CN105784661A

CN105784661A - 一种减少荧光衰减的封片剂

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Publication number: CN105784661A
Application number: CN201610206674.6A
Authority: CN
Inventors: 刘涛; 王红; 郭喜; 孙继红; 陈恺; 王国强
Original assignee: Beijing Leagene Biotech Co Ltd
Current assignee: Beijing Leagene Biotech Co Ltd
Priority date: 2016-04-06
Filing date: 2016-04-06
Publication date: 2016-07-20
Anticipated expiration: 2036-04-06
Also published as: CN105784661B

Abstract

本发明“一种减少荧光衰减的封片剂”，其特征是所述的减少荧光衰减的封片剂中包括如下组分：聚乙烯醇、甘油、重氮双环辛烷、金属离子螯合剂、碳酸盐缓冲液、Tris‑HCl缓冲液、防腐剂、水，既能用于自身能发出荧光的样本或荧光染色后的样本的封片以延缓样本荧光的衰减程度，亦可用于常规染色后的封片。本发明还提供了所述的减少荧光衰减的封片剂的制备方法及封片方法，大大减缓各种荧光衰减或淬灭的程度，较普通抗荧光淬灭封片剂的抗淬灭效果大大增强。

Description

一种减少荧光衰减的封片剂

技术领域：

本发明属于生物医药应用领域，具体涉及一种减缓荧光衰减或淬灭的封片剂及其制备、封片方法。

背景技术：

封片是将组织切片(亦可是血液涂片、细胞爬片等)封固保存于载玻片与盖玻片之间，使之不与空气发生接触，防止其氧化、褪色，利于镜检观察及保存。对于组织切片，完成染色后经过脱水透明后，为了易于在显微镜下观察，并能长时间保存备查，需要用封片剂(又称封固剂、封片介质等)把染片封固起来，从而完成一张组织玻片标本的制作。一般情况下，较好的封片剂具有如下特点：1、牢固的黏性；2、较好的折光性；3、折光率与玻片差距不大；4、能与透明剂相混合；5、中性，对染料无影响等。

目前，市面上常用的封片剂有两大类：1、非水溶性胶：主要用于染色后经无水乙醇脱水，二甲苯透明的染色片的封片。常用的有中性树胶、加拿大树胶、DPX合成树脂等。2、水溶性胶：主要用于染色后不能经无水乙醇脱水，二甲苯透明的染色片的封固。常用的水溶性胶有甘油明胶、阿拉伯糖胶以及进口的专用水溶性胶等。

在生物学应用领域，经常需要用荧光染料对组织、细胞等样本进行荧光染色，在荧光显微镜下进行观察。荧光显微镜与普通光学显微镜不同，它不是通过普通光源的照明观察样本，而是利用一定波长的光(通常是紫外光、蓝紫光)激发显微镜下标本内的荧光物质，使之发射荧光，所以荧光显微镜的光源所起的作用不是直接照明，而是作为一种激发标本的内荧光物质的能源。科研工作者之所以能观察样本，不是由于光源的照明，而是标本内荧光物质吸收激发的光能后呈现的荧光现象。

由于荧光容易褪色，样本作荧光染色后最好立即在荧光显微镜下观察，当时的荧光强度是最强的。但由于种种原因，样本染色后不能及时观察，需要用特殊介质保存，以避免荧光减退。因此开发出一种减缓荧光衰减或淬灭的封片剂就显得尤其重要。

发明内容：

为了解决自身能发出荧光的样本或荧光染色后的样本的荧光易衰减或淬灭的问题，本发明“一种减少荧光衰减的封片剂”旨在提供一种减少荧光衰退的水溶性封片剂，能够保存自身能发出荧光的样本或荧光染色后的样本，大大延缓样本荧光的衰减程度，可以用于减缓各种常见荧光染料的荧光淬灭，较普通抗荧光淬灭封片剂的抗淬灭效果大大增强，一般3周后特异性荧光的强度才会有所减弱。

一种减少荧光衰减的封片剂，其特征是所述的每100ml封片剂中包括如下组分：聚乙烯醇0.1～6g；甘油8～30ml；重氮双环辛烷1.5～5g；金属离子螯合剂0.05～1g；碳酸盐缓冲液15～40ml；Tris-HCl缓冲液15～30ml；防腐剂0.02g～1g；其余为水。

进一步地，所述的聚乙烯醇与所述的重氮双环辛烷的质量比小于1.5。

进一步地，所述的碳酸盐缓冲液与所述的Tris-HCl缓冲液的体积比大于1。

一种减少荧光衰减的封片剂，所述的聚乙烯醇其CAS号为9002-89-5，可选择不同聚合度的聚乙烯醇作为封片剂的原料，采用的聚乙烯醇可以为超高聚合度(分子量25～30万)、高聚合度(分子量17～22万)、中聚合度(分子量12～15万)和低聚合度(2.5～3.5万)以及其他聚合度聚乙烯醇的一种或多种的混合物。聚乙烯醇的物理性质受化学结构、醇解度、聚合度的影响，在聚乙烯醇分子中存在着两种化学结构，即1，3和1，2乙二醇结构，但主要的结构是1，3乙二醇结构，即“头·尾”结构。聚乙烯醇的聚合度主要分为超高聚合度(分子量25～30万)、高聚合度(分子量17～22万)、中聚合度(分子量12～15万)、低聚合度(2.5～3.5万)以及其他聚合度的聚乙烯醇。醇解度一般有78％、88％、98％三种，部分醇解的醇解度通常为87％～89％，完全醇解的醇解度为98％～100％。常取平均聚合度的千、百位数放在前面，将醇解度的百分数放在后面，如17-88即表聚合度为1700，醇解度为88％。对于超高聚合度(分子量25～30万)聚乙烯醇，每100ml封片剂中加入0.1～0.5g；对于高聚合度(分子量17～22万)聚乙烯醇，每100ml封片剂中加入0.3～1.5g；对于中聚合度(分子量12～15万)聚乙烯醇，每100ml封片剂中加入0.5～2g；对于低聚合度(2.5～3.5万)聚乙烯醇，每100ml封片剂中加入3～6g。一种减少荧光衰减的封片剂，优选平均分子量为85,000～124,000的聚乙烯醇2.5～5g，最优选平均分子量为85,000～124,000的聚乙烯醇3g。

一种减少荧光衰减的封片剂，所述的甘油是指无荧光的分析纯及以上级别的甘油。所述的甘油又称丙三醇，是甘油三酯分子的骨架成分。当人体摄入食用脂肪时，其中的甘油三酯经过体内代谢分解，形成甘油并储存在脂肪细胞中。因此，甘油三酯代谢的最终产物便是甘油和脂肪酸。甘油可用作溶剂、润滑剂、药剂和甜味剂。每100ml减少荧光衰减的封片剂优选甘油12～24ml。进一步地，每100ml减少荧光衰减的封片剂最优选甘油18ml。

一种减少荧光衰减的封片剂，所述的重氮双环辛烷是指1，4-重氮双环-[2，2，2]辛烷，每100ml优选1，4-重氮双环-[2，2，2]辛烷2～4g。进一步地，每100ml减少荧光衰减的封片剂最优选1，4-重氮双环-[2，2，2]辛烷3g。

一种减少荧光衰减的封片剂，所述的金属离子螯合剂是指可以通过螯合剂分子与金属离子的强结合作用将金属离子包合到螯合剂内部变成稳定的分子量更大化合物的物质，从而阻止金属离子起作用，可以用于解毒、印染、阻垢等方面。螯合剂一般由一个简单正离子(称为中心离子)和几个中性分子或离子(称为配位体)结合而成的复杂离子叫配离子(又称络离子)，含有配离子的化合物叫配位化合物。配合物中心离子与配位体通过配位键结合，配位键是一种特殊的共价键，通常的共价键是由两个成键·原子分别贡献出一个电子形成共同电子对的，而在配位键中是只由一个原子提供电子对，另一原手提供空轨道形成的。如果配位体中只有一个配位原子，则中心离子与配位体之间只能形成一个配位键。而有些配位体分子中含有两个以上的配位原子，当两个原子间相隔着两至三个其他非配位原子时，这个配体就可以与中心离子(或原子)同时形成两个以上的配位键，并形成一个包括两个配位五元或六元环的特殊结构，把这种配合物称为螯合物，螯合物比一般配合物更稳定。常用的金属离子螯合剂有EDTA、EDTA.2Na、EDTA.2K、EGTA等，其中EDTA是指乙二胺四乙酸；其中EDTA.2Na是指乙二胺四乙酸二钠盐；其中EDTA.2K是指乙二胺四乙酸二钾盐；其中EGTA直指乙二醇双(2-氨基乙基醚)四乙酸。一种减少荧光衰减的封片剂中所述的金属离子螯合剂主要为EDTA、EDTA.2Na、EDTA.2K、EGTA的一种或多种的混合物，每100ml减少荧光衰减的封片剂优选EDTA.2Na或EDTA.2K 0.05～0.2g，最优选EDTA.2Na 0.1g。

