CN105745226A - 包含抗-磷脂酶d4抗体的药物 - Google Patents

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Abstract

本申请提供药物包含与磷脂酶D4(PLD4)结合的抗体以及使用所述药物检测及抑制活化的B细胞的方法。本申请还针对来自活性?阻遏功能的自身免疫疾病及变应病的治疗。为了解决这些问题，本申请提供与磷脂酶D4(PLD4)蛋白的细胞外结构域结合的单克隆抗体，或其含有抗原?结合区的片段作为活性成分。

Description

包含抗-磷脂酶D4抗体的药物
【技术领域】
本发明涉及与磷脂酶D4结合的抗体的使用。在下文中，“磷脂酶D”可缩写为PLD和“磷脂酶D4”等可缩写为PLD4等。
【背景技术】
PLD是催化通过水解磷脂酰胆碱产生磷脂酸和胆碱的反应，和导致各种细胞内信号传导的酶。已相信产生的磷脂酸发挥脂质信号分子的功能。
PLD1和PLD2已知为2种类型的哺乳动物PLD，其之前已知道，及在其N-端区含有磷脂酰肌醇酯-结合Phox同源性结构域(PX结构域)和磷脂酰肌醇酯-结合普列克底物蛋白同源性结构域(PH结构域)。2个结构域涉及PLD的膜定位。
PLD1和PLD2还含有2His-x-Lys-x-x-x-x-Asp序列(HKD基序)。HKD基序是对于PLD活性必要的结构域。
由PLD1和PLD2产生的磷脂酸已被提示涉及细胞骨架重建，胞吐，吞噬，癌化，细胞粘接，趋化性等，及主要作用于神经系统，免疫系统等。
人Hu-K4和小鼠SAM9，其现在被官方地命名为PLD3，缺乏PX和PH结构域，及不显示PLD活性，尽管具有2HKD基序。尽管还有3种PLD家族成员，PLD4，PLD5和PLD6，关于这些非-典型PLD知道很少。
作为在小脑发育转录组数据库(CDT-DB)中搜索小鼠小脑发育中的基因表达模式的结果，鉴定了发育期间控制的转录产物，PLD4(见非专利文献1)。PLD4的基本特征未被报道。有或无糖基化的PLD4的酶促活性需要测定。
PLD4具有SEQ ID NO:1中显示的506个氨基酸序列，及由SEQID NO:44的cDNA碱基序列编码(非专利文献1和2)。PLD4蛋白具有由2个C-端区保守的HKD基序(His-x-Lys-x-x-x-x-Asp氨基酸序列,x表示其他氨基酸)及推定的磷酸化位点(Thr 472)构成的2个暂定PDE区(磷酸二酯酶基序)。PLD4蛋白的结构被估计为II型跨膜蛋白。此外，PLD4不具有PX和PH结构域，在典型PLD家族中的PLD1和PLD2在N-端区具有它们。
另一方面，PLD4属于PLD家族，因为具有2个HKD基序，但缺乏PX结构域和PH结构域，及代之以具有推定的跨膜结构域(非专利文献3)。
已在优先位于1周龄小鼠的白质区包括胼胝体及小脑白质周围的小细胞群集中发现低至中等水平的PLD4mRNA表达。表达这些PLD4mRNA的细胞已被鉴定为Iba1-阳性小胶质细胞(非专利文献3)。但是，小鼠小脑中的PLD4-阳性细胞在10日龄小鼠中是分散的。提示在小鼠小脑中在早期出生后发育期间PLD4表达暂时受局限。
小鼠中的髓磷脂形成在出生之后1周开始于胼胝体及小脑白质。此时，PLD4在存在于白质中的变形虫样(活化的状态)小胶质细胞中高度表达，由此也已相信，有此时在白质中的表达PLD4的细胞涉及髓磷脂形成的可能性。尤其是，也已揭示，PLD4在食物泡中蓄积，及已揭示，有PLD4涉及吞噬的可能性。在处于活化的状态的变形虫样小胶质细胞中，各种细胞因子和生长因子分泌及同时吞噬活化。其已相信，在发育时期中的小鼠的脑白质中，剩余少突胶质细胞(中枢神经系统神经胶质细胞,其通过围绕轴突形成髓磷脂)经历凋亡。有少突胶质细胞被分解及在变形虫样小胶质细胞中被移出而分泌信号分子和由此调整白质中的髓磷脂-形成环境的可能性。已提示，PLD4涉及这些过程包括髓磷脂形成。
小鼠PLD4mRNA的表达也在非-神经元组织中观察到，和主要分布在脾脏中。在脾红髓的边缘区域周围检测到PLD4蛋白的强表达，及自亚细胞膜级分收集的脾PLD4蛋白是高度N-糖基化的。当PLD4在异源细胞系统中表达时，PLD4定位于内质网和高尔基体中。异源性地表达的PLD4未显示PLD酶活性(非-专利文献3)。
自在时空地受局限的PLD4的表达模式，已提示PLD4可在早期出生后脑发育期间在小胶质细胞和脾边缘区域细胞之中，在常见的功能中起到作用。
另一方面，本发明人发现，PLD4在静止时期的pDC(类浆细胞树状细胞)(静止pDC)中特别高度表达(专利文献1)。本发明人还报道，PLD4-特异性抗体可用于阻遏pDC活性。
而且，PLD4已在日本被报道为系统性硬化的新感受性基因之一(非-专利文献4)。但是，作为欧洲的相同的分析的结果，未发现与PLD4的显著关联，及未获得显示PLD4和自身免疫疾病诸如系统性硬化之间的关系的强结果。
免疫机理被粗略分类为2组。一组是“天然免疫(先天性免疫)”，其检测外源物质诸如病原体及实施初始攻击，及另一组是通过信息交换的“获得性免疫”，其为源于外源物质的抗原肽等的呈递。嗜中性粒细胞，巨噬细胞，树突细胞(DC)，NK(自然杀伤)细胞等主要涉及“天然免疫”，及传递了由以上树突细胞等呈递的抗原肽等的信息的T细胞和B细胞涉及“获得性免疫”。通过抗原肽的信息的传递活化的T细胞能如细胞-介导的免疫以直接方式特异性识别及攻击病原体，及以与以上相同的方式活化的B细胞能通过产生抗体以间接方式特异性识别和攻击病原体(激素免疫)。
在“天然免疫”中，普遍地存在于病原体中的病原体-关联的分子模式(PAMP)(LPS,CpG DNA,脂蛋白,RNA等)通过Toll-样受体(TLR)识别，及炎性细胞因子的分泌经NF-kB被促进，或干扰素(IFN)的分泌经IRF(干扰素调控因子)被促进。TLR由亚细胞定位位点粗略被分类为2组：在细胞表面表达的组和在内体和内质网(ER)中表达的组。在pDC中，IRF7经在内体和内质网定位的中TLR7和TLR9被活化而诱导IFN-α产生。为何这些TLR未在细胞表面表达，但在细胞内表达的原因已提示是为降低自身免疫疾病初现的风险。TLR7和TLR9分别识别单链RNA和DNA作为配体。不仅外源病原性细菌、而且宿主保持这些核酸，由此其已提示识别核酸及活化免疫细胞的受体总是诱导自身免疫疾病。
另一方面，在“获得性免疫”中显示重要作用的B细胞(B淋巴细胞)是在其表面表达免疫球蛋白Ig受体的淋巴细胞。B细胞在骨髓中由造血干细胞产生，及分化为前-B细胞和未成熟的B细胞，然后成熟为幼稚B细胞(成熟,未接触抗原的B细胞)。幼稚B细胞由不仅通过以上T细胞刺激，而且直接抗原刺激活化，及还通过分化和增殖成为抗体-产生细胞而产生及分泌抗体诸如IgM，IgD，IgA，IgE，IgG(包括亚类诸如IgG1,IgG2,IgG2b,IgG3等)。已知道，除了识别特定外源抗原的B细胞受体(BCR)之外，以上TLR在B细胞中表达。例如，已之前知道，已知导致B细胞的增殖和抗体产生的LPS是TLR4的配体，及以上TLR7和TLR9也在B细胞中表达。该B细胞已被提示具有诱导不仅以上自身免疫疾病，而且过敏性疾病(由于其抗体-产生能力的过反应)的可能性。
IgG，免疫球蛋白G是由4个肽链，即2个相同重链和2个相同轻链组成的抗体同种型。IgG由B细胞产生，及对于适应性免疫起到关键作用。不产生IgG的幼稚B细胞分化为成浆细胞，及最终分化为浆细胞。成浆细胞和浆细胞可产生大量的抗体。常规地，骨髓样树突细胞(DC)已显示通过用IL-12和IL-6和/或膜分子诸如BAFF/APRIL刺激而引发B细胞生长和分化(非-专利文献5,6和7)。此外，类浆细胞DC(pDC)诱导幼稚B细胞成熟和分化为抗体-分泌成浆细胞和浆细胞产生IFN-α和IL-6(非-专利文献8)。IgG的可变区捕获各种病原体诸如病毒，细菌和真菌，导致身体免于该感染的保护。
SLE被认为是典型免疫复合物-介导的自身免疫疾病。免疫复合物(IC)在循环中或原位形成，作为产生的针对核酸和它们的关联的蛋白，诸如dsDNA，核糖核蛋白和组蛋白的自身抗体的结果。该IC导致具有疾病-特征性临床症状的发炎诸如肾炎，关节炎，皮肤疹，及血管炎。来自SLE患者的血通过幼稚B细胞及增加的记忆B细胞，成浆细胞和浆细胞的减少表征(非-专利文献9,10和11)。因此，分化为浆细胞的阻遏和通过自身-反应性抗体-分泌成浆细胞的操作的抗体产生会导致治愈自身免疫疾病的有前途的策略。
在PBMC中，有各种B细胞子集，诸如幼稚B细胞，记忆B细胞，及成浆细胞。PBMC中的多数B细胞子集是幼稚B细胞。幼稚B细胞是未被外源抗原暴露的B细胞。记忆B细胞是由原发感染形成、且通过分化为成浆细胞而在快速抗体-介导的免疫应答中关键的B细胞。成浆细胞是分泌大量的抗体及由CD19+CD27+IgD-CD38+标记的B细胞。
一旦被外源抗原暴露，幼稚B细胞成为活化的B细胞。活化的B细胞还分化为记忆B细胞，及/或也分化为分泌抗体的成浆细胞。此变化被称为“成熟”。
B细胞成熟经多期发生。起初，抗原-独立期诱导可与唯一抗原结合的成熟B细胞。此成熟阶段发生在活体的骨髓和脾脏中。B细胞成熟的抗原-依赖性期在B细胞由抗原结合及共刺激活化后发生。这些信号促进B细胞成熟为记忆B细胞或抗体-分泌成浆细胞。B细胞成熟的抗原-依赖性期涉及活化的B细胞增殖，抗体亲和性成熟，及抗体类切换。那些成熟发生在二级淋巴样组织的生发中心。
已报道，体外实验条件，pDC通过释放IFN-α和IL-6诱导活化的B细胞成熟为Ig-分泌成浆细胞。CpG2216活化pDC而诱导IFN-α产生和B细胞而起始成熟。来自pDC的IFN-α还在IL-6的存在下支持活化的B细胞成熟为成浆细胞。
【引用文献列表】
【专利文献】
[PTL 1]PCT/JP2013/052781
【非专利文献】
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[NPL 10]Arce et al.,2001,JI,167,2361-2369
[NPL 11]Wei et al.,2007,JI,178,6624-6633
【发明内容】
【发明要解决的技术课题】
本发明要解决的技术课题是使用与PLD4结合的抗体调控活化的B细胞及改善由此导致的疾病的症状。
【解决课题的技术方案】
通过对PLD4的研究，本发明人确证，除了之前已报道的处于静止期的pDC细胞之外，PLD4表达也在活化的B细胞中被诱导。本发明人因此检查了PLD4抗体对活化的B细胞的影响。产生及纯化抗-PLD4抗体的方法由专利文献1的方法实施。
即，本发明涉及使用以下描述的抗-PLD4抗体的二次用途。
(1)抑制活化的B细胞的药物组合物，其中所述药物组合物包含与磷脂酶D4(PLD4)蛋白结合的单克隆抗体，或其含有抗原-结合区的片段作为活性成分。
(2)根据以上(1)的药物组合物，其中所述单克隆抗体或其含有抗原-结合区的片段在重链的可变区中具有序列SYWMH(SEQ IDNO:2)作为CDR1，序列DIYPGSDSTNYNEKFKS(SEQ ID NO:3)作为CDR2和序列GGWLDAMDY(SEQ ID NO:4)作为CDR3。
(3)根据以上(1)的药物组合物，其中所述单克隆抗体或其含有抗原-结合区的片段在轻链的可变区中具有序列RASQDISNYLN(SEQ ID NO:5)作为CDR1，序列YTSRLHS(SEQ ID NO:6)作为CDR2和序列QQGNTLPW(SEQ ID NO:7)作为CDR3。
(4)根据以上(1)的药物组合物，其中所述单克隆抗体或其含有抗原-结合区的片段在重链的可变区中具有序列SYWMH作为CDR1，序列DIYPGSDSTNYNEKFKS作为CDR2和序列GGWLDAMDY作为CDR3，及在轻链的可变区中具有序列RASQDISNYLN作为CDR1，序列YTSRLH作为CDR2和序列QQGNTLPW作为CDR3。
(5)根据以上(1)的药物组合物，其中所述单克隆抗体或其含有抗原-结合区的片段在重链的可变区中具有序列TYWMH(SEQ IDNO:8)作为CDR1，序列AIYPGNSETSYNQKFKG(SEQ ID NO:9)作为CDR2和序列GYSDFDY(SEQ ID NO:10)作为CDR3。
(6)根据以上(1)的药物组合物，其中所述单克隆抗体或其含有抗原-结合区的片段在轻链的可变区中具有序列HASQGIRSNIG(SEQ ID NO:11)作为CDR1，序列HGTNLED(SEQ ID NO:12)作为CDR2和序列VQYVQFP(SEQ ID NO:13)作为CDR3。
(7)根据以上(1)的药物组合物，其中所述单克隆抗体或其含有抗原-结合区的片段在重链的可变区中具有序列TYWMH作为CDR1，序列AIYPGNSETSYNQKFKG作为CDR2和序列GYSDFDY作为CDR3，及在轻链的可变区中具有序列HASQGIRSNIG作为CDR1，序列HGTNLED作为CDR2和序列VQYVQFP作为CDR3。
(8)根据以上(1)的药物组合物，其中所述单克隆抗体或其含有抗原-结合区的片段在重链的可变区中具有序列DYNLH(SEQ IDNO:14)作为CDR1，序列YIYPYNGNTGYNQKFKR(SEQ ID NO:15)作为CDR2和序列GGIYDDYYDYAIDY(SEQ ID NO:16)作为CDR3。
(9)根据以上(1)的药物组合物，其中所述单克隆抗体或其含有抗原-结合区的片段在轻链的可变区中具有序列RASENIYSHIA(SEQ ID NO:17)作为CDR1，序列GATNLAH(SEQ ID NO:18)作为CDR2和序列QHFWGTP(SEQ ID NO:19)作为CDR3。
(10)根据以上(1)的药物组合物，其中所述单克隆抗体或其含有抗原-结合区的片段在重链的可变区中具有序列DYNLH作为CDR1，序列YIYPYNGNTGYNQKFKR作为CDR2和序列GGIYDDYYDYAIDY作为CDR3，及在轻链的可变区中具有序列RASENIYSHIA作为CDR1，序列GATNLAH作为CDR2和序列QHFWGTP作为CDR3。
(11)根据以上(1)的药物组合物，其中所述单克隆抗体或其含有抗原-结合区的片段在重链的可变区中具有序列SYYLY(SEQ IDNO:20)作为CDR1，序列LINPTNSDTIFNEKFKS(SEQ ID NO:21)作为CDR2和序列EGGYGYGPFAY(SEQ ID NO:22)作为CDR3。
(12)根据以上(1)的药物组合物，其中所述单克隆抗体或其含有抗原-结合区的片段在轻链的可变区中具有序列TSSQTLVHSNGNTYLH(SEQ ID NO:23)作为CDR1，序列KVSNRFS(SEQ ID NO:24)作为CDR2和序列HSTHVP(SEQ ID NO:25)作为CDR3。
(13)根据以上(1)的药物组合物，其中所述单克隆抗体或其含有抗原-结合区的片段在重链的可变区中具有序列SYYLY作为CDR1，序列LINPTNSDTIFNEKFKS作为CDR2和序列EGGYGYGPFAY作为CDR3，及在轻链的可变区中具有序列TSSQTLVHSNGNTYLH作为CDR1，序列KVSNRFS作为CDR2和序列HSTHVP作为CDR3。
(14)根据以上(1)的药物组合物，其中所述单克隆抗体或其含有抗原-结合区的片段在重链的可变区中具有序列SYGMS(SEQ IDNO:26)作为CDR1，序列TISSGGSYIYYPESVKG(SEQ ID NO:27)作为CDR2和序列LYGGRRGYGLDY(SEQ ID NO:28)作为CDR3。
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(16)根据以上(1)的药物组合物，其中所述单克隆抗体或其含有抗原-结合区的片段在重链的可变区中具有序列SYGMS作为CDR1，序列TISSGGSYIYYPESVKG作为CDR2和序列LYGGRRGYGLDY作为CDR3，及在轻链的可变区中具有序列RSSKSLLHSDGITYLY作为CDR1，序列QMSNLAS作为CDR2和序列AQNLEL作为CDR3。
(17)根据以上(1)的药物组合物，其中所述单克隆抗体或其含有抗原-结合区的片段在重链的可变区中具有序列SHYYWT(SEQ IDNO:32)作为CDR1，序列YISYDGSNNYNPSLKN(SEQ ID NO:33)作为CDR2和序列EGPLYYGNPYWYFDV(SEQ ID NO:34)作为CDR3。
(18)根据以上(1)的药物组合物，其中所述单克隆抗体或其含有抗原-结合区的片段在轻链的可变区中具有序列RASQDIDNYLN(SEQ ID NO:35)作为CDR1，序列YTSRLHS(SEQ ID NO:36)作为CDR2和序列QQFNTLP(SEQ ID NO:37)作为CDR3。
(19)根据以上(1)的药物组合物，其中所述单克隆抗体或其含有抗原-结合区的片段在重链的可变区中具有序列SHYYWT作为CDR1，序列YISYDGSNNYNPSLKN作为CDR2和序列EGPLYYGNPYWYFDV作为CDR3，及在轻链的可变区中具有序列RASQDIDNYLN作为CDR1，序列YTSRLHS作为CDR2和序列QQFNTLP作为CDR3。
(20)根据以上(1)的药物组合物，其中所述单克隆抗体或其含有抗原-结合区的片段在重链的可变区中具有序列SHYYWS(SEQ IDNO:38)作为CDR1，序列YISYDGSNNYNPSLKN(SEQ ID NO:39)作为CDR2和序列EGPLYYGNPYWYFDV(SEQ ID NO:40)作为CDR3。
(21)根据以上(1)的药物组合物，其中所述单克隆抗体或其含有抗原-结合区的片段在轻链的可变区中具有序列RASQDIDNYLN(SEQ ID NO:41)作为CDR1，序列YTSRLHS(SEQ ID NO:42)作为CDR2和序列QQFNTLP(SEQ ID NO:43)作为CDR3。
(22)根据以上(1)的药物组合物，其中所述单克隆抗体或其含有抗原-结合区的片段在重链的可变区中具有序列SHYYWS作为CDR1，序列YISYDGSNNYNPSLKN作为CDR2和序列EGPLYYGNPYWYFDV作为CDR3，及在轻链的可变区中具有序列RASQDIDNYLN作为CDR1，序列YTSRLHS作为CDR2和序列QQFNTLP作为CDR3。
(23)抑制活化的B细胞的药物组合物，其中所述药物组合物包含由保藏号NITE BP-1211，NITE BP-1212，NITE BP-1213和NITEBP-1214的杂交瘤mp5B7，mp7B4，mp13D4和mp13H11的任一种产生的单克隆抗体，或其含有抗原-结合区的片段作为活性成分。
(24)根据以上(1)～(23)之任一项的药物组合物，其还用于预防或治疗自身免疫疾病。
(25)根据以上(1)～(23)之任一项的药物组合物，其还用于预防或治疗过敏性疾病。
