CN105749261A - 复方盐酸溶菌酶阴道片及其制备方法 - Google Patents

复方盐酸溶菌酶阴道片及其制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种复方盐酸溶菌酶阴道片及其制备方法和应用。所述的阴道片，包括活性成份和辅料，所述的活性成份是盐酸溶菌酶和蔗糖，其中，在复方盐酸溶菌酶阴道片中的：盐酸溶菌酶重量百分比为2～11％；蔗糖重量百分比为38～72％。所述的辅料为制备盐酸溶菌酶阴道片所需的可接受的任何辅料，根据本领域所熟知的，包括冻干粉骨架剂、粘合剂、填充剂、润滑剂和/或其他添加剂。所述阴道片具有较好的抑菌或杀菌效果，对白色葡萄球菌、白色念珠菌大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌等均有抑制作用。

Description

复方盐酸溶菌酶阴道片及其制备方法
技术领域
本发明涉及一种阴道片及其制备方法，特别涉及一种含有盐酸溶菌酶和蔗糖的复方盐酸溶菌酶阴道片及其制备方法，属于医药技术领域。
背景技术
妇女阴道由于具有特殊的解剖生理特点，最容易受到各种病原体的感染，从而引起阴道炎症和其他阴道疾病，如果不积极治疗，可能引起其他妇科疾病和产妇围生期不良结局。在引起阴道炎的各种病原体中，排在第一位的是白色念珠菌，而且感染率很高，几乎占到了阴道炎病人的1/2，是目前妇女阴道炎的主要病原体，其他病原体，如滴虫、革兰阳性菌、革兰阴性菌等的感染率与过去相比有显著增高。另一方面，引起阴道炎的各病原体之间有合并感染现象，其原因是致病菌感染后，阴道自净作用受到破坏，pH值增大，酸性减弱，阴道黏膜受损，有利于混合感染的发生。
目前市场上妇科阴道用药剂型有：片剂、栓剂、凝胶剂、软胶囊、洗液等剂型；而阴道片剂在市场中使用量较大，其中阴道片剂具有较多的优点：(1)使用方便、质量稳定、生产的机械化程度高；(2)与栓剂相比，克服了栓剂基质受体温作用熔融后连同药物一起流失而影响疗效、污染衣物及患者的不适感；(3)阴道泡腾片可以快速崩解，增加药物在阴道的分布面积，起效快，疗效高；(4)生物黏附性阴道片提高了制剂的抗排出能力，延长了阴道内的滞留时间，有利于提高生物利用度。
中国专利文件CN102178938A公开了一种海洋溶菌酶栓剂及其制备方法，其主要是以含有海洋溶菌酶、聚乙二醇4000、聚乙二醇1500、丙三醇、纯化无菌水经调配、成栓而得棕色或浅棕色鸭嘴形栓剂。以上专利很好的提供一种溶菌酶治疗妇科阴道炎的药物栓剂，不足之处在于(1)该专利制备方法溶菌酶在55℃条件下溶解，而海洋溶菌酶最适作用温度范围5～50℃，稳定性较好，其效价最高；(2)因盐酸溶菌酶在pH4.0～6.0之间稳定性好，该工艺未描述在制备过程中的pH。
溶菌酶广泛存在于高等动物、原生动物、昆虫以及植物和各种微生物中，是一种无毒蛋白质。近年来，随着生物技术的普及和人们环保意识的增强，尤其是生物高技术产业的发展，使得溶菌酶的作用价值得到更加广泛的关注和新的认识。溶菌酶在医学领域有很高的实用价值，可与血液中病菌或病毒结合，发挥消炎、抗病毒、抗肿瘤及止血等作用。盐酸溶菌酶为典型的低温酶，最适作用温度范围5～50℃，且广谱杀菌、低毒。本研究以阴道炎常见致病菌白色念珠菌以及生孢梭菌、金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌为受试菌，测定海洋低温溶菌酶的MIC和MBC，探讨该酶的抗菌活性，为寻找治疗阴道炎药物开辟一新的领域。
蔗糖具有干燥脱水作用，糖粒的渗透作用可吸收细菌的水分，细菌失水后菌体蛋白质即发生变性，致细菌停止生长而死亡；同时还能破坏菌体的原生质膜，吸收菌体原生质膜内水分，原生质膜失去水后即过度皱缩，使菌体内蛋白质变性，代谢障碍而致细菌死亡，此时由于感染的外因已去除，机体中的白细胞及网状内皮系统的吞噬作用，组织修复作用加强，故创口得以愈合。以精制白糖作为主要原料制成的外用药物，既没有其他局部消毒剂的化学作用，也没有局部应用抗生素的生物作用，因此不会因局部消毒剂的应用而破坏正常组织细胞，也不会因局部应用抗生素而产生耐药性菌株，且药源充足、经济，对人体组织无刺激性。
目前，盐酸溶菌酶制剂主要为口服制剂，临床用于急慢性咽喉炎、口腔粘膜溃疡及咳痰困难等。迄今为止，含有盐酸溶菌酶和蔗糖的复方盐酸溶菌酶阴道片在治疗妇科阴道炎应用尚未见报道。
发明内容
本发明的目的在于克服上述现有技术存在不足与缺陷，提供了一种复方盐酸溶菌酶阴道片及其制备方法。
发明概述
本发明以盐酸溶菌酶和蔗糖为有效成分，加以合适的辅料制成阴道片，实现治疗阴道感染等效果。可发挥以下作用：(1)与各种诱发炎症的酸性物质结合，使其失活，并增强抗生素和其他药物的疗效；(2)改善组织基质的粘多糖代谢，从而有利于修复被炎症损伤的组织；(3)激活血小板，改善组织局部循环障碍，分解脓液，增强局部防卫；(4)防止阴道感染，更好的发挥抗菌、消炎、止痛等作用，阻止外界的细菌入侵，并对受损的阴道粘膜有愈合作用。
发明详述
术语说明：
盐酸溶菌酶，英文名Lysozymehydrochloride，系自新鲜鸡蛋清中提取的一种粘多糖的碱性蛋白酶，与氯离子结合成为溶菌酶氯化物，CAS登录号9066-59-5，市场可购。
本发明的技术方案如下：
一种复方盐酸溶菌酶阴道片，包括活性成份和辅料，所述的活性成份是盐酸溶菌酶和蔗糖，其中，在复方盐酸溶菌酶阴道片中的：盐酸溶菌酶重量百分比为2～11％；蔗糖重量百分比为38～72％。
根据本发明，所述的辅料为制备盐酸溶菌酶阴道片所需的可接受的任何辅料，根据本领域所熟知的，包括冻干粉骨架剂、粘合剂、填充剂、润滑剂和/或其他添加剂。
根据本发明优选的，所述的冻干粉骨架剂为甘露醇；粘合剂、填充剂均为乳糖；润滑剂为硬脂酸镁；其他添加剂为纯化水。
