CN105998111A - 一种酶法预处理辅助提取禹白芷中总香豆素的工艺 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种酶法预处理辅助提取禹白芷总香豆素的工艺，该酶法预处理提取工艺低温进行，使用本方法可以使流浸膏收率提高20%以上，总香豆素收率提高15%以上，本发明提取温度低，能耗低，有效成分得率高，得到的产品质量稳定，反应条件易控制，适合于工业化放大生产。

Description

一种酶法预处理辅助提取禹白芷中总香豆素的工艺

技术领域

本发明属于中药提取工艺技术领域，具体涉及一种可有效提高禹白芷中总香豆素提取效率的酶法预处理提取工艺。

背景技术

白芷为伞形科植物白芷或杭白芷的干燥根，是中医临床常用药之一，它始记载于，《神农本草经》，性温，味辛，具有祛风、除湿、行气、止痛，消疮、止血、美容的功效，用于治疗感冒头痛，眉棱骨痛，鼻渊、牙痛，疮疡肿痛等，现代药理学研究表明，白芷具有抗炎，解热，镇痛，抗病原微生物的作用，能抑制银屑病，治疗白癜风，具有拮抗副交感神经的作用，有解痉止痛效果等，商品白芷主要有祁白芷，禹白芷，杭白芷，川白芷，白芷中所含化学成分以挥发油和香豆素类为主，香豆素类中，以氧化前胡素、欧前胡素、和异欧前胡素的含量居高，白芷中总香豆素含量的高低，是中药白芷品质评价的重要指标之一，研究表明白芷提取物中总香豆素的含量越高，其疗效也越好，因此如何提高白芷提取物中总香豆素的含量成为白芷提取工艺的关键。白芷临床应用广泛，据统计，在中国药典2000版一部收载的458个组方中，有43个成分还有白芷，同时他也是一种很好的香料和调味辅料，在日常生活中广泛应用。

香豆素的提取工艺，比较常用的主要有有机溶剂提取法，超临界二氧化碳萃取法等，其中有机溶剂的提取法由于工艺简单，操作方便，反应条件较易控制等有点，目前仍是最广泛的一种提取方法，但是有机溶解提取通常需要较高的温度和大量的有机溶剂，从而在一定 程度上影响了目标产物的活性，且香豆素的纯度也会受到影响，二氧化碳超临界提取方法对设备的要求比较高。

发明内容

本发明的目的在于提供一种酶法预处理提取禹白芷中总香豆素的方法，为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种酶法预处理辅助提取禹白芷中总香豆素的工艺，它包括以下步骤：

第一步：取一份禹白芷粉碎过筛至40-60目，加入3份的纯净水搅拌均匀，水浴加热至60摄氏度左右，得禹白芷溶液；

第二步：在第一步得到的禹白芷溶液中加入6-10U/g的纤维素酶，4-80U/g的淀粉酶和3-7U/g的木瓜蛋白酶组成的复合酶，在PH3-5条件下反应2小时，得到酶解液；

第三步：将第二步得到的酶解液，加入8倍量的70%乙醇溶液抽提3次，每次抽屉时间为2小时，抽提温度为60℃，过滤得到抽提液；

第四步：合并抽提液，减压浓缩滤液得浓缩膏，计算出膏率；

第五步：浓缩液经喷雾干燥制备得到禹白芷提取物，喷雾干燥条件为：进液物料温度为70-80℃，浸膏相对密度为1.08-1.10（60℃），进液速度为每分钟60-70ml，进风温度为138-140℃，出风温度为83-85℃；

第六步：采用紫外分光光度法检测禹白芷提取物中总香豆素含量检测，具体步骤如下：精密称取欧前胡素对照品3.91mg，置于10ml量瓶中，加甲醇使其完全溶解并稀释至刻度，摇匀，分别吸取0.1ml、0.15ml、0.2ml、0.25ml、0.3ml，用甲醇稀释定容到ml量瓶中，摇匀，在303nm波长测定吸光度，以欧前胡素对照品浓度为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标准曲线，去禹白芷总香豆素提取物适量，加入95%乙醇定容至250ml量瓶中，摇匀，精密吸取0.3ml，加入95%乙醇定容至5ml量瓶中，摇匀，于303nm波长处测定吸光度，计算含量。

