CN106148461A - 一种抗菌肽菌种培养基配方及其制备方法 - Google Patents
一种抗菌肽菌种培养基配方及其制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN106148461A CN106148461A CN201610760539.6A CN201610760539A CN106148461A CN 106148461 A CN106148461 A CN 106148461A CN 201610760539 A CN201610760539 A CN 201610760539A CN 106148461 A CN106148461 A CN 106148461A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- antibacterial peptide
- peptone
- sodium chloride
- culture medium
- potassium dihydrogen
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P21/00—Preparation of peptides or proteins
- C12P21/02—Preparation of peptides or proteins having a known sequence of two or more amino acids, e.g. glutathione
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
本发明涉及一种抗菌肽菌种培养基配方及其制备方法，所述培养基由如下以下重量百分比组分制成：酵母浸粉0.3％‑0.6％、蛋白胨0.5％‑2.0％、氯化钠0.3％‑0.6％、磷酸二氢钾 0.05％‑0.15％、磷酸氢二钾0.03％‑0.1％，余量为蒸馏水；一种抗菌肽菌种的制备方法，它包括以下步骤：（1）培养基配置；（2）调整：用氢氧化钠调整所述培养基液体的 pH 值为6.5‑7.0；（3）杀菌；（4）接种培养：将杀菌处理后的培养基液体冷却到37 ℃以下，接入抗菌肽菌种，调节培养温度30℃‑35℃，所述种子罐通入净化空气进行有氧培养，培养12‑14小时。该菌种培养基配方优化抗菌肽菌种发酵环境。
Description
技术领域
本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种抗菌肽菌种培养基配方及其制备方法。
背景技术
抗菌肽(Antimicrobial pepertides)原指昆虫体内经诱导而产生的一类分子量在4KD左右，具有抗菌活性的碱性多肽物质。最初，人们在研究北美天蚕的免疫机制时，发现其滞育蛹经外界刺激诱导后，其血淋巴中产生了具有抑菌作用的多肽物质，这类抗菌多肽被命名为天蚕素(Cecropins)。后来，从其他昆虫以及两栖类动物、哺乳动物中，也分离到结构相似的抗菌多肽。迄今为止，在不同动物组织中已发现了很多具有抗菌作用的蛋白质和多肽，已有70多种抗菌多肽的结构被测定，抗菌肽的概念得到了极大的扩展。
根据抗菌肽的结构，可将其分为5类：(1)单链无半胱氨酸残基的α-螺旋，或由无规卷曲连接的两段α-螺旋组成的肽；(2)富含某些氨基酸残基但不含半胱氨酸残基的抗菌肽；(3)含1个二硫键的抗菌多肽；(4)有2个或2个以上二硫键、具有β-折叠结构的抗菌肽；(5)由其它已知功能的较大的多肽衍生而来的具有抗菌活性的肽。其中最早分离到的Cecropins和从非洲爪蟾中分离到的Magainins等属于第一类抗菌肽，通常也将其称为Cecropin类抗菌肽，目前对此类抗菌肽的研究也较深入。
抗菌肽是生物中具有抗菌活性的一类小分子多肽，抗菌肽具有抗菌谱广，作用强，不良反应小，安全范围大，无环境污染，不产生抗药性的特点，抗菌肽可广泛存在于许多生物中。
目前已有一些研究报道了利用液态发酵工艺来生产抗菌肽的方法，其中《一种抗菌化合物的制备方法》(CN101979629A)、《一种枯草芽孢杆菌生产抗菌肽的发酵工艺》(CN103966297A)等，但这些方法所用的培养基原料多为葡萄糖、蛋白胨等碳源和氮源，存在生产成本高、获得的抗菌肽效价低等缺点。
发明内容
本发明的目的在于提供了一种抗菌肽菌种培养基配方及其制备方法，该菌种培养基配方优化抗菌肽菌种发酵环境。
为实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：
本发明提供了一种抗菌肽菌种培养基配方，所述培养基由如下以下重量百分比组分制成：酵母浸粉0.3％-0.6％、蛋白胨0.5％-2.0％、氯化钠0.3％-0.6％、磷酸二氢钾 0.05％-0.15％、磷酸氢二钾0.03％-0.1％，余量为蒸馏水。
根据上述的抗菌肽菌种培养基配方，所述培养基由如下以下重量百分比组分制成：酵母浸粉0.4％-0.5％、蛋白胨0.5％-1.5％、氯化钠0.4％-0.6％、磷酸二氢钾 0.08％-0.12％、磷酸氢二钾0.04％-0.06％，余量为蒸馏水。
根据上述的抗菌肽菌种培养基配方，所述培养基由如下以下重量百分比组分制成：酵母浸粉0.5％、蛋白胨1.0％、氯化钠0.5％、磷酸二氢钾 0.1％、磷酸氢二钾0.05％，余量为蒸馏水。
一种抗菌肽菌种的制备方法，它包括以下步骤：
（1）培养基配置：将原料中的氯化钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾溶于部分蒸馏水中充分搅拌，直至溶解；将原料中的酵母浸粉、蛋白胨加入剩余的蒸馏水中搅拌溶解，去除泡沫；将上述含有氯化钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾的水溶液与含有酵母浸粉、蛋白胨的水溶液混匀，制得培养基液体；
（2）调整：用氢氧化钠调整所述培养基液体的 pH 值为6.5-7.0；
（3）杀菌：将所述培养基液体在杀菌设备中进行杀菌处理；在不损失营养的情况下，杀灭培养基液体中的细菌；
（4）接种培养：将杀菌处理后的培养基液体冷却到37 ℃以下，接入抗菌肽菌种，调节培养温度30℃-35℃，所述种子罐通入净化空气进行有氧培养，培养12-14小时，即可制得抗菌肽生产菌种。
与现有技术相比，本发明的有益效果：
本发明原料来源丰富、价格低廉，采用本发明培养出的抗菌肽菌种生长快、活力强、菌体含量高，接种后的菌种萌发率好、发酵周期短、成品率高。
具体实施方式
以下通过实施例对本发明的内容进一步描述，但不局限于这些实施例。
以下原料酵母浸粉、蛋白胨、氯化钠、磷酸二氢钾和磷酸氢二钾均为市售。
实施例1
一种抗菌肽菌种培养基配方，所述培养基由如下以下重量百分比组分制成：酵母浸粉0.3％-0.6％、蛋白胨0.5％-2.0％、氯化钠0.3％-0.6％、磷酸二氢钾 0.05％-0.15％、磷酸氢二钾0.03％-0.1％，余量为蒸馏水。
一种抗菌肽菌种的制备方法，它包括以下步骤：
（1）培养基配置：将原料中的氯化钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾溶于部分蒸馏水中充分搅拌，直至溶解；将原料中的酵母浸粉、蛋白胨加入剩余的蒸馏水中搅拌溶解，去除泡沫；将上述含有氯化钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾的水溶液与含有酵母浸粉、蛋白胨的水溶液混匀，制得培养基液体；
（2）调整：用氢氧化钠调整所述培养基液体的 pH 值为6.5-7.0；
（3）杀菌：将所述培养基液体在杀菌设备中进行杀菌处理；在不损失营养的情况下，杀灭培养基液体中的细菌；
（4）接种培养：将杀菌处理后的培养基液体冷却到37 ℃以下，接入抗菌肽菌种，调节培养温度30℃-35℃，所述种子罐通入净化空气进行有氧培养，培养12-14小时，即可制得抗菌肽生产菌种。
菌种活菌数：培养12小时活菌量≥80亿/毫升。
实施例2
一种抗菌肽菌种培养基配方，所述培养基由如下以下重量百分比组分制成：酵母浸粉0.5％、蛋白胨1.0％、氯化钠0.5％、磷酸二氢钾 0.1％、磷酸氢二钾0.05％，余量为蒸馏水。菌种活菌数：培养13小时活菌量为85亿/毫升。
实施例3
一种抗菌肽菌种培养基配方，所述培养基由如下以下重量百分比组分制成：酵母浸粉0.3％、蛋白胨1.0％、氯化钠0.4％、磷酸二氢钾 0.05％、磷酸氢二钾0.1％，余量为蒸馏水。菌种活菌数：培养12小时活菌量为82亿/毫升。
实施例4
一种抗菌肽菌种培养基配方，所述培养基由如下以下重量百分比组分制成：酵母浸粉0.4％、蛋白胨1.5％、氯化钠0.3％、磷酸二氢钾 0.15％、磷酸氢二钾0.05％，余量为蒸馏水。菌种活菌数：培养14小时活菌量为81亿/毫升。
实施例5
