CN105748494A - 虎杖苷在制备防治百草枯所致肺纤维化药物中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了虎杖苷的医药新用途，即虎杖苷防治百草枯所致肺纤维化药物中的应用。相关动物实验证实，从虎杖中提取纯化的虎杖苷对百草枯所致肺纤维化有良好的改善和防治作用。以虎杖苷为主要成分制得的胶囊剂、片剂和颗粒剂等常见药物剂型都可用来防治百草枯所致肺纤维化。本发明疗效确切、毒副作用小、价格低廉。

Description

虎杖苷在制备防治百草枯所致肺纤维化药物中的应用

技术领域

本发明涉及一种治疗方法，尤其涉及虎杖苷在制备防治百草枯所致肺纤维化药物中的应用。

背景技术

百草枯(PQ)，化学名称是1-1-二甲基-4-4-联吡啶阳离子盐，是一种快速灭生性除草剂，其对人畜具有很强毒性，且无特效解毒药。百草枯可经消化道、皮肤和呼吸道吸收，临床致死病例主要为自服或误服，起病凶险，病情变化迅速，口服中毒死亡率高达50-70％，成人致死量为20％水溶液5-15ml(20-40mg/kg)左右，它是目前致死性最高的农药中毒事件。临床常见百草枯中毒多为自服或误服，经消化道吸收。完整皮肤能够有效阻止百草枯的吸收，长时间接触、阴囊或会阴部被污染、破损的皮肤大量接触，仍有可能造成全身毒性。经口中毒者有口腔烧灼感，口腔、食管黏膜糜烂溃疡、恶心、呕吐、腹痛、腹泻，甚至呕血、便血，严重者并发胃穿孔、胰腺炎等；部分病人出现肝脏肿大、黄疸和肝功能异常，甚至肝功能衰竭。可有头晕、头痛，少数患者发生幻觉、恐惧、抽搐、昏迷等中枢神经系统症状。肾损伤最常见，表现为血尿、蛋白尿、少尿，血BUN、Cr升高，严重者发生急性肾功能衰竭。

肺损伤是百草枯中毒最为突出也最为严重的症状，百草枯急性中毒后进入人体可使肺、肾、肝、脑等多器官出现损伤，但其中肺是主要的靶器官，在肺组织中的浓度最高，是血浆浓度的10-90倍，早期表现为急性肺损伤(ALI)或急性呼吸窘迫综合征(ARDS)，后期则发展为肺泡内和肺间质纤维化，成为患者死亡的主要原因。百草枯中毒目前尚无有效的治疗手段，临床表现为咳嗽、胸闷、气短、发绀、呼吸困难，查体可发现呼吸音减低，两肺可闻及干湿啰音。大量口服者，24小时内出现肺水肿、肺出血，常在数天内因ARDS死亡；非大量摄入者呈亚急性经过，多于1周左右出现胸闷、憋气，2～3周呼吸困难达高峰，患者常死于呼吸衰竭。少数患者发生气胸、纵隔气肿、中毒性心肌炎、心包出血等并发症。

虎杖苷(PD)是从蓼科蓼属虎杖的干燥根茎中提取的一种单体，也可称为白藜芦醇苷。PD在植物中分布广、含量高、具有较强的生物活性。现代药理学研究表明，PD对心肌细胞、血管平滑肌细胞、抗血小板聚集、改善微循环等有显著作用，此外还能减轻多种因素造成的组织器官损伤，具有保护肝细胞，降血脂及抗脂质过氧化等作用。虎杖苷对肺损伤的保护作用也有相关报道，研究证实PD可有效降低低压低氧大鼠的肺动脉平均压(mPAP)，减轻其右心室肥厚，提示PD对大鼠的肺动脉高压有明显的预防作用；PD也可明显改善低压低氧性肺动脉高压大鼠的肺小动脉结构重建，并可上调低压低氧性肺动脉高压大鼠血清、肺组织中NO含量和增强NOS活性，这可能是PD降低肺动脉高压、改善肺血管重建的机制之一。

