CN104888399A - 一种降解青贮中有机磷农药的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种降解青贮中有机磷农药的方法，属于青贮饲料加工技术领域；本方法利用植物乳杆菌在玉米青贮发酵体系中对有机磷农药的降解作用，使用优势降解菌株，优化降解条件参数，以获得最大程度的农药降解；最终产品内容物特点为有机磷农药降解率超过90％，形成组织状态、口感和质构相对稳定的青贮饲料。

Description

一种降解青贮中有机磷农药的方法
技术领域
本发明属于青贮饲料加工技术，主要涉及一种降解青贮中有机磷农药的方法。
背景技术
有机磷农药是农业化生产的必要生产资料，在其保障农业发展的同时，也污染了饮水、饲料、农、畜副产品等，同时对环境造成很大的影响，近年来农药污染已经成为人们普遍关注的热点，应该受到重视。畜产品中有机磷农药残留主要来自于两个方面：一方面来自于动物体内的农药残留；另一方面来自于原料生产基地周围环境中农药残留对畜产品的直接污染。青贮原料中有机磷农药的物理清除和化学降解的应用都有一定的局限性，而对有机磷农药的生物降解具有低成本，范围应用广，降解效率高，降解的产物对生态系统破坏小等优点，所以受到人们越来越多的关注，随着微生物对有机磷农药的降解技术的不断完善与发展，这个处理有机磷农药残留的方法逐步得到认可，确定了微生物在农药降解中的不可缺少的重要地位。在有机磷农药的降解菌株中，既有专一性非常强的菌株，也有广谱性的降解菌株，植物乳杆菌在食品和饲料加工生产中广泛应用。
利用植物乳杆菌在玉米青贮发酵体系中对有机磷农药的降解作用，使用优势降解菌株，优化降解条件参数，以获得最大程度的农药降解，对降低食品原料中农药残留，确保食品和农产品安全具有重要的意义。
发明内容
本发明的目的是，利用植物乳杆菌在玉米青贮发酵体系中对有机磷农药的降解作用，使用优势降解菌株，优化降解条件参数，以获得最大程度的农药降解。
本发明的产品及制备方法如下：
一种降解青贮中有机磷农药的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：(1)蜡熟后期玉米植株尚青绿时候收割，切短长度为1～5cm，将将微生物制剂均匀的喷洒在切碎的玉米及秸秆上，微生物制剂是直投的植物乳杆菌，喷洒菌液活菌数为1×104～1×106cfu mL-1，每组放在青贮罐密封好于室温18～22℃避光保存，每周取一次样品，然后立即进行有机磷农药的提取、净化，及气相色谱的进行测定分析；(2)准确称取2.0～5.0g饲料于50mL三角瓶中，在三角瓶中加入0.2g活性炭，加入10mL的二氯甲烷，萃取10～20min，提取液分离出来，然后再用10mL二氯甲烷重复上述萃取操作二次，最后合并提取液使其通过放有3g左右无水硫酸钠的玻璃小漏斗，脱去其中的水分、活性炭和玉米青贮饲料残渣，最后用少量二氯甲烷洗涤玻璃小漏斗2次，合并全部提取液于分液漏斗中，振摇2min，静置分层，收集全部二氯甲烷，移取15mL提取液至试管中，用氮吹仪吹至近干，再用色谱级丙酮定容至1mL，供气相色谱测定用。
所述的降解青贮中有机磷农药的方法，其特征在于，所述的青贮的发酵参数优化为：蜡熟后期玉米植株尚青绿时候收割，切短长度为3cm，将将微生物制剂均匀的喷洒在切碎的玉米及秸秆上，每组放在青贮罐密封好于室温20℃避光保存，每周取一次样品，然后立即进行有机磷农药的提取、净化，及气相色谱的进行测定分析。