一种抗菌肽菌种培养基配方，所述培养基由如下以下重量百分比组分制成：酵母浸粉0.5％、蛋白胨2.0％、氯化钠0.5％、磷酸二氢钾 0.05％、磷酸氢二钾0.08％，余量为蒸馏水。菌种活菌数：培养13小时活菌量为89亿/毫升。
实施例6
一种抗菌肽菌种培养基配方，所述培养基由如下以下重量百分比组分制成：酵母浸粉0.6％、蛋白胨1.5％、氯化钠0.5％、磷酸二氢钾 0.1％、磷酸氢二钾0.03％，余量为蒸馏水。菌种活菌数：培养14小时活菌量为86亿/毫升。
实施例7
一种抗菌肽菌种培养基配方，所述培养基由如下以下重量百分比组分制成：酵母浸粉0.45％、蛋白胨1.0％、氯化钠0.4％、磷酸二氢钾 0.09％、磷酸氢二钾0.07％，余量为蒸馏水。菌种活菌数：培养13小时活菌量为83亿/毫升。
实施例8
一种抗菌肽菌种培养基配方，所述培养基由如下以下重量百分比组分制成：酵母浸粉0.4％、蛋白胨1.5％、氯化钠0.5％、磷酸二氢钾 0.15％、磷酸氢二钾0.09％，余量为蒸馏水。菌种活菌数：培养12小时活菌量为85亿/毫升。
实施例9
一种抗菌肽菌种培养基配方，所述培养基由如下以下重量百分比组分制成：酵母浸粉0.5％、蛋白胨1.0％、氯化钠0.6％、磷酸二氢钾 0.08％、磷酸氢二钾0.04％，余量为蒸馏水。菌种活菌数：培养14小时活菌量为88亿/毫升。
实施例10
一种抗菌肽菌种培养基配方，所述培养基由如下以下重量百分比组分制成：酵母浸粉0.5％、蛋白胨1.2％、氯化钠0.4％、磷酸二氢钾 0.09％、磷酸氢二钾0.06％，余量为蒸馏水。菌种活菌数：培养13小时活菌量为80亿/毫升。
实施例11
一种抗菌肽菌种培养基配方，所述培养基由如下以下重量百分比组分制成：酵母浸粉0.5％、蛋白胨1.4％、氯化钠0.4％、磷酸二氢钾 0.07％、磷酸氢二钾0.04％，余量为蒸馏水。菌种活菌数：培养12小时活菌量为87亿/毫升。
实施例12
一种抗菌肽菌种培养基配方，所述培养基由如下以下重量百分比组分制成：酵母浸粉0.5％、蛋白胨0.9％、氯化钠0.4％、磷酸二氢钾 0.09％、磷酸氢二钾0.08％，余量为蒸馏水。菌种活菌数：培养14小时活菌量为90亿/毫升。
实施例13
一种抗菌肽菌种培养基配方，所述培养基由如下以下重量百分比组分制成：酵母浸粉0.3％、蛋白胨1.6％、氯化钠0.4％、磷酸二氢钾 0.15％、磷酸氢二钾0.05％，余量为蒸馏水。菌种活菌数：培养13小时活菌量为86亿/毫升。
实施例14
一种抗菌肽菌种培养基配方，所述培养基由如下以下重量百分比组分制成：酵母浸粉0.6％、蛋白胨1.0％、氯化钠0.5％、磷酸二氢钾 0.06％、磷酸氢二钾0.03％，余量为蒸馏水。菌种活菌数：培养12小时活菌量为81亿/毫升。
上述为本发明优选的实施方式，在不脱离本发明所附权利说明书所限定的本发明精神范围内，在形式和细节上对本发明所做的任何变化，都属于本发明的保护范围。
Claims (4)
1.一种抗菌肽菌种培养基配方，其特征在于：所述培养基由如下以下重量百分比组分制成：酵母浸粉0.3％-0.6％、蛋白胨0.5％-2.0％、氯化钠0.3％-0.6％、磷酸二氢钾0.05％-0.15％、磷酸氢二钾0.03％-0.1％，余量为蒸馏水。
2.根据权利要求1所述的抗菌肽菌种培养基配方，其特征在于：所述培养基由如下以下重量百分比组分制成：酵母浸粉0.4％-0.5％、蛋白胨0.5％-1.5％、氯化钠0.4％-0.6％、磷酸二氢钾 0.08％-0.12％、磷酸氢二钾0.04％-0.06％，余量为蒸馏水。
3.根据权利要求1所述的抗菌肽菌种培养基配方，其特征在于：所述培养基由如下以下重量百分比组分制成：酵母浸粉0.5％、蛋白胨1.0％、氯化钠0.5％、磷酸二氢钾 0.1％、磷酸氢二钾0.05％，余量为蒸馏水。
4.一种抗菌肽菌种的制备方法，其特征在于它包括以下步骤：
（1）培养基配置：将原料中的氯化钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾溶于部分蒸馏水中充分搅拌，直至溶解；将原料中的酵母浸粉、蛋白胨加入剩余的蒸馏水中搅拌溶解，去除泡沫；将上述含有氯化钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾的水溶液与含有酵母浸粉、蛋白胨的水溶液混匀，制得培养基液体；
（2）调整：用氢氧化钠调整所述培养基液体的 pH 值为6.5-7.0；
（3）杀菌：将所述培养基液体在杀菌设备中进行杀菌处理；在不损失营养的情况下，杀灭培养基液体中的细菌；