本发明的有益效果：本发明以禹州道地中药材禹白芷为研究对象，采用酶法预处理后用常温提取方法可以使出膏率比传统工艺提高20%以上，提取物中总香豆素的含量提高15%以上，采用该方法可以提高出膏率和提取物中总香豆素的含量，本发明产品，生产工艺简单易行，且产品质量稳定，低温对提取物活性破坏小、能耗少、收率高，适宜于大规模生产。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步的说明。

实施例1

一种酶法预处理辅助提取禹白芷中总香豆素的工艺，包括以下步骤：

第一步：取100kg禹白芷粉碎过筛至40目，加入300kg的纯净水搅拌均匀，加热至60摄氏度左右，得禹白芷溶液；

第二步：在所述禹白芷溶液中加入8U/g的纤维素酶，60U/g的淀粉酶和5U/g的木瓜蛋白酶组成的复合酶，在PH4条件下反应2小时，得到酶解液；

第三步：取上述酶解液，加入8倍量的70%乙醇溶液抽提3次，每次抽提时间为2小时，抽提温度为60℃；过滤得到抽提液；

第四步：合并抽提液，减压浓缩滤液得浓缩膏10.1kg，出膏率为10.1%；

第五步：浓缩液经喷雾干燥制备得到禹白芷提取物，喷雾干燥条件为：进液物料温度为70℃，浸膏相对密度为1.00（60℃），进液速度为每分钟60ml，进风温度为140℃，出风温度为85℃；

第六步：采用紫外分光光度法检测禹白芷提取物中总香豆素含量检测，精密称取欧前胡素对照品3.91mg，置于10ml量瓶中，加甲醇使其完全溶解并稀释至刻度，摇匀，分别吸取0.1ml、0.15ml、0.2ml、0.25ml、0.3ml，用甲醇稀释定容到ml量瓶中，摇匀，在303nm波长测定吸光度，以欧前胡素对照品浓度为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标准曲线，去禹白芷总香豆素提取物适量，加入95%乙醇定容至250ml量瓶中，摇匀，精密吸取0.3ml，加入95%乙醇定容至5ml量瓶中，摇匀，于303nm波长处测定吸光度，计算出禹白芷提取物中总香豆素含量为65.7%。

实施例2

一种酶法预处理辅助提取禹白芷中总香豆素的工艺，包括以下步骤：

第一步：取100kg禹白芷粉碎过筛至50目，加入300kg的纯净水搅拌均匀，加热至60摄氏度左右，得禹白芷溶液；

第二步：在所述禹白芷溶液中加入7U/g的纤维素酶，55U/g的淀粉酶和8U/g的木瓜蛋白酶组成的复合酶，在PH3.5条件下反应2小时，得到酶解液；

第三步：取上述酶解液，加入7倍量的80%乙醇溶液抽提3次，每次抽提时间为2小时，抽提温度为60℃，过滤得到抽提液；

第四步：合并抽提液，减压浓缩滤液得浓缩膏10.8kg，出膏率10.8%；

第五步：浓缩液经喷雾干燥制备得到禹白芷提取物，喷雾干燥条件为：进液物料温度为75℃，浸膏相对密度为1.00（60℃），进液速度为每分钟65ml，进风温度为139℃，出风温度为84℃；

第六步：采用紫外分光光度法检测禹白芷提取物中总香豆素含量检测，禹白芷提取物中总香豆素含量为66.5%.

