CN105794637A - 一种生姜无毒快速育苗方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及作物育苗技术领域,具体是一种生姜无毒快速育苗方法。目的在于提供一种生姜快速无毒育苗方法,可降低生姜病害的发生,解决由于生姜连作导致病虫害大量发生的状况;包括生姜催芽、苗的获得、生根培养、幼训化苗;缩短了生姜育苗的时间,减少了生姜的生长周期,节约的土地;优选出对形成愈伤组织,丛生芽的形成,生根培养的培养基,使得诱导率达到95%、芽分化率达到89%、生根率达到86%,提高了繁育系数。
Description
技术领域
本发明涉及作物育苗技术领域,具体是一种生姜无毒快速育苗方法。
背景技术
生姜是姜科多年生草本植物姜(ZingiberofficinaleRoscoe)的新鲜根茎,别名有姜根、百辣云、勾装指、因地辛、炎凉小子、鲜生姜、蜜炙姜。姜的根茎(干姜)、栓皮(姜皮)、叶(姜叶)均可入药。生姜在中医药学里具有发散、止呕、止咳等功效。
姜原产东南亚的热带地区,喜欢温暖、湿润的气候,耐寒和抗旱能力较弱,植株只能无霜期生长,生长最适宜温度是25-28℃,温度低于20℃则发芽缓慢,遇霜植株会凋谢,受霜冻根茎就完全失去发芽能力。广西主产区大部分县的年平均温度为18-19℃,7月平均气温为25.3℃,极端高温为39℃;一月份平均气温为10.2℃,极端低温为-4℃;全年无霜期330天以上。年降雨量900-1300毫米,空气相对湿度为80%左右。
常规生姜的栽培方法是3月中下旬开始晒姜、困姜、室内催芽,约20-30天左右当芽长至1-1.5cm时开沟种植。由于生姜前期发芽缓慢,对温度敏感,播种前需要准备时间较长、头绪繁琐、费工费力,从播种到出苗需要25-30天,从出苗到5-6片叶需要25-30天,期间造成土地闲置时间长达60-70天,足以种植一茬春季蔬菜。而且生姜幼苗怕强光,需要田间搭棚遮荫。传统方法种植生姜费时、费力,种姜使用量大,田间占用土地时间长,一年只能种一季,不利于茬口调节,出苗时间不一致,造成大小苗、弱苗、缺苗。
发明内容
本发明的目的在于提供一种生姜快速无毒育苗方法,可降低生姜病害的发生,解决由于生姜连作导致病虫害大量发生的状况。
根据上述目的提出具体方案:
(1)生姜催芽
选择饱满含水量25-35%、无病虫害的生姜作种,在黑暗、25℃条件下,埋在含水量为30-33%的沙土中,并覆盖草帘密封1-2天,姜芽长至0.5-1cm时即可;
(2)试管苗的获得
①将催芽得到的芽先用75%的酒精消毒30s,用无菌水冲洗3次,再用0.1%的升汞消毒5分钟,用无菌水冲洗三次,用滤纸吸干;在无菌条件下,切取芽尖分生组织0.2-0.3mm,置于20-25℃、光照1500-3000Lux、12小时/天光照条件下培养,培养基的成分为:MS+0.1~1.5(mg/L)NAA+2~5(mg/L)BA+15~20%葡萄糖、PH=5~7,培养4-6天,得到愈伤组织;
优选培养基为:MS+1.2mg/LNAA+4.0mg/LBA+15~20%葡萄糖;
②切取愈伤组织块接到MS+0.1~1.5(mg/L)NAA+2~5(mg/L)BA+15~20%葡萄糖、PH=5~7,置于20-25℃、光照1500-3000Lux、12小时/天光照条件下培养,培养3-4天,获得丛生芽;
优选培养基为:MS+1.0mg/LNAA+3.5mg/LBA+15~20%葡萄糖;
③将获得的丛生芽置于25-28℃、光照2500-4000Lux、12小时/天光照条件下培养10-15天,获的无根脱毒试管苗;
(3)生根培养
在步骤(2)中得到的无毒苗至2-3cm时,转接到三角瓶中的生根培养基上,在25-28℃,自然光照条件下培养10-15天;培养基为;1/2MS+0.1mg/L-1.0mg/LNAA+15~25%蔗糖、PH=5~7;
优选培养基为:1/2MS+0.6mg/LNAA+15~20%葡萄糖;
(4)幼苗训化
