CN105925648A - 一种塔拉蛋白粉和多肽粉及其生产方法 - Google Patents
一种塔拉蛋白粉和多肽粉及其生产方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN105925648A CN105925648A CN201610328837.8A CN201610328837A CN105925648A CN 105925648 A CN105925648 A CN 105925648A CN 201610328837 A CN201610328837 A CN 201610328837A CN 105925648 A CN105925648 A CN 105925648A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- powder
- tara
- albumen
- tower
- filtrate
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 239000000843 powder Substances 0.000 title claims abstract description 81
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title claims abstract description 59
- 235000017399 Caesalpinia tinctoria Nutrition 0.000 title claims abstract description 45
- 241000388430 Tara Species 0.000 title claims abstract description 45
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 title claims abstract description 41
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 title claims abstract description 39
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title abstract description 8
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims abstract description 40
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 33
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 24
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims abstract description 21
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 21
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims abstract description 18
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims abstract description 18
- 239000000047 product Substances 0.000 claims abstract description 14
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 claims abstract description 11
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract description 11
- 239000003513 alkali Substances 0.000 claims abstract description 9
- 238000001471 micro-filtration Methods 0.000 claims abstract description 8
- 238000003916 acid precipitation Methods 0.000 claims abstract description 6
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 claims abstract description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 44
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 42
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 42
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 claims description 42
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 claims description 30
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 30
- 239000008213 purified water Substances 0.000 claims description 25
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 21
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 18
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims description 15
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 14
- 239000004365 Protease Substances 0.000 claims description 13
- 235000013305 food Nutrition 0.000 claims description 13
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims description 12
- 108091005658 Basic proteases Proteins 0.000 claims description 11
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims description 11
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 claims description 10
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 claims description 10
- 239000004744 fabric Substances 0.000 claims description 10
- 150000002333 glycines Chemical class 0.000 claims description 10
- 210000000582 semen Anatomy 0.000 claims description 10
- 108090000145 Bacillolysin Proteins 0.000 claims description 9
- 101710130006 Beta-glucanase Proteins 0.000 claims description 9
- 108091005507 Neutral proteases Proteins 0.000 claims description 9
- 102000035092 Neutral proteases Human genes 0.000 claims description 9
- 238000009826 distribution Methods 0.000 claims description 9
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 claims description 9
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 claims description 7
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 claims description 7
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 7
