CN106018380A - 一种农药残留检测方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种农药残留检测方法，包括如下步骤：将样品汽爆处理后，加入丙酮和乙酸乙酯超声萃取，然后加入硫酸钠水溶液，离心后吸取上清液；按比例称取待检农药、丙烯酸、丙烯酰胺、N’N‑亚甲基双丙烯酰胺、过硫酸铵和去离子水制备薄膜状的印迹水凝胶；将所得印迹水凝胶浸泡在有机溶剂中去除其中的待检农药；将不同浓度的待检农药储备液分别加入本身不含待检农药的样品汁中做成不同梯度的印迹水凝胶，用便携式拉曼光谱仪对所得的印迹水凝胶进行检测，将并将所得光谱进行比对，判断待检测样品中是否含有该农药。本发明能够快速、低成本检测果蔬中的农药残留。
Description
技术领域
本发明涉及一种检测方法，具体涉及一种农药残留检测方法。
背景技术
农药在促进林牧业的发展方面作用显著，但同时使用农药所带来的污染环境以及人类健康问题越来越严重。农药残留危害问题也越来越受到重视，许多国家都制定了食品中农药残存限量。
目前，果蔬中农药残留的检测方法有：薄层色谱法、气相色谱法、高效液相色谱法、超临界流体色谱法等等。现有的方法虽具有灵敏度高、检出限低等优点，但因仪器昂贵、耗时长、检测成本高等而难以满足食品安全问题频发的现状。因此，开发一种低成本、满足现场快速检测的新方法极为必要。
发明内容
为解决上述问题，本发明提供了一种农药残留检测方法，通过分子印迹技术制备对该检测农药具有特异性识别作用的水凝胶，待测样品经水凝胶吸附富集后，利用便携式拉曼光谱仪进行光谱采集，通过与该检测农药的标准拉曼光谱相对比，判断样品中是否含有此药物，使用方便。
为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：
一种农药残留检测方法，包括如下步骤：
S1、将待检测样品置于汽爆罐内，先通入氮气至汽爆罐内压力为0.7～1.3MPa，爆破处理8～25min；然后迅速通入蒸汽至汽爆罐内压力为1.3～1.7MPa，蒸汽爆破处理0.5～2.5min后，加入丙酮和乙酸乙酯超声萃取4～5min，然后加入浓度为6-12％的硫酸钠水溶液，离心6-10min，吸取上清液(待检测试样液)，备用；
S2、称取待检农药0.016-0.02g、丙烯酸1.4-1.6mL、丙烯酰胺2.5-4.5g、N’N-亚甲基双丙烯酰胺0.08-0.12g、过硫酸铵0.08-0.14g和去离子水4.0-6.0mL置于烧杯中内，搅拌混合均匀，经氮气除氧后，将其填充到由两片载玻片形成的夹板空间中，置于55-65℃的烘箱中聚合反应3-4h，得薄膜状的印迹水凝胶；
S3、将由步骤S2所得的印迹水凝胶浸泡在有机溶剂中，并超声振荡5-10min，以去除其中的待检农药；
S4、将不同浓度的待检农药储备液分别加入10ml本身不合待检农药的样品汁中，使所得溶液中待检农药的浓度分别为0mg/L、0.01mg/L、0.05mg/L、0.1mg/L、0.5mg/L、1mg/L、5mg/L、10mg/L；
S5、将步骤S3所得的印迹水凝胶浸泡于步骤S4中所得的含不同浓度待检农药的溶液中，5-7min后，将其取出并用去离子水漂去多余的溶液，得不同梯度的印迹水凝胶；
S6、将步骤S3所得的印迹水凝胶浸泡于步骤S1所得的上清液中，5-7min后，将其取出并用去离子水漂去多余的上清液，得样品印迹水凝胶；
S7、用便携式拉曼光谱仪对步骤S5和步骤S6所得的印迹水凝胶进行检测，将并将所得光谱进行比对，判断待检测样品中是否含有该农药。
其中，所述待检测样品与丙酮的固液比为0.2～0.5g/ml。
其中，待检测样品与乙酸乙酯的固液比为0.2～0.5g/ml。
其中，待检测样品与浓度为6-12％的硫酸钠水溶液的体积比为1∶1-5。
其中，所述有机溶剂为丙酮、二氯甲烷、乙酸乙酯中的一种或几种构成。
本发明具有以下有益效果：
本发明能够快速、低成本检测果蔬中的农药残留。通过分子印迹技术制备的水凝胶，可在5min之内完成对被测样品中待测农药的吸附富集作用，再经便携式拉曼光谱仪采集光谱信息，整个过程快速便捷，且水凝胶可多次循环重复使用，在降低检测成本的同时还具有环境友好的优点，并可满足现场、高通量检测的需求。
具体实施方式
为了使本发明的目的及优点更加清楚明白，以下结合实施例对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
