CN105748714A - 改善骨微结构的复方中药制剂及制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及药物技术领域,尤其是一种改善骨微结构的中药复方制剂。本发明所述的改善骨微结构的复方中药制剂由下列重量百分比的原料制成:人参11.70%14.12%,黄芪21.18%23.39%,三七17.54%21.18%,陈皮5.85%7.06%,杜仲14.12%17.54%,红花8.77%10.59%,洋金花2.82%3.51%,钻地风4.23%5.85%,鳖甲4.70%5.85%。本制备方法由以下步骤组成:将上述九味,加水冷浸618小时,煎煮三次,每次13小时,同时收集蒸馏液冷藏备用;合并煎液,滤过,50℃下滤液浓缩至相对密度为1.031.04,离心,静置618小时,滤过,将滤液与上述蒸馏液混匀,调节PH值至5.05.8,加水,滤过,灌装,即得。本产品能改善腰椎骨显微结构。
Description
技术领域
本发明涉及药物技术领域,尤其是一种改善骨微结构的中药复方制剂。
技术背景
中国专利申请CN99122173.7公开了一种“治疗骨折骨病的药物”,系由下列用量的原料制成:红花15-45g、洋金花6-12g、陈皮10-30g、三七30-90g、黄芪40-90g、人参20-60g、杜仲30-60g、鳖甲10-20g、钻地风10-18g。本药物经急性毒性试验,长期毒性试验证明,无毒副作用,具有明显的止痛、消肿、促进骨折愈合的作用,称为“骨王”,对治疗各种类型新鲜骨折及陈旧性骨折有效率达96.6%。
中国专利申请CN201510827399.5公开了“一种治疗骨质疏松的中药组合物及其制备方法”,中药组合物原料及重量份为:党参50-60克,人参6-8克,茯苓50-60克,黄芪40-50克,白术50-60克,山药40-50克,制何首乌50-60克,当归50-60克,熟地黄100-120克,川芎20-25克,泽泻25-30克,牡丹皮25-30克,牛膝25-30克,白芍40-50克,杜仲叶60-70克,续断25-30克,阿胶6-9克,红花10-15克,三七6-8克,炙甘草12-15克,黄精24-30克,陈皮5-7克。该中药组合物能够治疗骨质疏松及其引起的多种疾病的病症,效果显著。
中国专利申请CN201510687580.0公开了“一种有效治疗骨质疏松的制剂”,是由以下中药原料制成,桑白皮、龟版、威灵仙、三七、枸杞子、川芎、火麻仁、黄精、巴戟天、鳖甲、淫羊藿、红花、牡丹皮、知母、何首乌、续断、无名异、黄柏、牛膝、白毛草、三白草、刘寄奴、石韦,本发明制剂服用后可以有效增加骨量、改善骨质量、维持骨微结构的完整程度、增加成骨细胞活性、促进钙沉积等作用,并能缓解腰背及四肢骨痛,改善微循环,提高骨密度,促进骨生长,有效扩张微循环,使血流畅通,从而有效达到活血化瘀的作用,加快骨质疏松症愈合。
骨微结构的定义:骨小梁的三维构筑及小梁间的连接程度统称为骨微结构。骨小梁是骨中最重要的结构,骨小梁并非无序排列,而是根据主要受力状态沿主应力方向得到排列,形成最优的受力结果,用最少的材料承受最大的外部载荷。除骨密度外,骨微结构也会影响骨强度,对绝大多数人而言,骨组织的组成材料基本一致,因此,骨微结构成为评价骨质量的重要指标。骨微结构的衰退影响着人类骨骼的健康:①随着年龄的增长,骨量丢失增多,成骨却减少,骨重建处于负平衡状态,骨微结构逐渐发生衰退并影响骨的强度。②骨微结构和多种骨科疾病相关:如1997年国际公认的定义“骨质疏松症是一种以低骨量和骨组织微结构衰败凋萎为特征的进展性全身性骨骼病;骨小梁微结构的衰败,将使三维结构取向遭到严重破坏,连续完整性丧失,结构强度和稳定性受损,最终导致骨脆性增加而易于发生骨折。所以,改善骨微结构是本领域中亟待解决的技术问题。
发明内容
