CN106109474A - 原人参三醇ppt在制备防治血管新生疾病药物中的用途 - Google Patents

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Abstract

本发明提供原人参三醇PPT在制备防治血管新生疾病药物中的用途。本发明还提供用于治疗或预防血管新生疾病的药物组合物。所述药物组合物包括作为活性成分的治疗或预防有效量的原人参三醇PPT，以及药学可接受的载体。

Description

原人参三醇PPT在制备防治血管新生疾病药物中的用途
技术领域
本发明涉及生物医药领域，具体涉及原人参三醇(PPT)在抑制血管新生方面的应用。
背景技术
新生血管是从一般血管新伸出的螺旋状毛细血管。在正常的生理过程中，人体在怀孕、创伤等特定条件下，才会出现新生的血管，除此之外如果有新生血管出现，则很可能会引发某些疾病，这些疾病总称为血管新生疾病，如肿瘤、类风湿性关节炎、退行性关节炎、糖尿病性视网膜病变等。
新生血管与一般血管的生理功能相似，其主要作用是通过血液将氧气与养分输送到全身各处的组织细胞，如果肿瘤周围有大量的新生血管，它就会将肿瘤细胞误认为正常细胞，不断输送氧气与养分，使肿瘤细胞不断增殖体积增大以至于到人体免疫系统无法控制的阶段。此外，新生血管也成为肿瘤细胞尤其是恶性肿瘤细胞转移的途径。慢性类风湿性关节炎或者退行性关节炎的发病与新生血管也有密切的关系，原来应该没有血管存在的关节软骨由于未知原因而异常变化，形成新生血管，使得软骨受到侵蚀，造成关节变形或疼痛。
新生血管引起的疾病已经受到了越来越多的科研人员和医务工作者的重视，因此，具有抑制血管新生作用的药物分子的研发成为热点工作。
发明内容
本发明的目的在于提供一种新的用于治疗或预防血管新生疾病的药物组合物。本发明的其他目的在于提供原人参三醇(PPT)在制备用于治疗或预防血管新生疾病或抑制血管新生的药物中的用途。此外，本发明还提供原人参三醇(PPT)在制备抗肿瘤药物中的用途。
本发明人经过深入研究发现，原人参三醇(PPT)具有强的血管新生抑制作用，且其血管新生抑制作用明显强于公认的血管新生抑制物质人参皂苷Rg3，从而完成了本发明。
即，本发明包括：
1.一种用于治疗或预防血管新生疾病、或者用于抑制血管新生的药物组合物，其包括：作为活性成分的原人参三醇(PPT)，以及药学可接受的载体。
2.根据项1所述的药物组合物，其中，所述原人参三醇(PPT)作为唯一活性成分。
3.根据项1或2所述的药物组合物，其中，所述血管新生疾病是恶性实体肿瘤。
4.根据项1～3中任一项所述的药物组合物，其中，该药物组合物用于抑制血管新生。
5.根据项1～4中任一项所述的药物组合物，其中，该药物组合物中，原人参三醇(PPT)的含量为0.1重量％以上。
6.原人参三醇(PPT)在制备用于治疗或预防血管新生疾病的药物中的用途。
7.根据项6所述的用途，其中，原人参三醇(PPT)作为所述药物的唯一活性成分。
8.根据项6或7所述的用途，其中，所述药物用于抑制血管新生。
9.根据项6～8中任一项所述的用途，其中，所述原人参三醇(PPT)在所述药物中的含量为0.1重量％以上。
10.根据项6～9中任一项所述的用途，其中，所述血管新生疾病为恶性实体肿瘤。
11.原人参三醇(PPT)在制备用于抑制血管新生的药物中的用途。
12.根据项11所述的用途，其中，原人参三醇(PPT)作为所述药物的唯一活性成分。
13.根据项11或12所述的用途，其中，所述原人参三醇(PPT)在所述药物中的含量为0.1重量％以上。