以下实施例中，所使用的待检测样品与丙酮的固液比为0.2～0.5g/ml；
所使用的检测样品与乙酸乙酯的固液比为0.2～0.5g/ml；所使用的检测样品与浓度为6-12％的硫酸钠水溶液的体积比为1∶1-5；所使用的有机溶剂为丙酮、二氯甲烷、乙酸乙酯中的一种或几种构成。
实施例1
S1、将待检测样品置于汽爆罐内，先通入氮气至汽爆罐内压力为0.7MPa，爆破处理25min；然后迅速通入蒸汽至汽爆罐内压力为1.3MPa，蒸汽爆破处理2.5min后，加入丙酮和乙酸乙酯超声萃取4min，然后加入浓度为6-12％的硫酸钠水溶液，离心6min，吸取上清液(待检测试样液)，备用；
S2、称取待检农药0.016g、丙烯酸1.4mL、丙烯酰胺2.5g、N’N-亚甲基双丙烯酰胺0.08g、过硫酸铵0.08g和去离子水4.0mL置于烧杯中内，搅拌混合均匀，经氮气除氧后，将其填充到由两片载玻片形成的夹板空间中，置于55℃的烘箱中聚合反应4h，得薄膜状的印迹水凝胶；
S3、将由步骤S2所得的印迹水凝胶浸泡在有机溶剂中，并超声振荡5min，以去除其中的待检农药；
S4、将不同浓度的待检农药储备液分别加入10ml本身不含待检农药的样品汁中，使所得溶液中待检农药的浓度分别为0mg/L、0.01mg/L、0.05mg/L、0.1mg/L、0.5mg/L、1mg/L、5mg/L、10mg/L；
S5、将步骤S3所得的印迹水凝胶浸泡于步骤S4中所得的含不同浓度待检农药的溶液中，5min后，将其取出并用去离子水漂去多余的溶液，得不同梯度的印迹水凝胶；
S6、将步骤S3所得的印迹水凝胶浸泡于步骤S1所得的上清液中，5-7min后，将其取出并用去离子水漂去多余的上清液，得样品印迹水凝胶；
S7、用便携式拉曼光谱仪对步骤S5和步骤S6所得的印迹水凝胶进行检测，将并将所得光谱进行比对，判断待检测样品中是否含有该农药。
实施例2
S1、将待检测样品置于汽爆罐内，先通入氮气至汽爆罐内压力为1.3MPa，爆破处理8min；然后迅速通入蒸汽至汽爆罐内压力为1.7MPa，蒸汽爆破处理0.5min后，加入丙酮和乙酸乙酯超声萃取5min，然后加入浓度为6-12％的硫酸钠水溶液，离心10min，吸取上清液(待检测试样液)，备用；
S2、称取待检农药0.02g、丙烯酸1.6mL、丙烯酰胺4.5g、N’N-亚甲基双丙烯酰胺0.12g、过硫酸铵0.14g和去离子水6.0mL置于烧杯中内，搅拌混合均匀，经氮气除氧后，将其填充到由两片载玻片形成的夹板空间中，置于65℃的烘箱中聚合反应3h，得薄膜状的印迹水凝胶；
S3、将由步骤S2所得的印迹水凝胶浸泡在有机溶剂中，并超声振荡10min，以去除其中的待检农药；
S4、将不同浓度的待检农药储备液分别加入10ml本身不含待检农药的样品汁中，使所得溶液中待检农药的浓度分别为0mg/L、0.01mg/L、0.05mg/L、0.1mg/L、0.5mg/L、1mg/L、5mg/L、10mg/L；
S5、将步骤S3所得的印迹水凝胶浸泡于步骤S4中所得的含不同浓度待检农药的溶液中，7min后，将其取出并用去离子水漂去多余的溶液，得不同梯度的印迹水凝胶；
S6、将步骤S3所得的印迹水凝胶浸泡于步骤S1所得的上清液中，7min后，将其取出并用去离子水漂去多余的上清液，得样品印迹水凝胶；
S7、用便携式拉曼光谱仪对步骤S5和步骤S6所得的印迹水凝胶进行检测，将并将所得光谱进行比对，判断待检测样品中是否含有该农药。
实施例3
S1、将待检测样品置于汽爆罐内，先通入氮气至汽爆罐内压力为1MPa，爆破处理16.5min；然后迅速通入蒸汽至汽爆罐内压力为1.5MPa，蒸汽爆破处理1.5min后，加入丙酮和乙酸乙酯超声萃取4.5min，然后加入浓度为9％的硫酸钠水溶液，离心8min，吸取上清液(待检测试样液)，备用；
S2、称取待检农药0.018g、丙烯酸1.5mL、丙烯酰胺3.5g、N’N-亚甲基双丙烯酰胺0.1g、过硫酸铵0.11g和去离子水5.0mL置于烧杯中内，搅拌混合均匀，经氮气除氧后，将其填充到由两片载玻片形成的夹板空间中，置于60℃的烘箱中聚合反应3.5h，得薄膜状的印迹水凝胶；
S3、将由步骤S2所得的印迹水凝胶浸泡在有机溶剂中，并超声振荡7.5min，以去除其中的待检农药；
S4、将不同浓度的待检农药储备液分别加入10ml本身不合待检农药的样品汁中，使所得溶液中待检农药的浓度分别为0mg/L、0.01mg/L、0.05mg/L、0.1mg/L、0.5mg/L、1mg/L、5mg/L、10mg/L；