一种减少荧光衰减的封片剂，所述的碳酸盐缓冲液是指主要由碳酸氢盐、碳酸盐、水组成的缓冲液，其碳酸盐总浓度为0.05～0.2mol/L，其pH值在8.0～9.5。所述的碳酸氢盐可以是碳酸氢钠、碳酸氢钾的一种或二种的混合物，所述的碳酸盐可以是碳酸钠、碳酸钾的一种或二种的混合物，所述的水为蒸馏水或去离子水中的一种。由于碳酸氢盐和碳酸盐均是偏碱性，可采用盐酸调节至所需pH值。进一步地，每100ml减少荧光衰减的封片剂中最优选加入碳酸盐缓冲液(0.1mol/L，pH＝8.7)30ml。

一种减少荧光衰减的封片剂，所述的Tris-HCl缓冲液是指由Tris、HCl、水组成的缓冲液，其Tris浓度为0.1～0.5mol/L，其pH值在7.5～9.5。所述的Tris又称三羟甲基氨基甲烷、氨基丁三醇等，优选分析纯(AR)级别以上的Tris。所述的HCl又称盐酸、氯化氢等，优选分析纯(AR)级别以上的HCl。所述的水为蒸馏水或去离子水中的一种，采用盐酸调节至所需pH值。进一步地，每100ml减少荧光衰减的封片剂中最优选含有0.15mol/L的Tris-HCl缓冲液(pH＝8.3)25ml。

一种减少荧光衰减的封片剂，所述的防腐剂是指叠氮钠(又称叠氮化钠)、甲醛、氯仿的一种或多种的混合物。进一步地，每100ml减少荧光衰减的封片剂中，所述的叠氮钠优选0.05～0.4g，最优选0.1g；所述的甲醛(40％的甲醛)优选0.1～2ml，最优选0.5ml；所述的氯仿优选0.01～2ml，最优选0.1ml。

一种减少荧光衰减的封片剂，所述的水为蒸馏水或去离子水中的一种。

最优选的减少荧光衰减的封片剂，每100ml包括如下组分：平均分子量为85,000～124,000的聚乙烯醇3g；甘油18ml；1，4-重氮双环-[2，2，2]辛烷3g；EDTA.2Na 0.1g；碳酸盐缓冲液(0.1mol/L，pH＝8.3)30ml；Tris-HCl缓冲液(0.15mol/L，pH＝8.7)25ml；叠氮钠0.1g；其余为去离子水，共计100ml。

一种减少荧光衰减的封片剂，所述的封片剂可用于动物、植物、细菌、真菌、培养细胞等样本的封固，可用于封片样本的类型有石蜡切片、冰冻切片、血液涂片、培养细胞以及细胞涂片(如宫颈粘液涂片、脑脊液涂片等)和细胞爬片等；所述的减少荧光衰减的封片剂既能用于荧光样本的封片，亦可用于常规染色后的封片。

一种减少荧光衰减的封片剂，所述的封片剂既能用于自身能发出荧光的样本或荧光染色后的样本的封片，亦可用于常规染色后的封片。

一种减少荧光衰减的封片剂，所述的封片剂可应用于手工封片、半自动封片机、全自动封片机等。

一种减少荧光衰减的封片剂，所述的减少荧光衰减的封片剂应用于荧光显微镜分析、普通显微镜分析、电镜分析、计算机软件程序编写以及仪器的开发和利用，提高各种生物学样本及病理学样本处理方法的染色效果。