14.原人参三醇(PPT)在制备抗肿瘤药物中的用途。
15.根据项14所述的用途，其中，原人参三醇(PPT)作为所述药物的唯一活性成分。
16.根据权利要求14或15所述的用途，其中，所述肿瘤是肺癌、结肠癌、肝癌、乳腺癌或胃癌。
17.根据项14～16中任一项所述的用途，其中，所述原人参三醇(PPT)在所述药物中的含量为0.1重量％以上。
18.根据项14～17中任一项所述的用途，其中，所述肿瘤为恶性实体肿瘤。
根据本发明，能够提供显著抑制血管新生的用于治疗或预防血管新生疾病的药物组合物，以及原人参三醇(PPT)在制备用于治疗或预防血管新生疾病、或者用于抑制血管新生的的药物中的用途。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明进行详细的说明。在无冲突的情况下，本说明书中的科学术语具有本领域技术人员通常理解的含义，如有冲突应以本说明书中的定义为准。
首先，在一个方面中，本发明一种药物组合物(本发明的药物组合物)，其包括：作为活性成分的原人参三醇(PPT)，以及药学可接受的载体。上述本发明的药物组合物可用于治疗或预防血管新生疾病、和/或用于抑制血管新生、和/或抗肿瘤。
在本说明书中，原人参三醇(PPT)是指下述化学式1所述的化合物。
【化学式1】
上述原人参三醇(PPT)是已知化合物，可以采用本技术领域已知的方法来制备，例如可以通过酶解人参皂苷Re来制备原人参三醇(PPT)。
本发明的药物组合物可以包含原人参三醇(PPT)作为唯一活性成分，也可以包含其他活性成分。
作为所述的药学可接受的载体，可以由本领域技术人员根据剂型的需要等常规地进行选择。例如，在制备口服液体制剂(液体药物组合物)时，可以将活性成分溶解或悬浮于适当的液体(例如水)中。在制备口服固体制剂(固体药物组合物)时，可以在向活性成分中加入赋形剂以及视需要的粘合剂、崩解剂、滑润剂、着色剂、矫味剂等后，按照常规方法制成片剂、包衣片剂、颗粒剂、细粒剂、散剂、胶囊剂或丸剂等。作为赋形剂，可使用例如乳糖、玉米淀粉、白糖、葡萄糖、山梨糖醇、结晶纤维素、二氧化硅等；作为粘合剂，可使用例如聚乙烯醇、乙基纤维素、甲基纤维素、阿拉伯胶、羟基丙基纤维素、羟基丙基甲基纤维素等；作为滑润剂，可使用例如硬脂酸镁、滑石、二氧化硅等；作为着色剂，可使用允许在医药品中添加的着色剂；作为矫味剂，可使用可可末、薄荷脑、芳香酸、薄荷油、龙脑、桂皮粉等。当然，也可以在上述片剂、颗粒剂上包覆糖衣、明胶衣、以及其它的必要外衣。
新生血管是从一般血管新伸出的螺旋状毛细血管。在正常的生理过程中，人体在怀孕、创伤等特定条件下，才会出现新生的血管，除此之外如果有新生血管出现，则很可能会引发某些疾病，这些疾病总称为血管新生疾病，如肿瘤、类风湿性关节炎、退行性关节炎、糖尿病性视网膜病变等。
本说明书中，“抗肿瘤”包括杀灭肿瘤细胞、促进肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤生长、抑制肿瘤转移、抑制毛细血管增生、改善肿瘤预后或防止肿瘤复发等。
在本说明书，作为恶性实体肿瘤，可列举例如胰癌、胃癌、大肠癌、乳腺癌、前列腺癌、肺癌、肾癌、脑肿瘤、头颈部癌、食道癌、皮肤癌、肝癌、子宫癌、子宫颈癌、膀胱癌、甲状腺癌、精巢肿瘤、绒毛癌、骨肉瘤、软组织肉瘤和卵巢癌等。
本发明的口服药物组合物可用于肿瘤(特别是恶性实体肿瘤)的治疗和/或肿瘤(特别是恶性实体肿瘤)转移的治疗，特别是本发明的药物组合物可用于转移性肿瘤的治疗。在该用途中，原人参三醇(PPT)优选作为唯一活性成分。