目前临床尚无治疗百草枯急性中毒的特效解毒药物，仍在摸索之中。临床应用的药物主要是防治靶器官肺损伤、纤维化为主，主要包括糖皮质激素、免疫抑制剂、抗氧化剂等，但临床疗效均不确切。因此，深入研究急性百草枯中毒机制并找寻有效治疗方法刻不容缓。虎杖苷具有多种生物活性和广泛的药理作用，为用于治疗百草枯所致肺损伤、纤维化及多器官功能修复提供了良好前景，本发明是在以往研究基础上，探讨虎杖苷治疗百草枯急性中毒的疗效与可行性，为百草枯中毒寻找新的治疗策略和理论依据。

发明内容

本发明提供了一种防治百草枯中毒的化合物及其应用，本发明为中药药材虎杖提取而来，传统的虎杖具有利湿退黄、清热解毒、散瘀止痛、化痰止咳等作用。现代研究：降压，减慢心率，加强心肌收缩力，保护心脏、降血脂；抑制血小板聚集，抗休克，改善微循环；抗菌、抗病毒、抗癌抗氧化；平喘，镇咳、镇静、镇痛，止血、抗炎。而我们研究发现虎杖苷对百草枯中毒所致肺纤维化有显著的防治作用，且能够增强人体抵抗力，提高脏器自我修复能力。我们利用虎杖苷为主可制备成胶囊、片剂和颗粒剂等口服制剂，该制剂疗程短、见效快，安全可靠，无任何毒副作用，成本低廉，能够达到标本兼治的目的，值得临床广泛推广应用。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明做进一步阐述。

实施例1：

①.染毒模型的制备将实验大鼠60只分组，随机分为5组，即正常对照组(NS组)、模型组(PQ组)、虎杖苷治疗组(PD的大、中、小剂量组分别为20、10和5mg.kg^-1)，每组12只，分别饲养。灌胃染毒造模：PQ以50mg/kg计算，用NS将20％PQ稀释到1ml(新鲜配制)给大鼠一次性灌胃染毒。染毒前，各组大鼠禁食、水10h。

②.PD干预PQ所致大鼠肺损伤的治疗在PQ染毒后1h(此时绝大多数急性百草枯中毒组实验动物已出现PQ中毒反应)，PD组大鼠以上述剂量灌胃进行干预治疗，NS组和PQ组以等量生理盐水灌胃，实验期间，每天1次，连续14天给予干预治疗。观察其生存状况和肺组织大体情况和病理切片、电镜超微结构变化。

③.肺损伤相关因子检测观察PQ大鼠染毒及给予PD治疗后相关因子的变化，如血清中MDA含量、GPX活性、SOD含量、CAT活性、MPO活性等的变化；大鼠肺组织NF-kBp65、肺脏系数及羟脯氨酸(Hyp)含量的变化。

我们通过将PD灌胃给予百草枯中毒肺损伤大鼠模型，观察了14天内各组大鼠的各项指标的变化。

(1)大鼠生存和存活状况百草枯组中，百草枯灌胃24h-48h后大鼠逐渐出现活动进食减少、呼吸次数增快，存活最短时间是8天，存活最长时间是12天，大鼠的平均存活天数是9.6天。PD防治组中，观察的14天中大鼠均存活，但在灌胃后的前3天内活动进食减少、呼吸次数较快，但7天后上述症状有所缓解。

(2)肺湿干比百草枯组灌胃后的第3、7天肺干湿比值均明显高于对照组，在第7天尤为显著(P≤0.01)；PD防治组大鼠在灌胃后3天内肺干湿比与百草枯组相比无显著差异(P＞0.05)，在灌胃后7天达峰值但明显低于百草枯组(P≤0.05)，并开始逐渐恢复(见表3)。

表3各组大鼠的肺湿干比测定

注：与正常对照组比较，*P≤0.01，^ΔP＞0.05；与百草枯组比较，^▲P≤0.05，^▲▲P＞0.05

(3)血浆中炎症介质IL-1β、TNF-α的含量变化

与正常对照组相比，百草枯组和PD防治组中血浆IL-1β和TNF-α的含量均显著上升(P≤0.01)。但在PD灌胃治疗组中，灌胃后7天血浆IL-1β和TNF-α的含量显著低于百草枯组(P≤0.01)，到灌胃后14天炎症介质的含量已明显回落(见表4)。

表4各组大鼠血浆中IL-1β、TNF-α含量变化(n＝6，ng/L)

