CN106167461B - 一种水溶性靛红衍生物及其制备方法与应用 - Google Patents

一种水溶性靛红衍生物及其制备方法与应用 Download PDF

Info

Publication number
CN106167461B
CN106167461B CN201610589432.XA CN201610589432A CN106167461B CN 106167461 B CN106167461 B CN 106167461B CN 201610589432 A CN201610589432 A CN 201610589432A CN 106167461 B CN106167461 B CN 106167461B
Authority
CN
China
Prior art keywords
compound
water
soluble
preparation
application
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201610589432.XA
Other languages
English (en)
Other versions
CN106167461A (zh
Inventor
郁彭
王栋
滕玉鸥
苗龙飞
王静
张倩
袁媛
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Tianjin University of Science and Technology
Original Assignee
Tianjin University of Science and Technology
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Tianjin University of Science and Technology filed Critical Tianjin University of Science and Technology
Priority to CN201610589432.XA priority Critical patent/CN106167461B/zh
Priority to US16/089,968 priority patent/US10703717B2/en
Priority to PCT/CN2016/091979 priority patent/WO2018014368A1/zh
Publication of CN106167461A publication Critical patent/CN106167461A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN106167461B publication Critical patent/CN106167461B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D209/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D209/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom condensed with one carbocyclic ring
    • C07D209/04—Indoles; Hydrogenated indoles
    • C07D209/30—Indoles; Hydrogenated indoles with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, directly attached to carbon atoms of the hetero ring
    • C07D209/32—Oxygen atoms
    • C07D209/38—Oxygen atoms in positions 2 and 3, e.g. isatin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

本发明涉及一种新型水溶性靛红衍生物及其制备方法与应用，以含有酚羟基类靛红衍生物为底物，通过在酚羟基邻位引入二甲胺亚甲基，该类化合物水溶性显著提高，并且相关抗肿瘤活性研究发现其活性并未降低，甚至有提高。该类化合物在抗肿瘤药物开发应用方面具有广阔的前景。