本发明目的在于克服现有技术的缺陷,提供一种能有效改善骨微结构、对广大骨微结构衰败人群的骨骼健康做出积极贡献的改善骨微结构的复方中药制剂。
本发明的另一目的在于提供这种复方中药制剂的制备方法。
本发明所述的改善骨微结构的复方中药制剂由下列重量百分比的原料制成:人参11.70%-14.12%,黄芪21.18%-23.39%,三七17.54%-21.18%,陈皮5.85%-7.06%,杜仲14.12%-17.54%,红花8.77%-10.59%,洋金花2.82%-3.51%,钻地风4.23%-5.85%,鳖甲4.70%-5.85%。
本发明所述的改善骨微结构的复方中药制剂的制备方法由以下步骤组成:将上述九味,加水冷浸6-18小时,煎煮三次,每次1-3小时,同时收集蒸馏液冷藏备用;合并煎液,滤过,50℃下滤液浓缩至相对密度为1.03-1.04,离心,静置6-18小时,滤过,将滤液与上述蒸馏液混匀,调节PH值至5.0-5.8,加水,滤过,灌装,即得。
本发明的药效学及毒性试验:
一、改善骨微结构的动物实验:
实验一:本研究对本产品(实施例1,下同)治疗兔骨质疏松性骨折愈合处不同时相点的骨微结构改善、促进成骨细胞增殖,并增强胞内ALP活性进行研究。
1.骨微结构决定着骨组织的质量,当骨小梁变薄、变细、变稀疏,提示骨微结构退化。MicroCT能够在不破坏样品的情况下,对骨骼、牙齿、活体小动物和各种材料器件进行高分辨率(<10μm)X线成像,获取样品内部详尽的三维结构信息,从而显示各部分的三维图像,分辨率远远高于临床CT。利用专业图像处理软件,用户可以观察任意角度的断层图像/三维图像,定义任意数量和三维形状的ROI(感兴趣区),分割或合并多个的三维图像,定量计算样品内部选定区域的体积、面积、孔隙率、连接密度、结构模型指数、各向异性程度等等。根据已知密度的标准品(体模),还可以得到样品的密度值(如BMD),分析物质的种类、组成、强度和完整性等参数。本研究将骨折处桡骨进行骨形态学检测(HE染色)(实验方案:于各时相点取材并将左侧桡骨骨折处上半段及第三腰椎固定于4%中性甲醛中,之后经脱水、透明、浸蜡、切片等步骤后HE染色普通光镜下观察)和MicroCT检测(实验方案:空气栓塞法处死动物,迅速取出右侧桡骨,剔净软组织,用生理盐水浸泡过的纱布包裹后迅速置于-20℃冰箱中保存。测量前逐级解冻并在室温下自然复温,分别将每组的6个标本放入Micro-CT样品杯中,在相同条件下(层距:35μm;平面分辨率2048X2048;电压:55kV;电流:72μA;连续扫描约400层)扫描并行三维重建);发现本产品对兔骨质疏松性骨折愈合处骨微结构有明显的改善作用,并能改善腰椎骨微结构。
实验二:本产品对骨微结构的影响
于药物干预不同时相点对不同组别兔第一腰椎行MicroCT检测并选择感兴趣区行三维重建,分析各组兔第一腰椎的Tb.N、Tb.Th、Tb.Sp、BV/TV和BS/BV等骨微结构参数,由表1可知:
药物干预60d、120d时,模型组第一腰椎的Tb.N、Tb.Th、BV/TV均明显低于Sham组(P<0.01),Tb.Sp、BS/BV均明显高于Sham组(P<0.01)。
药物干预60d时,与模型组比较:(OVX+300mg/kg本产品)组第一腰椎Tb.Sp明显降低(P<0.05),而Tb.N、Tb.Th、BV/TV、BS/BV均无明显变化(P>0.05);(OVX+600mg/kg本产品)组第一腰椎Tb.N(P<0.01)、Tb.Th(P<0.05)、BV/TV(P<0.05)明显升高,而Tb.Sp、BS/BV明显降低(P<0.05)。(OVX+600mg/kg本产品)组与(OVX+300mg/kg本产品)组比较,上述指标均无明显差异(P>0.05)。