在本说明书中，“肿瘤的治疗”是指：对原位肿瘤的治疗。“肿瘤转移的治疗”是指对转移瘤以及转移过程的治疗，例如抑制肿瘤转移。“转移性肿瘤”是指：肿瘤细胞从原发部位侵入淋巴管，血管或其他途经被带到其它组织、器官处继续生长，形成与原发部位肿瘤具有相同类型的肿瘤或异质瘤，该过程称为转移，所形成的同质或异质肿瘤称为转移瘤或转移癌，在该过程中，由于转移瘤处于初期，急需大量的新生血管以供应其迅速生长所需的营养等，我们把该过程及其过程中新形成的肿瘤统称为转移性肿瘤。
在本发明的药物组合物中，原人参三醇(PPT)的含量可以为0.1重量％以上，优选为0.2重量％以上，更优选为0.5重量％以上，更优选为1重量％以上，更优选为2重量％以上，更优选为5重量％以上，更优选为10重量％以上。
在另一个方面中，本发明提供原人参三醇(PPT)在制备用于治疗或预防血管新生疾病、或者用于抑制血管新生的药物、或者抗肿瘤(例如本发明的药物组合物)中的用途(本发明的用途)。
此外，在另一方面中，本发明还提供一种治疗对象中的血管新生疾病的方法、或抑制对象中的血管新生的方法、或者治疗对象中的肿瘤的方法，其包括给所述对象施用本发明的药物组合物的步骤。
这里，所述对象可以是哺乳动物，例如可以是人、大鼠、兔、羊、猪、牛、猫、狗、猴等，优选为人。
本发明的药物组合物，可以口服或非口服施用。施用量因症状程度、患者年龄、性别、体重、敏感性差异、施用方法、施用时期、施用间隔、药物制剂的性质、有效成分的种类等而异，无特殊限制，但通常成人(体重60Kg)每日1～3000mg、优选10～1000mg、更优选100～500mg，上述施用量通常可每日分1～3次施用。较好的剂量是每日300mg左右。
实施例
下面结合实施例对本发明进行详细的说明。下面给出的实施例，是为了便于理解本发明而非对本发明的限定。
实施例1原人参三醇(PPT)对碱烧伤角膜血管新生的抑制作用
本实验参考青岛大学硕士学位论文《雷帕霉素脂质体滴眼液对大鼠角膜新生血管抑制作用的实验研究》(2007，作者：张振华)，略作修改。
1.模型制作方法
1)麻醉方法采用10％的水合氯醛(3mg/kg)对大鼠进行腹腔注射麻醉，0.4％盐酸奥布卡因滴眼做局部麻醉。
2)碱烧伤步骤将大鼠麻醉后用棉签拭去过多水分，将统一规格直径3mm的单层滤纸浸入氢氧化钠溶液中1min，使其达饱和状态，吸水纸吸除多余液体，将滤纸片置于大鼠角膜中央1min后取下，用生理盐水冲洗结膜囊1min。用氯霉素滴眼液点眼，此时在角膜中央可见圆形灰白色角膜烧伤区。术后氯霉素滴眼液每天滴眼四次，预防感染。
2.动物分组及给药
健康成年清洁型wistar大鼠48只，裂隙灯显微镜下检查无眼前节病变。碱烧伤空白对照组16只。碱烧伤后氯霉素滴眼液滴眼每天四次。按角膜碱烧伤后1d、4d、7d、14d随机分成4组，每组4只(8只眼)。
碱烧伤原人参三醇(PPT)治疗组16只。碱烧伤后使用原人参三醇(PPT)溶液(50μg/mL、100μg/mL、200μg/mL)每天滴眼三次，间隔氯霉素滴眼液每天滴眼四次。按角膜碱烧伤后1d、4d、7d、14d随机分成4组，每组4只(8只眼)。
碱烧伤人参皂苷Rg3(R型)治疗组16只。碱烧伤后使用人参皂苷Rg3(R型)溶液(50μg/mL、100μg/mL、200μg/mL)每天滴眼三次，间隔氯霉素滴眼液每天滴眼四次。按角膜碱烧伤后1d、4d、7d、14d随机分成4组，每组4只(8只眼)。