一种减少荧光衰减的封片剂，所述的一种减少荧光衰减的封片剂应用于临床检测试剂、科研试剂以及其他生命科学试剂及试剂盒。

本发明“一种减少荧光衰减的封片剂”的制备方法，包括如下步骤：

配制碳酸盐缓冲液：按选定的浓度取适量的碳酸氢盐和碳酸盐，加入适量的蒸馏水或去离子水，充分溶解，用HCl调节pH至所需的值，备用。

配制Tris-HCl缓冲液：按选定的浓度取适量的Tris，加入适量的蒸馏水或去离子水，充分溶解，用HCl调节pH至所需的值，备用。

配制减少荧光衰减的封片剂：取适量的上述配制好的碳酸盐缓冲液和配制好的Tris-HCl缓冲液，充分混匀后，按选定的质量分数取聚乙烯醇加入前述混合液中，再取适量的甘油、重氮双环辛烷、防腐剂依次加入，补蒸馏水或去离子水至恰当体积，即得封片剂粗液。持续搅拌封片剂粗液4～8h，8000～12000g离心1～2h，吸取上清，即获得减少荧光衰减的封片剂，2～8℃保存。

需要说明的是，在所述的减少荧光衰减的封片剂的制备过程中，选用多种所述的防腐剂时，各所述的防腐剂应分批加入所述的混合液中。

本发明“一种减少荧光衰减的封片剂”的封片方法，包括如下步骤(仅供参考)：

取待封片的样本(如石蜡切片、冰冻切片、血液涂片、细胞涂片、细胞爬片、痰液涂片等)，滴加适量的减少荧光衰减的封片剂，将玻片稍微倾斜，用手将盖玻片顺着载玻片斜面轻放以防止气泡产生或直接用封片剂封片。室温避光保存于阴凉处，需要低温保存的样本应4℃避光保存。

进一步地，需要说明的是，采用所述的减少荧光衰减的封片剂进行封片时，本领域技术人员可以根据封片情况及具体样本要求对封片剂使用量、封片时间、封片方式等进行适当调整。可用于封片的样本的类型有石蜡切片、冰冻切片、血液涂片、培养细胞以及体液涂片(如宫颈粘液涂片、脑脊液涂片等)等。

对于本领域的技术人员来说，可以根据本发明的技术方案和构思，上述组成的用量和配比可根据具体需要进行调整，从而制备出不同特点的减少荧光衰减的封片剂。

本发明“一种减少荧光衰减的封片剂”与现有技术封片剂相比具有以下优点：

1、本发明的减少荧光衰减的封片剂不含有二甲苯有害物质，对环境污染极小，对病理技术人员以及科研人员的身体健康伤害较小。

2、本发明的减少荧光衰减的封片剂既能用于荧光样本的封片，以大大延缓样本荧光染色的衰减程度，亦可用于自身能发出荧光的样本或荧光染色后的样本的封片，防止其氧化、褪色，利于镜检观察及保存。

3、本发明的减少荧光衰减的封片剂中的防腐剂可防止样本发霉，使保存时间延长。

具体实施方式：

以下具体实施方式进一步阐明本发明“一种减少荧光衰减的封片剂”的内容，但不应理解为对本发明的限制。在不背离本发明精神和实质的情况下，对本发明方法、条件、步骤及应用所做的修改或替换，均属于本发明的范围。

实施例一

本发明“一种减少荧光衰减的封片剂”，每100ml包括如下组分：平均分子量为85,000～124,000的聚乙烯醇3g；甘油18ml；1，4-重氮双环-[2，2，2]辛烷3g；EDTA.2Na 0.1g；碳酸盐缓冲液(0.1mol/L，pH＝8.3)30ml；Tris-HCl缓冲液(0.15mol/L，pH＝8.7)25ml；叠氮钠0.1g；其余为去离子水，共计100ml。

“一种减少荧光衰减的封片剂”制备方法：

碳酸盐缓冲液(0.1mol/L，pH＝8.3)：取无水碳酸氢钠7.56g和十水合碳酸钠2.862g溶解于900ml去离子水中，其pH值约接近于9.16，用盐酸调节pH值至8.3，补加去离子水至1000ml，备用。

Tris-HCl缓冲液(0.15mol/L，pH＝8.7)：取Tris 18.17g溶解于900ml去离子水中，充分溶解，用盐酸调节pH值至8.7，补加去离子水至1000ml，备用。

配制减少荧光衰减的封片剂：取适量的上述配制好的碳酸盐缓冲液(0.1mol/L，pH＝8.3)30ml和配制好的Tris-HCl缓冲液(0.15mol/L，pH＝8.7)25ml，充分混匀后，取聚乙烯醇(平均分子量为85,000～124,000)3g加入前述混合液中混匀，加入甘油18ml、1，4-重氮双环-[2，2，2]辛烷3g、EDTA.2Na 0.1g、叠氮钠0.1g，补去离子水至100ml，即得封片剂粗液。持续搅拌封片剂粗液4～8h，8000离心1.5h，吸取上清，即为减少荧光衰减的封片剂，2～8℃保存。