(26)检测活化的B细胞的方法，所述方法包括使与PLD4的细胞外结构域结合的单克隆抗体或其含有抗原-结合区的片段接触待测试的细胞及检测与细胞结合的单克隆抗体或其含有抗原-结合区的片段的步骤。
(27)检测活化的B细胞的试剂，其中所述试剂包含与PLD4的细胞外结构域结合的单克隆抗体或其含有抗体-结合区的片段。
(28)抑制活化的B细胞的方法，所述方法包括使以下任一组分接触活化的B细胞的步骤：
(a)与PLD4结合及抑制活化的B细胞的单克隆抗体，或其含有抗原-结合区的片段，以及
(b)移接了(a)中的单克隆抗体的互补性-决定区的免疫球蛋白，或其含有抗原-结合区的片段。
(29)抑制活体中活化的B细胞的方法，所述方法包括向活体施用以下任一组分的步骤：
(a)与PLD4结合及抑制活化的B细胞的活性的单克隆抗体，或其含有抗原-结合区的片段，以及
(b)移接了(a)中的单克隆抗体的互补性-决定区的免疫球蛋白，或其含有抗原-结合区的片段。
(30)方法根据(28)以上或(29)以上，其中所述活化的B细胞的活性是抗体-产生活性。
(31)抑制活化的B细胞的剂，其中所述剂包含以下组分作为活性组分：
(a)与PLD4结合及抑制活化的B细胞的单克隆抗体，或其含有抗原-结合区的片段，以及
(b)移接了(a)中的单克隆抗体的互补性-决定区的免疫球蛋白，或其含有抗原-结合区的片段。
(32)抑制活化的B细胞的剂根据(31)以上，其中活化的B细胞的活性是抗体-产生活性。
“活化的B细胞”可包括由不仅通过BCR和TLR直接刺激，而且通过T细胞刺激具有增殖和抗体产生和分泌的活性的B细胞。
“含有抗原-结合区的片段”可包括由用木瓜蛋白酶或胃蛋白酶的部分消化获得的Fab，Fab’，F(ab’)2片段等，但不限于此。此外，含有抗原-结合区的片段也可包括含有移接了单克隆抗体的CDR(互补性-决定区)的可变区的免疫球蛋白的片段。熟知的是，这些抗体片段可用作与抗原具有结合亲和力的抗体分子。或者，只要维持需要的抗原-结合活性，可使用由基因重组构建的抗体。由基因重组构建的抗体的例可包括自抗体片段等形成的嵌合抗体，CDR-移接的抗体，单链Fv(scFv)，双抗体(双抗体)，线性抗体和多特异性抗体。知道基于单克隆抗体或产生单克隆抗体的抗体-产生细胞获得这些抗体的方法。
“自身免疫疾病”是通过通过将个体的自身身体组织误解为外源物质而免疫功能的攻击导致的疾病。器官-特异性自身免疫疾病包括Guillain-Barre综合征，重症肌无力，慢性胃炎(慢性萎缩性胃炎)，自身免疫肝炎，主要胆道硬化，主要硬化胆管炎，自身免疫胰腺炎，主动脉炎综合征，古德帕斯丘综合征，快速进行性肾小球肾炎，巨成红细胞贫血，自身免疫溶血贫血，自身免疫中性粒细胞减少症，特发性血小板减少性紫癜，Basedow病，桥本甲状腺炎，原发性甲状腺功能减退，特发性Addison氏病，1型糖尿病，溃疡性结肠炎，克罗恩病，腹腔疾病等；及系统性自身免疫疾病包括关节风湿病，系统性红斑狼疮，抗-磷脂抗体综合征，多发性肌炎，硬皮病，斯耶格伦综合征，血管炎综合征，自身免疫淋巴组织增生性综合征(ALPS)等，但不限于此。
“过敏性疾病”是由针对外源物质的异常免疫反应导致的疾病，及包括特应性皮炎，支气管哮喘，花粉病，过敏性鼻炎，荨麻疹，婴儿哮喘，过敏性胃肠炎，接触性皮炎，血清病，血管紫癜等，但不限于此。
【发明效果】
本发明提供可归因于使用特异性识别PLD4的抗体和其片段，及具有其治疗效果的药物阻遏活化的B细胞的治疗性方法。
本发明可还预期通过使用活化的B细胞-抑制活性而对患自身免疫疾病或过敏性疾病的患者具有预防和治疗效果。
【附图说明】
图1是显示人B细胞(CD19+)用抗-PLD4抗体染色的FACS分析图。通过用TLR9配体，CpG2006刺激在CD19+B细胞上诱导PLD4蛋白。活化的B细胞(CD19+)中PLD4的诱导可由TLR9配体(CpG2006)检测。单克隆抗体11G9.6和5B7用于检测PLD4。小鼠IgG2b,κ被用作阴性对照。
图2是显示人PBMC用抗-PLD4抗体和抗-CD19抗体的染色的FACS分析图。通过用TLR9配体刺激而PLD4+细胞在活化的B细胞(CD19+)中增加。小鼠IgG1,κ被用作阴性对照。
图3是显示在TLR9配体刺激的存在或缺失下人PBMC用抗-PLD4抗体和抗-CD19抗体染色的FACS分析图。PLD4+TLR9配体-刺激的B细胞(CD19+)的显著增加可用抗-PLD4抗体(5B7,13D4,13H11和11G9.6)检测。小鼠IgG2b,κ被用作阴性对照。
图4是显示由指示的各抗-PLD4嵌合抗体的PLD4+活化的B细胞的减少的FACS分析图。PBMC与抗-PLD4嵌合抗体(ch3B4,ch13D4,ch13H11,ch5B7和ch11G9.6)的共培养在TLR9配体的存在下减少PLD4+活化的B细胞。但是，在未添加抗体的情况(NoAb)和使用非特异性抗体的情况(对照Ig)中，通过添加CpG2006的B细胞活化可不被抑制。
图5是以数表示图4中的抑制效应的图。表达PLD4及用对照Ig处理的活化的B细胞组被认为是100％，及显示表达PLD4及用各抗-PLD4嵌合抗体处理的活化的B细胞组中的变化。
图6是流式细胞术的结果。将PBMC用指示的嵌合PLD4抗体，在TLR9配体和重组人IL-6的存在下培养。相比对照Ig处理，通过用ch3B4，ch5B7，ch13D4，ch13H11或ch11G9.6处理而成浆细胞群(CD19+CD27+IgD-CD38+)减少。
图7是图6的培养上清液的ELISA测定的结果。相比对照Ig处理，通过用ch3B4，ch5B7，ch13D4，ch13H11或ch11G9.6处理而自成浆细胞的人IgG产生减少。
【实施方式】
本发明人新发现，PLD4是其表达随B细胞的活化被诱导的分子。
本发明人之前报道了人PLD4的表达，亚细胞定位，结构和功能(专利文献1)。在本发明中，还发现，PLD4的表达不仅在pDC而且在活化的B细胞中被诱导。还新发现，抗-PLD4抗体抑制活化的B细胞。该发现不仅加强抗-PLD4抗体通过阻遏pDC活性(这之前已报道)，而且B细胞活性对自身免疫疾病具有治疗效果的可能性。
蛋白诸如CD19，CD20，CD22和BAFF-R在B细胞的表面表达。CD19在自几乎所有阶段的B细胞诸如原-B细胞至抗体-分泌浆细胞上表达，及发挥控制成熟B细胞中的活化的辅助受体的功能。CD20自前B细胞至活化的B细胞表达，CD22在成熟B细胞的细胞表面表达，及在B细胞的长分化阶段中观察到BAFF-R的表达。因此，注意到，识别这些蛋白的抗体不仅抑制活化的B细胞，而且抑制未接触抗原的幼稚B细胞。但是，本发明的抗-PLD4抗体，表征为抑制活化的B细胞而不影响幼稚B细胞。
本发明中使用的抗-PLD4抗体与之前报道的那些相同(专利文献1)。简言之，使用编码含有PLD4的细胞外结构域的氨基酸序列(对应于SEQ ID NO:1显示的氨基酸序列中的第54～506位的氨基酸序列)的重组PLD4-Ig融合蛋白作为免疫原，如下获得针对PLD4的抗体。
<抗-人PLD4单克隆抗体的产生>
【(1)免疫】
作为免疫原，使用以上重组PLD4-Ig融合蛋白。将PLD4-Ig融合蛋白施用于3只BALB/c小鼠的背部下皮。作为佐剂，使用完全和不完全的弗氏佐剂(SIGMA)。第1次施用的体积是200μg/小鼠，及第2至第4次施用的体积是50μg/小鼠。
【(2)抗-血清滴度的确认】
在第3和第4免疫之后收集血，和由ELISA评价抗-血清滴度。
将PLD4-Ig融合蛋白转化进96孔微孔板上的固相。抗血清自1000-倍以3-倍增量连续稀释，和制备达729000-倍的稀释系列。向抗原-包被的板，添加各50μl的各样品，及实施第1级反应。在洗涤之后，第2级反应用HRP-标记的抗-小鼠IgG(κ,λ)抗体实施，和显色用OPD(邻苯二胺)检测(490nm)。
【(3)细胞融合】
从观察到抗-血清滴度增加的小鼠提取脾细胞。提取的脾细胞和小鼠骨髓瘤细胞(P3U1)由PEG方法融合，和将融合的脾细胞在HAT培养基中选择性地培养。
<使用CAL-1细胞的杂交瘤的FACS筛选>
由FACS评价自各由HAT选择性培养获得的融合的脾细胞的克隆产生的抗体。因而，杂交瘤培养上清液中的3B4，5B7，7B4，8C11，10C3，11D10，13D4，13H11，14C1和11G9.6与人PLD4良好反应。
在自以上杂交瘤产生的各单克隆抗体中，根据Kabat编号系统的分析方法测定可变区中的CDR区(CDR；CDR1,CDR2和CDR3)和FW区(框架工作区)和可变区的序列(Kabat et al,1991,Sequences ofProteins of Immunological Interest,National Institutes of HealthPublication No.91-3242,5th ed.,United States Department of Healthand Human Services,Bethesda,MD)。
获得的小鼠11G9.6抗体的重链可变区的核酸序列是SEQ ID NO:74，及氨基酸序列是SEQ ID NO:75。小鼠11G9.6抗体的重链可变区之内的CDR1，CDR2和CDR3的氨基酸序列分别是SEQ ID NO:2，SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4。
获得的小鼠3B4抗体的重链可变区的核酸序列是SEQ ID NO:76，及氨基酸序列是SEQ ID NO:77。小鼠3B4抗体的重链可变区之内的CDR1，CDR2和CDR3的氨基酸序列分别是SEQ ID NO:8，SEQID NO:9和SEQ ID NO:10。
获得的小鼠5B7抗体的重链可变区的核酸序列是SEQ ID NO:78，及氨基酸序列是SEQ ID NO:79。小鼠5B7抗体的重链可变区之内的CDR1，CDR2和CDR3的氨基酸序列分别是SEQ ID NO:14，SEQ ID NO:15和SEQ ID NO:16。
获得的小鼠7B4抗体的重链可变区的核酸序列是SEQ ID NO:80，及氨基酸序列是SEQ ID NO:81。小鼠7B4抗体的重链可变区之内的CDR1，CDR2和CDR3的氨基酸序列分别是SEQ ID NO:14，SEQ ID NO:15和SEQ ID NO:16。7B4抗体是与5B7抗体在重和轻链的可变区具有相同的CDR序列的抗体。
获得的小鼠8C11抗体的重链可变区的核酸序列是SEQ ID NO:82，及氨基酸序列是SEQ ID NO:83。小鼠8C11抗体的重链可变区之内的CDR1，CDR2和CDR3的氨基酸序列分别是SEQ ID NO:20，SEQ ID NO:21和SEQ ID NO:22。
获得的小鼠10C3抗体的重链可变区的核酸序列是SEQ ID NO:84，及氨基酸序列是SEQ ID NO:85。小鼠10C3抗体的重链可变区之内的CDR1，CDR2和CDR3的氨基酸序列分别是SEQ ID NO:26，SEQ ID NO:27和SEQ ID NO:28。
获得的小鼠11D10抗体的重链可变区的核酸序列是SEQ ID NO:86，及氨基酸序列是SEQ ID NO:87。小鼠11D10抗体的重链可变区之内的CDR1，CDR2和CDR3的氨基酸序列分别是SEQ ID NO:26，SEQ ID NO:27和SEQ ID NO:28。11D10抗体是与10C3抗体在重和轻链的可变区具有相同的CDR序列的抗体。但是，它们的重链同种型不同(10C3具有小鼠IgG2a的恒定区和11D10具有小鼠IgG2b的恒定区)。
获得的小鼠13D4抗体的重链可变区的核酸序列是SEQ ID NO:88，及氨基酸序列是SEQ ID NO:89。小鼠13D4抗体的重链可变区之内的CDR1，CDR2和CDR3的氨基酸序列分别是SEQ ID NO:32，SEQ ID NO:33和SEQ ID NO:34。
获得的小鼠13H11抗体的重链可变区的核酸序列是SEQ ID NO:90，及氨基酸序列是SEQ ID NO:91。小鼠13H11抗体的重链可变区之内的CDR1，CDR2和CDR3的氨基酸序列分别是SEQ ID NO:38，SEQ ID NO:39和SEQ ID NO:40。
获得的小鼠14C1抗体的重链可变区的核酸序列是SEQ ID NO:92，及氨基酸序列是SEQ ID NO:93。小鼠14C1抗体的重链可变区之内的CDR1，CDR2和CDR3的氨基酸序列分别是SEQ ID NO:38，SEQ ID NO:39和SEQ ID NO:40。14C1抗体是与13H11抗体在重和轻链的可变区具有相同的CDR序列的抗体。但是，它们的重链同种型不同(13H11具有小鼠IgG2b的恒定区和14C1具有小鼠IgG1的恒定区)。
小鼠11G9.6抗体的轻链可变区的核酸序列是SEQ ID NO:94，及氨基酸序列是SEQ ID NO:95。小鼠11G9.6抗体的轻链可变区之内的CDR1，CDR2和CDR3的氨基酸序列分别是SEQ ID NO:5，SEQ IDNO:6和SEQ ID NO:7。
小鼠3B4抗体的轻链可变区的核酸序列是SEQ ID NO:96，及氨基酸序列是SEQ ID NO:97。小鼠3B4抗体的轻链可变区之内的CDR1，CDR2和CDR3的氨基酸序列分别是SEQ ID NO:11，SEQ IDNO:12和SEQ ID NO:13。
小鼠5B7抗体的轻链可变区的核酸序列是SEQ ID NO:98，及氨基酸序列是SEQ ID NO:99。小鼠5B7抗体的轻链可变区之内的CDR1，CDR2和CDR3的氨基酸序列分别是SEQ ID NO:17，SEQ IDNO:18和SEQ ID NO:19。
小鼠7B4抗体的轻链可变区的核酸序列是SEQ ID NO:100，及氨基酸序列是SEQ ID NO:101。小鼠7B4抗体的轻链可变区之内的CDR1，CDR2和CDR3的氨基酸序列分别是SEQ ID NO:17，SEQ IDNO:18和SEQ ID NO:19。
小鼠8C11抗体的轻链可变区的核酸序列是SEQ ID NO:102，及氨基酸序列是SEQ ID NO:103。小鼠8C11抗体的轻链可变区之内的CDR1，CDR2和CDR3的氨基酸序列分别是SEQ ID NO:23，SEQ IDNO:24和SEQ ID NO:25。
小鼠10C3抗体的轻链可变区的核酸序列是SEQ ID NO:104，及氨基酸序列是SEQ ID NO:105。小鼠10C3抗体的轻链可变区之内的CDR1，CDR2和CDR3的氨基酸序列分别是SEQ ID NO:29，SEQ IDNO:30和SEQ ID NO:31。
小鼠11D10抗体的轻链可变区的核酸序列是SEQ ID NO:106，及氨基酸序列是SEQ ID NO:107。小鼠11D10抗体的轻链可变区之内的CDR1，CDR2和CDR3的氨基酸序列分别是SEQ ID NO:29，SEQ ID NO:30和SEQ ID NO:31。
小鼠13D4抗体的轻链可变区的核酸序列是SEQ ID NO:108，及氨基酸序列是SEQ ID NO:109。小鼠13D4抗体的轻链可变区之内的CDR1，CDR2和CDR3的氨基酸序列分别是SEQ ID NO:35，SEQ IDNO:36和SEQ ID NO:37。
小鼠13H11抗体的轻链可变区的核酸序列是SEQ ID NO:100，及氨基酸序列是SEQ ID NO:111。小鼠13H11抗体的轻链可变区之内的CDR1，CDR2和CDR3的氨基酸序列分别是SEQ ID NO:41，SEQ ID NO:42和SEQ ID NO:43。
小鼠14C1抗体的轻链可变区的核酸序列是SEQ ID NO:112，及氨基酸序列是SEQ ID NO:113。小鼠14C1抗体的轻链可变区之内的CDR1，CDR2和CDR3的氨基酸序列分别是SEQ ID NO:41，SEQ IDNO:42和SEQ ID NO:43。
在本发明中更优选的单克隆抗体的例可包括由杂交瘤mp5B7，mp7B4，mp13D4和mp13H11产生的单克隆抗体。
杂交瘤mp5B7，mp7B4，mp13D4和mp13H11于2012年1月27日，在独立行政法人制品评价技术基盘机构专利生物保藏中心，以保藏号NITE ABP-1211下，NITE ABP-1212，NITE ABP-1213和NITEABP-1214保藏。特定保藏信息描述如下。
(1)保藏机构的名称和地址
名称：独立行政法人制品评价技术基盘机构专利生物保藏中心
地址：292-0818，日本国千叶县木更津市上总镰足2-5-8
(2)保藏日：2012年1月27日
(3)保藏号：NITE BP-1211(杂交瘤mp5B7)
NITE BP-1212(杂交瘤mp7B4)
NITE BP-1213(杂交瘤mp13D4)
NITE BP-1214(杂交瘤mp13H11)
尤其是，更优选的抗体是具有如下组合的抗体：
重链CDR1：DYNLH，CDR2：YIYPYNGNTGYNQKFKR，及CDR3：GGIYDDYYDYAIDY，以及
轻链CDR1：RASENIYSHIA，CDR2：GATNLAH，及CDR3：QHFWGTP
作为构成其可变区的CDR的序列；
具有以下组合的抗体：
重链CDR1：SHYYWT，CDR2：YISYDGSNNYNPSLKN，及CDR3：EGPLYYGNPYWYFDV，以及
轻链CDR1：RASQDIDNYLN，CDR2：YTSRLHS，及CDR3：QQFNTLP
构成其可变区的CDR的序列；以及
具有以下组合的抗体：
重链CDR1：SHYYWS，CDR2：YISYDGSNNYNPSLKN，及CDR3：EGPLYYGNPYWYFDV，以及
轻链CDR1：RASQDIDNYLN，CDR2：YTSRLHS，及CDR3：QQFNTLP，
作为构成其可变区的CDR的序列。
识别PLD4的嵌合抗体或人源化的抗体可使用编码其的多核苷酸由遗传加工产生。如描述于专利文献1，例如，各有活性的嵌合抗体(ch3B4Ab,ch5B7Ab,ch7B4Ab,ch8C11Ab,ch10C3Ab,ch11D10Ab,ch13D4Ab,ch13H11Ab,ch14C1Ab,ch11G9.6Ab等)可由本领域技术人员通过使用以上小鼠单克隆抗体(3B4,5B7,7B4,8C11,10C3,11D10,13D4,13H11,14C1,11G9.6等)的各CDR区容易产生。
本发明人确证，针对PLD4的单克隆抗体具有针对表达PLD4的细胞的CDC(补体依赖性细胞毒性)活性和ADCC(抗体-依赖性细胞毒性)活性。因此，本发明的抗-PLD4单克隆抗体针对表达PLD4的细胞具有细胞毒性作用。
即，本发明涉及抑制活化的B细胞的剂，其中所述剂包含与PLD4的细胞外结构域结合的抗体作为活性组分。或者，本发明提供抑制抗体产生的方法，所述方法包括施用与PLD4的细胞外结构域结合的抗体的步骤。本发明还涉及与PLD4的细胞外结构域结合的抗体在生产抑制活化的B细胞的药物组合物中的用途。
在本发明中，可使用根据需要修饰的抗体。根据本发明，识别PLD4的细胞外结构域的抗体具有抑制活化的B细胞的作用。即，已相信，有抗体本身针对活化的B细胞具有细胞毒性作用的可能性。知道显示强效应子作用的抗体亚类。或者，对活化的B细胞的抑制效应可还通过用细胞毒性剂修饰抗体而增加。作为细胞毒性剂，可提及以下物质。
毒素：假单胞菌属(Pseudomonas)内毒素(PE)，白喉毒素，赖氨酸
放射性同位素：Tc99m，Sr89，I131，Y90
抗癌剂：加利刹霉素，丝裂霉素，紫杉醇
含有蛋白的毒素可由双官能剂结合到抗体或其片段等。或者，通过缀合编码抗体的基因与编码毒素的基因，也可获得二者的融合蛋白。也知道放射性同位素与抗体结合的方法。用放射性同位素标记抗体的方法，例如，知道使用螯合剂。而且，抗癌剂可使用聚糖或双官能剂等结合到抗体。
在本发明中，可将结构经人工修饰的抗体用作活性组分。例如，知道改善抗体的细胞毒性作用和稳定性的各种修饰方法。具体地，知道重链的聚糖经修饰的免疫球蛋白(Shinkawa,T.et al.J.Biol.Chem.278:3466-3473.2003)。通过聚糖的修饰，免疫球蛋白的ADCC(抗体依赖性细胞-介导的细胞毒性)活性增加。
在本发明中，可使用一种或更多单克隆抗体。例如，识别PLD4的细胞外结构域的几种类型的单克隆抗体可组合及用于本发明。
如下所述，可确证抗-PLD4抗体对活化的B细胞的获得性免疫抗体-产生活性具有抑制作用。B细胞通过刺激BCR配体或TLR配体(优选TLR4配体,TLR7配体或TLR9配体)产生大量的抗体。在刺激B细胞的以上配体之前及之后或与用配体刺激同时提供抗-PLD4抗体，及使用抗-PLD4抗体未被作为对照提供的B细胞，比较了产生源于B细胞的获得性免疫抗体的能力。抗体-产生能力可通过测量在B细胞的培养上清液中含有的分泌型免疫球蛋白评价。比较的结果，当通过添加抗-PLD4抗体显著地降低上清液中源于B细胞的获得性免疫抗体的量时，可确证测试的抗-PLD4抗体对B细胞的抗体-产生能力具有抑制作用。知道测量抗体的方法。B细胞是在活体内产生激素免疫(分泌抗体)的细胞。因此，激素免疫可通过抑制B细胞的抗体-产生能力来调整。
当将识别PLD4的细胞外结构域的抗体施用于不同于抗体所来源的生物物种的宿主时，期望将其加工为难以被该宿主识别为外源物质的形式。通过加工为以下描述的分子，例如，免疫球蛋白可难被识别为外源物质。知道以下描述的加工免疫球蛋白分子的技术：
●缺乏恒定区的含有抗原-结合区的片段(Monoclonal Antibodies:Principles and Practice.third edition,Academic Press Limited.1995；Antibody Engineering,A Practical Approach,IRL PRESS,1996)；
●由单克隆抗体的抗原-结合区和宿主免疫球蛋白的恒定区构成的嵌合抗体(Experimental manual for genetic expression,Kodansha Ltd.1994(由Isao Ishida和Tamie Ando编辑))；以及
●CDR-取代的抗体，其中宿主免疫球蛋白中的互补性-决定区(CDR)被单克隆抗体的CDR取代(Experimental manual for geneticexpression,Kodansha Ltd.1994(由Isao Ishida和Tamie Ando编辑))。
或者，人免疫球蛋白的可变区基因也可由噬菌体展示方法获得(McCafferty J.et al.,Nature 348:552-554,1990；Kretzschmar T et.al.,Curr Opin Biotechnol.2002Dec；13(6):598-602.)。在噬菌体展示方法中，将编码人免疫球蛋白的可变区的基因合入噬菌体基因。使用各种类型的免疫球蛋白基因作为源，也可创建噬菌体库。噬菌体作为构建噬菌体本身的蛋白的融合蛋白表达该可变区。由噬菌体在噬菌体表面表达的可变区维持与抗原的结合活性。因此，通过选择与抗原结合的噬菌体或表达抗原的细胞等，可自噬菌体库筛选表达具有靶结合活性的可变区的噬菌体。而且，编码具有靶结合活性的可变区的基因保持在如上选择的噬菌体粒子中。即，在噬菌体展示方法中，使用可变区的结合活性作为指标，可获得编码具有靶结合活性的可变区的基因。
在本发明的抑制B细胞活性的剂或抑制B细胞活性的方法中，识别PLD4的细胞外结构域的抗体或其含有至少抗原-结合区的抗体片段可作为蛋白或编码其的多核苷酸施用。为了施用多核苷酸，期望使用编码靶蛋白的多核苷酸设置在适当的启动子控制下，从而靶蛋白可表达的载体。在载体中，也可设置增强子和终止子。知道维持构成免疫球蛋白的重和轻链的基因及免疫球蛋白分子可表达的载体。免疫球蛋白可表达的载体可通过导入细胞来施用。为施用到活体，可通过施用到活体感染细胞的载体可直接施用。或者，载体被导入自活体分离的淋巴细胞，然后载体可返回到活体(离体)。
在基于本发明的抑制B细胞活性的剂或抑制B细胞活性的方法中，施用于活体的单克隆抗体的量正常是0.5mg～10mg，例如1mg～50mg，优选2mg～10mg免疫球蛋白/kg体重。向活体的抗体施用间隔可适当地调整，以便可维持在处理时期期间活体中免疫球蛋白的有效浓度。具体，例如，抗体可以1～2周的间隔施用。可使用任何施用途径。本领域技术人员可为治疗适当地选择有效施用途径。具体地，可提及口腔或肠胃外施用。由静脉内注射，肌内注射，腹膜内注射或皮下注射等，例如，抗体可为全身或局部施用。对于肠胃外施用适合的制剂在本发明中包括注射，栓剂，喷雾剂等。此外，当向细胞提供时，免疫球蛋白在培养液中以正常1μg/ml，优选10μg/mL或更高，更优选50μg/mL或更高，及还优选0.5mg/mL或更高的量提供。
在基于本发明的抑制B细胞活性的剂或抑制B细胞活性的方法中，单克隆抗体可由任何方法施用于活体。单克隆抗体与药学可接受的载体正常组合。单克隆抗体可根据需要与添加剂组合，诸如增稠剂，稳定剂，防腐剂和溶解剂。该载体或添加剂包括乳糖，柠檬酸，硬脂酸，硬酯酸镁，蔗糖，淀粉，滑石，明胶，琼脂，植物油，乙二醇等。术语“药学可接受的”是指被各国政府机构批准，或其对动物，哺乳动物及，尤其是人的使用被列于各国药典或通常被认可的药典。抑制B细胞活性的剂在本发明中也可以冷冻干燥粉或片剂形式，以一个或更多剂量供给。而且，可将用于溶解的灭菌的注射用水，生理学盐溶液或缓冲溶液与冷冻干燥粉或片剂组合，以便组合物在施用之前会获得期望的浓度。
而且，为作为表达免疫球蛋白的载体施用，重链和轻链作为不同质粒共转染，和各质粒可以0.1～10mg，例如1～5mg/kg体重施用。此外，1～5μg载体/106细胞用于体外导入细胞。以下以由实施例方式更详细描述本发明。
本说明书中引用的全部相关的领域文献通过引用在本文合并。
现在由实施例方式更详细描述本发明。但是，应注意，本发明不限于该实施例。
【实施例】
【实施例1】
将人PBMC(1×107细胞/ml)由CpG2006，TLR9的配体，(1μM的终浓度)刺激，及在24孔板中在CO2温育器(37℃,5％CO2)中温育约20小时。平行地，未受刺激的人PBMC(1×107细胞/ml)也在CO2温育器(37℃,5％CO2)中培养约20小时。
将人PBMC用经FACS缓冲剂(1％FBS/PBS)稀释5倍的FcR阻断试剂(Miltenyi)于4℃处理20分钟。在洗涤之后，用5B7，11G9.6或小鼠IgG2b，κ，第一抗体，(各10μg/ml)于4℃实施染色15分钟。将第二抗体和随后抗体用FACS缓冲剂稀释，从而FcR阻断试剂会被稀释25-倍。将PE-标记的抗-小鼠Ig(BD)，第二抗体，稀释100-倍，和向其中添加溶液及混合。此外，为在FACS上分级分离B细胞，将APC-标记的抗-人CD 19抗体(Biolegend)用含有FcR阻断试剂的FACS缓冲剂稀释30-倍，及于4℃实施染色15分钟。使用FACSCalibur(BD)，将数据合并。将活细胞在X轴：FSC和Y轴：SSC的点图上选通。将数据合并，直到活细胞选通中的细胞数计数成为100,000个。将B细胞：抗-标志物分子抗体-阳性细胞选通。在X轴：PLD4的直方图上分析选通的细胞，及在其上覆盖用小鼠IgG2b，κ的染色结果。因而，抗-PLD4抗体难以与非-刺激的B细胞结合，但与通过用TLR9配体刺激活化的B细胞选择性地结合(图1)。此显示，PLD4在活化的B细胞上表达。
【实施例2】
<B细胞被各单克隆抗体的结合测试>
将人PBMC用1μM终浓度的CpG2006刺激约20小时。收集细胞，及用FcR阻断试剂于4℃处理20分钟。在洗涤之后，用各10μg/ml的3B4，5B7，13D4，13H11，11G9.6，小鼠IgG1，κ或小鼠IgG2b，κ，第一抗体，于4℃实施染色15分钟。用PE-标记的抗-小鼠Ig，第二抗体，于4℃实施染色15分钟。为B细胞组的选通，用APC-标记的抗-人CD19抗体于4℃实施复染色15分钟。通过抗-PLD4抗体与CD19+B细胞的结合分析X轴：FSC和Y轴：SSC的点图上的活细胞组(图2和图3)。因而，全部测试的抗-PLD4单克隆抗体结合到由TLR9刺激的B细胞。即，确证，由全部抗-PLD4单克隆抗体，在B细胞中以活化-依赖性方式诱导PLD4的表达。
【实施例3】
<针对活化的B细胞的抗-PLD4嵌合抗体的细胞毒性活性>
将通过用TLR9配体(1μM)刺激诱导的PLD4+活化的B细胞的频度用作指标。将人PBMC与CpG2006和各抗-PLD4嵌合抗体或对照Ig培养约16小时。作为培养基，使用RPM11640(SIGMA)(包括10％FBS(Equitech-bio)，5ml的200mM L-谷氨酰胺(GIBCO)，5ml的Pen-Strep(GIBCO)，5ml的丙酮酸钠(GIBCO)，及0.5ml的50mM 2-ME(SIGMA))。收集细胞，及用FcR阻断试剂于4℃处理20分钟。在洗涤之后，将细胞还由5B7或13D4，3B4或小鼠IgG2b，κ，第一抗体，于4℃染色15分钟(各10μg/ml)。将PBMC用嵌合3B4抗体(ch3B4)，嵌合3D4抗体(ch3D4)，或嵌合13H11抗体(ch13H11)处理的样品用5B7染色，及将PBMC用嵌合5B7抗体(ch5B7)或嵌合11G9.6抗体(ch11G9.6)处理的样品用13D4染色。已确证，为ADCC处理的抗-PLD4抗体克隆和为染色使用的抗-PLD4抗体克隆彼此不竞争。由PE-标记的抗-小鼠Ig，第二抗体，于4℃实施染色15分钟而发现抗-PLD4的结合。为B细胞的选通，用APC-标记的抗-人CD19抗体于4℃实施复染色15分钟(图4)。将用各嵌合抗-PLD4抗体处理的PLD4+活化的B细胞群与用对照抗体处理的PLD4+活化的B细胞的群比较(图5)。因而，相比用对照Ig处理，全部嵌合抗-PLD4抗体减少活化的PLD4+B细胞(当用对照Ig处理时，被认为是100％,ch3B4：70.2％,ch13D4：56.0％,ch13H11：55.3％,ch5B7：25.8％,ch11G9.6：66.4％)。
【实施例4】
<针对活化的B细胞的嵌合抗-PLD4抗体的抑制性效应>
为了测定抗-人PLD4抗体通过B细胞活化对B细胞成熟和Ig产生的效应，将全人PBMC用ch3B4，ch5B7，ch13D4，ch13H11，ch11G9.6或对照Ig处理24h。然后，将PBMC在CpG2216(1μM)和重组人IL-6的存在下进一步培养，以诱导B细胞活化，导致B细胞成熟。在活化的B细胞培养7天的结果中，由流式细胞术，用PE-标记的抗-人CD19抗体分析活化的B细胞中的成浆细胞，CD19+CD27+IgD-CD38+。为了测量人IgG产生，在用PBS洗涤2次之后，将培养的活化的B细胞用50ng/ml的PMA(佛波醇肉豆蔻酸酯乙酸盐)再刺激。2天后，在培养上清液中由ELISA测量人IgG产生。相比用对照Ig处理，通过用ch3B4，ch5B7，ch13D4，ch13H11或ch11G9.6处理而活化的B细胞中的成浆细胞减少(图6)。而且，相比对照Ig处理，通过用ch3B4，ch5B7，ch13D4，ch13H11或ch11G9.6处理而人IgG产生减少(图7)。这些结果指示，用嵌合抗-人PLD4Abs处理而减少Ab-分泌活化的人B细胞。
【工业实用性】
如显示于以上例，抗-PLD4抗体识别及抑制活化的B细胞。因此，该抗体对于预防和治疗免疫功能中涉及的疾病(自身免疫疾病和过敏性疾病)有用。
<本发明的抗-PLD4单克隆抗体的序列信息的解释>
【1.抗-PLD4小鼠11G9.6抗体】
获得的抗-PLD4小鼠11G9.6抗体的重链可变区的核酸序列是SEQ ID NO:74，及氨基酸序列是SEQ ID NO:75。小鼠11G9.6抗体的重链可变区之内的CDR1，CDR2和CDR3的氨基酸序列分别是SEQID NO:2，SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4。
抗-PLD4小鼠11G9.6抗体的重链可变区的核酸序列(504bp)[大写字母：小鼠11G9.6VH可变区，小写字母：小鼠IgG2b重链恒定区](SEQ ID NO:74)
ATGAGATCACAGTTCTCTATACAGTTACTGAGCACACAGAACCTCACCTTGGGATGGAGCTGTATCATCCTCTTCTTGGTAGCAACAGCTACAGGTGTCCACTCCCAGGTCCAACTGCAGCAGCCTGGGGCTGAACTGGTGAAGCCTGGGACTTCAGTGAAAATGTCCTGCAAGGCTTCTGGCTACACCTTCACCAGCTACTGGATGCACTGGGTGAAGCAGAGGCCGGGACAAGGCCTTGAGTGGATTGGAGATATTTATCCTGGTAGTGATAGTACTAACTACAATGAGAAGTTCAAGAGCAAGGCCACACTGACTGTAGACACATCCTCCAGCACAGCCTACATGCAACTCAGCAGCCTGACATCTGAGGACTCTGCGGTCTATTACTGTGCAAGAGGAGGGTGGTTGGATGCTATGGACTACTGGGGTCAAGGAACCTCAGTCACCGTCTCCTCAgccaaaacaacacccccatcagtctatccactggcccctaagggc
小鼠11G9.6抗体的重链可变区的氨基酸序列(168a.a.)[大写字母：小鼠11G9.6VH可变区，小写字母：小鼠IgG2b重链恒定区]加下划线的序列显示其信号序列及双下划线显示其CDR区(CDR1,CDR2和CDR3)(SEQ ID NO:75)。
MRSQFSIQLLSTQNLTLGWSCIILFLVATATGVIISQVQLQQPGAELVKPGTSVKMSCKASGYTFTWVKQRPGQGLEWIGKATLTVDTSSSTAYMQLSSLTSEDSAVYYCARWGQGTSVTVSSakttppsvyplapkg
11G9.6抗体的重链可变区中的CDR1
(SEQ ID NO:2)
11G9.6抗体的重链可变区中的CDR2
(SEQ ID NO:3)
11G9.6抗体的重链可变区中的CDR3
(SEQ ID NO:4)
获得的抗-PLD4小鼠11G9.6抗体的轻链可变区的核酸序列是SEQ ID NO:38，及氨基酸序列是SEQ ID NO:39。小鼠11G9.6抗体的轻链可变区之内的CDR1，CDR2和CDR3的氨基酸序列分别是SEQID NO:40，SEQ ID NO:41和SEQ ID NO:42。
抗-PLD4小鼠11G9.6抗体的轻链可变区的核酸序列(421bp)[大写字母：小鼠11G9.6VL可变区，小写字母：小鼠Igκ轻链恒定区](SEQ ID NO:94)
ATGATGTCCTCTGCTCAGTTCCTTGGTCTCCTGTTGCTCTGTTTTCAAGGTACCAGATGTGATATCCAGATGACACAGACTACATCCTCCCTGTCTGCCTCTCTGGGAGACAGAGTCACCATCAGTTGCAGGGCAAGTCAGGACATTAGCAATTATTTAAACTGGTATCAGCAGAAACCAGATGGAACTGTTAAACTCCTGATCTACTACACATCAAGATTACACTCAGGAGTCCCATCAAGGTTCAGTGGCAGTGGGTCTGGAACAGATTATTCTCTCACCATTAGCAACCTGGAGCAAGAAGATATTGCCACTTACTTTTGCCAACAGGGTAATACGCTTCCGTGGACGTTCGGTGGAGGCACCAAGCTGGAAATCAAAcgggctgatgctgcaccaactgtatccatcaagggcgaat
小鼠11G9.6抗体的轻链可变区的氨基酸序列(140a.a.)[大写字母：小鼠11G9.6VL可变区，小写字母：小鼠Igκ轻链恒定区]加下划线的序列显示其信号序列及双下划线显示其CDR区(CDR1,CDR2和CDR3)(SEQ ID NO:95)。
MMSSAQFLGLLLLCFQGTRCDIQMTQTTSSLSASLGDRVTISCWYQQKPDGTVKLLIYGVPSRFSGSGSGTDYSLTISNLEQEDIATYFC TFGGGTKLEIKradaaptvsikge
11G9.6抗体的轻链可变区中的CDR1
(SEQ ID NO:5)
11G9.6抗体的轻链可变区中的CDR2
(SEQ ID NO:6)
11G9.6抗体的轻链可变区中的CDR3
(SEQ ID NO:7)
【2.抗-PLD4小鼠3B4抗体】
获得的抗-PLD4小鼠3B4抗体的重链可变区的核酸序列是SEQID NO:76，及氨基酸序列是SEQ ID NO:77。小鼠3B4抗体的重链可变区之内的CDR1，CDR2和CDR3的氨基酸序列分别是SEQ ID NO:8，SEQ ID NO:9和SEQ ID NO:10。
抗-PLD4小鼠3B4抗体的重链可变区的核酸序列(437bp)[大写字母：小鼠3B4VH可变区，小写字母：小鼠IgG1重链恒定区]
ATGGAATGTAACTGGATACTTCCTTTTATTCTGTCGGTAATTTCAGGGGTCTCCTCAGAGGTTCAGCTCCAGCAGTCTGGGACTGTGCTGTCAAGGCCTGGGGCTTCCGTGACGATGTCCTGCAAGGCTTCTGGCGACAGCTTTACCACCTACTGGATGCACTGGGTAAAACAGAGGCCTGGACAGGGTCTAGAATGGATTGGTGCTATCTATCCTGGAAATAGTGAAACTAGCTACAACCAGAAGTTCAAGGGCAAGGCCAAACTGACTGCAGTCACATCCGCCAGCACTGCCTATATGGAGTTCACTAGCCTGACAAATGAGGACTCTGCGGTCTATTACTGTACGGGGGGTTATTCCGACTTTGACTACTGGGGCCAAGGCACCACTCTCACAGTCTCCTCAgccaaaacgacacccccatctgtctatccact
小鼠3B4抗体的重链可变区的氨基酸序列(145a.a.)[大写字母：小鼠3B4VH可变区，小写字母：小鼠IgG1重链恒定区]加下划线的序列显示其信号序列及双下划线显示其CDR区(CDR1,CDR2和CDR3)。
MECNWILPFILSVISGVSSEVQLQQSGTVLSRPGASVTMSCKASGDSFTWVKQRPGQGLEWIGKAKLTAVTSASTAYMEFTSLTNEDSAVYYCTGWGQGTTLTVSSakttppsvyp
3B4抗体的重链可变区中的CDR1
TYWMH
3B4抗体的重链可变区中的CDR2
AIYPGNSETSYNQKFKG
3B4抗体的重链可变区中的CDR3
GYSDFDY
获得的抗-PLD4小鼠3B4抗体的轻链可变区的核酸序列是SEQID NO:96，及氨基酸序列是SEQ ID NO:97。小鼠3B4抗体的轻链可变区之内的CDR1，CDR2和CDR3的氨基酸序列分别是SEQ ID NO:11，SEQ ID NO:12和SEQ ID NO:13。
抗-PLD4小鼠3B4抗体的轻链可变区的核酸序列(459bp)[大写字母：小鼠3B4VL可变区，小写字母：小鼠Igκ轻链恒定区]
ATGATGGTCCTTGCTCAGTTTCTTGCATTCTTGTTGCTTTGGTTTCCAGGTGCAGGATGTGACATCCTGATGACCCAATCTCCATCCTCCATGTCTGTATCTCTGGGAGACACAGTCAGCATCACTTGCCATGCAAGTCAGGGCATTAGAAGTAATATAGGGTGGTTGCAGCAGAAACCAGGGAAATCATTTAAGGGCCTGATCTTTCATGGAACCAACTTGGAAGATGGAGTTCCATCAAGGTTCAGTGGCAGAGGATCTGGAGCAGATTATTCTCTCACCATCAACAGCCTGGAATCTGAAGATTTTGCAGACTATTACTGTGTACAGTATGTTCAGTTTCCTCCAACGTTCGGCTCGGGGACAAAGTTGGAAATAAGAcgggctgatgctgcaccaactgtatccatcttcccaccatccagtgagcagttaacatctggaggtgcctcagtcgtg
小鼠3B4抗体的轻链可变区的氨基酸序列(153a.a.)[大写字母：小鼠3B4VL可变区，小写字母：小鼠Igκ轻链恒定区]加下划线的序列显示其信号序列及双下划线显示其CDR区(CDR1,CDR2和CDR3)。
MMVLAQFLAFLLLWFPGAGCDILMTQSPSSMSVSLGDTVSITCWLQQKPGKSFKGLIFGVPSRFSGRGSGADYSLTINSLESEDFADYYCPTFGSGTKLEIRradaaptvsifppsseqltsggasvv
3B4抗体的轻链可变区中的CDR1
HASQGIRSNIG
3B4抗体的轻链可变区中的CDR2
HGTNLED
3B4抗体的轻链可变区中的CDR3
VQYVQFP
【3.抗-PLD4小鼠5B7抗体】
获得的抗-PLD4小鼠5B7抗体的重链可变区的核酸序列是SEQID NO:78，及氨基酸序列是SEQ ID NO:79。小鼠5B7抗体的重链可变区之内的CDR1，CDR2和CDR3的氨基酸序列分别是SEQ ID NO:14，SEQ ID NO:15和SEQ ID NO:16。
抗-PLD4小鼠5B7抗体的重链可变区的核酸序列(475bp)[大写字母：小鼠5B7VH可变区，小写字母：小鼠IgG2b重链恒定区]
ATGGGATGGAGCTGGATCTTTCTCTTCCTCCTGTCAGGAACTGCAGGCGTCCACTCTGAGGTCCAGCTTCAGCAGTCAGGACCTGAACTGGTGAAACCTGGGGCCTCAGTGAAGATATCCTGCAAGGCTTCTGGATACACATTCACTGACTACAACTTGCACTGGGTGAAGCAGAGCCATGGAAAGAGCCTTGAGTGGATTGGATATATTTATCCTTACAATGGTAATACTGGCTACAACCAGAAGTTCAAGAGGAAGGCCACATTGACTGTAGACAATTCCTCCGGCACAGTCTACATGGAGCTCCGCAGCCTGACATCTGAGGACTCTGCAGTCTATTACTGTGCAAGAGGAGGGATCTATGATGATTACTACGACTATGCTATCGACTATTGGGGTCAAGGAACCTCAGTCACCGTCTCCTCAgccaaaacaacacccccatcagtctatccactggcccctaagggcgaat
小鼠5B7抗体的重链可变区的氨基酸序列(158a.a.)[大写字母：小鼠5B7VH可变区，小写字母：小鼠IgG2b重链恒定区]加下划线的序列显示其信号序列及双下划线显示其CDR区(CDR1,CDR2和CDR3)。
MGWSWIFLFLLSGTAGVHSEVQLQQSGPELVKPGASVKISCKASGYTFTWVKQSHGKSLEWIGKATLTVDNSSGTVYMELRSLTSEDSAVYYCARWGQGTSVTVSSakttppsvyplapkge
5B7抗体的重链可变区中的CDR1
DYNLH
5B7抗体的重链可变区中的CDR2
YIYPYNGNTGYNQKFKR
5B7抗体的重链可变区中的CDR3
GGIYDDYYDYAIDY
获得的抗-PLD4小鼠5B7抗体的轻链可变区的核酸序列是SEQID NO:98，及氨基酸序列是SEQ ID NO:99。小鼠5B7抗体的轻链可变区之内的CDR1，CDR2和CDR3的氨基酸序列分别是SEQ ID NO:17，SEQ ID NO:18和SEQ ID NO:19。
抗-PLD4小鼠5B7抗体的轻链可变区的核酸序列(467bp)[大写字母：小鼠5B7VL可变区，小写字母：小鼠Igκ轻链恒定区]
ATGAGTGTGCCCACTCAGGTCCTGGGGTTGCTGCTGCTGTGGCTTACAGATGCCAGATGTGACATCCAGATGACTCAGTCTCCAGCCTCCCTATCTGTATCTGTGGGAGAAACTGTCGCCATCACATGTCGAGCAAGTGAGAATATTTACAGTCATATAGCATGGTATCAGCAGAAAGAGGGAAAATCTCCTCAGCGCCTGGTCTATGGTGCAACAAACTTAGCACATGGTGTGCCATCAAGGTTCAGTGGCAGTGGATCAGGCACACAGTATTCCCTCAAGATCAACAGCCTTCAGTCTGAAGATTTTGGGAGTTATTACTGTCAACATTTTTGGGGTACTCCGTGGACGTTCGGTGGAGGCACCAAGCTGGAAATCAAAcgggctgatgctgcaccaactgtatccatcttcccaccatccagtgagcagttaacatctggaggtgcctcagtcgtgtgcttctt
小鼠5B7抗体的轻链可变区的氨基酸序列(155a.a.)[大写字母：小鼠5B7VL可变区，小写字母：小鼠Igκ轻链恒定区]加下划线的序列显示其信号序列及双下划线显示其CDR区(CDR1,CDR2和CDR3)。
MSVPTQVLGLLLLWLTDARCDIQMTQSPASLSVSVGETVAITCWYQQKEGKSPQRLVYGVPSRFSGSGSGTQYSLKINSLQSEDFGSYYC WTFGGGTKLEIKradaaptvsifppsseqltsggasvvcf
5B7抗体的轻链可变区中的CDR1
RASENIYSHIA
5B7抗体的轻链可变区中的CDR2
GATNLAH
5B7抗体的轻链可变区中的CDR3
QHFWGTP
【4.抗-PLD4小鼠7B4抗体】
获得的抗-PLD4小鼠7B4抗体的重链可变区的核酸序列是SEQID NO:80，及氨基酸序列是SEQ ID NO:81。小鼠7B4抗体的重链可变区之内的CDR1，CDR2和CDR3的氨基酸序列分别是SEQ ID NO:14，SEQ ID NO:15和SEQ ID NO:16。
抗-PLD4小鼠7B4抗体的重链可变区的核酸序列(470bp)[大写字母：小鼠7B4VH可变区，小写字母：小鼠IgG2b重链恒定区]
ATGGGATGGAGCTGGATCTTTCTCTTCCTCCTGTCAGGAACTGCAGGCGTCCACTCTGAGGTCCAGCTTCAGCAGTCAGGACCTGAACTGGTGAAACCTGGGGCCTCAGTGAAGATATCCTGCAAGGCTTCTGGATACACATTCACTGACTACAACTTGCACTGGGTGAAGCAGAGCCATGGAAAGAGCCTTGAGTGGATTGGATATATTTATCCTTACAATGGTAATACTGGCTACAACCAGAAGTTCAAGAGGAAGGCCACATTGACTGTAGACAATTCCTCCGGCACAGTCTACATGGAGCTCCGCAGCCTGACATCTGAGGACTCTGCAGTCTATTACTGTGCAAGAGGAGGGATCTATGATGATTACTACGACTATGCTATCGACTATTGGGGTCAAGGAACCTCAGTCACCGTCTCCTCAgccaaaacaacacccccatcagtctatccactggcccctaaggg
小鼠7B4抗体的重链可变区的氨基酸序列(156a.a.)[大写字母：小鼠7B4VH可变区，小写字母：小鼠IgG2b重链恒定区]加下划线的序列显示其信号序列及双下划线显示其CDR区(CDR1,CDR2和CDR3)。
MGWSWIFLFLLSGTAGVHSEVQLQQSGPELVKPGASVKISCKASGYTFTWVKQSHGKSLEWIGKATLTVDNSSGTVYMELRSLTSEDSAVYYCARWGQGTSVTVSSakttppsvyplapk
7B4抗体的重链可变区中的CDR1
DYNLH
7B4抗体的重链可变区中的CDR2
YIYPYNGNTGYNQKFKR
7B4抗体的重链可变区中的CDR3
GGIYDDYYDYAIDY
获得的抗-PLD4小鼠7B4抗体的轻链可变区的核酸序列是SEQID NO:100，及氨基酸序列是SEQ ID NO:101。小鼠7B4抗体的轻链可变区之内的CDR1，CDR2和CDR3的氨基酸序列分别是SEQ IDNO:17，SEQ ID NO:18和SEQ ID NO:19。
抗-PLD4小鼠7B4抗体的轻链可变区的核酸序列(454bp)[大写字母：小鼠7B4VL可变区，小写字母：小鼠Igκ轻链恒定区]
ATGAGTGTGCCCACTCAGGTCCTGGGGTTGCTGCTGCTGTGGCTTACAGATGCCAGATGTGACATCCAGATGACTCAGTCTCCAGCCTCCCTATCTGTATCTGTGGGAGAAACTGTCGCCATCACATGTCGAGCAAGTGAGAATATTTACAGTCATATAGCATGGTATCAGCAGAAAGAGGGAAAATCTCCTCAGCGCCTGGTCTATGGTGCAACAAACTTAGCACATGGTGTGCCATCAAGGTTCAGTGGCAGTGGATCAGGCACACAGTATTCCCTCAAGATCAACAGCCTTCAGTCTGAAGATTTTGGGAGTTATTACTGTCAACATTTTTGGGGTACTCCGTGGACGTTCGGTGGAGGCACCAAGCTGGAAATCAAAcgggctgatgctgcaccaactgtatccatcttcccaccatccagtgagcagttaacatctggaggtgcctcag
小鼠7B4抗体的轻链可变区的氨基酸序列(151a.a.)[大写字母：小鼠7B4VL可变区，小写字母：小鼠Igκ轻链恒定区]加下划线的序列显示其信号序列及双下划线显示其CDR区(CDR1,CDR2和CDR3)。
MSVPTQVLGLLLLWLTDARCDIQMTQSPASLSVSVGETVAITCWYQQKEGKSPQRLVYGVPSRFSGSGSGTQYSLKINSLQSEDFGSYYC WTFGGGTKLEIKradaaptvsifppsseqltsggas
7B4抗体的轻链可变区中的CDR1
RASENIYSHIA
7B4抗体的轻链可变区中的CDR2
GATNLAH
7B4抗体的轻链可变区中的CDR3
QHFWGTP
【5.抗-PLD4小鼠8C11抗体】
获得的抗-PLD4小鼠8C11抗体的重链可变区的核酸序列是SEQID NO:82，及氨基酸序列是SEQ ID NO:83。小鼠8C11抗体的重链可变区之内的CDR1，CDR2和CDR3的氨基酸序列分别是SEQ IDNO:20，SEQ ID NO:21和SEQ ID NO:22。
抗-PLD4小鼠8C11抗体的重链可变区的核酸序列(462bp)[大写字母：小鼠8C11VH可变区，小写字母：小鼠IgG2b重链恒定区]
ATGGGATGGAGCTATATCATCCTCTTTTTGGTAGCAACAGCAACAGGGGTCCACTCCCAGGTCCAACTGCAGCAGTCGGGGGCTGAACTGGTGAAGCCTGGGGCTTCAGTGAAGTTGTCCTGCAAGGCTTCTGGCTACACCTTCACCAGCTACTATTTGTACTGGGTGAGGCAGAGGCCTGGACAAGGCCTTGAGTGGATTGGACTGATTAATCCTACCAATAGTGATACTATCTTCAATGAGAAGTTCAAGAGCAAGGCCACACTGACTGTAGACAAATCCTCCAGCACAGCATACATGCAACTCAGCAGCCTGACATCTGAGGACTCTGCGGTCTATTACTGTACACGAGAGGGGGGATATGGTTACGGCCCGTTTGCTTACTGGGGCCAAGGGACTCTGGTCACTGTCTCTGCAgccaaaacaacacccccatcagtctatccactggcccctaagggc
小鼠8C11抗体的重链可变区的氨基酸序列(154a.a.)[大写字母：小鼠8C11VH可变区，小写字母：小鼠IgG2b重链恒定区]加下划线的序列显示其信号序列及双下划线显示其CDR区(CDR1,CDR2和CDR3)。
MGWSYIILFLVATATGVHSQVQLQQSGAELVKPGASVKLSCKASGYTFTWVRQRPGQGLEWIGKATLTVDKSSSTAYMQLSSLTSEDSAVYYCTRWGQGTLVTVSAakttppsvyplapkg
8C11抗体的重链可变区中的CDR1
SYYLY
8C11抗体的重链可变区中的CDR2
LINPTNSDTIFNEKFKS
8C11抗体的重链可变区中的CDR3
EGGYGYGPFAY
获得的抗-PLD4小鼠8C11抗体的轻链可变区的核酸序列是SEQID NO:102，及氨基酸序列是SEQ ID NO:103。小鼠8C11抗体的轻链可变区之内的CDR1，CDR2和CDR3的氨基酸序列分别是SEQ IDNO:23，SEQ ID NO:24和SEQ ID NO:25。
抗-PLD4小鼠8C11抗体的轻链可变区的核酸序列(457bp)[大写字母：小鼠8C11VL可变区，小写字母：小鼠Igκ轻链恒定区]
ATGAAGTTGCCTGTTAGGCTGTTGGTGCTGATGTTCTGGATTCCTGCTTCCAGCAGTGATGTTGTGATGACCCAAACTCCACTCTCCCTGCCTGTCAGTCTTGGAGATCAAGCCTCCATCTCTTGCACATCTAGTCAGACCCTTGTACACAGTAATGGAAACACCTATTTACATTGGTACCTGCAGAAGCCAGGCCAGTCTCCAAAGCTCCTGATCTACAAAGTTTCCAACCGATTTTCTGGGGTCCCAGACAGGTTCAGTGGCAGTGGATCAGGGACAGATTTCACACTCAAGATCAGCAGAGTGGAGGCTGAGGATCTGGGAGTTTATTTCTGCTCTCACAGTACACATGTTCCATTCACGTTCGGCTCGGGGACAAAGTTGGAAATAAAAcgggctgatgctgcaccaactgtatccatcttcccaccatccagtgagcagttaacatctggag
小鼠8C11抗体的轻链可变区的氨基酸序列(152a.a.)[大写字母：小鼠8C11VL可变区，小写字母：小鼠Igκ轻链恒定区]加下划线的序列显示其信号序列及双下划线显示其CDR区(CDR1,CDR2和CDR3)。
MKLPVRLLVLMFWIPASSSDVVMTQTPLSLPVSLGDQASISCWYLQKPGQSPKLLIYGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDLGVYFCS FTFGSGTKLEIKradaaptvsifppsseqltsg
8C11抗体的轻链可变区中的CDR1
TSSQTLVHSNGNTYLH
8C11抗体的轻链可变区中的CDR2
KVSNRFS
8C11抗体的轻链可变区中的CDR3
HSTHVP
【6.抗-PLD4小鼠10C3抗体】
获得的抗-PLD4小鼠10C3抗体的重链可变区的核酸序列是SEQID NO:84，及氨基酸序列是SEQ ID NO:85。小鼠10C3抗体的重链可变区之内的CDR1，CDR2和CDR3的氨基酸序列分别是SEQ IDNO:26，SEQ ID NO:27和SEQ ID NO:28。
抗-PLD4小鼠10C3抗体的重链可变区的核酸序列(450bp)[大写字母：小鼠10C3VH可变区，小写字母：小鼠IgG2a重链恒定区]
ATGAACTTCGGGCTCAGCTTGATTTTCCTTGCCCTCATTTTAAAAGGTGTCCAGTGTGAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGACTTAGTGAGGCCTGGAGGGTCCCTGAAACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCAGTTTCAGTAGCTATGGCATGTCTTGGTTTCGCCAGACTCCAGACAAGAGGCTGGAGTGGGTCGCAACCATTAGTAGTGGTGGTAGTTACATCTACTATCCAGAAAGTGTGAAGGGGCGATTCACCATCTCCAGAGACAATGCCAGGAACATCCTGTACCTGCAAATGAGCAGTCTGAAGTCTGAGGACACAGCCATGTATTATTGTGTAAGACTCTACGGTGGTAGGAGAGGCTATGGTTTGGACTACTGGGGTCAAGGAACCTCAGTCACCGTCTCCTCAgccaaaacaacagccccatcggtctatcca
小鼠10C3抗体的重链可变区的氨基酸序列(150a.a.)[大写字母：小鼠10C3VH可变区，小写字母：小鼠IgG2a重链恒定区]加下划线的序列显示其信号序列及双下划线显示其CDR区(CDR1,CDR2和CDR3)。
MNFGLSLIFLALILKGVQCEVQLVESGGDLVRPGGSLKLSCAASGFSFSWFRQTPDKRLEWVARFTISRDNARNILYLQMSSLKSEDTAMYYCVRWGQGTSVTVSSakttapsvyp
10C3抗体的重链可变区中的CDR1
SYGMS
10C3抗体的重链可变区中的CDR2
TISSGGSYIYYPESVKG
10C3抗体的重链可变区中的CDR3
LYGGRRGYGLDY
获得的抗-PLD4小鼠10C3抗体的轻链可变区的核酸序列是SEQID NO:104，及氨基酸序列是SEQ ID NO:105。小鼠10C3抗体的轻链可变区之内的CDR1，CDR2和CDR3的氨基酸序列分别是SEQ IDNO:29，SEQ ID NO:30和SEQ ID NO:31。
抗-PLD4小鼠10C3抗体的轻链可变区的核酸序列(423bp)[大写字母：小鼠10C3VL可变区，小写字母：小鼠Igκ轻链恒定区]
ATGAGGTTCTCTGCTCAGCTTCTGGGGCTGCTTGTGCTCTGGATCCCTGGATCCACTGCGGAAATTGTGATGACGCAGGCTGCATTCTCCAATCCAGTCACTCTTGGAACATCAGCTTCCATCTCCTGCAGGTCTAGTAAGAGTCTCCTACATAGTGATGGCATCACTTATTTGTATTGGTATCTGCAGAAGCCAGGCCAGTCTCCTCAGCTCCTGATTTATCAGATGTCCAACCTTGCCTCAGGAGTCCCAGACAGGTTCAGTAGCAGTGGGTCAGGAACTGATTTCACACTGAGAATCAGCAGAGTGGAGGCTGAGGATGTGGGTGTTTATTACTGTGCTCAAAATCTAGAACTTTACACGTTCGGAGGGGGGACCAAGCTGGAAATAAAAcgggctgatgctgcaccaactgtatccatc
小鼠10C3抗体的轻链可变区的氨基酸序列(141a.a.)[大写字母：小鼠10C3VL可变区，小写字母：小鼠Igκ轻链恒定区]加下划线的序列显示其信号序列及双下划线显示其CDR区(CDR1,CDR2和CDR3)。
MRFSAQLLGLLVLWIPGSTAEIVMTQAAFSNPVTLGTSASISCWYLQKPGQSPQLLIYGVPDRFSSSGSGTDFTLRISRVEAEDVGVYYC YTFGGGTKLEIKradaaptvsi
10C3抗体的轻链可变区中的CDR1
RSSKSLLHSDGITYLY
10C3抗体的轻链可变区中的CDR2
QMSNLAS
10C3抗体的轻链可变区中的CDR3
AQNLEL
【7.抗-PLD4小鼠11D10抗体】
获得的抗-PLD4小鼠11D10抗体的重链可变区的核酸序列是SEQID NO:86，及氨基酸序列是SEQ ID NO:87。小鼠11D10抗体的重链可变区之内的CDR1，CDR2和CDR3的氨基酸序列分别是SEQ IDNO:26，SEQ ID NO:27和SEQ ID NO:28。
抗-PLD4小鼠11D10抗体的重链可变区的核酸序列(450bp)[大写字母：小鼠11D10VH可变区，小写字母：小鼠IgG2b重链恒定区]
ATGAACTTCGGGCTCAGCTTGATTTTCCTTGCCCTCATTTTAAAAGGTGTCCAGTGTGAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGACTTAGTGAGGCCTGGAGGGTCCCTGAAACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCAGTTTCAGTAGCTATGGCATGTCTTGGTTTCGCCAGACTCCAGACAAGAGGCTGGAGTGGGTCGCAACCATTAGTAGTGGTGGTAGTTACATCTACTATCCAGAAAGTGTGAAGGGGCGATTCACCATCTCCAGAGACAATGCCAGGAACATCCTGTACCTGCAAATGAGCAGTCTGAAGTCTGAGGACACAGCCATGTATTATTGTGTAAGACTCTACGGTGGTAGGAGAGGCTATGGTTTGGACTACTGGGGTCAAGGAACCTCAGTCACCGTCTCCTCAgccaaaacaacacccccatcagtctatcca
小鼠11D10抗体的重链可变区的氨基酸序列(150a.a.)[大写字母：小鼠11D10VH可变区，小写字母：小鼠IgG2b重链恒定区]加下划线的序列显示其信号序列及双下划线显示其CDR区(CDR1,CDR2和CDR3)。
MNFGLSLIFLALILKGVQCEVQLVESGGDLVRPGGSLKLSCAASGFSFSWFRQTPDKRLEWVARFTISRDNARNILYLQMSSLKSEDTAMYYCVRWGQGTSVTVSS akttppsvyp
11D10抗体的重链可变区中的CDR1
SYGMS
11D10抗体的重链可变区中的CDR2
TISSGGSYIYYPESVKG
11D10抗体的重链可变区中的CDR3
LYGGRRGYGLDY
获得的抗-PLD4小鼠11D10抗体的轻链可变区的核酸序列是SEQID NO:106，及氨基酸序列是SEQ ID NO:107。小鼠11D10抗体的轻链可变区之内的CDR1，CDR2和CDR3的氨基酸序列分别是SEQ IDNO:29，SEQ ID NO:30和SEQ ID NO:31。
抗-PLD4小鼠11D10抗体的轻链可变区的核酸序列(423bp)[大写字母：小鼠11D10VL可变区，小写字母：小鼠Igκ轻链恒定区]
ATGAGGTTCTCTGCTCAGCTTCTGGGGCTGCTTGTGCTCTGGATCCCTGGATCCACTGCGGAAATTGTGATGACGCAGGCTGCATTCTCCAATCCAGTCACTCTTGGAACATCAGCTTCCATCTCCTGCAGGTCTAGTAAGAGTCTCCTACATAGTGATGGCATCACTTATTTGTATTGGTATCTGCAGAAGCCAGGCCAGTCTCCTCAGCTCCTGATTTATCAGATGTCCAACCTTGCCTCAGGAGTCCCAGACAGGTTCAGTAGCAGTGGGTCAGGAACTGATTTCACACTGAGAATCAGCAGAGTGGAGGCTGAGGATGTGGGTGTTTATTACTGTGCTCAAAATCTAGAACTTTACACGTTCGGAGGGGGGACCAAGCTGGAAATAAAAcgggctgatgctgcaccaactgtatccatc
小鼠11D10抗体的轻链可变区的氨基酸序列(141a.a.)[大写字母：小鼠11D10VL可变区，小写字母：小鼠Igκ轻链恒定区]加下划线的序列显示其信号序列及双下划线显示其CDR区(CDR1,CDR2和CDR3)。
MRFSAQLLGLLVLWIPGGSTAEIVMTQAAFSNPVTLGTSASISCWYLQKPGQSPQLLIYGVPDRFSSSGSGTDFTLRISRVEAEDVGVYYC YTFGGGTKLEIKradaaptvsi
11D10抗体的轻链可变区中的CDR1
RSSKSLLHSDGITYLY
11D10抗体的轻链可变区中的CDR2
QMSNLAS
11D10抗体的轻链可变区中的CDR3
AQNLEL
【8.抗-PLD4小鼠13D4抗体】
获得的抗-PLD4小鼠13D4抗体的重链可变区的核酸序列是SEQID NO:88，及氨基酸序列是SEQ ID NO:89。小鼠13D4抗体的重链可变区之内的CDR1，CDR2和CDR3的氨基酸序列分别是SEQ IDNO:32，SEQ ID NO:33和SEQ ID NO:34。
抗-PLD4小鼠13D4抗体的重链可变区的核酸序列(472bp)[大写字母：小鼠13D4VH可变区，小写字母：小鼠IgG2b重链恒定区]
ATGAAAGTGTTGAGTCTGTTGTACCTGTTGACAGCCATTCCTGGTATCCTGTCTGATGTACAGCTTCAGGAGTCAGGACCTGGCCTCGTGAAACCTTCTCAATCTCTGTCTCTCACCTGCTCTGTCACTGGCTACTCCATCACCAGTCATTATTACTGGACCTGGATCCGGCAGTTTCCAGGAAACAAACTGGAATGGATGGGCTACATAAGCTACGACGGTAGCAATAACTACAACCCATCTCTCAAAAATCGAATCTCCATCACTCGTGACACATCTAAGAACCAGTTTTTCCTGAAGTTGAATTCTGTGACTACTGAGGACACAGCTACATATAACTGTGCAAGAGAGGGCCCGCTCTACTATGGTAACCCCTACTGGTATTTCGATGTCTGGGGCGCAGGGACCACGGTCACCGTCTCCTCAgccaaaacaacacccccatcagtctatccactggcccctaagggcg
小鼠13D4抗体的重链可变区的氨基酸序列(157a.a.)[大写字母：小鼠13D4VH可变区，小写字母：小鼠IgG2b重链恒定区]加下划线的序列显示其信号序列及双下划线显示其CDR区(CDR1,CDR2和CDR3)。
MKVLSLLYLLTAIPGILSDVQLQESGPGLVKPSQSLSLTCSVTGYSITWIRQFPGNKLEWMGRISITRDTSKNQFFLKLNSVTTEDTATYNCARWGAGTTVTVSSakttppsvyplapkg
13D4抗体的重链可变区中的CDR1
SHYYWT
13D4抗体的重链可变区中的CDR2
YISYDGSNNYNPSLKN
13D4抗体的重链可变区中的CDR3
EGPLYYGNPYWYFDV
获得的抗-PLD4小鼠13D4抗体的轻链可变区的核酸序列是SEQID NO:108，及氨基酸序列是SEQ ID NO:109。小鼠13D4抗体的轻链可变区之内的CDR1，CDR2和CDR3的氨基酸序列分别是SEQ IDNO:35，SEQ ID NO:36和SEQ ID NO:37。
抗-PLD4小鼠13D4抗体的轻链可变区的核酸序列(404bp)[大写字母：小鼠13D4VL可变区，小写字母：小鼠Igκ轻链恒定区]
ATGATGTCCTCTGCTCAGTTCCTTGGTCTCCTGTTGCTCTGTTTTCAAGGTACCAGATGTGATATCCAGATGACACAGACTACATCCTCCCTGTCTGCCTCTCTGGGGGACAGAGTCACCATCAGTTGCAGGGCAAGTCAGGACATTGACAATTATTTAAACTGGTATCAGCAGAAACCAGATGGAACTGTTAAACTCCTGATCTACTACACATCAAGATTACACTCAGGAGTCCCATCAAGGTTCAGTGGCAGTGGGTCTGGAACAGATTATTCTCTCACCATTAGCAACCTGGAGCAAGAAGATGTTGCCACTTACTTTTGCCAGCAGTTTAATACGCTTCCTCGGACGTTCGGTGGAGGCACCAAACTGGAAATCAAAcgggctgatgctgcaccaactgt
小鼠13D4抗体的轻链可变区的氨基酸序列(134a.a.)[大写字母：小鼠13D4VL可变区，小写字母：小鼠Igκ轻链恒定区]加下划线的序列显示其信号序列及双下划线显示其CDR区(CDR1,CDR2和CDR3)。
MMSSAQFLGLLLLCFQGTRCDIQMTQTTSSLSASLGDRVTISCWYQQKPDGTVKLLIYGVPSRFSGSGSGTDYSLTISNLEQEDVATYFCRTFGGGTKLEIKradaapt
13D4抗体的轻链可变区中的CDR1
RASQDIDNYLN
13D4抗体的轻链可变区中的CDR2
YTSRLHS
13D4抗体的轻链可变区中的CDR3
QQFNTLP
【9.抗-PLD4小鼠13H11抗体】
获得的抗-PLD4小鼠13H11抗体的重链可变区的核酸序列是SEQID NO:90，及氨基酸序列是SEQ ID NO:91。小鼠13H11抗体的重链可变区之内的CDR1，CDR2和CDR3的氨基酸序列分别是SEQ IDNO:38，SEQ ID NO:39和SEQ ID NO:40。
抗-PLD4小鼠13H11抗体的重链可变区的核酸序列(471bp)[大写字母：小鼠13H11VH可变区，小写字母：小鼠IgG2b重链恒定区]
ATGAAAGTGTTGAGTCTGTTGTACCTGTTGACAGCCATTCCTGGTATCCTGTCTGATGTACAGCTTCAGGAGTCAGGACCTGGCCTCGTGAAACCTTCTCAGTCTCTGTCTCTCACCTGCTCTGTCACTGGCTACTCCATCTCCAGTCATTATTACTGGAGTTGGATCCGGCAGTTTCCAGGAAACAGACTGGAATGGATGGGCTACATAAGCTACGACGGTAGCAATAACTACAACCCATCTCTCAAAAATCGAATCTCCATCACTCGTGACACATCTAAGAACCAGTTTTTCCTGAAGTTGAATTCTGTGACTACTGAGGACACAGCTACATATAACTGTGCAAGAGAGGGCCCGCTCTACTATGGTAACCCCTACTGGTATTTCGATGTCTGGGGCGCAGGGACCACGGTCACCGTCTCCTCAgccaaaacaacacccccatcagtctatccactggcccctaagggc
小鼠13H11抗体的重链可变区的氨基酸序列(157a.a.)[大写字母：小鼠13H11VH可变区，小写字母：小鼠IgG2b重链恒定区]加下划线的序列显示其信号序列及双下划线显示其CDR区(CDR1,CDR2和CDR3)。
MKVLSLLYLLTAIPGILSDVQLQESGPGLVKPSQSLSLTCSVTGYSISWIRQFPGNRLEWMGRISITRDTSKNQFFLKLNSVTTEDTATYNCAR WGAGTTVTVSSakttppsvyplapkg
13H11抗体的重链可变区中的CDR1
SHYYWS
13H11抗体的重链可变区中的CDR2
YISYDGSNNYNPSLKN
13H11抗体的重链可变区中的CDR3
EGPLYYGNPYWYFDV
获得的抗-PLD4小鼠13H11抗体的轻链可变区的核酸序列是SEQID NO:110，及氨基酸序列是SEQ ID NO:111。小鼠13H11抗体的轻链可变区之内的CDR1，CDR2和CDR3的氨基酸序列分别是SEQID NO:41，SEQ ID NO:42和SEQ ID NO:43。
抗-PLD4小鼠13H11抗体的轻链可变区的核酸序列(414bp)[大写字母：小鼠13H11VL可变区，小写字母：小鼠Igκ轻链恒定区]
ATGATGTCCTCTGCTCAGTTCCTTGGTCTCCTGTTGCTCTGTTTTCAAGGTACCAGATGTGATATCCAGATGACACAGACTACATCCTCCCTGTCTGCCTCTCTGGGGGGCAGCGTCACCATCAGTTGCAGGGCAAGTCAGGACATTGACAATTATTTAAACTGGTATCAGCAAAAACCAGATGGAACTGTTAAACTCCTGATCTACTACACATCAAGATTACACTCAGGAGTCCCATCAAGGTTCAGTGGCAGTGGGTCTGGAACAGATTATTCTCTCACCATTAGCAACCTGGAACAAGAAGATATTGCCACTTACTTTTGCCAACAGTTTAATACGCTTCCTCGGACGTTCGGTGGAGGCACCAAGCTGGAAATCAAAcgggctgatgctgcaccaactgtatccatcttc
小鼠13H11抗体的轻链可变区的氨基酸序列(138a.a.)[大写字母：小鼠13H11VL可变区，小写字母：小鼠Igκ轻链恒定区]加下划线的序列显示其信号序列及双下划线显示其CDR区(CDR1,CDR2和CDR3)。
MMSSAQFLGLLLLCFQGTRCDIQMTQTTSSLSASLGGSVTISCWYQQKPDGTVKLLIYGVPSRFSGSGSGTDYSLTISNLEQEDIATYFCRTFGGGTKLEIKradaaptvsif
13H11抗体的轻链可变区中的CDR1
RASQDIDNYLN
13H11抗体的轻链可变区中的CDR2
YTSRLHS
13H11抗体的轻链可变区中的CDR3
QQFNTLP
【10.抗-PLD4小鼠14C1抗体】
获得的抗-PLD4小鼠14C1抗体的重链可变区的核酸序列是SEQID NO:92，及氨基酸序列是SEQ ID NO:93。小鼠14C1抗体的重链可变区之内的CDR1，CDR2和CDR3的氨基酸序列分别是SEQ IDNO:38，SEQ ID NO:39和SEQ ID NO:40。
抗-PLD4小鼠14C1抗体的重链可变区的核酸序列(470bp)[大写字母：小鼠14C1VH可变区，小写字母：小鼠IgG1重链恒定区]
ATGAAAGTGTTGAGTCTGTTGTACCTGTTGACAGCCATTCCTGGTATCCTGTCTGATGTACAGCTTCAGGAGTCAGGACCTGGCCTCGTGAAACCTTCTCAGTCTCTGTCTCTCACCTGCTCTGTCACTGGCTACTCCATCTCCAGTCATTATTACTGGAGTTGGATCCGGCAGTTTCCAGGAAACAGACTGGAATGGATGGGCTACATAAGCTACGACGGTAGCAATAACTACAACCCATCTCTCAAAAATCGAATCTCCATCACTCGTGACACATCTAAGAACCAGTTTTTCCTGAAGTTGAATTCTGTGACTACTGAGGACACAGCTACATATAACTGTGCAAGAGAGGGCCCGCTCTACTATGGTAACCCCTACTGGTATTTCGATGTCTGGGGCGCAGGGACCACGGTCACCGTCTCCTCAgccaaaacgacacccccatctgtctatccactggcccctaaggg
小鼠14C1抗体的重链可变区的氨基酸序列(156a.a.)[大写字母：小鼠14C1VH可变区，小写字母：小鼠IgG1重链恒定区]加下划线的序列显示其信号序列及双下划线显示其CDR区(CDR1,CDR2和CDR3)。
MKVLSLLYLLTAIPGILSDVQLQESGPGLVKPSQSLSLTCSVTGYSISWIRQFPGNRLEWMGRISITRDTSKNQFFLKLNSVTTEDTATYNCAR WGAGTTVTVSS akttppsvyplapk
14C1抗体的重链可变区中的CDR1
SHYYWS
14C1抗体的重链可变区中的CDR2
YISYDGSNNYNPSLKN
14C1抗体的重链可变区中的CDR3
EGPLYYGNPYWYFDV
获得的抗-PLD4小鼠14C1抗体的轻链可变区的核酸序列是SEQID NO:112，及氨基酸序列是SEQ ID NO:113。小鼠14C1抗体的轻链可变区之内的CDR1，CDR2和CDR3的氨基酸序列分别是SEQ IDNO:41，SEQ ID NO:42和SEQ ID NO:43。
抗-PLD4小鼠14C1抗体的轻链可变区的核酸序列(465bp)[大写字母：小鼠14C1VL可变区，小写字母：小鼠Igκ轻链恒定区]
ATGATGTCCTCTGCTCAGTTCCTTGGTCTCCTGTTGCTCTGTTTTCAAGGTACCAGATGTGATATCCAGATGACACAGACTACATCCTCCCTGTCTGCCTCTCTGGGGGGCAGCGTCACCATCAGTTGCAGGGCAAGTCAGGACATTGACAATTATTTAAACTGGTATCAGCAAAAACCAGATGGAACTGTTAAACTCCTGATCTACTACACATCAAGATTACACTCAGGAGTCCCATCAAGGTTCAGTGGCAGTGGGTCTGGAACAGATTATTCTCTCACCATTAGCAACCTGGAACAAGAAGATATTGCCACTTACTTTTGCCAACAGTTTAATACGCTTCCTCGGACGTTCGGTGGAGGCACCAAGCTGGAAATCAAAcgggctgatgctgcaccaactgtatccatcttcccaccatccagtgagcagttaacatctggaggtgcctcagtcgtgtgcttc
小鼠14C1抗体的轻链可变区的氨基酸序列(155a.a.)[大写字母：小鼠14C1VL可变区，小写字母：小鼠Igκ轻链恒定区]加下划线的序列显示其信号序列及双下划线显示其CDR区(CDR1,CDR2和CDR3)。
MMSSAQFLGLLLLCFQGTRCDIQMTQTTSSLSASLGGSVTISCWYQQKPDGTVKLLIYGVPSRFSGSGSGTDYSLTISNLEQEDIATYFCRTFGGGTKLEIKradaaptvsifppsseqltsggasvvcf
14C1抗体的轻链可变区中的CDR1
RASQDIDNYLN
14C1抗体的轻链可变区中的CDR2
YTSRLHS
14C1抗体的轻链可变区中的CDR3
QQFNTLP
产生的嵌合11G9.6抗体的重链和轻链的碱基序列和氨基酸序列如以下给出的序列号。
重链
SEQ ID NO:120(碱基序列)
SEQ ID NO:121(氨基酸序列)
轻链
SEQ ID NO:122(碱基序列)
SEQ ID NO:123(氨基酸序列)
【11.抗-PLD4嵌合11G9.6抗体的重链的核酸序列(1401bp)[大写字母：嵌合11G9VH可变区，小写字母：人IgG1重链恒定区](SEQ ID NO:120)】
ATGAAAGTGTTGAGTCTGTTGTACCTGTTGACAGCCATTCCTGGTATCCTGTCTcagGTCCAACTGCAGCAGCCTGGGGCTGAACTGGTGAAGCCTGGGACTTCAGTGAAAATGTCCTGCAAGGCTTCTGGCTACACCTTCACCAGCTACTGGATGCACTGGGTGAAGCAGAGGCCGGGACAAGGCCTTGAGTGGATTGGAGATATTTATCCTGGTAGTGATAGTACTAACTACAATGAGAAGTTCAAGAGCAAGGCCACACTGACTGTAGACACATCCTCCAGCACAGCCTACATGCAACTCAGCAGCCTGACATCTGAGGACTCTGCGGTCTATTACTGTGCAAGAGGAGGGTGGTTGGATGCTATGGACTACTGGGGTCAAGGAACCTCAGTCACCGTCTCCTCAgctagcaccaagggcccatcggtcttccccctggcaccctcctccaagagcacctctgggggcacagcggccctgggctgcctggtcaaggactacttccccgaaccggtgacggtgtcgtggaactcaggcgccctgaccagcggcgtgcacaccttcccggctgtcctacagtcctcaggactctactccctcagcagcgtggtgaccgtgccctccagcagcttgggcacccagacctacatctgcaacgtgaatcacaagcccagcaacaccaaggtggacaagaaagttgagcccaaatcttgtgacaaaactcacacatgcccaccgtgcccagcacctgaactcctggggggaccgtcagtcttcctcttccccccaaaacccaaggacaccctcatgatctcccggacccctgaggtcacatgcgtggtggtggacgtgagccacgaagaccctgaggtcaagttcaactggtacgtggacggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagtacaacagcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggctgaatggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaagccctcccagcccccatcgagaaaaccatctccaaagccaaagggcagccccgagaaccacaggtgtacaccctgcccccatcccgggatgagctgaccaagaaccaggtcagcctgacctgcctggtcaaaggcttctatcccagcgacatcgccgtggagtgggagagcaatgggcagccggagaacaactacaagaccacgcctcccgtgctggactccgacggctccttcttcctctacagcaagctcaccgtggacaagagcaggtggcagcaggggaacgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggctctgcacaaccactacacgcagaagagcctctccctgtctccgggtaaatga
【12.抗-PLD4嵌合11G9.6抗体的重链的氨基酸序列(466a.a.)[大写字母：嵌合11G9VH可变区，小写字母：人IgG1重链恒定区](SEQ ID NO:121)】
MKVLSLLYLLTAIPGILSQVQLQQPGAELVKPGTSVKMSCKASGYTFTSYWMHWVKQRPGQGLEWIGDIYPGSDSTNYNEKFKSKATLTVDTSSSTAYMQLSSLTSEDSAVYYCARGGWLDAMDYWGQGTSVTVSSastkgpsvfplapsskstsggtaalgclvkdyfpepvtvswnsgaltsgvhtfpavlqssglyslssvvtvpssslgtqtyicnvnhkpsntkvdkkvepkscdkthtcppcpapellggpsvflfppkpkdtlmisrtpevtcvvvdvshedpevkfnwyvdgvevhnaktkpreeqynstyrvvsvltvlhqdwlngkeykckvsnkalpapiektiskakgqprepqvytlppsrdeltknqvsltclvkgfypsdiavewesngqpennykttppvldsdgsfflyskltvdksrwqqgnvfscsvmhealhnhytqkslslspgk
【13.抗-PLD4嵌合11G9.6抗体的轻链的核酸序列(705bp)[大写字母：嵌合11G9VL可变区，小写字母：人Igκ轻链恒定区](SEQID NO:122)】
ATGATGTCCTCTGCTCAGTTCCTTGGTCTCCTGTTGCTCTGTTTTCAAGGTACCAGATGTGATATCCAGATGACACAGACTACATCCTCCCTGTCTGCCTCTCTGGGAGACAGAGTCACCATCAGTTGCAGGGCAAGTCAGGACATTAGCAATTATTTAAACTGGTATCAGCAGAAACCAGATGGAACTGTTAAACTCCTGATCTACTACACATCAAGATTACACTCAGGAGTCCCATCAAGGTTCAGTGGCAGTGGGTCTGGAACAGATTATTCTCTCACCATTAGCAACCTGGAGCAAGAAGATATTGCCACTTACTTTTGCCAACAGGGTAATACGCTTCCGTGGACGTTCGGTGGAGGCACCAAGCTGGAAATCAAAcgaactgtggctgcaccatctgtcttcatcttcccgccatctgatgagcagttgaaatctggaactgcctctgttgtgtgcctgctgaataacttctatcccagagaggccaaagtacagtggaaggtggataacgccctccaatcgggtaactcccaggagagtgtcacagagcaggacagcaaggacagcacctacagcctcagcagcaccctgacgctgagcaaagcagactacgagaaacacaaagtctacgcctgcgaagtcacccatcagggcctgagctcgcccgtcacaaagagcttcaacaggggagagtgctag
【14.抗-PLD4嵌合11G9.6抗体的轻链的氨基酸序列(234a.a.)[大写字母：嵌合11G9VL可变区，小写字母：人Igκ轻链恒定区](SEQ ID NO:123)】
MMSSAQFLGLLLLCFQGTRCDIQMTQTTSSLSASLGDRVTISCRASQDISNYLNWYQQKPDGTVKLLIYYTSRLHSGVPSRFSGSGSGTDYSLTISNLEQEDIATYFCQQGNTLPWTFGGGTKLEIKrtvaapsvfifppsdeqlksgtasvvcllnnfypreakvqwkvdnalqsgnsqesvteqdskdstyslsstltlskadyekhkvyacevthqglsspvtksfnrgec
<PLD4-相关的分子的cDNA和蛋白序列>
>人PLD4cDNA(1521bp)(SEQ ID NO:44)
ATGCTGAAGCCTCTTTGGAAAGCAGCAGTGGCCCCCACATGGCCATGCTCCATGCCGCCCCGCCGCCCGTGGGACAGAGAGGCTGGCACGTTGCAGGTCCTGGGAGCGCTGGCTGTGCTGTGGCTGGGCTCCGTGGCTCTTATCTGCCTCCTGTGGCAAGTGCCCCGTCCTCCCACCTGGGGCCAGGTGCAGCCCAAGGACGTGCCCAGGTCCTGGGAGCATGGCTCCAGCCCAGCTTGGGAGCCCCTGGAAGCAGAGGCCAGGCAGCAGAGGGACTCCTGCCAGCTTGTCCTTGTGGAAAGCATCCCCCAGGACCTGCCATCTGCAGCCGGCAGCCCCTCTGCCCAGCCTCTGGGCCAGGCCTGGCTGCAGCTGCTGGACACTGCCCAGGAGAGCGTCCACGTGGCTTCATACTACTGGTCCCTCACAGGGCCTGACATCGGGGTCAACGACTCGTCTTCCCAGCTGGGAGAGGCTCTTCTGCAGAAGCTGCAGCAGCTGCTGGGCAGGAACATTTCCCTGGCTGTGGCCACCAGCAGCCCGACACTGGCCAGGACATCCACCGACCTGCAGGTTCTGGCTGCCCGAGGTGCCCATGTACGACAGGTGCCCATGGGGCGGCTCACCAGGGGTGTTTTGCACTCCAAATTCTGGGTTGTGGATGGACGGCACATATACATGGGCAGTGCCAACATGGACTGGCGGTCTCTGACGCAGGTGAAGGAGCTTGGCGCTGTCATCTATAACTGCAGCCACCTGGCCCAAGACCTGGAGAAGACCTTCCAGACCTACTGGGTACTGGGGGTGCCCAAGGCTGTCCTCCCCAAAACCTGGCCTCAGAACTTCTCATCTCACTTCAACCGTTTCCAGCCCTTCCACGGCCTCTTTGATGGGGTGCCCACCACTGCCTACTTCTCAGCGTCGCCACCAGCACTCTGTCCCCAGGGCCGCACCCGGGACCTGGAGGCGCTGCTGGCGGTGATGGGGAGCGCCCAGGAGTTCATCTATGCCTCCGTGATGGAGTATTTCCCCACCACGCGCTTCAGCCACCCCCCGAGGTACTGGCCGGTGCTGGACAACGCGCTGCGGGCGGCAGCCTTCGGCAAGGGCGTGCGCGTGCGCCTGCTGGTCGGCTGCGGACTCAACACGGACCCCACCATGTTCCCCTACCTGCGGTCCCTGCAGGCGCTCAGCAACCCCGCGGCCAACGTCTCTGTGGACGTGAAAGTCTTCATCGTGCCGGTGGGGAACCATTCCAACATCCCATTCAGCAGGGTGAACCACAGCAAGTTCATGGTCACGGAGAAGGCAGCCTACATAGGCACCTCCAACTGGTCGGAGGATTACTTCAGCAGCACGGCGGGGGTGGGCTTGGTGGTCACCCAGAGCCCTGGCGCGCAGCCCGCGGGGGCCACGGTGCAGGAGCAGCTGCGGCAGCTCTTTGAGCGGGACTGGAGTTCGCGCTACGCCGTCGGCCTGGACGGACAGGCTCCGGGCCAGGACTGCGTTTGGCAGGGCTGA
>人PLD4蛋白(506氨基酸)(SEQ ID NO:1)
MLKPLWKAAVAPTWPCSMPPRRPWDREAGTLQVLGALAVLWLGSVALICLLWQVPRPPTWGQVQPKDVPRSWEHGSSPAWEPLEAEARQQRDSCQLVLVESIPQDLPSAAGSPSAQPLGQAWLQLLDTAQESVHVASYYWSLTGPDIGVNDSSSQLGEALLQKLQQLLGRNISLAVATSSPTLARTSTDLQVLAARGAHVRQVPMGRLTRGVLHSKFWVVDGRHIYMGSANMDWRSLTQVKELGAVIYNCSHLAQDLEKTFQTYWVLGVPKAVLPKTWPQNFSSHFNRFQPFHGLFDGVPTTAYFSASPPALCPQGRTRDLEALLAVMGSAQEFIYASVMEYFPTTRFSHPPRYWPVLDNALRAAAFGKGVRVRLLVGCGLNTDPTMFPYLRSLQALSNPAANVSVDVKVFIVPVGNHSNIPFSRVNHSKFMVTEKAAYIGTSNWSEDYFSSTAGVGLVVTQSPGAQPAGATVQEQLRQLFERDWSSRYAVGLDGQAPGQDCVWQG
>短尾猴PLD4cDNA(1521bp)(SEQ ID NO:63)
ATGCTGAAGCCTCTTCGGAGAGCgGCAGTGACCCCCATGTGGCCGTGCTCCATGCTGCCCCGCCGCCTGTGGGACAGAGAGGCTGGCACGTTGCAGGTCCTGGGAGTGCTGGCTATGCTGTGGCTGGGCTCCATGGCTCTTACCTACCTCCTGTGGCAAGTGCGCCGTCCTCCCACCTGGGGCCAGGTGCAGCCCAAGGACGTGCCCAGGTCCTGGGGGCATGGTTCCAGCCCAGCTCTGGAGCCCCTGGAAGCGGAGGTCAGGAAGCAGAGGGACTCCTGCCAGCTTGTCCTTGTGGAAAGCATCCCCCAGGACCTGCCATTTGCAGCCGGCAGCCTCTCCGCCCAGCCTCTGGGCCAGGCCTGGCTGCAGCTGCTGGACACTGCCCAGGAGAGCGTCCACGTGGCTTCATACTACTGGTCCCTCACAGGGCCCGACATTGGGGTCAACGACTCATCTTCCCAGCTGGGAGAGGCCCTTCTGCAGAAGCTGCAGCAGCTGCTGGGCAGGAACATTTCCTTGGCTGTGGCCACCAGCAGTCCAACACTGGCCAGGAAGTCCACCGACCTGCAGGTCCTGGCTGCCCGAGGTGCCCAGGTACGACGGGTGCCCATGGGGCGGCTCACCAGGGGCGTTTTGCACTCCAAATTCTGGGTTGTGGATGGACgGCACATATACATGGGCAGTGCcAACATGGACTGGCGGTCCCTGACGCAGGTGAAGGAGCTTGGCGCTGTCATCTATAACTGCAGCCACCTGGCCCAAGACCTGGAGAAGACCTTCCAGACCTACTGGGTGCTGGGGGTGCCCAAGGCTGTCCTCCCCAAAACCTGGCCTCAGAACTTCTCATCTCACATCAACCGTTTCCAGCCCTTCCAGGGCCTCTTTGATGGGGTGCCCACCACTGCCTACTTCTCAGCATCGCCACCcGCACTCTGTCCCCAGGGCCGCACCCCTGACCTGGAGGCGCTGTTGGCGGTGATGGGGAGCGCCCAGGAGTTCATCTATGCCTCCGTGATGGAGTATTTCCCTACCACgCGCTTCAGCCACCCCCGCAGGTACTGGCCGGTGCTGGACAACGCGCTGCGGGCGGCAGCCTTCAGCAAGGGTGTGCGCGTGCGCCTGCTGGTCAGCTGCGGACTCAACACGGACCCCACCATGTTCCCCTATCTGCGGTCCCTGCAGGCGCTCAGCAACCCCGCGGCCAACGTCTCTGTGGACGTGAAAGTCTTCATCGTGCCGGTGGGGAATCATTCCAACATCCCGTTCAGCAGGGTGAACCACAGCAAGTTCATGGTCACGGAGAAGGCAGCCTACATAGGCACCTCCAACTGGTCGGAGGATTACTTCAGCAGCACGACGGGGGTGGGCCTGGTGGTCACCCAGAGCCCCGGCGCGCAGCCCGCGGGGGCCACGGTACAGGAGCAGCTGCGGCAGCTCTTTGAGCGGGACTGGAGTTCGCGCTACGCCGTCGGCCTGGACGGACAGGCTCCGGGCCAGGACTGCGTTTGGCAGGGCTGA
>短尾猴PLD4蛋白(506氨基酸)(SEQ ID NO:129)
MLKPLRRAAVTPMWPCSMLPRRLWDREAGTLQVLGVLAMLWLGSMALTYLLWQVRRPPTWGQVQPKDVPRSWGHGSSPALEPLEAEVRKQRDSCQLVLVESIPQDLPFAAGSLSAQPLGQAWLQLLDTAQESVHVASYYWSLTGPDIGVNDSSSQLGEALLQKLQQLLGRNISLAVATSSPTLARKSTDLQVLAARGAQVRRVPMGRLTRGVLHSKFWVVDGRHIYMGSANMDWRSLTQVKELGAVIYNCSHLAQDLEKTFQTYWVLGVPKAVLPKTWPQNFSSHINRFQPFQGLFDGVPTTAYFSASPPALCPQGRTPDLEALLAVMGSAQEFIYASVMEYFPTTRFSHPRRYWPVLDNALRAAAFSKGVRVRLLVSCGLNTDPTMFPYLRSLQALSNPAANVSVDVKVFIVPVGNHSNIPFSRVNHSKFMVTEKAAYIGTSNWSEDYFSSTTGVGLVVTQSPGAQPAGATVQEQLRQLFERDWSSRYAVGLDGQAPGQDCVWQG
>恒河猴PLD4cDNA(1521bp)(SEQ ID NO:124)
ATGCTGAAGCCTCTTCGGAGAGCGGCAGTGACCCCCATGTGGCCGTGCTCCATGCTGCCCCGCCGCCTGTGGGACAGAGAGGCTGGCACGTTGCAGGTCCTGGGAGTGCTGGCTATGCTGTGGCTGGGCTCCATGGCTCTTACCTACCTCCTGTGGCAAGTGCGCTGTCCTCCCACCTGGGGCCAGGTGCAGCCCAGGGACGTGCCCAGGTCCTGGGGGCATGGTTCCAGCCTAGCTCTGGAGCCCCTGGAAGCGGAGGTCAGGAAGCAGAGGGACTCCTGCCAGCTTGTCCTTGTGGAAAGCATCCCCCAGGACCTGCCATTTGCAGCCGGCAGCCTCTCCGCCCAGCCTCTGGGCCAGGCCTGGCTGCAGCTGCTGGACACTGCCCAGGAGAGCGTCCACGTGGCTTCATACTACTGGTCCCTCACAGGGCCCGACATTGGGGTCAACGACTCATCTTCCCAGCTGGGAGAGGCCCTTCTGCAGAAGCTGCAGCAGCTGCTGGGCAGGAACATTTCCTTGGCTGTGGCCACCAGCAGTCCAACACTGGCCAGGAAGTCCACCGACCTGCAGGTCCTGGCTGCCCGAGGTGCCCAGGTACGACGGGTGCCCATGGGGCGGCTCACCAGGGGCGTTTTGCACTCCAAATTCTGGGTTGTGGATGGACGGCACATATACATGGGCAGTGCCAACATGGACTGGCGGTCCCTGACGCAGGTGAAGGAGCTTGGCGCTGTCATCTATAACTGCAGCCACCTGGCCCAAGACCTGGAGAAGACCTTCCAGACCTACTGGGTGCTGGGGGTGCCCAAGGCTGTCCTCCCCAAAACCTGGCCTCAGAACTTCTCATCTCACATCAACCGTTTCCAGCCCTTCCAGGGCCTCTTTGATGGGGTGCCCACCACTGCCTACTTCTCAGCATCGCCACCCGCACTCTGTCCCCAGGGCCGCACCCCTGACCTGGAGGCGCTGTTGGCGGTGATGGGGAGCGCCCAGGAGTTCATCTATGCCTCCGTGATGGAGTATTTCCCTACCACGCGCTTCAGCCACCCCCGCAGGTACTGGCCGGTGCTGGACAACGCGCTGCGGGCGGCAGCCTTCAGCAAGGGTGTGCGCGTGCGCCTGCTGGTCAGCTGCGGACTCAACACGGACCCCACCATGTTCCCCTATCTGCGGTCCCTGCAGGCGCTCAGCAACCCCGCGGCCAACGTCTCTGTGGACGTGAAAGTCTTCATCGTGCCGGTGGGGAATCATTCCAACATCCCGTTCAGCAGGGTGAACCACAGCAAGTTCATGGTCACGGAGAAGGCAGCCTACATAGGCACCTCCAACTGGTCGGAGGATTACTTCAGCAGCACGACGGGGGTGGGCCTGGTGGTCACCCAGAGCCCCGGCGCGCAGCCCGCGGGGGCCACGGTACAGGAGCAGCTGCGGCAGCTCTTTGAGCGGGACTGGAGTTCGCGCTACGCCGTCGGCCTGGACGGACAGGCTCCGGGCCAGGACTGCGTTTGGCAGGGCTGA
>恒河猴PLD4蛋白(506氨基酸)(SEQ ID NO:130)
MLKPLRRAAVTPMWPCSMLPRRLWDREAGTLQVLGVLAMLWLGSMALTYLLWQVRCPPTWGQVQPRDVPRSWGHGSSLALEPLEAEVRKQRDSCQLVLVESIPQDLPFAAGSLSAQPLGQAWLQLLDTAQESVHVASYYWSLTGPDIGVNDSSSQLGEALLQKLQQLLGRNISLAVATSSPTLARKSTDLQVLAARGAQVRRVPMGRLTRGVLHSKFWVVDGRHIYMGSANMDWRSLTQVKELGAVIYNCSHLAQDLEKTFQTYWVLGVPKAVLPKTWPQNFSSHINRFQPFQGLFDGVPTTAYFSASPPALCPQGRTPDLEALLAVMGSAQEFIYASVMEYFPTTRFSHPRRYWPVLDNALRAAAFSKGVRVRLLVSCGLNTDPTMFPYLRSLQALSNPAANVSVDVKVFIVPVGNHSNIPFSRVNHSKFMVTEKAAYIGTSNWSEDYFSSTTGVGLVVTQSPGAQPAGATVQEQLRQLFERDWSSRYAVGLDGQAPGQDCVWQG
>小鼠PLD4cDNA(1512bp)(SEQ ID NO:131)
ATGGACAAGAAGAAAGAGCACCCAGAGATGCGGATACCACTCCAGACAGCAGTGGAGGTCTCTGATTGGCCCTGCTCCACATCTCATGATCCACATAGCGGACTTGGCATGGTACTGGGGATGCTAGCTGTACTGGGACTCAGCTCTGTGACTCTCATCTTGTTCCTGTGGCAAGGGGCCACTTCTTTCACCAGTCATCGGATGTTCCCTGAGGAAGTGCCCTCCTGGTCCTGGGAGACCCTGAAAGGAGACGCTGAGCAGCAGAATAACTCCTGTCAGCTCATCCTTGTGGAAAGCATCCCCGAGGACTTGCCATTTGCAGCTGGCAGCCCCACTGCCCAGCCCCTGGCCCAGGCTTGGCTGCAGCTTCTTGACACTGCTCGGGAGAGCGTCCACATTGCCTCGTACTACTGGTCCCTCACTGGACTGGACATTGGAGTCAATGACTCGTCTTCTCGGCAGGGAGAGGCCCTTCTACAGAAGTTCCAACAGCTTCTTCTCAGGAACATCTCTGTGGTGGTGGCCACCCACAGCCCAACATTGGCCAAGACATCCACTGACCTCCAGGTCTTGGCTGCCCATGGTGCCCAGATACGACAAGTGCCCATGAAACAGCTTACTGGGGGTGTTCTACACTCCAAATTCTGGGTTGTGGATGGGCGACACGTCTACGTGGGCAGCGCCAACATGGACTGGCGGTCCCTGACTCAGGTGAAGGAACTTGGTGCAATCATCTACAACTGCAGCAACCTGGCTCAAGACCTTGAGAAAACATTCCAGACCTACTGGGTGCTAGGGACTCCCCAAGCTGTTCTCCCTAAAACCTGGCCTCGGAACTTCTCATCCCACATCAACCGCTTCCATCCCTTGCGGGGTCCCTTTGATGGGGTTCCCACCACGGCCTATTTCTCGGCCTCCCCTCCCTCCCTCTGCCCGCATGGCCGGACCCGGGATCTGGACGCAGTGTTGGGAGTGATGGAGGGTGCTCGCCAGTTCATCTATGTCTCGGTGATGGAGTATTTCCCTACCACGCGCTTCACCCACCATGCCAGGTACTGGCCCGTGCTGGACAATGCGCTACGGGCAGCGGCCCTCAATAAGGGTGTGCATGTGCGCTTACTGGTCAGCTGCTGGTTCAACACAGACCCCACCATGTTCGCTTATCTGAGGTCCCTGCAGGCTTTCAGTAACCCCTCGGCTGGCATCTCAGTGGATGTGAAAGTCTTCATCGTGCCTGTGGGAAATCATTCCAACATCCCGTTCAGCCGCGTGAACCACAGCAAGTTCATGGTCACAGACAAGACAGCCTATGTAGGCACCTCTAACTGGTCAGAAGACTACTTCAGCCACACCGCTGGTGTGGGCCTGATTGTCAGCCAGAAGACCCCCAGAGCCCAGCCAGGCGCAACCACCGTGCAGGAGCAGCTGAGGCAACTCTTTGAACGAGACTGGAGTTCCCACTATGCTATGGACCTAGACAGACAAGTCCCGAGCCAGGACTGTGTCTGGTAG
>小鼠PLD4蛋白(503氨基酸)(SEQ ID NO:132)
MDKKKEHPEMRIPLQTAVEVSDWPCSTSHDPHSGLGMVLGMLAVLGLSSVTLILFLWQGATSFTSHRMFPEEVPSWSWETLKGDAEQQNNSCQLILVESIPEDLPFAAGSPTAQPLAQAWLQLLDTARESVHIASYYWSLTGLDIGVNDSSSRQGEALLQKFQQLLLRNISVVVATHSPTLAKTSTDLQVLAAHGAQIRQVPMKQLTGGVLHSKFWVVDGRHVYVGSANMDWRSLTQVKELGAIIYNCSNLAQDLEKTFQTYWVLGTPQAVLPKTWPRNFSSHINRFHPLRGPFDGVPTTAYFSASPPSLCPHGRTRDLDAVLGVMEGARQFIYVSVMEYFPTTRFTHHARYWPVLDNALRAAALNKGVHVRLLVSCWFNTDPTMFAYLRSLQAFSNPSAGISVDVKVFIVPVGNHSNIPFSRVNHSKFMVTDKTAYVGTSNWSEDYFSHTAGVGLIVSQKTPRAQPGATTVQEQLRQLFERDWSSHYAMDLDRQVPSQDCVW
>人PLD3cDNA序列(SEQ ID NO:55)
ATGAAGCCTAAACTGATGTACCAGGAGCTGAAGGTGCCTGCAGAGGAGCCCGCCAATGAGCTGCCCATGAATGAGATTGAGGCGTGGAAGGCTGCGGAAAAGAAAGCCCGCTGGGTCCTGCTGGTCCTCATTCTGGCGGTTGTGGGCTTCGGAGCCCTGATGACTCAGCTGTTTCTATGGGAATACGGCGACTTGCATCTCTTTGGGCCCAACCAGCGCCCAGCCCCCTGCTATGACCCTTGCGAAGCAGTGCTGGTGGAAAGCATTCCTGAGGGCCTGGACTTCCCCAATGCCTCCACGGGGAACCCTTCCACCAGCCAGGCCTGGCTGGGCCTGCTCGCCGGTGCGCACAGCAGCCTGGACATCGCCTCCTTCTACTGGACCCTCACCAACAATGACACCCACACGCAGGAGCCCTCTGCCCAGCAGGGTGAGGAGGTCCTCCGGCAGCTGCAGACCCTGGCACCAAAGGGCGTGAACGTCCGCATCGCTGTGAGCAAGCCCAGCGGGCCCCAGCCACAGGCGGACCTGCAGGCTCTGCTGCAGAGCGGTGCCCAGGTCCGCATGGTGGACATGCAGAAGCTGACCCATGGCGTCCTGCATACCAAGTTCTGGGTGGTGGACCAGACCCACTTCTACCTGGGCAGTGCCAACATGGACTGGCGTTCACTGACCCAGGTCAAGGAGCTGGGCGTGGTCATGTACAACTGCAGCTGCCTGGCTCGAGACCTGACCAAGATCTTTGAGGCCTACTGGTTCCTGGGCCAGGCAGGCAGCTCCATCCCATCAACTTGGCCCCGGTTCTATGACACCCGCTACAACCAAGAGACACCAATGGAGATCTGCCTCAATGGAACCCCTGCTCTGGCCTACCTGGCGAGTGCGCCCCCACCCCTGTGTCCAAGTGGCCGCACTCCAGACCTGAAGGCTCTACTCAACGTGGTGGACAATGCCCGGAGTTTCATCTACGTCGCTGTCATGAACTACCTGCCCACTCTGGAGTTCTCCCACCCTCACAGGTTCTGGCCTGCCATTGACGATGGGCTGCGGCGGGCCACCTACGAGCGTGGCGTCAAGGTGCGCCTGCTCATCAGCTGCTGGGGACACTCGGAGCCATCCATGCGGGCCTTCCTGCTCTCTCTGGCTGCCCTGCGTGACAACCATACCCACTCTGACATCCAGGTGAAACTCTTTGTGGTCCCCGCGGATGAGGCCCAGGCTCGAATCCCATATGCCCGTGTCAACCACAACAAGTACATGGTGACTGAACGCGCCACCTACATCGGAACCTCCAACTGGTCTGGCAACTACTTCACGGAGACGGCGGGCACCTCGCTGCTGGTGACGCAGAATGGGAGGGGCGGCCTGCGGAGCCAGCTGGAGGCCATTTTCCTGAGGGACTGGGACTCCCCTTACAGCCATGACCTTGACACCTCAGCTGACAGCGTGGGCAACGCCTGCCGCCTGCTCTGA
>人PLD3蛋白(490氨基酸)(SEQ ID NO:127)
MKPKLMYQELKVPAEEPANELPMNEIEAWKAAEKKARWVLLVLILAVVGFGALMTQLFLWEYGDLHLFGPNQRPAPCYDPCEAVLVESIPEGLDFPNASTGNPSTSQAWLGLLAGAHSSLDIASFYWTLTNNDTHTQEPSAQQGEEVLRQLQTLAPKGVNVRIAVSKPSGPQPQADLQALLQSGAQVRMVDMQKLTHGVLHTKFWVVDQTHFYLGSANMDWRSLTQVKELGVVMYNCSCLARDLTKIFEAYWFLGQAGSSIPSTWPRFYDTRYNQETPMEICLNGTPALAYLASAPPPLCPSGRTPDLKALLNVVDNARSFIYVAVMNYLPTLEFSHPHRFWPAIDDGLRRATYERGVKVRLLISCWGHSEPSMRAFLLSLAALRDNHTHSDIQVKLFVVPADEAQARIPYARVNHNKYMVTERATYIGTSNWSGNYFTETAGTSLLVTQNGRGGLRSQLEAIFLRDWDSPYSHDLDTSADSVGNACRLL
>人PLD5cDNA(1338bp)(SEQ ID NO:56)
ATGGGAGAGGATGAGGATGGACTCTCAGAAAAAAATTGCCAAAATAAATGTCGAATTGCCCTGGTGGAAAATATTCCTGAAGGCCTTAACTATTCAGAAAATGCACCATTTCACTTATCACTTTTCCAAGGCTGGATGAATTTACTCAACATGGCCAAAAAGTCTGTTGACATAGTGTCTTCCCATTGGGATCTCAACCACACTCATCCATCAGCATGTCAGGGTCAACGTCTTTTTGAAAAGTTGCTCCAGCTGACTTCGCAAAATATTGAAATCAAGCTAGTGAGTGATGTAACAGCTGATTCAAAGGTATTAGAAGCCTTGAAATTAAAGGGAGCCGAGGTGACGTACATGAACATGACCGCTTACAACAAGGGCCGGCTGCAGTCCTCCTTCTGGATCGTGGACAAACAGCACGTGTATATCGGCAGTGCCGGTTTGGACTGGCAATCCCTGGGACAGATGAAAGAACTCGGTGTCATCTTCTACAACTGCAGCTGCCTGGTCCTAGATTTACAAAGGATATTTGCTCTATATAGTTCATTAAAATTCAAAAGCAGAGTGCCTCAAACCTGGTCCAAAAGACTCTATGGAGTCTATGACAATGAAAAGAAATTGCAACTTCAGTTGAATGAAACCAAATCTCAAGCATTTGTATCGAATTCTCCAAAACTCTTTTGCCCTAAAAACAGAAGTTTTGACATAGATGCCATCTACAGTGTGATAGATGATGCCAAGCAGTATGTGTACATCGCTGTCATGGACTACCTGCCTATCTCCAGCACAAGCACCAAAAGGACTTACTGGCCAGACTTGGATGCAAAAATAAGAGAAGCATTAGTTTTACGAAGCGTTAGAGTTCGACTCCTTTTAAGCTTCTGGAAGGAAACTGATCCCCTTACGTTTAACTTTATTTCATCTCTTAAAGCGATTTGCACTGAAATAGCCAACTGCAGTTTGAAAGTTAAATTTTTTGATCTGGAAAGAGAGAATGCTTGTGCTACAAAAGAACAAAAGAATCACACCTTTCCTAGGTTAAATCGCAACAAGTACATGGTGACAGATGGAGCAGCTTATATTGGAAATTTTGATTGGGTAGGGAATGATTTCACTCAGAATGCTGGCACGGGCCTTGTTATCAACCAGGCAGATGTGAGGAACAACAGAAGCATCATTAAGCAACTTAAAGATGTGTTTGAAAGGGACTGGTATTCACCGTATGCCAAAACCTTACAGCCAACCAAACAGCCGAACTGCTCAAGCCTGTTCAAACTCAAACCCCTCTCCAACAAAACTGCCACAGACGACACAGGCGGAAAGGATCCCCGGAACGTATGA
>人PLD5蛋白(445氨基酸)(SEQ ID NO:128)
MGEDEDGLSEKNCQNKCRIALVENIPEGLNYSENAPFHLSLFQGWMNLLNMAKKSVDIVSSHWDLNHTHPSACQGQRLFEKLLQLTSQNIEIKLVSDVTADSKVLEALKLKGAEVTYMNMTAYNKGRLQSSFWIVDKQHVYIGSAGLDWQSLGQMKELGVIFYNCSCLVLDLQRIFALYSSLKFKSRVPQTWSKRLYGVYDNEKKLQLQLNETKSQAFVSNSPKLFCPKNRSFDIDAIYSVIDDAKQYVYIAVMDYLPISSTSTKRTYWPDLDAKIREALVLRSVRVRLLLSFWKETDPLTFNFISSLKAICTEIANCSLKVKFFDLERENACATKEQKNHTFPRLNRNKYMVTDGAAYIGNFDWVGNDFTQNAGTGLVINQADVRNNRSIIKQLKDVFERDWYSPYAKTLQPTKQPNCSSLFKLKPLSNKTATDDTGGKDPRNV
>人PLD4-Ig融合蛋白cDNA(2142bp)(SEQ ID NO:125)
ATGGAGTTTCAGACCCAGGTCTTTGTATTCGTGTTGCTCTGGTTGTCTGGTGTTGATGGAgattacaaggatgacgacgataaaGGATCCcccagagggcccacaatcaagccctgtcctccatgcaaatgcccagcacctaacctcttgggtggaccatccgtcttcatcttccctccaaagatcaaggatgtactcatgatctccctgagccccatagtcacatgtgtggtggtggatgtgagcgaggatgacccagatgtccagatcagctggtttgtgaacaacgtggaagtacacacagctcagacacaaacccatagagaggattacaacagtactctccgggtggtcagtgccctccccatccagcaccaggactggatgagtggcaaggagttcaaatgcaaggtcaacaacaaagacctcccagcgcccatcgagagaaccatctcaaaacccaaagggtcagtaagagctccacaggtatatgtcttgcctccaccagaagaagagatgactaagaaacaggtcactctgacctgcatggtcacagacttcatgcctgaagacatttacgtggagtggaccaacaacgggaaaacagagctaaactacaagaacactgaaccagtcctggactctgatggttcttacttcatgtacagcaagctgagagtggaaaagaagaactgggtggaaagaaatagctactcctgttcagtggtccacgagggtctgcacaatcaccacacgactaagagcttctcccggactccgggtaaaCGTCCTCCCACCTGGGGCCAGGTGCAGCCCAAGGACGTGCCCAGGTCCTGGGAGCATGGCTCCAGCCCAGCTTGGGAGCCCCTGGAAGCAGAGGCCAGGCAGCAGAGGGACTCCTGCCAGCTTGTCCTTGTGGAAAGCATCCCCCAGGACCTGCCATCTGCAGCCGGCAGCCCCTCTGCCCAGCCTCTGGGCCAGGCCTGGCTGCAGCTGCTGGACACTGCCCAGGAGAGCGTCCACGTGGCTTCATACTACTGGTCCCTCACAGGGCCTGACATCGGGGTCAACGACTCGTCTTCCCAGCTGGGAGAGGCTCTTCTGCAGAAGCTGCAGCAGCTGCTGGGCAGGAACATTTCCCTGGCTGTGGCCACCAGCAGCCCGACACTGGCCAGGACATCCACCGACCTGCAGGTTCTGGCTGCCCGAGGTGCCCATGTACGACAGGTGCCCATGGGGCGGCTCACCAGGGGTGTTTTGCACTCCAAATTCTGGGTTGTGGATGGACGGCACATATACATGGGCAGTGCCAACATGGACTGGCGGTCTCTGACGCAGGTGAAGGAGCTTGGCGCTGTCATCTATAACTGCAGCCACCTGGCCCAAGACCTGGAGAAGACCTTCCAGACCTACTGGGTACTGGGGGTGCCCAAGGCTGTCCTCCCCAAAACCTGGCCTCAGAACTTCTCATCTCACTTCAACCGTTTCCAGCCCTTCCACGGCCTCTTTGATGGGGTGCCCACCACTGCCTACTTCTCAGCGTCGCCACCAGCACTCTGTCCCCAGGGCCGCACCCGGGACCTGGAGGCGCTGCTGGCGGTGATGGGGAGCGCCCAGGAGTTCATCTATGCCTCCGTGATGGAGTATTTCCCCACCACGCGCTTCAGCCACCCCCCGAGGTACTGGCCGGTGCTGGACAACGCGCTGCGGGCGGCAGCCTTCGGCAAGGGCGTGCGCGTGCGCCTGCTGGTCGGCTGCGGACTCAACACGGACCCCACCATGTTCCCCTACCTGCGGTCCCTGCAGGCGCTCAGCAACCCCGCGGCCAACGTCTCTGTGGACGTGAAAGTCTTCATCGTGCCGGTGGGGAACCATTCCAACATCCCATTCAGCAGGGTGAACCACAGCAAGTTCATGGTCACGGAGAAGGCAGCCTACATAGGCACCTCCAACTGGTCGGAGGATTACTTCAGCAGCACGGCGGGGGTGGGCTTGGTGGTCACCCAGAGCCCTGGCGCGCAGCCCGCGGGGGCCACGGTGCAGGAGCAGCTGCGGCAGCTCTTTGAGCGGGACTGGAGTTCGCGCTACGCCGTCGGCCTGGACGGACAGGCTCCGGGCCAGGACTGCGTTTGGCAGGGCTGA
>人PLD4-Ig融合蛋白(713氨基酸)(SEQ ID NO:126)
MEFQTQVFVFVLLWLSGVDGDYKDDDDKGSPRGPTIKPCPPCKCPAPNLLGGPSVFIFPPKIKDVLMISLSPIVTCVVVDVSEDDPDVQISWFVNNVEVHTAQTQTHREDYNSTLRVVSALPIQHQDWMSGKEFKCKVNNKDLPAPIERTISKPKGSVRAPQVYVLPPPEEEMTKKQVTLTCMVTDFMPEDIYVEWTNNGKTELNYKNTEPVLDSDGSYFMYSKLRVEKKNWVERNSYSCSVVHEGLHNHHTTKSFSRTPGKRPPTWGQVQPKDVPRSWEHGSSPAWEPLEAEARQQRDSCQLVLVESIPQDLPSAAGSPSAQPLGQAWLQLLDTAQESVHVASYYWSLTGPDIGVNDSSSQLGEALLQKLQQLLGRNISLAVATSSPTLARTSTDLQVLAARGAHVRQVPMGRLTRGVLHSKFWVVDGRHIYMGSANMDWRSLTQVKELGAVIYNCSHLAQDLEKTFQTYWVLGVPKAVLPKTWPQNFSSHFNRFQPFHGLFDGVPTTAYFSASPPALCPQGRTRDLEALLAVMGSAQEFIYASVMEYFPTTRFSHPPRYWPVLDNALRAAAFGKGVRVRLLVGCGLNTDPTMFPYLRSLQALSNPAANVSVDVKVFIVPVGNHSNIPFSRVNHSKFMVTEKAAYIGTSNWSEDYFSSTAGVGLVVTQSPGAQPAGATVQEQLRQLFERDWSSRYAVGLDGQAPGQDCVWQG
【登录号】
NITE ABP-1211
NITE ABP-1212
NITE ABP-1213
NITE ABP-1214
【序列表自由文本】
SEQ ID NO:45：正向引物
SEQ ID NO:46：反向引物
SEQ ID NO:47：正向引物
SEQ ID NO:48：反向引物
SEQ ID NO:49：正向引物
SEQ ID NO:50：反向引物
SEQ ID NO:51：正向引物
SEQ ID NO:52：反向引物
SEQ ID NO:53：正向引物
SEQ ID NO:54：反向引物
SEQ ID NO:70：锚定引物
SEQ ID NO:70：n是脱氧肌苷
SEQ ID NO:71：AUAP引物
SEQ ID NO:72：引物
SEQ ID NO:73：引物
SEQ ID NO:114：引物
SEQ ID NO:115：引物
SEQ ID NO:116：引物
SEQ ID NO:117：引物
SEQ ID NO:118：引物
SEQ ID NO:119：引物
【序列表】

Claims (32)

1.抑制活化的B细胞的药物组合物，其中所述药物组合物包含与磷脂酶D4(PLD4)蛋白结合的单克隆抗体，或其含有抗原-结合区的片段作为活性成分。
2.权利要求1的药物组合物，其中所述单克隆抗体或其含有抗原-结合区的片段在重链的可变区中具有
序列SYWMH作为CDR1，
序列DIYPGSDSTNYNEKFKS作为CDR2，和
序列GGWLDAMDY作为CDR3。
3.权利要求1的药物组合物，其中所述单克隆抗体或其含有抗原-结合区的片段在轻链的可变区中具有
序列RASQDISNYLN作为CDR1，
序列YTSRLHS作为CDR2，和
序列QQGNTLPW作为CDR3。
4.权利要求1的药物组合物，其中所述单克隆抗体或其含有抗原-结合区的片段
在重链的可变区中具有
序列SYWMH作为CDR1，
序列DIYPGSDSTNYNEKFKS作为CDR2，和
序列GGWLDAMDY作为CDR3，及
在轻链的可变区中具有
序列RASQDISNYLN作为CDR1，
序列YTSRLH作为CDR2，和
序列QQGNTLPW作为CDR3。
5.权利要求1的药物组合物，其中所述单克隆抗体或其含有抗原-结合区的片段在重链的可变区中具有
序列TYWMH作为CDR1，
序列AIYPGNSETSYNQKFKG作为CDR2，和
序列GYSDFDY作为CDR3。
6.权利要求1的药物组合物，其中所述单克隆抗体或其含有抗原-结合区的片段在轻链的可变区中具有
序列HASQGIRSNIG作为CDR1，
序列HGTNLED作为CDR2，和
序列VQYVQFP作为CDR3。
7.权利要求1的药物组合物，其中所述单克隆抗体或其含有抗原-结合区的片段
在重链的可变区中具有
序列TYWMH作为CDR1，
序列AIYPGNSETSYNQKFKG作为CDR2，和
序列GYSDFDY作为CDR3，及
在轻链的可变区中具有
序列HASQGIRSNIG作为CDR1，
序列HGTNLED作为CDR2，和
序列VQYVQFP作为CDR3。
8.权利要求1的药物组合物，其中所述单克隆抗体或其含有抗原-结合区的片段在重链的可变区中具有
序列DYNLH作为CDR1，
序列YIYPYNGNTGYNQKFKR作为CDR2，和
序列GGIYDDYYDYAIDY作为CDR3。
9.权利要求1的药物组合物，其中所述单克隆抗体或其含有抗原-结合区的片段在轻链的可变区中具有
序列RASENIYSHIA作为CDR1，
序列GATNLAH作为CDR2，和
序列QHFWGTP作为CDR3。
10.权利要求1的药物组合物，其中所述单克隆抗体或其含有抗原-结合区的片段
在重链的可变区中具有
序列DYNLH作为CDR1，
序列YIYPYNGNTGYNQKFKR作为CDR2，和
序列GGIYDDYYDYAIDY作为CDR3，及
在轻链的可变区中具有
序列RASENIYSHIA作为CDR1，
序列GATNLAH作为CDR2，和
序列QHFWGTP作为CDR3。
11.权利要求1的药物组合物，其中所述单克隆抗体或其含有抗原-结合区的片段在重链的可变区中具有
序列SYYLY作为CDR1，
序列LINPTNSDTIFNEKFKS作为CDR2，和
序列EGGYGYGPFAY作为CDR3。
12.权利要求1的药物组合物，其中所述单克隆抗体或其含有抗原-结合区的片段在轻链的可变区中具有
序列TSSQTLVHSNGNTYLH作为CDR1，
序列KVSNRFS作为CDR2，和
序列HSTHVP作为CDR3。
13.权利要求1的药物组合物，其中所述单克隆抗体或其含有抗原-结合区的片段
在重链的可变区中具有
序列SYYLY作为CDR1，
序列LINPTNSDTIFNEKFKS作为CDR2，和
序列EGGYGYGPFAY作为CDR3，及
在轻链的可变区中具有
序列TSSQTLVHSNGNTYLH作为CDR1，
序列KVSNRFS作为CDR2，和
序列HSTHVP作为CDR3。
14.权利要求1的药物组合物，其中所述单克隆抗体或其含有抗原-结合区的片段在重链的可变区中具有
序列SYGMS作为CDR1，
序列TISSGGSYIYYPESVKG作为CDR2，和
序列LYGGRRGYGLDY作为CDR3。
15.权利要求1的药物组合物，其中所述单克隆抗体或其含有抗原-结合区的片段在轻链的可变区中具有
序列RSSKSLLHSDGITYLY作为CDR1，
序列QMSNLAS作为CDR2，和
序列AQNLEL作为CDR3。
16.权利要求1的药物组合物，其中所述单克隆抗体或其含有抗原-结合区的片段
在重链的可变区中具有
序列SYGMS作为CDR1，
序列TISSGGSYIYYPESVKG作为CDR2，和
序列LYGGRRGYGLDY作为CDR3，及
在轻链的可变区中具有
序列RSSKSLLHSDGITYLY作为CDR1，
序列QMSNLAS作为CDR2，和
序列AQNLEL作为CDR3。
17.权利要求1的药物组合物，其中所述单克隆抗体或其含有抗原-结合区的片段在重链的可变区中具有
序列SHYYWT作为CDR1，
序列YISYDGSNNYNPSLKN作为CDR2，和
序列EGPLYYGNPYWYFDV作为CDR3。
18.权利要求1的药物组合物，其中所述单克隆抗体或其含有抗原-结合区的片段在轻链的可变区中具有
序列RASQDIDNYLN作为CDR1，
序列YTSRLHS作为CDR2，和
序列QQFNTLP作为CDR3。
19.权利要求1的药物组合物，其中所述单克隆抗体或其含有抗原-结合区的片段
在重链的可变区中具有
序列SHYYWT作为CDR1，
序列YISYDGSNNYNPSLKN作为CDR2，和
序列EGPLYYGNPYWYFDV作为CDR3，及
在轻链的可变区中具有
序列RASQDIDNYLN作为CDR1，
序列YTSRLHS作为CDR2，和
序列QQFNTLP作为CDR3。
20.权利要求1的药物组合物，其中所述单克隆抗体或其含有抗原-结合区的片段在重链的可变区中具有
序列SHYYWS作为CDR1，
序列YISYDGSNNYNPSLKN作为CDR2，和
序列EGPLYYGNPYWYFDV作为CDR3。
21.权利要求1的药物组合物，其中所述单克隆抗体或其含有抗原-结合区的片段在轻链的可变区中具有
序列RASQDIDNYLN作为CDR1，
序列YTSRLHS作为CDR2，和
序列QQFNTLP作为CDR3。
22.权利要求1的药物组合物，其中所述单克隆抗体或其含有抗原-结合区的片段
在重链的可变区中具有
序列SHYYWS作为CDR1，
序列YISYDGSNNYNPSLKN作为CDR2，和
序列EGPLYYGNPYWYFDV作为CDR3，及
在轻链的可变区中具有
序列RASQDIDNYLN作为CDR1，
序列YTSRLHS作为CDR2，和
序列QQFNTLP作为CDR3。
23.抑制活化的B细胞的药物组合物，其中所述药物组合物包含由保藏号NITE BP-1211，NITE BP-1212，NITE BP-1213和NITEBP-1214的杂交瘤mp5B7，mp7B4，mp13D4和mp13H11的任一种产生的单克隆抗体，或其含有抗原-结合区的片段作为活性成分。
24.权利要求1～权利要求23之任一项的药物组合物，其还用于预防或治疗自身免疫疾病。
25.权利要求1～权利要求23之任一项的药物组合物，其还用于预防或治疗过敏性疾病。
26.检测活化的B细胞的方法，所述方法包括使与PLD4的细胞外结构域结合的单克隆抗体或其含有抗原-结合区的片段接触待测试的细胞及检测与细胞结合的单克隆抗体或其含有抗原-结合区的片段的步骤。
27.检测活化的B细胞的试剂，其中所述试剂包含与PLD4的细胞外结构域结合的单克隆抗体或其含有抗体-结合区的片段。
28.抑制活化的B细胞的方法，所述方法包括使以下任一组分接触活化的B细胞的步骤：
(a)与PLD4结合及抑制活化的B细胞的单克隆抗体，或其含有抗原-结合区的片段，以及
(b)移接了(a)中的单克隆抗体的互补性-决定区的免疫球蛋白，或其含有抗原-结合区的片段。
29.抑制活体中活化的B细胞的方法，所述方法包括向活体施用以下任一组分的步骤：
(a)与PLD4结合及抑制活化的B细胞的活性的单克隆抗体，或其含有抗原-结合区的片段，以及
(b)移接了(a)中的单克隆抗体的互补性-决定区的免疫球蛋白，或其含有抗原-结合区的片段。
30.权利要求28或权利要求29的方法，其中所述活化的B细胞的活性是抗体-产生活性。
31.抑制活化的B细胞的剂，其中所述剂包含以下任一组分作为活性组分：
(a)与PLD4结合及抑制活化的B细胞的单克隆抗体，或其含有抗原-结合区的片段，以及
(b)移接了(a)中的单克隆抗体的互补性-决定区的免疫球蛋白，或其含有抗原-结合区的片段。
32.权利要求31的抑制活化的B细胞的剂，其中活化的B细胞的活性是抗体-产生活性。
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