CN105997920A - 一种伪狂犬活疫苗免疫佐剂泡腾片 - Google Patents

一种伪狂犬活疫苗免疫佐剂泡腾片 Download PDF

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Abstract

一种伪狂犬活疫苗免疫佐剂泡腾片，属于兽用生物制品技术领域。每1000片泡腾片包括以下原料：黄芪多糖：20‑60g、二氢槲皮素：30‑80g、二氢桑色素：5‑20g、橙皮素：10‑30g、α‑甘露聚糖肽：10‑30g、泡腾料：300‑500g、填充剂：补足至1000g。本发明所制备的泡腾片，降低了产品的运输要求，增加了用户使用的便利性；本发明所制备的泡腾片可增强猪只免疫力，提高伪狂犬活疫苗的免疫效果。

Description

一种伪狂犬活疫苗免疫佐剂泡腾片
技术领域
本发明属于兽用生物制品技术领域，具体涉及一种伪狂犬活疫苗免疫佐剂泡腾片。
背景技术
伪狂犬病毒（Pseudorabies virus, PRV）属于疱疹病毒（Herpesviridae）α疱疹病毒亚科（Alphaher-pesririnae）水痘病毒属（Varicello virus）的疱疹病毒亚科Ⅰ型（Porcine herpesvirus Typel），能引发猪的严重疾病。同时，猪既是伪狂犬病毒的贮存者，也是伪狂犬病毒的传染源，控制猪伪狂犬病不仅对养猪事业本身，而且对其它动物养殖的顺利发展也有着十分重要的意义。在欧美等达国家，得利于PRV基因缺失活苗和相应鉴别方法的应用，该病得到控制或根除；但在发展中国家，该病仍频繁发生，严重制约了这些国家和地区养猪业的健康发展。但是，冻干活疫苗在养殖户使用过程中较为不便，需要额外的配备疫苗稀释液或者直接中冷开水稀释，一方面配备稀释液则大幅度提高生产、使用成本，另一方面直接使用冷开水会导致疫苗免疫效果较差。
黄酮类化合物是自然界中存在的多元酚类物质，也是自然界药用植物中的主要活性成分之一。它是指具有15个碳原子并以C6-C3-C6的方式构成的三环天然有机物，是植物在长期自然选择中产生的二级代谢产物，现在已分离鉴定的有4000多种。它广泛存在于果蔬、中草药中，无毒副作用，它具有显著的清除机体内自由基、抗老化、抗突变、调血脂降血压等药理保健功能，是一类极具开发前景的天然有机抗氧化剂，这些抗氧化活性物质可以减少和清除机体内自由基，具有预防疾病的作用。
多糖是中药活性成分之一，大量研究表明，多糖及糖复合物在生物体内不仅是作为能量资源和构成材料，更重要的是它存在于一切细胞膜结构中，参与生命现象中细胞的各种活动。多糖类物质是所有生命有机体的重要组成部分，具有清除自由基、提高抗氧化酶活性和抑制脂质过氧化的能力。
发明内容
针对现有技术存在的问题，本发明的目的在于设计提供一种伪狂犬活疫苗免疫佐剂泡腾片的技术方案。
所述的一种伪狂犬活疫苗免疫佐剂泡腾片，其特征在于每1000片泡腾片包括以下原料：
黄芪多糖：20-60g
二氢槲皮素：30-80g
二氢桑色素： 5-20g
橙皮素：10-30g
α-甘露聚糖肽：10-30g
泡腾料：300-500g
填充剂：补足至1000g。
所述的一种伪狂犬活疫苗免疫佐剂泡腾片，其特征在于每1000片泡腾片包括以下原料：
黄芪多糖：30-50g
二氢槲皮素：40-60g
二氢桑色素： 10-15g
橙皮素：15-20g
α-甘露聚糖肽：15-20g
泡腾料：350-400g
填充剂：补足至1000。
所述的一种伪狂犬活疫苗免疫佐剂泡腾片，其特征在于所述的泡腾料包括以下重量份的原料：
无水柠檬酸：100-180份
碳酸氢钠：150-250份
聚维酮K30：10-30份
乙二胺四乙酸二钠：20-40份
硬脂酸镁：4-8份。
所述的一种伪狂犬活疫苗免疫佐剂泡腾片，其特征在于所述的泡腾料包括以下重量份的原料：
无水柠檬酸：120-160份
碳酸氢钠：180-220份
聚维酮K30：15-25份
乙二胺四乙酸二钠：25-35份
硬脂酸镁：5-6份。
所述的一种伪狂犬活疫苗免疫佐剂泡腾片，其特征在于所述的填充剂为乳糖和微晶纤维素MCC102。
所述的一种伪狂犬活疫苗免疫佐剂泡腾片，其特征在于所述的乳糖和微晶纤维素MCC102的重量比为2:1。
所述的一种伪狂犬活疫苗免疫佐剂泡腾片，其特征在于所述的黄芪多糖按以下步骤制得：
a、取黄芪饮片，加8倍量水，加热煮沸二次，第一次2h，第二次1.5h，合并提取液，过滤，滤液至浓缩药液量与药材量比为2:1 (V/G)；
b、取上浓缩液，加等量乙醇，搅拌均匀，0℃-10℃冷藏36h，过滤冷藏液，回收乙醇，并浓缩冷藏液至药液量与药材量比为1.6: 1(V/G)，然后再将浓缩的药液加1.5倍量乙醇至药液含醇量为60%后，0℃-10℃冷藏36h，过滤冷藏液，回收乙醇，浓缩冷藏液至药液量与药材量比为1:5，即每1ml相当于药材5g；
c、取上浓缩液，加水稀释药液至每1ml相当于药材1g，0℃-10℃冷藏24h后过滤，浓缩滤液至每1ml相当于药材10g，喷雾干燥，即得。