实施例3

一种酶法预处理辅助提取禹白芷中总香豆素的工艺，它包括以下步骤：

第一步：取一份禹白芷粉碎过筛至60目，加入3份的纯净水搅拌均匀，水浴加热至60摄氏度左右，得禹白芷溶液；

第二步：在第一步得到的禹白芷溶液中加入7U/g的纤维素酶，55U/g的淀粉酶和8U/g的木瓜蛋白酶组成的复合酶，在PH3.5条件下反应2小时，得到酶解液；

第三步：将第二步得到的酶解液，加入8倍量的70%乙醇溶液抽提3次，每次抽屉时间为2小时，抽提温度为60℃，过滤得到抽提液；

第四步：合并抽提液，减压浓缩滤液得浓缩膏，出膏率10.8%；

第五步：浓缩液经喷雾干燥制备得到禹白芷提取物，喷雾干燥条件为：进液物料温度为80℃，浸膏相对密度为1.10（60℃），进液速度为每分钟70ml，进风温度为138℃，出风温度为83℃；

第六步：采用紫外分光光度法检测禹白芷提取物中总香豆素含量检测，具体步骤如下：精密称取欧前胡素对照品3.91mg，置于10ml量瓶中，加甲醇使其完全溶解并稀释至刻度，摇匀，分别吸取0.1ml、0.15ml、0.2ml、0.25ml、0.3ml，用甲醇稀释定容到ml量瓶中，摇匀，在303nm波长测定吸光度，以欧前胡素对照品浓度为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标准曲线，去禹白芷总香豆素提取物适量，加入95%乙醇定容至250ml量瓶中，摇匀，精密吸取0.3ml，加入95%乙醇定容至5ml量瓶中，摇匀，于303nm波长处测定吸光度，计算出禹白芷提取物中总香豆素含量为66.1%。

表1通过对比说明本发明提取工艺的提取效率。

由表1可知，本发明酶法提取工艺、实施例1、实施例2和实施例3的出膏率分别为10.5%、10.1%、10.4%和10.5%，均高于普通乙醇提取工艺的8.5%，提高比例均高于15%；本发明实施例提取的总香豆素含量均高于普通乙醇提取，提高效率均高于19%；由此表1可知，本发明提取工艺优于普通乙醇提取工艺。

Claims (1)

1.一种酶法预处理辅助提取禹白芷中总香豆素的工艺，其特征在于，它包括以下步骤：

第一步：取一份禹白芷粉碎过筛至40-60目，加入3份的纯净水搅拌均匀，水浴加热至58-62摄氏度，得禹白芷溶液；

第二步：在第一步得到的禹白芷溶液中加入6-10U/g的纤维素酶，4-80U/g的淀粉酶和3-7U/g的木瓜蛋白酶组成的复合酶，在PH3-5条件下反应2小时，得到酶解液；

第三步：将第二步得到的酶解液，加入8倍量的70%乙醇溶液抽提3次，每次抽屉时间为2小时，抽提温度为58-62℃，过滤得到抽提液；

第四步：合并抽提液，减压浓缩滤液得浓缩膏，计算出膏率；

第五步：浓缩液经喷雾干燥制备得到禹白芷提取物，喷雾干燥条件为：进液物料温度为70-80℃，浸膏相对密度为1.08-1.10（60℃），进液速度为每分钟60-70ml，进风温度为138-140℃，出风温度为83-85℃；

第六步：采用紫外分光光度法检测禹白芷提取物中总香豆素含量检测，具体步骤如下：精密称取欧前胡素对照品3.91mg，置于10ml量瓶中，加甲醇使其完全溶解并稀释至刻度，摇匀，分别吸取0.1ml、0.15ml、0.2ml、0.25ml、0.3ml，用甲醇稀释定容到ml量瓶中，摇匀，在303nm波长测定吸光度，以欧前胡素对照品浓度为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标准曲线，去禹白芷总香豆素提取物适量，加入95%乙醇定容至250ml量瓶中，摇匀，精密吸取0.3ml，加入95%乙醇定容至5ml量瓶中，摇匀，于303nm波长处测定吸光度，计算含量。