CN106124692A - 一种快速测定饲料原料中粗蛋白总含量的方法 - Google Patents

一种快速测定饲料原料中粗蛋白总含量的方法 Download PDF

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张邦辉
赵德志
傅永钢
朱凌盈
于菲
陈少泽
王琼
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Abstract

本发明公开了一种快速测定饲料原料中粗蛋白总含量的方法，通过在过氧化氢催化下与浓硫酸快速反应，反应液再用氢氧化钠反应，生成NH4OH，NH4OH与盐酸滴定中和反应，可以计算得到NH4OH的摩尔量，从而得到氮离子的摩尔数，再用该物质中蛋白总量与易转化蛋白量的换算系数，换算得出该样品粗蛋白总含量，本发明操作简单，换算简便，提高了实际工作中效益。

Description

一种快速测定饲料原料中粗蛋白总含量的方法
技术领域
本发明涉及蛋白含量的测定，具体涉及一种快速测定饲料原料中粗蛋白总含量的方法。
背景技术
动、植物及制品都含有蛋白质，蛋白质是有机大分子，是由氨基酸组成的一类化合物，是构成机体组织、体细胞的基本成分，是生命的物质基础，是生命活动的主要承担者。蛋白质的种类很多，性质、功能各异，如果动物饲料日粮中蛋白质含量较少，饲料利用率就低，机体的生长就会受限，体重下降；蛋白质缺乏严重还会导致动物的繁殖机能紊乱，等。为了衡量动物饲料的优劣，蛋白质含量首当其冲成为评价饲料营养品质的直接指标。又因为原料中粗蛋白质的含量与饲料中的蛋白质含量存在线性关系，蛋白质的含量决定饲料的品质。为了严把质量关，原料中粗蛋白含量已成为饲料生产企业日常检测工作中的必检项目。如公开号为CN104316524的发明专利申请，就公开了植物饲料原料中粗蛋白含量的测定方法，其通过浓硫酸-双氧水混合液消化，再加双氧水消化至清亮透明，定容后为样品消化液，样品消化液与乙酸钠-乙酸混合液及显色剂混合定容为试样液，在分光光度计中测得吸光度，同时用不同体积的氨氮标准液与乙酸钠-乙酸混合液混合定容，也在分光光度计中测得吸光度，以氮的质量浓度为纵坐标，吸光度为横坐标，得到标准工作曲线及标准曲线方程得到氮系数F，然后根据样品质量、制备的样品消化液体积、测定用样品消化液定容体积、试样液体积、测试用试样液体积、显色剂浓度、氮系数F设计公式，计算得到样品中粗蛋白总含量。该方法操作步骤多，粗蛋白总含量计算复杂，降低实际工作中效益。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种快速测定饲料原料中粗蛋白总含量的方法，该方法操作简单，换算简便，提高了实际工作中效益。
本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为：一种快速测定饲料原料中粗蛋白总含量的方法，其步骤如下：
a、在0. 2～0.5g样品粉末中加入质量百分浓度为98%的浓硫酸8ml，混匀后再加入质量百分浓度为30%的过氧化氢溶液8ml，摇匀后静置反应10～15min，得到反应液；样品粉末中不稳定蛋白质易转化的氨基酸在过氧化氢催化下，与浓硫酸快速反应为硫酸铵；
b、在上述反应液加入3～5滴酚酞指示剂，再加入质量百分浓度为35～45%的氢氧化钠溶液至饱和，90℃下蒸馏5～7min，冷却后加入质量百分浓度为1.8～2.2%的硼酸溶液30ml，用蒸馏水定容至130～180ml，得到测定液；
c、用浓度0.09～0.11mol/l的盐酸滴定测定液至溶液不显色，计录盐酸滴定的体积，按盐酸体积与浓度，得出氯离子的摩尔数，按氯离子与氨基摩尔比1:1的比例，得到氮离子的摩尔数，从而得到催化反应中蛋白质含量；