上述的一种伪狂犬活疫苗免疫佐剂泡腾片及其制备方法：将各原料进行混合，用压片机压制成片剂，定量分装，即得到伪狂犬活疫苗免疫佐剂泡腾片。
本发明具有以下有益效果：
1、本发明所制备的泡腾片，降低了产品的运输要求，增加了用户使用的便利性。
2、本发明所制备的泡腾片可增强猪只免疫力，提高伪狂犬活疫苗的免疫效果。
具体实施方式
为了使本发明更加容易理解，下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围，下列实施例中未提及的具体实验方法，通常按常规实验方法进行。
实施例1：黄芪多糖制备
a、取黄芪饮片，投入多功能提取罐中，加8倍量水，加热煮沸二次，第一次2h，第二次1.5h，合并提取液，过滤，滤液进入浓缩器至浓缩药液量与药材量比为2:1 (V/G)；
b、取上浓缩液于醇沉罐中，加等量乙醇，搅拌均匀，0℃-10℃冷藏36h，过滤冷藏液，回收乙醇，并浓缩冷藏液至药液量与药材量比为1.6: 1(V/G)，然后再将浓缩的药液加1.5倍量乙醇至药液含醇量为60%后，0℃-10℃冷藏36h，过滤冷藏液，回收乙醇，浓缩冷藏液至药液量与药材量比为1:5，即每1ml相当于药材5g；
c、取上浓缩液，加水稀释药液至每1ml相当于药材1g，0℃-10℃冷藏24h后过滤，浓缩滤液至每1ml相当于药材10g，喷雾干燥，即得。
实施例2：泡腾料的制备
无水柠檬酸：180份
碳酸氢钠：250份
聚维酮K30：30份
乙二胺四乙酸二钠：40份
硬脂酸镁：8份
将上述原料混合，经Co-60辐射灭菌制得泡腾材料。
实施例3：泡腾料的制备
无水柠檬酸：160份
碳酸氢钠：220份
聚维酮K30：25份
乙二胺四乙酸二钠：35份
硬脂酸镁：6份
将上述原料混合，经Co-60辐射灭菌制得泡腾材料。
实施例4：泡腾料的制备
无水柠檬酸：100份
碳酸氢钠：150份
聚维酮K30：10份
乙二胺四乙酸二钠：20份
硬脂酸镁：4份
将上述原料混合，经Co-60辐射灭菌制得泡腾材料。
实施例5：一种伪狂犬活疫苗免疫佐剂泡腾片
实施例1制得的黄芪多糖：50g
二氢槲皮素：50g
二氢桑色素：15g
橙皮素：15g
α-甘露聚糖肽：20g
实施例2制得的泡腾料：478g
填充剂：乳糖248g、微晶纤维素MCC102 124g。
将上述各组分充分混合，用压片机压制成片剂，定量分装，即得到伪狂犬活疫苗免疫佐剂泡腾片。
实施例6：一种伪狂犬活疫苗免疫佐剂泡腾片
实施例1制得的黄芪多糖：30g
二氢槲皮素：30g
二氢桑色素：20g
橙皮素：20g
α-甘露聚糖肽：20g
实施例3制得的泡腾料：376g
填充剂：乳糖336g、微晶纤维素MCC102 168g。
将上述各组分充分混合，用压片机压制成片剂，定量分装，即得到伪狂犬活疫苗免疫佐剂泡腾片。
实施例7：一种伪狂犬活疫苗免疫佐剂泡腾片
实施例1制得的黄芪多糖：40g
二氢槲皮素：60g
二氢桑色素：10g
橙皮素：20g
α-甘露聚糖肽：10g
实施例4制得的泡腾料：374g
填充剂：乳糖324g、微晶纤维素MCC102 162g。
将上述各组分充分混合，用压片机压制成片剂，定量分装，即得到伪狂犬活疫苗免疫佐剂泡腾片。
试验例1 本发明泡腾片的应用
1材料
1.1伪狂犬活疫苗免疫佐剂泡腾片
按本发明实施例5-7制得。
1.2 伪狂犬活疫苗 购自某生物制品有限公司
1.3 试验用猪 28日龄健康断奶仔猪60头，检测伪狂犬抗体、抗原双阴性。70日龄健康育肥猪60头，检测伪狂犬抗体、抗原双阴性。
2 方法
2.1将60头28日龄健康断奶仔猪分为四组，第一组15头，作为实验一组，采用本发明实施例5制备泡腾片进行疫苗稀释；第二组15头，作为实验二组，采用本发明实施例6制备泡腾片进行疫苗稀释；第三组15头，作为实验三组，采用本发明实施例7制备泡腾片进行疫苗稀释；第四组15头，作为实验四组，采用疫苗自带稀释液进行疫苗稀释。免疫后于7d、14d、21d、42d、63d、84d分别采血，分离血清，采用IDEXX伪狂犬抗体检测试剂盒检测各组gB IgG抗体。
2.2将60头70日龄健康阴性猪分为四组，第一组15头，作为实验一组，采用本发明实施例5制备泡腾片进行疫苗稀释；第二组15头，作为实验二组，采用本发明实施例6制备泡腾片进行疫苗稀释；第三组15头，作为实验三组，采用本发明实施例7制备泡腾片进行疫苗稀释；第四组15头，作为实验四组，采用疫苗自带稀释液进行疫苗稀释。免疫后于7d、14d、21d、42d、63d、84d分别采血，分离血清，采用IDEXX伪狂犬抗体检测试剂盒检测各组gB IgG抗体。
3 结果
3.1 崩解时限结果
取1片泡腾片，置盛有200ml水的250ml烧杯中，水温15-25℃，观察并记录完全溶解的时间，结果见表1。
表1 崩解时限检验结果
3.2 28日龄断奶仔猪试验结果
表2 28日龄健康断奶仔猪试验结果
3.3 70日龄育肥猪试验结果
表3 70日龄育肥猪试验结果
4 结论
综上所述，本发明猪伪狂犬免疫佐剂泡腾片可以提高机体免疫力，一方面提前产生抗体降低免疫空白期，另一方面延长疫苗保护期，可大幅度提高伪狂犬活疫苗免疫效果。