本发明所使用的盐酸溶菌酶为本领域常规原料，市购产品。
本发明提供以下优选的技术方案：
一种复方盐酸溶菌酶阴道片，由以下原料按质量份制成：
进一步优选的：
一种复方盐酸溶菌酶阴道片，由以下原料按质量份制成：
更进一步优选的：
一种复方盐酸溶菌酶阴道片，由以下原料按质量份制成：
或者，
一种复方盐酸溶菌酶阴道片，由以下原料按质量份制成：
或者，
一种复方盐酸溶菌酶阴道片，由以下原料按质量份制成：
本发明所述的复方盐酸溶菌酶阴道片，所使用的原料未特别说明的均为常规市购产品。
一种复方盐酸溶菌酶阴道片的制备方法，包括如下步骤：
(1)将蔗糖进行粉碎，过100～120目筛；将乳糖进行粉碎，过80～100目筛；将蔗糖、乳糖和硬脂酸镁分别在温度为40～60℃进行灭菌：蔗糖、乳糖控制灭菌压力在20～30Kpa，时间在6～7h条件；硬脂酸镁控制灭菌压力在35～50Kpa，时间在3～4h条件，备用；
(2)按配比称取盐酸溶菌酶，加纯化水溶解，用2～10％(W/W)盐酸调pH4.0～6.0，用0.1～0.22μm滤膜过滤除菌后，将所得溶菌酶料液输送至已灭菌的罐内，室温备用；
(3)按配比称取甘露醇、纯化水混合，继续升温至131～136℃，并保持温度20～30min进行灭菌；输送至已灭菌的罐内存放，降至室温备用；
(4)将步骤(1)中的蔗糖与步骤(2)和步骤(3)混合后，进行搅拌；配制成混合溶液，然后放入冻干箱中；开启冻干机，将冻干搁板降至-40℃～-50℃，待混合溶液温度降至-30℃～-40℃，预冻保温2～3小时；抽真空，然后逐步提高温度至-10℃～-15℃，真空干燥15～20小时；再次提高搁板温度至30℃～40℃，保持1～2小时，真空度维持在0～10Pa，直至制品水分在2～6％(W/W)冻干结束，出箱即得；
(5)将步骤(1)乳糖与步骤(4)冻干粉置入混合机中，混合10～15分钟；再将步骤(1)的硬脂酸镁加入，继续混合10～15分钟；压片，即得。
根据本发明优选的，步骤(2)所述的冻干粉水分在2％～5％(W/W)。
根据本发明优选的，步骤(3)所述的灭菌是在环氧乙烷灭菌柜中进行。
根据本发明进一步优选的，一种复方盐酸溶菌酶阴道片的制备方法，包括如下步骤：
(1)将蔗糖进行粉碎，过100目筛；将乳糖进行粉碎，过80目筛；将蔗糖、乳糖和硬脂酸镁分别在温度为40～60℃灭菌：蔗糖、乳糖控制灭菌压力在20～30Kpa，时间在6h条件；硬脂酸镁控制灭菌压力在35～50Kpa，时间在3～4h条件，备用；
(2)按配比称取盐酸溶菌酶，加纯化水溶解，用2％(W/W)盐酸调pH4.0～6.0，用0.22μm滤膜过滤除菌后，将所得溶菌酶料液输送至已灭菌的罐内，室温备用；
(3)按配比称取甘露醇、纯化水各组分混合，继续升温至131～136℃，并保持温度20～30min进行灭菌；输送至已灭菌的罐内存放，降至室温备用；
(4)将步骤(1)中的蔗糖与步骤(2)和步骤(3)混合后，进行搅拌；配制成混合溶液，然后放入冻干箱中；开启冻干机，将冻干搁板降至-40℃～-50℃，待混合溶液温度降至-30℃～-40℃，预冻保温2～3小时；开始抽真空，然后逐步提高温度至-10℃～-15℃，真空干燥15～20小时；再次提高搁板温度至30℃～40℃，保持1～2小时，真空度维持在0～10Pa，直至制品水分在2～5％(W/W)冻干结束，出箱即得；
(5)将步骤(1)乳糖与步骤(4)冻干粉置入混合机中，混合10分钟；再将硬脂酸镁加入，继续混合10分钟；压片，即得。
本发明所述的室温是指实验操作所处的环境温度，控制在15～30℃范围内。
下面结合实验例对本发明做进一步的说明，但不限于此。
就制备方法而言，以上是本发明的优选方法，但不限于此。以上所述复方盐酸溶菌酶阴道片制备方法中未特别限定的，可参照现有技术。本领域的技术人员根据其熟知的知识，可以适当加以调整。制备方法中所使用的设备均为现有技术中的常规设备。
经过实验表明，复方盐酸溶菌酶阴道片对白色葡萄球菌、白色念珠菌大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌等均有抑制作用；因此，本发明还包括所述的复方盐酸溶菌酶阴道片在制备治疗阴道炎的药物中的应用。
根据本发明，优选的，复方盐酸溶菌酶阴道片在制备治疗阴道炎的药物中的应用，其中，所述阴道炎包括霉菌性、细菌性或混合性阴道炎。
根据本发明，优选的，所述应用是复方盐酸溶菌酶阴道片单独应用或者和与其它药物配合作为药剂的联合应用。
本发明所述的制备方法中复方盐酸溶菌酶阴道片质量标准如下，但不限以下所述复方盐酸溶菌酶阴道片标准。
复方盐酸溶菌酶阴道片
本品每片中含盐酸溶菌酶的效价不得低于3.125万单位。含蔗糖应为标示量的90.0％～110.0wt％；
【性状】本品为白色片剂。
【鉴别】
(1)取本品1片，加入纯化水30mL溶解后，取出2mL加10％(W/W)氢氧化钠溶液5滴与10％(W/W)硫酸铜溶液1滴,混匀后显紫红色；
(2)取鉴别(1)项下滤液5mL，加茚三酮试液1mL，加热，溶液应显蓝紫色；
(3)取鉴别中的溶解液10mL加醋酸-醋酸钠缓冲液制成每1mL中含盐酸溶菌酶0.4mg的溶液，照分光光度法(中国药典2010年版二部附录ⅣA)测定，在280nm的波长处有最大吸收，吸收度应为0.39～0.49；
所述的醋酸-醋酸钠缓冲液按如下方法制得：取无水醋酸钠6.7g，加水约900mL，振摇使溶解，用醋酸调节pH值至5.4，加水稀释至1000mL，摇匀即得。
(4)取溶菌酶标准品适量，用磷酸盐缓冲液制成每1mL含1mg的溶液。照有关物质项下方法试验。供试品色谱中，在与标准品色谱相应的位置上，显相同颜色的条带；
所述的磷酸盐缓冲液按如下方法制得：取磷酸二氢钠10.4g与磷酸氢二钠7.86g及乙二胺四乙酸二钠0.37g，加水溶解使成1000mL，调节pH值至6.0即得。