- 239000012466 permeate Substances 0.000 claims description 7
- 235000019419 proteases Nutrition 0.000 claims description 7
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 claims description 6
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims description 5
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 claims description 5
- 239000003826 tablet Substances 0.000 claims description 4
- 108010004032 Bromelains Proteins 0.000 claims description 3
- 108010019160 Pancreatin Proteins 0.000 claims description 3
- 108090000526 Papain Proteins 0.000 claims description 3
- 235000019835 bromelain Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000012530 fluid Substances 0.000 claims description 3
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 claims description 3
- 230000036541 health Effects 0.000 claims description 3
- 229940055695 pancreatin Drugs 0.000 claims description 3
- 229940055729 papain Drugs 0.000 claims description 3
- 235000019834 papain Nutrition 0.000 claims description 3
- 238000001694 spray drying Methods 0.000 claims description 3
- 238000001291 vacuum drying Methods 0.000 claims description 3
- 102100032487 Beta-mannosidase Human genes 0.000 claims description 2
- -1 Casing sheet Substances 0.000 claims description 2
- 108090000284 Pepsin A Proteins 0.000 claims description 2
- 239000012752 auxiliary agent Substances 0.000 claims description 2
- 108010055059 beta-Mannosidase Proteins 0.000 claims description 2
- 239000002775 capsule Substances 0.000 claims description 2
- 239000007919 dispersible tablet Substances 0.000 claims description 2
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 claims description 2
- 239000008187 granular material Substances 0.000 claims description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims description 2
- 150000003254 radicals Chemical class 0.000 claims description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 claims description 2
- 102000057297 Pepsin A Human genes 0.000 claims 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims 1
- 230000006837 decompression Effects 0.000 claims 1
- 229940111202 pepsin Drugs 0.000 claims 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 claims 1
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 claims 1
- 244000046052 Phaseolus vulgaris Species 0.000 abstract description 4
- 235000010627 Phaseolus vulgaris Nutrition 0.000 abstract description 4
- 238000000746 purification Methods 0.000 abstract description 3
- 238000000926 separation method Methods 0.000 abstract description 3
- 108010009736 Protein Hydrolysates Proteins 0.000 abstract 1
- 239000000413 hydrolysate Substances 0.000 abstract 1
- 239000003531 protein hydrolysate Substances 0.000 abstract 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 40
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 16
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 description 14
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 13
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 12
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 12
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- OHDRQQURAXLVGJ-HLVWOLMTSA-N azane;(2e)-3-ethyl-2-[(e)-(3-ethyl-6-sulfo-1,3-benzothiazol-2-ylidene)hydrazinylidene]-1,3-benzothiazole-6-sulfonic acid Chemical compound [NH4+].[NH4+].S/1C2=CC(S([O-])(=O)=O)=CC=C2N(CC)C\1=N/N=C1/SC2=CC(S([O-])(=O)=O)=CC=C2N1CC OHDRQQURAXLVGJ-HLVWOLMTSA-N 0.000 description 10
- HHEAADYXPMHMCT-UHFFFAOYSA-N dpph Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC([N+](=O)[O-])=CC([N+]([O-])=O)=C1[N]N(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 HHEAADYXPMHMCT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 7
- 230000007760 free radical scavenging Effects 0.000 description 6
- 239000012224 working solution Substances 0.000 description 6
- MVORZMQFXBLMHM-QWRGUYRKSA-N Gly-His-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)CC1=CN=CN1 MVORZMQFXBLMHM-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 5