注：与正常对照组比较，*P≤0.01，^ΔP＞0.05；与百草枯组比较，^▲P≤0.01

(4)肺组织NF-κBp65的表达变化

与正常对照组相比，百草枯组和PD灌胃治疗组中肺组织NF-κBp65的表达均明显升高，均在灌胃后3天达峰值(P≤0.01)。但PD灌胃治疗组中，在灌胃后3天NF-κBp65的表达已显著低于百草枯组(P≤0.01)，灌胃后5天NF-κBp65的表达明显回落(见表5)。

表5各组肺组织NF-κBp65灰度值测定(n＝5)

注：与正常对照组比较，*P≤0.01，**P≤0.05，^ΔP＞0.05；与百草枯组比较，^▲P≤0.01，^▲▲P≤0.05

(5)血浆中MDA、SOD和GSH-P_X的水平变化

与正常对照组比较，百草枯组和PD灌胃治疗组中灌胃7天内大鼠血浆中MDA水平显著上升(P≤0.01)，SOD和GSH-P_X水平显著下降(P≤0.01)；但与百草枯组相比，PD灌胃治疗组中在灌胃7天后，MDA水平开始下降(P≤0.05)，SOD和GSH-P_X水平明显回升(P≤0.01；见表6)。

表6各组大鼠血浆中MDA、SOD、GSH-P_X水平变化(n＝6)

注：与正常对照组比较，*P≤0.01，**P≤0.05，^ΔP＞0.05；与百草枯组比较，^▲P≤0.01，^▲▲P≤0.05

根据我们目前研究显示：PD灌胃使染毒大鼠14天内大鼠均存活，肺湿干比明显下降，血浆中早期炎症介质IL-1β和TNF-α含量显著降低；MDA水平显著降低，SOD、GSH-P_X的消耗减少，尤其在植入7天后表现尤为突出，表明PD灌胃具有减轻损伤肺脏水肿渗出、抑制炎症介质释放、降低脂质过氧化程度、缓解炎症反应和减轻细胞损伤的能力，显示其对于百草枯中毒肺损伤具有一定保护潜力。同时本研究观察到，从PD灌胃到发挥作用需要一定时间，因此在植入后3d内的早期治疗优势并不十分显著，但已显示缓解炎症反应和脂质过氧化的趋势，并能在植入后7d保持较持续的保护作用。以上结果提示，PD灌胃对于百草枯中毒肺损伤的中后期治疗可能更为有效。PD灌胃为百草枯中毒临床救治提供了一条新途径。

临床资料：

典型病例举例：

1、刘某，女，32岁，陕西渭南人。患者急诊转院，诊断为百草枯中毒，患者自诉，因与丈夫吵架后口服百草枯，量约7毫升，半小时后被家人发现送当地医院给予洗胃、催吐等对症治疗，并隔天急诊转入我科，根据血尿中百草枯浓度，行血液灌流一次，并口服本发明胶囊治疗，服用3天后，症状好转，复查血尿中百草枯浓度已降至安全范围，观察并继续治疗3天后出院。

2、杜某，男，16岁，陕西宝鸡人。患者因受老师批评服百草枯10ml，被同学和老师发现急送当地医院行洗胃等对症治疗，并连夜送至我院，自诉食道烧灼感明显，确诊为百草枯中毒，检查发现血尿百草枯浓度较高，伴有肝肾功能减退，通过血液灌流等对症治疗外，服用本发明胶囊治疗，服药5天后，各项检查明显好转，继续服用和观察4天后，症状明显好转出院。

3、李某，女，24岁，陕西西安人。患者感情不顺口服百草枯一口(量不详)，2小时后家人陪急诊，确诊为百草枯中毒。行洗胃，大剂量激素治疗，检查示肺、肝、胃有明显受损征象。常规血液灌流并服用本发明胶囊治疗7天，不适症状明显好转，各项检查显示明显好转，继续治疗3天后，出院，随访无任何后遗症出现。

Claims (2)

1.一种可用来防治百草枯所致肺纤维化的化合物，其成分为虎杖苷。

2.根据权利要求1所述的应用，虎杖苷作为主要成分可被制成胶囊剂、片剂、颗粒剂、泡腾片和口服液制剂。