48只大鼠均于碱烧伤后1d，每日行裂隙灯显微镜检查，用YDY-91A眼科多功能图像处理系统摄影，并按照公式1计算CNV(角膜新生血管)生长面积。C为CNV网的跨圆周钟点数，I为CNV从角膜缘深入角膜的长度，r为大鼠角膜半径(r＝3mm)。
公式1：C/12×3.1416×[r2-(r-I)2]
3.结果评价
按照公式1计算不同实验组、不同观察天数大鼠CNV面积如表1所示：
表1:碱烧伤后各组大鼠CNV面积的比较
P值均满足P<0.01
由表1可知，治疗组在整个观察期仅有少量新生血管生长且与给药浓度呈显著负相关(P<0.05)；烧伤空白组烧伤1d后，见损伤区角膜上皮水肿，增厚，角膜边缘血管充血，4d时，角膜上皮缺失，角巩膜边缘处有CNV呈现细丝状伸入角膜区域，7d时CNV显著变长，面积增加，血管分支生长，随后CNV面积增长减慢，14d时，基质层脱落，肿胀程度减缓，CNV交织成网状，生长区域稳定。碱烧伤人参皂苷Rg3(R型)治疗组烧伤1d后，角膜上皮轻微水肿，基质略肿胀增厚，角膜边缘血管充血，第4d时，角膜上皮缺失，角巩膜边缘处有CNV呈现细丝状伸入角膜区域，比烧伤空白组稀疏，7d时，CNV显著变长，面积增加，血管开始分支生长，但新生血管比烧伤空白组血管细、数量少，14d时，少量新生血管达到碱烧伤区域，随后CNV退化。碱烧伤原人参三醇(原人参三醇(PPT))治疗组烧伤1d后，角膜上皮轻微水肿，基质略肿胀增厚，角膜缘血管充血，第4d时，角膜上皮缺失，角巩膜边缘处有少量CNV呈现细丝状伸入角膜区域，且比碱烧伤人参皂苷Rg3(R型)治疗组血管稀疏，覆盖面积小，7d时，CNV变长，面积增加，血管开始分支生长，但明显比人参皂苷Rg3(R型)治疗组新生血管生长缓慢，14d时，仅少量新生血管达到碱烧伤区域，其后CNV退化程度比人参皂苷Rg3(R型)治疗组更明显。
上述结果表明治疗组的大鼠眼睛滴入原人参三醇(PPT)溶液，CNV面积相比空白对照组以及人参皂苷Rg3(R型)治疗组明显减小，血管的数量少，血管细，并且随着原人参三醇(PPT)给药浓度的增加，CNV面积减小，对新生血管生长抑制作用增强，P<0.01，具有统计学意义。表明原人参三醇(PPT)能显著抑制角膜新生血管的生长，且抑制效果明显强于Rg3(R型)。
实施例2原人参三醇(PPT)对角膜微囊袋法建立鼠角膜血管形成的抑制作用
本实验参考中南大学博士学位论文《靶向VEGFR-1脱氧核酶抑制血管生成及肿瘤生长的实验研究》(2014，作者：周琴)，略作修改。
1.模型制作方法
1)选取7周龄左右大的雄性大鼠42只，随机分为7组，每组6只。
2)提前准备含30μM的VEGF的溶液中浸泡的硝化纤维滤膜颗粒。滤膜置于管内，种植前在冰上放置2小时。建立角膜血管新生模型。
3)模型的建立：用显微剪在大鼠角膜中央剪一个局部的板层口。
4)显微镊子在切口的下层钝性分离并延伸至下方角膜缘。
5)形成一个角膜基质微囊袋将准备好的硝化纤维滤膜植入微囊袋中，使其距离角膜缘新生血管可在几天后通过显微镜和电脑图像分析直接观察。
2.动物模型给药
1)在放置显微滤膜颗粒的当天进行实验，实验分为4组：
实验组1经微囊内紧靠滤膜旁注射50μg原人参三醇(PPT)溶(原人参三醇(PPT)-50)；
实验组2经微囊内紧靠滤膜旁注射50μg人参皂苷Rg3(R型)溶液(人参皂苷Rg3(R型)-50)；
实验组3经微囊内紧靠滤膜旁注射100μg原人参三醇(PPT)溶液(原人参三醇(PPT)-100)；
实验组4经微囊内紧靠滤膜旁注射100μg人参皂苷Rg3(R型)溶液(人参皂苷Rg3(R型)-100)；
实验组5经微囊内紧靠滤膜旁注射200μg原人参三醇(PPT)溶液(原人参三醇(PPT)-200)；