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 5
- 108010038983 glycyl-histidyl-lysine Proteins 0.000 description 5
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 4
- LUEWUZLMQUOBSB-FSKGGBMCSA-N (2s,3s,4s,5s,6r)-2-[(2r,3s,4r,5r,6s)-6-[(2r,3s,4r,5s,6s)-4,5-dihydroxy-2-(hydroxymethyl)-6-[(2r,4r,5s,6r)-4,5,6-trihydroxy-2-(hydroxymethyl)oxan-3-yl]oxyoxan-3-yl]oxy-4,5-dihydroxy-2-(hydroxymethyl)oxan-3-yl]oxy-6-(hydroxymethyl)oxane-3,4,5-triol Chemical compound O[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@@H](O[C@@H]2[C@H](O[C@@H](OC3[C@H](O[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H]3O)CO)[C@@H](O)[C@H]2O)CO)[C@H](O)[C@H]1O LUEWUZLMQUOBSB-FSKGGBMCSA-N 0.000 description 3
- QCVGEOXPDFCNHA-UHFFFAOYSA-N 5,5-dimethyl-2,4-dioxo-1,3-oxazolidine-3-carboxamide Chemical compound CC1(C)OC(=O)N(C(N)=O)C1=O QCVGEOXPDFCNHA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000007627 Caesalpinia Nutrition 0.000 description 3
- 241000522234 Caesalpinia Species 0.000 description 3
- 102000002322 Egg Proteins Human genes 0.000 description 3
- 108010000912 Egg Proteins Proteins 0.000 description 3
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 3
- 235000014103 egg white Nutrition 0.000 description 3
- 210000000969 egg white Anatomy 0.000 description 3
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 3
- 239000012567 medical material Substances 0.000 description 3
- 229930027945 nicotinamide-adenine dinucleotide Natural products 0.000 description 3
- BOPGDPNILDQYTO-NNYOXOHSSA-N nicotinamide-adenine dinucleotide Chemical compound C1=CCC(C(=O)N)=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]2[C@H]([C@@H](O)[C@@H](O2)N2C3=NC=NC(N)=C3N=C2)O)O1 BOPGDPNILDQYTO-NNYOXOHSSA-N 0.000 description 3
- 238000011017 operating method Methods 0.000 description 3
- 108010082495 Dietary Plant Proteins Proteins 0.000 description 2
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 2
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 2
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 2
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 2
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 2
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 2
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 2
- LNTHITQWFMADLM-UHFFFAOYSA-N gallic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 LNTHITQWFMADLM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 description 2
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 description 2
- USHAGKDGDHPEEY-UHFFFAOYSA-L potassium persulfate Chemical compound [K+].[K+].[O-]S(=O)(=O)OOS([O-])(=O)=O USHAGKDGDHPEEY-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 2
- OILXMJHPFNGGTO-UHFFFAOYSA-N (22E)-(24xi)-24-methylcholesta-5,22-dien-3beta-ol Natural products C1C=C2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)C=CC(C)C(C)C)C1(C)CC2 OILXMJHPFNGGTO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OCZVHBZNPVABKX-UHFFFAOYSA-N 1,1-diphenyl-2-(2,4,6-trinitrophenyl)hydrazine;ethanol Chemical compound CCO.[O-][N+](=O)C1=CC([N+](=O)[O-])=CC([N+]([O-])=O)=C1NN(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 OCZVHBZNPVABKX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- TUSDEZXZIZRFGC-UHFFFAOYSA-N 1-O-galloyl-3,6-(R)-HHDP-beta-D-glucose Natural products OC1C(O2)COC(=O)C3=CC(O)=C(O)C(O)=C3C3=C(O)C(O)=C(O)C=C3C(=O)OC1C(O)C2OC(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 TUSDEZXZIZRFGC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OQMZNAMGEHIHNN-UHFFFAOYSA-N 7-Dehydrostigmasterol Natural products C1C(O)CCC2(C)C(CCC3(C(C(C)C=CC(CC)C(C)C)CCC33)C)C3=CC=C21 OQMZNAMGEHIHNN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000024827 Alzheimer disease Diseases 0.000 description 1
- 108010001682 Dextranase Proteins 0.000 description 1
- 239000001263 FEMA 3042 Substances 0.000 description 1
- 244000182067 Fraxinus ornus Species 0.000 description 1
- 235000002917 Fraxinus ornus Nutrition 0.000 description 1
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 1