药物干预120d时,(OVX+600mg/kg本产品)组和(OVX+300mg/kg本产品)组第一腰椎的Tb.N、Tb.Th、BV/TV均明显高于模型组(P<0.01),Tb.Sp、BS/BV均明显低于模型组(P<0.01),且上述指标与Sham组比较均无明显差异(P>0.05)。(OVX+600mg/kg本产品)组与(OVX+300mg/kg本产品)组比较,上述指标均无明显差异(P>0.05)。
表1本产品干预对骨质疏松兔第一腰椎骨微结构参数的影响
注:与同时相点Sham组比较,1)P<0.05,2)P<0.01;与同时相点模型组比较,3)P<0.05,4)P<0.01。
OP(是一种以低骨量和骨组织微结构破坏为特征的全身性骨代谢疾病),它的特征是骨组织显微结构退化。骨小梁的数量、密度和空间构象等显微结构影响着骨的生物力学特性,因此骨显微结构的改变可以直观地反应OP的情况。骨组织病理学检测是反映骨显微结构变化的最直接的依据,但因不能用于活体检测而受到限制。MicroCT是一种体外无损伤测量技术,适用于药物治疗后骨小梁结构的三维分析。本研究同时采用组织病理学和MicroCT检测实验动物,发现去势150d时OVX组骨小梁变细、中断、游离端增多,数量减少,间隙增宽,空间结构破坏增加;本产品干预能明显改善上述骨显微结构指标,提示本产品对改善OP兔模型显微结构具有一定的疗效。此外,本研究中组织病理学和MicroCT检测结果可相互印证,呈现出较高的一致性,提示MicroCT可用于活体动物的骨微结构检测。
综上所述,本产品能改善腰椎骨显微结构。
二、安全性研究
1.急性毒性试验
用三倍临床浓度的本产品给小鼠灌胃,剂量达50ml/kg(相当于生药25.5g/kg),小鼠半数致死量(LD50)不能测出。最大耐受量试验结果表明,小鼠日服量达150ml/kg(相当于生药76.5g/kg),按体表面积换算,为临床成人日服用量的65.5倍,按体重换算则为成人日服量的540倍,仍未见到实验动物死亡现象,提示本产品的最大给药量MTD>150ml/kg(三倍临床浓度)。故临床使用本产品的剂量是安全的。
2.长期毒性试验
大鼠连续灌胃本产品,其中高剂量组的用药为临床成人药用量的16倍(按体表面积换算),各组实验动物的血液学、血液生化学、肝、肾等各重要脏器的脏器系数和病理组织学检查,均未发现异常,与对照组比较均无明显差异(P>0.05)。表明临床本产品的药用量是安全的。
附图说明
图1为药物干预120d时本产品低剂量组桡骨骨形态学图(HE染色40x)。
图2为药物干预120d时本产品高剂量组桡骨骨形态学图(HE染色40x)。
图3为药物干预120d时本产品低剂量组第三腰椎骨形态学图(HE染色40x)。
图4为药物干预120d时本产品高剂量组第三腰椎骨形态学图(HE染色40x)。
图5为药物干预120d时本产品低剂量组桡骨MicroCT三维重建图。
图6为药物干预120d时本产品高剂量组桡骨MicroCT三维重建图。
图7为药物干预120d时本产品低剂量组腰椎MicroCT三维重建图。
图8为药物干预120d时本产品高剂量组腰椎MicroCT三维重建图。
图9为Sham组干预60d时第一腰椎MicroCT三维重建图。
图10为模型组干预60d时第一腰椎MicroCT三维重建图。
图11为本产品300组干预60d时第一腰椎MicroCT三维重建图。
图12为本产品600组干预60d时第一腰椎MicroCT三维重建图。
图13为Sham组干预120d时第一腰椎MicroCT三维重建图。
图14为模型组干预120d时第一腰椎MicroCT三维重建图。
图15为本产品300组干预120d时第一腰椎MicroCT三维重建图。
图16为本产品600组干预120d时第一腰椎MicroCT三维重建图。