取经上述步骤制得的减少荧光衰减的封片剂，对石蜡切片进行封片操作：

取染色后的石蜡切片置于二甲苯内，封片时从二甲苯内取出每张切片，用绸布擦去或用吸水纸吸去组织周边多余的二甲苯，滴加适量的减少荧光衰减的封片剂，将玻片稍微倾斜，用手将盖玻片顺载玻片斜面轻放以防止气泡产生，室温避光保存于阴凉处，避免阳光直射。

实施例二

本发明“一种减少荧光衰减的封片剂”，每100ml包括如下组分：平均分子量为170,000～220,000的聚乙烯醇1g；甘油22ml；1，4-重氮双环-[2，2，2]辛烷2.5g；EGTA 0.08g；碳酸盐缓冲液(0.2mol/L，pH＝8.6)20ml；Tris-HCl缓冲液(0.3mol/L，pH＝8.4)15ml；氯仿0.1ml；其余为蒸馏水，共计100ml。

“一种减少荧光衰减的封片剂”制备方法：

碳酸盐缓冲液(0.2mol/L，pH＝8.6)：取无水碳酸氢钠15.12g和十水合碳酸钠5.724g溶解于900ml蒸馏水中，其pH值约接近于9.1，用盐酸调节pH值至8.6，补加蒸馏水至1000ml，备用。

Tris-HCl缓冲液(0.3mol/L，pH＝8.4)：取Tris 36.34g溶解于900ml蒸馏水中，充分溶解，用盐酸调节pH值至8.4，补加蒸馏水至1000ml，备用。

配制减少荧光衰减的封片剂：取适量的上述配制好的碳酸盐缓冲液(0.2mol/L，pH＝8.6)20ml和配制好的Tris-HCl缓冲液(0.3mol/L，pH＝8.4)15ml，充分混匀后，取聚乙烯醇(平均分子量为170,000～220,000)1g加入前述混合液中混匀，加入甘油22ml、1，4-重氮双环-[2，2，2]辛烷2.5g、EGTA 0.08g、氯仿0.1ml，补蒸馏水至100ml，即得封片剂粗液。持续搅拌封片剂粗液4～8h，10000离心1h，吸取上清，即为减少荧光衰减的封片剂，2～8℃保存。

取经上述步骤制得的减少荧光衰减的封片剂，对细胞爬片进行封片操作：

取自身能发出荧光细胞爬片或荧光染色后的细胞爬片，用滤纸轻轻吸干残余培养液或缓冲液，直接滴加适量的减少荧光衰减的封片剂，将玻片稍微倾斜，用手将盖玻片顺载玻片斜面轻轻放以防止气泡产生，2～8℃避光保存，避免阳光直射。

Claims

1.一种减少荧光衰减的封片剂，其特征在于，所述的每100ml减少荧光衰减的封片剂中包括如下组分：聚乙烯醇0.1～6g；甘油8～30ml；重氮双环辛烷1.5～5g；金属离子螯合剂0.05～1g；碳酸盐缓冲液15～40ml；Tris-HCl缓冲液15～30ml；防腐剂0.02g～1g；其余为水。

2.根据权利要求1所述的一种减少荧光衰减的封片剂，其特征在于，所述的聚乙烯醇与所述的重氮双环辛烷的质量比小于1.5，所述的碳酸盐缓冲液与所述的Tris-HCl缓冲液的体积比大于1，所述的水为蒸馏水或去离子水中的一种。

3.根据权利要求1-2所述的一种减少荧光衰减的封片剂，其特征在于，所述的聚乙烯醇可为超高聚合度(分子量25～30万)、高聚合度(分子量17～22万)、中聚合度(分子量12～15万)、低聚合度(2.5～3.5万)以及其他聚合度的聚乙烯醇的一种或多种的混合物，每100ml减少荧光衰减的封片剂优选平均分子量为85,000～124,000的聚乙烯醇2.5～5g；所述的重氮双环辛烷是指1，4-重氮双环-[2，2，2]辛烷，每100ml减少荧光衰减的封片剂优选1，4-重氮双环-[2，2，2]辛烷2～4g。