（4）接种培养：将杀菌处理后的培养基液体冷却到37 ℃以下，接入抗菌肽菌种，调节培养温度30℃-35℃，所述种子罐通入净化空气进行有氧培养，培养12-14小时，即可制得抗菌肽生产菌种。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201610760539.6A CN106148461A (zh) | 2016-08-30 | 2016-08-30 | 一种抗菌肽菌种培养基配方及其制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201610760539.6A CN106148461A (zh) | 2016-08-30 | 2016-08-30 | 一种抗菌肽菌种培养基配方及其制备方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN106148461A true CN106148461A (zh) | 2016-11-23 |
Family
ID=57344091
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201610760539.6A Pending CN106148461A (zh) | 2016-08-30 | 2016-08-30 | 一种抗菌肽菌种培养基配方及其制备方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN106148461A (zh) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN110272931A (zh) * | 2019-05-31 | 2019-09-24 | 贵州医科大学 | 一种促进抗菌多肽短杆菌肽合成的培养基及其培养方法 |
| CN114214255A (zh) * | 2022-01-10 | 2022-03-22 | 清远一生自然生物研究院有限公司 | 一种抗菌肽菌种培养基配方及其制备方法 |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102524518A (zh) * | 2012-01-21 | 2012-07-04 | 河北科技大学 | 一种利用侧芽孢杆菌生产抗菌肽的方法 |
| CN102952835A (zh) * | 2011-08-29 | 2013-03-06 | 中农颖泰林州生物科园有限公司 | 一种枯草芽孢杆菌发酵生产天蚕素抗菌肽的方法 |
| CN103333937A (zh) * | 2013-06-06 | 2013-10-02 | 徐州工程学院 | 一种利用枯草芽孢杆菌制备抗菌肽的工艺方法 |
| CN104250660A (zh) * | 2014-09-19 | 2014-12-31 | 中农颖泰林州生物科园有限公司 | 一种抗菌肽发酵培养基处方 |
| CN104878060A (zh) * | 2015-06-25 | 2015-09-02 | 湖南农业大学 | 一种生产抗菌肽的枯草芽孢杆菌培养基及其应用 |
-
2016
- 2016-08-30 CN CN201610760539.6A patent/CN106148461A/zh active Pending
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102952835A (zh) * | 2011-08-29 | 2013-03-06 | 中农颖泰林州生物科园有限公司 | 一种枯草芽孢杆菌发酵生产天蚕素抗菌肽的方法 |
| CN102524518A (zh) * | 2012-01-21 | 2012-07-04 | 河北科技大学 | 一种利用侧芽孢杆菌生产抗菌肽的方法 |
| CN103333937A (zh) * | 2013-06-06 | 2013-10-02 | 徐州工程学院 | 一种利用枯草芽孢杆菌制备抗菌肽的工艺方法 |
| CN104250660A (zh) * | 2014-09-19 | 2014-12-31 | 中农颖泰林州生物科园有限公司 | 一种抗菌肽发酵培养基处方 |
| CN104878060A (zh) * | 2015-06-25 | 2015-09-02 | 湖南农业大学 | 一种生产抗菌肽的枯草芽孢杆菌培养基及其应用 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 张蕾 等: "枯草芽孢杆菌BSD-2产抗菌肽发酵培养基的优化", 《生物工程》 * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN110272931A (zh) * | 2019-05-31 | 2019-09-24 | 贵州医科大学 | 一种促进抗菌多肽短杆菌肽合成的培养基及其培养方法 |
| CN114214255A (zh) * | 2022-01-10 | 2022-03-22 | 清远一生自然生物研究院有限公司 | 一种抗菌肽菌种培养基配方及其制备方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN103553828B (zh) | 一种长保质期的液态复合生物菌肥及其制备方法与应用 | |
| CN106135285B (zh) | 沼泽红假单胞菌生防菌剂在防控稻瘟病中的应用 | |
| AU2021255849A1 (en) | Bacillus strain for applications in agriculture, livestock health and environmental protection | |
| CN105794857A (zh) | 一种木霉菌可湿性粉剂的制备方法 | |
| KR101608735B1 (ko) | 유용 및 기능성미생물을 이용한 미생물균질추출물 및 그 제조방법 | |
| KR101500930B1 (ko) | 항균활성을 가지는 바실러스 리체니포르미스 균주 | |
| CN106148461A (zh) | 一种抗菌肽菌种培养基配方及其制备方法 | |
| CN102907458B (zh) | 生物灭蚊剂及其制备方法 | |
| CN107674850B (zh) | 一种杀根结线虫的莓实假单孢菌Sneb811、代谢产物及应用 | |
| CN109566264A (zh) | 一种富硒香菇的栽培方法及栽培基质 | |
| KR101042070B1 (ko) | 신규 미생물 및 이를 포함하는 친환경 비료 첨가제 | |
| CN102796672A (zh) | 一种蜡蚧轮枝菌固体发酵培养基及其制备方法和应用 | |
| KR101190269B1 (ko) | 작물의 수확량을 증가시키는 신규 균주 판토에아 아나나티스 ｂ1-9 | |
| KR20020031961A (ko) | 길항미생물인 스트렙토마이세스 카슈겐시스 지비에이-0927균주, 이를 포함하는 미생물 제제, 및 이를 이용한 난시들음병 및 오이 흑성병 병해를 방제하는 방법 | |
| CN102584452A (zh) | 一种免疫诱导生物技术制备生物抗菌有机肥料的方法 | |
| CN104774788A (zh) | 垃圾堆肥中草坪耐盐强化复合微生物菌群的制备方法及应用 | |
| CN101935669A (zh) | 一种解毒工程菌及其制备方法和应用 | |
| JPH06133763A (ja) | 新規微生物および植物病害防除剤 | |
| JP4384497B2 (ja) | 菌の早くて十分な胞子形成のための新規組成物およびそれについての方法 | |
| RU2675503C1 (ru) | Способ получения биологического препарата для стимуляции роста и защиты растений от заболеваний | |
| CN112723560A (zh) | 一种北方越冬池塘水质的处理方法 | |
| CN102835596B (zh) | 二点委夜蛾幼虫人工饲料 | |
| KR20120077691A (ko) | 미부화 폐란을 이용한 코디세핀 생산방법 | |
| KR101797937B1 (ko) | 바실러스 아밀로리퀴파시엔스 ｗｅｈ-1 균주 또는 이를 이용한 부화장 동물성 폐기물의 분해물을 함유하는 비료 조성물 | |
| CN114916561B (zh) | 一种防治作物病原菌的生物农药 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20161123 |