Claims (7)

1.一种伪狂犬活疫苗免疫佐剂泡腾片，其特征在于每1000片泡腾片包括以下原料：
黄芪多糖：20-60g
二氢槲皮素：30-80g
二氢桑色素： 5-20g
橙皮素：10-30g
α-甘露聚糖肽：10-30g
泡腾料：300-500g
填充剂：补足至1000g。
2.如权利要求1所述的一种伪狂犬活疫苗免疫佐剂泡腾片，其特征在于每1000片泡腾片包括以下原料：
黄芪多糖：30-50g
二氢槲皮素：40-60g
二氢桑色素：10-15g
橙皮素：15-20g
α-甘露聚糖肽：15-20g
泡腾料：350-400g
填充剂：补足至1000。
3.如权利要求1或2所述的一种伪狂犬活疫苗免疫佐剂泡腾片，其特征在于所述的泡腾料包括以下重量份的原料：
无水柠檬酸：100-180份
碳酸氢钠：150-250份
聚维酮K30：10-30份
乙二胺四乙酸二钠：20-40份
硬脂酸镁：4-8份。
4.如权利要求1或2所述的一种伪狂犬活疫苗免疫佐剂泡腾片，其特征在于所述的泡腾料包括以下重量份的原料：
无水柠檬酸：120-160份
碳酸氢钠：180-220份
聚维酮K30：15-25份
乙二胺四乙酸二钠：25-35份
硬脂酸镁：5-6份。
5.如权利要求1或2所述的一种伪狂犬活疫苗免疫佐剂泡腾片，其特征在于所述的填充剂为乳糖和微晶纤维素MCC102。
6.如权利要求1或2所述的一种伪狂犬活疫苗免疫佐剂泡腾片，其特征在于所述的乳糖和微晶纤维素MCC102的重量比为2:1。
7.如权利要求1或2所述的一种伪狂犬活疫苗免疫佐剂泡腾片，其特征在于所述的黄芪多糖按以下步骤制得：
a、取黄芪饮片，加8倍量水，加热煮沸二次，第一次2h，第二次1.5h，合并提取液，过滤，滤液至浓缩药液量与药材量比为2:1 (V/G)；
b、取上浓缩液，加等量乙醇，搅拌均匀，0℃-10℃冷藏36h，过滤冷藏液，回收乙醇，并浓缩冷藏液至药液量与药材量比为1.6: 1(V/G)，然后再将浓缩的药液加1.5倍量乙醇至药液含醇量为60%后，0℃-10℃冷藏36h，过滤冷藏液，回收乙醇，浓缩冷藏液至药液量与药材量比为1:5，即每1ml相当于药材5g；
c、取上浓缩液，加水稀释药液至每1ml相当于药材1g，0℃-10℃冷藏24h后过滤，浓缩滤液至每1ml相当于药材10g，喷雾干燥，即得。
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