Description

一种水溶性靛红衍生物及其制备方法与应用
技术领域
本发明属于新化合物合成和药物应用领域，涉及一类新型水溶性的靛红类衍生物，包括靛红的合成、评价及应用。
技术背景
吲哚酮类化合物作为氮杂环类生物碱，广泛存在于自然界中，具有良好的生物活性，如抗肿瘤、抗病毒、抗菌、降血压及抗心脑血管疾病等多种生物活性，含有吲哚酮核心结构的药物在临床上用于肿瘤、炎症、心脑血管及精神类等疾病的治疗。代表性的衍生物如靛红(Isatin，见图1)、靛玉红(Indirubin，见图1)和四环吲哚酮生物碱(Rhynchophyline，见图1)等。研究发现靛红作为天然治疗癌症的先导化合物对多种肿瘤细胞的生长有抑制作用，同时其对正常细胞不产生作用，这有效降低了抗肿瘤药物的毒副作用。靛红衍生物的上述生物学特性既传承了传统中药的优点又克服了现有抗癌药物损害正常细胞的缺点。但有文献报道发现吲哚酮类衍生物存在溶解性差，生物利用度低的缺点，从而限制了该类化合物在临床上的应用。因此设计合成具有良好水溶性及生物活性的吲哚酮类衍生物意义重大。
Figure GDA0002506299000000011
发明内容
本发明的目的在于提供一种改变含有酚羟基类靛红衍生物水溶性的化合物的结构及相关合成方法，通过在酚羟基邻位引入二甲胺亚甲基，该类化合物水溶性显著提高，并且相关抗肿瘤活性研究发现其活性并未降低，甚至有提高。
本发明的目的是通过以下技术方案实现的：
一种新型水溶性靛红衍生物的结构，结构通式如下
Figure GDA0002506299000000021
其中，R1为烷基，烷氧基，三氟甲基，或者芳基。
一种新型水溶性靛红衍生物的结构，结构通式如下
Figure GDA0002506299000000022
其中，R2为氢或者烷基，R3为连接在苯环上任一位置的α，β-不饱和酯基，烷基，烷氧基，卤素，羧基，氰基或者芳基。
如权利要求1所述的化合物I的制备方法，所述方法包括以下步骤：
Figure GDA0002506299000000023
以已知化合物III为原料，通过Suzuki偶联反应得到IV，再与二甲胺，甲醛在醋酸催化下发生类似曼尼希反应得到最终产物I。
所述的化合物II的制备方法，所述方法包括以下步骤：
Figure GDA0002506299000000024
以化合物V为原料，在三溴化硼作用下脱除甲基得到VI，然后在钒催化剂作用下，与三甲胺氮氧化物反应得到VII，最后与碘代烷烃R3I反应得到产物II。
新型含有二甲胺亚甲基的吲哚酮衍生物，结构如下：
Figure GDA0002506299000000031
新型含有二甲胺亚甲基的吲哚酮衍生物，结构如下：
Figure GDA0002506299000000032
上述新型靛红衍生物在提高水溶性方面的应用。
上述新型水溶性靛红衍生物在作为制备治疗抗肿瘤药物中的作用。
化合物1，2，4，6的体外抗肿瘤活性结果如表1所示(化合物1，2，4，6的结构见实施例)。
表1体外抗肿瘤活性
Figure GDA0002506299000000033
表1结果表明，目标化合物1，2水溶性均得到明显改善。化合物1依然保留了一定的细胞毒活性。化合物2与其前体化合物6相比活性大大提高，且活性优于阳性对照物喜树碱，抗肿瘤效果明显。
本发明的优点和积极效果：
(1)本发明设计了一种能显著提高靛红类化合物水溶性的简便方法，适用于多种含有酚羟基类药物。
(2)本发明提出了两种在酚羟基邻位引入二甲胺亚甲基的合成方法，两种方法均具有操作简便，相关化合物价廉易得，产率高等优点。
(3)本发明所有水溶性靛红类衍生物在抗肿瘤方面的活性较相应水溶性较差的母体化合物活性没有降低，个别略有提高。
附图说明
图1为化合物1在氘代氯仿中的核磁氢谱图；
图2为化合物1在氘代氯仿中的核磁碳谱图；
图3为化合物2在氘代氯仿中的核磁氢谱图；
图4为化合物2在氘代氯仿中的核磁碳谱图；
具体的实施方式
为了理解本发明，下面结合实施例对本发明作进一步说明：下述实施例是说明性的，不是限定性的，不能以下述实施例来限定本发明的保护范围。
实施例1
Figure GDA0002506299000000041
(1)化合物3的合成
25ml圆底烧瓶中依次加入1g 5-溴靛红，4ml DMF，1.83g碳酸钾和0.83g 对甲氧基苄基氯，室温搅拌过夜，TLC检测反应完全。体系中加入水20ml，搅拌10min后析出红色沉淀，过滤，晾干得红色固体1.38g，产率90％。1H NMR(400 MHz，d6-DMSO)δ7.76(d，J＝8.4Hz，1H)7.73(s，1H)，7.36(d，J＝8.4Hz，2H)，6.94(d， J＝8.4Hz，1H)，6.91(d，J＝8.4Hz，2H)，4.84(s，2H)，3.73(s，3H).
(2)化合物4的合成