蔗糖对照品10mg,加甲醇溶液20mL，作为对照品溶液。另取本品适量(约相当于蔗糖10mg)加甲醇溶液20mL，作为供试品溶液。
分别取上述溶液各2μl，点在薄层板上，立即吹干，用体积比10:5:3:21，2—二氯乙烷:冰乙酸:甲醇:水混合液展开，至15cm左右，取出，高温吹干。重复一次展开，高温吹干后。均匀的喷上麝香草酚溶液，130℃加热10分钟。供试品溶液主要斑点的颜色大小同对照品溶液一致。
所述的麝香草酚溶液按照如下方法制得：取麝香草酚0.5g溶解于100mL体积比19:1乙醇硫酸混合液，即得。下同。
【检查】
有关物质取本品照效价测定项下供试品溶液制备方法用磷酸盐缓冲液(pH6.0)制成每1mL中含溶菌酶1mg的溶液，作为供试品溶液。取溶菌酶标准品适量，用磷酸盐缓冲液(pH6.2)制成每1mL含2mg的溶液，作为标准品溶液。分别精密吸取各溶液10μl照电泳法(《中国药典》2010年版二部附录ⅤF)测定，用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法，考马斯亮蓝染色。供试品溶液如显杂质斑点，与标准品溶液杂质斑点比较，不得更深。
融变时限取25mL量筒6只，分别加水3mL，置37℃恒温水浴中，待恒温后，分别投入1片，药片均应在5min内崩解完成。
转化糖对照溶液：称取葡萄糖10mg，置50mL量瓶中，加甲醇溶液适量溶解，并用甲醇溶液稀释至刻度，摇匀，即得。
供试品溶液：称取样品1.0g，精密称定，置50mL量瓶中，加甲醇溶液适量溶解，并用甲醇溶液稀释至刻度，摇匀，即得。
分别取上述溶液各2μL，点在硅胶G薄层板上，立即吹干，用体积比10:5:3:21，2—二氯乙烷:冰乙酸:甲醇:水混合液展开，至15cm左右，取出，高温吹干。重复一次展开，高温吹干。均匀的喷上麝香草酚溶液，130℃加热10分钟。结果：供试品溶液在对照溶液斑点处不显斑点；如显斑点，供试品溶液斑点的颜色不得深于对照溶液斑点颜色。
其他应符合中国药典片剂项下有关的各项规定。
【含量测定】蔗糖取本品2片，精密称定，置小烧杯中，加水适量，搅拌溶解，转移置100mL量瓶中，并用水稀释至刻度，摇匀；精密量取1mL，置100mL量瓶中，用睡稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。另取蔗糖12.5mg，精密称定，置250mL量瓶中，加水振摇溶解，并用水稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。
精密量取对照品溶液和供试品溶液各1mL，分别置10mL量瓶中，加5％(W/W)硫酸溶液3mL，钼酸铵溶液(4g钼酸铵加入100ml水中溶解)3.5mL，并用水稀释至刻度，摇匀，沸水浴中25分钟后，用水冷却至室温。照中国药典2005年版二部(附录)紫外分光光度，于700nm处测定，并空白校正，记录吸光度，计算，即得。
【效价测定】取本品2片，加入适量的纯化水，并时时振摇，所得液体过滤，取液体10mL，加磷酸盐缓冲液(pH6.2)适量，移入200mL量瓶中，加磷酸盐缓冲液(pH6.2)至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液5mL，置100mL量瓶中，加磷酸盐缓冲液(pH6.2)至刻度，摇匀，作为供试品溶液。
标准品溶液制备精密称取盐酸溶菌酶标准品25毫克，置100mL容量瓶中，加磷酸盐缓冲溶液溶解，定容至刻度。分别精密移取1mL、2mL溶液置50mL容量瓶中，加PH6.2磷酸盐缓冲溶液至刻度，做为标准溶液(1)及标准溶液(2)。样品溶液，标准溶液(1)标准溶液(2)置冰浴中保存。
底物悬浮液的制备称取盐酸溶酶小球菌15～20mg，加磷酸盐缓冲液(pH6.2)0.5～1mL，在研钵内研磨3分钟，再加磷酸盐缓冲液(pH6.2)适量，使总体积约为50mL，使悬浮液于25±0.1℃时，在450nm的波长处测得的吸收度为0.70±0.05(临用前配制)。
测定法精密量取盐酸溶菌酶底物试液4mL，在35℃水浴中加热5分钟，精密移取在水浴提前加热3分钟的样品溶液100μl，加入底物试液中，并在35℃水浴中加热10分钟后，再精密量取1mol/L的盐酸溶液0.5mL加入底其中，摇匀。以水做为空白，在波长640nm处，紫外可见分光光度法测量样品溶液的吸收值Ast。标准溶液(1)、标准溶液(2)按以上方法测定吸光度As1、As2。
Ws：溶菌酶标准品称取量；
Wt：样品称取量×规格；
As1：标准溶液(1)吸收度；
As2：标准溶液(2)吸收度。
下面结合实验例对本发明做进一步的说明，但不限于此。
实验例1、蔗糖以及辅料灭菌实验
不同的环氧乙烷灭菌压力和时间对蔗糖以及硬脂酸镁灭菌效果的比较,见表1。
表1蔗糖以及硬脂酸镁灭菌效果比较
由表1中可分析出：
1、环氧乙烷灭菌压力10～20Kpa，时间在3～6h条件下，蔗糖、乳糖以及硬脂酸镁无菌检查，不符合规定；
2、环氧乙烷灭菌压力20～30Kpa，时间在3～4h条件下，蔗糖、乳糖、硬脂酸镁无菌检查，不符合规定；
3、环氧乙烷灭菌压力20～30Kpa，时间在6h条件下，蔗糖、乳糖无菌检查，符合规定。而硬脂酸镁无菌检查，不符合规定。
4、环氧乙烷灭菌压力35～50Kpa，时间在3～4h条件下，蔗糖、乳糖、硬脂酸镁无菌检查，符合规定。
试验结果：温度在40～60℃；蔗糖、乳糖控制灭菌压力在20～30Kpa，时间在6h条件下；硬脂酸镁控制灭菌压力在35～50Kpa，时间在3～4h条件下。
实验例2、甘露醇灭菌实验
不同的高温灭菌温度和时间对甘露醇高温灭菌效果的比较，见表2：
表2甘露醇高温灭菌效果比较
由表2中可分析得出：
1、高温灭菌温度在121～126℃，时间在15～30min条件下，无菌检查，不符合规定；
2、高温灭菌温度在131℃、时间在15min、无菌检查，不符合规定；
3、高温灭菌温度在131～136℃、时间在20～30min、无菌检查，符合规定；
试验结果：甘露醇高温灭菌控制温度在131～136℃、时间在20～30min。
实验例3、复方溶菌酶冻干粉粒径和粒径分布的测定实验
复方溶菌酶阴道片剂外观、脆碎度、硬度、重量差异、融变时限、效价等质量，主要是片剂的中间体质量所控制，也是决定片剂的主要质量因素，首先研究复方溶菌酶冻干粉的质量；
1、仪器及材料：仪器Winner99图象仪(静态颗粒图像仪)；超微振动粉碎机。
2、实验方法：样品1制备，复方溶菌酶冻干粉按照实施例1步骤(4)方法制备；样品2制备，将盐酸溶菌酶进行粉碎，过80目筛；将蔗糖进行粉碎，过100目筛；然后充分混合；
2.1粒径检测
2.1.1称取样品1适量，加入20倍量(W/W)正辛醇，装片，采集图像(见图1)并检测粒径；
2.1.2称取样品2适量，照上述方法装片，采集图像(见图2)并检测粒径；
2.1.3样品1与样品2的粒径检测结果，见表3：
表3样品1与样品2的粒径检测结果
显微学研究表明两种粉体的显微特征有很大的区别：图1可见有含针状体的大形晶体，平均直径37.6～65.2μm；图2可见有钟乳体大形晶体,平均直径62.6～93.4μm；从其可见具有很大的区别，并两颗粒：图1颗粒松散，易于压片成型。图2颗粒致密，不易于压片成型。
实验例4、处方筛选实验
本片剂所拟用的辅料均为药用辅料级，针对本制剂特点并结合片剂研制经验，设计初步筛选的处方。分别对性状、脆碎度、融变时限进行考察，并注意观察制备过程现象。见表4。
表4盐酸溶菌酶阴道片处方筛选1(单位：W/W)
组分 01 02 03
盐酸溶菌酶 3.0 3.0 3.0
蔗糖 30 30 30
甘露醇 3.0 6.0 10
乳糖 10 10 10
硬脂酸镁 0.2 0.2 0.2
纯化水 30 30 30
取原辅料盐酸溶菌酶、蔗糖、甘露醇，按照实施例1方法制备冻干粉；加入乳糖混合，然后加入润滑剂硬脂酸镁混合均匀制成颗粒；用橄榄型冲模压片。对各处方进行检验，结果见下表5：
表5处方筛选试验1检验结果
原辅料 01 02 03
性状 片面不光洁 片面光洁 片面光洁
脆碎度 ≤1％ ≤1％ ≤1％
融变时限(min) 13 6 4
备注 融变时间长 融变时间较长 融变时间较好
结果分析：处方1、2并融变时间较长，弃用。处方3制备过程较顺利，片剂融变时间较好，故根据处方3调整辅料用量，试验4批，继续验证处方。见表6。
表6处方筛选试验2(单位：W/W)
组分 04 05 06 07
盐酸溶菌酶 3.0 3.5 4.0 5.0
蔗糖 30 35 45 50
甘露醇 10 14 16 18
乳糖 10 14 16 18
硬脂酸镁 0.2 0.4 0.6 0.8
纯化水 30 35 40 50
取原辅料盐酸溶菌酶、蔗糖、甘露醇，按照实施例1方法制备冻干粉；加入乳糖混合，然后加入润滑剂硬脂酸镁混合均匀制成颗粒；用橄榄型冲模压片。对各处方进行检验，结果见下表7：
表7处方筛选试验2检验结果
原辅料 04 05 06 07
性状 片面光洁 片面光洁 片面光洁 片面光洁
脆碎度 ≤1％ ≤1％ ≤1％ ≤1％
融变时限(min) 4 4 3 3
备注 融变时间较好 融变时间较好 融变时间较好 融变时间较好
结论：处方4、5、6、7处方所得片剂各项均良好。所以确定处方4、5、6、7为本制剂的最优处方。
实验例5、复方盐酸溶菌酶阴道片体外抑菌实验
盐酸溶菌酶的药理特性溶菌酶又称胞壁质酶或N-乙酰胞壁质聚糖水解酶，是一种能水解致病菌中黏多糖的碱性酶。主要通过破坏细胞壁中的N-乙酰胞壁酸和N-乙酰氨基葡糖之间的β-1,4糖苷键，使细胞壁不溶性黏多糖分解成可溶性糖肽，导致细胞壁破裂内容物逸出而使细菌溶解。溶菌酶还可与带负电荷的病毒蛋白直接结合，与DNA、RNA、脱辅基蛋白形成复盐，使病毒失活。因此，该酶具有抗菌、消炎、抗病毒等作用。而蔗糖是通过改变病原体细胞膜的通透性达到杀菌目的，二者联合应用起到了抗菌、消炎作用，蔗糖联合盐酸溶菌酶治疗阴道炎，起到协同作用。
4.1药物：复方盐酸溶菌酶阴道片实施例1制备，粉碎加水溶解，制成溶液、洁尔阴洗液；
4.2菌种：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌、白色念珠菌、厌氧菌(山东省药品检验所提供)。
4.3方法：采用药物琼脂平皿法：制备含复方盐酸溶菌酶阴道片及洁尔阴分别为150、100、50、10、5、2.5mg/mL的培养基和不含药物的培养基，即药物营养琼脂平皿、药物沙氏培养基及药物厌氧菌培养基。取一接种大肠杆菌18h的培养液分别接种于不同浓度的药物营养琼脂平皿中，同法将金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌接种于药物沙氏培养基中，将白色念珠菌、厌氧菌接种于药物厌氧菌培养基中；另相应各接种一套不含药物的培养基作对照。置于37℃下培养并于不同时间进行观察，结果详见表8。
表8复方盐酸溶菌酶阴道片与洁尔阴对阴道致病菌的体外抑菌试验结果
表7中，“+”表示抑菌环小于12mm或无抑菌环；“-”表示抑菌环在12～18mm；“①”表示最低抑菌浓度。
结果，一定浓度复方盐酸溶菌酶阴道片制成溶液和洁尔阴对金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌、白色念珠菌和厌氧菌等阴道致病菌均有抑制作用。50mg/mL复方盐酸溶菌酶阴道片制成溶液对白色葡萄球菌和白色念珠菌有抑制作用；对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌，10mg/mL复方盐酸溶菌酶阴道片制成溶液即有较强抑制作用，并对厌氧菌也有一定抑制作用；而洁尔阴对上述各菌的有效抑菌浓度为100～150mg/mL。
结果评价:复方盐酸溶菌酶阴道片对阴道致病菌有较强的抑菌作用，且效果优于洁尔阴。
实验例6、原辅料相容性实验
本发明复方盐酸溶菌酶阴道片研究过程中选用的盐酸溶菌酶、蔗糖，尤其是辅料在处方中的应用，需进行原辅料的相容性试验，原辅料相容性试验如下；
将原料与所选辅料按一定比例物理混合，按照中国药典2010版二部(附录ⅪXC)原料药与药物制剂稳定性试验指导原则中影响因素的实验方法，由于盐酸溶菌酶在高温下，稳定性较差，分别在高温50℃±2℃、湿度90％±5％、强光4500±500lx的条件下放置10天，检查放置前后变化。试验结果如下：
1、高温条件原辅料相容性试验
将原辅料按照一定比例混合，暴露置高温50℃±2℃条件下10天取样，检验结果见表9：
表9原辅料相容性试验(50℃±2℃)10天
经高温50℃±2℃条件下10天相容性试验，盐酸溶菌酶与蔗糖；结果显示与各辅料之间的性状、效价、含量、有关物质；均无变化
以上结果表明盐酸溶菌酶+蔗糖在高温50℃±2℃条件下与辅料相容性良好。
2、光照条件原辅料相容性试验
将原辅料按照一定比例混合，暴露置光照(4500±500lx)条件下10天取样，测定各项指标，结果见表10。
表10原辅料相容性试验光照(4500±500lx)10天
以上结果表明盐酸溶菌酶+蔗糖在光照(4500±500lx)条件下与辅料相容性良好；经光照(4500±500lx)条件下10天相容性试验，盐酸溶菌酶与蔗糖；结果显示与各辅料之间的性状、效价、含量、有关物质均无变化。
3、高湿条件原辅料相容性试验
将原辅料按照一定比例混合，暴露置高湿(90％±5％)条件下10天取样，测定各项指标，结果见表11。
表11原辅料相容性试验高湿(90％±5％)10天
经高湿90％±5％条件下10天相容性试验，盐酸溶菌酶与蔗糖；结果显示与各辅料之间的性状、效价、含量、有关物质均无变化。因本法为物料暴露于高湿条件下，故水分有所增加。
以上结果表明盐酸溶菌酶+蔗糖在高湿90％±5％条件下与辅料相容性良好。综合试验结果表明制剂应密封保存。
实验例7、复方盐酸溶菌酶阴道片的长期稳定性实验
将实施例1制备的复方盐酸溶菌酶阴道片在上市规定的贮存条件下进行长期稳定性试验，考察复方盐酸溶菌酶阴道片在运输、保存、使用过程中的稳定性特征，从而作为确定有效期和贮存条件的依据。将采用PVC/铝箔包装的复方盐酸溶菌酶阴道片样品，放置于25℃±2℃、RH60％±10％的恒温、恒湿箱中放置24个月，分别于0、3、6、9、12、18、24个月取样，检测各项质量指标。结果见表12。
表12复方盐酸溶菌酶阴道片长期稳定性实验
结果：经长期稳定性24个月的考察，结果显示与0月比较各项指标无明显变化，表明复方复方盐酸溶菌酶阴道片在25℃±2℃、RH60％±10％条件下稳定性良好，在规定的各项条件下生产、包装、贮存、运输均不会对本品的质量产生不利影响，可保障临床用药安全有效。
实验例8、复方盐酸溶菌酶阴道片主动皮肤过敏性及阴道刺激性的实验研究
复方盐酸溶菌酶阴道片经阴道给药后毒副反应低，本试验观察了复方盐酸溶菌酶阴道片多次给予家兔阴道后所产生的刺激反应情况，以期将此开发为治疗细菌性阴道炎的新药。
1、试验材料
1.1动物：豚鼠，英国短毛种，雌雄各半，体重(300.0±11.0)g，日本大耳兔，雌性，体重：(2.50±0.10)kg；由山东大学实验动物中心提供
1.2试验药物：复方盐酸溶菌酶阴道片，实施例1制备，粉碎并过100目筛；赋形剂空白对照，是不加盐酸溶菌酶和蔗糖，制备方法按实施例1制备，粉碎并过100目筛；
2、动物分组及实验方法
2.1主动皮肤过敏实验：取豚鼠30只，常规饲养3d，以适应环境。按体重随机分成3组，即复方盐酸溶菌酶阴道片组(0.26g/只)、赋形剂空白对照组(赋形剂0.26g/只)与阳性对照组(1％2，4-二硝基氯代苯0.2mL/只)，每组10只，将豚鼠背部两侧去毛，面积为(3cm×3cm)，24h后，将2片(3×3)cm2干净滤纸片盖于豚鼠左侧去毛皮肤上，在纸片上滴0.2mL供试品使之湿透，然后用一层油纸及两层纱布覆盖，再用无刺激性胶布固定，务使供试品与皮肤接触6h，第7天和第14天重复接触致敏，共3次。末次接触致敏14d后，在豚鼠右侧去毛皮肤上按上法分别涂抹0.2mL供试品激发接触，阳性对照药用0.1％2，4-二硝基氯代苯溶液。6h后去除供试品，即刻观察，并于24、48、72h再次观察有无过敏反应。见表13；
表13复方盐酸溶菌酶阴道片激发接触后豚鼠皮肤过敏反应情况
主动皮肤过敏实验结果：复方盐酸溶菌酶阴道片组及赋形剂组豚鼠激发接触6h后观察，皮肤无红斑及水肿现象出现，其反应级数平均值为0。致敏率均为0，阳性对照组红斑反应级数平均值为2.6±0.72，水肿反应级数平均值为1.8±1.1，致敏率均为100％。
结果：复方盐酸溶菌酶阴道片(0.26g/只)经豚鼠皮肤重复接触后，在豚鼠皮肤上未见红斑及水肿现象出现，其反应级数平均值为0，致敏率为0，表明该药外用对豚鼠无皮肤过敏反应。
2.2阴道刺激性试验：取大耳白兔30只，适应性养殖3d(天)。按体重随机分成3组，即复方盐酸溶菌酶阴道片高剂量组(1.050g/kg)、复方盐酸溶菌酶阴道片低剂量组(0.525g/kg)和赋形剂对照组(与高剂量组等量)，每组10只，将供试品(4h内分两次给药)轻轻纳入大耳白兔阴道，然后用消毒过的细小玻棒将供试品轻轻推入阴道5cm，固定观察4h，确认供试品无漏出，然后任其自由活动，观察给受试物后至24、48h全身状况及局部刺激反应。24h后处死一半大耳白兔，取阴道，观察有无充血、水肿等变化，与对照组比较，并作病理组织学检查。剩余大耳白兔逐日观察并记录全身状况，体重、肠胃、呼吸、中枢神经系统及四肢活动等变化。第7d(天)处死全部大耳白兔检查阴道的变化，并作病理组织学检查。阴道刺激性试验结果(表14)
表14复方盐酸溶菌酶阴道片对大耳白兔阴道刺激性反应情况
复方盐酸溶菌酶阴道片1.050g/kg和0.525g/kg经大耳白兔阴道给药，大耳白兔未发现全身及局部性不良反应，与赋形剂组比较无差异，故认为该药对大耳白兔阴道粘膜无刺激性。
实验例9、复方溶菌酶阴道片治疗念珠菌性阴道炎的临床研究实验
霉菌性阴道炎是妇女常见病之一，一旦感染了霉菌性阴道炎会给患者带来莫大的痛苦。为此，寻找一种使用方便又有效的药物来治疗霉菌性阴道炎具有特别重要的意义。研究对复方溶菌酶阴道片治疗方案的临床疗效作一前瞻性的研究，旨在进一步客观评价这一新疗法的价值。
1材料与方法
1.1病例选择和分组选择念珠菌性阴道炎患者135例，部分患者是普查时发现且可随诊者，均已婚，年龄20～55a，随机分成A、B和c三组，每组45例，A组每晚单用复方盐酸溶菌酶阴道片一片塞入阴道，B组每晚用制霉菌素阴道片一片塞入阴道，10d为一个疗程。所有患者于疗程结束后3d和30d复诊，进行妇科检查，作阴道分泌物念珠菌涂片和培养，记录不良反应。治疗期间禁用所有其他抗感染药物。
1.2诊断标准具有以下8项指标中⑦并至少有其它4项者，诊断为念珠菌性阴道炎：①白带增多，呈白色豆渣样或凝乳样；②白带稀薄，含白色片状物；③外阴部痒，可伴外阴阴道烧灼感，排尿时尤为明显；④外阴部痒伴尿频、尿痛和性交痛；⑤妇检时见小阴唇内侧及阴道粘膜表面有白色片状薄膜或凝乳状物覆盖；⑥妇检时见小阴唇内侧及阴道粘膜表面有灰白色厚膜，不易擦去，去除后可见粘膜红肿；⑦阴道分泌物生理盐水悬液镜检见念珠菌芽孢和菌丝；⑧阴道pH＜4.0。
1.3试验药品复方盐酸溶菌酶阴道片实施例1制备；制霉菌素阴道片为中美上海施贵宝制药有限公司提供，每片含制霉菌素100000μ；
1.4临床疗效评价治疗效果分为痊愈、显效、改善和无效，未治愈患者不继续随访。痊愈：在疗程内症状、体征和病原菌检查均恢复正常：显效：在疗程内，病原菌检查恢复正常，其余7项中有1项未完全恢复正常；改善：在疗程内，病原菌检查仍然阳性，其余7项中有2项未恢复正常；无效：在疗程内症状、体征无明显改善或加重，病原菌检查仍然阳性。痊愈及显效按有效病例统计，改善及无效按无效病例统计。
1.5资料整理及统计分析观察临床症状、体征和测阴道分泌物pH值，进行涂片和培养找念珠菌，记录不良反应。统计学处理采用X2检验。
2结果
2.1临床疗效表15可见，疗程结束后3d(天)A组的痊愈率和有效率分别为84.4％和88.9％，与B组的痊愈率86.7％和有效率93.3％相比无显著差异(p＞0.05)，上述疗效一直持续到疗程结束后30d(天)(见表16)；
2.2细菌转阴率表17可见，疗程结束后3d，阴道分泌物培养出念珠菌的A组有5例，其转阴率为88.9％(40/45)，与B组转阴率93.3％(42/45)相比无显著差异(p＞0.05)。疗程结束后30d(天)，阴道分泌物培养出念珠菌的A组有3例，其转阴率92.3％(36/39)，与B组转阴率95.0％(38/40)相比两者无显著差异(p＞0.05)；
表15疗程结束后3d(天)患者疗程分析
表16疗程结束后30d(天)患者疗效分析
30d(天)时复方盐酸溶菌酶阴道片组淘汰5例，失访1例；制霉菌素阴道片组淘汰3例，失访2例；
表17疗程结束后念珠菌培养结果和转阴率比较
2.3不良反应：用药期间A组未见明显局部和周身有不良反应，B组有5例(11.1％)、C组有3例(6.7％)用药后感恶心，无其它不适。
研究结果显示，复方盐酸溶菌酶阴道片治疗念珠菌性阴道炎一个疗程10d(天)后d3的临床有效率和细菌转阴率均高达88.9％，接近其与制霉菌素阴道片应用时的效果(均为93.3％)，且用药过程中无明显局部和周身不良反应。30d(天)时复方盐酸溶菌酶阴道片组有效率为92.3％，细菌转阴率92.3％，表明复方盐酸溶菌酶阴道片阴道给药治疗念珠菌性阴道炎的临床有效率和细菌转阴率均达到其与制霉菌素阴道片应用的水平，且可有效地预防疾病的复发和再感染，因而是治疗念珠菌性阴道感染的良好药物。
使用复方盐酸溶菌酶阴道片，溶解迅速，增加了局部用药浓度，能较快发挥效果，提高了临床疗效，并减少了全身性副作用。本研究表明复方盐酸溶菌酶阴道片为安全有效、简单方便的局部治疗药物，可作为治疗念珠菌性阴道感染的首选药物。
本发明以溶菌酶、蔗糖为活性成分，加以合适的辅料制成复方阴道片剂，经过阴道给药，都显示了它具有高渗、杀菌，其中所具备的特点如下：阻止细菌的繁殖，防止阴道进一步感染，阻止外界的细菌入侵，并对受损的阴道有愈合作用；溶菌酶、蔗糖的作用特点为局部使用，使用更安全。
本发明的有益效果如下：
1、本发明制剂中的溶菌酶具有促进纤维芽细胞的增殖作用、促进试验性创伤愈合作用、促进结缔组织纤维形成作用等药理作用。复方溶菌酶阴道片中的活性成分溶菌酶为一种粘多糖溶解酶，其通过水解破坏组成细菌细胞壁的肽糖分子的由N-乙酰胞壁酸和N-乙酰氨基葡萄糖氨之间的β-(1，4)糖苷键，使细胞因渗透压不平衡引起破裂，从而导致菌体细胞壁溶解而杀死细菌。
2、本发明制剂中使用蔗糖，在水肿组织外形成高渗状态，同时还能放出热量，改变局部的渗透压，从而将水肿组织内多余水分吸出，高渗也能抑制细菌生长，还可起到一种“消毒”作用，与使用高渗葡萄糖换药机制一样，因为蔗糖具有高渗作用，能减轻局部创口水肿程度，加速肉芽组织生成，加速愈合，能达到收敛生肌的目的。
3、本发明制剂中使用蔗糖能改变阴道的酸性环境，促使阴道产生温良的生理刺激，供给阴道受损的粘膜营养，使粘膜附近血液循环良好，促进细胞再生，加速阴道粘膜愈合。