S5、将步骤S3所得的印迹水凝胶浸泡于步骤S4中所得的含不同浓度待检农药的溶液中，6min后，将其取出并用去离子水漂去多余的溶液，得不同梯度的印迹水凝胶；
S6、将步骤S3所得的印迹水凝胶浸泡于步骤S1所得的上清液中，6min后，将其取出并用去离子水漂去多余的上清液，得样品印迹水凝胶；
S7、用便携式拉曼光谱仪对步骤S5和步骤S6所得的印迹水凝胶进行检测，将并将所得光谱进行比对，判断待检测样品中是否含有该农药
本发明的原理为：分子印迹技术，首先通过选择合适的功能单体与模板分子在介质中预组装形成特异性识别位点，再通过交联聚合反应形成聚合物凝胶而将这种特异性识别位点固定下来，然后利用合适的溶剂将模板分子从凝胶中移除，这样便在凝胶中留下了在三维空间上与模板分子相匹配的具有“记忆”功能的空穴，即实现对模板分子的特异性识别，从而可以在一定的基质中将模板分子富集。在本发明中，模板分子为待测农药，利用印迹聚合物凝胶将其在被测样品中富集后，采集聚合物凝胶的拉曼光谱，通过与该检测农药的标准拉曼光谱进行比对，判断凝胶中是否含有待测农药，从而判断被测样品中是否含有此成分。
本具体实施在0.05mg/L-10mg/L的浓度范围内均可检测到待测农药。
综上所述，本发明能够快速、低成本检测果蔬中是否有农药残留。通过分子印迹技术制备的水凝胶，可在5min之内完成对被测样品中待测农药的吸附富集作用，再经便携式拉曼光谱仪采集光谱信息，整个过程快速便捷，且水凝胶可多次循环重复使用，在降低检测成本的同时还具有环境友好的优点，并可满足现场、高通量检测的需求。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以作出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
Claims (5)
1.一种农药残留检测方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1、将待检测样品置于汽爆罐内，先通入氮气至汽爆罐内压力为0.7～1.3MPa，爆破处理8～25min；然后迅速通入蒸汽至汽爆罐内压力为1.3～1.7MPa，蒸汽爆破处理0.5～2.5min后，加入丙酮和乙酸乙酯超声萃取4～5min，然后加入浓度为6-12％的硫酸钠水溶液，离心6-10min，吸取上清液，备用；
S2、称取待检农药0.016-0.02g、丙烯酸1.4-1.6mL、丙烯酰胺2.5-4.5g、N’N-亚甲基双丙烯酰胺0.08-0.12g、过硫酸铵0.08-0.14g和去离子水4.0-6.0mL置于烧杯中内，搅拌混合均匀，经氮气除氧后，将其填充到由两片载玻片形成的夹板空间中，置于55-65℃的烘箱中聚合反应3-4h，得薄膜状的印迹水凝胶；
S3、将由步骤S2所得的印迹水凝胶浸泡在有机溶剂中，并超声振荡5-10min，以去除其中的待检农药；
S4、将不同浓度的待检农药储备液分别加入10ml本身不含待检农药的样品汁中，使所得溶液中待检农药的浓度分别为0mg/L、0.01mg/L、0.05mg/L、0.1mg/L、0.5mg/L、1mg/L、5mg/L、10mg/L；
S5、将步骤S3所得的印迹水凝胶浸泡于步骤S4中所得的含不同浓度待检农药的溶液中，5-7min后，将其取出并用去离子水漂去多余的溶液，得不同梯度的印迹水凝胶；
S6、将步骤S3所得的印迹水凝胶浸泡于步骤S1所得的上清液中，5-7min后，将其取出并用去离子水漂去多余的上清液，得样品印迹水凝胶；
S7、用便携式拉曼光谱仪对步骤S5和步骤S6所得的印迹水凝胶进行检测，将并将所得光谱进行比对，判断待检测样品中是否含有该农药。
2.根据权利要求1所述的一种农药残留检测方法，其特征在于，所述待检测样品与丙酮的固液比为0.2～0.5g/ml。
3.根据权利要求1所述的一种农药残留检测方法，其特征在于，待检测样品与乙酸乙酯的固液比为0.2～0.5g/ml。
4.根据权利要求1所述的一种农药残留检测方法，其特征在于，待检测样品与浓度为6-12％的硫酸钠水溶液的体积比为1∶1-5。
5.根据权利要求1所述的一种农药残留检测方法，其特征在于，所述有机溶剂为丙酮、二氯甲烷、乙酸乙酯中的一种或几种构成。
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20161012 |
|
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |