CN106008693A - 一种β2微球蛋白的提取方法 - Google Patents
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Abstract
一种β2微球蛋白的提取方法，涉及β2微球蛋白提取技术领域，收取透析患者透析废液，向其内加入其质量0.1‑15%的蛋白保护剂，加入蛋白保护剂的透析废液作为提取原液；将提取原液通过高通量透析器将其中含有的大分子物质去除，收取滤出的提取原液待用；将经步骤2滤得的提取原液通过低通量透析器滤出其内含有的水分，直到剩余的液体体积为提取原液体积的0.1‑1%时，得β2微球蛋白浓缩液；将β2微球蛋白浓缩液用蛋白质分离纯化装置处理，去除其他白蛋白，纯化β2微球蛋白浓缩液，制得成品。本发明工艺简单、操作方便，制取成本低廉。
Description
技术领域
本发明涉及β2微球蛋白提取技术领域，详细讲是一种工艺简单、操作方便，制取成本低廉的β2微球蛋白的提取方法。
背景技术
我们知道，β2微球蛋白作为一种中分子物质，是体外评价透析器性能的重要试剂，随着高通量透析器及血液滤过器在国内的普及范围不断扩大，使用频率不断增加，高通量透析器及血滤器的品牌和种类也越来越多。作为评价透析器体外性能的重要试剂β2微球蛋白的需求量也不断增加。但由于来源有限，生产工艺比较复杂等原因，造成β2微球蛋白的价格十分昂贵，高达3600元/mg。根据透析器体外性能评价方法的不同，对β2微球蛋白的消耗量也会有所差异。在透析器体外性能评价中在保证性能符合要求的条件下，评价一支透析器所需要的试剂中仅β2微球蛋白一项就需要花费几万元，大大增加了企业的检测成本。
发明内容
本发明的目的是解决上述现有技术的不足，提供一种工艺简单、操作方便，制取成本低廉的β2微球蛋白的提取方法。
本发明解决上述现有技术的不足所采用的技术方案是：
一种β2微球蛋白的提取方法，其特征在于包括如下步骤：
步骤1：收取透析患者透析废液，向其内加入其质量0.1-15%的蛋白保护剂，加入蛋白保护剂的透析废液作为提取原液；
步骤2：将提取原液通过高通量透析器将其中含有的大分子物质去除，收取滤出的提取原液待用；
步骤3：将经步骤2滤得的提取原液通过低通量透析器滤出其内含有的水分，直到剩余的液体体积为提取原液体积的0.1-1%时，得β2微球蛋白浓缩液；
步骤4：将β2微球蛋白浓缩液用蛋白质分离纯化装置处理，去除其他白蛋白，纯化β2微球蛋白浓缩液，制得成品。
本发明中所述的蛋白质分离纯化装置为切割分子量为1-6W的超滤分离纯化装置。
优选的，本发明所述的超滤分离纯化装置的切割分子量为3-5W。
进一步的，将步骤4制得的成品进行分装，采用冷冻干燥机进行干燥，得到冻干粉长期保存。
本发明步骤1中所述的蛋白保护剂为psmf trion100、葡聚糖、肌醇、甘露醇、丙三醇、山梨醇等中的一种或者多种组合。
本发明步骤1中优选的向收取的透析废液内加入其体积2-5%的蛋白保护剂制成提取原液。
本发明步骤2中所述的高通量透析器为超滤系数Kuf>20ml/mmHg/h的透析器；优选超滤系数Kuf为35-60ml/mmHg/h的透析器。
本发明步骤3中所述的低通量透析器为超滤系数Kuf<20ml/mmHg/h的透析器；优选超滤系数Kuf为15-19ml/mmHg/h的透析器。
本发明使用了高通量透析器、低通量透析器和蛋白质分离纯化装置等现有的成熟产品，对透析患者治疗过程中产生的透析废液进行简单处理，即制得了β2微球蛋白，使用的器具成本低廉，操作简单方便。本发明具有原料充足，提取工艺简单、操作方便，制取成本低廉等有益效果。
附图说明
图1为本发明的实施流程图。
具体实施方式
实施例1
收取透析患者透析废液，加入其质量2%的葡聚糖，制得提取原液；将提取原液通过超滤系数Kuf为42ml/mmHg/h的透析器将其中含有的大分子物质去除；然后将滤出的提取原液循环通过超滤系数Kuf为19ml/mmHg/h的透析器，滤出其内含有的大量水分，直到剩余的液体体积为提取原液体积的0.2%时，得β2微球蛋白浓缩液；将β2微球蛋白浓缩液用切割分子量为3W的超滤离心管处理，得纯化β2微球蛋白浓缩液，制得成品。将制得的纯化β2微球蛋白浓缩液进行分装，采用冷冻干燥机进行干燥，得到冻干粉长期保存。
经检测，本实施例制得的β2微球蛋白冻干粉的纯度为85.5%。
β2微球蛋白的含量如下表所示：
| 样品名称 | 重量 | β2微球蛋白含量 |
| β2微球蛋白冻干粉 | 10mg | 8.55mg |
实施例2
收取透析患者透析废液，加入其质量5%的甘露醇，制得提取原液；将提取原液通过超滤系数Kuf为55ml/mmHg/h的透析器，除去其中的大分子蛋白；然后将滤出的提取原液循环通过超滤系数Kuf为18ml/mmHg/h的透析器，滤出其内含有的大量水分，直到剩余的液体体积为提取原液体积的0.8%时，得β2微球蛋白浓缩液；将β2微球蛋白浓缩液用切割分子量为5W的超滤杯处理，得纯化β2微球蛋白浓缩液，制得成品。将制得的纯化β2微球蛋白浓缩液进行分装，采用冷冻干燥机进行干燥，得到冻干粉长期保存。
经检测，本实施例制得的β2微球蛋白冻干粉的纯度约为77%。
β2微球蛋白的含量如下表所示：
| 样品名称 | 重量 | β2微球蛋白含量 |
| β2微球蛋白冻干粉 | 11mg | 8.5mg |
本发明使用了高通量透析器、低通量透析器和分离纯化装置等现有的成熟产品，对透析患者治疗过程中产生的透析废液进行简单处理，即制得了β2微球蛋白，使用的器具成本低廉，操作简单方便。本发明具有原料充足，提取工艺简单、操作方便，制取成本低廉、极大降低了透析器性能评价试剂中β2微球蛋白的成本等有益效果。
Claims (8)
1.一种β2微球蛋白的提取方法，其特征在于包括如下步骤：
步骤1：收取透析患者透析废液，向其内加入其质量0.1-15%的蛋白保护剂，加入蛋白保护剂的透析废液作为提取原液；
步骤2：将提取原液通过高通量透析器将其中含有的大分子物质去除，收取滤出的提取原液待用；
步骤3：将经步骤2滤得的提取原液通过低通量透析器滤出其内含有的水分，直到剩余的液体体积为提取原液体积的0.1-1%时，得β2微球蛋白浓缩液；
步骤4：将β2微球蛋白浓缩液用蛋白质分离纯化装置处理，去除其他白蛋白，纯化β2微球蛋白浓缩液，制得成品。
2.根据权利要求1所述的β2微球蛋白的提取方法，其特征在于步骤4中所述的蛋白质分离纯化装置为切割分子量为1-6W的超滤分离纯化装置。
3.根据权利要求2所述的β2微球蛋白的提取方法，其特征在于所述的超滤分离纯化装置的切割分子量为3-5W。
4.根据权利要求1或2或3所述的β2微球蛋白的提取方法，其特征在于将步骤4制得的成品进行分装，采用冷冻干燥机进行干燥，得到冻干粉长期保存。
5.根据权利要求4所述的β2微球蛋白的提取方法，其特征在于步骤1中所述的蛋白保护剂为psmf trion100、葡聚糖、肌醇、甘露醇、丙三醇、山梨醇等中的一种或者多种组合。
6.根据权利要求4所述的β2微球蛋白的提取方法，其特征在于本发明步骤1中优选的向收取的透析废液内加入其体积2-5%的蛋白保护剂制成提取原液。
7.根据权利要求6所述的β2微球蛋白的提取方法，其特征在于步骤2中所述的高通量透析器为超滤系数Kuf>20ml/mmHg/h的透析器。
8.根据权利要求7所述的β2微球蛋白的提取方法，其特征在于步骤3中所述的低通量透析器为超滤系数Kuf<20ml/mmHg/h的透析器。
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