将幼苗长至瓶口时,在自然条件下,打开瓶塞,炼苗2-3天,选取生长良好的幼苗用镊子取出,清水冲洗培养基,移栽到营养钵中,置于温室棚膜中,4-6天后,置于温室外或揭开棚膜,在自然条件生长8-10天后,姜苗长至20cm时,移栽;
所述的营养钵基质为:泥炭、珍珠岩和草木灰按照1:1:0.1或1:2:0.2或2:1:0.2混合,并可多次重复利用,在每次重复使用前喷施25%的甲霜灵水溶液,防治病菌。
本发明的优点在于:(1)缩短了生姜育苗的时间,减少了生姜的生长周期,节约的土地;
(2)优选出对形成愈伤组织,丛生芽的形成,生根培养的培养基,使得诱导率达到95%、芽分化率达到89%、生根率达到86%,提高了繁育系数;
(3)一芽直接再生的方式,保持了优良性状的稳定性遗传;
(4)所得脱毒苗具有抗再度感染的特性,降低病害的发生,提供经济效益。
具体实施方式
实例1、
1、生姜催芽
选择饱满含水量25-35%、无病虫害的生姜作种,在黑暗、25℃条件下,埋在含水量为30-33%的沙土中,并覆盖草帘密封1-2天,姜芽长至0.5-1cm时即可;
2、试管苗的获得
(1)诱导愈伤组织
①诱导愈伤组织培养基的优选将催芽得到的芽先用75%的酒精消毒30s,用无菌水冲洗3次,再用0.1%的升汞消毒5分钟,用无菌水冲洗三次,用滤纸吸干;在无菌条件下,切取芽尖分生组织0.2-0.3mm,置于不同浓度的BA、NAA培养基中,测定愈伤组织生长情况,确定最佳的培养基组分;结果如下表所示:
②诱导愈伤组织形成切取芽尖分生组织0.3mm,置于20℃、光照1500-3000Lux、12小时/天光照条件下培养,培养基的成分为:MS+1.2mg/LNAA+4.0mg/LBA+20%葡萄糖,培养6天,得到愈伤组织;
(2)获得丛生芽
①培养基优选切取愈伤组织块接到激素浓度不同的培养基中,置于25℃、光照1500-3000Lux、12小时/天光照条件下培养,培养4天,测定丛生芽的数量,确定最佳的培养基组分;
激素浓度配比(mg/L) | 接种愈伤组织数 | 分化出芽数 | 分化率(%) |
2.5BA+0.5NAA | 50 | 36 | 72 |
3.0BA+0.8NAA | 50 | 42 | 84 |
3.5BA+1.0NAA | 50 | 46 | 92 |
4.0BA+1.2NAA | 50 | 42 | 84 |
②丛生芽形成切取愈伤组织块接到MS+1.0mg/LNAA+3.5mg/LBA+20%葡萄糖,PH=7,置于25℃、光照1500-3000Lux、12小时/天光照条件下培养,4天,获得丛生芽;
(3)获得无根脱毒试管苗
将获得的丛生芽置于25-28℃、光照2500-4000Lux、12小时/天光照条件下培养10-15天,获的无根脱毒试管苗;
(4)生根培养
①培养基优选在无毒苗至3cm时,转接到含有培养基成分不同的三角瓶中,在28℃,自然光照条件下,培养10天,测定无根苗的生根状况,确定最佳的培养基组分;
培养基 | 接种数 | 生根幼苗数 | 生根总条数 | 生根率(%) | 平均每株生根条数 |
1/2MS+0.2NAA | 50 | 32 | 84 | 64 | 2.6 |
1/2MS+0.4NAA | 50 | 36 | 172 | 72 | 4.8 |
1/2MS+0.6NAA | 50 | 42 | 218 | 84 | 5.2 |
1/2MS+0.8NAA | 50 | 39 | 193 | 78 | 4.9 |
②生根培养在步骤(2)中得到的无毒苗至3cm时,转接到三角瓶中的生根培养基上,在28℃,自然光照条件下培养15天;培养基为;1/2MS+0.6mg/LNAA+25%蔗糖,PH=5;
(5)幼苗训化
将幼苗长至瓶口时,在自然条件下,打开瓶塞,炼苗3天,选取生长良好的幼苗用镊子取出,清水冲洗培养基,移栽到营养钵中,置于温室棚膜中,6天后,置于温室外或揭开棚膜,在自然条件生长10天后,姜苗长至20cm时,移栽;
所述的营养钵基质为:泥炭、珍珠岩和草木灰按照1:1:0.1混合。
实例2、
根据实例1所示确定最佳的诱导愈伤组织培养基、丛生芽获得培养基、生根培养基后,培养脱毒苗;
(1)生姜催芽
选择饱满含水量25-35%、无病虫害的生姜作种,在黑暗、25℃条件下,埋在含水量为33%的沙土中,并覆盖草帘密封2天,姜芽长至0.5-1cm时即可;
(2)试管苗的获得
①将催芽得到的芽先用75%的酒精消毒30s,用无菌水冲洗3次,再用0.1%的升汞消毒5分钟,用无菌水冲洗三次,用滤纸吸干;在无菌条件下,切取芽尖分生组织0.3mm,置于25℃、光照1500-3000Lux、12小时/天光照条件下培养,培养基的成分为:MS+1.2mg/LNAA+4.0mg/LBA+15%葡萄糖PH=7,培养6天,得到愈伤组织;
②切取愈伤组织块接到MS+1.0mg/LNAA+3.5mg/LBA+20%葡萄糖;、PH=5~7,置于25℃、光照1500-3000Lux、12小时/天光照条件下培养,培养4天,获得丛生芽;
③将获得的丛生芽置于28℃、光照2500-4000Lux、12小时/天光照条件下培养15天,获的无根脱毒试管苗;
(3)生根培养
在步骤(2)中得到的无毒苗至3cm时,转接到三角瓶中的生根培养基上,在25-28℃,自然光照条件下培养15天;培养基为;1/2MS+0.6mg/LNAA+20%葡萄糖、PH=7;
(4)幼苗训化
将幼苗长至瓶口时,在自然条件下,打开瓶塞,炼苗2-3天,选取生长良好的幼苗用镊子取出,清水冲洗培养基,移栽到营养钵中,置于温室棚膜中,4-6天后,置于温室外或揭开棚膜,在自然条件生长8-10天后,姜苗长至20cm时,移栽;
所述的营养钵基质为:泥炭、珍珠岩和草木灰按照2:1:0.2混合。
Claims (5)
1.一种生姜无毒快速育苗方法,其特征在于:
(1)生姜催芽
选择饱满含水量25-35%、无病虫害的生姜作种,在黑暗、25℃条件下,埋在含水量为30-33%的沙土中,并覆盖草帘密封1-2天,姜芽长至0.5-1cm时即可;
(2)试管苗的获得
①将催芽得到的芽先用75%的酒精消毒30s,用无菌水冲洗3次,再用0.1%的升汞消毒5分钟,用无菌水冲洗三次,用滤纸吸干;在无菌条件下,切取芽尖分生组织0.2-0.3mm,置于20-25℃、光照1500-3000Lux、12小时/天光照条件下培养,培养基的成分为:MS+0.1~1.5(mg/L)NAA+2~5(mg/L)BA+15~20%葡萄糖、PH=5~7,培养4-6天,得到愈伤组织;
②切取愈伤组织块接到MS+0.1~1.5(mg/L)NAA+2~5(mg/L)BA+15~20%葡萄糖、PH=5~7,置于20-25℃、光照1500-3000Lux、12小时/天光照条件下培养,培养3-4天,获得丛生芽;
③将获得的丛生芽置于25-28℃、光照2500-4000Lux、12小时/天光照条件下培养10-15天,获的无根脱毒试管苗;
(3)生根培养
在步骤(2)中得到的无毒苗至2-3cm时,转接到三角瓶中的生根培养基上,在25-28℃,自然光照条件下培养10-15天;培养基为;1/2MS+0.1mg/L-1.0mg/LNAA+15~25%蔗糖、PH=5~7;
(4)幼训化苗
将幼苗长至瓶口时,在自然条件下,打开瓶塞,炼苗2-3天,选取生长良好的幼苗用镊子取出,清水冲洗培养基,移栽到营养钵中,置于温室棚膜中,4-6天后,置于温室外或揭开棚膜,在自然条件生长8-10天后,姜苗长至20cm时,移栽。
2.根据权利要求1所述试管苗的获得,其特征在于:所述愈伤组织培养基为:MS+1.2mg/LNAA+4.0mg/LBA+15~20%葡萄糖。
3.根据权利要求1所述试管苗的获得,其特征在于:所述获得丛生芽培养基为:MS+1.0mg/LNAA+3.5mg/LBA+15~20%葡萄糖。
4.根据权利要求1所述生根培养,其特征在于:所述培养基为:1/2MS+0.6mg/LNAA+15~20%葡萄糖。
5.根据权利要求1所述幼训化苗,其特征在于:所述的营养钵基质为:泥炭、珍珠岩和草木灰按照1:1:0.1或1:2:0.2或2:1:0.2混合,并可多次重复利用,在每次重复使用前喷施25%的甲霜灵水溶液,防治病菌。
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