20ml微波管中依次加入化合物31g，对羟基苯硼酸0.48g，醋酸钾0.43g， [1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯0.24g，1，4-二氧六环溶解，充氩气5min，封口，加入到微反应器中反应条件为温度137℃，时间1h，预搅拌30s，微波吸收水平Normal，TLC检测反应完全。体系中加水50ml搅拌10min，DCM萃取三次每次50ml，饱和食盐水洗涤三次，无水硫酸钠干燥，减压蒸干溶剂。柱层析(PE∶EA＝3∶1)洗脱，得到产品后，蒸干洗脱剂用二氯甲烷及正己烷重结晶得棕色固体0.75g，产率74％。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ9.58(s，1H)，7.79(d，J＝8.4Hz，1H)，7.71(s，1H)，7.46(d，J＝8.4Hz，2H)，7.38(d，J＝8.8Hz，2H)，7.02(d，J＝8.0Hz，1H)，6.91(d，J＝6.8Hz，2H)，6.81(d，J＝6.8Hz，2H)，4.86(s，2H)，3.72(s，3H).
(3)化合物1的合成
25ml圆底瓶中加入化合物4 60mg，乙醇搅拌溶解，依次加入二甲胺146μ L，甲醛66μL，冰醋酸50μL，回流过夜。体系中加水10ml，搅拌10min后DCM 萃取三次每次20ml，饱和食盐水洗涤三次，无水硫酸钠干燥，减压蒸干溶剂。柱层折(DCM∶MeOH＝20∶1)洗脱，得到产品后，蒸干洗脱剂用二氯甲烷及正己烷重结晶得橙红色固体43mg，产率62％。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ2.35(s，6H)， 3.32(s，1H)，3.68(s，2H)，3.79(s，3H)，4.89(s，2H)，6.82(d，1H，J＝8.0Hz)，6.86-6.89 (m，3H)，7.09(s，1H)，7.28-7.30(m，3H)，7.63(d，1H，J＝8.0Hz)，7.76(s，1H).13C NMR (100MHz，CDCl3)δ43.6，44.5，55.3，62.9，111.3，114.5，116.7，118.1，122.5，123.2， 126.4，126.6，126.8，129.0，129.8，136.0，137.3，149.1，158.3，158.4，159.5，183.7. HRMS(ESI-TOF)m/z calcd.for C25H24N2O4[M+H]+：417.1809，found417.1816。
实施例2
Figure GDA0002506299000000061
(1)化合物5的合成
干燥的50ml圆底瓶中加入化合物3 200mg，1ml DCM溶解，氩气保护下加入1M BBr3的二氯甲烷溶液0.12ml，0℃搅拌半小时后，TLC检测反应完全。反应瓶中加入饱和碳酸氢钠水溶液10ml，搅拌10min后DCM萃取，饱和食盐水洗涤三次，无水硫酸钠干燥，减压蒸干溶剂。柱层析(PE∶EA＝3∶1)洗脱，得到产品后，蒸干洗脱剂用二氯甲烷及正己烷重结晶得棕红色固体243mg，产率84％。
1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ9.43(s，1H)，7.76(d，J＝8.4Hz，1H)，7.73(s，1H)，7.23(d，J＝8.4Hz，2H)，6.94(d，J＝8.4Hz，1H)，6.72(d，J＝8.4Hz，2H)，4.78(s，2H).
(2)化合物6的合成
5ml微波管中依次加入化合物5 300mg，丙烯酸甲酯102μL，醋酸钾121mg，双(三苯基膦基)二氯化钯32mg，DMF溶解，充氩气5min，封口，加入到微反应器中反应条件为温度145℃，时间15min，预搅拌30s，微波吸收水平High， TLC检测反应完全。后处理：加水20ml搅拌10min，DCM萃取，饱和食盐水洗涤三次，无水硫酸钠干燥，减压蒸干溶剂。柱层析(PE∶EA＝3∶1)洗脱，得到产品后，蒸干洗脱剂用二氯甲烷及正己烷重结晶得棕红色固体281mg，产率92％。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.78(s，1H)，7.57-7.64(m，2H)，7.22(d，J＝8.4Hz，2H)，6.85-6.81(m，3H)，6.35ld，J＝16.0Hz，1H)，4.97(s，1H)，4.87(s，2H)，3.81(s，3H).
(3)化合物2的合成
干燥的25ml圆底瓶中加入化合物6 50mg，三甲胺氮氧化物34mg，氧化二乙酰丙酮合钒5mg，氩气保护下搅拌回流过夜，TLC检测反应完全。反应液冷却到室温后加水10ml搅拌10min，DCM萃取，饱和食盐水洗涤三次，无水硫酸钠干燥，减压蒸干溶剂。柱层析(DCM∶MeOH＝20∶1)洗脱，得到产品后，蒸干洗脱剂用二氯甲烷及正己烷重结晶得红色固体38mg，产率65％。1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ2.30(s，6H)，3.60(s，2H)，3.80(s，3H)，4.82(s，2H)，6.35(d，1H，J＝16.0 Hz)，6.78(d，1H，J＝8.0Hz)，6.87(d，1H，J＝8.0Hz)，6.93(s，1H)，7.14(d，1H，J＝8.4 Hz)，7.57-7.64(m，2H)，7.77(s，1H).13C NMR(100MHz，CDCl3)δ43.9，44.5，51.9，62.6， 111.5，116.4，118.0，118.1，122.7，124.1，124.3，127.7，128.3，130.4，137.9，142.5，151.7，158.2，158.4，166.9，182.9.HRMS(ESI-TOF)m/z calcd.for C22H22N2O5 [M+Na]+：417.1421，found 417.1425。
抗肿瘤活性测定方法
1、溶液的配制：
DMEM low glucose培养液的配制：购买HyClone MEM low glucose培养基，每瓶500mL，加入10％的胎牛血清和1％的青链霉素溶液，即每瓶培养基加入50mL 的胎牛血清和5mL的青链霉素，培养基的配置在超净工作台中进行，后放置冰箱 4℃保存。
DMEM/F-12培养液的配制：购买HyClone MEM/F-12培养基，每瓶500mL，加入10％的胎牛血清和1％的青链霉素溶液，即每瓶培养基加入50mL的胎牛血清和 5mL的青链霉素，培养基的配置在超净工作台中进行，后放置冰箱4℃保存。
PBS缓冲液的配制：在1000mL锥形瓶中，称取氯化钠8g，氯化钾0.2g，十二水合磷酸氢二钠2.9g，磷酸二氢钾0.2g，加入800mL纯净水充分搅拌溶解后定容至1000mL，高压灭菌后放置冰箱4℃保存。
MTT溶液的配制：称取MTT干粉0.5g，溶于100mL PBS缓冲液中，用0.22μM 滤膜过滤除菌后，放置冰箱-12℃保存。
2、抗肿瘤活性测定的具体步骤：
本发明抗肿瘤活性测定所用3种肿瘤细胞：人肝癌细胞(HepG2)、白血病细胞(K562)和人结肠癌细胞(HCT116)。
利用人肝癌细胞HepG2活性测试
HepG2细胞使用的培养液为含1％的青霉素-链霉素溶液，10％的胎牛血清的 DMEM细胞培养液，培养条件为37℃、含5％CO2的恒温培养箱。具体步骤：
(1)用血球计数板对细胞进行计数后，用DMEM low glucose培养液将其稀释至5x104个/mL；
(2)在96孔板的每个孔里加入100μL细胞悬液吹打混匀，培养箱37℃温育24h；
(3)将所要测试化合物稀释至5种浓度：2mM，0.2mM，20μM，2μM，0.2μM，按照浓度依次加药0.5μL/孔，培养箱37℃温育48h；
(4)加入浓度为5mg/mL的MTT，培养箱37℃温育4h；
(5)加DMSO将细胞溶解，酶标仪测定在490nm和630nm下的OD值；
(6)处理数据，根据OD值计算IC50值。
利用人白血病细胞K562活性测试
K562细胞使用的培养液为含1％的青霉素-链霉素溶液，10％的胎牛血清的RPMI1640细胞培养液，培养条件为37℃、含5％CO2的恒温培养箱。具体步骤：
(1)用血球计数板对细胞进行计数后，用RPMI培养液将其稀释至5x104个/mL；
(2)在96孔板的每个孔里加入100μL细胞悬液，培养箱37℃温育2h；
(3)将所要测试化合物稀释至5种浓度：2mM，0.2mM，20μM，2μM，0.2μM，按照浓度依次加药0.5μL/孔，培养箱37℃温育48h；
(4)加入浓度为5mg/mL的MTT，培养箱37℃温育4小时；
(5)加异丙醇与盐酸裂解液，酶标仪测定在570nm和630nm下的OD值；
(6)处理数据，根据OD值计算IC50值。
利用人结肠癌细胞HCT116活性测试
HCT116细胞使用的培养液为含1％的青霉素-链霉素溶液，10％的胎牛血清的DMEM/F-12细胞培养液，培养条件为37℃、含5％CO2的恒温培养箱。具体步骤：
(1)用血球计数板对细胞进行计数后，用DMEM/F-12培养液将其稀释至5x104个/mL；
(2)在96孔板的每个孔里加入100μL细胞悬液吹打混匀，培养箱37℃温育24h；
(3)将所要测试化合物稀释至5种浓度：2mM，0.2mM，20μM，2μM，0.2μM，按照浓度依次加药0.5μL/孔，培养箱37℃温育48h；
(4)加入浓度为5mg/mL的MTT，培养箱37℃温育4h；
(5)加DMSO将细胞溶解，酶标仪测定在490nm和630nm下的OD值；
(6)处理数据，根据OD值计算IC50值。

Claims (2)

1.含有二甲胺亚甲基的吲哚酮衍生物，其特征在于：结构如下：
Figure FDA0002496662820000011
2.制备如权利要求1所述的含有二甲胺亚甲基的吲哚酮衍生物的方法，其特征在于：所述方法包括以下步骤：
Figure FDA0002496662820000012
CN201610589432.XA 2016-07-20 2016-07-20 一种水溶性靛红衍生物及其制备方法与应用 Active CN106167461B (zh)

Priority Applications (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610589432.XA CN106167461B (zh) 2016-07-20 2016-07-20 一种水溶性靛红衍生物及其制备方法与应用
US16/089,968 US10703717B2 (en) 2016-07-20 2016-07-28 Water-soluble isatin derivative, and manufacturing method and application thereof
PCT/CN2016/091979 WO2018014368A1 (zh) 2016-07-20 2016-07-28 一种水溶性靛红衍生物及其制备方法与应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610589432.XA CN106167461B (zh) 2016-07-20 2016-07-20 一种水溶性靛红衍生物及其制备方法与应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN106167461A CN106167461A (zh) 2016-11-30
CN106167461B true CN106167461B (zh) 2020-08-07

Family

ID=58065575

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201610589432.XA Active CN106167461B (zh) 2016-07-20 2016-07-20 一种水溶性靛红衍生物及其制备方法与应用

Country Status (3)

Country Link
US (1) US10703717B2 (zh)
CN (1) CN106167461B (zh)
WO (1) WO2018014368A1 (zh)

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114292222B (zh) * 2021-12-28 2024-02-02 深圳北京大学香港科技大学医学中心 厚朴酚衍生物及其制备方法和应用
CN114591214B (zh) * 2022-03-25 2023-06-02 北京大学深圳医院 靛红衍生物及其制备方法

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104130175A (zh) * 2014-06-13 2014-11-05 天津科技大学 不同位置取代吲哚酮类衍生物及其应用
CN104130176A (zh) * 2014-06-13 2014-11-05 天津科技大学 一种1,5-二取代吲哚酮类衍生物及其应用

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US9828342B2 (en) * 2012-02-24 2017-11-28 City Of Hope Isatin derivatives, pharmaceutical compositions thereof, and methods of use thereof

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104130175A (zh) * 2014-06-13 2014-11-05 天津科技大学 不同位置取代吲哚酮类衍生物及其应用
CN104130176A (zh) * 2014-06-13 2014-11-05 天津科技大学 一种1,5-二取代吲哚酮类衍生物及其应用

Also Published As

Publication number Publication date
CN106167461A (zh) 2016-11-30
US20190359568A1 (en) 2019-11-28
WO2018014368A1 (zh) 2018-01-25
US10703717B2 (en) 2020-07-07

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN105153136B (zh) 布雷菲德菌素a酯类衍生物及其制备与应用
CN113234116B (zh) 一种雷公藤红素衍生物及其制备方法和医用用途
CN102584780B (zh) 一种蓝萼甲素衍生物及其制备方法和应用
CN106366075B (zh) 吡咯烷类化合物、盐、核磁探针和药物应用、试剂、药物
CN107400146A (zh) 一种抗肿瘤金属铱(ⅲ)配合物及其制备方法和应用
CN106167461B (zh) 一种水溶性靛红衍生物及其制备方法与应用
CN107955042A (zh) 具有抗癌活性的铂类配合物、制备方法及应用
CN115227829B (zh) 酸敏感性适配体雷公藤甲素偶联物及应用
CN114853810A (zh) 一种姜黄素衍生物及其制备方法和应用
CN113880872A (zh) 一种喜树碱硼酸类化合物的制备及其在抗肿瘤方面的用途
CN110437285B (zh) 青蒿素钌金属配合物及其制备方法和医药用途
CN106317033B (zh) 一种水飞蓟宾23-取代衍生物及其注射剂的制备方法和用途
CN103833623A (zh) 一种氨基酸-胺缀合物及其制备方法和应用
CN107827934B (zh) 具有抗癌活性的四价铂配合物、制备方法及应用
CN103864642B (zh) 大黄酸衍生物及其合成方法和用途
CN110294764A (zh) 一种偶氮键连接的鬼臼毒素衍生物及其制备方法
CN115124531A (zh) 一类4-氮杂色胺酮芳香硫醚衍生物、制备方法及应用
CN108484623B (zh) 喜树碱衍生物及其制备方法与应用
CN106928074A (zh) 异丙醇胺取代β‑榄香烯衍生物及其制备方法和用途
CN106478692A (zh) 以1‑(2‑吡啶)‑9‑苄基‑β‑咔啉为配体的硝酸铜配合物及其合成方法和应用
CN103772471B (zh) 一种雌二醇-4-氨甲基吡啶缀合物及其合成方法和应用
CN106543155B (zh) 作为极光激酶抑制剂的查尔酮及黄酮类衍生物
CN116120390B (zh) 一种雷公藤红素衍生物及其制备方法与用途
CN115043878B (zh) 具有肿瘤靶向的生物素化金（i）配合物及其制备方法和应用
CN103405480B (zh) 10-羟基喜树碱-丁二酸与腺病毒结合物及制法和用途

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant
CP02 Change in the address of a patent holder

Address after: No.9, 13th Street, economic and Technological Development Zone, Binhai New Area, Tianjin

Patentee after: Tianjin University of Science and Technology

Address before: 300222 Tianjin University of Science and Technology, 1038 South Road, Tianjin, Hexi District, Dagu

Patentee before: Tianjin University of Science and Technology

CP02 Change in the address of a patent holder