4、本发明制剂中使用蔗糖为有效成分，只能被少数细菌分解，因此具有选择性地促进阴道内乳杆菌生长的作用。通过促进阴道内有益乳杆菌的增殖，使乳杆菌分解糖原产生乳酸从而降低阴道pH值，同时诱导乳杆菌分泌过氧化氢和细菌素，抑制致病菌的生长，调节阴道菌群，达到在微生态水平治愈细菌性阴道病的效果。
5、复方盐酸溶菌酶阴道片的作用特点为局部使用，所使用的原辅材料不涉及到吸收利用的问题，对阴道刺激小，无副作用，使用更安全。
综上，本发明的复方盐酸溶菌酶阴道片制剂，采用盐酸溶菌酶、蔗糖为本发明药物的有效成分与药用辅料，通过溶解、高温灭菌、滤膜过滤除菌、环氧乙烷、低温冻干、混料制粒、压片等工艺制成药剂，极大地提高了融变速度。经过阴道给药，对治疗妇科阴道炎都显示了它具有较好的临床作用。更为详细的效果实验将在实施例中予以说明。
附图说明
图1是实验例3复方盐酸溶菌酶冻干粉粒径和粒径分布Winner99图；
图2是实验例3盐酸溶菌酶过80目筛与蔗糖过100目筛后的混合粉粒径和粒径分布Winner99图。
具体实施方式
下面通过具体实施例并结合附图对本发明做进一步说明，但不限于此。
实施例中原辅料说明：
实施例中所涉及的装置和设备均为固体制剂生产通用设备，市场可购，说明如下:
万能高效粉碎机(型号30B)、方形振荡筛(型号FS-0.5M2-X)、三维运动混合机(型号SYH-800)以上设备：常州市腾龙药化设备有限公司有售。冻干机(型号LGJ-200F)北京松源华兴科技发展有限公司有售。全自动双进料高速压片机(型号GZPS-49)：北京翰林航宇科技发展股份公司有售。
以下结合具体实施例，对本发明做进一步说明。应理解，以下实施例仅用于说明本发明，而非用于限定本发明的范围。
实施例1、一种复方盐酸溶菌酶阴道片的制备方法
1、一种复方盐酸溶菌酶阴道片，由以下原料按质量份制成：
2、制备方法如下：
(1)将蔗糖进行粉碎，过100目筛；将乳糖进行粉碎，过80目筛；将蔗糖、乳糖和硬脂酸镁分别进行灭菌,温度为40～60℃，蔗糖、乳糖控制灭菌压力在20～30Kpa，时间在6h条件；硬脂酸镁控制灭菌压力在35～50Kpa，时间在3～4h条件。备用；
(2)按配比称取盐酸溶菌酶，加纯化水溶解，用2(W/W)盐酸调pH4.0～6.0，用0.22μm滤膜过滤除菌后，将所得溶菌酶料液输送至已灭菌的罐内，室温备用；
(3)按配比称取甘露醇、纯化水各组分混合，继续升温至131～136℃，并保持温度20～30min进行灭菌；输送至已灭菌的罐内存放，降至室温备用；
(4)将步骤(1)中的蔗糖与步骤(2)和步骤(3)混合后，进行搅拌；配制成混合溶液，然后放入冻干箱中；开启冻干机，将冻干搁板降至-40℃～-50℃，待混合溶液温度降至-30℃～-40℃，预冻保温2～3小时；开始抽真空，然后逐步提高温度至-10℃～-15℃，真空干燥15～20小时；再次提高搁板温度至30℃～40℃，保持1～2小时，真空度维持在0～10Pa，直至制品水分在2％(W/W)冻干结束，出箱即得；
(5)将步骤(1)乳糖与步骤(4)冻干粉置入混合机中；进行充分的混合，时间10分钟；再将步骤(1)硬脂酸镁加入，继续混合10分钟；压片，即得。
实施例2、一种复方盐酸溶菌酶阴道片的制备方法
1、一种复方盐酸溶菌酶阴道片，由以下原料按质量份制成：
2、制备方法如下：
(1)将蔗糖进行粉碎，过120目筛；将乳糖进行粉碎，过100目筛；将蔗糖、乳糖和硬脂酸镁分别进行灭菌,温度为40～60℃，蔗糖、乳糖控制灭菌压力在20～30Kpa，时间在6h条件；硬脂酸镁控制灭菌压力在35～50Kpa，时间在3～4h条件。备用；
(2)按配比称取盐酸溶菌酶，加纯化水溶解，用10％(W/W)盐酸调pH4.0～6.0，用0.22μm滤膜过滤除菌后，将所得溶菌酶料液输送至已灭菌的罐内，室温备用；
(3)按配比称取甘露醇、纯化水各组分混合，继续升温至131～136℃，并保持温度20～30min进行灭菌；输送至已灭菌的罐内存放，降至室温备用；
(4)将步骤(1)中的蔗糖与步骤(2)和步骤(3)混合后，进行搅拌；配制成混合溶液，然后放入冻干箱中；开启冻干机，将冻干搁板降至-40℃～-50℃，待混合溶液温度降至-30℃～-40℃，预冻保温2～3小时；开始抽真空，然后逐步提高温度至-10℃～-15℃，真空干燥15～20小时；再次提高搁板温度至30℃～40℃，保持1～2小时，真空度维持在0～10Pa，直至制品水分在5％(W/W)冻干结束，出箱即得；
(5)将步骤(1)中乳糖与步骤(4)冻干粉置入混合机中；进行充分的混合，时间15分钟；再将步骤(1)中硬脂酸镁加入，继续混合15分钟；压片，即得。
实施例3、一种复方盐酸溶菌酶阴道片的制备方法
1、一种复方盐酸溶菌酶阴道片，由以下原料按质量份制成：
2、制备方法如下：
(1)将蔗糖进行粉碎，过110目筛；将乳糖进行粉碎，过90目筛；将蔗糖、乳糖和硬脂酸镁分别进行灭菌,温度为40～60℃，蔗糖、乳糖控制灭菌压力在20～30Kpa，时间在6h条件；硬脂酸镁控制灭菌压力在35～50Kpa，时间在3～4h条件。备用；
(2)按配比称取盐酸溶菌酶，加纯化水溶解，用6％(W/W)盐酸调pH4.0～6.0，用0.22μm滤膜过滤除菌后，将所得溶菌酶料液输送至已灭菌的罐内，室温备用；
(3)按配比称取甘露醇、纯化水各组分混合，继续升温至131～136℃，并保持温度20～30min进行灭菌；输送至已灭菌的罐内存放，降至室温备用；
(4)将步骤(1)中的蔗糖与步骤(2)和步骤(3)混合后，进行搅拌；配制成混合溶液，然后放入冻干箱中；开启冻干机，将冻干搁板降至-40℃～-50℃，待混合溶液温度降至-30℃～-40℃，预冻保温2～3小时；开始抽真空，然后逐步提高温度至-10℃～-15℃，真空干燥15～20小时；再次提高搁板温度至30℃～40℃，保持1～2小时，真空度维持在0～10Pa，直至制品水分在6％(W/W)冻干结束，出箱即得；