所述的降解青贮中有机磷农药的方法，其特征在于，所述的青贮中有机磷农药萃取纯化参数优化为：准确称取3.0g饲料于50mL三角瓶中，在三角瓶中加入0.2g活性炭，加入10mL的二氯甲烷，萃取15min，提取液分离出来，然后再用10mL二氯甲烷重复上述萃取操作二次，最后合并提取液使其通过放有3g左右无水硫酸钠的玻璃小漏斗，脱去其中的水分、活性炭和玉米青贮饲料残渣，最后用少量二氯甲烷洗涤玻璃小漏斗2次，合并全部提取液于分液漏斗中，振摇2min，静置分层，收集全部二氯甲烷，移取15mL提取液至试管中，用氮吹仪吹至近干，再用色谱级丙酮定容至1mL，供气相色谱测定用。
本发明最终产品内容物特点：有机磷农药降解率超过90％，形成组织状态、口感和质构相对稳定的青贮饲料。
附图说明
图1是本发明的工艺流程图；
图2是有机磷农药甲拌磷和毒死蜱标品的气相色谱图；
图3是青贮样品中机磷农药甲拌磷和毒死蜱的气相色谱图；
具体实施方式
下面结合附图来对具体实施例来进一步描述。
一种降解青贮中有机磷农药的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：(1)蜡熟后期玉米植株尚青绿时候收割，切短长度为1～5cm，将将微生物制剂均匀的喷洒在切碎的玉米及秸秆上，微生物制剂是直投的植物乳杆菌，喷洒菌液活菌数为1×104～1×106cfu mL-1，每组放在青贮罐密封好于室温18～22℃避光保存，每周取一次样品，然后立即进行有机磷农药的提取、净化，及气相色谱的进行测定分析；(2)准确称取2.0～5.0g饲料于50mL三角瓶中，在三角瓶中加入0.2g活性炭，加入10mL的二氯甲烷，萃取10～20min，提取液分离出来，然后再用10mL二氯甲烷重复上述萃取操作二次，最后合并提取液使其通过放有3g左右无水硫酸钠的玻璃小漏斗，脱去其中的水分、活性炭和玉米青贮饲料残渣，最后用少量二氯甲烷洗涤玻璃小漏斗2次，合并全部提取液于分液漏斗中，振摇2min，静置分层，收集全部二氯甲烷，移取15mL提取液至试管中，用氮吹仪吹至近干，再用色谱级丙酮定容至1mL，供气相色谱测定用。
所述的降解青贮中有机磷农药的方法，其特征在于，所述的青贮的发酵参数优化为：蜡熟后期玉米植株尚青绿时候收割，切短长度为3cm，将将微生物制剂均匀的喷洒在切碎的玉米及秸秆上，每组放在青贮罐密封好于室温20℃避光保存，每周取一次样品，然后立即进行有机磷农药的提取、净化，及气相色谱的进行测定分析。
所述的降解青贮中有机磷农药的方法，其特征在于，所述的青贮中有机磷农药萃取纯化参数优化为：准确称取3.0g饲料于50mL三角瓶中，在三角瓶中加入0.2g活性炭，加入10mL的二氯甲烷，萃取15min，提取液分离出来，然后再用10mL二氯甲烷重复上述萃取操作二次，最后合并提取液使其通过放有3g左右无水硫酸钠的玻璃小漏斗，脱去其中的水分、活性炭和玉米青贮饲料残渣，最后用少量二氯甲烷洗涤玻璃小漏斗2次，合并全部提取液于分液漏斗中，振摇2min，静置分层，收集全部二氯甲烷，移取15mL提取液至试管中，用氮吹仪吹至近干，再用色谱级丙酮定容至1mL，供气相色谱测定用。
实施例1
(1)蜡熟后期玉米植株尚青绿时候收割，切短长度为2cm，将将微生物制剂均匀的喷洒在切碎的玉米及秸秆上，微生物制剂是直投的植物乳杆菌，喷洒菌液活菌数为1×104cfu mL-1，每组放在青贮罐密封好于室温20℃避光保存，每周取一次样品，然后立即进行有机磷农药的提取、净化，及气相色谱的进行测定分析。
