层溶液，留用下层菌液；
加水可以将残留的发酵液除去，清洗菌体，过多的发酵培养基残留会减弱菌剂对果蔬表面农药的清除效果；
h、收集步骤g乳酸菌菌体，称取重量，添加相同重量的1mol/L的氯化钠水溶液，冰箱-10℃保藏；
经试验后发现：在乳酸菌菌体中添加氯化钠溶液，一方面能够减少低温对菌体的伤害；另一方面能够抑制乳酸菌的生长。
检验：将步骤h所得菌液放置室温1小时，以1％的投料比(质量比)添加菌液到灭多威和速灭威混合溶液中(100μg/kg)，同时做空白对照。两小时后将反应液离心，上清液过滤膜后经液相色谱质谱检测含量，结果经乳酸菌处理后，灭多威和速灭威在质谱上未出现提取离子峰，色谱图如附图2，说明已经被菌剂完全处理。空白对照色谱图见附图1。
除非另有说明，本发明中所采用的百分数均为体积百分数。
以上所述为本发明最佳实施方式的举例，其中未详细述及的部分均为本领域普通技术人员的公知常识。本发明的保护范围以权利要求的内容为准，任何基于本发明的技术启示而进行的等效变换，也在本发明的保护范围之内。
Claims (1)
1.一种果蔬农药残留净化菌剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
乳酸菌菌种经培养后离心清洗，添加氯化钠水溶液；乳酸菌菌种保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，简称CGMCC，保藏编号：CGMCC No.10574；乳酸菌菌种的培养包括：
无菌接种：取冰箱4℃保藏的乳酸菌菌种在超净台接种到细菌培养基，培
养温度37℃，转速120转/分钟摇床培养3天，得种子；乳酸菌菌种的培养还包括：
发酵培养：将培养好的种子超净台全部接种到发酵培养基，无菌搅拌均匀，
温箱中培养，温度为37℃培养2天，降低温度到30℃培养1天，得菌液；细菌培养基包括：
酵母膏7.5g、蛋白胨7.5g、葡萄糖10g、磷酸二氢钾2g、0.5mL吐温80，121℃高压灭菌35min；发酵培养基包括：
酵母膏 10g、蛋白胨10g、玉米浆40g、蔗糖10g、碳酸钙粉5g，调pH到
6.5，121℃高压灭菌35 min后冰箱4℃保藏；乳酸菌菌种的离心清洗包括：
将培养好的菌液装入离心管， 4 ℃，3000转/分离心10分钟，弃去上层
溶液，留用下层菌液；乳酸菌菌种的离心清洗还包括：
将下层菌液中加入等体积纯水，涡混均匀，4 ℃，3000转/分离心10分钟，
弃去上层溶液，留用下层菌液；离心清洗后的乳酸菌菌体中添加相同重量的1 mol/L的氯化钠水溶液，并冰箱-10 ℃保藏。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201610814765.8A CN106244498B (zh) | 2016-08-31 | 2016-08-31 | 一种果蔬农药残留净化菌剂的制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201610814765.8A CN106244498B (zh) | 2016-08-31 | 2016-08-31 | 一种果蔬农药残留净化菌剂的制备方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN106244498A CN106244498A (zh) | 2016-12-21 |
| CN106244498B true CN106244498B (zh) | 2020-01-14 |
Family
ID=57599429
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201610814765.8A Active CN106244498B (zh) | 2016-08-31 | 2016-08-31 | 一种果蔬农药残留净化菌剂的制备方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN106244498B (zh) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106614572B (zh) * | 2016-12-27 | 2019-06-25 | 浙江大学 | 一种通过红茶菌消减枸杞中有机磷农药残留的方法 |
| CN107099391A (zh) * | 2017-05-10 | 2017-08-29 | 颐中（青岛）实业有限公司 | 一种用于清除果蔬表面ddt的微生物菌剂及其制备方法 |
| CN109260645B (zh) * | 2018-10-31 | 2021-07-02 | 湖南中茂生物科技有限公司 | 一种去除植物来源黄酮类提取物中残留农药的方法 |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102391917A (zh) * | 2011-09-22 | 2012-03-28 | 澄思源生物科技（上海）有限公司 | 一种微生物果蔬农药清洗剂及其制备方法 |
| CN104888399A (zh) * | 2015-06-26 | 2015-09-09 | 东北农业大学 | 一种降解青贮中有机磷农药的方法 |
| CN104911123A (zh) * | 2015-05-19 | 2015-09-16 | 孙军 | 一株乳酸片球菌p3-4及其筛选鉴定和在降解红霉素、罗红霉素中的应用 |
-
2016
- 2016-08-31 CN CN201610814765.8A patent/CN106244498B/zh active Active
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102391917A (zh) * | 2011-09-22 | 2012-03-28 | 澄思源生物科技（上海）有限公司 | 一种微生物果蔬农药清洗剂及其制备方法 |
| CN104911123A (zh) * | 2015-05-19 | 2015-09-16 | 孙军 | 一株乳酸片球菌p3-4及其筛选鉴定和在降解红霉素、罗红霉素中的应用 |
| CN104888399A (zh) * | 2015-06-26 | 2015-09-09 | 东北农业大学 | 一种降解青贮中有机磷农药的方法 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 培养基中3株乳酸菌对7种有机磷农药的降解作用;王晶等;《中国乳品工业》;20111231;第39卷(第6期);摘要 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN106244498A (zh) | 2016-12-21 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN105132308B (zh) | 一种能降低食品中生物胺含量的植物乳杆菌及其应用 | |
| CN101701203B (zh) | 一株植物乳杆菌及其应用 | |
| CN101724591B (zh) | 植物乳杆菌菌株及其应用 | |
| CN101338283B (zh) | 一种干酪乳杆菌及其在固态发酵中的应用 | |
| CN100451105C (zh) | 侧孢芽孢杆菌及由该菌种制备的土壤接种剂 | |
| CN106479927A (zh) | 利用地衣芽孢杆菌生物合成纳米硒的方法及其应用 | |
| CN102056489B (zh) | 新型发酵乳及其应用 | |
| CN106244498B (zh) | 一种果蔬农药残留净化菌剂的制备方法 | |
| CN113215016B (zh) | 一株解淀粉芽孢杆菌及其应用 | |
| CN111808765B (zh) | 一株高效降解呕吐毒素的枯草芽孢杆菌及其应用 | |
| CN106472961A (zh) | 一种生物降解饲料中赭曲霉毒素的脱毒剂及其制备工艺 | |
| CN100406552C (zh) | 一株成团泛菌及其发酵培养方法与应用 | |
| CN110916177A (zh) | 一种通过酶酵耦合技术制备的海带酵素方法 | |
| CN114586890A (zh) | 一种利用菌草制作复合菌群饲料的方法 | |
| CN111909878A (zh) | 一种具有清除展青霉素作用的干酪乳杆菌 | |
| CN106566788B (zh) | 利用耐银土壤芽孢杆菌生物合成纳米硒的方法及其应用 | |
| CN102676366A (zh) | 一种拐枣醋 | |
| CN108251476B (zh) | 从酶制剂废水中提取维生素b12的方法 | |
| CN103005382A (zh) | 降胆固醇菌粉，含有该菌粉的降胆固醇复合调味酱及其应用 | |
| CN104757544B (zh) | 一种具有抑菌作用的膳食补充剂及其制备方法和应用 | |
| CN116536207A (zh) | 一种萎缩芽孢杆菌wlkysy-4、生物菌剂及应用 | |
| CN110760456A (zh) | 一种用于降解胆固醇的植物乳杆菌La1及其应用 | |
| CN102102082A (zh) | 海带内生活性菌株的分离纯化方法 | |
| CN109984189A (zh) | 一种由地衣芽孢杆菌、萎缩芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌所产抑菌物复配的鲜切果蔬保鲜剂 | |
| CN115418337A (zh) | 一株木质素降解菌及其在水稻秸秆微贮中的应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| TR01 | Transfer of patent right |
Effective date of registration: 20220705 Address after: 261000 north of Beigong East Street and west of Jinma Road, Beiyuan community, Xincheng street, high tech Zone, Weifang City, Shandong Province (Room 301, Weifang Zhongsheng import and Export Co., Ltd.) Patentee after: Shandong grapefruit Mdt InfoTech Ltd. Address before: 261041 Weifang entry exit inspection and Quarantine Bureau of the people's Republic of China, No. 39 Siping Road, Kuiwen District, Weifang City, Shandong Province Patentee before: Sun Jun |
|
| TR01 | Transfer of patent right | ||
| TR01 | Transfer of patent right |
Effective date of registration: 20240115 Address after: 719000 South side of Haotong Road, Qingshui Industrial Park, Yushen Industrial Zone, Yulin City, Shaanxi Province Patentee after: Shaanxi Hengrun Linong Biotechnology Co.,Ltd. Address before: 261000 north of Beigong East Street and west of Jinma Road, Beiyuan community, Xincheng street, high tech Zone, Weifang City, Shandong Province (Room 301, Weifang Zhongsheng import and Export Co., Ltd.) Patentee before: Shandong grapefruit Mdt InfoTech Ltd. |
|
| TR01 | Transfer of patent right |