实验组6经微囊内紧靠滤膜旁注射200μg人参皂苷Rg3(R型)溶液(人参皂苷Rg3(R型)-200)；
对照组经微囊内紧靠滤膜旁注射等量生理盐水(Saline)；
2)5d后，分离角膜并通过光学显微镜分析血管的生长面积及血管的数目评价原人参三醇(PPT)以及人参皂苷Rg3(R型)的生物学活性。新生血管最多的面积被确定后，200×的视野下进行计数(是否血管形成的数量和面积不同)
3.结果分析
表2:原人参三醇(PPT)对大鼠角膜新生血管面积的影响
注：表中数值的误差类型为标准偏差。
表3:原人参三醇(PPT)对角膜新生血管数量的影响
注：表中数值的误差类型为标准偏差。
表2和表3展示了新生血管的区域和数量的变化趋势。图中可以看出：相对于生理盐水组，和Rg3(R型)实验组。原人参三醇(PPT)实验组减少了新生血管面积和血管数量，各实验组与生理盐水组比较，差异有统计学意义(P<0.05)；且新生血管抑制率随给药浓度增加而增加，但100μg、200μg给药剂量的血管面积及血管数量差异不显著(P>0.05)，说明给药剂量已至上限。综上，通过角膜微囊袋法成功构建角膜血管形成模型，显微镜下观察发现原人参三醇(PPT)显著抑制了角膜新生血管形成的面积和数量(P<0.05)。
还需要说明的是，在可实施且不明显违背本发明的主旨的前提下，在本说明书中作为某一技术方案的构成部分所描述的任一技术特征或技术特征的组合同样也可以适用于其它技术方案；并且，在可实施且不明显违背本发明的主旨的前提下，作为不同技术方案的构成部分所描述的技术特征之间也可以以任意方式进行组合，来构成其它技术方案。本发明也包含在上述情况下通过组合而得到的技术方案，并且这些技术方案相当于记载在本说明书中。
以上通过具体实施方式和实施例对本发明进行了说明，但本领域技术人员应该理解的是，这些并非意图对本发明的范围进行限定，本发明的范围应由权利要求书确定。
工业实用性
本发明的药物组合物能够显著抑制血管新生，因而其作为用于治疗或预防血管新生疾病的药物是有用的。

Claims (13)

1.一种用于治疗或预防血管新生疾病、或者用于抑制血管新生的药物组合物，其包括：作为活性成分的原人参三醇(PPT)，以及药学可接受的载体。
2.根据权利要求1所述的药物组合物，其中，所述原人参三醇(PPT)作为唯一活性成分。
3.根据权利要求1所述的药物组合物，其中，所述血管新生疾病是恶性实体肿瘤。
4.根据权利要求1所述的药物组合物，其中，该药物组合物用于抑制血管新生。
5.根据权利要求1所述的药物组合物，其中，该药物组合物中，原人参三醇(PPT)的含量为0.1重量％以上。
6.原人参三醇(PPT)在制备用于治疗或预防血管新生疾病、或者用于抑制血管新生的药物中的用途。
7.根据权利要求6所述的用途，其中，原人参三醇(PPT)作为所述药物的唯一活性成分。
8.根据权利要求6所述的用途，其中，所述药物用于抑制血管新生。
9.根据权利要求6所述的用途，其中，所述原人参三醇(PPT)在所述药物中的含量为0.1重量％以上。
10.根据权利要求6所述的用途，其中，所述血管新生疾病为恶性实体肿瘤。
11.原人参三醇(PPT)在制备抗肿瘤药物中的用途。
12.根据权利要求11所述的用途，其中，原人参三醇(PPT)作为所述药物的唯一活性成分。
13.根据权利要求11所述的用途，其中，所述肿瘤是肺癌、结肠癌、肝癌、乳腺癌或胃癌。
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