由图9-16可知:Sham组骨小梁致密且排列整体,而模型组骨微结构退化,骨小梁稀疏且排列紊乱,本产品干预后可逐步修复去势造成的退化的骨微结构,干预120d时接近正常水平,且(OVX+600mg/kg本产品)组修复效果稍好于(OVX+300mg/kg本产品)。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步的说明,但不限于实施例。
实施例1:
取重量百分比的人参11.70%、黄芪23.39%、三七17.54%、陈皮5.85%、杜仲17.54%、红花8.77%、洋金花3.51%、钻地风5.85%、鳖甲5.85%。
上述九味,加水冷浸12小时,煎煮三次,每次1小时,同时收集蒸馏液冷藏备用。合并煎液,滤过,滤液浓缩至相对密度为1.03-1.04(50℃),离心,静置12小时,滤过,将滤液与上述蒸馏液混匀,调节PH值至5.0-5.8,加水,滤过,灌装,即得。
病例:
1、一位来自美国马里兰州的StevenHathaway,男,52岁,患有一种叫Osteopenia的病,特征为骨微结构破坏。他上阁楼去拿冬天穿的大衣,下楼梯时,因大衣遮住了眼睛,被鞋子绊倒,在自身重力的牵引下摔下楼梯导致右脚受伤,之后右脚踝很快开始肿胀。第二天早晨,他去照了X片,医生诊断为:右脚踝韧带撕裂、腓骨骨折,医生为他打了石膏,石膏限制了他的活动很不舒服,Hathaway被告知要上六个星期的石膏。回家后Hathaway开始服用本产品。仅仅2个星期后,他感觉右脚踝的肿胀及疼痛已基本消失了。于是,他坚持让医生再照X片(这样就必须去掉固定石膏),医生不同意最后他们达成一致意见,三个星期后再照X片。三个星期后医生对X片的诊断描述是:“一般骨折愈合要六个星期,而你只要一半的时间,我感到非常惊讶!”连连称赞:真棒!
2、一位来自美国萨克拉门托的患者,女,45岁,从2008年开始常感全身关节疼痛,下肢酸胀、麻木、发软无力,难以久站久行,诊断为严重骨微结构破坏。于2009年8月开始服用本产品,服用半月疼痛就有所减轻,腰背酸痛缓解,连续服用3个月,疼痛完全消失,又服用8个月后,能正常行走,能下蹲,上下楼梯,功能完全恢复。患者感慨地说:我吃了不少药,不管用,服用了这产品才真正解决了我的难题,你们为患者做了好事,我们全家非常感谢你们。
3、一位来自中国浙江的患者陈某,男,69岁,因患颅内良性肿瘤,经手术治疗后,右侧上下肢偏瘫,行走需人扶,生活不能自理,长期卧床。近半年常感腰背疼痛,并伴有关节酸痛、四肢酸胀,时有麻感,双下肢软而无力,对腰椎、髋部等扫描测定反应骨量减少,骨微结构破坏。服用本品二个月后感腰背酸痛缓解,服第三个月后,腰背疼痛明显减轻,服用第五个月后,关节及下肢疼痛已基本消失,下肢开始有力。服用6个月后,已恢复正常。
Claims (3)
1.一种改善骨微结构的复方中药制剂,其特征在于由下列重量百分比的原料制成:人参11.70%-14.12%,黄芪21.18%-23.39%,三七17.54%-21.18%,陈皮5.85%-7.06%,杜仲14.12%-17.54%,红花8.77%-10.59%,洋金花2.82%-3.51%,钻地风4.23%-5.85%,鳖甲4.70%-5.85%。
2.如权利要求1所述的改善骨微结构的复方中药制剂,其特征在于由下列重量百分比的原料制成:人参11.70%、黄芪23.39%、三七17.54%、陈皮5.85%、杜仲17.54%、红花8.77%、洋金花3.51%、钻地风5.85%、鳖甲5.85%。
3.如权利要求1所述的改善骨微结构的复方中药制剂的制备方法,其特征在于由以下步骤组成:将上述九味,加水冷浸6-18小时,煎煮三次,每次1-3小时,同时收集蒸馏液冷藏备用;合并煎液,滤过,50℃下滤液浓缩至相对密度为1.03-1.04,离心,静置6-18小时,滤过,将滤液与上述蒸馏液混匀,调节PH值至5.0-5.8,加水,滤过,灌装,即得。
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