d、按样品国标中样品蛋白总量与易转化蛋白量的换算系数，换算得出样品粗蛋白总含量。
与现有技术相比，本发明的优点在于一种快速测定饲料原料中粗蛋白总含量的方法，通过在过氧化氢催化下与浓硫酸快速反应，反应液再用氢氧化钠反应，生成NH4OH，NH4OH与盐酸滴定中和反应，可以计算得到NH4OH的摩尔量，从而得到氮离子的摩尔数，再用该物质中蛋白总量与易转化蛋白量的换算系数，换算得出该样品粗蛋白总含量，本发明操作简单，换算简便，提高了实际工作中效益。
具体实施方式
以下结合实施例对本发明作进一步详细描述。
实施例1
一种快速测定饲料原料中粗蛋白总含量的方法，步骤如下：在0.2g鸡肉粉中加入质量百分浓度为98%的浓硫酸8ml，混匀后再加入质量百分浓度为30%的过氧化氢溶液8ml，摇匀后静置反应10～15min，得到反应液；样品粉末蛋白质中不稳定易转化的氨基酸在过氧化氢催化下，与浓硫酸快速反应为硫酸铵；在上述反应液加入3～5滴酚酞指示剂，再加入质量百分浓度为35～45%的氢氧化钠溶液至饱和，90℃下蒸馏5～7min，冷却后加入质量百分浓度为1.8～2.2%的硼酸溶液30ml，用蒸馏水定容至130～180ml，得到测定液；用浓度0.1mol/l的盐酸滴定测定液至溶液不显色，计录盐酸滴定的体积为11.03ml，按盐酸体积与浓度，得出氯离子的摩尔数为1.103mmol，按氯离子与氨基摩尔比1:1的比例，得到氮离子的摩尔数为1.103mmol，从而得到催化反应中蛋白质含量为96.51mg；按样品国标中鸡肉蛋白总量与易转化蛋白量的换算系数1.717，换算得出样品粗蛋白总含量165.71mg。
实施例2
与实施例1基本相同，所不同的只是0.2 g鸡肉粉换作0.5 g米糠，盐酸滴定的浓度为0.11mol/l，盐酸体积为5.61ml，氯离子的摩尔数为0.6171mmol，氮离子的摩尔数0.6171mmol，从而得到催化反应中蛋白质含量54.00mg；按样品国标中米糠蛋白总量与易转化蛋白量的换算系数1.667，换算得出样品粗蛋白总含量90.01mg。
实施例3
与实施例1基本相同，所不同的只是0.2 g鸡肉粉换作0.3 g豆粕，盐酸滴定的浓度为0.09mol/l，盐酸体积为10.51ml，氯离子的摩尔数为0.9459mmol，氮离子的摩尔数0.9459mmol，从而得到催化反应中蛋白质含量82.77mg；按样品国标中豆粕蛋白总量与易转化蛋白量的换算系数1.715，换算得出样品粗蛋白总含量为141.95mg。

Claims (1)

1.一种快速测定饲料原料中粗蛋白总含量的方法，其特征在于步骤如下：
a、在0. 2～0.5g样品粉末中加入质量百分浓度为98%的浓硫酸8ml，混匀后再加入质量百分浓度为30%的过氧化氢溶液8ml，摇匀后静置反应10～15min，得到反应液；
b、在上述反应液加入3～5滴酚酞指示剂，再加入质量百分浓度为35～45%的氢氧化钠溶液至饱和，90℃下蒸馏5～7min，冷却后加入质量百分浓度为1.8～2.2%的硼酸溶液30ml，用蒸馏水定容至130～180ml，得到测定液；
c、用浓度0.09～0.11mol/l的盐酸滴定测定液至溶液不显色，计录盐酸滴定的体积，按盐酸体积与浓度，得出氯离子的摩尔数，按氯离子与氨基摩尔比1:1的比例，得到氮离子的摩尔数，从而得到催化反应中蛋白质含量；
d、按样品国标中样品蛋白总量与易转化蛋白量的换算系数，换算得出样品粗蛋白总含量。
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