(2)准确称取3.0g饲料于50mL三角瓶中，在三角瓶中加入0.2g活性炭，加入10mL的二氯甲烷，萃取10min，提取液分离出来，然后再用10mL二氯甲烷重复上述萃取操作二次，最后合并提取液使其通过放有3g左右无水硫酸钠的玻璃小漏斗，脱去其中的水分、活性炭和玉米青贮饲料残渣，最后用少量二氯甲烷洗涤玻璃小漏斗2次，合并全部提取液于分液漏斗中，振摇2min，静置分层，收集全部二氯甲烷，移取15mL提取液至试管中，用氮吹仪吹至近干，再用色谱级丙酮定容至1mL，供气相色谱测定用。
实施例2
(1)蜡熟后期玉米植株尚青绿时候收割，切短长度为3cm，将将微生物制剂均匀的喷洒在切碎的玉米及秸秆上，微生物制剂是直投的植物乳杆菌，喷洒菌液活菌数为1×105cfu mL-1，每组放在青贮罐密封好于室温18℃避光保存，每周取一次样品，然后立即进行有机磷农药的提取、净化，及气相色谱的进行测定分析。
(2)准确称取4.0g饲料于50mL三角瓶中，在三角瓶中加入0.2g活性炭，加入10mL的二氯甲烷，萃取15min，提取液分离出来，然后再用10mL二氯甲烷重复上述萃取操作二次，最后合并提取液使其通过放有3g左右无水硫酸钠的玻璃小漏斗，脱去其中的水分、活性炭和玉米青贮饲料残渣，最后用少量二氯甲烷洗涤玻璃小漏斗2次，合并全部提取液于分液漏斗中，振摇2min，静置分层，收集全部二氯甲烷，移取15mL提取液至试管中，用氮吹仪吹至近干，再用色谱级丙酮定容至1mL，供气相色谱测定用。
实施例3
(1)蜡熟后期玉米植株尚青绿时候收割，切短长度为4cm，将将微生物制剂均匀的喷洒在切碎的玉米及秸秆上，微生物制剂是直投的植物乳杆菌，喷洒菌液活菌数为1×106cfu mL-1，每组放在青贮罐密封好于室温20℃避光保存，每周取一次样品，然后立即进行有机磷农药的提取、净化，及气相色谱的进行测定分析。
(2)准确称取5.0g饲料于50mL三角瓶中，在三角瓶中加入0.2g活性炭，加入10mL的二氯甲烷，萃取20min，提取液分离出来，然后再用10mL二氯甲烷重复上述萃取操作二次，最后合并提取液使其通过放有3g左右无水硫酸钠的玻璃小漏斗，脱去其中的水分、活性炭和玉米青贮饲料残渣，最后用少量二氯甲烷洗涤玻璃小漏斗2次，合并全部提取液于分液漏斗中，振摇2min，静置分层，收集全部二氯甲烷，移取15mL提取液至试管中，用氮吹仪吹至近干，再用色谱级丙酮定容至1mL，供气相色谱测定用。
实施例4
(1)蜡熟后期玉米植株尚青绿时候收割，切短长度为5cm，将将微生物制剂均匀的喷洒在切碎的玉米及秸秆上，微生物制剂是直投的植物乳杆菌，喷洒菌液活菌数为1×105cfu mL-1，每组放在青贮罐密封好于室温22℃避光保存，每周取一次样品，然后立即进行有机磷农药的提取、净化，及气相色谱的进行测定分析。
(2)准确称取3.0g饲料于50mL三角瓶中，在三角瓶中加入0.2g活性炭，加入10mL的二氯甲烷，萃取15min，提取液分离出来，然后再用10mL二氯甲烷重复上述萃取操作二次，最后合并提取液使其通过放有3g左右无水硫酸钠的玻璃小漏斗，脱去其中的水分、活性炭和玉米青贮饲料残渣，最后用少量二氯甲烷洗涤玻璃小漏斗2次，合并全部提取液于分液漏斗中，振摇2min，静置分层，收集全部二氯甲烷，移取15mL提取液至试管中，用氮吹仪吹至近干，再用色谱级丙酮定容至1mL，供气相色谱测定用。
实施例5
(1)蜡熟后期玉米植株尚青绿时候收割，切短长度为2cm，将将微生物制剂均匀的喷洒在切碎的玉米及秸秆上，微生物制剂是直投的植物乳杆菌，喷洒菌液活菌数为1×106cfu mL-1，每组放在青贮罐密封好于室温20℃避光保存，每周取一次样品，然后立即进行有机磷农药的提取、净化，及气相色谱的进行测定分析。
(2)准确称取3.0g饲料于50mL三角瓶中，在三角瓶中加入0.2g活性炭，加入10mL的二氯甲烷，萃取15min，提取液分离出来，然后再用10mL二氯甲烷重复上述萃取操作二次，最后合并提取液使其通过放有3g左右无水硫酸钠的玻璃小漏斗，脱去其中的水分、活性炭和玉米青贮饲料残渣，最后用少量二氯甲烷洗涤玻璃小漏斗2次，合并全部提取液于分液漏斗中，振摇2min，静置分层，收集全部二氯甲烷，移取15mL提取液至试管中，用氮吹仪吹至近干，再用色谱级丙酮定容至1mL，供气相色谱测定用。
实施例6
(1)蜡熟后期玉米植株尚青绿时候收割，切短长度为2cm，将将微生物制剂均匀的喷洒在切碎的玉米及秸秆上，微生物制剂是直投的植物乳杆菌，喷洒菌液活菌数为1×106cfu mL-1，每组放在青贮罐密封好于室温18℃避光保存，每周取一次样品，然后立即进行有机磷农药的提取、净化，及气相色谱的进行测定分析。
(2)准确称取5.0g饲料于50mL三角瓶中，在三角瓶中加入0.2g活性炭，加入10mL的二氯甲烷，萃取20min，提取液分离出来，然后再用10mL二氯甲烷重复上述萃取操作二次，最后合并提取液使其通过放有3g左右无水硫酸钠的玻璃小漏斗，脱去其中的水分、活性炭和玉米青贮饲料残渣，最后用少量二氯甲烷洗涤玻璃小漏斗2次，合并全部提取液于分液漏斗中，振摇2min，静置分层，收集全部二氯甲烷，移取15mL提取液至试管中，用氮吹仪吹至近干，再用色谱级丙酮定容至1mL，供气相色谱测定用。

Claims (3)

1.一种降解青贮中有机磷农药的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：(1)蜡熟后期玉米植株尚青绿时候收割，切短长度为1～5cm，将将微生物制剂均匀的喷洒在切碎的玉米及秸秆上，微生物制剂是直投的植物乳杆菌，喷洒菌液活菌数为1×104～1×106cfu mL-1，每组放在青贮罐密封好于室温18～22℃避光保存，每周取一次样品，然后立即进行有机磷农药的提取、净化，及气相色谱的进行测定分析；(2)准确称取2.0～5.0g饲料于50mL三角瓶中，在三角瓶中加入0.2g活性炭，加入10mL的二氯甲烷，萃取10～20min，提取液分离出来，然后再用10mL二氯甲烷重复上述萃取操作二次，最后合并提取液使其通过放有3g左右无水硫酸钠的玻璃小漏斗，脱去其中的水分、活性炭和玉米青贮饲料残渣，最后用少量二氯甲烷洗涤玻璃小漏斗2次，合并全部提取液于分液漏斗中，振摇2min，静置分层，收集全部二氯甲烷，移取15mL提取液至试管中，用氮吹仪吹至近干，再用色谱级丙酮定容至1mL，供气相色谱测定用。
2.根据权利要求1所述的降解青贮中有机磷农药的方法，其特征在于，所述的青贮的发酵参数优化为：蜡熟后期玉米植株尚青绿时候收割，切短长度为3cm，将将微生物制剂均匀的喷洒在切碎的玉米及秸秆上，每组放在青贮罐密封好于室温20℃避光保存，每周取一次样品，然后立即进行有机磷农药的提取、净化，及气相色谱的进行测定分析。
3.根据权利要求1所述的降解青贮中有机磷农药的方法，其特征在于，所述的青贮中有机磷农药萃取纯化参数优化为：准确称取3.0g饲料于50mL三角瓶中，在三角瓶中加入0.2g活性炭，加入10mL的二氯甲烷，萃取15min，提取液分离出来，然后再用10mL二氯甲烷重复上述萃取操作二次，最后合并提取液使其通过放有3g左右无水硫酸钠的玻璃小漏斗，脱去其中的水分、活性炭和玉米青贮饲料残渣，最后用少量二氯甲烷洗涤玻璃小漏斗2次，合并全部提取液于分液漏斗中，振摇2min，静置分层，收集全部二氯甲烷，移取15mL提取液至试管中，用氮吹仪吹至近干，再用色谱级丙酮定容至1mL，供气相色谱测定用。
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