(5)将步骤(1)中乳糖与步骤(4)冻干粉置入混合机中；进行充分的混合，时间13分钟；再将步骤(1)中硬脂酸镁加入，继续混合13分钟；压片，即得。

Claims (10)

1.一种复方盐酸溶菌酶阴道片，包括活性成。份和辅料，其特征在于，所述的活性成份是盐酸溶菌酶和蔗糖，其中，在复方盐酸溶菌酶阴道片中的：盐酸溶菌酶重量百分比为2～11％；蔗糖重量百分比为38～72％。
2.如权利要求1所述的复方盐酸溶菌酶阴道片，其特征在于，所述的辅料为制备盐酸溶菌酶阴道片所需的可接受的任何辅料，根据本领域所熟知的，包括冻干粉骨架剂、粘合剂、填充剂、润滑剂和/或其他添加剂。
3.如权利要求2所述的复方盐酸溶菌酶阴道片，其特征在于，所述的冻干粉骨架剂为甘露醇；粘合剂、填充剂均为乳糖；润滑剂为硬脂酸镁；其他添加剂为纯化水。
4.如权利要求1～3任一所述的复方盐酸溶菌酶阴道片，其特征在于，由以下原料按质量份制成：
5.如权利要求4所述的复方盐酸溶菌酶阴道片，其特征在于，由以下原料按质量份制成：
6.如权利要求5所述的复方盐酸溶菌酶阴道片，其特征在于，由以下原料按质量份制成：
或者，
或者，
7.如权利要求4～6任一所述的复方盐酸溶菌酶阴道片的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)将蔗糖进行粉碎，过100～120目筛；将乳糖进行粉碎，过80～100目筛；将蔗糖、乳糖和硬脂酸镁分别在温度为40～60℃进行灭菌：蔗糖、乳糖控制灭菌压力在20～30Kpa，时间在6～7h条件；硬脂酸镁控制灭菌压力在35～50Kpa，时间在3～4h条件，备用；
(2)按配比称取盐酸溶菌酶，加纯化水溶解，用2～10％(W/W)盐酸调pH4.0～6.0，用0.1～0.22μm滤膜过滤除菌后，将所得溶菌酶料液输送至已灭菌的罐内，室温备用；
(3)按配比称取甘露醇、纯化水混合，继续升温至131～136℃，并保持温度20～30min进行灭菌；输送至已灭菌的罐内存放，降至室温备用；
(4)将步骤(1)中的蔗糖与步骤(2)和步骤(3)混合后，进行搅拌；配制成混合溶液，然后放入冻干箱中；开启冻干机，将冻干搁板降至-40℃～-50℃，待混合溶液温度降至-30℃～-40℃，预冻保温2～3小时；抽真空，然后逐步提高温度至-10℃～-15℃，真空干燥15～20小时；再次提高搁板温度至30℃～40℃，保持1～2小时，真空度维持在0～10Pa，直至制品水分在2～6％(W/W)冻干结束，出箱即得；
(5)将步骤(1)乳糖与步骤(4)冻干粉置入混合机中，混合10～15分钟；再将步骤(1)的硬脂酸镁加入，继续混合10～15分钟；压片，即得。
8.如权利要求7所述的复方盐酸溶菌酶阴道片的制备方法，其特征在于，步骤(2)所述的冻干粉水分在2％～5％(W/W)；步骤(3)所述的灭菌是在环氧乙烷灭菌柜中进行。
9.如权利要求7所述的复方盐酸溶菌酶阴道片的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)将蔗糖进行粉碎，过100目筛；将乳糖进行粉碎，过80目筛；将蔗糖、乳糖和硬脂酸镁分别在温度为40～60℃灭菌：蔗糖、乳糖控制灭菌压力在20～30Kpa，时间在6h条件；硬脂酸镁控制灭菌压力在35～50Kpa，时间在3～4h条件，备用；
(2)按配比称取盐酸溶菌酶，加纯化水溶解，用2(W/W)盐酸调pH4.0～6.0，用0.22μm滤膜过滤除菌后，将所得溶菌酶料液输送至已灭菌的罐内，室温备用；
(3)按配比称取甘露醇、纯化水各组分混合，继续升温至131～136℃，并保持温度20～30min进行灭菌；输送至已灭菌的罐内存放，降至室温备用；
(4)将步骤(1)中的蔗糖与步骤(2)和步骤(3)混合后，进行搅拌；配制成混合溶液，然后放入冻干箱中；开启冻干机，将冻干搁板降至-40℃～-50℃，待混合溶液温度降至-30℃～-40℃，预冻保温2～3小时；开始抽真空，然后逐步提高温度至-10℃～-15℃，真空干燥15～20小时；再次提高搁板温度至30℃～40℃，保持1～2小时，真空度维持在0～10Pa，直至制品水分在2～5％(W/W)冻干结束，出箱即得；
(5)将步骤(1)乳糖与步骤(4)冻干粉置入混合机中，混合10分钟；再将硬脂酸镁加入，继续混合10分钟；压片，即得。
10.如权利要求1～6任一所述的复方盐酸溶菌酶阴道片在制备治疗阴道炎的药物中的应用，其中，所述阴道炎包括霉菌性、细菌性或混合性阴道炎。
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Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
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CN1663610A (zh) * 2004-03-01 2005-09-07 孙明杰 溶菌酶新制剂

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
HUP0102164A2 (hu) * 2001-05-23 2003-06-28 József Szabó Hüvelyfertőtlenítő kúp
CN1663610A (zh) * 2004-03-01 2005-09-07 孙明杰 溶菌酶新制剂

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
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肖冰冰等: "蔗糖凝胶治疗细菌性阴道病Ⅱ期临床试验研究", 《北京大学学报( 医学版)》 *

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