- OYHQOLUKZRVURQ-HZJYTTRNSA-N Linoleic acid Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/CCCCCCCC(O)=O OYHQOLUKZRVURQ-HZJYTTRNSA-N 0.000 description 1
- KVCWSJZUKMSPLM-UHFFFAOYSA-N O.O[PH2]=O Chemical compound O.O[PH2]=O KVCWSJZUKMSPLM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LRBQNJMCXXYXIU-PPKXGCFTSA-N Penta-digallate-beta-D-glucose Natural products OC1=C(O)C(O)=CC(C(=O)OC=2C(=C(O)C=C(C=2)C(=O)OC[C@@H]2[C@H]([C@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)[C@@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)[C@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)O2)OC(=O)C=2C=C(OC(=O)C=3C=C(O)C(O)=C(O)C=3)C(O)=C(O)C=2)O)=C1 LRBQNJMCXXYXIU-PPKXGCFTSA-N 0.000 description 1
- 102100039652 Pepsin A-5 Human genes 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-L Phosphate ion(2-) Chemical compound OP([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710093543 Probable non-specific lipid-transfer protein Proteins 0.000 description 1
- 206010039966 Senile dementia Diseases 0.000 description 1
- 229930182558 Sterol Natural products 0.000 description 1
- OUUQCZGPVNCOIJ-UHFFFAOYSA-M Superoxide Chemical compound [O-][O] OUUQCZGPVNCOIJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241001593750 Turcica Species 0.000 description 1
- HZYXFRGVBOPPNZ-UHFFFAOYSA-N UNPD88870 Natural products C1C=C2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)=CCC(CC)C(C)C)C1(C)CC2 HZYXFRGVBOPPNZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910000004 White lead Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 239000002585 base Substances 0.000 description 1
- LGJMUZUPVCAVPU-UHFFFAOYSA-N beta-Sitostanol Natural products C1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)CCC(CC)C(C)C)C1(C)CC2 LGJMUZUPVCAVPU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- KCIDZIIHRGYJAE-YGFYJFDDSA-L dipotassium;[(2r,3r,4s,5r,6r)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl] phosphate Chemical compound [K+].[K+].OC[C@H]1O[C@H](OP([O-])([O-])=O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O KCIDZIIHRGYJAE-YGFYJFDDSA-L 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000005553 drilling Methods 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 230000005714 functional activity Effects 0.000 description 1
- 235000004515 gallic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229940074391 gallic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000007952 growth promoter Substances 0.000 description 1
- 230000036571 hydration Effects 0.000 description 1
- 238000006703 hydration reaction Methods 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000004435 hydrogen atom Chemical class [H]* 0.000 description 1
- 230000000055 hyoplipidemic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011031 large-scale manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 235000020778 linoleic acid Nutrition 0.000 description 1
- OYHQOLUKZRVURQ-IXWMQOLASA-N linoleic acid Natural products CCCCC\C=C/C\C=C\CCCCCCCC(O)=O OYHQOLUKZRVURQ-IXWMQOLASA-N 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 150000002894 organic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940066716 pepsin a Drugs 0.000 description 1
- PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid;potassium Chemical compound [K].OP(O)(O)=O PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 235000019394 potassium persulphate Nutrition 0.000 description 1
- 238000000751 protein extraction Methods 0.000 description 1
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 1
- 230000009758 senescence Effects 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 1
- 150000003432 sterols Chemical class 0.000 description 1
- 235000003702 sterols Nutrition 0.000 description 1
- HCXVJBMSMIARIN-PHZDYDNGSA-N stigmasterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)/C=C/[C@@H](CC)C(C)C)[C@@]1(C)CC2 HCXVJBMSMIARIN-PHZDYDNGSA-N 0.000 description 1
- 235000016831 stigmasterol Nutrition 0.000 description 1
- 229940032091 stigmasterol Drugs 0.000 description 1
- BFDNMXAIBMJLBB-UHFFFAOYSA-N stigmasterol Natural products CCC(C=CC(C)C1CCCC2C3CC=C4CC(O)CCC4(C)C3CCC12C)C(C)C BFDNMXAIBMJLBB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- LRBQNJMCXXYXIU-NRMVVENXSA-N tannic acid Chemical compound OC1=C(O)C(O)=CC(C(=O)OC=2C(=C(O)C=C(C=2)C(=O)OC[C@@H]2[C@H]([C@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)[C@@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)[C@@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)O2)OC(=O)C=2C=C(OC(=O)C=3C=C(O)C(O)=C(O)C=3)C(O)=C(O)C=2)O)=C1 LRBQNJMCXXYXIU-NRMVVENXSA-N 0.000 description 1
- 235000015523 tannic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229920002258 tannic acid Polymers 0.000 description 1
- 229940033123 tannic acid Drugs 0.000 description 1
- 229920001864 tannin Polymers 0.000 description 1
- 235000018553 tannin Nutrition 0.000 description 1
- 239000001648 tannin Substances 0.000 description 1
- 239000000213 tara gum Substances 0.000 description 1
- 235000010491 tara gum Nutrition 0.000 description 1
- 238000009941 weaving Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P21/00—Preparation of peptides or proteins
- C12P21/06—Preparation of peptides or proteins produced by the hydrolysis of a peptide bond, e.g. hydrolysate products
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/01—Hydrolysed proteins; Derivatives thereof
- A61K38/011—Hydrolysed proteins; Derivatives thereof from plants
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
- C07K1/14—Extraction; Separation; Purification
- C07K1/30—Extraction; Separation; Purification by precipitation
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
- C07K1/14—Extraction; Separation; Purification
- C07K1/34—Extraction; Separation; Purification by filtration, ultrafiltration or reverse osmosis
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Botany (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Immunology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Water Supply & Treatment (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
Abstract
本发明涉及一种塔拉蛋白粉和多肽粉及其生产方法，所述方法将塔拉豆粉碎、过筛，使用碱提酸沉法提取蛋白质，过滤、酶解，再将蛋白酶解液依次经过微滤膜与超滤膜高效分离纯化，最后将蛋白液和酶解液浓缩干燥，得到塔拉蛋白粉和塔拉多肽粉。本发明的方法操作简便，高收率低成本，产品质量稳定，工艺绿色环保，适合大规模生产。
Description
技术领域
本发明提供一种塔拉蛋白粉及其多肽粉的生产方法，属于食品深加工领域。
背景技术
塔拉(Caesalpinia spinose Kuntze)又名刺云实(Tara)，系苏木科云实属植物，主要分布主要在南美洲西北部的秘鲁、厄瓜多尔、哥伦比亚等国家，盛产于秘鲁。它耐干热、速生、常绿、四季开花，是绿化荒山的优良树种之一。它的寿命长达50余年，盛产期约20年，栽后3-4年亩产豆荚可达300余千克。是花工少，投资小，收益大，一劳多益的优良经济林树种。上世纪90年代初，中国林业科学研究院资源昆虫研究所从南美引进了替代五倍子生产没食子单宁及其系列产品的补充原料植物-塔拉，并在云南省干热、干暖河谷地区种植成功。至2006年，云南已发展塔拉近1.5万亩，贵州、四川、广西及海南等省区也开始引种。塔拉豆荚含塔拉单宁55-61％，可生产上百种医药和化工产品；其种仁含半乳葡萄糖甘露聚糖约34％，可生产在食品、医药、纺织、造纸和石油钻井等方面有重要用途的塔拉胶，同时种仁中含有13％脂肪酸(亚油酸占总脂肪酸的52-54％)。研究者从塔拉豆中提取了豆甾醇和谷甾醇(两醇约占甾醇总量的90％，前者是生产云大120的主要原料，后者可生产降血脂药，价值达1000余美元/千克)。该豆用途广，且无毒可食，是一种珍贵木本豆类。
植物蛋白对各种年龄层次的人都是有益的，对青少年更是生长发育、增强体质不可缺少的物质。对于中年人来说，蛋白质能使脑力劳动者增强记忆，使体力劳动者增强耐力。对于老年人来说，补充优质蛋白质可推迟衰老，防治多种老年病的发生。随着人们生活水平的提高，对蛋白质的需求量也不断增加。据研究表明拉豆中含有13％以上的蛋白质，是一种重要的植物蛋白来源。由于塔拉豆中含有较多的半乳葡萄糖甘露聚糖，使用碱液提取蛋白质时，也溶解了大量的半乳葡萄糖甘露聚糖，造成碱提液过于黏稠，加酸无法使蛋白质沉淀下来，是目前塔拉蛋白提取的主要难点。为解决此技术问题，本专利提供了塔拉蛋白的制备工艺，同时也提供了获得比原蛋白在营养、功能性及生物活性上更加优良的塔拉多肽的制备方法。本专利弥补了塔拉蛋白及其多肽在制备工艺上的欠缺。
发明内容
本发明公开了一种塔拉蛋白粉和多肽粉及其生产方法，将塔拉豆粉碎后，使用特殊技术获得塔拉蛋白粉，并且通过一定工艺酶解后，获得具有生物活性的短肽。该生产方法是经过长期的生产实践和科学研究而总结出来的，该工艺的特点在于工艺简单、经济，绿色环保，尤其适用于大规模生产。
为达到上述目的，本发明是通过下述方法实现的：
本发明将塔拉豆粉碎、过筛，使用碱提酸沉法提取蛋白质，离心过滤，得到蛋白沉淀物；将蛋白沉淀物加水复溶、酶解，依次经过微滤膜与超滤膜高效分离纯化、浓缩，最后将蛋白沉淀物和酶解浓缩液干燥，得到淡黄色塔拉蛋白粉和多肽粉。塔拉蛋白的收率在5～8wt％，含量大于70wt％；塔拉多肽的收率在4～8wt％，肽含量不少于70wt％，95％以上肽分子量分布在1500Dalton以下。
其技术方案如下：
(1)将塔拉豆粉碎，过40目以上筛网从而获得塔拉豆粉。将一定量的塔拉豆粉与纯化水按质量比为1∶10～1∶20混合，加入豆粉质量的0.1％～1％的聚糖降解酶，调节pH至5～8，恒温40℃搅拌1～2h，完成后，离心过滤，滤液待用；
(2)将步骤(1)中的滤渣与其质量比为1∶10～1∶20的纯化水混合，调节pH至8～10，恒温40℃提取1～2h，提取完成后离心过滤，弃去滤渣，滤液待用；
(3)合并步骤(1)和(2)中的滤液，调节pH为3～5，静置1～2h，弃去上清液，沉淀物干燥后，得到纯度较高的淡黄色塔拉蛋白粉，产率可达5～8wt％，含量为70％wt以上；
(4)将步骤(3)中蛋白沉淀物中加入体积比为1∶5～1∶15的纯化水，搅拌均匀复溶，将蛋白复溶液加热至40～55℃，加入塔拉豆粉质量的0.5～2％蛋白酶，搅拌酶解4～6h后，煮沸灭活10～30min，离心，上清液即为蛋白酶解液；
(5)将蛋白酶解液使用孔径为0.1～0.5μm的微滤膜进行过滤，透过液再经2000～20000Dalton超滤膜处理后，截留液浓缩、干燥后，得到淡黄色塔拉多肽粉，产率可达4～8wt％，并测得肽含量在70wt％以上，95％以上肽分子量分布在1500Dalton以下。
所述的碱提酸沉法可包括连续逆流提取法和普通提取法。
所述的聚糖降解酶选自食品级的β-葡聚糖酶(酶活力≥2000U/g)和甘露聚糖酶(酶活力≥2000U/g)中的一种或者它们的混合物，优选地使用β-葡聚糖酶。
所述的蛋白酶选自食品级的中性蛋白酶(酶活力≥20万u/g)、木瓜蛋白酶(酶活力≥40万u/g)、菠萝蛋白酶(酶活力≥30万u/g)、碱性蛋白酶(酶活力≥20万u/g)、胃蛋白酶(酶活力≥50万u/g)、胰酶(酶活力≥3000u/g)中的一种或者它们的混合物，优选地使用中性蛋白酶、碱性蛋白酶中的一种或者它们的混合物。
所述的浓缩方法可以为膜浓缩、减压浓缩、常压浓缩。
所述的干燥方法可以为喷雾干燥、真空干燥、加热干燥、冷冻干燥。
所述的蛋白粉的检测方法为国家标准GB 5009.5-2010中的凯氏定氮法。
所述的多肽含量检测方法为国家标准GB/T 22492-2008附录B中的多肽测定法。
所述的多肽相对分子量分布的检测方法为国家标准GB/T 22492-2008附录A中的肽相对分子质量分布的测定法。
优选地，本发明提供了一种塔拉多肽粉，采用GB/T 22492-2008附录B中的多肽含量检测方法和GB/T 22492-2008附录A中的肽相对分子质量分布的测定法，测得肽含量在70wt％以上，95％以上肽分子量分布在1500Dalton以下，其分子量分布如下所示：
分子量Dalton分布
数均分子量范围：18～1300
重均分子量范围：40～1300。
优选地，所述塔拉多肽粉的制备方法，包括下述步骤：将塔拉豆粉碎、过筛，使用碱提酸沉法提取蛋白质，离心过滤，得到蛋白沉淀物；将蛋白沉淀物加水复溶、酶解，依次经过微滤膜与超滤膜高效分离纯化、浓缩，酶解浓缩液干燥，得到多肽粉；其中所述碱提酸沉法为连续逆流提取法或普通提取法。
优选地，所述的制备方法，还包括下述步骤：
(1)将塔拉豆粉碎，过40目以上筛网从而获得塔拉豆粉；
(2)将一定量的塔拉豆粉与纯化水按质量比为1∶10～1∶20混合，加入豆粉质量的0.1％～1％的聚糖降解酶，调节pH至5～8，恒温40℃搅拌1～2h，完成后，离心过滤，滤液待用；
(3)将步骤(2)中的滤渣与其质量比为1∶10～1∶20的纯化水混合，调节pH至8～10，恒温40℃提取1～2h，提取完成后离心过滤，弃去滤渣，滤液待用；
(4)合并步骤(2)和(3)中的滤液，调节pH为3～5，静置1～2h，弃去上清液，得到蛋白沉淀物；
(5)将步骤(4)中的蛋白沉淀物中加入体积比为1∶5～1∶15的纯化水，搅拌均匀复溶；
(6)将步骤(5)中的蛋白复溶液加热至40～55℃，加入塔拉豆粉质量的0.5～2％蛋白酶，搅拌酶解4～6h后，煮沸灭活10～30min，离心，上清液即为蛋白酶解液；
(7)将蛋白酶解液使用孔径为0.1～0.5μm的微滤膜进行过滤，透过液再经2000～20000Dalton超滤膜处理后，截留液浓缩、干燥后，得到淡黄色塔拉多肽粉，产率可达4～8wt％。
优选地，所述的聚糖降解酶选自食品级的β-葡聚糖酶(酶活力≥2000U/g)和甘露聚糖酶(酶活力≥2000U/g)中的一种或者它们的混合物，优选地使用β-葡聚糖酶。
优选地，所述的蛋白酶选自食品级的中性蛋白酶(酶活力≥20万u/g)、木瓜蛋白酶(酶活力≥40万u/g)、菠萝蛋白酶(酶活力≥30万u/g)、碱性蛋白酶(酶活力≥20万u/g)、胃蛋白酶(酶活力≥50万u/g)、胰酶(酶活力≥3000u/g)中的一种或者它们的混合物，优选地使用中性蛋白酶、碱性蛋白酶中的一种或者它们的混合物。
优选地，所述的浓缩方法可以为膜浓缩、减压浓缩或常压浓缩；所述的干燥方法可以为喷雾干燥、真空干燥、加热干燥或冷冻干燥。
优选地，本发明还提供了一种塔拉蛋白粉，其是通过下述方法制备得到：
(1)将塔拉豆粉碎，过40目以上筛网从而获得塔拉豆粉；
(2)将一定量的塔拉豆粉与纯化水按质量比为1∶10～1∶20混合，加入豆粉质量的0.1％～1％的聚糖降解酶，调节pH至5～8，恒温40℃搅拌1～2h，完成后，离心过滤，滤液待用；
(3)将步骤(2)中的滤渣与其质量比为1∶10～1∶20的纯化水混合，调节pH至8～10，恒温40℃提取1～2h，提取完成后离心过滤，弃去滤渣，滤液待用；
(4)合并步骤(2)和(3)中的滤液，调节pH为3～5，静置1～2h，弃去上清液，得到蛋白沉淀物，沉淀物干燥后，得到淡黄色塔拉蛋白粉，产率可达5～8wt％，含量为70％wt以上。
优选地，所述塔拉蛋白粉的制备方法，其于包括下述步骤：
(1)将塔拉豆粉碎，过40目以上筛网从而获得塔拉豆粉；
(2)将一定量的塔拉豆粉与纯化水按质量比为1∶10～1∶20混合，加入豆粉质量的0.1％～1％的聚糖降解酶，调节pH至5～8，恒温40℃搅拌1～2h，完成后，离心过滤，滤液待用；
(3)将步骤(2)中的滤渣与其质量比为1∶10～1∶20的纯化水混合，调节pH至8～10，恒温40℃提取1～2h，提取完成后离心过滤，弃去滤渣，滤液待用；
(4)合并步骤(2)和(3)中的滤液，调节pH为3～5，静置1～2h，弃去上清液，得到蛋白沉淀物，沉淀物干燥后，得到淡黄色塔拉蛋白粉，产率可达5～8wt％，含量为70％wt以上，所述的蛋白粉的检测方法为国家标准GB 5009.5-2010中的凯氏定氮法。
优选地，本发明还提供了一种组合物，其含有所述塔拉多肽粉或含有所述塔拉蛋白粉，药物或食品上可接受的助剂。
所述组合物的剂型选自素片、薄膜包衣片、糖衣片、肠衣片、分散片、胶囊、颗粒剂、口服溶液或口服混悬液。
所述的塔拉多肽粉可用于制备治疗或预防自由基过多引起的症状的药物、食品或保健品的应用。
所述的塔拉多肽粉的抗氧化活性使用自由基清除法(DPPH、ABTS)和超氧阴离子自由基清除法(SRSA)三种方法得以验证，测试结果表明塔拉多肽具有较好的抗氧化活性。
附图说明
图1：中性蛋白酶酶解后肽液相色谱图；
图2：碱性蛋白酶酶解后肽液相色谱图。
实施例
下面通过实施例对本发明作进一步说明。应该理解的是，本发明实施例所述方法仅仅是用于说明本发明，而不是对本发明的限制，在本发明的构思前提下对本发明制备方法的简单改进都属于本发明要求保护的范围。实施例中用到的所有原料和溶剂均购自Sigma Biochemical and Organic Compounds for Research and Diagnostic ClinicalReagents公司。
实施例1：
将塔拉豆(云南易门药材市场，其它商购产品亦可)粉碎，过40目以上筛网从而获得塔拉豆粉。将100kg塔拉豆粉与纯化水按质量比为1∶10混合，加入豆粉质量的0.1％的β-葡聚糖酶(酶活力3000U/g)，调节pH至6，恒温40℃提取2h；提取完成后，离心过滤，滤液待用；再将滤渣与其质量比为1∶15的纯化水混合，调节pH至9，恒温40℃提取2h；提取完成后离心过滤，弃去滤渣，滤液待用；最后合并以上待用滤液，调节pH为3.5，静置1h，弃去上清液，不断搅拌沉淀物并加入纯化水以调节固含至7wt％，进行喷雾干燥，进口温度为150℃，出口温度为50℃，得到纯度较高的淡黄色塔拉蛋白，产率为5.6％，使用凯氏定氮法测得蛋白含量为73.9％。
实施例2：
将塔拉豆(云南易门药材市场，其它商购产品亦可)粉碎，过40目以上筛网从而获得塔拉豆粉。将100kg塔拉豆粉与纯化水按质量比为1∶10混合，加入豆粉质量的0.1％的β-葡聚糖酶(酶活力3000U/g)，调节pH至6，恒温40℃提取2h；提取完成后，离心过滤，滤液待用；再将滤渣与其质量比为1∶15的纯化水混合，调节pH至9，恒温40℃提取2h；提取完成后离心过滤，弃去滤渣，滤液待用；最后合并以上待用滤液，调节pH为3.5，静置1h，弃去上清液，往沉淀物中加入体积比为1∶10的纯化水，搅拌均匀得到蛋白复溶液。将蛋白复溶液加热至45℃，加入塔拉豆粉质量的1％中性蛋白酶(酶活力为30万u/g)，恒定pH为7，搅拌酶解4h后，煮沸灭活30min，离心，上清液即为蛋白酶解液。将蛋白酶解液使用孔径为0.5μm的微滤膜进行过滤，透过液再经5000Dalton超滤膜处理后，透过液在50℃下浓缩至固含为6.8wt％时，进行喷雾干燥，进口温度为160℃，出口温度为65℃，得到高纯度、低分子量的淡黄色塔拉多肽粉，产率6.2％，测得肽含量为72.14wt％(如表1)，至少96.02％肽分子量分布在1500Dalton以下(如表2)。
表1中性蛋白酶所制备得塔拉肽粉中多肽的百分含量
表2中性蛋白酶所制备得塔拉肽粉中多肽分子量分布
实施例3：
将塔拉豆(云南易门药材市场，其它商购产品亦可)粉碎，过40目以上筛网从而获得塔拉豆粉。将100kg塔拉豆粉与纯化水按质量比为1∶10混合，加入豆粉质量的0.1％的β-葡聚糖酶(酶活力3000U/g)，调节pH至6，恒温40℃提取2h；提取完成后，离心过滤，滤液待用；再将滤渣与其质量比为1∶15的纯化水混合，调节pH至9，恒温40℃提取2h；提取完成后离心过滤，弃去滤渣，滤液待用；最后合并以上待用滤液，调节pH为3.5，静置1h，弃去上清液，往沉淀物中加入体积比为1∶10的纯化水，搅拌均匀得到蛋白复溶液。将蛋白复溶液加热至45℃，加入塔拉豆粉质量的1％碱性蛋白酶(酶活力为50万u/g)，恒定pH为8，搅拌酶解4h后，煮沸灭活30min，离心，上清液即为蛋白酶解液。将蛋白酶解液使用孔径为0.5μm的微滤膜进行过滤，透过液再经5000Dalton超滤膜处理后，透过液在50℃下浓缩至固含为6wt％时，进行喷雾干燥，进口温度为160℃，出口温度为65℃，得到高纯度、低分子量的淡黄色塔拉多肽粉，产率5.1％，测得肽含量为71.50wt％(如表3)，至少96.50％肽分子量分布在1500Dalton以下(如表4)。
表3碱性蛋白酶所制备得塔拉肽粉中多肽的百分含量
表4碱性蛋白酶所制备得塔拉肽粉中多肽分子量分布
活性实施例4：
1.DPPH自由基清除实验
1.1 DPPH乙醇溶液的配制：精密称取DPPH 4mg，置于100mL棕色容量瓶中，加入50mL乙醇，超声30s，用乙醇定容至刻度，摇匀，待用。本品须现配现用。
1.2供试品溶液的配制：配制1mg/mL的塔拉多肽粉溶液，待测。
1.3操作步骤：准确吸取2mL供试品溶液和2mL DPPH溶液混合均匀；准确吸取2mL供试品溶液和2mL乙醇混合均匀；准确吸取2mL DPPH溶液和2mL乙醇混合均匀，室温放置30min，在515nm波长处测定吸光度，并根据以下计算公式计算自由基清除率：
IR％＝[1-(Ai-Aj)/A0]*100％；
其中，Ai表示待测溶液和DPPH混合后溶液的吸光度；
Aj表示待测溶液和溶剂混合后溶液的吸光度；
A0表示DPPH和溶剂混合后溶液的吸光度。
2.ABTS+自由基清除实验
2.1 PBS缓冲液的配制：称取氯化钠8g，氯化钾0.2g，磷酸二氢钾0.24g，十二水合磷酸氢二钠3.62g，置于1000mL烧杯中，加入800mL蒸馏水，搅伴使其溶解，用盐酸或氢氧化钠调节pH至7.4，转移至1000mL容量瓶中，加蒸馏水稀释至刻度，摇匀，待用。
2.2 ABTS+贮存溶液的配制：精密称取ABTS+78mg左右，置于20mL棕色容量瓶中，加入15mL蒸馏水，超声5min，用蒸馏水定容至刻度，摇匀。精密称取过硫酸钾76mg左右，置于2mL棕色容量瓶中，加入1mL蒸馏水，超声使其溶解，用蒸馏水定容至刻度，摇匀。精确吸取352μL过硫酸钾溶液加入至ABTS溶液中，摇匀，静置过夜。
2.3 ABTS+工作溶液的配制：精确吸取贮存溶液1mL，加入65mL左右PBS缓冲液，摇匀。
2.4供试品溶液的配制：配制1mg/mL的塔拉多肽粉溶液，待测。
2.5操作步骤：准确吸取0.5mL供试品溶液和5mL ABTS工作溶液混合均匀；准确吸取0.5mL供试品溶液和5mL PBS缓冲液混合均匀；准确吸取5mL ABTS工作溶液和0.5mL PBS缓冲液混合均匀，立即在734nm处测定吸光度，并根据以下公式计算自由基清除率：
IR％＝[1-(Ai-Aj)/A0]*100％；
其中，Ai表示待测溶液和ABTS混合后溶液的吸光度；
Aj表示待测溶液和溶剂混合后溶液的吸光度；
A0表示ABTS和溶剂混合后溶液的吸光度。
3.SRSA超氧阴离子自由基清除实验
3.1 0.1moL/L PBS缓冲液(pH 7.4)的配制：称取氯化钠80g，氯化钾2g，磷酸二氢钾2.4g，三水合磷酸氢二钾23.1g，置于1000mL烧杯中，加入600mL蒸馏水，搅拌使其溶解，用盐酸或氢氧化钠调节pH至7.2，转移至1000mL容量瓶中，加蒸馏水稀释至刻度，摇匀，待用。
3.2 150μmoL/LNBT溶液的配制：准确称取NBT 12.5mg置于100mL棕色容量瓶中，加入蒸馏水，超声使其溶解，并用蒸馏水定容至刻度，摇匀，即得。
3.3 60μmoL/L PMS溶液的配制：准确称取PMS 18.8mg，置于1000mL的容量瓶中，加入蒸馏水，超声使其溶解，并用蒸馏水定容至刻度，摇匀，即得。
3.4 468μmoL/L NADH溶液的配制：准确称取NADH 33.9mg，置于100mL的容量瓶中，加入蒸馏水，超声使其溶解，并用蒸馏水定容至刻度，摇匀，即得。
3.5供试品溶液的配制：配制1mg/mL的塔拉多肽粉溶液，待测。
3.6工作液的配制：取1mL 0.1moL/L PBS缓冲液(pH7.4)于容量瓶中，加入1mL 150μmoL/L NBT溶液，加入2mL 468μmoL/L NADH溶液，加入1mL 60μmoL/L PMS溶液，搅拌均匀，25℃下反应5min，与560nm波长处测定其吸光度值。
3.7操作步骤：准确吸取0.5mL供试品溶液和5mL上述工作溶液混合均匀；准确吸取0.5mL供试品溶液和5mL蒸馏水混合均匀；准确吸取5mL上述工作溶液和0.5mL蒸馏水混合均匀，立即在560nm处测定吸光度，并根据以下公式计算自由基清除率：
IR％＝[1-(Ai-Aj)/A0]*100％；
其中，Ai表示待测溶液和SRSA混合后溶液的吸光度；
Aj表示待测溶液和溶剂混合后溶液的吸光度；
A0表示SRSA和溶剂混合后溶液的吸光度。
分别配制中性蛋白酶解产品和碱性蛋白酶解产品浓度为1mg/mL，以没食子酸为阳性对照(浓度为1mg/mL)，测试结果如下表所示：
表5塔拉多肽粉抗氧化活性测试结果
由表5可知，两种酶解所得的塔拉多肽肽均有较好的抗氧化活性，在相同浓度下中性蛋白酶的酶解产品的抗氧化活性稍高于碱性蛋白酶的酶解产品，但相差不大，可见所需生物酶的种类不同对产品的活性影响不大。由此可知，塔拉多肽是具有开发潜力的新资源食品和药品，因此塔拉多肽有可能防止人体中细胞老化、改善记忆力、延缓衰老、保护心血管、防止老年痴呆等作用，更深层的生物活性正在研究之中。
Claims (10)
1.一种塔拉多肽粉，其特征在于：采用GB/T 22492-2008附录B中的多肽含量检测方法和GB/T 22492-2008附录A中的肽相对分子质量分布的测定法，测得肽含量在70wt％以上，其中95％以上分布在1500Dalton分子量以下，其分子量分布如下所示：
分子量Dalton分布
数均分子量范围：18～1300
重均分子量范围：40～1300。
2.权利要求1所述塔拉多肽粉的制备方法，其特征在于包括下述步骤：使用碱提酸沉法得到蛋白沉淀物；蛋白沉淀物酶解，分离纯化得到多肽粉；其中所述碱提酸沉法为连续逆流提取法或普通提取法。
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于包括下述步骤：
(1)将塔拉豆粉碎，过40目以上筛网从而获得塔拉豆粉；
(2)将塔拉豆粉与纯化水按质量比为1∶10～1∶20混合，加入豆粉质量的0.1％～1％的聚糖降解酶，调节pH至5～8，恒温40℃搅拌1～2h，完成后，离心过滤，滤液待用；
(3)将步骤(2)中的滤渣与其质量比为1∶10～1∶20的纯化水混合，调节pH至8～10，恒温40℃提取1～2h，提取完成后离心过滤，弃去滤渣，滤液待用；
(4)合并步骤(2)和(3)中的滤液，调节pH为3～5，静置1～2h，弃去上清液，得到蛋白沉淀物；
(5)将步骤(4)中的蛋白沉淀物中加入体积比为1∶5～1∶15的纯化水，搅拌均匀形成蛋白复溶液；
(6)将步骤(5)中的蛋白复溶液加热至40～55℃，加入塔拉豆粉质量的0.5～2％蛋白酶，搅拌酶解4～6h后，煮沸灭活10～30min，离心，上清液即为蛋白酶解液；
(7)将蛋白酶解液使用孔径为0.1～0.5μm的微滤膜进行过滤，透过液再经2000～20000Dalton超滤膜处理后，截留液浓缩、干燥后，得到塔拉多肽粉。
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于：所述的浓缩方法可以为膜浓缩、减压浓缩或常压浓缩；所述的干燥方法可以为喷雾干燥、真空干燥、加热干燥或冷冻干燥。
5.一种塔拉蛋白粉，其特征在于是通过下述方法制备得到：
(1)将塔拉豆粉碎，过40目以上筛网从而获得塔拉豆粉；
(2)将一定量的塔拉豆粉与纯化水按质量比为1∶10～1∶20混合，加入豆粉质量的0.1％～1％的聚糖降解酶，调节pH至5～8，恒温40℃搅拌1～2h，完成后，离心过滤，滤液待用；
(3)将步骤(2)中的滤渣与其质量比为1∶10～1∶20的纯化水混合，调节pH至8～10，恒温40℃提取1～2h，提取完成后离心过滤，弃去滤渣，滤液待用；
(4)合并步骤(2)和(3)中的滤液，调节pH为3～5，静置1～2h，弃去上清液，得到蛋白沉淀物，沉淀物干燥后，得到塔拉蛋白粉。
6.权利要求5所述塔拉蛋白粉的制备方法，其特征在于包括下述步骤：
(1)将塔拉豆粉碎，过40目以上筛网从而获得塔拉豆粉；
(2)将塔拉豆粉与纯化水按质量比为1∶10～1∶20混合，加入豆粉质量的0.1％～1％的聚糖降解酶，调节pH至5～8，恒温40℃搅拌1～2h，完成后，离心过滤，滤液待用；
(3)将步骤(2)中的滤渣与其质量比为1∶10～1∶20的纯化水混合，调节pH至8～10，恒温40℃提取1～2h，提取完成后离心过滤，弃去滤渣，滤液待用；
(4)合并步骤(2)和(3)中的滤液，调节pH为3～5，静置1～2h，弃去上清液，得到蛋白沉淀物，沉淀物干燥后，得到塔拉蛋白粉。
7.根据权利要求3或6所述的制备方法，其特征在于：所述的聚糖降解酶选自食品级的β-葡聚糖酶(酶活力≥2000U/g)和甘露聚糖酶(酶活力≥2000U/g)中的一种或者它们的混合物，优选使用β-葡聚糖酶；所述的蛋白酶选自食品级的中性蛋白酶(酶活力≥20万u/g)、木瓜蛋白酶(酶活力≥40万u/g)、菠萝蛋白酶(酶活力≥30万u/g)、碱性蛋白酶(酶活力≥20万u/g)、胃蛋白酶(酶活力≥50万u/g)、胰酶(酶活力≥3000u/g)中的一种或者它们的混合物，优选使用中性蛋白酶、碱性蛋白酶中的一种或者它们的混合物。
8.一种组合物，其特征在于：含有权利要求1所述的塔拉多肽粉或含有权利要求6所述的塔拉蛋白粉，以及药物或食品上可接受的助剂。
9.根据权利要求8所述的组合物，其特征在于：其剂型选自素片、薄膜包衣片、糖衣片、肠衣片、分散片、胶囊、颗粒剂、口服溶液或口服混悬液。
10.权利要求1所述的塔拉多肽粉可以用于制备治疗或预防自由基过多引起的症状的药物、食品或保健品的用途。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201610328837.8A CN105925648B (zh) | 2016-05-17 | 2016-05-17 | 一种塔拉蛋白粉和多肽粉及其生产方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201610328837.8A CN105925648B (zh) | 2016-05-17 | 2016-05-17 | 一种塔拉蛋白粉和多肽粉及其生产方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN105925648A true CN105925648A (zh) | 2016-09-07 |
| CN105925648B CN105925648B (zh) | 2019-11-19 |
Family
ID=56840726
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201610328837.8A Active CN105925648B (zh) | 2016-05-17 | 2016-05-17 | 一种塔拉蛋白粉和多肽粉及其生产方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN105925648B (zh) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107287270A (zh) * | 2017-07-18 | 2017-10-24 | 杏辉天力（杭州）药业有限公司 | 一种塔拉低聚肽及其工业化制备方法和用途 |
| CN107373664A (zh) * | 2017-07-18 | 2017-11-24 | 杏辉天力（杭州）药业有限公司 | 一种具有抗pm2.5颗粒物功效的组合物 |
| CN112877373A (zh) * | 2021-01-26 | 2021-06-01 | 桂林莱茵生物科技股份有限公司 | 一种获得含量大于99%没食子酸的制备方法 |
| CN114478814A (zh) * | 2022-01-24 | 2022-05-13 | 上海浩泰生物科技有限公司 | 一种高透明型刺云实胶及其制备方法和应用 |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101569344A (zh) * | 2009-06-05 | 2009-11-04 | 哈高科大豆食品有限责任公司 | 一种高分散性大豆分离蛋白及其制备方法 |
| CN101824455A (zh) * | 2009-03-06 | 2010-09-08 | 香港百特有限公司 | 一种大豆蛋白低聚肽及其制备方法和用途 |
| JP2011083275A (ja) * | 2009-09-16 | 2011-04-28 | Hokkaido Univ | アメフラシ由来マンナナーゼ |
| CN103290086A (zh) * | 2013-06-25 | 2013-09-11 | 广州合诚实业有限公司 | 具有ace抑制活性的绿豆蛋白肽及其制备方法与应用 |
-
2016
- 2016-05-17 CN CN201610328837.8A patent/CN105925648B/zh active Active
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101824455A (zh) * | 2009-03-06 | 2010-09-08 | 香港百特有限公司 | 一种大豆蛋白低聚肽及其制备方法和用途 |
| CN101569344A (zh) * | 2009-06-05 | 2009-11-04 | 哈高科大豆食品有限责任公司 | 一种高分散性大豆分离蛋白及其制备方法 |
| JP2011083275A (ja) * | 2009-09-16 | 2011-04-28 | Hokkaido Univ | アメフラシ由来マンナナーゼ |
| CN103290086A (zh) * | 2013-06-25 | 2013-09-11 | 广州合诚实业有限公司 | 具有ace抑制活性的绿豆蛋白肽及其制备方法与应用 |
Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107287270A (zh) * | 2017-07-18 | 2017-10-24 | 杏辉天力（杭州）药业有限公司 | 一种塔拉低聚肽及其工业化制备方法和用途 |
| CN107373664A (zh) * | 2017-07-18 | 2017-11-24 | 杏辉天力（杭州）药业有限公司 | 一种具有抗pm2.5颗粒物功效的组合物 |
| CN107373664B (zh) * | 2017-07-18 | 2021-02-05 | 杏辉天力（杭州）药业有限公司 | 一种具有抗pm2.5颗粒物功效的组合物 |
| CN112877373A (zh) * | 2021-01-26 | 2021-06-01 | 桂林莱茵生物科技股份有限公司 | 一种获得含量大于99%没食子酸的制备方法 |
| CN112877373B (zh) * | 2021-01-26 | 2023-03-21 | 桂林莱茵生物科技股份有限公司 | 一种获得含量大于99%没食子酸的制备方法 |
| CN114478814A (zh) * | 2022-01-24 | 2022-05-13 | 上海浩泰生物科技有限公司 | 一种高透明型刺云实胶及其制备方法和应用 |
| CN114478814B (zh) * | 2022-01-24 | 2022-09-27 | 上海浩泰生物科技有限公司 | 一种高透明型刺云实胶及其制备方法和应用 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN105925648B (zh) | 2019-11-19 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN105925648A (zh) | 一种塔拉蛋白粉和多肽粉及其生产方法 | |
| CN104152521B (zh) | 牡丹花粉蛋白多肽，及制备方法和应用 | |
| EP1478732B1 (en) | A selenium yeast product, a method of preparing a selenium yeast product and the use of the product for preparing food, a dietary supplement or a drug | |
| CN111772195B (zh) | 一种大鲵胶原蛋白肽、其制备方法及其制剂 | |
| EP2779845B1 (en) | Chicory extract and method of preparing | |
| CN102086465B (zh) | 酶解白果蛋白制备多肽类活性物质的方法 | |
| CN101669571A (zh) | 乳酸菌混菌发酵结合酶解法生产蛋白饲料源小肽工艺 | |
| CN103014108A (zh) | 一种玉米低聚肽的制备方法 | |
| CN110521993A (zh) | 罗汉果苷甜味和风味组合物及其制备方法与应用 | |
| KR100601395B1 (ko) | 수용성 프로폴리스 추출물 및 분말의 제조 방법 | |
| CN111249338A (zh) | 一种苁蓉提取物及其工业化制备方法和用途 | |
| CN101649341A (zh) | 一种从禽蛋壳膜中提取蛋白肽的方法 | |
| CN108309922A (zh) | 一种三花发酵原浆化妆品及其制备方法 | |
| CN113925081A (zh) | 一种天然植物防腐组合物、制备方法及其应用 | |
| CN101480216A (zh) | 一种从西瓜或打瓜中提取复合氨基酸的方法 | |
| JP2008212137A (ja) | 生物転換法を利用したペリヌスリンテウス菌糸体の液体培養による人参からの新規のジンセノサイド製造方法 | |
| EP0027514A1 (en) | Antitumor substance and its production | |
| CN100415697C (zh) | 从油菜籽饼粕或油菜籽种皮中提取多酚的萃取剂及其制备方法 | |
| CN109232758A (zh) | 一种榆黄蘑菌糠多糖及其提取工艺和应用 | |
| KR101156775B1 (ko) | 항암활성을 갖는 영지버섯 추출물 및 염기성 알콜을 이용한 추출 방법 | |
| CN112708651A (zh) | 一种瓜蒌蛋白粉和多肽粉及其制备方法和应用 | |
| CN104584821B (zh) | 一种含红景天苷的植物的栽培方法及应用 | |
| RU2104025C1 (ru) | Способ получения сухого экстракта женьшеня | |
| Rajendran et al. | Improved method of liquid jaggery preparation. | |
| CN107474086A (zh) | 提取甜菊糖的工艺 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |