CN106086097A - 磷脂酰丝氨酸的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种磷脂酰丝氨酸的制备方法,其中,所述制备方法包括:1)将大豆卵磷脂和水混合,制得混合物M1;2)向混合物M1中加入L‑丝氨酸和磷脂酶D混合,制得磷脂酰丝氨酸粗制品;3)向上述制得的磷脂酰丝氨酸粗制品中加入溶剂萃取,制得磷脂酰丝氨酸半成品;4)将上述制得的磷脂酰丝氨酸半成品顺次通过硅胶柱和离子交换树脂,制得磷脂酰丝氨酸;其中,所述溶剂由氯仿、乙醇、乙醚和水组成。上述设计通过将大豆卵磷脂先与水混合,而后加入L‑丝氨酸和磷脂酶D反应,采用含有氯仿、乙醇、乙醚和水的溶剂进行萃取,经硅胶柱和离子交换树脂过滤,实现了操作简单方便,且制得的磷脂酰丝氨酸纯度较高,使得其使用范围大大增加的效果。
Description
技术领域
本发明涉及磷脂酰丝氨酸的生产制备领域,具体地,涉及磷脂酰丝氨酸的制备方法。
背景技术
磷脂酰丝氨酸又称复合神经酸,是细胞膜的活性物质,尤其存在于大脑细胞中,其主要功能是改善神经细胞功能,调节神经脉冲的传导,增进大脑记忆功能等。因而,在人体中起着极为重要的作用。
现今对于磷脂酰丝氨酸的制备主要为提取法,但是往往植物中磷脂酰丝氨酸的含量较少,使得其提取需要用到大量的原料,且纯度不高,而从动物细胞中进行提取,往往也只能使用动物的脑细胞进行提取,不仅原料成本高,且提取方法复杂。
因此,提供一种制备方法相对简单,制得的磷脂酰丝氨酸纯度较高的磷脂酰丝氨酸的制备方法是本发明亟需解决的问题。
发明内容
针对上述现有技术,本发明的目的在于克服现有技术中往往植物中磷脂酰丝氨酸的含量较少,使得其提取需要用到大量的原料,且纯度不高,而从动物细胞中进行提取,往往也只能使用动物的脑细胞进行提取,不仅原料成本高,且提取方法复杂的问题,从而提供一种制备方法相对简单,制得的磷脂酰丝氨酸纯度较高的磷脂酰丝氨酸的制备方法。
为了实现上述目的,本发明提供了磷脂酰丝氨酸的制备方法,其中,所述制备方法包括:
1)将大豆卵磷脂和水混合,制得混合物M1;
2)向混合物M1中加入L-丝氨酸和磷脂酶D混合,制得磷脂酰丝氨酸粗制品;
3)向上述制得的磷脂酰丝氨酸粗制品中加入溶剂萃取,制得磷脂酰丝氨酸半成品;
4)将上述制得的磷脂酰丝氨酸半成品顺次通过硅胶柱和离子交换树脂,制得磷脂酰丝氨酸;其中,
所述溶剂由氯仿、乙醇、乙醚和水组成。
通过上述技术方案,本发明将大豆卵磷脂先与水混合,而后加入L-丝氨酸和磷脂酶D反应,制得磷脂酰丝氨酸粗制品,再将上述磷脂酰丝氨酸粗制品采用含有氯仿、乙醇、乙醚和水的溶剂进行萃取后,经硅胶柱和离子交换树脂过滤,制得纯度较高的磷脂酰丝氨酸,上述操作不仅简单方便,且制得的磷脂酰丝氨酸纯度较高,使得其使用范围大大增加。
本发明的其他特征和优点将在随后的具体实施方式部分予以详细说明。
具体实施方式
以下对本发明的具体实施方式进行详细说明。应当理解的是,此处所描述的具体实施方式仅用于说明和解释本发明,并不用于限制本发明。
本发明提供了一种磷脂酰丝氨酸的制备方法,其中,所述制备方法包括:
1)将大豆卵磷脂和水混合,制得混合物M1;
2)向混合物M1中加入L-丝氨酸和磷脂酶D混合,制得磷脂酰丝氨酸粗制品;
3)向上述制得的磷脂酰丝氨酸粗制品中加入溶剂萃取,制得磷脂酰丝氨酸半成品;
4)将上述制得的磷脂酰丝氨酸半成品顺次通过硅胶柱和离子交换树脂,制得磷脂酰丝氨酸;其中,
所述溶剂由氯仿、乙醇、乙醚和水组成。
上述设计通过将大豆卵磷脂先与水混合,而后加入L-丝氨酸和磷脂酶D反应,制得磷脂酰丝氨酸粗制品,再将上述磷脂酰丝氨酸粗制品采用含有氯仿、乙醇、乙醚和水的溶剂进行萃取后,经硅胶柱和离子交换树脂过滤,制得纯度较高的磷脂酰丝氨酸,上述操作不仅简单方便,且制得的磷脂酰丝氨酸纯度较高,使得其使用范围大大增加。
在本发明的一种优选的实施方式中,为了使原料的使用率更高,进一步降低生产成本,相对于100重量份的步骤1)中的所述水,所述大豆卵磷脂的用量为30-50重量份,所述L-丝氨酸的用量为15-20重量份,所述磷脂酶D的用量为1-5重量份,所述溶剂的用量为200-500重量份。
溶剂中各成分的含量可以根据实际需要进行调节,例如,在本发明的一种优选的实施方式中,为了进一步提高制得的磷脂酰丝氨酸的纯度,相对于100重量份的所述溶剂中的水,所述氯仿的用量为20-80重量份,所述乙醇的用量为30-60重量份,所述乙醚的用量为10-30重量份。
步骤2)中的混合过程可以为静置混合,混合条件可以不作限定,当然,在本发明的一种更为优选的实施方式中,步骤2)中混合过程的混合温度为25-30℃,混合时间为25-35h。
为了进一步提高制得的磷脂酰丝氨酸的纯度,在本发明的一种更为优选的实施方式中,步骤3)中萃取次数可以进一步选择为2-4次。
步骤4)中的离子交换树脂可以为本领域常规使用的离子交换树脂类型,例如,在本发明的一种优选的实施方式中,步骤4)中所述离子交换树脂可以进一步选择为阳离子交换树脂。
以下将通过实施例对本发明进行详细描述。以下实施例中,所述大豆卵磷脂、所述L-丝氨酸、所述磷脂酶D、所述氯仿、所述乙醇和所述乙醚为常规市售品。
实施例1
将150g水、30g氯仿、45g乙醇和15g乙醚混合,制得溶剂;将30g大豆卵磷脂和100g水混合,制得混合物M1;向混合物M1中加入15gL-丝氨酸和1g磷脂酶D在25℃的条件下混合25h,制得磷脂酰丝氨酸粗制品;向上述制得的磷脂酰丝氨酸粗制品中加入200g溶剂萃取,重复上述萃取过程2次,制得磷脂酰丝氨酸半成品;将上述制得的磷脂酰丝氨酸半成品顺次通过硅胶柱和阳离子交换树脂,制得磷脂酰丝氨酸A1。
实施例2
将200g水、160g氯仿、120g乙醇和60g乙醚混合,制得溶剂;将50g大豆卵磷脂和100g水混合,制得混合物M1;向混合物M1中加入20gL-丝氨酸和5g磷脂酶D在30℃的条件下混合35h,制得磷脂酰丝氨酸粗制品;向上述制得的磷脂酰丝氨酸粗制品中加入500g溶剂萃取,重复上述萃取过程4次,制得磷脂酰丝氨酸半成品;将上述制得的磷脂酰丝氨酸半成品顺次通过硅胶柱和阳离子交换树脂,制得磷脂酰丝氨酸A2。
实施例3
将200g水、100g氯仿、100g乙醇和40g乙醚混合,制得溶剂;将40g大豆卵磷脂和100g水混合,制得混合物M1;向混合物M1中加入18gL-丝氨酸和3g磷脂酶D在28℃的条件下混合30h,制得磷脂酰丝氨酸粗制品;向上述制得的磷脂酰丝氨酸粗制品中加入400g溶剂萃取,重复上述萃取过程3次,制得磷脂酰丝氨酸半成品;将上述制得的磷脂酰丝氨酸半成品顺次通过硅胶柱和阳离子交换树脂,制得磷脂酰丝氨酸A3。
实施例4
按照实施例1的制备方法进行制备,不同的是,所述氯仿的用量为20g,所述乙醇的用量为30g,所述乙醚的用量为10g,制得磷脂酰丝氨酸A4。
实施例5
按照实施例2的制备方法进行制备,不同的是,所述氯仿的用量为200g,所述乙醇的用量为150g,所述乙醚的用量为100g,制得磷脂酰丝氨酸A5。
实施例6
按照实施例1的制备方法进行制备,不同的是,所述L-丝氨酸的用量为10g,所述磷脂酶D的用量为0.5g,制得磷脂酰丝氨酸A6。
实施例7
按照实施例2的制备方法进行制备,不同的是,所述L-丝氨酸的用量为30g,所述磷脂酶D的用量为8g,制得磷脂酰丝氨酸A7。
对比例1
按照实施例3的制备方法进行制备,不同的是,不添加乙醚,制得磷脂酰丝氨酸D1。
对比例2
按照实施例3的制备方法进行制备,不同的是,将乙醇改为乙醚,制得磷脂酰丝氨酸D2。
测试例
分别检测上述制得的A1-A7、D1和D2中磷脂酰丝氨酸的含量,得到的结果如表1所示。
表1
编号 | 磷脂酰丝氨酸的含量(%) |
A1 | 85 |
A2 | 89 |
A3 | 86 |
A4 | 68 |
A5 | 69 |
A6 | 72 |
A7 | 70 |
D1 | 52 |
D2 | 46 |
以上详细描述了本发明的优选实施方式,但是,本发明并不限于上述实施方式中的具体细节,在本发明的技术构思范围内,可以对本发明的技术方案进行多种简单变型,这些简单变型均属于本发明的保护范围。
另外需要说明的是,在上述具体实施方式中所描述的各个具体技术特征,在不矛盾的情况下,可以通过任何合适的方式进行组合,为了避免不必要的重复,本发明对各种可能的组合方式不再另行说明。
此外,本发明的各种不同的实施方式之间也可以进行任意组合,只要其不违背本发明的思想,其同样应当视为本发明所公开的内容。
Claims (6)
1.一种磷脂酰丝氨酸的制备方法,其特征在于,所述制备方法包括:
1)将大豆卵磷脂和水混合,制得混合物M1;
2)向混合物M1中加入L-丝氨酸和磷脂酶D混合,制得磷脂酰丝氨酸粗制品;
3)向上述制得的磷脂酰丝氨酸粗制品中加入溶剂萃取,制得磷脂酰丝氨酸半成品;
4)将上述制得的磷脂酰丝氨酸半成品顺次通过硅胶柱和离子交换树脂,制得磷脂酰丝氨酸;其中,
所述溶剂由氯仿、乙醇、乙醚和水组成。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其中,相对于100重量份的步骤1)中的所述水,所述大豆卵磷脂的用量为30-50重量份,所述L-丝氨酸的用量为15-20重量份,所述磷脂酶D的用量为1-5重量份,所述溶剂的用量为200-500重量份。
3.根据权利要求1或2所述的制备方法,其中,相对于100重量份的所述溶剂中的水,所述氯仿的用量为20-80重量份,所述乙醇的用量为30-60重量份,所述乙醚的用量为10-30重量份。
4.根据权利要求1或2所述的制备方法,其中,步骤2)中混合过程的混合温度为25-30℃,混合时间为25-35h。
5.根据权利要求1或2所述的制备方法,其中,步骤3)中萃取次数为2-4次。
6.根据权利要求1或2所述的制备方法,其中,步骤4)中所述离子交换树脂为阳离子交换树脂。
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