4.根据权利要求1所述的一种减少荧光衰减的封片剂，其特征在于，所述的甘油是指无荧光的分析纯及以上级别的甘油，每100ml减少荧光衰减的封片剂优选甘油12～24ml；所述的金属离子螯合剂是指可以通过螯合剂分子与金属离子的强结合作用将金属离子包合到螯合剂内部变成稳定的分子量更大化合物的物质，可为EDTA、EDTA.2Na、EDTA.2K、EGTA的一种或多种的混合物，每100ml减少荧光衰减的封片剂优选EDTA.2Na或EDTA.2K 0.05～0.2g。

5.根据权利要求1-2所述的一种减少荧光衰减的封片剂，其特征在于，所述的碳酸盐缓冲液是指主要由碳酸氢盐、碳酸盐、水组成的缓冲液，其碳酸盐总浓度为0.05～0.2mol/L，其pH值在8.0～9.5，所述的碳酸氢盐可以是碳酸氢钠、碳酸氢钾的一种或二种的混合物，所述的碳酸盐可以是碳酸钠、碳酸钾的一种或二种的混合物，所述的水为蒸馏水或去离子水中的一种，采用盐酸调节至所需pH值；所述的Tris-HCl缓冲液是指由Tris、HCl、水组成的缓冲液，其Tris浓度为0.1～0.5mol/L，其pH值在7.5～9.5，所述的Tris又称三羟甲基氨基甲烷，优选分析纯(AR)级别以上的Tris，所述的HCl又称盐酸、氯化氢等，优选分析纯(AR)级别以上的HCl，所述的水为蒸馏水或去离子水中的一种，采用盐酸调节至所需pH值。

6.根据权利要求1所述的一种减少荧光衰减的封片剂，其特征在于，所述的防腐剂为叠氮钠、甲醛、氯仿的一种或多种的混合物；进一步地，每100ml减少荧光衰减的封片剂中，所述的叠氮钠优选0.05～0.4g，所述的甲醛优选0.1～2ml，所述的氯仿优选0.01～2ml。

7.根据权利要求1-6所述的一种减少荧光衰减的封片剂，其特征在于，所述的减少荧光衰减的封片剂的制备方法包括如下步骤：按选定的浓度取适量的碳酸氢盐和碳酸盐，加入适量的蒸馏水或去离子水，充分溶解，用HCl调节pH至所需的值，即获得碳酸盐缓冲液；按选定的浓度取适量的Tris，加入适量的蒸馏水或去离子水，充分溶解，用HCl调节pH至所需的值，即获得Tris-HCl缓冲液；取适量的上述配制好的碳酸盐缓冲液和配制好的Tris-HCl缓冲液，充分混匀后，按选定的质量分数取聚乙烯醇加入前述混合液中，再取适量的甘油、重氮双环辛烷、防腐剂依次加入，补蒸馏水或去离子水至恰当体积，持续搅拌4～8h，8000～12000g离心1～2h，吸取上清，即获得减少荧光衰减的封片剂。

8.根据权利要求1-7所述的一种减少荧光衰减的封片剂，其特征在于，所述的减少荧光衰减的封片剂的封片方法包括如下步骤：取待封片的样本滴加适量的减少荧光衰减的封片剂，将玻片稍微倾斜，将盖玻片顺着载玻片斜面轻放或直接用封片剂封片。

9.根据权利要求1所述的一种减少荧光衰减的封片剂，其特征在于，所述的减少荧光衰减的封片剂应用于动物、植物、细菌、真菌、培养细胞等样本的封固，可用于封片样本的类型有石蜡切片、冰冻切片、血液涂片、细胞爬片、培养细胞以及细胞涂片(如宫颈粘液涂片、脑脊液涂片等)等；所述的减少荧光衰减的封片剂既能用于自身能发出荧光的样本或荧光染色后的样本的封片，亦可用于常规染色后的封片；所述的减少荧光衰减的封片剂应用于手工封片、半自动封片、全自动封片等。

10.根据权利要求1所述的一种减少荧光衰减的封片剂，其特征在于，所述的减少荧光衰减的封片剂应用于荧光显微镜分析、普通显微镜分析、电镜分析、计算机软件程序编写以及仪器的开发和利用，提高各种生物学样本及病理学样本处理方法的染色效果；所述的减少荧光衰减的封片剂应用于应用于临床检测试剂、科研试剂以及其他生命科学试剂及试剂盒。